Prctico de Enzimas

Introduccin

En este prctico se experimentara con la enzima catalasa, se observar su accin y las variables
que influyen en ella.
La enzima catalasa es un catalizador de origen proteico. Es la encargada de eliminar el perxido
de hidrgeno (H2O2), compuesto altamente txico, del organismo. Por ende, esta enzima es de
suma importancia para los seres vivos y se encuentra en todas las clulas eucariotas, ya sean
vegetales o animales, contenidas en los peroxisomas.

Los objetivos para este prctico son: observar la accin de la catalasa sobre el H2O2, e
identificar cules son las variables que afectan la actividad enzimtica y entre que rangos se
encuentra su medio ptimo. Estas variables son: concentracin del sustrato, temperatura y pH. Si
hay un cambio en alguno de estos factores, la actividad enzimtica merma.

Experimento 1: Accin de la Catalasa

Objetivo: Observar la accin de la catalasa sobre el H2O2.
Materiales:
- 3 vasos de precipitado. - Agua oxigenada 30 vol.
- Pipetas - Encendedor
- Pajuela - Cronometro
- Papa - Panita de pollo

Cambios Cantidad de gas Caractersticas Velocidad de N vaso

Observados iniciales de cada Reaccin
vaso
No hay cambios No hay gas H2O2 No hay reaccin 1
5 cc de H2O2
Espuma Hay presencia H2O2 + raspado 22 segundos 2
concentrada. de gas en menor de papa cruda 5 cc de H2O2 +
Burbujas de cantidad raspado de papa
menor tamao.
Espuma con Hay presencia H2O2 + papilla 30 segundos 3
menor volumen de gas en mayor de panita de 5 cc de H202 +
Burbujas de cantidad pollo cruda papilla de panita
mayor tamao. de pollo
Espuma se
rompe en
presencia del
fuego.

Procedimiento:
Preguntas:
1) Cul es la finalidad del vaso control?
Nos sirve para establecer los parmetros sin variables aplicadas, es decir, un grupo en el que
podamos observar el comportamiento del sustrato sin ser afectado por la variable.

2) A qu se debe que la velocidad de reaccin enzimtica sea mayor en un tejido que en otro?
Se debe a la concentracin de enzimas que hay en cada tejido.

3) Introduzca la pajuela al interior del vaso precipitado, registre sus observaciones. Qu gas
libera est compuesto por accin de la catalasa? De qu manera lo comprob?

Observaciones: Vaso control, sin cambios; Vaso 2, papa rallada + H2O2, la llama se apaga en 22 seg;
Vaso 3, panita a T ambiente, la llama chispea al introducirse en el vaso y tarda 30 seg en apagarse.

Los vasos 2 y 3 liberan Oxgeno, lo podemos comprobar al observar que la llama no se apaga, debido
al rompimiento de enlaces de H2O2 se obtiene H20 + O2 y este oxgeno alimenta a la llama.

4)Qu sustancias cambian durante la reaccin en los vasos de precipitado 2 y 3?

Cambia la composicin qumica de los sustratos.+aguagena oxi

5) A qu se debe el aumento de T percibida en los vasos de precipitado? Explique.

Se debe a que la accin de la catalasa en el H2O2 produce una reaccin exotrmica.

6)Qu se entiende por especificidad enzimtica? Explica con un ejemplo experimental distinto
al realizado en el laboratorio.
Se refiere a que cada enzima se encarga de catalizar cierto tipo de reaccin o degradar un determinado
tipo de sustrato. Ej: La amilasa degrada el almidn en los alimentos y la lactasa degrada la lactosa.

7 Cul es el sustrato donde acta la catalasa?

El agua Oxigenada.

Experimento 2: Efecto de la Temperatura

Objetivo: Observar y analizar la accin de la temperatura sobre las enzimas.
Materiales:
-Papilla de panita de pollo congelado - Papilla de panita de pollo cruda
-Papilla de panita de pollo cocida - 3 vasos de precipitado
-Pipetas - Agua oxigenada
-Cuchara - Cuchillo

Procedimiento:

Cambios Observados T Presencia Color Condicin de la N Vaso

de inicial enzima
Reaccin

Aparicin de 24-26 Si Rojo Condicin 1

burbujas Intenso Optima 5 gr de Papilla de
panita de pollo
cruda + 2 cc de
H2O2

No hay cambio 100 No Caf Desnaturalizada 2

5 gr de Papilla de
panita de pollo
cocida + 2 cc de
H2O2

No hay cambio -10 No Rojo Inactivada 3

inicial, Oscuro 5 gr de Papilla de
posteriormente panita de pollo
aparecen burbujas. ccongelada + 2 cc
de H2O2
Preguntas:
1)

2) A partir de su grfica establezca la relacin entre T y la actividad enzimtica

Al aumentar la temperatura la actividad enzimtica se cancela en cambio al disminuir la
temperatura se detiene la accin enzimtica
3).A bajas temperaturas regularmente las enzimas se inactivan, fenmeno llamado
inactivacin, al respecto conteste :
a)Qu diferencia esencial existe entre las desnaturalizacin y la inactivacin?
La inactivacin enzimtica causa la supresin de la actividad biolgica de forma reversible mientras
que la desnaturalizacin enzimtica inhibir su accin irreversiblemente
b) En que forma lo demostrara? (debe ser diferente el ejemplo) La amilasa sometida a bajas T
se inactiva, no degrada el almidn, al descongelarse recupera su actividad enzimtica. Y si es
sometida a altas T su actividad se detiene definitivamente.

Experimento 3: Efecto del pH

Objetivo: Observar cmo afecta el pH en la reaccin enzimtica de la catalasa.
Materiales:
- Papilla de panita de pollo - Agua destilada
- 3 vasos de precipitado - Hidrxido de sodio (NaOH)
- Pipeta - Acido Clorhdrico (HCl)
- Cuchara - Agua Oxigenada

Procedimiento:
Tabla
N de vaso pH Caractersticas Presencia Cambios
color valor clculo fsicas iniciales de reaccin observados
observado del hgado
1. Papilla amarillo 6 Roja oscura SI Espuma
de hgado + Cruda grande y no
5cc Estaba a T densa, se
agua destilada ambiente deshace
= + 2cc de (26C aprox,) rpidamente
H2O2 Aumenta T
2. Papilla verde 7 Roja oscura SI Hay aroma
de hgado + Cruda Espuma
5cc de NaOH Estaba a T densa que
= + 2cc de ambiente permanece
H2O2 (26C aprox,)
3. Papilla naranjo 3 Roja oscura SI Cambia de
de hgado + Cruda color a color
5cc de HCl = + Estaba a T caf (parecido
2cc de H2O2 ambiente al color de la
(26C aprox,) panita cocida)
La panita se
desintegra

Clculo:

Preguntas:
1.
2. A partir de su grfica establezca la relacin entre el pH y la actividad enzimtica.
El pH ptimo para la accin enzimtica de la catalasa es 6, y al aproximarse al extremo cido y
alcalino su accin va disminuyendo.
3. Investigar Cmo afecta el pH a la reaccin enzimtica?
La reaccin enzimtica es muy sensible al pH., cuando esta se encuentra en un medio con pH
ptimo, es eficaz. Pero cuando est inserta en un medio con pH distinto al ptimo se desacelera.
4. Investigue Cul es el pH ptimo para la actividad enzimtica de la catalasa?
El pH ptimo es 7.

Conclusin:
En este prctico se analizaron las reacciones de la enzima catalasa, presente en el hgado de pollo,
sobre el agua oxigenada. Adems se observ como esta enzima se encuentra en mayor
concentracin en el hgado de los organismos vivos, la cual varia su actividad biolgica frente a las
diferentes variables a las que est expuesta, tales como pH y temperatura. Tambin se observo y se
analiz su velocidad de reaccin.
En resumen, la catalasa es la enzima catalizadora de la descomposicin del agua oxigenada
(compuesto txico para gran parte de los organismos) en oxgeno molecular y agua. Esta enzima se
inactiva a bajas temperaturas, sin embargo puede volver a su actividad normal, tambin se
desnaturaliza a altas temperaturas; por otra parte alcanza su mxima actividad dentro de un medio
con pH 7 y se desnaturaliza si alcanza los extremos cidos o bsicos.

Ismael Soto Lpez,Lidia Melndez Balbuena,Abraham Jimnez Hernndez. (Junio 2015). El

tema de la catalasa en los diferentes niveles de enseanza aprendizaje. 10 de abril del 2017, de
Benemrita Universidad Autnoma de Puebla Sitio web:
file:///C:/Users/Jocelyn/Downloads/265-1108-1-PB.pdf

Mnica Amat Marco Aida Ivars Rodrguez . (2010). ESTUDIO DE LOS FACTORES QUE
INFLUYEN EN LA ACTIVIDAD ENZIMTICA DE LA CATALASA . 10 de abril del
2017, de IES ALCCER Sitio web:
http://www.cac.es/cursomotivar/resources/document/2010/1.pdf

Neil Mike Lpez Monsalve . (2003). Influencia de la concentracin Enzimtica inicial en la

cintica de desactivacin trmica de Peroxidasa comercial . 9 de abril del 2017, de universidad
austral de chile Sitio web: http://cybertesis.uach.cl/tesis/uach/2003/fal864i/doc/fal864i.pdf
- Hernndez Gil Rubn, PhD. Profesor de Fisiologa Vegetal, Departamento de
Botnica, Facultad de Ciencias Forestales y Ambientales. Universidad de Los Andes - Mrida
Venezuela. Libro Botnica Online ENZIMAS con la direccin:
http://www.forest.ula.ve/~rubenhg/enzimas/index.html