Nanopartculas de slice: preparacin

y aplicaciones en biomedicina
Maria C. Llins, David Snchez-Garca*
Grup dEnginyeria Molecular, Institut Qumic de Sarri, Universitat Ramon Llull, Via Augusta 390, E-08017 Barcelona (Spain)

Silica nanoparticles: preparation and applications in biomedicine

Nanopartcules de slice: preparaci i aplicacions en biomedicina
Recibido: 15 de julio de 2013; revisado: 4 de diciembre de 2013; aceptado: 5 de diciembre de 2013

RESUMEN RESUM

Actualmente, un importante nmero de avances cient-
ficos se fundamentan en la utilizacin de nanopartculas
cmo superficies de actuacin, vehculos de transporte,
en procesos relacionados con aplicaciones en catlisis,
sistemas de informacin, nuevos materiales o biomedici-
na. Esta revisin se centra en las nanopartculas de slice
mesoporosas, las cuales estn caracterizadas por su ele-
vada superficie especfica, su buena biocompatibilidad, su
fcil obtencin en mltiples tamaos y formas, as como
su fcil funcionalizacin.
Palabras clave: nanotecnologa, administracin de fr-
macos, nanopartculas de slice mesoporosas.
Actualment, un gran nombre davenos cientfics es basen
en ls de nanopartcules com a superfcies dactuaci o
vehicles de transport, en processos relacionats amb apli-
cacions en catlisi, sistemes dinformaci, nous materials
o biomedicina. Aquesta revisi se centra en nanopartcu-
les de slice mesoporoses, que es caracteritzen per la seva
alta superfcie especfica, la seva bona biocompatibilitat,
fcil obtenci en mltiples mides i formes, aix com la seva
fcil funcionalitzaci.
Mots clau: nanotecnologia, administraci de frmacs, na-
nopartcules de slice mesoporoses.

SUMMARY

Currently, a large number of scientific advances are ba-

sed on the use of nanoparticles as functional surfaces or
transport vehicles, in processes related to applications in
catalysis, information systems, new materials or biomedi-
cine. This review focuses on mesoporous silica nanoparti-
cles, which are characterized by their high specific surfa-
ce, its good biocompatibility, easy preparation in multiple
sizes and shapes, as well as its easy functionalization.

Key words: nanotechnology, drug delivery, mesoporous

silica nanoparticles.

*Autor para la correspondencia: david.sanchez@iqs.edu

20 AFINIDAD LXXI, 565, Enero - Marzo 2014

1. NANOPARTCULAS
En los ltimos aos, el uso de las nanopartculas (NPs)
tanto en la investigacin como en la industria ha aumen-
tado de forma exponencial. Segn un informe de la OCDE
(Organizacin para la Cooperacin y el Desarrollo Eco-
nmico), la manufacturacin de productos que utilizan
nanopartculas pasar del 0,1% en 2013, a un 15% en
2015 con aplicaciones en el transporte, energa y medio
ambiente, electrnica, biotecnologa, ciencias de la salud,
sector textil y construccin(1). Las NPs se definen como
partculas que tienen al menos una de las dimensiones en
el rango comprendido entre 1 y 100 nm(2). En la Figura 1 se
comparan los tamaos de diversas NPs con una molcula
de agua y una clula. Como se puede apreciar las NPs
poseen un tamao comprendido entre el de pequeas
protenas y los virus.
partculas orgnicas estn formadas por materiales tales
como polmeros, estructuras repetitivas, bicapas lipdicas,
mientras que los materiales inorgnicos estaran formados
por metales y materiales inertes como el dixido de titanio,
la hidroxiapatita o la slice.
2. NANOPARTCULAS DE SLICE MESOPO-
ROSA
Desde hace una dcada las nanopartculas de slice me-
soporosa (MNPs) han atrado la atencin de la comunidad
cientfica. Este hecho es debido a sus excepcionales pro-
piedades fsico-qumicas como son su resistencia mec-
nica, estabilidad qumica, biocompatibilidad y versatilidad
sinttica(6,7). Estas NPs estn constituidas por una matriz
de slice y se caracterizan por la presencia de poros de
un dimetro comprendido entre los 2 y 50 nm(8). Esta sin-
gularidad proporciona a estas NPs dos dominios diferen-
ciados: una superficie externa y otra interior en los poros
(Figura 2). Las posibilidades que abren estas propiedades
las hacen idneas para ser utilizadas en un amplio campo
de aplicaciones que van desde la biotecnologa y nanome-
dicina a la ciencia de los materiales. Las principales carac-
tersticas de las NPs de slice mesoporosa son:

Elevada rea superficial (>1000 m2g-1) que permite

Figura 1: Escala de tamaos
Dentro del trmino NPs se engloban diversas familias de
nanobjetos: dendrmeros, liposomas, sistemas polimri-
cos, micelas, virus, quantum dots, nantotubos de car-
bono y todo tipo de nanopartculas de metales de transi-
cin y slice entre las ms estudiadas(3-5). Generalmente,
las nanopartculas se pueden clasificar atendiendo a su
naturaleza inorgnica u orgnica (Tabla 1). As, las nano-
almacenar una gran cantidad de carga (35%).
Elevado volumen de poro (>1 cm3g-1), gran porosidad
y elevado orden del poro.
Tamao de poro modificable con una estrecha distri-
bucin (2-10 nm).
Buena estabilidad qumica y trmica.
No txicas y biocompatibles con el organismo humano.
Dos superficies funcionalizables (interna y externa)
Fcilmente modificables morfolgicamente (control
en tamao, poro y forma).
Fcilmente sintetizables.
Mesoestructura estable.

Tabla 1: Principales tipos de nanopartculas y sus aplicaciones

Utilizadas en aplicaciones mdicas. No obstante, presentan una biodistribucin no espe-
Nanopartculas polimricas
cfica y una baja capacidad de carga.
Macromolculas definidas, que presentan una estructura altamente ramificada formada
Dendrmeros por un ncleo y mltiples ramas. Su estructura molecular les permite cargar diferentes
agentes activos.
Nanopartculas
orgnicas Nanosistemas esfricos formados por una bicapa lipdica que permiten la encapsulacin
Liposomas de frmacos hidroflicos e hidrofbicos. A pesar de estar ampliamente estudiados, una
de sus principales desventajas es su rpida eliminacin.
Agregados coloidales de molculas amfiflicas. Las micelas estn formadas por una parte
Micelas interna hidrofbica y una externa hidroflica que permite la internalizacin de frmacos de
carcter apolar para su vehiculizacin.
Las nanopartculas de slice son inertes, biodegradables y presentan una buena biodis-
Nanopartculas de slice
tribucin. Son fcilmente sintetizables y se pueden obtener de distinta forma y tamao.
Nanopartculas metlicas que presentan unas propiedades pticas y electrnicas que
Nanopartculas de oro dependen totalmente de su forma y tamao. No presentan toxicidad intrnseca. Adems
son fcilmente funcionalizables mediante la formacin de puentes Au-SR.
Nanopartculas de xido de hierro, tpicamente de magnetita (Fe3O4), biocompatibles y
Nanopartculas de xido de hierro fcilmente biodegradables. Tienen gran potencial en biomedicina dada su capacidad
Nanopartculas
intrnseca de ser monitorizadas in vivo por tcnicas de resonancia magntica nuclear.
inorgnicas
Nanopartculas activas que se utilizan generalmente como sondas para imagen, ya que
presentan elevados rendimientos cunticos de fluorescencia, elevada fotoestabilidad y
Quantum dots (QD) una emisin fluorescente que puede ser variable mediante el tamao. Sin embargo, los
QD no son biodegradables ni biocompatibles con el organismo, lo que restringe bastante
su uso en aplicaciones mdicas.
Monocapas de grafeno enrolladas en forma de cilindros. Presentan una elevada superfi-
Nanotubos de carbono
cie especfica que permite anclar una amplia variedad de molculas teraputicas.

AFINIDAD LXXI, 565, Enero - Marzo 2014 21


Figura 2: Representacin esquemtica de una
MNP y micrografa de MNP realizada mediante mi-
croscopa electrnica de transmisin (TEM)
Su elevada superficie y gran volumen de poro permite una
elevada carga de componentes, tales como frmacos,
sensores o protenas, los cuales dotaran de funcionalidad
los soportes inorgnicos. Por otra parte, las molculas
husped en el interior de los poros estarn protegidas de
una posible degradacin en ambientes hostiles, como son
el estmago y los intestinos, en el caso de aplicaciones
biolgicas(8).
3. PREPARACIN DE NANOPARTCULAS
MESOPOROSAS DE SLICE
La preparacin de MNPs fue comunicada por primera vez
por cientficos de la Mobil Company en 1992 en el marco
de un proyecto de la compaa para encontrar materiales
con poros de mayor tamao que el que presentan las zeo-
litas. Es por ello que este tipo de nanopartculas son cono-
cidas como MCM (Mobil Composition of Matter) y ms en
concreto como MCM-41(9). Su metodologa de sntesis se
basa en la condensacin de precursores de slice (silicato
sdico, tetraetilortosilicato o silicato de tetrametilamonio)
en presencia de surfactantes catinicos en condiciones
bsicas. Se trata de una adaptacin del mtodo descrito
por Stber en 1968 para la obtencin de nanopartculas
de slice(10), pero con la diferencia de que se le incorpora
un tensioactivo catinico. Se combina as el proceso de
sol-gel, una tcnica muy utilizada para preparar vidrios
inorgnicos, con surfactantes catinicos que permiten
la obtencin de estructuras ordenadas y monodispersas
mediante la formacin tpica de micelas, que actuaran a
modo de molde o plantilla y darn origen a la formacin de
poros(11,12). El procedimiento estndar consiste en mezclar
un precursor de silicato, generalmente tetraetilortosilicato
(TEOS), con un surfactante catinico, siendo el ms utili-
zado el bromuro de cetiltrimetilamonio (CTAB), a una tem-
peratura comprendida entre 30 y 60 oC en medio bsico
(pH = 11). Las nanopartculas se forman mediante el pro-
ceso de sol-gel catalizado en medio bsico, segn dos re-
acciones clave, hidrlisis y condensacin(13) (Esquema 1).
La primera etapa del proceso consiste en la hidrlisis del
alcxido. En esta etapa se obtiene una suspensin coloi-
dal que contiene partculas de tamao inferior a 100 nm
a la vez que se forman grupos silanol (Si-OH) y se libera
el alcohol correspondiente(14). A continuacin los grupos
silanol polimerizan por condensacin, formando estructu-
Esquema 1: Mecanismo de polimerizacin del TEOS
22
ras tridimensionales unidas por enlaces siloxano (Si-O-Si)
con eliminacin de agua y alcohol concomitante. En esta
segunda etapa de condensacin se forma un gel, ms o
menos compacto y denso(11,12). La presencia en esta fase
de micelas, formadas por el surfactante es crtica ya que
actan a modo de molde y darn origen a la formacin
de los poros. En efecto, el surfactante catinico atrae las
cargas negativas de las especies de slice, las cuales se
concentran alrededor de las micelas formando una estruc-
tura de slice tubular. La nanopartcula va aumentando de
tamao hasta que la carga neta negativa, que introducen
las especies de slice, es tan elevada que sta deja de cre-
cer. Hay que sealar que el tamao, la forma y la regulari-
dad de las nanopartculas dependen de diversas variables
como son la temperatura, la velocidad de adicin, la agita-
cin y la cantidad de catalizador utilizado respecto a la de
TEOS(15). De todos estos factores se ha determinado que
el que ms afecta al tamao de la MNP es la proporcin
de base respecto a la cantidad de TEOS, seguido de la
temperatura(16). La formacin de las MNPs puede seguirse
visualmente ya que a medida que avanza la polimeriza-
cin aumenta la turbidez de la suspensin de MNPs como
consecuencia del crecimiento de stas. Alternativamente,
tambin puede seguirse la evolucin de las NPs a travs
de la dispersin que sufre un haz de luz al atravesar la
disolucin coloidal (efecto Tyndall) (Figura 3).
Figura 3: Turbidez y efecto Tyndall en soluciones coloi-
dales de MNPs en funcin del tamao de partcula
Finalmente, se debe liberar el surfactante del interior de
los poros. Para ello se pueden seguir tres mtodos: reflujo
en alcohol acidulado con cido clorhdrico, un tratamiento
con nitrato amnico o mediante calcinacin. stos trata-
mientos permiten la rotura de la interaccin electroesttica
que existe entre los grupos de la cabeza del surfactante
catinico y los silicatos aninicos, lo que facilita la elimina-
cin del surfactante en los mesoporos y la formacin final
de las nanopartculas mesoporosas (Figura 4).
Para aplicaciones biomdicas, las MNPs deben presentar
un tamao uniforme que est comprendido, idealmente,
entre 50-100 nm ya que por debajo de este rango las na-
nopartculas resultan ser algo citotxicas y difciles de ob-
tener, mientras que por encima se trata de nanopartculas
demasiado grandes que o bien no podran ser inyectadas
o seran fcilmente eliminadas del organismo(16b, 16c, 17).
AFINIDAD LXXI, 565, Enero - Marzo 2014
 Esta tcnica permite estimar el tamao de las nanopart-
culas tomndolas como un conjunto. De hecho, el valor
obtenido es un promedio de toda la muestra, lo que per-
mite estimar su polidispersidad. La obtencin de una dis-
tribucin estrecha se corresponde a una muestra homo-
gnea, mientras que la obtencin de varios picos significa
la existencia de diversas poblaciones de NPs de distinto
tamao (Figura 6).

Figura 4: Fases para la preparacin de MNPs

4. CARACTERIZACIN DE LAS MNPS

La caracterizacin de MNPs requiere determinar el ta- Figura 6: Distribucin de tamaos medida por DLS
mao, tanto de la NP como de los poros y su morfologa
general(18). Los mtodos ms utilizados para caracterizar Generalmente, los mismos equipos de DLS incorporan
NPs son: dispersin de luz dinmica (DLS), isotermas de un sistema de medida del potencial zeta (Figura 7). Este
adsorcin y desorcin de N2 (BET, BJH), difraccin de ra- potencial est relacionado con la carga superficial de las
yos X de ngulo pequeo (XRD) y microscopa electrnica nanopartculas y es muy til para evaluar la estabilidad y el
de transmisin (TEM). Las tcnicas del DLS y de TEM per- grado de agregacin de las NPs. As, si se obtiene un ele-
miten determinar el tamao global de las nanopartculas, vado valor absoluto de potencial zeta, las nanopartculas
mientras que las tcnicas de BET, BJH y de XRD se uti- nanopartculas y es muy
tendern til para entre
a repelerse evaluar
s la estabilidad
y no y el Sin
flocularan. grado de agregacin de las
embargo,
lizan para caracterizar los poros. A continuacin se van NPs.
a As,sisilas nanopartculas
se obtiene presentan
un elevado unosde
valor absoluto bajos valores
potencial delas
zeta, po-
nanopartculas
describir brevemente dichas tcnicas de caracterizacin. tencial zeta stas acabaran floculando ya que no existe
tendern a repelerse entre s y no flocularan. Sin embargo, si las nanopartculas
ninguna fuerza que lo impida. En general, la lnea divisoria
4.1 TAMAO DE LAS MNPS: DISPERSIN DE LUZ DI- presentan entre
unos bajos valores deestables
suspensiones potencialezeta stas acabaran
inestables floculando
se establece en ya que no
NMICA (DLS) el rango
existe ninguna deque
fuerza +30lomV o -30mV.
impida. Por otra
En general, parte,divisoria
la lnea un potencial
entre suspensiones
La dispersin de luz dinmica (DLS) permite relacionar el positivo es altamente recomendable para favorecer la in-
estables e inestables se establece en el rango de +30 mV o -30mV. Por otra parte, un
desplazamiento aleatorio de las partculas con el dimetro ternalizacin de las nanopartculas en membranas celula-
hidrodinmico de stas. Este dimetro depender de potencial
la positivo
res paraesaplicaciones
altamente recomendable
biolgicas. para favorecer la internalizacin de las
fuerza inica del medio, de la concentracin de la diso- nanopartculas en membranas celulares para aplicaciones biolgicas.
lucin, de la temperatura y de su ndice de refraccin. En
medios de elevada fuerza inica el tamao obtenido es
menor al real de la MNP, mientras que en medios de baja
fuerza inica se obtienen valores del dimetro de partcu-
la mayores. Si adems las nanopartculas presentan una
capa de molculas que recubren su superficie, la veloci-
dad de difusin global se ralentiza y el radio hidrodinmico
tampoco corresponder con el tamao real de la partcula,
obtenindose un valor superior (Figura 5) (19).
Figura 7: Distribucin de potencial-
Z de una muestra de MNPs
Figura 7: Distribucin de potencial-Z de una muestra de MNPs
4.2 SUPERFICIE
4.2. SUPERFICIE ESPECFICAESPECFICA
Y POROSIDAD:Y POROSIDAD:
MTODOSMTO-DE BET Y BJT
DOS DE BET Y BJT
Un parmetro
Un parmetro fundamentalfundamental en la caracterizacin
en la caracterizacin de sli-
de slidos porosos es su superficie
dos porosos es su superficie especfica(20). Este valor pue-
(20)
especfica . Este valor puede estimarse utilizando el mtodo de Brunauer, Emmett y
de estimarse utilizando el mtodo de Brunauer, Emmett
Teller (BET) basado
y Teller en labasado
(BET) capacidad
endelalos slidos ende
capacidad absorber gases en
los slidos ensu superficie
absorber gases en su superficie que
que viene gobernada por la siguiente ecuacin [Eq.1]:viene gobernada por
la siguiente ecuacin [Eq.1]:
1 1 (1)
= + [Eq.1] [Eq.1]
0 1 0

Dnde
Dnde
V volumen de un gas (tpicamente N2) adsorbido a la
Figura 5: Dimetro hidrodinmico de una presin p;
V volumen de un gas (tpicamente N2) adsorbido a la presin p;
NP funcionalizada en su superfcie.
Vm volumen requerido para cubrir la superficie del adsorbente con una capa
monomolecular de adsorbato;
p presin de equilibrio;
AFINIDAD LXXI, 565, Enero - Marzo 2014 23
po presin de saturacin del adsorbato lquido utilizado;
 Vm volumen requerido para cubrir la superficie del adsor- cuando la nanopartcula se encuentra perpendicular al
bente con una capa monomolecular de adsorbato; plano de visualizacin se observan los poros como lneas
p presin
De la representacin dedeequilibrio;
grfica los datos experimentales sobre un grfico 1/V[(p0/p)-1] o canales (Figura 8a), mientras que si las nanopartculas se
po presin de saturacin del adsorbato lquido utilizado; encuentran en el mismo plano de visualizacin lo que se
frente a (p/p0) se obtiene una curva que es lineal en el intervalo 0,05 < (p/p0) < 0,35 de
C constante de BET; observa son crculos peridicos (Figura 8b).
la cual pueden extraerse Vm y C. De estos valores se calcula la superficie especfica SBET
De la representacin grfica de los datos experimentales sobre un grfico 1/V[(p0/p)-1]
a partir de la De la representacin
frmula [Eq. 2]: grfica de los datos experimentales
frente a (p/p 0) se un
sobre obtiene
grficouna1/V[(p
curva que /p)-1]es frente
lineal en el intervalo
a (p/p 0,05 <una
) se obtiene (p/p0) < 0,35 de
0 0
curva
la cual pueden que esVlineal
extraerse m y C.en Deelestos
intervalo
( valores
) 0,05 < (p/p0la) <superficie
se calcula 0,35 de especfica
la SBET
cual pueden extraerse
=V y C. De estos valores se calcula
[Eq. 2]
a partir de la frmula [Eq. 2]: m
la superficie especfica SBET a partir de la frmula [Eq. 2]:
Dnde ( )
= [Eq. 2] [Eq. 2]

Vm volumen
Dnde requerido para cubrir la superficie del adsorbente con una capa
Dnde monomolecular
Vm volumen de adsorbato;
requerido para cubrir la superficie del adsor-
N bente
nmero de Avogadro; con una capa monomolecular de adsorbato;
Vm N nmero
volumen requerido de Avogadro;
para cubrir la superficie del adsorbente con una capa Figura 8: Micrografa de MNPs realizada medi-
s superficie
s de una molculas
superficie
monomolecular de una
de adsorbato; demolculas
adsorbato; de adsorbato; ante TEM de alta resolucin: a) plano perpen-
V volumen molar del adsorbato; dicular al de visualizacin b) mismo plano
V N volumen nmero molar del adsorbato;
de Avogadro;
masa del adsorbente.
s masa del adsorbente.
superficie de una molculas de adsorbato; Adems de poder observar la morfologa y periodicidad de
Suponiendo que las partculas son esfricas y que presen- los poros en las nanopartculas, la tcnica TEM tambin
Suponiendo
V que lasmolar
volumen partculas son esfricas y que presentan una distribucin de tamao
del adsorbato;
tan una distribucin de tamao estrecha, el rea superfi- permite obtener el valor del dimetro de stos a travs de
estrecha,
el rea
cial superficial
especfica
masa del adsorbente. especfica
proporciona proporciona
un dimetro un dimetro
medio de medio
la NP de la NP
la transformada de Fourier (Figura 9).
denominado denominado
dimetro de BET. dimetro de BET.
Suponiendo Laque las partculas son
caracterizacin deesfricas
los poros y quesepresentan
efectauna distribucin
mediante el de tamao
La caracterizacin
mtodo de propuesto
los poros sepor efecta
Barret, mediante
Joyner elymtodo
Halenda propuesto
(BJH) (21)por Barret,
estrecha, el rea superficial especfica proporciona un dimetro medio de la NP
(21)
Joyner y Halenda
para el (BJH)
clculopara del el clculo del
dimetro dimetrode
y volumen y volumen
los poros. deEstos
los poros. Estos
denominado dimetro de BET.
parmetros
parmetros se pueden determinar se pueden determinar
a partir a partir dedelas
de las isotermas isotermas
adsorcin-desorcin de
La caracterizacin de los poros se efecta
de adsorcin-desorcin mediante utilizando
de nitrgeno el mtodo la propuesto
ecua- por Barret,
nitrgeno utilizando laKelvin
cin de(BJH) ecuacin
(21)[Eq.de Kelvin poros[Eq. 3] para poros cilndricos:
Joyner y Halenda para3]elpara
clculo del cilndricos:
dimetro y volumen de los poros. Estos
parmetros se pueden determinar a partir de las isotermas de adsorcin-desorcin de
ln = 2 [Eq. 3] [Eq. 3]
0
nitrgeno utilizando la ecuacin de Kelvin [Eq. 3] para poros cilndricos:
Dnde
Dnde
Vm volumen molar ln deladsorbato
= 2 lquido; [Eq. 3]
tensin superficial 0 del adsorbato
lquido; Figura 9: Transformada de Fourier realizada medi-
Vm volumen molar del adsorbato lquido;
r radio de Kelvin; ante TEM sobre una muestra de MNPs proporcio-
Dnde nando un dimetro medio de poro de 4 nm.
tensin superficial del adsorbato lquido;
La medida del volumen de los poros ofrece, indirectamen-
Vm volumen
te, unamolar del adsorbato
estimacin lquido;
del grado de funcionalizacin que se ha Adems, algunos modelos de microscopios tambin per-
r radio de Kelvin;
dado en la superficie de los poros, por comparacin entre miten realizar el anlisis elemental de la muestra, lo cual
tensin superficial
el volumen dedel
losadsorbato
poros de lquido;
las MNPs funcionalizadas y permite obtener informacin sobre la composicin y fun-
La medida del volumen de los poros ofrece, indirectamente, una estimacin del grado
sin funcionalizar. cionalizacin de las NPs.
der funcionalizacin
radio de Kelvin;
que se ha dado en la superficie de los poros, por comparacin entre
el volumen de4.3losESTRUCTURA
poros de las MNPs MESOPOROSA:
funcionalizadas y sinDIFRACCIN
funcionalizar. DE
La medidaRAYOS
del volumen de los poros ofrece, indirectamente, una estimacin del grado
X (XRD) 5. DECORACIN Y FUNCIONALIZACION DE
La difraccin
de funcionalizacin que sedeharayos
dado en X de ngulo pequeo
la superficie (XRD)
de los poros, porescomparacin
una MNPS
entre
tcnica no-destructiva que permite estudiar la estructura 11
el volumen de los poros de las MNPs funcionalizadas y sin funcionalizar.
interna mesoporosa de las MNPs. Los difractogramas Las MNPs presentan tres posibles dominios de funcionali-
dan informacin sobre la periodicidad y el orden interno zacin: la superficie de la NP, la parte interna de los meso-
de las nanopartculas porosas(20, 22). Esta tcnica resulta poros y la matriz de slice de la NP. Existen entonces, tres
11
especialmente til para verificar la integridad de la estruc- estrategias de funcionalizacin que permiten incorporar
tura mesoporosa de las MNPs despus de efectuar ma- cualquier agente activo en una MNP, mediante oclusin,
nipulaciones qumicas sobre ellas que pueden erosionar injerto, o co-condensacin(23,10).
su estructura.
5.1 OCLUSIN
4.4 MORFOLOGA DE LAS NANOPARTCULAS: MI- La oclusin se utiliza generalmente con molculas fluores-
CROSCOPA DE TRANSMISIN ELECTRNICA (TEM) centes, a modo de sondas, o agentes de contraste que
La microscopa de transmisin electrnica (TEM) permite permiten la localizacin y seguimiento de los nanovehcu-
visualizar directamente la estructura y tamao de una na- los en el organismo (24,25). En este tipo de funcionalizacin,
nopartcula en concreto o de un conjunto de ellas. De for- el agente activo se encuentra disperso en la matriz poli-
ma visual es posible determinar si la muestra es morfol- mrica sin estar unido covalentemente(7,26). La oclusin de
gicamente homognea. En el caso particular de las MNPs un agente en el interior de la matriz de la NP permite su
permite la observacin de los poros y su periodicidad. As, proteccin contra factores externos, minimizndose as su
degradacin (Figura 10).

24 AFINIDAD LXXI, 565, Enero - Marzo 2014

 puede alcanzar, simplemente, eliminando el tensioactivo y,
posteriormente, aplicando el mtodo del injerto tratando
con un silano (p.ej. APTMS). La superficie externa de la
NP, ms accesible al reactivo, se funcionalizar preferente-
mente respecto a la interior. Un mtodo alternativo, quizs
ms eficiente, es silanizar la MNP en dos fases con y sin
surfactante (Figura 12).

Figura 10: Anclaje en la matriz de la nanopartcula

5.2 MTODO DEL INJERTO

El injerto (grafting) es un mtodo post-sinttico que per-
mite modificar la superficie de la NP e incorporar grupos
funcionales por silanizacin(27). En este procedimiento los
grupos silanol superficiales (Si-OH), que pueden estar
presentes en elevada concentracin, actan como puntos
de anclaje por tratamiento con un siloxano funcionalizado
con el grupo deseado. La silanizacin transcurre ya sea a
travs de grupos libres de (= Si-OH) o de grupos silanol
geminales (=Si(OH)2).

5.3 MTODO DE CO-CONDENSACIN

El mtodo de co-condensacin se basa fundamentalmen-
te en el proceso de sol-gel(28). La diferencia estriba en la
adicin de un siloxano funcionalizado junto con el precur-
sor de slice (TEOS). En comparacin con el mtodo de
post-injerto en el que la distribucin de los grupos fun-
cionales tiende a ser heterognea, el mtodo de co-con-
densacin es capaz de distribuir homogneamente gru-
pos orgnicos en la superficie interna de los poros. Otra
ventaja del mtodo de co-condensacin sobre el mtodo
del injerto es que se puede controlar ms fcilmente la
morfologa de las MNPs (Figura 11).

Figura 12: Mtodo selectivo para funciona-

lizar las dos superficies de las MNPs

Figura 11: Co-condensacin de una MNP con
aminopropiltrimetilsiloxano (APTMS)
En cualquier caso, cada uno de los dos mtodos de fun-
cionalizacin tiene ciertas ventajas. Si lo que se desea es
la funcionalizacin directa de la superficie en un solo paso
de sntesis el mtodo de grafting parece el ms adecuado.
Sin embargo, si se desea la obtencin de una superficie
homognea e uniforme el mtodo de co-condensacin re-
sulta ms prctico.
5.4 FUNCIONALIZACIN REGIOSELECTIVA
Existe la posibilidad de funcionalizar las MNPs de forma
regioselectiva y discriminar entre la superficie externa de
las nanopartculas y sus poros. Esta regioselectividad se
5.5 POSTFUNCIONALIZACIN
Con el fin de conferir mayor complejidad a las MNPs y
preparar materiales funcionales se han descrito protoco-
los de post-funcionalizacin que permiten incorporar a la
NP prcticamente cualquier grupo funcional, macromol-
cula e incluso otras NPs. Bsicamente, estos protocolos
se pueden dividir en dos tipos: los que implican la forma-
cin de enlaces covalentes con la MNPs y los basados en
interacciones de carcter electrosttico.
5.5.1 FORMACIN DE ENLACES COVALENTES CON
MNPs
Una vez la MNP ha sido funcionalizada mediante injerto
o co-condensacin es posible utilizar las diversas tcni-
cas desarrolladas en bioconjugacin con el fin de deco-
rar la MNP con molculas o biomoleculas de inters(29). A
continuacin, se describen algunas de las estrategias de
acoplamiento ms interesantes en el campo de las nano-
partculas: formacin de amidas, tioureas y cicloadicin de
Huisgen.
Normalmente para la formacin de amidas se requiere la
participacin de un reactivo activador del cido. Un proto-
colo muy utilizado se conoce como reaccin de Steglich o
mtodo de la carbodiimida. Para ello el cido carboxlico

AFINIDAD LXXI, 565, Enero - Marzo 2014 25

se activa mediante la formacin del ster de la N-hidroxi-
succinimida correspondiente. Esta activacin se realiza en
presencia de un agente de acoplamiento como la 1-etil-
3-(dimetilaminopropil) carbodiimida (EDC). Finalmente la
amina reacciona con el ster activado para proporcionar la
amida con excelentes rendimientos (>90%) (Esquema 2).
Esquema 2: Formacin de una amida
Alternativamente es posible utilizar la gran reactividad y
selectividad del grupo isotiocianato frente a aminas pri-
marias para formar tioureas(30). Este protocolo es amplia-
mente utilizado en bioqumica para el acoplamiento de
protenas y conjugacin de anticuerpos. La reaccin es
prcticamente cuantitativa y se pueden utilizar DMSO o
EtOH como disolventes (Esquema 3).
Esquema 3: Formacin de una tiourea
Otra ruta muy comn en bioconjugacin es la cicloadicin
alquino-azida catalizada por Cu(I), basada en el concepto
de qumica click o tambin conocida como CuAAC(31-33). 6.2 ESPECTROSCOPA DE INFRAROJO (IR)
Este tipo de qumica implica la cicloadicin de un alquino
y una azida para formar un anillo de 1,2,3-triazol, que sir-
ve como un fuerte nexo entre la nanopartcula y el agente
biofuncional (esquema 4).
Esquema 4: Reaccin de formacin de 1,3-triazoles
Este proceso ha demostrado ser altamente verstil y ade-
cuado para la conjugacin de una variedad de especies,
desde molculas pequeas hasta protenas(34).
5.5.2 INTERACCIN ELECTROESTTICA
La elaboracin de sistemas complejos que doten de fun-
cionalidad a las NPs puede beneficiarse de la aplicacin
de conceptos de la qumica supramolecular. En particular
de todo tipo de interacciones dbiles (puentes de hidrge-
no, formacin de complejos metlicos y pares inicos en-
tre otras) y asociaciones entre macromolculas (polmeros
y biomolculas). Un ejemplo relevante de aplicacin biol-
gica es el recubrimiento de MNPs cargadas positivamente
en su superficie con aminas cuaternizadas y recubiertas
con cadenas de ADN aninicas(35-37).
26
6. TCNICAS DE CARACTERIZACIN DE
NANOPARTCULAS FUNCIONALIZADAS
Con el fin de estudiar y analizar la presencia de grupos
funcionales en la superficie de las NPs se dispone de di-
versas tcnicas que no difieren de los mtodos comunes
del laboratorio: espectroscopa de absorcin y fluorescen-
cia, espectroscopa de infrarrojo (IR), anlisis termogravi-
mtrico (TGA), anlisis elemental orgnico (AE) y resonan-
cia magntica en fase slida.
6.1 ESPECTROSCOPIA DE ABSORCIN Y
FLUORESCENCIA
Los espectros de absorcin y fluorescencia son una bue-
na opcin para confirmar rpidamente la funcionalizacin
de las nanopartculas, a partir de su suspensin en un
disolvente adecuado(38). Estas tcnicas son especialmen-
te indicadas para el estudio de sistemas que incorporan
sensores fluorescentes o colorantes. En la Figura 13, se
muestra como ejemplo el espectro de absorcin de MNPs
funcionalizadas con isocianato de fluorescena (FITC).
Figura 13: Espectro de absorcin de MNPs
funcionalizadas con FITC (EtOH)
La utilizacin de la espectroscopa de IR est muy indicada
para el estudio de MNPs funcionalizadas dado que per-
mite reconocer fcilmente y de forma no destructiva(39) la
presencia de carbonilos, tioureas, azidas, aminas, steres
o cidos. Como ejemplo, en la Figura 14 se muestra el es-
pectro de IR de nanopartculas funcionalizadas con aminas
primarias. A continuacin las NPs se tratan con isocianato
de fluorescena (FITC) para generar el conjugado corres-
pondiente. Si se comparan los espectros de IR de las NPs
funcionalizadas (Figura 14 b) con el de las mismas NPs sin
funcionalizar (Figura 14 a), se puede observar la aparicin
de toda una serie de bandas entre 1600 cm-1 y 1200 cm-1
que corresponden a la tensin de la lactona (1575 cm-1) y al
aumento de las flexiones C-H alrededor de 1400 cm-1.
Figura 14: IR MNPs sin funcionali-
zar a) y funcionalizadas con FITC b)
AFINIDAD LXXI, 565, Enero - Marzo 2014
6.3 TERMOGRAVIMETRA (TGA) y ANLISIS
ELEMENTAL (AE)
La termogravimetra s una tcnica destructiva de anli-
sis que consiste en monitorizar las cambios de peso de
una muestra en funcin de la temperatura y el tipo de at-
msfera (oxidante, reductora). En particular, los estudios
de TGA sobre MNPs permiten determinar su contenido
en materia orgnica y estimar su grado de funcionaliza-
cin(21). A modo de ejemplo, en la Figura 15 se muestra el
TGA de una muestra de nanopartculas no funcionalizadas
que se comparan con unas nanopartculas funcionaliza-
das con grupos amino por co-condensacin con APTES
(aminopropiltrietilsilano). As, como se puede observar en
la Figura 15a), se produce una primera prdida de masa
que corresponde a la prdida de agua. En cambio las na-
nopartculas funcionalizadas con grupos amino adems
de la prdida de agua, presentan otra prdida importante
de masa entre 300 oC y 550 oC. Comparando la cantidad
de materia orgnica que se encuentra presente en las
MNPs sin funcionalizar y funcionalizadas se estima que el
porcentaje de carga de materia orgnica proveniente del
APTES es del 17%. Es decir, hay alrededor de 2,810-7 mol
de grupos amino por miligramo de MNPs.
Figura 15: TGA de MNPs sin gru-
pos APTES a) y con APTES b)
Tambin es posible realizar un estudio anlogo, aunque
no tan preciso, de las MNPs funcionalizadas utilizando
el anlisis elemental por combustin (AE). En efecto, esta
tcnica permite estimar la presencia de la fraccin orgni-
ca por comparacin del porcentaje de carbono, hidrgeno
y nitrgeno de las MNPs sin funcionalizar con el de las
funcionalizadas. En el ejemplo de la Tabla 2, se compa-
ran MNPs sin funcionalizar, con MNPs funcionalizadas
por co-condensacin con APTES. En este caso se puede
observar que se ha introducido un 1,9 %, de nitrgeno y
la fraccin orgnica ha aumentado aproximadamente el
doble. Adems se puede calcular que cada miligramo de
MNPs equivale aproximadamente a 1,410-6 mol de gru-
pos amino.
Tabla 2: AE MNPs y MNPs-(CH2)3NH2
Peso / mg C/% H/ % N/%
MNPs
1,090 3,36 1,33 --
1,006 3,24 1,26 --
MNPs-(CH2)3NH2
1,127 6,39 2,08 1,9
1,068 6,17 2,04 1,9
AFINIDAD LXXI, 565, Enero - Marzo 2014
6.4 RESONANCIA MAGNTICA EN ESTADO SLIDO
(RMN-MAS)
A diferencia de lo que ocurre con las muestras en diso-
lucin, la espectroscopa de resonancia magntica nu-
clear de muestras slidas no est tan extendida. La razn
proviene del gran ensanchamiento de las seales del es-
pectro debido a las interacciones dipolo-dipolo entre los
momentos magnticos de los ncleos vecinos que carac-
teriza los espectros de slidos. Una tcnica comnmente
empleada, que minimiza estas interacciones y reduce la
anchura de las seales, consiste en la rotacin de la mues-
tra con un ngulo de 54,44 con respecto a la direccin del
campo magntico. sta tcnica se conoce como RMN de
rotacin en ngulo mgico (RMN-MAS, Magic Angle Spin-
ning). El desarrollo de sta y otras tcnicas han permitido
el uso del RMN en estado slido para el estudio estructu-
ral de sustancias poco solubles, como algunos polmeros,
vidrios, cermicas y resinas, entre otros, siendo una bue-
na alternativa para materiales de baja cristalinidad que no
pueden ser estudiados por tcnicas de difraccin(40).
La aplicacin de la tcnica de RMN-MAS a MNPs permite
observar los protones provenientes tanto de la superficie
externa como de la interna. As en el caso de MNPs fun-
cionalizadas con grupos APTES es posible observar los
tres grupos metileno acoplados entre s. Esta tcnica tam-
bin permite conocer la existencia de algn tipo de inte-
raccin entre las molculas y la slice o incluso que tipo
de conformacin puede ser la ms probable en funcin
del tipo de interacciones de los protones con el medio(41).
7. APLICACIONES DE MNPS EN BIOMEDICI-
NA: NANOPLATAFORMAS TERANSTICAS
Aunque las MNPs se desarrollaron inicialmente para ca-
tlisis, rpidamente se descubri su potencial para otras
muchas aplicaciones tales como sondas de imagen, sen-
sores, materiales pticos, fotocatlisis, pilas de combus-
tible, sistemas elctricos y sobretodo en el mbito de la
investigacin mdica. Es precisamente en este campo en
el que los cientficos han mostrado un mayor inters por
las MNPs como materiales biotecnolgicos(4, 42) debido a
su elevado potencial para albergar diferentes molculas
huspedes gracias a su elevada superficie especfica y
particular geometra. Estas caractersticas y su baja toxi-
cidad hacen de las MNPs prometedores vehculos tiles
para la liberacin de frmacos (Controled Drug Release)
(43)
. Estos vehculos se conciben como nanoplataformas
capaces de desempear una doble funcin de diagnosis
y terapia al mismo tiempo, lo que hoy en da se conoce
bajo el concepto de teranstica(44) (derivado de terapia y
diagnosis) (Figura 16).
Figura 16: Concepto de Teranstica
27
Por tanto se desea disear NPs con capacidad para de-
tectar, visualizar y tratar(45-47). Para dotar de todas estas
funciones a las NPs es preciso funcionalizarlas y conju-
garlas con los agentes activos necesarios (Tabla 3).
Tabla 3: Agentes activos utilizados para funcionalizar MNPs
Molcula Propiedades
Frmaco Tratamiento enfermedades
Anticuerpos Selectividad del transporte
ADN/SiRNA Transduccin gentica
Fotosensibilizadores Terapia fotodinmica (PDT)
Proteinas Centro activo, selectividad
Polmeros catinicos Cruzar membranas
Polmeros biodegradables Biodistribucin y estabilidad
Agentes de contraste Imagen por Resonan-
cia Magntica (IRM)
Fluorforo Localizacin y reconocimiento
Sensor de iones o pH Sensor, diagnstico
Fosfolpidos Encapsulacin molculas
El modelo tpico de estas nanoplataformas (Figura 17)
consiste en incorporar un frmaco en el interior de la MNP
de forma reversible y decorar la superficie con elementos
que mejoren su biodisponibilidad (polietilenglicol (PEG)
(48-52)
y polmeros catinicos para cruzar membranas ci-
toplasmticas(53)), aumenten su selectividad (anticuerpos
que permiten una gran selectividad hacia la zona afecta-
da(16,17,54)) y localizen la NP (agentes de contraste,(30,31) mo-
lculas fluorescentes o nanocristales paramagnticos(24)).
Adicionalmente, la incorporacin de receptores de anio-
nes y cationes ofrece informacin sobre la composicin
del entorno qumico ya sea el pH del medio (niveles bajos
asociados a clulas con un elevado metabolismo como
las clulas tumorales) o la presencia de ciertos aniones o
cationes (55- 59).
Figura 17: Ejemplo de una nanoplataforma
Otra modalidad de nanovehculo descrito en la literatura
consiste en MNPs recubiertas por cadenas de SiRNA uni-
das a la superficie de la nanopartcula por interacciones
inicas. Una vez la MNP se ha internalizado, la nanoplata-
forma se disocia liberando el SiRNA. Esta tecnologa se ha
utilizado en la transfeccin celular(26).
7.1 SISTEMAS DE LIBERACIN DE FARMACOS
Un importante requisito para el diseo de sistemas de li-
beracin de frmacos es que presenten una eficiente ha-
bilidad para transportar la carga a la regin adecuada y
liberarla dosificadamente. En este contexto, las MNPs se
presentan como una buena alternativa a los vehculos ac-
28
tuales(60) (p.ej. liposomas y polmeros biodegradables) ya
que es posible incorporar elevadas cantidades de carga
en sus mesoporos y a continuacin bloquear reversible-
mente su salida, permitiendo un transporte selectivo y una
liberacin eficaz (Figura 18).
Figura 18: Liberacin de carga controlada
Para conseguir este objetivo es necesario disear nano-
puertas inteligentes que se abran como respuesta a un
estmulo(4,42,61). Principalmente, se han utilizado dos tipos
de estmulos(62,63): los estmulos internos como cambios
de pH, medios reductores y actividad enzimtica, que
dependen de la homeostasis de la clula, y los estmulos
externos como son la luz, los ultrasonidos o los campos
magnticos, que pueden aplicarse segn se desee. Ade-
ms, los estmulos externos tienen la ventaja que pueden
controlarse en tiempo y localizacin (Tabla 4).
Tabla 4: Tipo de nanopuertas que se pueden utilizar
Nanopuertas Mediante
sensibles a:
pH Enlaces lbiles (hidracinas, steres, tioles)
Temperatura Polmeros termosensibles
Reacciones redox Puentes disulfuro
Luz Ismeros cis-trans
Campos magnticos Aplicacin de un campo magntico
sobre nanopartculas metlicas
Enzimas Glucosa, enlace biotina-avidina, enlace
glicosdico, interaccin con aptmeros
A continuacin se describen tres sistemas de apertura de
las nanopuertas: apertura mediante un grupo bloqueador,
apertura mediante polmero y apertura mediante vlvulas
(64,65)
.
7.1.1 APERTURA POR ELIMINACIN DE UN GRUPO
BLOQUEANTE
Se trata de anclar un grupo bloqueador en los poros de
la MNP mediante un enlace reactivo capaz de escindirse
o sufrir isomerizacin a travs de un estmulo, liberndo-
se as la carga contenida (Figura 19). Este tipo de control
mecnico se basara en enlaces covalentes (por ejemplo,
tioteres que son escindidos en medios reductores o ami-
das degradables por enzimas especficas(66-67)), grupos
voluminosos (por ejemplo, NPs de Au o nanocristales de
CdS) o molculas fotoisomerizables, como los azobence-
nos(68-69).
AFINIDAD LXXI, 565, Enero - Marzo 2014

Figura 19: Liberacin de carga medi-
ante un grupo bloqueador
7.1.2 APERTURA MEDIANTE POLMEROS
Los polmeros se han utilizado como controles mecnicos
ya sea mediante absorcin o unin covalente a la super-
ficie de las MNPs. Su mecanismo de accin se basa en
envolver fuertemente la superficie externa de las nanopar-
tculas taponando la salida de los poros(62,70,71). A travs de
diferentes estmulos, los polmeros pueden inflarse, enro-
llarse o eliminarse lo que permite la apertura de los poros
bloqueados y la liberacin de la carga (Figura 20).
Figura 20: Ejemplo de liberacin de carga mediante polmero
7.1.3 APERTURA MEDIANTE VLVULAS
El concepto de una nanovlvula supramolecular incluye el
uso de una molcula inmovilizada unida covalentemente a
la matriz de slice (eje) junto con una molcula cclica que
actuar a modo de tapn(62, 72,73). En el estado cerrado, la
molcula cclica se une al eje y este conjunto sirve como
barrera de las aperturas de los poros. Por otra parte, la
disociacin y la retirada de la tapa hace que la vlvula este
en la posicin abierta y se libere la carga del poro (Figura
21).
Figura 21: Liberacin de carga mediante vlvula
AFINIDAD LXXI, 565, Enero - Marzo 2014
8. PERSPECTIVAS FUTURAS
Con el fin de preparar MNPs para su utilizacin en apli-
caciones biomdicas como nanoplataformas, una amplia
gama de propiedades, factores y condiciones de carcter
fsico, qumico, biolgico y fisiolgico deben cumplirse(74):
Deben ser biocompatibles y biodegradables
Deben permitir una elevada carga de agentes activos
Deben presentar un mecanismo de entrega de la car-
ga especfico en el lugar adecuado excluyendo la li-
beracin en clulas normales y tejidos
No debe liberarse el frmaco de forma prematura
Deben presentar un mecanismo de liberacin contro-
lado para proporcionar una dosis eficaz
Aunque gran parte de estos requisitos se han alcanzado,
desgraciadamente las interacciones que sufren las NPs
en el organismo son extraordinariamente complejas, lo
que explica, en gran medida, la dificultad del proceso de
optimizacin y evaluacin al que deben someterse las na-
noplataformas para que estn listas para ser usadas en
aplicaciones clnicas. Aun as grandes progresos se han
conseguido en poco ms de una dcada (Figura 22).
Figura 22: Avance en el estudio de las MNPs
Sin duda, una cuestin fundamental que rodea el uso de
las MNPs es su toxicidad. sta depender siempre de los
sustituyentes y agentes activos que se encuentren an-
clados a las nanopartculas. Por lo que, en cada caso, se
deber estudiar la toxicidad de las nanopartculas funcio-
nalizadas.
Otro aspecto crtico es la tendencia de las NPs a formar
agregados. Cualquier agregacin que ocurra en el torrente
sanguneo puede obstruir los capilares y resultar en una
embolia. En general, el hgado y el bazo son los principales
rganos dnde se acumulan las MNPs(75). Se cree que,
mayoritariamente, la eliminacin de las nanopartculas de
slice ocurre a travs de su descomposicin en cido orto
silcico y su posterior excrecin a travs del sistema re-
nal(6). Se han observado nanopartculas de slice mesopo-
rosa intactas en la orina pero el proceso de excrecin por
el cual ocurre todava no es conocido.
Si las nanopartculas son administradas mediante in-
yeccin por va intravenosa, el tiempo de circulacin en
sangre y su biodistribucin depende principalmente del
dimetro efectivo de las nanopartculas y de sus propie-
dades de superficie. Se sabe que las nanopartculas de
gran tamao, superiores a 100 nm de dimetro, o nano-
partculas agregadas son rpidamente absorbidas por el
29
sistema retculo-endotelial (RES)(74). Del mismo modo, una
adsorcin de protenas no especficas en la superficie ex-
terna de las nanopartculas tambin produce aumento del
dimetro efectivo y puede conducir a mismo fenmeno de
absorcin por el RES. Por lo tanto, resulta muy importante
controlar el tamao y modificar adecuadamente la super-
ficie de las MNPs para superar con xito los ensayos in
vivo.
9. CONCLUSIONES
Las MNPs se caracterizan por presentar unas cavidades
mesoporosas que permiten alojar y proteger una amplia
variedad de molculas orgnicas, mientras que en la su-
perficie externa se pueden funcionalizar con agentes que
mejoren su biodistribucin, solubilidad, selectividad y es-
pecificidad. stos agentes pueden ser adsorbidos o cova-
lentemente enlazados tanto en las paredes interiores de
los mesoporos cmo en su superficie externa. Las MNPs
se presentan como unos buenos candidatos para su apli-
cacin clnica como nanoplataformas multifuncionales
para el diseo de nanodispositivos capaces de desempe-
ar una doble funcin de diagnosis y terapia (teranstica).
No obstante, todava hay variables que deben ser estudia-
das como su estabilidad y biocompatibilidad.
10. BIBLIOGRAFA
1. http://www.oecd.org/science/nanosafety/37770473.
pdf 17/06/2013
2. Deepak, T., Yashwant, P., Michel, D., Drugs and the
pharmaceutical sciences vol. 166, Nanoparticulate
Drug-Delivery Systems: An overview. Chapter 1.
Nanoparticulate Drug-Delivery Systems: An Overview
p.1-32. Edited by Deepak T., Michel D., Yashwant, P.
(2007).
3. Mai, W. X., Meng, H.: Integr. Biol., 5, 19-28 (2013).
4. Vallet-Reg, M.: ISRN Materials Science, 1-20, (2012).
5. Zhang, L., Gu, F. X., Chan, J. M., Wang, A. Z., Langer,
R. S., Farokhzad, O. C.: Clin. Pharmacol .Ther., 83,
761-769 (2008).
6. Mamaeva, V., Sahlgren, C., Linden, M.: Adv. Drug De-
liv. Rev., 65, 689-702, (2013).
7. Slowing, I. I., Vivero-Escoto, J. L., Trewyn, B. G., Lin,
V. S. Y.: J. Mater. Chem., 20, 7924-7937 (2010).
8. Rosenholm, J. M., Sahlgren, C., Lind M.: Nanoscale,
2, 1870-1883 (2010).
9. Beck, J. S., Vartuli, J. C., Roth, W. J., Leonowicz, M.
E., Kresge, C. T., Schmitt, K. D., Chu, C. T. W., Olson,
D. H., Sheppard, E. W.: J. Am. Chem. Soc., 114(27),
10834-10843 (1992).
10. Stber, W.; Fink, A. J. Colloid. Interf. Sci., 26, 62-69
(1968).
11. Ramrez Palma, M. T., Huirache Acua, R., Espino-
sa Acosta, G., Hernndez Padrn, G.: Ciencia Ergo
Sum, 17, 183-188 (2010).
12. Zanella, R.: Mundo. Nano, 5, 69-81 (2012).
13. Wu, S. H., Mou, C. Y., Lin, H. P.: Chem. Soc. Rev., 39. Ma, W. F., Wu, K. Y., Tang, J., Li, D., Wei, C., Guo,
42, 3862-3875 (2013).
14. Tewodros, A.; Tao, Z.: Chem. Res. Toxicol., 25,
22652284 (2012).
15. Vivero-Escoto, J. L., Slowing, I. I., Trewyn, B. G., Lin,
V. S. Y.: Small, 6(18), 19521967 (2010).
30
16. a. Chiang, Y. D., Lian, H. Y., Leo, S.-Y., Wang, S.
G., Yamauchi, Y., Wu, K. C.-W.: J. Phys. Chem. C.,
115, 131581316 (2011). b. Santamara, J., Yage,
C., Moroa, M., Graz, V.: Chem. Eng. J., 137, 45-53
(2008). c. Lin, Y-S , Haynes C.L. J. Am. Chem. Soc.,
132, 48344842 (2010).
17. Park, Y. H., Bae, H. C., Jang, Y., Jeong, S. H., Lee, H.
N., Ryu, W. I., Yoo, M. G., Kim, Y. R., Kim, M. K.,
Lee, J. K., Jeong, J., Son, S. W.: Mol. Cell. Toxicol.: 9,
67-74 (2013).
18. Scott E. McNeil. Editor Characterization of Nanopar-
ticles Intended for Drug Delivery Editorial Humana
Press (2011).
19. Akbari, B.; Tavandashti, M. P., Zandrahimi, M.: IJM-
SE., 8, 48-56 (2011).
20. Mou, C. Y., Lin, H. P.: Pure Appl. Chem., 72(12),
137-146 (2000).
21. Chang, B., Chen, D., Wang, Y., Chen, Y., Jiao, Y., Sha,
X., Yang, W.: Chem. Mater., 25, 574-585 (2013).
22. Popat, A., Liu, J., Lua, G. Q., Qiao, S. Z.: J. Mater.
Chem., 22, 1117311178 (2012).
23. Yulin, H.: Functionalization of mesoporous silice
nanoparticles and their applications in organometallic
and organometallic catalysis. PhD Dissertation. Iowa
State University (2009).
24. Rossi, L. M., Shi, L., Quina, F. H., Rosenzweig. Z.:
Langmuir, 21, 4277-4280 (2005).
25. Rossi, L. M., Silva, P. R., Vono, L. L., Baptista, M. S.:
Langmuir, 24, 12534-12538 (2008).
26. Slowing, I. I., Vivero-Escoto, J. L., Wu, C.-W. Lin, V.
S. Y.: Adv. Drug. Deliv. Rev., 60, 1278-1288 (2008).
27. Carniato, F., Tei, L., Cossi, M., Marchese, L., Botta,
M.: Chem. Eur. J., 16, 10727-10734 (2010).
28. Yildirim, A., Ozgurab, E., Bayindir, M.: J. Mater. Chem.
B, 1, 19091920 (2013).
29. Thanh, N. T. K., Green, L. A. W.: Nano Today, 5, 213-
230, (2010).
30. Clarke, O. J., Boyle, R. W.: Chem. Commun., 2231
2232 (1999).
31. Dickschat, A. T., Behrends, F., Bhner, M., Ren, J.,
Wei, M., Eckert, H., Studer, A.: Chem. Eur. J. 18,
16689-16697 (2012).
32. Chandran, S. P., Srinivas, S.; Prasad, B. L. V.: Curr.
Sci., 95(9), 1327-1333 (2008).
33. Lia, N., Binder, W. B.: J. Mater. Chem., 21, 16717
(2011).
34. Thirumurugan, P., Matosiuk, D., Jozwiak, K.: Chem.
Rev., doi.org/10.1021/cr200409f (2013).
35. Climent, E., Martnez-Mez, R., Sancenn, F., Mar-
cos, M. D., Soto, J., Maquieira, A., Amors, P.: Angew.
Chem. Int. Ed., 49, 7281 7283 (2010).
36. He, W. T., Xue, Y. N., Peng, N., Liu, W. M., Zhuo,
R. X., Huang, S. W.: J. Mater. Chem., 21, 10496
10503 (2011).
37. Ozalp, V. C., Eyidogan, F., Oktem, H. A.: Pharmaceu-
ticals 4, 1137-1157 (2011).
38. Climent, E., Martnez-Mez, R., Maquieira, A., San-
cenn, F., Marcos, M. D., Brun, E. M., Soto, J., Amo-
rs, P.: Chemistry Open, 1, 251 259 (2012).
J., Wang, S. L. Wang, C. C.: J. Mater. Chem., 22,
1520615214 (2012).
40. Trebosc, J., Wiench, J. W., Huh, S., Lin, V. S. Y., Prus-
ki, M.: J. Am. Chem. Soc., 127, 3057-3068 (2005).
AFINIDAD LXXI, 565, Enero - Marzo 2014
41. Nedd, S., Kobayashi, T., Tsai, C.H., Slowing, I. I., 67. Cui, Y., Dong, H., Cai, X., Wang, D., Li, Y.: ACS Appl.
Pruski, M., and Gordon, M. S.: J. Phys. Chem. C., Mater. Interfaces, 4, 3177-3183 (2012).
115, 1633316339 (2011). 68. Coll, C., Bernardos, A., Martnez-Maez, R., Sance-
42. Colilla, M., Gonzlez, B., Vallet-Reg, M.: Biomater. nn, F.: Acc. Chem. Res. 46(2), 339349 (2013).
Sci., 1, 114-134 (2013). 69. Mal, N. K., Fujiwara, M., Tanaka, Y., Taguchi, T., Mat-
43. Cot, K. K., Belowich, M., Liong, M.; Ambrogio, M. W., sukata, M.: Chem. Mater., 15, 33853394 (2003).
Lau, Y. A., Khatib, H. A., Zink, J. I., Khashab, N. M., 70. Fu, Q. Rao, G. V. R, Ista, L. K., Wu, Y., Andrzejewski,
Stoddart, J. F.: Nanoscale, 1, 1639 (2009). B. P., Sklar, L. A.,Ward, T. L., Lopez, G.P.: Adv. Mater.,
44. Chen, N. T., Cheng, S. H., Souris, J. S., Chen, C. 15, 12621266 (2003).
T., Mou, C. Y., Lo, L. W.: Mater. Chem. B, 1, 3128- 71. Yang, Y., Yan, X., Cui, Y., He, Q., Li, D., Wang, A., Feia,
3135 (2013). J. Li, J.: J. Mater. Chem., 18, 5731-5737 (2008).
45. Bechet, D., Couleaud, P., Frochot, C., Viriot, M. L., 72. Zhao, Y., Li, Z., Kabehie, S., Botros, Y. Y., Stoddart, J.
Guillemin, F., Barberi-Heyob, M.: Trend. Biotechnol. F., Zink, J. I.: J. Am. Chem. Soc., 132, 13016-13025
26(11), 612-621 (2008). (2010).
46. Vivero-Escoto, J. L, Slowing, I. I., Trewyn, B.G., Lin, 73. Nguyen, T. D., Tseng, H. R., Celestre, P. C., Flood, A.
V.S.: Small, 6(18), 19521967 (2010). H., Liu, Y., Stoddart, J. F., Zink, J. I.: Proc. Natl. Acad.
47. McNeil, S. E.: J. Leukocyte Biol. 78, 585-594 (2005). Sci. U.S.A., 102, 1002910034 (2005).
48. Tsai, CP., Chen, C. Y., Hung, Y., Chang, F.H., Mou, 74. Lin, Y.-S., Hurley, K. R., Haynes, C. L.: J. Phys. Chem.
C. Y.: J. Mater. Chem.: 19, 57375743 (2009). Lett., 3, 364374 (2012).
49. Tansub, W., Tuitemwong, K., Limsuwan, P., Thepa- 75. Yu, T., Greish, K., McGill, L. D.; Ray, A., Ghandehari,
roonrat, S., Tuitemwong, P.: J. Nanomater, 1-20 H.: ACS Nano, 6, 2289-2301 (2012).
(2012).
50. Cho, K., Wang, X., Nie, S., Chen, Z. Shin, D. M.: Clin.
Cancer. Res., 14(5), 1310-1316 (2008).
51. Haag, R.: Angew. Chem. Int. Ed.: 43, 278-282 (2004).
52. Park, J. T., Seo, J. A., Ahn, S. H., Kim, J. H., Sang
Kang, W.: J. Ind. Eng. Chem.: 16, 517522 (2010).
53. Delehanty, J. B., Boeneman, K.; Bradburne, C. E.,
Robertson, K., Bongard, J. E., Menditz, I. L.: Ther. De-
liv.: 3, 411-433 (2010).
54. Cheng, S. H., Lee, C. H., Chen, M. C., Souris, J.
S., Tseng, F. G., Yang, C. S., Mou, C. Y., Chend, C.
T., Lo L. W.: J. Mater. Chem., 20, 6149-6157 (2010).
55. Moro, A. J., Schmidt, J., Doussineau, T., Lapres-
ta-Fernandez, A., Wegener, J., Mohr, G.: J. Chem.
Commun., 47, 6066-6068 (2011).
56. Gao, W., Chan, J. M., Farokhzad, O. C.: Mol. Pharm.,
7, 1913-1920 (2010).
57. Veale E. B., Gunnlaugsson, T.: Annu. Rep. Prog.
Chem. Sect. B., 106, 376-406 (2010).
58. Jeong, Y., Yoon, J.: Inorg. Chim. Acta, 381, 3-14
(2012).
59. Formica, M., Fusi, V., Giorgi, L., Micheloni, M.: Coord.
Chem. Rev., 256, 170-192 (2012).
60. Angelos, S., Liong, M., Choi, E., Zink, J. I.: Chem.
Eng. J. 137, 4-13 (2008).
61. Li, Z., Barnes, J. C., Bosoy, A., Stoddart, J. F., Zink, J.:
Chem. Soc. Rev., 41, 2590-2605 (2012).
62. Hechta, M., Climent, E., Biyikal, M., Sancenn, F.,
Martnez-Mez, R., Ruracka, K., Coord. Chem. Rev.
http://dx.doi.org/10.1016/j.ccr.2013.03.020 (2013)
63. Descalzo, A. B., Martnez-Martinez, R., Sancenn, F.,
Hoffmann, K., Rurack, K.: Angew. Chem. Int. Ed., 45,
5924-5948 (2006).
64. Wang, C., Li, Z., Cao, D., Zhao, Y. L., Gaines, J.
W., Bozdemir, O. A., Ambrogio, M. W., Frasconi, M.,
Botros, Y. Y., Zink, J. I., Stoddart, J. F.: Angew. Chem.
Int. Ed., 51, 5460-5465, (2012).
65. Trewyn, B. G., Giri, S., Slowing, I. I., Lin, V. S. Y.:
Chem. Commum., 3236-3245 (2007).
66. Nadrah, P., Maver, U., Jemec, A., Tisler, T., Bele, M.,
Goran Drazic, G., Mojca Bencina, M., Pintar, A., Pla-
ninsek, O., Gaberscek, M.: ACS Appl. Mater. Inter-
faces, 5, 3908-3915 (2013).

AFINIDAD LXXI, 565, Enero - Marzo 2014 31