INMUNOFLUORECENCIA

Esta tcnica se caracteriza por la unin de un anticuerpo a una molcula

fluorescentes como isotiocianato de fluorescena, el anticuerpo marcado con la
molcula fluorescente se hace reaccionar con un preparado bilgico luego la
muestra se expone a un haz de luz de onda corta ultravioleta, el preparado al recibir
esta luz de onda corta emite una un haz de luz de onda ms larga que puede ser
cuantificado con un fotmetro.
Se clasifican en directo e indirecto
Primaria o infmunofluorecencia directa IFD
hace uso de un nico anticuerpo que se encuentra qumicamente unido a
un fluorocromo. El anticuerpo reconoce la molcula diana y se une a ella
directamente.
Secundaria o infmunofluorecencia indirecta IFI
el anticuerpo primario es el que reconoce y se une a al molcula diana, mientras
que el secundario que es el que se encuentra marcado con el fluorforo, reconoce
al primario y se une a l. Esta tcnica es un poco ms compleja que la IFD, requiere
mas pasos y es ms posible que sufra interferencias, pero en contrapartida es
mucho ms flexible que una tcnica directa y debido a que es posible que un
anticuerpo primario una a ms de anticuerpo secundario, implica un efecto de
amplificacin que tambin aumenta la sensibilidad de la tcnica.
 ANTICUERPOS ANTINUCLEARES
son autoanticuerpos que tienen como blanco el contenido del ncleo celular. La
concentracin de anticuerpos antinucleares est significativamente aumentada en
aquellos pacientes con enfermedades autoinmunes. El test de ANA, mide el patrn
y la cantidad de autoanticuerpos, resultando positivo en el caso de que los ttulos
se encuentren aumentados en comparacin con la poblacin general. En general,
los ANA se encuentran presentes en bajas concentraciones en la mayor parte de la
poblacin, pero existe alrededor de un 5% de la poblacin (principalmente en
mujeres), en que su concentracin se encuentra significativamente aumentada y la
mitad de stos llegan a desarrollar alguna enfermedad autoinmune como
especialmente lupus eritematoso sistmico (LES), esclerosis sistmica progresiva,
sndrome e de Sjgren (SS) y enfermedad mixta del tejido conectivo (EMTC)
Los anticuerpos antinucleares (ANA) son anticuerpos dirigidos contra componentes
del ncleo celular. Para detectarlos se utilizan las tcnicas de
inmunofluorescencia indirecta (IFI) y ELISA.
Una vez determina la presencia de ANA significativo ahora debemos determinar qu
tipo es

PATRONES DE ANA
Patrn nuclear homogneo: Reacciona contra DNA (ds), histonas. Relacionado con
LES inducido por drogas y otras enfermedades del tejido conectivo.
Patrn nuclear perifrico: Anticuerpos dirigidos contra protenas integrantes de la
membrana nuclear: por ej. anti-laminina, anti-gp210. Relacionado con lupus
eritematoso sistmico (LES), lupus en actividad y lupus nefrtico.
Patrn nuclear moteado:

Reaccionan contra una gran familia de antgenos no histnicos.

Moteado grueso: anticuerpos anti Sm, anticuerpos anti U1RNP, asociado a
LES, esclerodermia, enfermedad mixta del tejido conectivo (EMTC)
Moteado fino: anticuerpos anti SSA /Ro, Anticuerpos anti SSB/ La: sndrome
de Sjgren (SS) y LES.
 Patrn centromrico: presente en el CREST (calcinosis, Raynaud, hipomotilidad
esofgica, telangectasia, esclerodactilia) y en la cirrosis biliar primaria (CBP).
La frecuencia de ANA en la poblacin vara en funcin de la edad, ya que el nmero
de positivos aumenta con la edad y es mayor en la IFI con clulas HEp-2.

En enfermedades reumticas sistmicas se hallan ttulos de 1/160 (con sustrato de

hgado de rata),1/640 con HEp-2.
 Utilidad Clnica:
Screening en poblaciones con
sospecha clnica de enfermedades
autoinmunes citados en el significado
clnico. Screening para LES (por su
falta de especificidad) y otras
enfermedades reumticas y
autoinmunes, incluyendo tiroiditis y
enfermedades hepticas (ej. hepatitis
autoinmunes) el ANA es un marcador
de LES y desrdenes relacionados.
Cuando son negativos hacen el
diagnstico de LES improbable pero no
lo descarta.
Este test no es especfico de ninguna
enfermedad vascular del colgeno