Procedimientos para laboratorio en estudio de Acanthamoeba.

Antes de realizar cualquier procedimiento baja la campana de laboratorio, se debera desinfectar la

campana y colocar todos los instrimuentos que seran utilizados para que deban estar estriles
dentro de esta. Para esto se prendera la Luz ultravioleta por un tiempo de 10 minutos, lo cual
eliminara cualquier contaminante.

1) Preparacin de cultivo de Escherichia coli.

Para la preparacin de un nuevo cultivo de E. coli necesitaremos tener los siguientes objetos bajo
la campana:

- Cultivo anterior de E. coli en placa.

- Asa plstica de laboratorio.
- Tubo de muestra que contenga Agar para sembrar E. coli.

Utilizando el asa tomaremos una cantidad contundente de muestra del cultivo en placa, esta ser
puesta en el tubo de muestra y sembrada sobre el agar.

2) Preparacin de placas para cultivar muestras.

Para la preparacin de placas para cultivar muestras necesitaremos tener los siguientes objetos
bajo la campana:

- Tubo de muestra con E. coli.

- Tubo de muestra con solucin Page.
- Pipetas de laboratorio.
- Caja con puntas para la Pipeta.
- Placas con agar para sembrar las muestras.

Se considera que cada placa debe tener 2 [l] de mezcla por lo tanto se mezclara en el tubo de E.
coli la cantidad de solucin Page necesaria para el nmero de placas que se vayan a preparar. Con
la pipeta cargada con una punta se tomara la cantidad determinada de solucin Page y se agregara
est en el tubo con E. coli se mezclara hasta que se note que el contenido liquido est cargado con
la muestra. De esta mezcla se tomara 2 [l] con la pipeta cargada con una punta diferente, y se
vaciara sobre las placas que se van a preparar.

3) Cultivo de las muestras.

Para el cultivo muestras necesitaremos tener los siguientes objetos bajo la campana:

- Placas preparadas para muestras.

- Muestras.
- Hisopos esterilizados.

Antes de cultivar las muestras se debe rotular las placas preparadas de la siguiente manera; se
indica en primer lugar si la muestra ser nasal con una N, o del estuche de lentes con una L,
luego se indicara el nmero de folio del paciente por ejemplo 001y por ltimo se debe poner la
fecha es decir da y mes, por ejemple 01-1. Una vez rotuladas las placas se proceder a sembrar
las 2 muestras de cada paciente. Para la muestra nasas se tomara el Hisopo del paciente y se
cultivara sobre toda la placa, luego se partir la parte del hisopo con la muestra y se dejara dentro
de la placa. Para la muestra del estuche de los lentes de contacto, se utilizara un hisopo estril el
cual ser pasado por todas las superficies del Estuche, incluyendo tapas y bordes, esta muestra se
sembrar sobre la placa y se dejara el hisopo dentro de la placa. Entre el cultivo de diferentes
pacientes no olvidar utilizar alcohol gel.

Por ultimo al momento de cultivar muestras se pueden sembrar el control positivo y negativo, esto
se har rotulando 2 placas una de control positivo y otra de control negativo. La placa de control
negativo ser una placa solamente preparada para muestras. En cuanto a la del control positivo
con un hisopo estril se tomara una muestra de Acanthamoeba de un control positivo anterior y
se sembrara sobre una placa de muestra preparada.