Influencia glial en la Barrera Hematoenceflica

Jorge Ivan Alvarez, Takahiro Katayama, y Alexandre Prat

La barrera hematoenceflica (BBB) es una estructura vascular especializada regular estrictamente

la homeostasis del sistema nervioso central (SNC). Las clulas endoteliales son el componente
central de la BBB y el control de su fenotipo barrera reside en astrocitos y pericitos. Las
interacciones entre estas clulas y el endotelio promueven y mantienen muchas de las
caractersticas fisiolgicas y metablicas que son exclusivos de la BBB. En esta revisin se
describen los hallazgos recientes relacionados con la participacin de las clulas astroglial,
incluyendo las clulas gliales radiales, en la induccin de propiedades de barrera durante la
embriognesis y la edad adulta. Adems, se describen los cambios que se producen en los
astrocitos y clulas endoteliales durante la lesin y la inflamacin con un nfasis particular en las
alteraciones del fenotipo BBB.
Palabras clave: astrocitos, la BBB, gliales, astrogliosis, la esclerosis mltiple

Introduccin
El sistema circulatorio se compone de los vasos sanguneos que se especializan en la prestacin de
los tejidos con el oxgeno, nutrientes y hormonas para estabilizar la temperatura del cuerpo, el pH,
y por lo tanto mantener la homeostasis. El desarrollo de un sistema vascular maduro es un proceso
multifactico dividido en dos etapas separadas. La primera es la vasculognesis y se define como
el de novo formacin de tubos endoteliales a partir de clulas precursoras endoteliales recin
diferenciadas, o angioblastos. Los agregados de dos o ms angioblastos inician el proceso de la
formacin del tubo vascular por electrosttica de repulsin de la superficie celular de las superficies
celulares apicales opuestos en una cuerda de clulas endoteliales (CE). Esto es seguido por la
elongacin CE, aplanar, y lumen ensanchamiento en el recipiente de desarrollo (Axnick y Lammert,
2012; Risau y Flamme, 1995).Establecimiento de la polaridad celular apical-basal y las
interacciones entre angioblastos y que rodea la matriz extracelular (ECM) son tambin pasos
importantes en el establecimiento de la vasculatura temprano (Davis y Camarillo, 1996; Patan,
2000).

La formacin de canales vasculares y el plexo capilar son los ltimos estadios de la vasculognesis,
que luego son remodeladas en una red circulatoria a travs de la angiognesis (Kelly y Hirschi,
2009). En esta segunda etapa del desarrollo vascular, hipoxia conduce la consecuencia de un brote
de un vaso preexistente. La inhibicin lateral es el mecanismo de accionamiento el brote en el
tejido hipxico. Brote puede ser intercelular o intracelular y parece estar controlada por los
mecanismos que participan en la formacin del lumen durante la vasculognesis (Axnick y
Lammert, 2012; Bicknell y Harris, 2004).

Una vez que el vaso sanguneo est totalmente formado, el proceso de la angiognesis ces y en el
caso del sistema nervioso central (CNS), el control homeosttico del fenotipo endotelial reside en
las clulas en las proximidades de los vasos tales como astrocitos, pericitos, neuronas, y
microglia. Estas interacciones dan forma a muchas de las caractersticas nicas del endotelio del
cerebro conocida como la barrera hematoenceflica (BBB).

La vasculatura asociada con la BBB est formada por ECs altamente especializadas que se
caracterizan por la presencia de los sistemas de transporte especializados (Abbott et al., 2006), una
baja actividad de pinocitosis (Coomber y Stewart, 1985), la fraccin de volumen mitocondrial
superior (Oldendorf et al., 1977), y una hendidura paracelular entre las membranas endoteliales
adyacentes (Alvarez et al., 2011a).Esta hendidura es sellado por filamentos continuos de las
protenas del complejo de unin que incluyen uniones estrechas (TJS) y las uniones adherentes
(AJS), protenas (Dejana et al, 2008;. Harhaj y Antonetti, 2004), que se anastomosan las
membranas plasmticas de uno o varios EC, como se muestra en microscopio electrnico de
congelacin-fractura (Nagy et al, 1984;. escalofros et al., 1984); expresin de AJs y TJs se sabe que
inducen una alta resistencia elctrica transendotelial (TEER) en comparacin con ECs en la periferia
(Rubin et al., 1991). La BBB controla el movimiento de electrolitos, xenobiticos y clulas inmunes
entre la circulacin sistmica y el parnquima del SNC de circulacin a fin de mantener un medio
ptimo para la funcin neuronal (Alvarez et al., 2011a).
Bajos resultados pasaje transcelular de la prdida de fenestraciones de clulas, y las protenas de
unin fuertemente adheridas entre BBB-EC que, adems, promover la difusin paracelular
baja. Adems, la permeabilidad paracelular depende tambin del equilibrio entre las fuerzas
contrctiles producidos por el citoesqueleto endotelial y de las fuerzas que se adhieren generados
por las protenas de unin clula-clula y las interacciones clula-ECM (Garca y Schaphorst,
1995). Por lo tanto, la apertura y cierre de la va paracelular depende de la interaccin dinmica
entre los componentes estructurales, que en condiciones patolgicas son perturbados a diferentes
niveles y resultan en alteraciones significativas en el intercambio regulado entre la sangre y el
sistema nervioso central.

Sin embargo, todas estas caractersticas nicas de la BBB son en gran parte debido a las
interacciones celulares complejas entre las EC y las clulas gliales perivasculares. En este sentido,
se proporcionaron las primeras manifestaciones claras de los astrocitos que contribuyen a la BBB
de formacin y mantenimiento de forma independiente por los grupos de Raff y Brightman, en
1987. En seminal in vivo de injerto y in vitro de cultivo celular estudios de estos dos grupos
demostraron que morfolgica y funcional BBB caractersticas dependen del entorno del SNC, y
especficamente sobre la contribucin de astrocitos perivasculares (Janzer y Raff, 1987;. Tao-Cheng
et al, 1987). En 1991, Rubin et al. demostr que aislado BBB-ECs fuera cultivadas del medio
ambiente CNS pierden su capacidad de barrera funcional, medida por grabaciones de TEER y
permeabilidad (Rubin et al., 1991).Sin embargo, la resistencia elctrica y la permeabilidad a los
marcadores moleculares grandes y pequeos pueden ser reinduced en BBB-ECs cuando se cultivan
en presencia de astrocitos medio acondicionado (ACM) (Alvarez et al, 2011b;. Neuhaus et al, 1991;.
Prat et al. , 2001) o cuando se proporciona contacto astrocito-ECs (Tao-Cheng et al., 1987).

A la inversa, cuando nonCNS ECs son cultivadas en presencia de astrocitos, o factores de astrocitos-
secretada, una serie de propiedades BBB-especficas, tales como P-glicoprotena (P-gp) y la
expresin TJ puede ser inducida
(Abbott et al., 2006 ; Prat et al, 2001;.. Wosik et al, 2007). BBB Desarrollo Barriergenesis y las
propiedades nicas de la CE en el SNC no estn predeterminadas por las clulas precursoras
endoteliales especfica del cerebro, pero son inducidas por el medio ambiente neural local durante
el desarrollo del sistema vascular. Desarrollo de vasos sanguneos dentro del SNC comienza cuando
los elementos vasculares de la red capilar primitivo situado en el plexo vascular perineural se
expanden por la angiognesis en el parnquima del SNC en el da embrionario 11 en el ratn
(Risau, 1997; Risau y Wolburg, 1990) y alrededor de la semana octava de la gestacin en los
humanos (Ballabh et al, 2005; Bar., 1980; Norman y O'Kusky, 1986).

Los brotes vasculares invaden el parnquima embrionario hacia un gradiente de Vascular Endotelial
Growth Factor (VEGF) generada por las clulas neuroectodrmicos que se extiende desde la
superficie pial a la epndimo (Liebner et al., 2011). Adems de VEGF, mltiples vas de sealizacin
tales como el sistema angiopoyetina-Tie, la va Hedgehog, los receptores tirosina quinasas Ephrin,
la Dll4 /sealizacin Notch1 y la va de sealizacin Wnt tambin estn implicados en el brote
angiognico y la remodelacin durante la embriognesis temprana (Adams, 2002;. lvarez et al,
2011b; Daneman et al, 2009;. Liebner et al, 2008;. Shawber y Kitajewski, 2004;. Suri et al,
1996). Durante esta fase los vasos exhiben TJs, fenestraciones falta cortos y primitivas y restringen
el movimiento de protenas derivadas de la sangre en el entorno del SNC (Liebner et al., 2011). La
etapa de la angiognesis es seguida por una fase de diferenciacin en que se establecen
interacciones entre los vasos recin formados, pericitos y clulas gliales radiales. La interaccin EC-
pericitos es impulsado por factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) -BB, que es
secretada por las EC y se une al PDGFR b en los pericitos, por la comunicacin transversal a travs
del sistema angiopoyetina-Tie y por mecanismos dependientes de contacto impulsadas por sitios
enriquecidos en la expresin de N-cadherina (Daneman et al., 2009, 2010).

En esta fase (E14-E16 en el ratn; alrededor de la semana 12 en los seres humanos), hebras TJ se
hacen ms complejos, ms largo y las valvas exteriores de las membranas adyacentes aparecen
como una cadena de puntos de fusin que forman conjuntos de redes complicado que puede ser
visualizado por fractura de congelacin microscopa electrnica (Wolburg y Lippoldt, 2002). En
contraste, los vasos sanguneos menngeos expresan protenas TJ en E14, pero carecen de una
barrera competente, como la mayora endgenos y exo marcadores genas de fuga vascular pueden
ser detectados en el espacio menngea (lvarez et al, 2011b;. Norman y O'Kusky, 1986) . Esto
confirma el papel esencial de las seales del parnquima, presumiblemente gliales, para establecer
un fenotipo BBB y destaca las diferencias fenotpicas y funcionales entre buques en distintas
localizaciones del SNC. La BBB contina su desarrollo y maduracin durante las ltimas etapas de
la embriognesis y despus del nacimiento, como una red muy compleja de filamentos y el
aumento de la densidad de las partculas revelan TJ maduracin (Ballabh et al, 2005;. Bar, 1980;
Norman y O'Kusky, 1986 ; Wolburg y Lippoldt, 2002). La aparicin de astrocitos perivasculares
apoyar an ms el refinamiento del fenotipo BBB, que tambin se cree que est influenciado por
microglial- y factores neuronales derivados (Abbott et al., 2006).

Adems, cuanto mayor sea la cobertura de pericitos en el SNC en comparacin con la periferia
pone de relieve la importancia funcional de los pericitos en biologa vascular CNS, tanto en la
embriognesis y la edad adulta (Bell et al, 2010;.. Daneman et al, 2010). Sin embargo, incluso en
ausencia de pericitos, clulas endoteliales CNS embrionarias expresan muchas molculas-BBB
especfica, lo que sugiere que, adems de los pericitos, las seales derivadas del SNC tambin
juegan un papel importante en la promocin de un fenotipo BBB (Daneman et al., 2010).
En los estudios histolgicos seminales utilizando material de cerebro humano fetal, los grupos de
Praaven Ballabh y Jeanne E. Bell revelaron la presencia de astrocitos en el SNC ya en la semana
gestacional noveno (Wilkinson et al., 1990), y su contacto con los microvasos del SNC se detect en
la semana 17a (Elkhoury et al., 2006). Estos astrocitos expresan protena cida fibrilar glial (GFAP),
S-100 b, y acuaporina-4 (AQP4) -. Material inmunorreactivo, que alcanz su punto mximo y
alcanz una meseta en la semana 23a, especialmente en la sustancia blanca y la corteza (Elkhoury
et al, 2006 ). En el desarrollo del ratn del SNC, astrocitos son reportados a aparecer en la segunda
mitad del periodo gestacional (Molofsky et al., 2012), slo despus de la formacin de una BBB
competente (Daneman et al., 2010).

Sin embargo, las clulas gliales radiales que son conocidos para apoyar la neurognesis y la
migracin de los precursores neuronales se encuentran en todo el SNC en desarrollo (Rakic,
1972). Tambin se sabe que las clulas gliales radiales para interactuar estrechamente con el
crecimiento de los vasos de la corteza (Gerhardt et al., 2004) y durante la tarde corticogenesis
embrionario entran en contacto con los vasos sanguneos nacientes para regular su estabilidad a
travs de la modulacin de la sealizacin de Wnt cannica (Ma et al., 2013). Esto sugiere que las
clulas gliales como modulan el fenotipo de los vasos durante la embriognesis y que distintos
tipos de clulas en el SNC pueden utilizar mecanismos similares para inducir BBB propiedades. Al
final de la neurognesis y el desarrollo cortical, las clulas gliales radiales ms pierden su adhesin
ventricular y migran hacia la placa cortical por un proceso conocido como Somal translocacin
(Nadarajah, 2003).

desarrollo Astrocyte se amplifica en las ltimas etapas de la embriognesis como clulas gliales
radiales transforman en astrocitos multipolares (Choi y Lapham, 1978; Molofsky et al, 2012;.
Schmechel y Rakic, 1979). Durante este proceso, las clulas gliales radiales convertir de clulas
bipolares que abarcan la corteza a las clulas unipolares ya no establecen contacto con la zona
subventricular y luego en clulas multipolares con la regresin de proceso radial que adquieren
progresivamente la morfologa de astrocitos. Durante el desarrollo postnatal, los astrocitos se
convierten en las clulas ms abundantes en el sistema nervioso central y en esta etapa participan
en la induccin y mantenimiento de la BBB propiedades (Prat et al., 2001), mientras que el papel
desempeado por otros constituyentes de la unidad neurovascular (NVU) tales como microglia y
neuronas que an queda por establecerse.

La heterogeneidad de los astrocitos

El cerebro es un rgano con una alta demanda de oxgeno y glucosa. Tales requerimientos
metablicos son crticos para un funcionamiento ptimo del SNC y tanto las EC y los astrocitos
desempean un papel crucial en este proceso. Endfeet astrocito ensheathe la microvasculatura del
SNC y establecer una estrecha interaccin conocida para controlar el flujo de la sangre del SNC
(acoplamiento neurovascular), el suministro de energa a las neuronas y, por tanto, ejercer un
control indirecto sobre la funcin del SNC.En el pasado, se consideraba que las neuronas eran
responsables de las seales metablicas que desencadenan cambios en el flujo sanguneo (Attwell
y Laughlin, 2001). Sin embargo, el reciente descubrimiento de los neurotransmisores de ser
liberado por los astrocitos y su capacidad para modular la sealizacin implicada en el
acoplamiento neurovascular tiene traer un fuerte apoyo a la implicacin de las clulas gliales no
slo controlan BBB propiedades, sino tambin en la regulacin del flujo sanguneo.

la sealizacin mediada por glutamato conduce a la liberacin de xido ntrico a partir de las
neuronas y de derivados del cido araquidnico a partir de astrocitos (Attwell et al., 2010). Estas
molculas pueden aumentar o disminuir el flujo de sangre en funcin de la concentracin de
oxgeno local. Curiosamente, el papel del glutamato y su influencia en el control de flujo de la
sangre vara segn la regin anatmica analizados (Northington et al., 1997).

En este sentido, varios tipos de astrocitos con el potencial para modular diferencialmente el
fenotipo microvascular incluyen: astrocitos protoplasmticos que se encuentran
predominantemente en la corteza y el hipotlamo, astrocitos fibrosos que se encuentran en todo el
SNC y altamente pueblan la sustancia blanca y el cuerno dorsal de la mdula espinal, la gla de
Bergmann que se encuentran en el cerebelo procesos de las clulas de Purkinje se extiende a la
superficie pial, clulas de Muller de la retina que tienen propiedades gliales radiales, los astrocitos
Velate que se encuentran en el cerebelo que forma una vaina que rodea las neuronas granulares,
perivascular y astrocitos marginales que se localizan cerca de la piamadre formacin de los
limitante pial y glia perivascular, tanycytes que se encuentran en el piso del tercer ventrculo apoyo
a las funciones neuroendocrinas y gla subependimario cuya funcin queda por determinar (de
Seranno et al., 2010 ; Reichenbach y Wolburg, 2005).

Adems de eso, existen diferencias sustanciales de acuerdo con la regin del cerebro analizada en
trminos de densidad de astrocitos y su tasa de proliferacin. El nivel de complejidad aumenta ya
que sus caractersticas difieren electrofisiolgicos. Los astrocitos procedentes de diferentes
regiones anatmicas expresan distintos niveles y tipos de canales de iones que influyen en sus
propiedades electrofisiolgicas, incluyendo sus potenciales de membrana en reposo (Oberheim et
al., 2012). Por lo tanto, el alto grado de heterogeneidad dentro de la poblacin astroglial define la
arquitectura celular nica del sistema nervioso central, y apoyar el concepto de que distintos
microambientes del SNC pueden reflejar diferencias moleculares y funcionales nicas de la BBB.

Astrocito interacciones-endotelial
Al NVU el espacio extracelular se compone de las membranas basales en los que se requiere la
interaccin entre los componentes de los receptores de adhesin de ECM y de la matriz para una
interaccin adecuada entre las clulas y su microambiente. A nivel de la BBB existen dos
membranas basales (BMS) que separa endotelio de los astrocitos: la primera se llama el BM
endotelial que se compone de fibronectina, colgeno tipo IV, perlecan, y los laminina un 4 y un 5
cadenas, que se asocian con laminina b 1 y c 1 para formar la laminina 411 y 511 (Engelhardt y
Sorokin, 2009;. Hamann et al, 1995;. Sixt et al, 2001). La segunda membrana se llama el
parnquima o BM astroglial (tambin llamado perivasculares limitans glia ) que se hace de los
componentes de ECM fibronectina, agrina y las lamininas un 1 y un 2 cadenas, que se asocian con
la laminina b 1 y c 1 para formar lamininas 111 y 211 (Engelhardt y Sorokin, 2009;. Sixt y otros,
2001).

Todos estos componentes de la MEC tienen el potencial de servir como molculas de andamiaje,
para unirse a receptores de la CE y por lo tanto contribuir al fenotipo BBB. En este sentido, la BBB-
EC se sabe que expresan las integrinas un 1 b 1, un 3 b 1, un 4 b 1, un 5 b 1, un 6 b 1, un 6 b 4
y un v b 1 /una v b 3 / una v b 8 que se unen a la mayora de las protenas de la BM en el SNC, as
como en la periferia (Milner y Campbell, 2002 (Dodelet-Devillers et al., 2009); Tagaya et al, 2001;.
Wagner et al., 1997). Los astrocitos tambin se han reportado para expresar distroglicano y las
integrinas un v b 5, un vb 8, y un 6 b 4 (Milner et al, 1999;.. Paulus et al, 1993;. Sixt et al, 2001;
Wagner et al., 1997). Las evacuaciones de microvasos cerebrales, por tanto, se ven como
estructuras de andamiaje importantes que permiten tanto astrocito-ECs proximidad y ptima
astrocito-ECs comunicacin. Los astrocitos tambin establecen una interaccin estrecha con la
vasculatura del cerebro a travs de anclaje transmembrana de las protenas, tales como AQP4 y
KIR4.1 (Higashi et al, 2001;. Lien et al, 2012;.. Nielsen et al, 1997) y sus molculas adaptadoras
(syntrophin, distrofina, y dystrobrevin).

El AQP4 canal de agua es conocida para controlar afluencia del agua a nivel de la BBB. AQP4 est
anclado a la citoarquitectura de astrocitos a travs de un -syntrophin, un componente del complejo
de distrofina-dystroglycan (Neely et al., 2001) que une las protenas asociadas a la distrofina (DAP),
tales como distroglicano, con diversos componentes del citoesqueleto. DAP, distroglicano, as como
otras molculas expresadas preferentemente en el endfeet astrocitos son responsables de la
expresin polarizada de AQP4 en astrocitos del SNC (Amiry-Moghaddam y Ottersen 2003;. Frigeri et
al, 2001; Lien et al, 2012.) Y se asociada con una alta densidad de matrices ortogonales de
partculas (jubilados) que se vuelven menos frecuentes en las zonas ms profundas de la neurpila
(Wolburg et al., 2011).Ambos animales knockout AQP4 y ratones especficamente deficientes para
AQP4 en astrocitos tienen una reduccin significativa en la absorcin de agua del cerebro y han
reducido el edema cerebral tras el accidente cerebrovascular, en comparacin con los animales WT
(Haj-Yasein et al, 2011;.. Manley et al, 2000) .

Sin embargo, los ratones deficientes en concreto para AQP4 en astrocitos tenan una BBB plena
capacidad, lo que sugiere que la alteracin del flujo bidireccional de agua debido a la deficiencia de
AQP4 no pone en peligro la funcin de barrera. Adems, AQP4 delecin afecta a la expresin glial
perivascular de un -syntrophin sin afectar la ultraestructura de CNS ECs y sus propiedades BBB
(EilertOlsen et al., 2012). Esto indica que la expresin de AQP4 es importante tanto para la
formacin o para la estabilidad de la citoarquitectura de los astrocitos.

KIR4.1 es un canal de potasio rectificador de entrada que colocaliza con AQP4, y es importante para
mantener el equilibrio de potasio y agua. KIR4.1 Tambin se ha informado de anclar al
citoesqueleto a travs de un -syntrophin (Connors et al., 2004), aunque los estudios que
utilizan una ratones knockout -syntrophin no demostr una reduccin o una redistribucin de KIR4.1
en endfeet astrocitos (Puwarawuttipanit et al., 2006). Estos resultados indican que otras protenas
intracelulares estn implicadas en la expresin polarizada de KIR4.1.

un -Dystrobrevin es otra protena citoplsmica expresada por endfeet glial y sabe que est presente
en las clulas que forman las barreras de los tejidos de la sangre (Lien et al., 2007). Dystrobrevins
establecen interacciones complejas con distrofinas, sintrofinas y otras protenas para proporcionar
anclaje y apoyo a un conjunto mltiple de los componentes del citoesqueleto, receptores y canales
situados en la parte apical de la membrana celular (Rees et al., 2007). Recientes experimentos
utilizando animales que carecen de un dystrobrevin demostraron un desarrollo progresivo y la BBB
con fugas de edema cerebral. Estas alteraciones coincidieron con perturbances en la interaccin
entre endfeet astrocitos y BBB-EC que se caracterizan por alteraciones en la expresin de las
protenas TJ y la expresin desregulada de AQP4, KIR4.1 y distroglucano (Lien et al., 2012). Por lo
tanto, endfeet astrocitos estn unidos al endotelial BM a travs de distroglicano que est conectado
a travs de sintrofinas y un -dystrobrevin al intracitoplasmtica / maquinaria citoesqueleto.

Los astrocitos se comunican entre s a travs de las uniones intercelulares y establecen un sincitio
funcional que est asociada con respuestas eficaces y bien coordinados dentro de grandes grupos
de clulas (Theis et al., 2005). Esta interaccin funcional tambin se detecta en la endfeet astroglial
que rodea la vasculatura del cerebro ya que expresan altos niveles de protenas de unin gap que
consisten principalmente en Connexin (Cx) 43 y, en menor medida, Cx30 (Giaume et al.,
1991). Estas molculas tambin contribuyen a la medida de la heterogeneidad de los astrocitos
como sus niveles de expresin varan durante el desarrollo y dentro de las regiones anatmicas
distintas (Nagy y erupcin cutnea, 2000).
A medida que el sincitio glial es altamente prevalente en la proximidad de los vasos sanguneos, se
ha sugerido que la sealizacin de astroglial implicado en la vasodilatacin y vasoconstriccin
durante el acoplamiento eurovascular se transmite a travs de las uniones comunicantes entre
astroglial (Rouach et al., 2008). En trminos de funcin BBB, ratones que carecen de Cx43 y Cx30
expresin en astrocitos tenan una prdida significativa de AQP-4 y b expresin -dystroglycan en su
endfeet que estaba asociado con edema y un BBB interrumpido (Ezan et al., 2012). BBB-ECs
tambin expresan CXS que se asocian con las protenas de unin y su inhibicin afecta a la funcin
de barrera (Nagasawa et al., 2006).

Adems, los astrocitos juegan un papel importante en el suministro de energa a las neuronas y su
estrecha interaccin con la vasculatura es fundamental en este proceso. En el clsico "lanzadera de
lactato astrocito-neurona" astrocitos toman glucosa a partir de los CE en respuesta a la actividad
neuronal glutamatrgica. La energa necesaria para la captacin de glutamato se proporciona por el
metabolismo de la glucosa que a su vez conduce a la produccin de lactato, una fuente importante
de energa tomado por las neuronas (Giaume et al., 2010).

FIGURA 1: diafona celular de astrocitos-endotelial apoyo a la funcin BBB. La BBB est formado por
clulas endoteliales (EC), rodeado de un membranas endoteliales y pericitos con stano astroglial
incrustados en el medio. Estos estn rodeados por endfeet astrocitos, que prestan apoyo a la
funcin endotelial y establecer comunicacin con las neuronas. El panel derecho muestra ejemplos
prototpicos de factores secretados por los astrocitos y los EC que son cruciales en el
establecimiento y mantenimiento de la BBB. Se incluyen los receptores para algunas de las
molculas que se muestran. Ang-1-2 (angiopoyetina 1 y 2), ApoE3-E4 (apolipoprotena E3 y E4),
AT1 (receptor de tipo 1 de la angiotensina), CypA (cyclophylin A), ET (endotelina), FGF (factor de
crecimiento de fibroblastos) GDNF (glial derivado de la lnea celular factor neurotrfico), MMP-9
(MMP 9), Ptch1 (Patched 1), RA (cido retinoico), RAR b (AR-receptor b ), Shh (sonic Hedgehog),
SMO (alisado), SSeCKS (Src suprimida C sustrato de quinasa), TGF b (factor de crecimiento
transformante b ), Tie2 (receptor tirosina quinasa 2) y VEGF (factor de crecimiento endotelial
vascular). La flecha representa la induccin / activacin; Romo lnea representan la inhibicin / baja
regulacin.

El control de la BBB Fenotipo por seales astrogliales

durante la homeostasis
Adems del apoyo proporcionado por los astrocitos a postnatal BBB desarrollo, la persistencia de
una BBB funcional durante la edad adulta es mantenido y regulado por numerosos factores nicos
para la microniche del NVU (Abbott et al, 2006;.. Haseloff et al, 2005) . Los niveles multifacticos de
la comunicacin cruzada y eventos de sealizacin que ocurren entre BBB-ECs y astrocitos,
pericitos, microglia y neuronas, mantener un fenotipo ptimo BBB y promover el mantenimiento de
la unin de protenas, expresin de metablicas y especializados transportadores, as como la
quiescencia inmune del CNS vasculatura (Prat et al., 2001). La naturaleza nica de tales
microambiente tambin facilita la regulacin ptima y remodelacin de la BBB, un fenmeno crucial
para mantener la homeostasis del SNC en respuesta a estmulos fisiolgicos y patolgicos. Tambin
se conocen interacciones Astrocyte-BBB-ECs para regular la proliferacin vascular, la angiognesis,
la morfologa CE, y, en ltima instancia, influir en el fenotipo de la barrera en condiciones
patolgicas (Abbott et al, 2006;. Prat et al, 2001;. Wolburg y Lippoldt, 2002 ; Wosik et al, 2007)..

Los astrocitos son conocidos por producir factores capaces de modular la funcin de CE durante el
desarrollo y la edad adulta. Durante la embriognesis hay una amplia gama de vas conocidas para
influir El dibujo y la ramificacin de sealizacin. Una de estas vas es la Hedgehog (Hh) cascada de
sealizacin conocida por estar involucrada en la morfognesis embrionaria, la orientacin
neuronal y la angiognesis (Nagase et al., 2008). En la edad adulta, que desempea un papel
importante el apoyo a la proliferacin vascular, la reparacin de tejidos y diversos mecanismos
homeostticos en todo el cuerpo (Byrd y Grabel, 2004;. Kanda et al., 2003; Robbins et al, 2012). la
sealizacin de Hh se inicia por uno de los tres homlogos secretados de la Drosophila Hh:. Hh
Indian (Ihh), Desert Hh (Dhh), y Sonic Hh (Shh), este ltimo siendo ampliamente relacionado con el
SNC eventos morfognicas (Briscoe et al, 1999 ; Marigo et al, 1995).. Recientemente hemos
demostrado que los astrocitos secretan Shh y que BBB-ECs llevan el receptor Hh Patched-1, el
transductor de seal de Smoothened (Smo), as como factores de transcripcin de la familia Gli (Fig.
1).

TEER y permeabilidad experimentos usando cultivos primarios humanos de BBB-ECs mostraron que
la activacin de la ruta de Hh estimul la expresin de protenas de unin y promovi un fenotipo
BBB. En vivo ensayos de permeabilidad mostr que el bloqueo de la ruta de Hh aumento de la
permeabilidad de la barrera y la falta de Shh comprometida significativamente el fenotipo
BBB. Adems, los ratones que carecen especficamente el transductor de seal Smo en ECs (Tie2-
Cre; Smo c / c ) mostraron un aumento significativo de permeabilidad de la BHE que se correlaciona
con una disminucin en la expresin de la protena de unin y perturbados evacuaciones
intestinales (Fig. 2) (Alvarez et al ., 2011b). Estos resultados se correlacionaron con una asociacin
reducida de endfeet astrocito hacia la vasculatura de Tie2-Cre; Smo c / c ratones en las etapas
postnatales tempranas, pero despus de 8 semanas se produjo un incremento moderado en la
expresin de GFAP (Fig. 2), indicando que perturbances en la funcin de barrera inducen un
fenotipo reactiva en astrocitos perivasculares.

FIGURA 2: permeabilidad de la BHE se ve comprometida en ratones que carecen de sealizacin Hh

en el SNC endotelio. De tipo salvaje (WT, paneles de la izquierda) y Tie2-Cre; Smo c / c (paneles de
la derecha) ratones de 8 semanas de edad fueron inyectados intraperiteonally con azul de Evans
(EB, azul). Criosecciones de cerebro de ambos grupos se inmunotieron para GFAP (astrocitos, rojo)
y laminina (Lam, las membranas basales, verde) (paneles superiores), as como para IgG
(indicadores de permeabilidad de la BHE, rojos (paneles inferiores)) y laminina ( n 5 3-5
animales). Rectngulos blancos indican reas que se muestran a la derecha de cada panel. Las
puntas de flecha indican las reas que muestran ruptura de la membrana basal.

Los astrocitos secretan factores angiognicos que promueven el crecimiento vascular tales como el
factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF). VEGF unin a dos receptores de tirosina quinasa,
VEGFR-1 (Flt-1) y VEGFR-2 (KDR / Flk-1), provoca CE activacin y mitosis (Robinson y Stringer, 2001;
Shibuya, 2008) (Fig. 1). Durante el desarrollo, se requiere VEGF para la formacin, la remodelacin
y la supervivencia de los vasos sanguneos de embriones como embriones que carecen de VEGF
desarrollan pocas o ninguna angioblastos y mueren prematuramente (Shalaby et al., 1995).
A medida que los astrocitos estn ausentes en la embriognesis temprana, clulas gliales radiales
parecen ser una fuente probable de VEGF durante la BBB desarrollo (Virgintino et al., 2003). Sin
embargo, ECs se han descrito para promover la activacin de clulas autnoma de la va de
sealizacin de VEGF que durante homeostasis es capaz de sostener un fenotipo vascular (Lee et
al., 2007a). Adems, las neuronas tambin son una fuente de VEGF (Shibuya, 2008), aunque su
papel en el desarrollo o el mantenimiento del fenotipo de la BBB a travs de la produccin de VEGF
queda por determinar.Por lo tanto, el VEGF es un factor conocido sobre todo para promover la
angiognesis y la activacin de EC durante el desarrollo, mientras que en la edad adulta que afecta
el fenotipo y la estabilidad de la BBB de las condiciones inflamatorias (Argaw et al., 2009).

Las angiopoyetinas (Ang-1, 2, 3, y 4) constituyen una familia de factores de crecimiento capaces de

influir en la funcin endotelial mediante la unin a la tirosina quinasa del receptor de Tie-2. clulas
perivasculares, incluyendo astrocitos, a travs de la secrecin de Ang-1participate en el proceso de
la BBB diferenciacin mediante la promocin de la angiognesis, la mejora de la estabilizacin
vascular y la induccin de una disminucin del tiempo y de dependiente de la dosis en la
permeabilidad endotelial a travs de la regulacin positiva de la expresin de la protena de unin
(Pfaff et al ., 2006; Suri et al, 1996) (Fig 1)...

Por el contrario, Ang-2, que es un factor multifuncional autocrina producido por EC se sabe que
funciona como motor de la remodelacin vascular postnatal en el ojo (Gale et al., 2002), para
promover la angiognesis, para participar en las fases tempranas de la BBB descomposicin
(Nourhaghighi et al., 2003) (Fig. 1) y para actuar como factor de proteccin que reduce la
permeabilidad de la barrera en ECs estresado. Curiosamente, cuando factores conocidos por
comprometer la funcin BBB tal como VEGF se coexpresan con Ang-1, la integridad de la barrera se
ha mejorado y propiedades neuroprotectoras son inducidos (Shen et al., 2011).

Src suprimida sustrato de quinasa C (SSeCKS) es un factor de produccin por los astrocitos, que
aumenta gradualmente durante BBB maduracin. SSeCKS regula la angiognesis e influye en el
fenotipo BBB por la disminucin de la expresin de VEGF, mediante la estimulacin de astrocitos-
Ang-1 de expresin, mediante el aumento de la expresin de ZO-1 y claudin-1 y por la disminucin
de la permeabilidad de monocapas cerebrales CE (Lee et al. , 2003) (Fig. 1). Sorprendentemente,
otra evaluacin ni la comprensin del papel de la SSeCKS en el control de la BBB en condiciones
normales o patolgicas ha surgido desde la publicacin original de hace ms de 10 aos. Esto deja
el tema de la funcin exacta de SSeCKS en condiciones de enfermedad, abierto a la discusin.

Los astrocitos tambin producen la enzima convertidora de angiotensina-1 (ACE-1), que convierte la
angiotensina I en angiotensina II y acta sobre los receptores tipo 1 de la angiotensina (AT1)
expresadas por BBB-ECs. La angiotensina II induce endurecimiento de los vasos aumentar la
presin arterial (Lavoie y Sigmund, 2003) y en el CNS, la activacin de AT1 restringe BBB
permeabilidad y esto se correlaciona con la estabilizacin de la funcin de protenas de unin (Fig.
1). AGT ratones deficientes mostraron una expresin aberrante de ocludina a nivel BBB y esto
correlaciona con una BBB con fugas, lo que sugiere que los astrocitos a travs de la angiotensina II
promueven la formacin TJ en BBB-ECs (Wosik et al., 2007).

Un denominador comn de los factores que influyen en la funcin astroglial BBB es su participacin
bien documentada en el desarrollo de las clulas neuronales del SNC. La familia de factores de
crecimiento de fibroblastos (FGFs) se reconoce para soportar mltiples mecanismos durante la
embriognesis CNS y la edad adulta.
Los astrocitos expresan receptores de FGF y FGF-2 se ha descrito como un candidato principal en la
autocrina y / o paracrina regulacin de la diferenciacin de astrocitos (Reuss y col., 2000) (Fig.
1). Los estudios que utilizan FGF-2 2 / 2 y FGF5 2 / 2 sola y FGF-2 2 / 2 / FGF-5 2 / 2 ratones doble
mutante demostr que la diferenciacin astroglial se ve comprometida en ausencia de FGF-2 y
FGP5 y esto da lugar a reduccin de la expresin de las protenas de unin, las fugas de los factores
de suero derivado y, en general, una BBB defectuoso (Reuss y col., 2003).

Estudios ms recientes han reforzado el papel de los FGF en el apoyo a la integridad vascular: la
supresin de la sealizacin de FGF se muestra para promover la disociacin de protenas de unin
en tanto arterial como venosa vasculatura (Fig. 1). Esta inhibicin inducida p120-catenina y VE-
cadherina desacoplamiento que llev a VE-cadherina internalizacin, a la prdida de contacto
clula-clula endotelial y comprometida la integridad de la barrera endotelial (Murakami et al.,
2008). Sin embargo, la funcin exacta de los factores de FGF en el control de la funcin de
astrocitos influir en la fisiologa endotelial queda por establecer. Factor de neurotrpico Glia
derivados (GDNF) es secretado por astrocitos y el receptor alfa de GDNF 1 (GDNFR- un 1) se
expresa preferentemente por BBB-ECs a nivel de la corteza.

BBB-ECs mostr un aumento en TEER y disminucin de la permeabilidad cuando son tratados con
GDNF, lo que sugiere la influencia de este factor neurotrfico en la modulacin de la expresin de
protenas de unin a la BBB (Igarashi et al., 1999) (Fig. 1). Adems de los astrocitos, los pericitos de
la BBB y de la barrera del nervio Blood (BNB) son capaces de secretar GNDF y modular BBB y BNB
fenotipo mediante el aumento de la expresin de claudin-5 y la TEER de estas barreras (Shimizu et
al., 2012 ). Como ocurre con la familia FGF, que an no se ha establecido cmo los astrocitos
inducen la expresin de GDNF durante el desarrollo y la homeostasis, cmo los factores
neurotrficos influyen en las propiedades de barrera distintas y nicas del SNC EC en condiciones
normales y patolgicas y qu diferencias, si las hay, entre la activacin inducida por GDNF
astrocitos y pericitos.

TGF- b es una citoquina multifuncional implicada en el crecimiento celular, la embriognesis, la

diferenciacin, la morfognesis, la cicatrizacin de heridas, la apoptosis y la inmunomodulacin
(Blobe et al., 2000). En el SNC, TGF- b es neuroprotector y in vitro estudios han demostrado su
capacidad para inducir la actividad de P-gp y para reducir permeabilidad de la BHE (Dohgu et al.,
2004). TGF b es secretado por astrocitos y CNS-ECs y TGF- b es conocido por regular a la baja la
medida de la transmigracin de leucocitos a travs del endotelio (Fabry et al., 1995).
Sin embargo, en la ltima dcada el inmunorreguladora y neuroprotector papel de TGF- b ha sido
cuestionada como esta molcula se ha encontrado para apoyar las respuestas astroglial durante la
lesin del SNC y de que se upregulated en numerosos trastornos del sistema nervioso central,
incluyendo la esclerosis mltiple, la enfermedad de Alzheimer, derrame cerebral, tumores y neuro
SIDA (Heinemann et al., 2012). Adems, TGF- b parece ser un factor crucial en el desarrollo de la
actividad epilptica como se demostr para apoyar la transformacin aberrante de astrocitos
durante el perodo de latencia de la epileptognesis (Heinemann et al., 2012).

TGF- b es altamente pleiotrpica muy probablemente debido a las numerosas vas de sealizacin
que resultan de la activacin del receptor TGF, receptores de TGF en diferentes clulas y bajo
cualquier condicin dada. Por ejemplo, TGF- b unin al TGF- b del receptor de tipo II activa el ALK1
restringida por la CE y la expresa en trminos generales ALK-5.
ALK1 va Smad1 / 5 factores de transcripcin estimula la proliferacin y la migracin de EC,
mientras que ALK5 travs de Smad2 / 3 tiene el efecto contrario (Lebrin et al., 2005), demostrando
que la respuesta a TGF- b altamente depende de los mecanismos de sealizacin en juego en
circunstancias dadas dentro de individuo ECs (Fig. 1). Por lo tanto, los papeles pleomrficas
abrumadores de TGF- bactualmente no permiten concluir sobre el papel exacto de los astrocitos
derivados TGF- b en la BBB fisiologa.

El cido retinoico (RA) derivado de clulas gliales radiales juega un papel crucial en el apoyo a la
neurognesis durante la embriognesis (Kornyei et al., 2007). Los resultados recientes sugieren que
la RA es secretado por astrocitos y su receptor, RA-receptor b (RAR b ) se expresa mediante el
desarrollo de la vasculatura. In vitro RAR b dependiente de la activacin induce propiedades de
barrera, incluyendo aumento de la TEER, la expresin de BBB relacionados con molculas tales
como VE-cadherina, P-gp, y ZO-1, mientras que la expresin de la VEGF factor de permeabilidad se
downregulated (Fig. 1) .
In vivo la inhibicin farmacolgica de RAR b afectada la diferenciacin de la vasculatura murino que
result en una BBB perturbado (Mizee et al., 2013). Adems, la AR es conocido para regular la Hh,
Wnt y vas de FGF durante el desarrollo del sistema nervioso central (Halilagic et al, 2007;. Paschaki
et al 2012.) Y como estas vas juegan un papel crucial en la BBB de la induccin y el mantenimiento
es plausible que la AR secretada por las clulas gliales radiales es un regulador maestro de aguas
arriba BBB desarrollo.

Thrombospondins (PAT) son protenas matricellular bien considerado por su papel en el apoyo a la
formacin de sinapsis (Eroglu, 2009). Astrocito-secretada (TSP) -1 y TSP2 tiene propiedades
antiangiognicas, inhibir la proliferacin de CE y se han sugerido para promover la maduracin
vascular (Park et al., 2008).

Conjunto de influencias ECM-2 TSP a travs de la modulacin de los niveles de MMP y los animales
deficientes en TSP-2 muestran deficiencias en la remodelacin de ECM (Kyriakides y MacLauchlan,
2009). La expresin y secrecin de TSP-1 / -2 est regulada por Meteorin (Park et al., 2008), una
protena altamente expresada por endfeet astrocitos durante el desarrollo embrionario y postnatal
y reconocida como un factor neurotrfico potente capaz de afectar a la gla la diferenciacin celular
(Nishino et al., 2004).

La apolipoprotena E (ApoE) es una glicoprotena con threeisoforms, ApoE2, ApoE3 y ApoE4, siendo
este ltimo un factor de riesgo importante para la enfermedad de Alzheimer (Mahley,
1988). partculas de lipoprotenas que contienen ApoE se producen principalmente por los
astrocitos para entregar colesterol y otros lpidos esenciales para neuronas (Herz y Bock 2002). Los
ratones deficientes en ApoE desarrolla espontneamente BBB y BNB ruptura que aumenta con la
edad e igualmente dependa de la ApoE sangre y derivado de tejido (Fullerton et al, 2001;.
HafeziMoghadam et al., 2007).

Utilizando un modelo de co-cultivo triple del primario EC, astrocitos y los pericitos, Nishitsuji et
al.demostr que los astrocitos derivados de ApoE4 regula la PKC g actividad y la fosforilacin de
ocludina que reflejaba ms bajas lecturas de TEER en un ApoE4 2 / 2 modelo de BBB. Del mismo
modo, permeabilidad de la BHE se mejor en ApoE4 2 / 2 ratones (Nishitsuji et al., 2011). Sin
embargo, los datos divergentes proporcionadas por un estudio ms reciente mostr que los
astrocitos-secretada ApoE4 es capaz de interrumpir la BBB integridad mediante la regulacin de la
activacin de la ciclofilina A NF-kB-MMP-9-va en pericitos (Bell et al., 2012) ( Figura 1). Esto indica
claramente la presencia de vas de comunicacin de cruz entre los elementos distintos de la NVU,
en este caso el ECs, los pericitos y los astrocitos.
La mayor parte de la influencia proporcionada por contacto o factores secretados es endotelial
centrado y se ha prestado poca atencin a los efectos de la BBB de factores derivados de la CE con
el fenotipo de los astrocitos y otras clulas en el nicho neurovascular.

En este sentido, in vitro experimentos han demostrado que BBB-ECs puede modular mltiples
aspectos de la fisiologa de astrocitos especialmente a travs de las endotelinas (ETS). ETs son una
familia de pptidos endotheliumderived que sealan a travs de los receptores ET A y ET B , que se
encuentran preferentemente en clulas de msculo liso que median la vasoconstriccin (Adner et
al., 1994).
ET B tambin se expresa por los astrocitos y por medio de in vitro y in vivo experimentos se ha
demostrado que la activacin exgena de la ET B receptor aumenta la produccin de factores
neurotrficos, especialmente aquellos conocido por promover BBB propiedades tales como BDNF,
GDNF, Nervio Factor de Crecimiento (NGF), as como la neurotrofina-3 (NT-3) (Koyama et al, 2003,
2005;. Wall, 2003) (Fig. 1).

Sin embargo, en estos experimentos una correlacin directa entre la produccin de estos factores y
la induccin de propiedades de barrera en BBB-ECs no se determined.In Adems, endotelial ET1 ha
informado para regular la produccin de astrocytic VEGF-A y Ang-1, y en este contexto el aumento
de la produccin de VEGF-a potencia la proliferacin de los astrocitos ETinduced por un mecanismo
autocrino (Koyama et al., 2012) (Fig. 1).

Todos los factores mencionados anteriormente proporcionadas por los astrocitos se ha informado
que un impacto en algunos aspectos de la fisiologa y la biologa de la BBB. Esto pone de relieve la
extrema diversidad de las entradas del SNC necesarios para generar esta barrera fisiolgica y hace
hincapi en la amplia redundancia de las seales moleculares que afectan a las molculas de unin,
la formacin BBB, y la estabilidad.
A pesar de tal redundancia, estas numerosas seales pueden ser integrados en un concepto ms
general utilizando el conocimiento disponible en el campo de la sealizacin de las clulas
(vas). Aunque muy poco de la informacin proporcionada a continuacin (o en la Fig. 3) vienen
especficamente de SNC-EC, una gran parte de estas vas de sealizacin es probable conservada
entre los distintos tipos de clulas. Nuestra revisin de la literatura identific "central" vas y
factores de transcripcin, ya sea con propiedades de barrera de la promocin (Wnt, Hh, Sox-18,
NRF-2, ERG, NKX2-1, y SP3 / YY1) o con efectos alteradores de barrera de sealizacin (NF -jb,
Caracol, FoxO1, PKC, y eNOS (Fig. 3)).

Dentro de las vas de sealizacin que promueven la BBB funcionamiento, Wnt y Hh parecen ser
dominantes y cooperar en la promocin de un fenotipo BBB. la unin a complejos de receptor /
LRP5 / 6 Frizzled ligando Wnt activa b-catenina que conduce a la transcripcin, la expresin y la
orientacin adecuada de las protenas de unin claudin-3 y p120 a la membrana celular (Hong et al,
2010;.. Liebner et al, 2008).
b-catenina es tambin conocido por regular la actividad de caracol, que tiene un efecto negativo en
la estabilidad de p120 / VE-cadherina complejos y en la expresin de molculas TJ ocludina y
claudina-5.Por otra parte, la prdida de la Wnt co-receptor Lrp5 se ha asociado con la regulacin
negativa de claudin-5 expresin (Chen et al., 2011). La va de sealizacin Hh parece conducir la
transcripcin y la expresin de las protenas de unin, sino que tambin amortigua las respuestas
inflamatorias en el SNC ECs. La activacin de Gli-1 por los ligandos Hh se informa para activar Sox-
18 (Alvarez et al., 2011b), un factor de transcripcin conocido para controlar claudin-5 expresin y
funcin de barrera (Fontijn et al., 2008) y la sealizacin de Wnt tambin influencias Sox-18
expresin.

Del mismo modo, la activacin de las vas de Hh y Wnt tambin promover la expresin de NKX2-1 a
travs de mecanismos independientes Gli y a travs de b-catenina (Gilbert-Sirieix et al, 2011;.
Gulacsi y Anderson 2006).
NKX2-1 (tambin conocido como TTF-1) regula transcripcionalmente la expresin ocludina (Runkle
et al., 2012). Adems, bcatenin puede influir en la va de sealizacin Hh mediante la mejora de la
actividad transcripcional de Gli (Maeda et al., 2006). Wnt y Hh activacin tambin inducen la
expresin de NR2F2, un factor de transcripcin conocido para promover la expresin de Ang-1, que
promueve la expresin de la protena de unin y amortigua las respuestas inflamatorias apoyados
por la ruta de NF-kB (Lee et al, 2007b;. Okamura et al. , 2009). Por el contrario, se sabe que NR2F2
regular a la baja la expresin de Ang-2, un factor conocido a afectar negativamente a la protena de
unin
expresin de BBB-EC. En conjunto, estos hallazgos sugieren que Wnt / b -catenina y Gli vas podran
converger o sinergia. Sorprendentemente, las vas de sealizacin adicionales / no parecen factores
-Transcripcin que promueven la expresin o la estabilidad de la protena AJ y TJ de cooperar o se
influyen mutuamente.

FIGURA 3: Vas de sealizacin y factores de transcripcin o de apoyo que afectan al fenotipo

barrera de SNC-EC. Las vas de sealizacin Wnt y Hh, as como los factores de transcripcin NRF-2
y ERG parecen estar jugando un papel dominante en la promocin de propiedades de barrera a
nivel complejo de unin. El NF- jb va de sealizacin y el caracol factor de transcripcin parecen
actuar como reguladores negativos dominantes. Se incluyen factores adicionales que promueven o
que afectan a la expresin de molculas de unin y el fenotipo BBB. Las flechas azules indican la
activacin / estimulacin y lneas rojas denotan regulacin a la baja / bloqueo. Akt (protena quinasa
B), Ang-1-2 (angiopoyetina 1 y 2), SON (elementos de respuesta antioxidante), Cl-3 (claudina-3), Cl-
5 (claudina-5), Ens (xido ntrico sintasa endotelial ), ERG (gen relacionado con ETS-), FoxO1
(Forkhead cuadro de protena O1), Fz (frizzled), Gli (dedo de zinc de la familia del oncogn glioma-
asociado), IKK una y -b (inhibidor de la kappa B quinasa un y b ) , LRP 5 / 6 (lipoprotenas de baja
densidad-protena relacionada con el receptor 5), NF-jb (factor nuclear kappa B), NKX2-1 (NK2
homeobox 1), NQO-1 (NADPH-quinona deshidrogenasa-1), NR2F2 ( subfamilia de receptores
nucleares 2, el grupo F, elemento 2), NRF-2 (factor nuclear (erythroidderived 2) -al igual que 2),
OCC (ocludina), PI3K (Phosphatidylinositide 3-quinasa), PKC (protena quinasa C), Ptch1 (Patched1 ),
ROS (especies reactivas de oxgeno), Shh (sonic Hegdehog), SMO (alisado), Tie2 (receptor de la
tirosina quinasa 2), VE-CAD (VE-cadherina), VEGFR (crecimiento endotelial vascular del receptor del
factor), YY1 (Ying y Yang 1 protena) y NPV1 ( zonula occludens 1).

Por ejemplo, la activacin de la NRF 2-va por el estrs oxidativo activa los elementos de respuesta
antioxidante (ARE) conocido por promover la acumulacin de NADPH-deshidrogenasa de quinona-1
(NQO-1) y el glutatin, que son conocidos para estabilizar ZO-1, ocludina y claudina-5 de expresin
(Fan et al., 2013). translocacin Nrf2 al ncleo se produce en respuesta a la activacin por la
protena quinasa C y las vas de MAP quinasa (McCubrey et al, 2006;.. Nguyen et al, 2009) y de
forma independiente de las vas de sealizacin Hh y Wnt. Adems, NRF-2 protege ECs durante la
lesin por suprimiendo la expresin de genes inflamatorios (Chen et al., 2006). El SP3 factores de
transcripcin y YY1 se han reportado para sostener la transcripcin y la estabilizacin de la
expresin de claudin-5 (SP3) y ocludina (YY1) (Sade et al., 2009), aunque los factores y las seales
que controlan su expresin en el endotelio CNS permanecen ser identificado.

El gen relacionado con ETS (ERG) es un factor de transcripcin expresado constitutivamente por
ECs que controla su permeabilidad y la expresin de las protenas de unin VE-cadherina y claudin-
5 (Birdsey et al, 2008;. Yuan et al, 2012).. Curiosamente, la expresin de ERG est bajo el control de
VE-cadherina y ERG puede actuar como un represor transcripcional de la ruta de NF-KB y otros
genes inflamatorios (Sperone et al., 2011). Por lo tanto, las vas de sealizacin y factores de
transcripcin que apoyan la funcin de barrera tambin tienden a promover respuestas anti-
inflamatorias. Por el contrario, la inflamacin activa el NF- j B va a travs de Akt, PKC (ismeros)
Fyn / Lyn y Rip que tienen un impacto negativo directo sobre la expresin, la transcripcin y la
estabilidad de ocludina, ZO-1 y claudin-5 (Aveleira et al. , 2010;.. Stamatovic et al, 2008), as como
un efecto indirecto a travs de la activacin de Snail (Wu et al, 2009b), que interrumpe
p120 / complejos VECadherin y disminuye la expresin de ocludina y claudina-5 (Ikenouchi et al. ,
2003; Ohkubo y Ozawa 2004).

Adems I JJ - un regula negativamente b -catenina y jj - B asociados con b -catenina para inducir la

proliferacin celular a travs de la ciclina D1, por lo tanto, la reduccin de las interacciones clula-
clula (Albanese et al, 2003;.. Lamberti et al, 2001) . La sealizacin de VEGFR tambin puede
tener un impacto en la funcin de barrera mediante la activacin de las vas de PKC y Enos y por lo
tanto afecta a ocludina y claudina-5 de expresin (Argaw et al., 2009, 2012). Curiosamente, NF- j B,
la activacin se ha informado de inducir la expresin de Shh, que puede promover la funcin de
barrera a travs de Smo y Gli-1 (Kasperczyk et al., 2009). Por ltimo, FoxO1 es un factor de
transcripcin que regula a la baja la expresin claudin-5, sin embargo tal mecanismo est sujeto a
un notable nivel de regulacin transcripcional como citoplasmtica VE-cadherina y b -catenina
puede reprimir la actividad de forma independiente FoxO1 (Jang et al, 2011;. Kamo et al, 2013;..
Taddei et al, 2008). En su conjunto, la informacin disponible sugiere que NF- j B y Caracol podran
ser los reguladores negativos dominantes de la BBB funcionamiento, mientras que las vas de
sealizacin Wnt y Hh, as como NRF-2 y ERG parecen ser promotores dominantes, o al menos los
facilitadores, de una ptima fenotipo BBB (Fig. 3).

Por lo tanto, la visin actual, que se basa en un nmero abrumador de artculos cientficos, es que
los astrocitos son reguladores clave del desarrollo BBB, mantenimiento y regulacin.
La extensin natural de este concepto sera que la comprensin de la matriz de interacciones
astrocito-BBB-ECs puede conducir al desarrollo de nuevas estrategias teraputicas para los
trastornos del sistema nervioso central, especialmente aquellas en las que se ve comprometida la
BBB funcin.
Sin embargo, dadas las mltiples clulas involucradas en el control de la funcin de barrera en el
NVU, se necesitan ms datos para descifrar las funciones distintas (y tal vez especficos) de
astrocitos, pericitos, neuronas y la microglia, as como a una mayor documento las interacciones de
sus maquinarias celulares en el apoyo a la funcin de la BBB.

Astrocitos y BBB respuestas durante inflamatorias

enfermedades del SNC
El microambiente del SNC es muy estrechamente controlados e incluso cualquier perturbances
menores en tales delicado equilibrio inducen cambios fenotpicos rpidos en astrocitos conocidos
como astrogliosis reactiva. Debido a su extraordinaria capacidad de responder rpidamente a las
seales adversas, muchos esfuerzos se han hecho en subestimar cmo astrocitos responden a la
lesin, inflamacin, o cualquier condicin adversa en sus proximidades. Como hay una amplia gama
de cambios que se producen en condiciones fisiopatolgicas, astrogliosis reactivo ha sido definido
como una serie de caractersticas inter-independientes en los que (i) un espectro de morfolgicas y
moleculares cambios se producen en respuesta a una lesin del SNC y de la enfermedad, (ii) se
correlaciona con la naturaleza y gravedad de la lesin, (iii) se regula de una manera especfica del
contexto por eventos de sealizacin particulares que tienen el potencial para modificar tanto la
naturaleza y el grado de estos cambios y (iv) tiene el potencial para inducir o bien ganancia o
prdida de la funcin de los astrocitos y por lo tanto afectar a las clulas neuronales y no
neuronales circundantes (Sofroniew, 2009).

A este respecto, la influencia de distintos microambientes del SNC al fenotipo reactiva visto en
astrocitos queda por establecer, as como la variabilidad en trminos de reactividad en funcin del
tipo de astrocitos estudiado. En trminos generales, astrogliosis se caracteriza por cambios
asociados con la hipertrofia de los cuerpos celulares y los procesos gliales, as como la regulacin
positiva de los filamentos de vimentina y GFAP intermedio y los proteoglicanos de sulfato de
componentes de ECM tenascin-C y condroitina (CSPGs) (Ridet et al., 1997 ; Robel et al, 2011).. De
inters, astrocitos reactivos expresan nestina, CD15, proteoglicanos DSD1, y el cerebro-lpido
protena de unin a lpidos (BLBP), parecido al fenotipo de las clulas gliales radiales y clulas
madre neurales (Robel et al., 2011).

Algunas de estas clulas tambin muestran autorrenovacin a largo plazo mltiple y capacidad en
comparacin con los astrocitos desde un sitio no lesiones (Buffo et al., 2008) y recientemente se ha
demostrado que Shh es necesario y suficiente para inducir tales respuestas de clulas madre en
astrocitos.Dependiendo de la extensin de la lesin o inflamacin, los astrocitos pueden proliferar y
esto se refleja por el alto nmero de clulas que se encuentran en la proximidad de una lesin,
lesin o cicatriz glial (Sofroniew, 2009). Sin embargo, los recientes hallazgos utilizando in vivo de
dos fotones microscopa de escaneo lser mostraron que despus de la lesin no todos los
astrocitos proliferan y migran. Se encontr proliferacin astroglial a ser predominante en la
proximidad de la lesin y selectivamente sobre los astrocitos se oponen a la vasculatura del SNC
(Bardehle et al., 2013).
La estrecha interaccin de los astrocitos con EC mantiene su endfeet polarizada hacia la
vasculatura que sirve como sensores de lesiones (Robel et al., 2011), lo que en parte explica su
proliferacin preferencial en la lesin. La prdida de la sealizacin entre astrocitos y vasculatura
CNS puede desencadenar la mayor parte del programa de sealizacin asociada con astrogliosis
reactiva. En particular, la eliminacin, postnatal de b 1 integrina en los astrocitos es suficiente para
despolarizar la endfeet e inducir cambios masivos que incluyen la hipertrofia, la regulacin positiva
de los filamentos intermedios, alteraciones en la localizacin de los miembros de DAP y el canal de
agua AQP4, as como la secrecin de proteoglicanos de sulfato de condroitina (Robel et al.,
2009). De nuevo, estos cambios directamente correlacionados con perturbances vasculares como
fibringeno, una protena de plasma soluble de entrar en el CNS interrupcin en BBB, modula la
expresin tanto de TGF- b y molculas asociadas con el fenotipo de los astrocitos reactivos
(Schachtrup et al., 2010). Sin embargo, esta va de activacin y el patrn no son nicos para los
astrocitos como fibringeno induce respuestas microgliales rpido hacia la vasculatura (Dvalos et
al., 2012).

Como resultado del fenotipo reactivo, astrocitos influyen en la respuesta fisiopatolgica del sistema
nervioso central a una lesin mediante la produccin de una amplia gama de molculas que
incluyen factores neurotrficos, factores de crecimiento, citocinas, quimiocinas, neurotransmisores,
especies reactivas de oxgeno, y proteasas (Sofroniew, 2009) . Estos factores pueden influir en la
remodelacin del CNS vasculatura, el estado de activacin de la migracin de los leucocitos y en
funcin del contexto en el que pueden tener beneficiosos y / efectos o perjudiciales sobre neuronas
y oligodendrocitos (Allman et al, 1994;. Koyama y Michinaga, 2012). Sin embargo, la mayora de los
estudios que caracterizan a estos factores han llevado a cabo utilizando in vitro metodologas
diseadas para comprender astrogliosis reactiva en el contexto de la lesin y no se han tenido en
cuenta el grado de heterogeneidad de los astrocitos en distintas reas anatmicas del sistema
nervioso central. En la siguiente seccin del papel fisiopatolgico de los astrocitos en el NVU se
discutir en trminos de las respuestas observadas durante neuroinflammatory neuromielitis ptica
(NMO), as como la esclerosis mltiple (EM) y su modelo animal encefalomielitis autoinmune
experimental (EAE).

Neuromielitis ptica, esclerosis mltiple y EAE.

En la mayora de las patologas del SNC el NVU / microniche BBB se ve afectada como resultado de
los procesos de inflamacin, lesin o degeneracin especficos para la patologa. Sin embargo, en
slo unas pocas enfermedades del NVU / BBB est afectado especficamente el proceso patognico
o por los factores determinantes de la enfermedad. NMO y MS se encuentran entre dichas
enfermedades.

En NMO, el astrocito AQP4 canal de agua est dirigido por el sistema inmune, lo que resulta en la
produccin de anticuerpos IgG antiAQP4 (Lennon et al., 2004). La enfermedad afecta directamente
la funcin de la BBB como AQP4 OAPs estn presentes en el endfeet astrocitos que rodea la
vasculatura del SNC. La unin de anticuerpos anti-AQP4 a su resultado objetivo en la activacin de
dao celular citotxica dependiente del complemento que conducen a la prdida de AQP4, GFAP y
el Transporter 2 aminocido excitatorio (EAAT2) (Hinson et al., 2007, 2008). Adems, el dao BBB
est asociada con reas focales de infiltracin de clulas inmunes perivascular y
desmielinizacin. Adems, la deposicin adicional de complejos APQ4-IgG aumenta la infiltracin de
clulas inmunes, en particular granulocitos y eosinfilos que desgranulan en el espacio perivascular
causar dao local que incluye lesiones de astrocitos. Los oligodendrocitos parecan ser afectados
como resultado de los cambios fisiopatolgicos en el NVU y esto conduce a la prdida de mielina y
dao axonal (Ratelade y Verkman, 2012). Sin embargo, el mecanismo (s) exacto que dirige
oligodendrocitos y dao neuronal debido a la orientacin de un antgeno relacionado con astrocitos
no se haban determinado.

En contraste con NMO, los astrocitos no son considerados clsicamente como un objetivo del
sistema inmune en la EM, aunque disrupcin de la BHE y las alteraciones en la fisiologa de los
astrocitos son caractersticas de la patognesis de la EM. La etiologa de la EM sigue siendo difcil
de alcanzar, pero est claro que mltiples factores son el desarrollo de la enfermedad
implicada. Los estudios que muestran una fuerte concordancia entre los dos gemelos dicigticos y
monocigticos demuestran que los factores hereditarios juegan un papel importante (Willer et al.,
2003). Susceptibilidad a la EM est fuertemente asociada con el gen que codifica el complejo
mayor de histocompatibilidad (MHC) de clase II gen DRB1 (Hafler et al., 2007) y los estudios de
asociacin de genoma completo (GWAS) han identificado los alelos de riesgo adicionales que
indican una fuerte implicacin de los sistemas inmune sistema y sugerir una influencia polignica
en la patognesis de la enfermedad (Bush et al., 2010).

Se cree que los factores ambientales tales como la vitamina D y la exposicin al sol que se asocia
con prevalencia MS como la vitamina D promueve un microambiente que suprime la activacin de
las clulas T encefalitognicas, la regulacin negativa de las respuestas autoinmunes en el SNC
(Farias et al, 2013;. Simon et al. , 2012). Varios virus han sido sugeridos como factores
desencadenantes de la esclerosis mltiple con el virus de Epstein-Barr (VEB), que muestra la
asociacin ms fuerte (Compston y Coles, 2008). MS y la mononucleosis distribuyen de manera
similar y se ha demostrado que la MS riesgo aumenta diez veces en los pacientes infectados con
este virus durante la infancia / adolescencia, cuando se compara con las poblaciones de EBV
seronegativos (Ascherio y Munger, 2007). Curiosamente, el riesgo de desarrollar EM aumenta si los
niveles bajos de vitamina D y la exposicin EBV se producen de forma concomitante (Ramagopalan
et al., 2011).

MS se considera una enfermedad mediada por clulas T CD4 en la que T helper (Th), las clulas del
fenotipo Th17 y Th1 juegan un papel fundamental en su patognesis (Kebir et al., 2009). Las clulas
B son tambin esenciales en la EM inmunopatogenia, como los anticuerpos producidos por va
intratecal son una caracterstica fundamental de la enfermedad (es decir, bandas oligoclonales) y
como terapias dirigidas B-clulas proporcionan una fuerte proteccin contra la formacin de la
lesin (Cross y Waubant, 2011). Las clulas presentadoras de antgeno profesionales (APC) tambin
son reconocidos como importantes impulsores del proceso de activacin inmune en el SNC y su
fenotipo es conocido por ser la forma por la NVU (Chastain et al, 2011;. Ifergan et al., 2008). Estas y
otras clulas inmunes necesidad de migrar desde la periferia hacia el sistema nervioso central y,
aunque el mecanismo utilizado por los leucocitos distintos de cruzar la NVU / BBB no se
comprenden bien, es evidente que durante este proceso la funcin de barrera se ve comprometida
(Larochelle et al. , 2011). Tal fenotipo se caracteriza por la BBB de fuga que se asocia con
alteraciones de las protenas de unin, as activacin BBB, que se refiere a la capacidad de ECs,
astrocitos, y posiblemente pericitos para expresar y secretar factores inmunes capaces de influir en
el reclutamiento, las funciones efectoras y la supervivencia de los leucocitos que entran en el CNS
(Alvarez et al., 2011a). Anlisis de los tejidos MS demuestra que las anormalidades en la expresin
de protenas de unin coinciden con astrogliosis perivascular y tales cambios se detectan en etapas
muy tempranas de la formacin de la lesin (Alvarez et al., 2011a). Esto ha sido en parte explorada
por Luo et al. cuando la induccin de EAE activa en ratones que expresan la luciferasa bajo el
control de GFAP. A pesar de mostrar signos clnicos solamente en da 11, los aumentos en la
bioluminiscencia asociadas con la expresin de GFAP se pudieron detectar en el cerebro de estos
animales a los 3 das despus de la induccin, (Luo et al., 2008) lo que sugiere que los astrocitos se
activan en el muy primeras etapas de la EAE y en la ausencia de signos clnicos de la
enfermedad. En este sentido, se ha analizado el estado de activacin de astrocitos en una recada
remisin espontnea modelo de EAE (EAE-SRR) que se asemeja a la esclerosis mltiple. Estos
animales desarrollan sntomas de la EAE en los alrededores de da 60 (Pollinger et al., 2009) y el
anlisis de los ratones presintomtico mostraron que al da 35 astrocitos perivasculares muestran
un fenotipo reactivo como expresin GFAP es mayor que en sus compaeros de camada de tipo
salvaje y en ausencia de infiltracin de clulas inmunes . El nivel de astrogliosis aumenta en da 45
y se asocia con niveles bajos de los macrfagos y la infiltracin de clulas T. Por da 55, la
infiltracin de clulas inmunes aument con el reclutamiento preferencial en manguitos
perivasculares y esta correlacionada con astrogliosis prominente en endfeet y parenquimatosas
astrocitos perivasculares (Fig. 4).

Los primeros perturbaciones de la BBB se asocian con la activacin de EC que mejora el proceso de
la infiltracin de leucocitos y conduce a multifocales infiltrados perivasculares. Estos infiltrados se
caracterizan por la presencia de contribuidores importantes del proceso inflamatorio y
desmielinizantes, incluyendo APCs, clulas citotxicas CD8 T, y Th1 y clulas Th17 T CD4 (Friese y
Fugger, 2009; Ifergan et al, 2008;. Kebir et al. , 2009). Mientras que esencialmente de proteccin
para el SNC, la BBB /NVU tambin puede promover las reacciones inflamatorias mediante la
produccin, la secrecin de, expresar o el transporte de citoquinas proinflamatorias, quimiocinas y
molculas de adhesin (Fig. 5).

Por lo tanto, adems de su funcin neuroprotectora primaria, la BBB tambin se ha demostrado

para promover activamente la neuroinflamacin por orquestar la respuesta inmune durante
CNStargeted agresin autoinmune. De hecho, la BBB-EC puede favorecer la migracin de las
clulas inmunitarias al espacio perivascular SNC mediante la expresin de E-selectina y P-
(Engelhardt y Ransohoff, 2005), aunque su papel exacto en el apoyo al proceso de reclutamiento de
linfocitos en el SNC sigue siendo un asunto de debate. Por otra parte, la BBB-ECs son una fuente
importante de pro-inflamatorias quimiocinas CCL2 / MCP-1, CXCL8 / IL-8 (Biernacki et al, 2001;..
Kebir et al, 2007), CCL5 / RANTES y CXCL10 / IP-10 (Ifergan et al., 2006) (Fig. 5), que se requieren
para los linfocitos y el reclutamiento de monocitos en el SNC (Ransohoff et al., 2003). Infiltracin de
clulas inmunes en el SNC se correlaciona con la produccin de mediadores proinflamatorios tales
como IL-17, IL-22, GM-CSF, IFN- c , y TNF un (Alvarez et al., 2011a). Estas citoquinas han sido
implicados en la modulacin de la funcin EC upregulating la expresin de mediadores
proinflamatorios y que afectan a la expresin de las protenas de unin y de este modo
comprometer la permeabilidad de la BHE (lvarez et al, 2011a;. Huppert et al, 2010;. Kebir et al. ,
2007) (Fig. 5).

Por ltimo y lo ms importante, despus de la activacin con citoquinas proinflamatorias, BBBECs

expresan la molcula de adhesin intercelular (ICAM) -1, ICAM-2, CAM vascular (VCAM) -1, activado
CAM de leucocitos (ALCAM), melanoma CAM (MCAM), y ninjurin- 1 que median, al menos en parte,
el proceso de adhesin y transmigracin de leucocitos y subtipos de leucocitos en el SNC (Cayrol et
al, 2008;. Ifergan et al, 2011;. Larochelle et al, 2012;.. Prat et al, 2000 ; Steiner et al, 2010;. Wong y
Dorovini-Z es, 1992) (figura 5).. efectores adicionales de diapedesis de leucocitos incluyen
plaquetas molcula de adhesin de clulas endoteliales (PECAM) (Williams et al., 1996), JAM-A
(Ostermann et al.2002), CD73 y vascular asociada a la protena-1 (VAP-1) (Jalkanen y Salmi , 2008)
(Fig. 5), pero su papel en el reclutamiento de clulas inmunes a la CNS no est claro. Por lo tanto,
aunque la BBB protege contra la inflamacin dirigida al SNC al restringir el acceso de clulas
inmunes en el cerebro, sino que tambin puede regular la respuesta inflamatoria local mediante la
expresin de molculas proinflamatorias que promueven el reclutamiento de clulas inmunes
perifricos en el SNC.

FIGURA 4: expresin de GFAP en recada espontnea asintomtica remitente ratones con EAE. Los
astrocitos se marcaron con GFAP (rojo) y las imgenes fueron adquiridas mediante microscopa
confocal y con la misma configuracin. Se muestran imgenes representativas de GFAP en la
sustancia blanca del cerebelo de ratones SRR-EAE asintomticos en el da (d) 35, D45, D55 y. Los
asteriscos indican los vasos sanguneos y rectngulos blancos indican las zonas de gran aumento
que se muestran a la derecha de cada panel. Tincin nuclear en azul. Barra de escala: 50 l m.

Tras la migracin a travs de ECs, leucocitos endotelial cruzan la BM y posteriormente el

parnquima BM para conseguir el acceso en el SNC (Sixt et al., 2001) (Fig. 5). La composicin de la
BM endotelial puede regular el grado de infiltracin perivascular como se detectan grandes
cantidades de leucocitos en los vasos que expresan la laminina 411 y bajos niveles de 511,
mientras que en ausencia de 411, la laminina 511 se expresa y se asocia con la infiltracin de
clulas T baja ubicua y la enfermedad ms leve (Wu et al., 2009a). En la EAE y MS, infiltrados de
clulas inmunes estn en gran parte contenida en el espacio perivascular y el proceso de migracin
de leucocitos a travs del parnquima BM y endfeet astrocitos parece estar ms estrechamente
controlada que la diapedesis a travs de los EC (Engelhardt y Sorokin, 2009). En la EAE,
CD4 1 infiltracin de clulas T a travs de la parnquima BM no es laminina dependiente, sino ms
bien requiere focal MMP-2 y MMP-9 para escindir selectivamente distroglicano, afectar a la
estabilidad y la integridad BM (Agrawal et al., 2006) (Fig. 5).
Curiosamente, parnquima componentes BM y otros receptores de unin a la ECM en la endfeet
astrocitos no se vern afectados, lo que indica la existencia de mecanismos de proteccin
especficos y especializados bajo el control de los astrocitos y posiblemente otras clulas dentro del
NVU (Engelhardt y Sorokin, 2009). Por lo tanto, se necesita una mayor comprensin en cuanto a la
implicacin de los astrocitos en el apoyo o la inhibicin de la activacin y la migracin de las clulas
inmunes, as como la reparacin de la afectada BBB / NVU durante MS / EAE y otros trastornos del
SNC.

Los astrocitos se han visto tradicionalmente como promotores de inflamacin del SNC en la EM y
poco se sabe acerca de su papel antiinflamatorio. Recientemente, tanto en el grupo Khoury en
Boston (Wang et al., 2008) y nuestro grupo en Montreal (Alvarez et al., 2011b) han demostrado que
los astrocitos perivasculares reactivos que se encuentran en las lesiones de EM hasta de regular
Shh (Fig. 5).Sorprendentemente, Shh se encontr para promover la quiescencia inmune del humano
BBB-ECs por la secrecin de abajo de la regulacin de las quimiocinas proinflamatorias CCL2, la
expresin de la adhesin celular molculas ICAM-1 y VCAM-1 y la migracin de clulas inmunes, un
fenmeno que se dysregulated durante neuroinflamacin (Fig. 5).
Adems, Shh se encontr que un impacto en la produccin de citoquinas de los linfocitos
infiltrantes locales Th1, Th2 y Th17 (Fig. 5). Finalmente, el bloqueo de la ruta de Hh durante el curso
de la EAE, aumento de la morbilidad de la enfermedad y este resultado perjudicial se asoci con
una respuesta neuroinflammatory exacerbado, lo que sugiere que se necesita una va de Hh activo
para mitigar respuestas auto-inflamatoria en el SNC. Por lo tanto, estos datos indican que la
activacin de Hh a nivel de la NVU proporciona efectos de barrera de promocin y un equilibrio
antiinflamatorio endgeno al ataque inmune dirigida al SNC (Alvarez et al., 2011b).

Figura 5: BBB cambios durante MS / EAE. Durante la neuroinflamacin, los primeros perturbaciones
de BBB estn asociados con la activacin de EC que se caracteriza por el aumento de expresin de
E- y P-selectinas, molculas de adhesin celular (CAMs), incluyendo ALCAM, ICAM-1, ICAM-2, VCAM-
1, MCAM, Ninjurin- 1, VAP-1 y CD73 [ 1 ], quimiocinas (CCL-CXCLs) [ 2 ] y receptores de citoquinas,
tales como IFNR, TNFR, IL-17R, IL-22R, y GM-CSFR [ 3 ]. Tal activacin compromete el fenotipo BBB
por afectar a las protenas de unin [ 4 ] y mejora la expresin de factores adicionales que apoyan
la infiltracin de T helper (Th) 1, Th17, y las clulas CD8 T, as como clulas presentadoras de
antgeno (APCs) [ 5 ] que acumular en el espacio perivascular en un patrn multifocal. Para obtener
acceso en el SNC, los leucocitos infiltrantes secretan metaloproteinasas de la matriz (MMPs) que se
dirigen a componentes de la membrana basal astroglial y distroglicano (DG) en el endfeet astrocyte
[ 6 ], durante este proceso la polaridad de la AQP4 canal de agua es perturbado lder a edema
[ 7 ]. La despolarizacin endfeet activa el programa glitica reactivo que resulta en aumento de la
expresin del filamento intermedio GFAP [ 8 ]. Los astrocitos tambin aumentan la expresin de Shh
[ 9 ] y EC regular al alza los receptores Hh Patched 1 (Ptch1) y Smoothened (SMO) [ 10 ] para
reparar la BBB y regular a la baja la activacin CE y la migracin de leucocitos. Shh tambin modula
el fenotipo de las clulas Th patgenos mediante la regulacin negativa de su expresin de
citocinas inflamatorias y CAMs [ 11 ]. En el medio del parnquima, microglia secretan IL-1 b y
activar la produccin de VEGF en astrocitos [ 12 ], que induce la produccin endotelial ntrico
sintasa oxidasa (eNOS) y promueve el dao de protenas de unin [ 13 ]. Por ltimo, el 50% de los
pacientes con EM tienen autoanticuerpos contra KIR4.1 que fija el complemento e inducen el
programa gliosis reactiva [ 14 ].

Por el contrario, los astrocitos reactivos pueden ser la fuente de factores que afectarn
negativamente a la funcin de barrera en el NVU. En MS y EAE, VEGF-A se expresa por los
astrocitos reactivos y in vitro /in vivo estudios demuestran su capacidad para inducir la BBB ruptura
mediante la interrupcin de la expresin claudin-5 y ocludina y por lo tanto promover la infiltracin
de clulas inmunes en el SNC (Argaw et al., 2009). Estudios adicionales proponen que la IL-
1 b produccin de microglia induce la regulacin positiva de VEGF-A (Fig. 5). VEGF-A se libera de los
astrocitos y la unin a su receptor VEGFR2 en BBB-EC activa regulacin a la baja de la eNOS
dependiente de las protenas de unin claudin-5 y ocludina que conduce a la BBB desglose (Argaw
et al., 2012) (Fig. 5) . Los autores tambin examinaron el papel del factor inducible por hipoxia (HIF)
-1 a , una molcula que induce la expresin de VEGF y se regula positivamente en astrocitos
reactivos en vitro y en las lesiones de EM (Argaw et al., 2006). Sin embargo, los ratones que
carecen especficamente HIF-1 una en astrocitos muestra poco efecto sobre VEGF-A expresin o
disrupcin de la BHE, lo que indica que los mecanismos de regulacin de VEGF-A de produccin por
los astrocitos en condiciones agudas como EAE diferir a los observados en la EM.
Mientras que los astrocitos reactivos pueden producir la BBB promotoras (es decir, Hh) o la BBB de
alteracin (es decir, factores VEGF), tambin pueden suelto o regular a la baja factores que tienen
la capacidad de promover la funcin de barrera. En este sentido, los astrocitos producen AGT (que
se escinde en angiotensina II) y el anlisis de los tejidos EM mostr que la expresin de AGT en
astrocitos y ocludina en ECs se disminuy en las lesiones de EM en comparacin con la materia
blanca que aparece normal. Este patrn se correlaciona con la expresin de AGT downregulated
detectado en astrocitos estimulados in vitro con IFN- c y TNF- a . Curiosamente, los ratones (EAE-
no) AGT-deficientes no inmunizados han puesto en peligro la BBB funcin de lo que se correlaciona
con una disminucin e interrumpi expresin de ocludina.
Por lo tanto mediadores inflamatorios locales presentes en manguitos perivasculares tambin
pueden tener un impacto negativo en la capacidad de los astrocitos reactivos para promover la
funcin BBB, por abajo de la regulacin de su produccin de factores BBBpromoting (Wosik et al.,
2007).
Factores inmunes no citocinas tambin pueden tener una influencia negativa directa sobre las
interacciones astrocyte- CE. El estudio de suero derivado de pacientes con EM llev Srivastava et
al. para encontrar las IgG especficas anti-KIR4.1 en aproximadamente 50% de los pacientes
(Srivastava et al., 2012). Estos IgG se demostraron que se unen a endfeet astrocitos y pueden
activar el sistema del complemento (Fig. 5). In vivo validacin del papel patognico de los
anticuerpos antiKIR4.1 fue proporcionada por la inyeccin de IgG anti-KIR4.1 en ratones; esto
condujo a la prdida de expresin KIR4.1, la activacin de la cascada del complemento y las
alteraciones en la expresin de GFAP en astrocitos. Por lo tanto, el estudio sugiere que los
autoanticuerpos presentes en el suero de una proporcin todava-ser confirmado a de los pacientes
con EM humanos se dirigen contra KIR4.1.
Esta citotoxicidad mediada por clulas autoinmunes y dependiente de anticuerpo interfiere con el
local de K 1 buffering en el NVU y podra ser la causa de inicio de la lesin o el dao tisular. Sern
necesarios estudios adicionales para determinar si la autoinmunidad KIR4.1 es especfico de la EM,
a un subtipo de la enfermedad o si la generacin de anticuerpos anti-KIR4.1 es el resultado (es
decir, es secundaria) de la respuesta inmune se produce en el nicho neurovascular .
Sin embargo, las divergencias importantes en los anti-KIR4.1 y anti-AQP4 respuestas son muy
informativos de la biologa de los astrocitos y la NVU. Curiosamente, KIR4.1 y AQP4 son co-
localizados en endfeet astrocitos y dos molculas asociadas tanto con la BBB / NVU fisiologa y
patologa.
Los anticuerpos anti-KIR4.1 parecen estar asociados con MS, mientras que los anticuerpos anti-
AQP4 estn claramente asociados con NMO.

Sin embargo, la prdida de expresin polarizada de AQP4 se observa en los vasos del sistema
nervioso central que exhiben inflamacin perivascular as como la interrupcin distroglicano y estos
cambios patolgicos contribuyen al desarrollo edema (Fukuda y Badaut, 2012;. Wolburg et al, 2009)
(Fig. 5).Estas dos enfermedades inflamatorias tienen distintos cursos clnicos, la respuesta al
tratamiento, y las caractersticas patolgicas. Por lo tanto, la orientacin diferentes determinantes
en astrocitos endfeet puede conducir a enfermedades patolgicas y clnicas distintas, incluso si
estos antgenos se expresan por las mismas clulas exactas. Estas discrepancias biolgicos,
patolgicos y clnicos importantes permanecen sin explicacin.

En conclusin, la evidencia acumulada reportado en los ltimos cien aos apuntan a la influencia
crtica de astrocitos perivasculares en la integridad anatmica y funcional de la BBB. Identificacin
de las vas moleculares que intervienen en la comunicacin entre astrocitos y la BBB-EC es, sin
embargo avanza lentamente. Esto es en parte debido a importantes diferencias biolgicas entre
especies (artiodactyla vs . Rodentia vs . Primates humanos y no humanos), las diferencias entre
la in vitro y in vivomodelos utilizados por diferentes grupos, as como la in vivo relevancia de
algunos de vitro modelos, los diferentes niveles de redundancia en la funcin de las vas
moleculares, las diferentes poblaciones de astrocitos estudiados, la ausencia de un nico, nico o
especfico fenotpica / determinante molecular de BBB-ECs y la inmensa complejidad de las nuevas
herramientas genticas utilizado para golpear -abajo o golpear en molculas especficas en las
poblaciones de clulas distintas. Para identificar el conjunto de factores que intervienen en la
comunicacin astrocito-BBB-ECs en el cerebro humano, sern necesarios esfuerzos adicionales de
investigacin y nuevas tecnologas.
Reconocimiento
patrocinador de la donacin: MS Society of Canada (MSSC); Grant patrocinador: CIHR; Grant
nmeros: 89885 MOP y MOP14828; Patrocinadores de la donacin: MSSC (a AIJ), Iniciativa para la
Formacin Estratgica CIHR en el Programa de Investigacin en Salud Formacin neuroinflamacin
(a los conocimientos tradicionales), y Fonds de la recherche en Sant correo du Qu EBEC (FRSQ)
(AP).

Los autores agradecen a Casper Briels til para los debates y Alejandro Alvarez Espitia por su
colaboracin durante la preparacin de las cifras para el manuscrito.
referencias