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17. ERM. CONSIDERACIONES TCNICAS (R: 03-2) 17.

17
ESPECTROSCOPIA POR RESONANCIA
MAGNTICA NUCLEAR:
CONSIDERACIONES BSICAS Y
TCNICAS

J. Alonso
J. Gili

La espectroscopia por resonancia magntica (ERM) se inicia en los numerosos equipos de


investigacin que tras el descubrimiento del fenmeno de la RM estudiaron las variaciones de la
frecuencia de resonancia en funcin del tipo de ncleo (hidrgeno-1, fsforo-31, carbono-13, sodio-
23, etc.) y, para un mismo ncleo, en funcin de la molcula en que estaba integrado
(desplazamiento qumico o chemical shift). Rpidamente los qumicos detectaron la gran
potencialidad de esta nueva tcnica y la incorporaron como una metodologa rutinaria para el anlisis
estructural de los compuestos qumicos y para el seguimiento de las transformaciones que ocurren
durante los procesos de sntesis de compuestos.

Con los avances tecnolgicos de los aos siguientes se desarrollaron imanes ms potentes y
con mayor uniformidad de campo, lo que permiti estudiar molculas de mayor peso molecular. La
resonancia magntica nuclear se extendi al campo de la bioqumica como tcnica de anlisis
estructural de macromolculas y las interacciones entre molculas. Pero, adems tambin es posible
el estudio de procesos metablicos mediante el anlisis de extractos o de rganos perfundidos y, en
la actualidad, estos estudios se pueden realizar a partir de rganos o tejidos "in vivo".

El gran auge de la IRM releg a un segundo trmino los estudios espectroscpicos. En la


actualidad, la posibilidad de obtener espectros con suficiente resolucin y sensibilidad, mediante
imanes de 1.5 Tesla (T) utilizados en las exploraciones por IRM, junto con la posibilidad que ofrece la
ERM de estudiar de forma directa algunos procesos metablicos "in vivo" sin interferir en
ellos, hace de esta metodologa una herramienta de trabajo en alza que trata de definir sus
verdaderas posibilidades en el campo clnico. El objetivo de este captulo es realizar una introduccin
a como es posible detectar metabolitos presentes en las clulas, a las secuencias de pulsos ms
comunes implementadas en equipos clnicos y al anlisis de los datos espectroscpicos.
17.2 17. ERM. CONSIDERACIONES TCNICAS (R: 03-2)

17.1. BIOFSICA

Las bases fsicas de la espectroscopia y de la imagen por resonancia magntica son las
mismas y, en consecuencia, los conceptos introducidos en los captulos anteriores son vlidos. La
principal diferencia entre las dos tcnicas es que la frecuencia en una exploracin de imagen
codifica el espacio mientras que en un estudio de espectroscopia la frecuencia codifica al
grupo qumico que origina la seal.

17.1.1. FRECUENCIA DE RESONANCIA

Tanto la IRM como la ERM se basan en la propiedad que presentan ciertos ncleos atmicos
de absorber selectivamente energa de radiofrecuencia cuando se someten a un campo magntico
(fenmeno de RESONANCIA). Este exceso energtico es liberado por los ncleos mediante un
proceso de RELAJACIN nuclear. La frecuencia de resonancia en este proceso, (fp : frecuencia de
precesin), es directamente proporcional al valor del campo magntico efectivo, B, que percibe el
ncleo (Ley de Larmor):
(ver: 3.4)
fp = . B / 2

donde es la constante giromagntica que depende del ncleo considerado.

El campo magntico efectivo (B) es la suma vectorial del campo magntico externo producido
por el imn (B0) ms el campo magntico sobreaadido que se crea mediante la activacin de
gradientes (BGRA) y el campo magntico inducido por cargas en movimiento que forman parte de las
diferentes molculas que hay en las clulas y que, genricamente, llamamos el entorno bioqumico
en que se encuentra el ncleo (BBIOQ).

B = B0 + BGRA + BBIOQ

Si la suma de los campos magnticos B0 y BGRA se denomina campo magntico externo,


BEXT, entonces el campo magntico efectivo, B, se puede escribir como:

B = BEXT + BBIOQ

El BBIOQ, debido al campo magntico inducido bsicamente por el movimiento de los


electrones alrededor de los ncleos, siempre se opone al campo magntico externo por lo que
ejerce un efecto de pantalla de manera que el ncleo percibe un campo magntico inferior al
campo magntico externo. BBIOQ es proporcional al campo magntico externo a travs de una
constante que recibe el nombre de constante de apantallamiento (). Por tanto, se puede expresar
BBIOQ como funcin del campo magntico externo a travs de la correspondiente y oponindose a
BEXT por lo que:

BBIOQ = - .BEXT
En consecuencia:

B = BEXT (1 - )

ahora la frecuencia de resonancia, fp, se puede definir como:

fp = . BEXT (1 - ) / 2
17. ERM. CONSIDERACIONES TCNICAS (R: 03-2) 17.3

De la expresin anterior se deduce que la frecuencia de resonancia de un ncleo depende de


la constante . La constante de apantallamiento no es tanto una caracterstica del ncleo como
del entorno electrnico del ncleo que esta relacionado con la estructura molecular de la que
forma parte el ncleo considerado. Esta propiedad es la que, en definitiva, proporciona a la
espectroscopia la posibilidad de detectar los compuestos que hay en una determinada muestra.

Como ejemplo, imaginemos un elemento de volumen lleno de alcohol etlico:

CH3-CH2-OH

Cuando se analiza la molcula desde un punto de vista qumico los ncleos de H forman
parte de tres grupos diferentes: el grupo metil (-CH3), el metileno (-CH2-) y el hidroxilo (-OH). De
manera intuitiva se puede apreciar que el entorno electrnico de estos grupos es diferente ya que el
nmero de electrones de los tomos de carbono y oxgeno son diferentes. As, mientras que un
tomo de hidrgeno est unido a un oxgeno, los otros estn a un carbono; adems el grupo metil
est prximo al grupo metileno mientras que este ltimo est rodeado por un grupo hidroxilo y otro
metilo. Una vez colocado bajo un campo magntico externo de 1,5 o 1 Tesla (Fig. 17.1), y despus de
enviar un pulso de radiofrecuencia de un ancho de banda capaz de producir la excitacin de todos los
ncleos de hidrgeno, la seal de relajacin est compuesta por tres tipos de emisin con frecuencias
de resonancia diferentes, ya que el hidrgeno del grupo OH emite a una frecuencia distinta de los
hidrgenos del grupo CH2, y a su vez distinta de los del grupo CH3. Si esta emisin la recogemos en
una antena y la representamos sobre un eje de frecuencias obtendremos el espectro del alcohol
etlico donde se aparecen tres picos o resonancias. La ms pequea situada a la izquierda
corresponde a la relajacin de los ncleos de hidrgeno del grupo OH. La resonancia situada en
medio corresponde a la respuesta de los ncleos de hidrgeno del grupo CH2 y tiene una rea doble
de la anterior ya que por cada H del grupo -OH hay 2 H del grupo -CH2. La resonancia colocada ms
a la derecha tiene una rea tres veces superior a la primera y corresponde a la respuesta de los tres
hidrgenos del grupo CH3. Para un mismo valor del campo magntico la posicin de la resonancia en
el espectro identifica al radical, sin embargo no es un parmetro muy til ya que un mismo compuesto
en diferentes campos magnticos presenta diferentes frecuencias de resonancia.

1,5 T - CH
3 1,0 T - CH
3
- CH - - CH -
2 2
- OH - OH

MHz MHz

63,760115 63,759844 42,550077 42,549896

63,76 42,55
Fig 17.1
Simplificacin del espectro del alcohol etlico obtenido a 1,5 T y a 1,0 T.
Las frecuencias de resonancia del ncleo del hidrgeno en los tres radicales a 1,5 Tesla son:
-OH = 63,760115 MHz, -CH2= 63,76 MHz, -CH3= 63,759844 MHz, mientras que a 1,0 Tesla son,
respectivamente, 42,550077, 42,55 y 42,549896 MHz.
Como se puede observar la frecuencia de resonancia de un radical vara en funcin del campo
magntico al que esta sometido lo que no es un parmetro muy til para el anlisis del espectro.
17.4 17. ERM. CONSIDERACIONES TCNICAS (R: 03-2)

Existen ms de 100 ncleos atmicos que presentan el fenmeno de resonancia magntica


nuclear, sin embargo, el nmero de ellos que presentan o pueden presentar un mayor inters clnico
es ms reducido y junto a algunas de sus propiedades se presentan en la Tabla 17.1. La informacin
que se obtiene de cada uno de ellos es diferente y, por ello, cuando se habla de un estudio por
espectroscopia o de un espectro de RM es recomendable aadir el ncleo que se ha observado. As
se habla de espectroscopia de protn (o del hidrgeno-1) y el espectro del alcohol etlico es un
espectro de protn. La tabla muestra como la frecuencia de resonancia de un ncleo vara en funcin
del campo magntico aplicado, se utilizan ncleos cuya abundancia natural vara desde el 100%
hasta otros que se presentan en la naturaleza en un porcentaje inferior al 0,1. Los ncleos
considerados tienen una sensibilidad inferior a la del hidrgeno-1 lo que, desde un punto de vista
tcnico, complica la deteccin de sus seales. En la prctica, el ncleo de hidrgeno-1 (protn) es el
ms utilizado en el campo de las neurociencias.

TABLA 17.1
PROPIEDADES DE LOS NCLEOS DE MAYOR INTERS EN ERM "IN VIVO"

Ncleo Spin Frecuencia de resonancia (MHz) Abundancia Sensibilidad


1,5 T 2,0 T 4,7 T Natural (%) absoluta
1
H 1/2 63,83 85,10 200,00 99,98 1,00000
13
C 1/2 16,05 21,40 50,29 1,11 0,00018
14
N 1 4,61 6,14 14,45 99,63 0,00100
15
N 1/2 6,47 8,62 20,27 0,37 0,00390
17
O 5/2 8,65 11,53 27,11 0,04 0,00001
19
F 1/2 60,05 80,07 188,15 100,00 0,83000
23
Na 3/2 16,88 22,51 52,90 100,00 0,09300
31
P 1/2 25,84 34,45 80,96 100,00 0,06600

17.1.2. DESPLAZAMIENTO QUMICO

Segn se desprende de la Ley de Larmor, la escala de valores en el eje de las frecuencias


depende del valor del campo magntico. Esto es un inconveniente cuando hay que comparar
espectros obtenidos con diferentes equipos ya que la frecuencia de resonancia de un mismo radical
depende del campo magntico externo. Para eliminar esta dependencia y lograr que los
espectros registrados con imanes de diferente campo magntico sean comparables, se
definen las posiciones de las distintas resonancias mediante una escala relativa de valores
respecto a un valor de referencia.

As, se define la posicin de la frecuencia de resonancia del radical A respecto al radical B


por el cociente:

(fA - fB)/ fB

cuando se sustituye la frecuencia de resonancia del radical A y B por la expresin deducida en el


apartado anterior fp = . BEXT (1 - ) / 2

(fA - fB)/ fB = [Bo(1-A)/2 - Bo(1-B)/2 ] / [Bo(1-B)/2]

que se puede escribir como:

(fA - fB)/ fB = (Bo /2)[(1-A) - (1-B)] / (Bo /2)(1-B)

la expresin (Bo/2) se puede eliminar del numerador y denominador

(fA - fB)/ fB = [(1-A) - (1-B)] / (1-B)


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y despus de simplificar queda:

(fA - fB)/ fB = (B - A) / (1- B)

En definitiva el cociente relativo solo depende de una caracterstica del radical como es la
constante de apantallamiento independiente del campo magntico. La posicin definida mediante la
expresin (fA - fB)/ fB se conoce como desplazamiento qumico y se identifica por la letra griega
. Este valor no tiene dimensin y es muy pequeo, por lo que para trabajar con un nmero
manejable, se indica multiplicado por 106 y se expresa en partes por milln o ppm.

En conclusin los ncleos presentes en diferentes radicales qumicos se pueden expresar


respecto a un valor de referencia correspondiente a un determinado radical (fB = fr). Si se refieren las
frecuencias de resonancia del ncleo en los diversos radicales respecto al valor de referencia,
a cada radical le corresponde un valor que es independiente del campo magntico al cual se ha
realizado el estudio. En consecuencia, el ncleo en un radical A se identifica mediante su
desplazamiento qumico (A) definido por:

A en ppm= 106(fA fr)/ fr

donde fr es la frecuencia de referencia para el ncleo estudiado.

El desplazamiento qumico () identifica el radical en el que se encuentra el ncleo


independientemente del valor del campo magntico. La escala de desplazamiento qumico permite
establecer una relacin entre posicin y radical que permite la identificacin de los diferentes
compuestos presentes en la muestra analizada independientemente del campo magntico en
que se ha obtenido el espectro. La Fig 17.2 muestra el mismo espectro del alcohol etlico que en la
Fig 17.1 pero respecto a la escala de desplazamiento qumico y como puede observarse la posicin
es independiente del campo magntico.

1,5 T Fig 17.2.


Simplificacin del espectro del alcohol
etlico utilizando como valor de referencia la
1,0 T - CH
3 frecuencia de resonancia del H del grupo CH2
(0 ppm). Al -OH le corresponden +1,80 ppm y la
- CH - resonancia que se observa a 2,45 ppm
2 identifica al H del grupo -CH3
- OH independientemente del campo magntico.

(ppm)
1,80 -2,45

0,00
17.6 17. ERM. CONSIDERACIONES TCNICAS (R: 03-2)

En la prctica para cada ncleo existen una serie de compuestos de referencia a partir de los
cuales se tabula la posicin de los dems. As en espectroscopia de protn las referencias ms
comunes son el tetrametilsilano (TMS) o el 3-trimetilsilil[2,2,3,3-2H]propionato sdico (TSP) que no se
encuentran en las clulas de los organismos vivos. A la posicin de la resonancia de estos
compuestos se le asigna el valor de 0 ppm y se ha observado que respecto a ellas, el grupo metil de
la creatina/fosfocreatina aparece a 3,02 ppm y el del grupo N-acetilaspartato a 2,02 ppm. Estos dos
ltimos son las referencias ms habituales en estudios in vivo.

17.2. SECUENCIAS DE PULSOS

Tal como se ha visto en IRM, para obtener un espectro tambin se utilizan secuencias de
pulsos, que no son ms que una serie de pulsos de radiofrecuencia y de gradientes de campo
magntico que se activan a tiempos determinados para obtener la seal de resonancia. A lo largo de
estos ltimos aos se han diseado un gran nmero de secuencias de pulsos que han aparecido
publicadas en la literatura, pero slo un reducido nmero de ellas ha sido implementado en los
equipos de resonancia de uso clnico. A continuacin se comentan brevemente algunas de las
caractersticas de las secuencias de pulsos que se aplican a la adquisicin de espectros de protn
(hidrgeno-1).

a)Secuencia spin-echo (SE, PRESS, PRIME)

Es una secuencia constituida por tres pulsos de excitacin con seleccin de plano, el primero
de 90 y los otros dos de 180 (Figura 17.3). El primer pulso excita la magnetizacin de un plano
mientras que el segundo se aplica en un plano perpendicular al anterior. Entonces solo la
magnetizacin de la columna o fila que ha sido excitada por los dos pulsos es reenfocada. Finalmente
se aplica el tercer pulso en un plano perpendicular a las dos anteriores (Figura 17.4). El grosor de
estos planos viene determinado por las dimensiones del volumen del cual se desea obtener el
espectro. El resultado final es una seal de eco que proviene solamente del volumen (VOI, volumen
de inters) que ha sido excitado por los tres pulsos. Gradientes adicionales alrededor de los pulsos de
180 ayudan a destruir la magnetizacin de regiones externas al VOI. Esta secuencia de pulsos esta
precedida por un nmero variable, entre 1 y 3, de pulsos selectivos a la frecuencia de resonancia del
agua destinados a suprimir la resonancia del agua.

Fig 17.3
Diagrama de la
secuencia de pulsos SE. La
ordenacin y las dems
caractersticas de los
gradientes dependen del
equipo en el que estn
implementadas y del tiempo de
eco que se utiliza.
17. ERM. CONSIDERACIONES TCNICAS (R: 03-2) 17.7

Fig 17.4
La localizacin espacial se obtiene a partir de la excitacin secuencial de tres planos ortogonales de tal
manera que la regin comn a los tres planos corresponde al volumen de inters del cual se desea obtener el
espectro.

b)Secuencia de eco estimulado (STEAM)

Esta es una secuencia muy parecida a la anterior, la principal diferencia radica en que los tres
pulsos de excitacin con seleccin de plano son siempre de 90 (Figura 17.5). Para obtener la
localizacin se utiliza la misma estrategia que ya se ha descrito (Figura 17.4). La secuencia de pulsos
procede de la siguiente manera: el primer pulso es el mismo que en la secuencia SE. Despus del
primer pulso se deja transcurrir un tiempo TE/2, antes de enviar el segundo pulso de excitacin. Entre
el segundo y el tercer pulso se deja un intervalo que oscila entre 13 y 30 ms que se denomina tiempo
de mezcla (TM, "mixing time"). A continuacin es enviado el tercer pulso y despus de un intervalo de
tiempo TE/2, se registra la seal de eco estimulado. Durante el intervalo TM la magnetizacin de
inters esta orientada en el eje Z y no esta afectada por el tiempo de eco. Sin embargo, es importante
que TM sea muy corto comparado con los valores de T1 de los compuestos de inters para evitar una
importante prdida de seal. En diferentes momentos de la secuencia de pulsos se activan gradientes
para producir el defasaje de la magnetizacin no deseada. Esta secuencia de pulsos tambin esta
precedida por un nmero variable, entre 1 y 3, de pulsos selectivos a la frecuencia de resonancia del
agua destinados a suprimir la resonancia del agua.

Fig 17.5
Diagrama de la secuencia de pulsos
STEAM. La ordenacin y dems
caractersticas de los gradientes
dependen del equipo en el que la
secuencia esta implementada y del tiempo
de eco utilizado.

c)Secuencias de imagen de desplazamiento qumico o de imagen espectroscpica con


excitacin selectiva de un volumen ("chemical shift imaging" o "spectroscopic imaging", SE-
CSI, STEAM-CSI, CSI-hbridas)
17.8 17. ERM. CONSIDERACIONES TCNICAS (R: 03-2)

Es una metodologa que permite la adquisicin de mltiples espectros localizados de manera


simultnea. La aplicacin de las secuencias CSI al estudio del cerebro por espectroscopia de protn
presenta, entre otros, el inconveniente que la seal de la grasa subcutnea puede contaminar
espectros de volmenes prximos. Para evitar este problema se ide la combinacin de la tecnologa
CSI con un sistema de preseleccin de un volumen de inters grande, del cual se puede excluir la
grasa subcutnea, mediante la secuencia SE o STEAM y, opcionalmente, se pueden aadir mltiples
bandas de saturacin. La tcnica de seleccin del volumen se combina con la aplicacin de 1, 2 o 3
gradientes de codificacin de fase que permiten despus del procesado de la seal obtener espectros
de diferentes subvolmenes dentro del volumen de inters seleccionado. En funcin del nmero de
gradientes activados la secuencia CSI se denomina monodimensional (1D-CSI), bidimensional (2D-
CSI) o tridimensional (3D-CSI) y la localizacin que se obtiene es diferente. As, en una secuencia
1D-CSI el plano excitado se divide por filas o columnas de cada una de las cuales se obtiene un
espectro. En la tcnica 2D-CSI, que es la ms empleada en la actualidad, el plano se divide a la vez
en filas y columnas lo que origina una serie de volmenes de los que se obtienen los espectros.
Finalmente, un 3D-CSI excita un volumen por filas y columnas y se obtienen espectros de volmenes
en los diferentes planos. Tambin se estn empezando a utilizar tcnicas 2D-CSI que permiten
adquirir ms de un plano y tcnicas 3D-CSI. A un nivel ms experimental, estas secuencias se
pueden combinar con tcnicas ecoplanares de recoger la seal dando lugar a las llamadas
secuencias rpidas ("turbo") de imagen espectroscpica que permiten cubrir todo el cerebro con
mltiples planos en una misma adquisicin.

17.3. CONSIDERACIONES GENERALES SOBRE LA APLICACIN DE ESTAS


SECUENCIAS DE PULSO

El ncleo de hidrgeno-1 es en la actualidad el ms utilizado, principalmente en el estudio del


cerebro, ya que los datos espectroscpicos se obtienen durante la exploracin de imagen sin
necesidad de cambiar de bobina ni mover a la persona. Las siguientes consideraciones que se
comentan son nociones generales y, por encima, de ellas se encuentran las caractersticas generales
del equipo del que se dispone.

El primer factor a considerar para realizar un estudio por espectroscopia de protn es la


eleccin entre una secuencia de vxel nico o una que permite el registro simultneo del espectro de
diferentes volmenes. Aparentemente se podra pensar que siempre es mejor recoger el mximo de
informacin y, por lo tanto, sera ms interesante utilizar una secuencia multivxel en la que estara
incluida la regin de inters prioritario aunque el tiempo necesario para adquirir el espectro sea ms
largo. En la prctica este razonamiento tiene tres inconvenientes principales: el primero consiste en
que cuanto mayor es la regin a estudiar, ms importantes son las dificultades tcnicas que es
necesario superar para obtener un espectro de calidad. En segundo lugar el tiempo de adquisicin es
ms largo. En tercer lugar, el procesamiento de los datos espectroscpicos de vxel nico esta muy
automatizado de manera que en unos 5-10 minutos, como mximo, tenemos todos los datos
analizados (ciertos equipos tienen el procesamiento totalmente automtico y el espectro junto con su
cuantificacin aparece en pantalla a los pocos segundos de haber finalizado la adquisicin), mientras
que los datos de una secuencia multivxel requieren un tiempo de procesamiento ms largo. En la
prctica, pues, si la regin a estudiar esta claramente definida o se debe estudiar un nmero reducido
de regiones (1 2), sera mejor utilizar secuencias de vxel nico, mientras que cuando en la imagen
de referencia no se delimita claramente la regin, o se espera encontrar diferencias dentro de una
misma regin, o se desea estudiar un nmero elevado de regiones ser preferible utilizar una
secuencia multivxel.
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Dentro de la espectroscopia de protn se han descrito dos secuencias de vxel nico, SE y


STEAM, y normalmente la pregunta que surge es cual debe utilizarse. Para ello debe tenerse en
cuenta que si tenemos el mismo vxel y los parmetros de adquisicin son los mismos, la secuencia
SE produce una relacin seal/ruido doble que la secuencia STEAM ya que en este ltimo caso solo
una parte de la magnetizacin se utiliza para generar el eco estimulado. Por contra una secuencia
STEAM permite trabajar con TEs ms cortos que la secuencia SE. Aplicable a los dos tipos de
secuencia es el hecho que resonancias de metabolitos con un T2 corto se defasan muy rpido y
pueden perderse durante el tiempo de eco. Por ello, espectros obtenidos con un tiempo de eco largo
muestran menos seales, por lo que son ms fciles de analizar, que los obtenidos con un tiempo de
eco corto. Los tiempos de eco largos ms utilizados corresponden a 135-144 ms y 270-288 ms,
mientras que entre los tiempos de eco cortos podemos destacar 25-45 ms para la secuencia SE, y
10-30 ms para la secuencia STEAM. Los primeros estudios in vivo se realizaron con tiempos de eco
largos ya que su implementacin en los equipos de RM es ms sencilla y se eligieron esos valores
por que permiten la deteccin del lactato sin la interferencia de la seal debida a los cidos grasos
que aparece en la misma posicin. Una regla que se puede aplicar para decidir entre secuencia SE o
STEAM es que cuando se ha de utilizar un TE largo conviene seleccionar la secuencia que
proporciona una mayor relacin seal/ruido (SE), mientras que cuando interesa visualizar el mayor
nmero de compuestos escoger la secuencia que permite trabajar a un TE menor (STEAM). Aunque
si se dispone de un equipo que permite utilizar un TE de 30-35 ms con la secuencia SE puede ser
ms interesante realizar los dos espectros con el mismo tipo de secuencia ya que permite ahorrar el
tiempo de preparacin dado que ser suficiente con cambiar el TE.

Ventajas e inconvenientes de las sequencias CSI. La ventaja ms clara radica en el hecho


que en una misma exploracin se pueden obtener espectros de zonas patolgicas y normales.
Adems hay que tener en cuenta que, como etapa previa de procesamiento, es posible ajustar la
posicin de los diferentes vxeles modificando la codificacin de fase mediante el proceso que se
denomina desplazamiento del vxel (voxel shifting). Como desventajas cabe decir que se requiere
un campo magntico homogneo en un volumen mayor. La localizacin utilizando la codificacin de
fase no es tan precisa como la de los mtodos de volumen nico ya que los spines en cada vxel
estn parcialmente defasados. La prdida de seal causada por este defase es aproximadamente del
13%. Adems existe una contaminacin causada por los vxeles vecinos ("voxel-bleeding") que
puede llegar a ser del 10%. Durante la realizacin de una espectroscopia de protn el FOV para las
codificaciones de fase debe cubrir toda la cabeza para evitar problemas de doblamiento de seal
("wraparound").

17.4. ANLISIS DE UN ESPECTRO

Despus del procesado de la seal original ya se inicia el anlisis del espectro para extraer la
informacin deseada. Para ello se estudia:

1. La posicin de la resonancia nos permite identificar el compuesto que origina la seal.

2. El rea bajo cada resonancia se puede cuantificar mediante procedimientos manuales o


semiautomticos y es proporcional al nmero de ncleos que contribuyen a la seal con lo cual se
puede llegar a determinar la concentracin del compuesto. La RM es una tcnica poco sensible y, por
ello, en un espectro de protn, normalmente, slo se observan los compuestos cuya concentracin es
superior a 1-2 mM. En la prctica, normalmente se registran los espectros sin dejar relajar
completamente los ncleos por lo que la seal que se detecta esta influenciada por los parmetros de
relajacin T1 y T2 de cada metabolito, en consecuencia, se debe corregir el valor del rea antes de
correlacionarla con la concentracin. Se pueden encontrar dos mtodos de cuantificacin:
17.10 17. ERM. CONSIDERACIONES TCNICAS (R: 03-2)

-cuantificacin relativa bien sea mediante los cocientes de las reas de las diversas
resonancias o a travs de porcentajes respecto a la suma de las reas de todas las resonancias
presentes en el espectro. Hasta ahora esta es la forma ms habitual de presentar los resultados.
Tiene el inconveniente que puede inducir a error y se pierde informacin puesto que, por ejemplo, una
alteracin que cause una reduccin a la mitad en la concentracin de todos los componentes de una
muestra dar los mismos cocientes y, en consecuencia, no ser posible observar dicha alteracin.

-cuantificacin absoluta mediante la utilizacin de una referencia interna (agua, creatina


total, etc) o externa (agua u otro compuesto del cual se conoce con precisin la concentracin).
Diferentes grupos han propuesto metodologas para realizar este tipo de cuantificacin que puede
incluir una correccin por el volumen de lquido cefalorraqudeo dentro de la regin de inters. En
general, estas metodologas alargan el tiempo de exploracin y, por lo tanto, son relativamente
difciles de aplicar de manera rutinaria pero en la literatura se puede observar la tendencia a utilizar
cada vez ms esta informacin.

3. El ancho de banda de la frecuencia a mitad de la altura (h/2) es inversamente


proporcional al tiempo de relajacin transversal T2 del ncleo. En efecto, cuanto mayor es el valor de
T2, ms sincrnica es la relajacin de los ncleos lo cual implica que se relajan a frecuencias muy
similares y, en consecuencia, la resonancia es ms estrecha (Fig 17.6).

h/2 = 1 / (.T2)

Sin embargo, en la prctica se ha observado que las resonancias son ms anchas debido a la
inhomogeneidad del campo magntico y la expresin anterior se puede escribir como:

h/2 obs = 1 / (.T2*)

Fig 17.6
Determinacin de la anchura de la banda de la
resonancia a mitad de la altura (h/2). Este valor es
inversamente proporcional al parmetro de relajacin
T2* del ncleo.

h/2

Esta dependencia hace que los ncleos integrados en estructuras rgidas como pueden ser
macromolculas, membranas, etc, que presentan valores de T2 muy cortos originan resonancias muy
anchas y, en consecuencia, de baja amplitud que son difciles de detectar y pueden contribuir a
complicar el anlisis de espectros registrados con un TE corto. Esta particularidad hace que la
espectroscopia detecte resonancias de compuestos mviles como son los metabolitos que estn en
el citosol celular o grupos qumicos expuestos al exterior que forman parte de molculas integradas
en estructuras rgidas.
17. ERM. CONSIDERACIONES TCNICAS (R: 03-2) 17.11

Hasta el momento siempre hemos representado la resonancia de un determinado ncleo


como una seal nica. Sin embargo en algunos casos las seales de resonancia de un ncleo
pueden aparecer desdoblados (dobletes) o multiplicados (multipletes) en seales separadas
uniformemente respecto a la frecuencia de resonancia que le correspondera si fuese nica y cuya
suma de intensidades sera equivalente a la de la seal si fuese nica. Este fenmeno es debido a
interferencias (acoplamientos) energticos entre ncleos vecinos en la misma molcula. Es muy
conocido el doblete del cido lctico.

BIBLIOGRAFA

Bolinger L. e Insko E.K.: Spectroscopy: Basic principles and techniques. in "Clinical Magnetic
Resonance Imaging", Edelman R.R., Hesselink J.R. y Zlatkin M.B: eds.,2 edicin. W.B. Saunders
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