"Determinación de La Concentración de Dosis Letal, Dosis Letal Media y Dosis Efectiva Del Herbicida Roundup en Tilapia Nilótica Gris, en Condiciones Experimentales".

UNIVERSIDAD PERUANA UNIN
FACULTAD DE INGENIERA Y ARQUITECTURA

E.A.P. INGENIERA AMBIENTAL
INFORME FINAL
DETERMINACIN DE LA CONCENTRACIN DE DOSIS LETAL, DOSIS

LETAL MEDIA Y DOSIS EFECTIVA DEL HERBICIDA ROUNDUP EN TILAPIA
NILTICA GRIS, EN CONDICIONES EXPERIMENTALES.
PRESENTADO POR
NAVARRO CARRASCO, Jos Natan
SINTI PINEDO, Diego Alonso
CURSO
TOXICOLOGA OCUPACIONAL
DOCENTE
JAVE CONCEPCIN, Henry Giovani
Morales, junio de 2016
1
TABLA DE CONTENIDOS
Paginas
TABLA DE CONTENIDOS ......................................................................................................................... 2

RESUMEN .............................................................................................................................................. 3
INTRODUCCIN ...................................................................................................................................... 4
CAPTULO I: PROBLEMA ......................................................................................................................... 5
1.1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ........................................................................................................ 5
1.2. FORMULACIN DEL PROBLEMA DE INVESTIGACIN ................................................................................. 5
1.3. OBJETIVOS..................................................................................................................................... 5
1.4. JUSTIFICACIN ................................................................................................................................ 6
CAPTULO II: MARCO TERICO ............................................................................................................... 7
2.1 ANTECEDENTES .............................................................................................................................. 7
2.2 BASES TERICAS............................................................................................................................. 9
2.3 BASES LEGALES ............................................................................................................................ 22
2.4 HIPTESIS ................................................................................................................................... 22
2.5 VARIABLES ................................................................................................................................... 23
CAPITULO III: METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN ............................................................................ 25
3.1. MBITO DE ESTUDIOS ..................................................................................................................... 25
3.2. TIPO DE INVESTIGACIN.................................................................................................................. 25
3.3. NIVEL DE INVESTIGACIN ................................................................................................................ 25
3.4. MTODO DE LA INVESTIGACIN ........................................................................................................ 25
3.5. DISEO DE LA INVESTIGACIN .......................................................................................................... 26
3.6. POBLACIN Y MUESTRA .................................................................................................................. 27
3.7. TCNICAS E INSTRUMENTOS DE RECOLECCIN DE DATOS ...................................................................... 27
3.8. PROCEDIMIENTO DE RECOLECCIN DE DATOS ..................................................................................... 28
3.9. TCNICAS DE PROCESAMIENTO Y ANLISIS DE DATOS ........................................................................... 28
CAPITULO IV: RESULTADOS ................................................................................................................. 29
4.1. PRESENTACIN DE RESULTADOS ...................................................................................................... 29
4.2. DISCUSIN DE RESULTADOS ............................................................................................................ 40
CONCLUSIONES ................................................................................................................................... 40
RECOMENDACIONES ............................................................................................................................ 41
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS .......................................................................................................... 42
ANEXOS ............................................................................................................................................... 44
2
RESUMEN
Mediante este trabajo realizado durante el ciclo acadmico se determin a dosis letal, letal media
(DL50) y la dosis efectiva en tilapia Niltica gris llevando un procedimiento estricto, se procedi a
la aclimatacin durante un periodo de 15 das en los cuales se midiendo su tamao, peso
promedio, biomasa y calculando su alimentacin diaria procedente de la estacin pesquera de
Ahuashiyacu, se consider una poblacin de 300 individuos en una pecera de 1m de largo, 45
de ancho y 80 de alto en la cual se aclimataron. Para el anlisis respectivo de la dosis letal, letal
media (DL50) y efectiva a diferentes concentraciones, iniciando con concentraciones menores
hasta encontrar la cantidad requerida, en una pecera de 1 m de largo dividido en tres partes
haciendo cuatro acuarios de 25 cm cada uno, 45cm de ancho y 25 cm de alto en la cual se
evalu las dosis expresando en mg / kg de peso corporal. En la cual la M2 = 2302000 mg
evaluado en 0.053 kg resulto ser la dosis letal media, en la M5 = 5755000 mg evaluado en 0.053
kg de peso corporal resulto ser la dosis letal ya que ningn individuo quedo vivo considerado la
muerte total equivalente al 100%.
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INTRODUCCIN
La dosis letal media, DL50, CL50 o LCt50 de una toxina, radiacin o patgeno es la
dosis necesaria para matar a la mitad de los miembros de una poblacin analizada despus de
una duracin de la prueba especificada.
El presente proyecto busca por medio de la realizacin de ensayos toxicolgicos,

determinaremos el efecto del herbicida Roundup en el medio acutico con ayuda de la especie
Tilapia (orechromis niloticus) en condiciones experimentales especficas y controladas, lo que
permitir determinar la concentracin letal media (CL50) del herbicida expuesto a diferentes
concentraciones.
Realizando pruebas de bioensayos que permitan medir el efecto de uno o ms

contaminantes en una o ms especies permitiendo evaluar el grado el grado de toxicidad de una
sustancia qumica un efluente, un cuerpo de agua, etc., empleando organismos vivos. Para
proteger el medio acutico, en este caso la tilapia orechromis es necesario fijar lmites superiores
a las descargas de contaminantes perjudiciales qumicos y fsicos, adems de vigilar y regular
las descargas que se realicen posteriormente, LD50 figuras se utilizan con frecuencia como un
indicador general de la toxicidad aguda de una sustancia.
Como resultado del proyecto, se busca que en un futuro se replanteen las normas
vigentes para la proteccin de ecosistemas acuticos, teniendo en cuenta que la micro fauna en
cuerpos de agua juega un papel importante y que por medio de los bioensayos se puede tener
una visin justificada de cules son los factores o componentes especficos que causan un
impacto en ellos.
4
CAPTULO I: PROBLEMA
1.1. Planteamiento del Problema
El estudio est orientado a conocer el impacto ocasionado por el insecticida
Roundup en los ecosistemas acuticos que resulta de la operacin a plena capacidad el
ao 2016 del proyecto realizado durante el ciclo acadmico 2016-1: herbicida Roundup
sobre ecosistemas acuticos con tilapia (Niltica gris) ubicad en el distrito de Morales de
la Provincia de San Martin del Departamento y Regin de San Martin; Este estudio sirve
como un proceso de aprendizaje para fortalecer los conocimientos.
1.2. Formulacin del Problema de Investigacin

Problema general
Cul ser la dosis letal, dosis letal media y dosis efectiva del herbicida Roundup en
tilapia (Niltica gris) san Martn 20016?
Problemas especficos
Cules sern los efectos morfolgicos que ocasiona el organofosforado glifosato
sobre las tilapias (Niltica gris)?
Cules sern los efectos fisiolgicos que ocasionen la muerte sobre las tilapias al
ser expuestas al Roundup?
Qu factores podran influir en la determinacin de cada una de las dosis?
1.3. Objetivos
Objetivo general
Determinar la Dosis Letal, Dosis letal Media (DL50) y Dosis efectiva del glifosato
Roundup en tilapia Niltica gris mediante bioensayos de toxicidad en condiciones
experimentales.
Objetivos especficos
Identificar los efectos morfolgicos del Roundup sobre la tilapia (Niltica gris).
Determinar los efectos fisiolgicos causados por el glifosato Roundup.
Definir los factores que influyen en la relacin dosis-efecto.
5
1.4. Justificacin
El presente trabajo aplicativo se desarrolla con la finalidad del cumplimiento
en el slabus establecido en el curso de toxicologa ocupacional inscrito en VII ciclo de la
Escuela Acadmico Profesional de Ingeniera Ambiental 2016-1 se tom en consideracin
evaluar la Dosis Letal Media en peces Tilapia (Niltica gris) de proveniencia del rio Nilo
utilizada en la zona de San Martn como un alimento diario ya que cuenta con nutrientes
(calcio) un excelente plato de la zona, se tom en cuenta evaluar la dosis letal dosis letal
media (DL50) y Dosis Efectiva con finalidad para determinar los efectos que genere el
agente contaminantes sobre los seres vivos, identificar la vulnerabilidad de estos al ser
expuestos en un ambiente contaminado con el herbicida Roundup, realizando ciertas
concentraciones a diferentes cantidades para ver las muertes y llevar una observacin
durante 96 horas por cada muestra, llenando una tabla previamente elaborada por el
grupo para la contabilidad posteriormente usando la formula encontraremos el porcentaje
final utilizando el mtodo Probit.
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CAPTULO II: MARCO TERICO
2.1 Antecedentes
Determinacin de la Concentracin Letal Media (cl50) y efecto histopatolgico del
permanganato de potasio, en renacuajos de rana toro Rana catesbeiana (Anura:
Ranidae). Meja Muoz, M; Artculo 2001 El motivo de esta investigacin es para
determinar la concentracin.
El permanganato de potasio es utilizado como un biocida en cultivos

intensivos. Para conocer un poco ms su efecto, se llev a cabo un estudio con
renacuajos de la especie Rana catesbeiana (Shaw, 1802) con el objetivo de conocer la
concentracin letal media de permanganato de potasio, as como sus efectos
histopatolgicos. Un total de 240 renacuajos fueron expuestos a siete diferentes
concentraciones de permanganato en un rango que vari de 0.4 a 3.0 mg/l durante 96
horas. No se observ mortalidad en concentraciones de 0.4 y 0.8 mg/l, mientras que el
mximo de mortalidad tuvo lugar al final de las primeras siete horas en concentraciones
de 2.3 2.7 y 3.0 mg/L. La concentracin letal fue de 1.22 mg/l al final de todo el
experimento. El permanganato de potasio afect el tejido epitelial a nivel de la epidermis,
causando necrosis e hipertrofia de las clulas epiteliales y presencia de mucosidad.
Determinacin de la Concentracin Letal Media (CL50) y eficacia del eugenol como

anestsico sobre xiphophorus helleri (heckel, 1848) (Cyprinodontiformes:
Poecilidae). Revista de Investigaciones Veterinarias del Per Llanos, Carlos,
Monteza, Carla, Scotto, Carlos 2012 El propsito de esta investigacin es ver el
anestsico y la resistencia en el pez espada.
Se determin la Concentracin Letal Media (CL50) y la eficacia como

anestsico de eugenol a diversas dosis sobre el pez espada Xiphophorus helleri (Heckel,
1848). Para la determinacin de la CL50 se trabaj con 10 individuos en el control y en
cada una de las concentraciones con rplicas por triplicado. El estimado del CL 50 a las 96
h para eugenol fue de 22.12 mg.L-1. La eficacia de anestesia se llev a cabo con 20
individuos por cada dosis de eugenol. La utilizacin del anestsico result efectivo en las
dosis de 100, 125 y 150 mg.L-1, con un tiempo de induccin total de la anestesia (T.I.T.)
de 265.4 seg a 100 mg.L-1, 229.8 seg a 125 mg.L-1 y 195.9 seg a 150 mg.L-1 y un tiempo
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de recuperacin total de la anestesia (T.R.T.) de 325.5 seg a 100 mg.L-1, 259.0 seg a 125
mg.L-1 246.7 seg a 150 mg.L-1. Se determin una mayor eficiencia a la induccin y
recuperacin a la dosis de 125 mg.L-1 mediante el anlisis de correlacin. Se obtuvieron
ecuaciones logartmicas para las dosificaciones de mayor eficiencia: y = 118.1ln(x) +
141.77; R = 0.5883 (Tiempo de induccin vs Peso a una dosis de 125 mg.L-1), y =
401.33ln(x) - 349.75; R = 0.5786 (Tiempo de induccin vs Longitud a una dosis de 125
mgL-1), y = 172.22ln(x) + 130.69; R = 0.4285 (Tiempo de recuperacin vs Peso a una
dosis de 125 mg.L-1), y = 531.62ln(x) - 508.64; R= 0.3477 (Tiempo de recuperacin vs
Longitud a una dosis de 125 mg.L-1). No se observ efectos letales durante la induccin
de la anestesia y posterior recuperacin.
Determinacin de la Concentracin Letal Media (cl50) del Glifosato Roundup 747 sg

((nh4) c3h7no5p), por medio de Bioensayos de toxicidad acutica sobre Daphnia
Pulex. Tesis facultad de Ingeniera Ambiental y Santaria Bogot D.C. GISELA P -
2008. El propsito del siguiente ttulo es determinar la sensibilidad de 6 a 24 de nacidos.
Posteriormente calculamos la Concentracin Letal Media (CL50-48) del

GLIFOSATO ROUNDUP 747 SG realizando 10 ensayos de toxicidad, tomando 5
concentraciones diferentes, un control negativo o blanco y se hicieron cuatro replicas por
cada concentracin por un periodo de 48 horas (tiempo manejado por el ciclo de vida de la
Daphnia pulex). Los resultados obtenidos se analizaron utilizando el programa de mtodo
de unidades probabilsticas Probit el cual evala la relacin concentracin respuesta de
un contaminante sobre un organismo con lmites de confiabilidad del 95%; arrojando como
resultado que la concentracin letal media del Glifosato ROUNDUP 747SG es de 86.642
mg/l. Una vez terminada la investigacin a nivel de laboratorio y recopilada informacin
necesaria sobre el producto Roundup 747SG, se dieron elementos importantes para
fortalecer la propuesta de incluir el producto como una sustancia de inters sanitario.
8
2.2 Bases tericas
A. TOXICIDAD
El trmino toxicidad se emplea para describir la naturaleza de los efectos
perjudiciales producidos y las condiciones necesarias para su produccin. La
toxicologa estudia las relaciones entre la cantidad de sustancia introducida en el
organismo y el efecto biolgico obtenido, tanto a nivel cualitativo como cuantitativo.
Esta ocurre toda vez que una sustancia entra en contacto con una superficie corporal
como la piel, los ojos o la mucosa del sistema digestivo o respiratorio.
En la sociedad moderna, la toxicologa es ya un elemento importante de

la salud ambiental y de la salud en el trabajo. Ello es as porque muchas
organizaciones, tanto gubernamentales como no gubernamentales, utilizan la
informacin toxicolgica para evaluar y regular los peligros presentes tanto en el lugar
de trabajo como en el medio ambiente general. La toxicologa es un componente
crucial de las estrategias de prevencin, pues proporciona informacin sobre peligros
potenciales en los casos en que no hay una exposicin humana amplia.
Los mtodos de la toxicologa son as mismo muy utilizados por la

industria en el desarrollo de productos, pues permiten obtener una informacin valiosa
para el diseo de determinadas molculas o formulaciones.
Mediante la Concentracin Letal Media CL50 se calcula estadsticamente

un agente qumico o fsico que se espera cause una mortalidad en el 50% de los
organismos de una poblacin bajo un conjunto de condiciones definidas.
Cantidad administrada o absorbida Va de ingreso al organismo

Distribucin a lo largo del tiempo despus de su administracin. Naturaleza y
severidad del dao producido. Tiempo necesario para producir el efecto. (Catalina G)
Cantidad administrada o absorbida.
Va de ingreso al organismo.
Distribucin a lo largo del tiempo despus de su administracin.
Naturaleza y severidad del dao producido.
Tiempo necesario para producir el efecto.
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B. CATEGORAS DE TOXICIDAD Y CLASIFICACIN DE LA TOXICIDAD:
Las categoras de toxicidad se refieren a una calificacin arbitraria de las
dosis o niveles de exposicin que causan efectos txicos. Se habla as de
sumamente txico, muy txico y moderadamente txico. Lo ms frecuente es que
estas expresiones se apliquen a la toxicidad aguda.
La clasificacin de la toxicidad se refiere a la agrupacin de las sustancias

qumicas en categoras generales conforme a su efecto txico principal. Se habla as
de sustancias alergnicas, neurotxicas y carcingenas.
Los txicos son definidos por la OSHAS (Administracin para la seguridad

y salud ocupacional) como un producto qumico que se encuentra en una de estas 3
categoras: Un producto qumico que tiene una dosis letal media (DL 50) de ms de 50
miligramos por kilogramos, pero no ms de 500 miligramos por kilogramo de peso
corporal cuando administrado oralmente a ratas albinas de entre 200 y 300 gramos de
peso.
Dosis letal media (DL50). Dosis, calculada estadsticamente, de un agente
qumico o fsico (radiacin) que se espera que mate al 50% de los organismos de
una poblacin bajo un conjunto de condiciones definidas.
Dosis no efectiva. Cantidad de sustancia que no tiene ningn efecto en el
organismo.
Un producto qumico que tiene una dosis letal media (DL50) de ms de 200
miligramos por kilogramo, pero no ms de 1000 miligramos por kilogramo de peso
corporal cuando administrado por contacto continuo durante 24 horas (o menos si
la muerte ocurre durante las siguientes 24 horas) con la piel desnuda de conejos
albinos de entre 2 a 3 kilogramos de peso.
Un producto qumico que tiene una concentracin letal media (CL50) en el aire de
ms de 200 partes por milln, pero no ms de 2000 partes por milln por volumen
de gas o vapor, o ms de 2 miligramos por litro, pero no ms de 20 miligramos por
litro de niebla, humo, o polvo, cuando administrado por inhalacin continua
durante una hora (o menos si la muerte ocurre en menos de una hora) a ratas
albinas de entre 200 y 300 gramos de peso.
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a) toxicidad aguda: La toxicidad aguda tiene por objeto determinar los efectos de
una dosis nica y muy elevada de una sustancia. Usualmente, el punto final del
estudio es la muerte del animal y la toxicidad aguda se expresa por la dosis letal
50, que viene a representar ms o menos la dosis de la sustancia que produce la
muerte en el 50% de los animales.
Cuando se quiere determinar el efecto de un determinado toxico sobre

una especie, lo primero que debe hacerse es determinar las condiciones del
cultivo tanto en el cultivo de los organismos como en el bioensayo mismo, a fin de
proporcionar condiciones estndar que permitan la reproducibilidad de las
pruebas.
En segundo lugar, deben realizarse dos tipos de pruebas a fin de

hallar las concentraciones del toxico que causen un efecto adverso en los
organismos.
b) Relacin dosis-efecto: es la relacin entre la dosis y el efecto a nivel individual.

Un incremento de la dosis puede incrementar la intensidad de un efecto o su
gravedad. Puede obtenerse una curva de dosis-efecto a nivel de todo el
organismo, de la clula o de la molcula (Diana).
c) Relacin dosis-respuesta: es la relacin entre la dosis y el porcentaje de

individuos que presentan un determinado efecto. Al incrementarse la dosis lo
normal es que aumente el nmero de individuos afectados en la poblacin
expuesta.
d) Toxicologa ambiental: la toxicologa ambiental evala los impactos que

producen en la salud pblica la exposicin de la poblacin a los txicos
ambientales presentes en un sitio contaminado. Los txicos son los xenobiticos
(cualquier substancia que no ha sido producida por la biota) que producen efectos
adversos en los organismos vivos. Estos impactos producidos se miden por su:
11
e) Exposicin: es el contacto de una poblacin o individuo con un agente qumico o
fsico. La magnitud de la exposicin se determina midiendo o estimando la
cantidad (concentracin) del agente que est presente en la superficie de contacto
(pulmones, intestino, piel, etc.) durante un perodo especificado.
f) Ruta de exposicin: es el camino que sigue un agente qumico en el ambiente

desde el lugar donde se emite hasta que llega a establecer contacto con la
poblacin o individuo expuesto. El anlisis de la ruta de exposicin describe la
relacin que existe entre las fuentes (localizaciones y tipo de derrames
ambientales) y los receptores (localizacin de las poblaciones, patrones de
actividad, etc.). Se consideran como rutas significativas las que dan lugar a
exposicin humana. Las rutas de exposicin consisten generalmente de cuatro
elementos: fuentes y mecanismos de emisin de txicos. Medio de retencin y
transporte (o medios en el caso de que haya transferencias de un medio a otro).
Punto de contacto potencial entre el medio contaminado y los individuos. Va de
ingreso al organismo.
g) Va de exposicin: es el mecanismo por medio del cual el txico entra en el

organismo. Para el propsito de la toxicologa ambiental, se consideran de
importancia la ingestin, la inhalacin y el contacto cutneo (absorcin cutnea).
h) Ingestin: cuando el txico se ingiere, entra al TGC, (tracto gastrointestinal) la

mayor cantidad se absorbe en el estmago y en los intestinos. El sitio de
absorcin depende en parte del estado de ionizacin del compuesto. Los cidos
dbiles es ms probable que se absorban en el estmago, donde hay un pH bajo,
mientras que las bases dbiles, que estn menos ionizadas a pH alto, se
absorben mejor en el intestino donde existen estas condiciones.
i) Inhalacin: la inhalacin es la va de exposicin a gases, vapores de lquidos

voltiles, aerosoles y partculas suspendidas en el aire. Los sitios de absorcin
son la nariz y los pulmones. La nariz acta como un limpiador o trampa para los
gases solubles en agua y los muy reactivos as como, para retener las partculas
grandes. Las molculas de los gases se absorben en el espacio alveolar de los
12
pulmones, disolvindose en la sangre, hasta que las concentraciones del gas en
ambas fases llegan al equilibrio. La solubilidad de gases en la sangre depende
fundamentalmente de su solubilidad en agua y de la presin parcial del gas en el
aire inhalado. Si se incrementa la concentracin de un gas en el aire, se
incrementar su velocidad de difusin en los pulmones, hasta alcanzar la nueva
concentracin de equilibrio en la sangre.
La regin del aparato respiratorio en el que se depositan las partculas

y aerosoles depende de su tamao. Las partculas de 5 m o ms grandes se
depositan en la regin nasofarngea, que es la regin ms alta. Las partculas de
1 a 5 m son depositadas en la regin traqueobronquiolar del pulmn, que es la
regin que en la regin intermedia. Las partculas de 1 m y ms pequeas
penetran a los sacos alveolares de los pulmones. Estas pueden ser absorbidas a
la sangre o bien, pueden ser eliminadas a travs del sistema linftico
j) Absorcin cutnea: la piel, a diferencia del epitelio del intestino y de los alvolos
pulmonares, no est diseada para la absorcin de substancias tiles al
organismo. La permeabilidad a travs de la piel es muy baja debido a que est
formada por varias capas, algunas de ellas muy gruesas y con muy escasa
irrigacin sangunea. Para que una substancia se absorba por la piel debe
difundirse a travs del estrato crneo y las dems capas de la epidermis, antes de
contactar los vasos capilares sanguneos y linfticos de la dermis y pasar al
torrente sanguneo.
k) Tiempo de exposicin: para la toxicologa ambiental las exposiciones se

clasifican de acuerdo a la magnitud del perodo de exposicin en:
Exposiciones crnicas: Son las exposiciones que duran entre 10% y el
100% del perodo de vida. Para el caso del hombre entre 7 y 70 aos.
Exposiciones subcrnicas: Son exposiciones de corta duracin, menores
que el 10% del perodo vital.
l) Exposiciones agudas: efecto letal u otro efecto producido en un tiempo

relativamente corto, usualmente dentro de los 4 das 96 horas para peces o macro
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vertebrados y periodos ms cortos (2 das) para organismos ms pequeos, estas
exposiciones suceden en un solo evento.
C. INDICADORES DE TOXICOLOGA
Las siguientes unidades de medida expresan los valores de concentracin
de contaminantes y las dosis recibidas por un organismo, sirviendo como indicadores:
a) DL50 (dosis letal media) es la dosis nica, obtenida por estadstica, de una
sustancia de la que puede esperarse que produzca muerte del 50 % de los
animales a los que se haya administrado. El valor de la DL50 se expresa en peso
de la sustancia por unidad de peso del animal (miligramos por kilogramo).
b) Concentracin Letal Media CL50: concentracin letal 50 es la concentracin,

obtenida por estadstica, de una sustancia de la que puede esperarse que
produzca la muerte, durante la exposicin o en un plazo definido despus de sta,
del 50% de los animales expuestos a dicha sustancia durante un periodo
determinado. El valor de la CL50 se expresa en peso de sustancia por unidad de
volumen de aire normal (miligramos por litro, mg/L).
c) Partes por milln (ppm): para determinar la concentracin de una substancia

qumica en un volumen se utilizan las partes por milln de partes iguales. Cada
millonsima parte de este volumen, correspondiente a la substancia de nuestro
inters, se considera una parte por milln de la substancia. La ppm se utiliza para
determinar concentraciones muy pequeas de gases en la atmsfera.
14
D. EFECTOS
Es el cambio biolgico producido tanto en el nivel de organismo individual
como en niveles de organizacin inferiores o superiores al individuo, asociado a la
exposicin del txico. Estos pueden ser:
a) Efecto agudo: corto tiempo de exposicin (horas, das) donde la severidad es la

mortalidad y se determina la concentracin que causa la mortalidad del 50% de la
poblacin expuesta (CL50).
b) Efecto letal: cuando es causada la muerte por accin directa como consecuencia
de la exposicin a una determinada concentracin del agente txico.
c) Efecto subletal: se produce por debajo del nivel que causa la muerte
directamente, como resultado de la exposicin a una determinada concentracin
del agente txico.
d) Respuesta: proporcin de la poblacin expuesta al txico que manifiesta el efecto

definido.
E. BIOENSAYOS
Se entiende por bioensayo un ensayo en que un tejido, organismo o grupo
de organismos vivos se usan como reactivo para determinar la potencia de cualquier
sustancia fisiolgicamente activa cuya actividad se desconoce (FAO, 1981).
Los bioensayos, o pruebas de toxicidad son experimentos que miden el

efecto de uno o ms contaminantes en una o ms especies (Reish y Oshida, 1987);
permiten evaluar el grado de toxicidad de una sustancia qumica, un efluente, un
cuerpo de agua, etc., empleando organismos vivos (Esclaps, 1999).
Para proteger el medio acutico es necesario fijar lmites superiores a las

descargas de contaminantes perjudiciales qumicos y fsicos, adems de vigilar y
regular las descargas que se realicen posteriormente. Los lmites superiores de las
descargas se derivan de la consideracin de los criterios apropiados de calidad de
15
agua formulados a partir de datos de respuestas para sistemas biolgicos (bioensayos
crnicos o agudos) (FAO, 1981).
Los individuos son expuestos a concentraciones crecientes del txico para

determinar cambios en el organismo. En general la muerte es el criterio ms utilizado
en la prueba de CL50 horas. Uno o ms controles son utilizados en organismos
expuestos a similares condiciones excepto cuando existe falta de disponibilidad del
txico (Reish y Oshida, 1987).
Los bioensayos toxicolgicos tienen por finalidad determinar las

concentraciones de un txico dado que ocasionen efectos dainos o nocivos en un
organismo modelo. Estos efectos pueden incluirse en las siguientes categoras:
Afectacin del trmino de vida
Alteracin de la tasa de crecimiento
Cambios de los parmetros reproductivos (Reish y Oshida, 1987).
a) Tipos de bioensayos
Ensayos de respuesta directa.
Bioensayos de toxicidad.
Figura 1: Clasificacin de bioensayos.

FUENTE: pruebas toxicolgicas con Daphnia magna.
16
F. TILAPIA NILOTICA GRIS:
La Tilapia niltica es de originaria del ro Nilo, es la segunda especie
cultivada en el mundo. Para cultivo se debe contar con poblaciones monosexo de
machos por su mejor crecimiento y para evitar su pronta reproduccin, lo que traera
serios problemas al cultivo por superpoblacin y competencia por oxgeno, espacio y
alimento, y la rpida propagacin de enfermedades. Por su coloracin, no necesita
cubrimiento con mallas en los estanques.
a) Taxonoma
Tabla N 1: Taxonoma tilapia

Phylum Vertebrada
Sub Phylum Craneata
Super Clase Gnostomata
Serie Piscis
Clase Teleostei
Sub Clase Actinopterigii
Orden Perciformes
Sub Orden Percoidei
Familia Cichilidae
Gnero Orechromis
Especie Oreochromis Niloticus
Oreochromis Mossambicus
Oreochromis Aereus
Oreochromis U. Hornorum
Oreochromis sp.
Fuente: Medicina veterinaria y zootcnica de Ambato
b) Morfologa: la familia Cichlidae se caracteriza por presentar especies de

coloracin muy atractiva, principalmente las nativas de frica, Amrica Central y la
parte Tropical de Sudamrica, (Boceck, 1996) Los miembros de la familia
Cichlidae se diferencian de los Mojarras (Centrarchidae) y de las Percas por
presentar un solo orificio a cada lado de la cabeza, y que sirve simultneamente
como entrada y salida de la cavidad nasal, (Bocek, 1996) La tilapia niltica
presenta un color en general cenizo azulado(Gris), siendo el macho de un color
ms claro al de la hembra, diferencindose de estas la tilapia roja, la cual
presenta un tono rosado a rojo, pudiendo variar en partes del cuerpo en ciertos
casos, (Bocek, 1996).
17
Tabla N 2: Morfologa
rea de Orechromis Oreochromis Oreochromus u.
Pigmentacin NIloticus Aereus Hornorum Minsculas
Cuerpo Verde Metlico Gris Azulado Negro acentuado Gris Oscuro
ligeramente gris en el macho
Cabeza Verde Metlico Gris Oscuro Gris Gris Oscuro
Color de Ojos Caf Caf Negro Negro
Regin Ventral Gris Plateado Gris claro con Gris Gris Claro
manchas rojisas
Papila Genital Blanca Blanca a brillante Rosada Blanca
claro
Borde aleta Negra a Oscura Fuertemente roja o Roja Ligeramente
dorsal rojiza roja
Porcin Rojas, bandas Roja, bandas difusas Roja Ligeramente
terminal aleta negras bien y plateadas roja
caudal definidas, borde
circular
FUENTE: medicina veterinaria Ambato
c) Reproduccin: la madurez sexual, en funcin de la edad y la talla, es por lo

general temprana, a tamao pequeo y edad juvenil. En estanques de cultivo y en
el trpico, bajo condiciones de mximo crecimiento, alcanzan su madurez sexual a
la edad de 5-6 meses y alrededor de los 150 g; aunque en condiciones de
alimentacin limitada, pueden reproducirse a pesos tan bajos como 20-30 gramos
o menos an; mientras que en condiciones de clima menos benigno, su respuesta
al crecimiento es buena en los meses de mejores temperaturas, y su reproduccin
es menor.
d) Alimento: las tilapias se alimentan en ambiente natural de una amplia variedad de

tems, desde plancton, organismos bentnicos, invertebrados de la columna de
agua, larvas de peces, detritus, materia orgnica en descomposicin, etc. En
estanques con alto suplemento externo, el propio alimento natural abastece
solamente un 30-50% del total.
La tilapia niltica es muy eficiente en consumo de algas del

fitoplancton. Si bien esta especie no ingiere activamente vegetales superiores
como otras (T. Rendalli o T. aureus), puede limitar su crecimiento cuando es
cultivada en estanques. En cambio, digiere entre un 30-60% de la protena
18
contenida en el plancton (algas azules y verdes) siendo las primeras mejor
digeridas que las segundas.
Cuando los estanques son fertilizados con abono animal, estos actan
tambin como alimento (abono de cerdos, de gallina u otros animales de granja).
Las tilapias no disturban los fondos como ocurre en el cultivo de carpas comunes.
Los peces buscan invertebrados durante el da e ingieren principalmente, aquellas
bacterias contenidas en la materia orgnica en descomposicin.
e) Habitad: dentro de reas originales de distribucin, las tilapias han colonizado

hbitats muy diversos; arroyos permanentes y temporales, ros anchos y
profundos, lagos profundos, lagos pantanosos, lagunas de agua dulce, salobres o
saladas. Las tilapias cultivadas habitan por lo general en aguas lenticas (poca
corriente), permaneciendo en zonas poco profundas y cercanas a las orillas donde
se alimentan y reproducen (Arboleda, 1990).
G. EVALUACIN DE LA CRIANZA ANTES DE REALIZAR LA EXPERIMENTACIN O

EVALUACIN.
El seguimiento de la crianza es indispensable para hacer un buen control
observando el crecimiento de los peces, el estado de sanidad y nutricin,
verificndolos problemas existentes para ser corregidos a tiempo. Es necesario
adecuar la cantidad de alimento necesario para tener un buen cultivo, los muestreos
deben realizarse mnimo mensualmente, evaluando y pesando del 5% del total
estimado de peces; en la siguiente informacin sern anotadas y evaluadas utilizando
las siguientes instrucciones: peso medio, biomasa, tasa de crecimiento y conversin
alimentaria.
a) Peso medio: se saca el 5% de la poblacin y se pesa luego de multiplica por el

nmero de la poblacin total.
b) Temperatura: para logara reproduccin es necesario criarlos a su Temperatura:

24 a 29 C
19
c) Oxgeno disuelto: este es el factor ms importante que afecta el crecimiento de
tilapia; el contenido de oxgeno en el agua no debe ser menor a 3 mg/ L (3cc).
H. METODOS DE ANALISIS PARA RESULTADOS DE TOXICIDAD
El mtodo a usar para determinar los valores de CL50 en pruebas de

toxicidad aguda depende de la forma de la distribucin de tolerancias12, es decir el
porcentaje de organismos de una poblacin dada que se ver afectada a una cierta
dosis. Generalmente los mtodos ms usados son los siguientes:
Mtodo Probit (paramtrico).
Clculo de Dosis Letal Media (DL50)
La DL50 se expresa generalmente como la masa de la sustancia

administrada por peso de animal sometido al ensayo. Habitualmente, la DL50 de una
sustancia se da enmg/kg de masa corporal. En el caso de algunas neurotoxinas tales
comobatrachotoxin, uno de los venenos ms mortales conocidos, la DL50 se
puedeexpresar ms convenientemente como microgramos por kilogramo g/kg de
masacorporal.
Anlisis Probit (confianza del 95%)

Para el clculo de los Dl50 generalmente se usa el anlisis Probit (con o sin
ajuste). En un experimento tpico de pruebas de toxicidad aguda se tiene la
siguiente situacin:
Concentracin de la sustancia o dosis (d)
Nmero de individuos (n)
Numero de organismos muertos o afectados (r)
Porcentaje de efecto (p)
I. HERBICIDA
20
Un herbicida es un producto fitosanitario utilizado para matar plantas
indeseadas. Los herbicidas selectivos matan ciertos objetivos, mientras preservan la
cosecha relativamente indemne. Algunos actan interfiriendo con el crecimiento de las
malas hierbas y se basan frecuentemente en las hormonas de las plantas. Pero los
herbicidas utilizados para limpiar grandes terrenos no son selectivos y matan toda
planta con la que entra en contacto (FAO).
a) Glifosato: el glifosato es un aminofosfonato y un anlogo del aminocido natural
glicina. El nombre es la contraccin de glicina, fosfo- y -ato, partcula que designa
a la base conjugada de un cido.
Fue descubierta su actividad herbicida en 1970 por John E. Franz,

trabajando en Monsanto. Por su hallazgo, en 1990 Franz recibi la National Medal
of Technology en 1987, y la Medalla Perkin en Qumica Aplicada.
Su frmula e ingrediente activo es N-fosfonometilglicina,

C6H17N2O5P, su peso molecular es 228,2 g/mol. Elaborado por CA.C.Ltda. y
Cia. S.C.A. Bogot D.C. Colombia. Importado distribuido por Farmex.
b) Clasificacin de herbicidas: los herbicidas se clasifican segn su finalidad, su

modo de actuacin y segn el momento de aplicacin; a continuacin, se
nombrarn de manera resumida:
Por su finalidad
Total. Es aquel que destruye toda la vegetacin sobre la que se aplica.
Puede ser selectivo si se aplica en dosis menores.
Selectivo. Son aquellos que en condiciones normales destruyen las malas
hierbas y no el cultivo.
En un tratamiento selectivo hay que tener en cuenta:
Dosis exacta que recomienda la casa comercial.
La mxima uniformidad posible en la distribucin del producto.
Naturaleza de la planta.
Empleo del producto adecuado.
21
Por su modo de actuacin
Residuales. Son aquellos que permanecen en el suelo el suficiente tiempo
como para ir matando las malas hierbas en el momento de su germinacin;
estos productos no son txicos para la planta.
2.3 Bases legales

Ley N. 26842, Ley General de Salud Aprueban el Reglamento de Ensayos Clnicos
en el Per DECRETO SUPREMO N. 017-2006-SA
Artculo 19 La Resolucin Directoral de Autorizacin del Ensayo Clnico tendr una
vigencia de 12 meses a partir de su emisin. Para aquellos ensayos clnicos cuya
duracin sea mayor a 12 meses, el patrocinador es responsable de solicitar la renovacin
de dicha autorizacin al menos 30 das previos a su expiracin, por lo que debe realizar
las gestiones respectivas para obtener la renovacin de la autorizacin, segn lo
establecido en el Manual de Procedimientos.
d) investigacin he informacin.
esta referida a la investigacin pura y aplicada al desarrollo de nuevos conocimientos y
busca de nuevos mtodos y tcnicas de las ciencias qumicas y farmacuticas para
prevenir enfermedades y resolver problemas y darla un beneficio de la salud humana y
animal y vegetal incluye la informacin de medicamentos y txicos y los resultados de las
investigaciones.
2.4 Hiptesis
Hiptesis general
22
Almenos una dosis ensayada resultara ser la dosis letal, dosis letal media y dosis
efectiva del herbicida Roundup en tilapia.
Hiptesis especficas
La alteracin celular como metaplasia, hiperplasia, displacia u otras sern los
cambios morfolgicos que genere el toxico sobre cierto tipo celular de los individuos
en estudio.
Alteraciones hormonales, metablicos y o bioqumicos generar el toxico en los
individuos en estudio.
La temperatura, la concentracin de solidos suspendidos, la concentracin de
oxgeno, el pH sern factores que influyan en el proceso de evaluacin del toxico
solo los individuos experimentales.
2.5 Variables
Variable Independiente (X)
X: Dosis.
Variable Dependiente (Y)

Y: Efecto (Dosis letal, dosis letal media y dosis efectiva)
Operacionalizacin de las variables
23
Tabla N 3: Operacionalizacin de las variables
VARIABLE DEFINICIN CONCEPTUAL DEFINICIN

DIMENSIN INDICADORES ESCALA DE MEDICIN
OPERACIONAL
INDEPENDIENTE La Dosis es la cantidad de Las dosis se llevan a Modificacin del Modificacin de habitad, Razn/proporcin.
Dosis cabo con la finalidad de rgimen. alteracin los especmenes,
toxico que penetra en el
cumplir las metas etc. Razn/proporcin.
organismo y una sustancia propuestas, a cargo de Transformacin del Continua:
los estudiantes. La dosis territorio y
que provoca la muerte de la
es la cantidad de toxico construccin de un Poblacin depende de su Razn/proporcin.
poblacin animal debido a la que ser asignada para habitad. alimento para sobrevivir
cada muestra con durante el proceso de Razn/proporcin.
exposicin a la sustancia por
finalidad de encontrar la Procesos. aclimatacin.
cualquier va distinta a la concentracin necesaria
para matar a la poblacin Alteracin en su
inhalacin.
requerida. ciclo inmunolgico.
DEPENDIENTE Cambios y/o alteraciones Los impactos en los Alteracin en su Nivel de volumen, Razn/proporcin.
positivas o negativas que especmenes pueden ser ciclo de vida. concentracin de oxgeno, etc. Continua:
Efecto puede sufrir cada uno de negativos,
los medios, ya sea fsico o Alteraciones del en Aparicin de signos y sntomas Razn/proporcin.
biolgico. diferente sistema de producto de enfermedades. Continua: mg/L
los individuos de las
reas de influencia.
FUENTE: Elaboracin propia, 2016.
24
CAPITULO III: METODOLOGA DE LA INVESTIGACIN
3.1. mbito de estudios
Espacial
El estudio se desarrollar en el pasaje 23 de octubre con pasaje Unin 1 en
la Planicie en la cual se realizar la parte concerniente a la alimentacin, aclimatacin y
estabilidad de los peces; la evaluacin de la dosis letal, dosis letal media y dosis efectiva
en el mismo lugar con las coordenadas 345336.03 m E y 9284539.02 m S.
Temporal
La investigacin se llevar a cabo en un tiempo estimado de tres (03) meses,
que comprende desde abril del 2016 hasta junio del 2016; de los cuales corresponde un
(01) mes a los trabajos de gabinete inicial, un (01) mes a la etapa de aclimatacin y
evaluacin y un (01) mes basado a los estudios de gabinete final.
3.2. Tipo de Investigacin

Investigacin experimental: Se presenta mediante la manipulacin de una
variable experimental no comprobada, en condiciones rigurosamente controladas, con el
fin de describir de qu modo o por qu causa se produce una situacin o acontecimiento
particular.
3.3. Nivel de Investigacin

El nivel de la Investigacin, es descriptiva experimental, porque
fundamentalmente analiza la determinacin de la concentracin de Dosis Letal, Dosis
Letal Media (DL50) y Dosis Efectiva del herbicida Roundup sobre ecosistemas acuticos
en tilapia, en condiciones experimentales.
3.4. Mtodo de la investigacin

Se aplic la metodologa de la investigacin de Hernndez Sanpieri, Roberto,
donde manifiesta que en este tipo de investigacin se describe los fenmenos,
situaciones, contextos y eventos; o cualquier otro fenmeno que se someta a un anlisis
etc. La aplicacin metodolgica se dio en tres etapas, como se detalla a continuacin.
25
PRIMERA ETAPA: Etapa de gabinete inicial
1. Bsqueda de informacin bibliogrfica:
2. Coordinacin con la institucin Estacin Pesquera de Aguashiyacu Para la obtencin
de los especmenes a estudiar.
3. Coordinacin con la vidriera KIKE para la elaboracin de las dos peceras.
4. Coordinacin para la compra de materiales, equipos e instrumentos tiles para el
desarrollo del presente proyecto.
SEGUNDA ETAPA: Etapa de Laboratorio

1. Construccin y o adecua-miento de los acuarios con su respectiva oxigenacin.
2. Transporte de los especmenes desde la Estacin Pesquera de Aguashiyacu hasta la
Planicie Pasaje Unin con 23 de octubre.
TERCERA ETAPA: Etapa de Laboratorio

1. Ubicacin en un lugar adecuado para evitar los rayos solares y no se caliente el agua
evitando el aumento de temperatura.
2. Con los especmenes comprados se procede al aclimata-miento durante 15 das.
3. Evaluacin de su tamao y peso promedio.
4. Alimentacin balanceada tres veces al da segn el tiempo peso y tamao promedio
registrado.
CUARTA ETAPA: Etapa de gabinete final

1. Evaluacin con finalidad de encontrar los datos requeridos a diferentes
concentraciones.
2. Presentacin e interpretacin de los resultados.
3.5. Diseo de la investigacin

La Investigacin tiene un diseo experimental, descriptivo que tuvo como
saber el impacto ocasionado por el herbicida en los ecosistemas acuticos en este caso
la tilapia; as mismo realizar una descripcin e interpretacin de la informacin obtenida.
El plan para desarrollar la investigacin considera:
Obtencin de informacin cuantitativa en los reportes llenados en la ficha
previamente elaborada.
26
Evaluar los cambios que ocasione el herbicida en los especmenes durante el
periodo de exposicin.
3.6. Poblacin y muestra

Poblacin
En la poblacin se encuentran 300 alevines, tilapia Niltica gris del rio Nilo (frica)
Muestra
Se consideran 10 individuos para cada anlisis y 10 para o testigo o control
3.7. Tcnicas e instrumentos de recoleccin de datos

Tcnicas
Observacin directa en campo.
Anlisis documentales, fsicos y virtuales.
Anlisis de contenidos, fsicos y virtuales.
Aplicacin de mtodos estandarizados.
Instrumentos
Una pecera para aclimatacin con dimensiones 1m de largo, 45 de ancho y 80 de
alto.
Una pecera para la evaluacin respectiva, con dimensiones de 1m de largo, 45 de
ancho y 25 de alto con, con tres divisiones.
Agua procedente del canal de riego para la aclimatacin.
Glifosato Roundup.
Peces
Hoja de bistur.
Boba para oxigenar el agua.
Comida para peces inicio de 45%.
Ficha para apuntar los datos.
Lapicero PILOT BP. S FINE.
Uso de la balanza analtica para determinar el peso promedio.
Regla para medir el tamao promedio.
Agua destilada.
Peachmetro (pH)/ C.
27
Conductivimetro EC/TDS/TEMP COM-100.
Laptop TOSHIBA.
Cinta de embalaje.
Bolsas de despacho.
Calculadora CASIO fx-350 ES PLUS.
Laminas MIROSCOPE SLIDES.
Wuite colorante.
De-clorador de agua.
Guantes.
Mascarilla.
3 pilas para el Conductivimetro EC/TDS/TEMP COM-100.
4 pilas para el peachmetro (pH/C).
3.8. Procedimiento de recoleccin de datos

Revisin bibliogrfica
Se realiz una seleccin y revisin de materiales bibliogrficos referidos a la
evaluacin de la dosis letal, dosis letal y dosis efectiva, Tambin se revis material
bibliogrfico sobre mtodos de evaluacin de las dosis.
3.9. Tcnicas de procesamiento y anlisis de datos

La informacin bibliogrfica necesaria se sistematizo adecuadamente de las
diferentes fuentes bibliogrficas como se menciona lneas arriba. Esta informacin fue
relevante en la elaboracin del marco terico o fundamentos tericos del tema de
estudio. La informacin fue ordenada de manera sistemtica de acuerdo a su
importancia y tiempo de utilizacin en el desarrollo del trabajo.
Los especmenes durante un periodo de aclimatacin de 15 das
28
CAPITULO IV: Resultados
4.1. Presentacin de resultados
Peso y tamao promedio
De acuerdo a informacin recopilada durante el periodo de aclimatacin es

necesario alimentar a la poblacin de estudio para hacerlo fuertes a vivir en condiciones
de cautiverio; para su alimentacin respectiva se sacaron el 5% formula (4.1) de la
poblacin, se encontr el peso medio formula (4.2), se calcul la biomasa mediante la
frmula (4.3) y se calcul la alimentacin formula (4.4), Necesaria, dividido con el
porcentaje establecido en la (Tabla N 4.) Dividido el resultado entre tres para su
alimentacin diaria.
Tabla N 4: Alimentacin
Peso en gramos % Racin alimento
1 14 10
15 20 6
21 34 5
35 - -44 4
45 54 3
55 229 2.5
230 330 2
331 380 1.9
381 432 1.8
433 516 1.6
FUENTE: Alimentacin de tilapia PRONAGRO.
Tabla N 5. Peso biomasa tamao y alimentacin.
Peso Biomasa g Tamao cm Alimentacin g / da

medio g
Inicial 3 60 2.8 6
Final 8 159 5.1 15.9
FUENTE: Elaboracin propia 2016.
29
Figura N 2: Peso biomasa tamao y alimentacin diaria
Muestra = (4.1)
Peso medio = (4.2)
Peso medio
Biomasa = peso medio x N total de peces (4.3)

Biomasa = 0.53 x 300 = 159 gramos
Conversin alimenticia = biomasa x % de tabla / 100 (4.4)
Alimento diario inicio del 45 % para crecimiento, 3 veces al da.
30
Tabla N 6. Alimentacin diaria
Alimentacin g / da
Maana 7:00 am 5.3
Tarde 12:00 pm 5.3
Noche 6:00 pm 5.3
TOTAL 15.9
Figura N 3: Alimentacin diaria ofrecida a los alevines en estudio.

Sobrevivientes al periodo de aclimatacin

Para obtener resultados ms confiables se tom en consideracin
aclimatarlos a los especmenes en condiciones de experimento durante un periodo de 15
das como se muestra en el (Anexo N 2; fotografa N 1) aclimatacin Durante el
periodo de aclimatacin; por cambios de temperatura y/o habitad murieron 38 y
sobrevivieron 262 individuos como se muestra en la (Tabla N 7, Figura N 4).
Tabla N 7. Individuos en el periodo de aclimatacin.

Sobrevivientes al periodo de aclimatacin
Vivos 262
Muertos 38
TOTAL 300
31
Figura N 4. Nmero de la poblacin sobreviviente durante el periodo de aclimatacin
por motivos de cambio brusco en su alimentacin y/o temperatura, etc. los especmenes
murieron 38 individuos.
Evaluacin general de parmetros y dosis requerida
Para encontrar los datos requeridos se elabor una tabla para llenar los
datos obtenidos durante la evaluacin y durante el periodo de observacin realizada,
insitu de experimento, como se muestra en la (tabla N 8).
32
Tabla N 8. Evaluacin general
Evaluacin general de la Dosis Letal, Media (DL50)
E EC (C) (d) mg L (Wp) kg V m pH t
T1 10 206 28.5 ---- 10 0.053 10 0 7 7:30 am LEYENDA
M1 10 234 28.5 1151000 10 0.053 8 2 7 7:30 am E= Expuesto
T2 10 206 27.5 ---- 10 0.053 10 0 7 9:00 pm EC=conductividad elctrica S
M 2 10 304 27.5 2302000 10 0.053 5 5 7 9:00 pm (C)= temperatura
T3 10 206 28.5 ---- 10 0.053 10 0 7 9:00 am (d)=Concentracin en mg
M 3 10 335 28.5 3653000 10 0.053 4 6 7 9:00 am (Wp)= peso de peces en kg
T4 10 206 27 ---- 10 0.053 10 0 7 7:30 pm T= Testigo o control
M 4 10 346 27 4604000 10 0.053 2 8 7 7:30 pm M= Muestra
T5 10 206 27.5 ---- 10 0.053 10 0 7 7:30 am V= Vivos
M 5 10 387 27.5 5755000 10 0.053 0 10 7 7:30 am m= Muertos
T6 10 206 28.5 ---- 10 0.053 10 0 7 9:00 pm pH= potencial de hidrogeno
M 6 10 337 28.5 6906000 10 0.053 0 10 7 9:00 pm t= Tiempo
T7 10 206 28.5 ---- 10 0.053 10 0 7 7:30 am L= titos de agua
M 7 10 428 28.5 8057000 10 0.053 0 10 7 7:30 am
Total 140 27.5 32428000 140 0.742 89 51 7 94 h
33
Numero de tilapias expuestas
Para encontrar la dosis requerida se utilizaron 4 muestras y 4 testigos en la

primera evaluacin. En cada muestra y testigo se aadi 10 litros de agua, y un alevn
por cada litro, con un total de 80 peces en evaluacin, dando como resultado en la
primera evaluacin la muerte de todos los alevines, esto nos llev a hacer 3
evaluaciones posteriores, bajo los mismos procedimientos excepto las concentracin,
por ltimo en la tercera evaluacin se redujo la concentracin a 1151000 mg / 0,053 kg
en peso vivo en 10 litros de agua que corresponde a un litro por cada tilapia en cada
pecera de evaluacin, teniendo en observacin durante un periodo de 96 horas 4 das,
habiendo utilizaron 10 tilapias por cada muestra y 10 por cada testigo as como se
muestra en el (Anexo N 2; fotografas 2 y 3), se evalu en 7 muestras y 7 testigos o
control con un total de 140 alevines en evaluacin como se muestra en la (figura 5).
Figura N 5. Evaluacin 3ra, el nmero de alevines fueron 140, habiendo utilizado 7

muestras y 7 controles, 10 especmenes por cada muestra y control o testigo.
34
Concentracin de Roundup en las muestras
Las concentraciones fueron progresivamente aumentando hasta encontrar

las dosis requeridas especificadas en los objetivos.
Figura N 6. Concentracin de Roundup aplicado en cada nuestra evaluada en mg / kg

de peces.
Temperatura
El clima de San Martin por lo general tropical (clido hmedo propio y
caracterstico de selva alta). Segn la informacin registrada se encontr que la
temperatura oscilaba entre 27 a 28,5 C, ver a continuacin la (figura 7).
Figura N 7. Datos de temperatura en los das de evaluacin.

35
Conductividad elctrica.
En la conductividad elctrica evaluamos los distintos parmetros que hubo en

nuestro sistema acutico dando buenos resultados en la poblacin de alevines al
glifosato.
Figura N 8. Conductividad elctrica registrada en los das experimentales.

FUENTE: Elaboracin propia 2016
Potencial de hidrogeno
El potencial de higrogeno que se muestra en la figura a continuacion fue

tomada en cada muestra y en cada testigo que no se encontro ninguna variacion tras a
ver inducido el hervicida Roundup.
Figura N 9. Potencial de hidrgeno registrado en la evaluacin.

36
Alevines muertos en la exposicin.
En la evaluacin se obtuvo una buena dosis en la poblacin de alevines,

generando una dosis ptima en el proyecto que se realiz, dando como resultado la
muerte de los peces en las diferentes muestras como se muestra a continuacin en la
(figura N: 10).
Figura N 10. Peces muertos registrados en la exposicion a diferentes cantidades de

Roundup.
Alevines vivos posteriormente a la exposicin
En la exposicin realizada se tuvo en consideracin el tiempo requerido de

96 horas equivalente a 4 das en observacin; y al trmino se observ que la evaluacin
fue correcta puesto que no murieron ningn individuo de los testigos y lo que no
murieron en las muestras M1 = 8, en la M2 = 5 individuos correspondiente a la DL 50, en
la M3 = 4 y en la M4 = solo se registr dos individuos vivos, como se muestra a
continuacin.
37
Figura N 11. Peces vivos registrados tras haber cumplido el periodo de exposicion y
onservacin se demostro que en el contro o testigo no se registraron muerto a diferencia
de las muestras expuestas a diferentes concentraciones.
DOSIS LETAL.
Para encontrar la dosis letal (DL) se tom en consideracin el mismo

procedimiento en la cual se increment la cantidad hasta que en la M5 en exposicin y
observacin se registr a las 96 horas se registr que toda la poblacin haba muerto
habiendo sido expuesta a una concentracin de 5755000 mg de Roundup en 0,053 kg
por peso vivo, correspondiendo a la dosis letal porque todos de la poblacin expuesta
haba muerto, como se muestra a continuacin en la (figura N12).
38
Figura N 12. En la presente figura se demuestra que La Dosis Letal es 5755000 mg de
Roundup por cada 0,053 kg de peso vivo en necesario para matar a toda la poblacin
expuesta, tras haber hecho evaluaciones repetitivas con las mismas concentraciones y
bajo las mismas condiciones.
DOSIS LETAL MEDIA (DL50)
La dosis letal media o concentracin letal media, es lo mortalidad de la mitad

de la poblacin, evaluando a diferentes concentraciones hasta encontrar la dosis
requerida, se registr que en la M2 a una concentracin de 2302000 mg en 0,053 kg de
peso vivo en 10 L de agua correspondiente a un alevino por cada litro de agua como se
muestra en la (figura N 13).
Figura N 13. La Dosis Letal Media en de 2302000 mg por cada 0,053 kg en peso vivo.
39
4.2. Discusin de resultados
Segn Conesa F. Vtora. Los impactos ambientales se generan comnmente
en la ejecucin de todos los proyectos, donde es necesario la utilizacin de mtodos
diversos para la identificacin y valorizacin, es as que los mtodos cualitativos y
cuantitativos como las listas de chequeo, Matriz de Leopold, Bathle, Causa efectos y
otros son de gran importancia para lograr identificar aspectos ambientales significativos
a priorizar durante la formulacin del Plan de Manejo Ambiental. Mientras que el
diagrama de causa efecto, ltimo mtodo utilizado para la identificacin de impactos
ambientales, nos permiti tener un panorama global del proyecto y sus impactos,
adems de identificar cules de estos impactos se producirn tanto de manera directa y
cules de manera indirecta en las reas de influencia.
Conclusiones
El organofosforado es un producto corrosivo cuando entran en contacto con los tejidos
vivos, pueden llegar a producir destruccin de los mismos.
40
Acta a nivel de acetil colina ocasionando una diseminacin de este puesto que, al ser
expuesto el individuo, este acta a nivel cerebral rompiendo las.
Por su principio activo es un producto altamente toxico en peces que puede matar con tan
solo 11511000 mg por 0.53 kg de peso corporal puede ocasionar trastornos y o la muerte.
Se observ que, en condiciones de experimento, el herbicida genera grande impacto directo
como se registr en las muestras M2 a una concentracin de 2302000 mg, en 0.53 kg en
peso vivo corporal tras a ver culminado el periodo de observacin los peces empezaban a
cambiar de su color natural a un color naranja claro.
Tiene la facilidad de ocasionar alteracin en su sistema nervioso central dejando a los
alevines en jake.
En las muestras M3, M4 los especmenes expuestos fueron afectados directamente a su
piel ya que empezaron a morir lentamente mediante muerte de clulas empezando desde
cabeza.
Como es un organofosforado este ataca a nivel de acetil colina en logrando dispersarla o
diseminarla provocando la muerte de los individuos expuestos.
Recomendaciones
Se deber implementar un programa que promueva a reciclar los embaces posterior de su
uso ya que puede ser muy agresivo para la salud.
41
Almacenar estos productos en lugares seguros evitando el contacto directo con las
personas ya que puede ocasionar grandes efectos negativos a los humanos provocando el
mismo efecto que en peces.
Evitar cualquier tipo de contacto ya que puede provocar deficiencia en el sistema del cuerpo
dependiendo al tipo de exposicin.
Reducir el uso de este glifosato porque en muy daino para la salud en un posible contacto.
Referencias Bibliogrficas
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42
2. Casley J.C. Manejo de malezas para pases en desarrollo, Herbicidas. Deposito
Documentos de la FAO. Captulo 10.
3. Gamez Rojas, C. and Ramirez Riveros, E. (2008). Determinacin de la Concentracin Letal
Media (cl50-48) del herbicida Roundup 747 sobre ecosistemas acuaticos mediante pruebas
toxicologicas con daphnia magna.. ingeniero. universidad de la salle, facultad de ingeniera
ambienta y sanitaria, bogot d.c.
4. Barros Santiago, C. and Gamez Rojas, V. (2008). Determinacin de la Concentracin Letal

Media (cl50-96) del Glifosato Roundupr 747sg, por medio de bioensayos utilizando alevinos
de trucha arco iris (oncorhynchus mykiss). ingeniero. Uiversidad de la Salle, Facultad de
Ingenieria Ambiental y Sanitaria, Bogot d.c.
5. Lpez Martnez, L. (2009). Determinacin de la Concentracin Letal Media (cl50-48) del

cloro en el efluente de una industria tipo mediante bioensayos de toxicidad acutica
utilizando Daphnia Pulex. Ingeniero. Universidad de la Salle, Ingeniera Ambiental y Sanitaria
Bogot d.c.
6. PIEROS ROJAS, G. (2008). Determinacin de la concentracin letal media (cl50)

del Glifosato Roundup 747 sg ((NH4) C3H7NO5P), por medio de bioensayos de
toxicidad acutica sobre Daphnia Pulex. Ingeniero. Universidad de la Salle,
Facultad de Ingenieria Ambiental y Santaria.
7. Saavedra, M. (Agosto de 2006). Manual del Cultivo de Tilapia.
8. TOXICOLOGIA AMBIENTAL 1996-2001. Evaluacin de Riesgos y Restauracin Ambiental,

The University of Arizona
43
ANEXOS
44
Anexos N 1
TABLA N 9: Evaluacin general
Evaluacin general de la Dosis Letal, Media (DL50).
E EC (C) (d) mg L (Wp) kg V m pH t
T1 LEYENDA
M1 E= Expuesto
T2 EC=conductividad elctrica S
M 2 (C)= temperatura
T3 (d)=Concentracin en mg
M 3 (Wp)= peso de peces en kg
T4 T= Testigo o control
M 4 M= Muestra
T5 V= Vivos
M 5 m= Muertos
T6 pH= potencial de hidrogeno
M 6 t= Tiempo
T7 L= volumen de agua en litros
M 7
Total
45
ANEXO 2: Panel fotogrfico.
FOTOGRAFA 01: Periodo de aclimatacin durante 15 das.

FOTOGRAFA 02: adecua-miento inicial y evaluacin a diferentes concentraciones.

FUENTE: Elaboracin propia, 2016
FOTOGRAFA 03: tercera evaluacin a diferentes en mg M1 = 1151000, M2 =
2302000, M3 = 3653000, M4 = 4604000, M5 = 5755000, M6 = 6906000 y M7 =
8057000 mg de Roundup por cada 0.053 kg de peso corporal.
FOTOGRAFA 04: herbicida Roundup

FOTOGRAFA 05: Toma de muestras con Conductivimetro EC/TDS/TEMP COM-100.
FOTOGRAFA 06: Etiquetado de las muestras para remitirlos al laboratorio para su

observacin.
FUENTE: Elaboracin propia, 2016
.
A B
C D
FOTOGRAFA 07: procedimiento como se muestra en las imgenes A, B, C, D y E se

muestra el proceso que se realiza para obtener el cerebro para ser observada en el
microscopio; en la imagen D se muestra la forma y tamao del cerebro.
FOTOGRAFA 08: preparacin del colorante wrigth para colorear las lminas.
FOTOGRAFA 09: observacin y comparacin de clulas expuestas al herbicida con

su control.
FOTOGRAFA 09: observacin y comparacin de acetil colina en esta se muestra el
control est intacto puesto que ha sido expuesto al herbicida.
FOTOGRAFA 09: observacin y comparacin el herbicida a una concentracin de

8055000 mg en 0.053 kg peso corporal, actuado a nivel de acetil colina, diseminando
esta como se muestra en la imagen

"Determinación de La Concentración de Dosis Letal, Dosis Letal Media y Dosis Efectiva Del Herbicida Roundup en Tilapia Nilótica Gris, en Condiciones Experimentales".

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UNIVERSIDAD PERUANA UNIN

FACULTAD DE INGENIERA Y ARQUITECTURA

DETERMINACIN DE LA CONCENTRACIN DE DOSIS LETAL, DOSIS

Morales, junio de 2016

TABLA DE CONTENIDOS ......................................................................................................................... 2

El presente proyecto busca por medio de la realizacin de ensayos toxicolgicos,

Realizando pruebas de bioensayos que permitan medir el efecto de uno o ms

1.2. Formulacin del Problema de Investigacin

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Se determin la Concentracin Letal Media (CL50) y la eficacia como

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b) Relacin dosis-efecto: es la relacin entre la dosis y el efecto a nivel individual.

c) Relacin dosis-respuesta: es la relacin entre la dosis y el porcentaje de

d) Toxicologa ambiental: la toxicologa ambiental evala los impactos que

f) Ruta de exposicin: es el camino que sigue un agente qumico en el ambiente

g) Va de exposicin: es el mecanismo por medio del cual el txico entra en el

h) Ingestin: cuando el txico se ingiere, entra al TGC, (tracto gastrointestinal) la

i) Inhalacin: la inhalacin es la va de exposicin a gases, vapores de lquidos

La regin del aparato respiratorio en el que se depositan las partculas

k) Tiempo de exposicin: para la toxicologa ambiental las exposiciones se

l) Exposiciones agudas: efecto letal u otro efecto producido en un tiempo

b) Concentracin Letal Media CL50: concentracin letal 50 es la concentracin,

c) Partes por milln (ppm): para determinar la concentracin de una substancia

a) Efecto agudo: corto tiempo de exposicin (horas, das) donde la severidad es la

d) Respuesta: proporcin de la poblacin expuesta al txico que manifiesta el efecto

Los bioensayos, o pruebas de toxicidad son experimentos que miden el

Para proteger el medio acutico es necesario fijar lmites superiores a las

Los individuos son expuestos a concentraciones crecientes del txico para

Los bioensayos toxicolgicos tienen por finalidad determinar las

Figura 1: Clasificacin de bioensayos.

Tabla N 1: Taxonoma tilapia

Fuente: Medicina veterinaria y zootcnica de Ambato

b) Morfologa: la familia Cichlidae se caracteriza por presentar especies de

c) Reproduccin: la madurez sexual, en funcin de la edad y la talla, es por lo

d) Alimento: las tilapias se alimentan en ambiente natural de una amplia variedad de

La tilapia niltica es muy eficiente en consumo de algas del

e) Habitad: dentro de reas originales de distribucin, las tilapias han colonizado

G. EVALUACIN DE LA CRIANZA ANTES DE REALIZAR LA EXPERIMENTACIN O

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b) Temperatura: para logara reproduccin es necesario criarlos a su Temperatura:

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Su frmula e ingrediente activo es N-fosfonometilglicina,

b) Clasificacin de herbicidas: los herbicidas se clasifican segn su finalidad, su

2.3 Bases legales

Variable Dependiente (Y)

Operacionalizacin de las variables

VARIABLE DEFINICIN CONCEPTUAL DEFINICIN

FUENTE: Elaboracin propia, 2016.