CULTIVOS CONTINUOS

Cultivos Continuos

SR
Reservorio

FI = F S
FI
FS X

X
S
V constante S
P
P

Quimiostato
 Cultivos Continuos
Ventajas

* incremento en la productividad por reduccin de los tiempos

de preparado del bioreactor.

permite determinar distintos parmetros cinticos ( max,

KS, Yx/s, etc).

* al poder controlar es posible trabajar a una ptima

para la sntesis del producto de inters.
 Cultivos Continuos
Ventajas

*ideal para realizar estudios fisiolgicos y optimizacin de

medios de cultivo

*Condiciones constantes Genmica, transcriptomica,

proteomica, metabolmica

* posibilidad de adaptar el proceso a las capacidades del

bioreactor.

* ideal para aislamiento de un determinado tipo de

microorganismo por enriquecimiento y seleccin.
 Cultivos Continuos
Desventajas

* mayor posibilidad de contaminacin

* los instrumentos de control deben permanecer

estables durante largos perodos de tiempo

* mutaciones, prdida de la cepa original

 Velocidad de Dilucin
En un sistema continuo el volumen del bioreactor se
mantiene constante, mientras que ingresa medio fresco a un
determinado flujo (F) existe otro flujo igual de salida que
saca medio +clulas. La relacin entre flujo y volumen en un
sistema continuo se llama tasa de diulcin o velocidad de
dilucin D

D= F
V
D tiene unidades de h-1 igual que la velocidad especfica
de crecimiento .

La inversa de D se llama tiempo de residencia y es el

tiempo que se requiere para renovar completamente el
volumen del bioreactor
 Balance de Biomasa
Balance de Biomasa = cel. entran - cel salen + cel. crecen - cel. mueren

dx F Xo - F X + X - KD X
=
dt V V
Suponiendo que Xo = 0, kd, F/V = D

dx = X - D X
dt

Reordenando queda:
dx
= ( - D)X
dt

En el estado estacionario dx / dt = 0 = D
 Balance de sustrato limitante
SR = concentracin de sustrato limitante en el reservorio
s = concentracin de sustrato limitante en el bioreactor

acumulacin sust. = Sust. entran - sust. sale - sust. Cons. biomasa - sust. mant. - sust. producto

ds = D SR - D s - X - mS X - qP X
dt Yxs YPS

mS X X Y formacin de producto despreciable

Yxs

ds = D SR - D s - X
dt Yxs

ds = D (SR s) - X
Reordenando queda,
dt Yxs
En estado estacionario ds/dt = 0

0 = D (SR s) - X
Yxs

Como en el estado estacionario = D

X = Yxs (SR s)
 Biomasa y sustrato limitante en el estado
equilibrio o estacionario (steady state)
max s
=
KS + s
Si = D
max s
D=
KS + s

Despejando y reordenando queda que la concentracin

de sustrato limitante en el estado estacionario es,
D KS D (KS + s) = max * S
s= D KS + D s = max * s
(max D) D KS = max s - D s
D KS = s (max - D)
Reagrupando la ecuacin D KS
s= queda
(max D)

D KS = s (max - D)
1
D KS = s max - s D
D
D KS + s D = s max
D (Ks + s) = s max
1 KS
max MAX
KS + s
1
=
D max s 1
- 1 s
Ks
1 KS 1 1
= +
D max s max
Sabemos que X = YXS (SR - s). Si se sustituye,

D KS
s=
(max D)

Queda,
D KS
X = Yxs SR -
(max D)

La ecuacin permite demostrar que la biomasa en el

estado estacionario depende de la velocidad de
dilucin y de la concentracin del sustrato limitante.
Valores del Estado estacionario de concentracin de biomasa
y sustrato limitante en un quimiostato de acuerdo a las
ecuaciones.
 Clculo del rendimiento verdadero (YG) )y del
coeficiente de mantenimiento (mS).
ds = ds + ds
dt dt M dt G

reescribiendo la ecuacin, considerando las velocidades de

consumo de sustrato para crecimiento y mantenimiento
queda:
ds = qS X = qSG X + qSM X
dt
donde qcrec.= mS/ YG y donde YG es el rendimiento
verdadero y qmant es mS= coeficiente de mantenimiento

1 mS 1
= +
YXS YG
 1 mS 1
= +
YXS YG

Si graficamos 1/ vs. 1/Y podemos hallar grficamente

los valores de mS (pendiente) y YG ( verdadero)
interseccin en el eje y.

1
YXS

1 Pendiente = mS
YG

1
D
 Balance de Producto

dp = qP X - D p
dt
produccin remocin

y si en estado estacionario dp/dt = 0

qP X
p= p = concentracin de producto
D en estado estacionario
 Productividad

QP = D X QP = D p
Sabemos que
D KS
X = Yxs SR -
(max D)

Reemplazando queda

D KS
QP P = D Yxs SR -
(max D)
Representacin grfica para hallar Efecto de la velocidad de dilucin en
la dilucin ptima con mxima la produccin de la protena de
productividad. fusin aprotinina:b--galactosidasa
 Dilucin critica y max

Si D > max dx/dt es negativo por lo tanto hay

lavado de biomasa y s tiende a SR entonces;
max SR
Dcrit = C11
KS + SR
Y tenemos que

dx
= ( - D)X C12
dt

A una D >> max la solucin de la ecuacin es :

Xt = Xo e [(max D) t] C13
 y

ln Xt = ln Xo + (MAX D) t

despejando max queda:

lnXt- lnXo
MAX = + D
t

Esto se puede calcular grficamente realizando una curva

de t vs. ln biomasa, la diferencia entre la pendiente de
lavado de biomasa y la D es igual a max. .
 Clculo de max por mtodo de lavado

ln X

max - D

t
 Cultivos Continuos
Ventajas

* incremento en la productividad por reduccin de los tiempos

de preparado del bioreactor.

permite determinar distintos parmetros cinticos ( max,

KS, Yx/s, etc).

* al poder controlar es posible trabajar a una ptima

para la sntesis del producto de inters.
 Cultivos Continuos
Ventajas

*ideal para realizar estudios fisiolgicos y optimizacin de

medios de cultivo

*Condiciones constantes Genmica, transcriptomica,

proteomica, metabolmica

* posibilidad de adaptar el proceso a las capacidades del

bioreactor.

* ideal para aislamiento de un determinado tipo de

microorganismo por enriquecimiento y seleccin.
 Cultivos Continuos
Desventajas

* mayor posibilidad de contaminacin

* los instrumentos de control deben permanecer

estables durante largos perodos de tiempo

* mutaciones, prdida de la cepa original

Balance de biomasa Balance de substrato

dx ds X
= ( - D)X = D (SR s) -
dt dt Yxs

D KS
X = Yxs (SR s) s=
(max D)

D KS
X = Yxs SR -
(max D)
 Balance de Producto

dp = qP X - D p
dt

QP = D p
 Permite estimar parmetros cinticos

1 KS 1 1 max
= +
D max s max KS

mS 1 mS
1 +
=
YXS YG YG

Tcnica de lavado

ln Xt = ln Xo + (MAX D) t max