Introduccin

A travs de la historia y especialmente a partir de la Revolucin Industrial, los hombres han

producido contaminantes muy peligrosos, los cuales han sido gradualmente depositados en
el ambiente. Los elevados niveles de metales txicos no biodegradables, encontrados en
sectores urbanos, son el resultado de una actividad antropognica indiscriminada (Granadillo,
1993). Por ejemplo, en la antigedad el plomo era muy comn y probablemente fue usado
primero con propsitos cosmticos y para hacer adornos (Aitcheson, 1960). La
contaminacin creciente de suelos y cuerpos de agua continentales a todo lo largo y ancho de
nuestro planeta tiene un fuerte impacto en el equilibrio de ecosistemas naturales y la calidad de
vida de la poblacin humana. Este grave problema demanda soluciones urgentes que no
pueden seguir postergndose ms.

La contaminacin del suelo con metales txicos puede ser frecuentemente el resultado de
diversas actividades humanas, especialmente aquellas relacionadas con la minera, emisiones
industriales, disposicin o filtracin de desechos industriales, aplicacin de aguas residuales en
suelos agrcolas, empleo de abonos, fertilizantes y pesticidas. Debido al elevado potencial de
toxicidad y persistencia de los metales, los suelos contaminados con estos elementos, son un
problema ambiental que necesita una solucin efectiva y promisoria.

Aunque tuvieron que ser desarrollarse numerosas tcnicas para remover metales desde los
suelos, muchos lugares permanecen an contaminados; porque los costos econmicos y
ambientales para limpiarlos superficialmente con las tecnologas disponibles son demasiado
elevados. De acuerdo con Ensley(2000), los gastos estimados contrados en la remediacin de
un lugar contaminado con Pb, utilizando la tcnica convencional mediante excavacin y
desprendimiento de tierras, comnmente propuesta y practicada en los Estados Unidos; son de
aproximadamente 150 a 350 dlares por tonelada. Los mtodos de restauracin ambiental de
suelos contaminados con metales utilizando una tecnologa basada en el uso de plantas, tiene
un inters atrayente que se ha incrementado en las dos ltimas dcadas. En este contexto,
tuvo que desarrollarse la fitorremediacin a un costo efectivo y ambientalmente como
un mtodo amigable de remediacin de suelos contaminados. Este tipo de remediacin de
suelos contaminados utilizando plantas, puede costar alrededor de 80 dlares por tonelada
(Ensley, 2000) 0,25 millones de dlares por hectrea (Cunningham & Berti, 2000), lo cual
hace a este un mtodo econmicamente atractivo para descontaminar suelos contaminados
por metales pesados.

La fitorremediacin es una tecnologa biolgica emergente que utiliza las plantas y los
microorganismos asociados a la rizsfera, para remover, transformar o contener sustancias
contaminantes localizadas en suelos, sedimentos, acuferos, cuerpos de agua e incluso de
la atmsfera. Esta tecnologa ambiental ha experimentado crecimiento acelerado durante la
ltima dcada. Aunque los primeros reportes datan de 1993, el periodo importante
de innovacin empez en 1996. Desde entonces a la fecha se han publicado 4576 artculos y
483 revisiones de esta temtica. Los estudios de fitorremediacin pueden clasificarse en dos
grandes grupos: 1) La biorremediacin de sustancias orgnicas recalcitrantes o peligrosa,
donde el principal objetivo es degradar los contaminantes hasta obtener un producto menos
txico (los contaminantes orgnicos ms estudiados son los contaminantes derivados
del petrleo como los hidrocarburos poliaromticos y los explosivos peligrosos como el TNT) y
2) La remocin de sustancias txicas elementales, grupo en el que estn comprendidos los
metales pesados y los elementos radioactivos (Weiss et al, 2006).

Tanto en artculos como en patentes, el rea ms intensamente estudiada es la de metales

pesados. La mayor parte de los artculos publican resultados experimentales con algunas
plantas en particular. Tambin se estudian intensamente los mecanismos de acumulacin de
metales, que involucran quelacin extracelular o intracelular, precipitacin,
compartamentizacin y traslocacin en el sistema vascular. Hay 53 patentes registradas en
todo el mundo; las compaas y grupos de investigacin que protegen esta oferta tecnolgica
estn localizados en Corea, Japn, China, Estados Unidos, Blgica y Espaa. Las patentes
solicitadas pueden dividirse en cuatro grupos:1) Sistemas para extraer metales pesados
de suelo y cuerpos de agua, 2)Procesos generales para aumentar la eficiencia de la
fitorremediacin, 3)Plantas modificadas genticamente que son hiperacumuladoras de metales
pesados y 4)Especies particulares empleadas en fitorremediacin.

La fitorremediacin de suelos contaminados por metales pesados representa una oportunidad

en el mercado de aproximadamente 1 billn de dlares por ao (Glass, 2000), solamente en los
Estados Unidos: el mercado de fitorremediacin incluye actualmente, el 0,5% del mercado total
de remediacin, equivalente a alrededor de 100 a 150 millones de dlares por ao (Pilon &
Smits., 2005).De esta manera existe all una amplia demanda reprimida por aquella tecnologa.
Porque a partir de estos costos relativamente bajos, la fitoremediacin se presenta como un
camino bueno y viable para limpiar los suelos en pases poco desarrollados, donde son
escasos sus fondos pblicos disponibles para la restauracin ambiental.

Para llegar a la utilizacin efectiva de plantas en la remocin de contaminantes de suelos y

cuerpos de agua continentales, es necesario superar los retos tecnolgicos inherentes. Son
tres las principales barreras existentes para el ingreso de esta tecnologa: 1) La identificacin
de especies prometedoras, 2) El establecimiento de procesos eficientes de cultivo para las
especies vegetales seleccionadas y 3) El proceso de mejoramiento gentico (Saad, et., al
2009).

1. Metales pesados

El trmino de metal pesado se refiere a cualquier elemento qumico metlico que tenga una
alta densidad relativa y sea txico o venenoso en concentraciones incluso muy bajas.
(Lucho et al., 2005). Adems se les define como elementos con propiedades metlicas
(conductibilidad, ductilidad, etc.), nmero atmico mayor de 20, y densidad mayor a los 5
g/cm3. Se consideran como metales pesados al plomo cadmio, cromo, mercurio,
zinc, cobre, plata y arsnico; porque constituyen un grupo de gran importancia, ya que
algunos son esenciales para las clulas, pero en altas concentraciones pueden resultar
txicos para los seres vivos (humanos, organismos del suelo, plantas y animales) (Spain et
al., 2003).Estos contaminantes pueden alcanzar niveles de concentracin que provocan
efectos negativos en las propiedades fsicas, qumicas y biolgicas como: reduccin del
contenido de materia orgnica, disminucin de nutrimentos, variacin del pH (generando
suelos cidos), amplias fluctuaciones en la temperatura, efectos adversos en el nmero,
diversidad y actividad en los microorganismos de la rizsfera, dificultan el crecimiento de
una cubierta vegetal protectora favoreciendo la aridez, erosin del suelo, y la dispersin de
los contaminantes hacia zonas y acuferos adyacentes; como consecuencia aumenta la
vulnerabilidad de la planta al ataque por insectos, plagas y enfermedades, afectando
su desarrollo (Zhuang et., al., 2007). Los metales pesados se encuentran generalmente
como componentes naturales de la corteza terrestre, en forma de minerales, sales u otros
compuestos. No pueden ser degradados o destruidos fcilmente de forma natural o
biolgica ya que no tienen funcionesmetablicas especficas para los seres vivos (Abollino
et al., 2002).

Las principales fuentes de metales pesados son las actividades naturales, como
alteraciones producidas en los cerros y volcanes; que constituyen una fuente relevante de
metales pesados en el suelo, as como tambin algunas actividades antropognicas, como
la industria minera que est catalogada como una de las actividades industriales que ms
genera metales pesados. En el suelo, los metales pesados, estn presentes como iones
libres, compuestos metlicos solubles, compuestos insolubles como xidos, carbonatos e
hidrxidos (Pineda, 2004). Los metales pesados contribuyen fuertemente a
la contaminacin ambiental, la cantidad de metales disponibles en el suelo esta
en funcin del pH, el contenido de arcillas, contenido de materia orgnica, la capacidad de
intercambio catinico y otras propiedades que los hacen nicos en trminos de manejo de
la contaminacin (Sauve et al., 2000).

Los metales pesados han sido ampliamente utilizados en muchas actividades, tales como
la agricultura, la minera, la fundicin, la galvanoplastia y el refinado del oro (Rodrguez-
Ortz et al., 2006). Por lo tanto, se han documentado serios problemas asociados a la
contaminacin de los suelos en estas actividades. La acumulacin de metales pesados en
las plantas inhibe o activa algunos procesos enzimticos que afectan suproductividad tanto
cualitativa como cuantitativamente (Miteva et al., 2001). El plomo (Pb), el arsnico (As)
(Codling & Ritchie, 2005), el cadmio (Cd) y el zinc (Zn) (Brown et al., 1994), entre otros
metales pueden ser absorbidos por las plantas (Rodrguez-Ortz et al., 2006) hasta
concentrarse en sus tejidos a niveles txicos. Tal situacin puede ser una posible va de
entrada de estos metales en la cadena alimentaria humana a travs del consumo de
plantas, directa o indirectamente por los seres humanos (Mortvedt, 1996; Chien et
al., 2003). Hay evidencias de que el Pb y Cd han sido la causa de efectos negativos sobre
la salud humana, de la mortandad en animales, y la perturbacin de los ecosistemas
naturales y los agro-ecosistemas. En general, los metales pesados pueden ser
potencialmente txicos para la salud humana.
Los metales pesados son peligrosos porque tienden a bioacumularse en diferentes cultivos.
La bioacumulacin significa un aumento en la concentracin de un producto qumico en un
organismo vivo en un cierto plazo de tiempo, comparada con la concentracin de dicho
producto qumico en el ambiente (Angelova et al., 2004). En un pequeo grado se pueden
incorporar a organismos vivos (plantas y animales) por va del alimento y lo pueden hacer a
travs del agua y el aire como medios de traslocacin y dependiendo de su movilidad en
dichos medios (Lucho et al., 2005).

1.1. Metales pesados en el suelo

Los metales pesados estn presentes en el suelo como componentes naturales del
mismo y tambin como consecuencia de las actividades antropognicas. En los
suelos se pueden encontrar diferentes metales, formando parte de los minerales;
como son silicio (Si), aluminio (Al), hierro (Fe), calcio (Ca), sodio (Na), potasio (K),
magnesio (Mg). Tambin puede encontrarse manganeso (Mn), que generalmente
se presenta en el suelo como xido y/o hidrxido, formando concreciones junto con
otros elementos metlicos. Algunos de estos metales son esenciales en
la nutricin de las plantas, as son requeridos algunos de ellos como el Mn,
imprescindible en la activacin de algunas enzimas (Mahler, 2003), para
el metabolismo vegetal. Se consideran entre otros elementos, a los metales
pesados tales como el plomo, el cadmio, el cromo, el mercurio, el zinc y el cobre;
los que constituyen un grupo de gran importancia, ya que algunos de ellos son
esenciales para las clulas, pero en altas concentraciones pueden resultar txicos
para los seres vivos, organismos del suelo, plantas y animales (Spain et al., 2003),
incluido el hombre. El nquel (Ni) es tambin un elemento esencial para el
metabolismo de las plantas, aun cuando stas requieren menos de 0.001 mg kg de
peso seco (Mahler, 2003). Tambin de forma natural puede encontrarse el zinc (Zn)
en los suelos, y es un nutriente requerido por las plantas para su desarrollo
(Mahler, 2003). En el suelo, los metales pesados, pueden estar presentes como
iones libres (disponibles), compuestos de sales metlicas solubles, compuestos
insolubles o parcialmente solubilizables, como: xidos, carbonatos e hidrxidos,
(Pineda, 2004).

En los ecosistemas agrcolas, la mayora de los metales pesados estn incluidos

en un ciclo biogeoqumico en el cual los dos componentes fundamentales son el
suelo y la planta. Por una parte, dichos elementos llegan al suelo por va area
(aerosoles, partculas minerales, polvos suspendidos y transportados por el aire) y
terrestre (fertilizantes, plaguicidas, residuos slidos, etc) y, por otra, se pierden bien
absorbidos por las plantas, o por lixiviacin y erosin. A su vez, existe un equilibrio
entre las fracciones disponible y no disponible de estos elementos en el suelo. La
importancia de las distintas vas de transferencia de estos elementos varia
considerablemente; depende del tipo de elemento, especie vegetal, tipo de suelo,
prcticas agrcolas, etc. Con frecuencia se producen alteraciones en los aportes o
prdidas de dichos elementos, que modifican su ciclo y dan lugar a que se
encuentren en proporciones txicas o deficientes. La movilidad relativa de los
metales en los suelos es de suma importancia en cuanto a su disponibilidad y su
potencial para lixiviarse en los perfiles del suelo hacia las agua subterrneas y
difiere de si su origen es natural o antropognico, y dentro de este ltimo, al tipo de
fuente (Burt et al., 2003).

Cuando el contenido de metales pesados en el suelo alcanzan niveles que rebasan

los limites mximos permitidos causan efectos inmediatos como inhibicin del
crecimiento normal y el desarrollo de las plantas, y un disturbio funcional en otros
componentes del ambiente as como la disminucin de las poblaciones
microbianas del suelo, el trmino que se usa o se emplea es "polucin de suelos"
(Martn, 2000). En el suelo, los metales pesados como iones libres, pueden
tener accin directa sobre los seres vivos lo que ocurre a travs del bloqueo de las
actividades biolgicas, es decir, la inactivacin enzimtica por la formacin de
enlaces entre el metal y los grupos SH (sulfhidrilos) de las protenas, causando
daos irreversibles en los diferentes organismos. La contaminacin en suelos por
metales pesados ocurre cuando estos son irrigados con aguas procedentes de
desechos de minas, aguas residuales contaminadas de parques industriales y
municipales y filtraciones de presas de jales (Wang et al., 1992).

Una vez en el suelo, los metales pesados pueden quedar retenidos en el mismo
pero tambin pueden ser movilizados en la solucin del suelo mediante diferentes
mecanismos biolgicos y qumicos (Pagnanelli et al., 2004). Los metales pesados
adicionados a los suelos se redistribuyen y reparten lentamente entre los
componentes de la fase slida del suelo. Dicha redistribucin se caracteriza por
una rpida retencin inicial y posteriores reacciones lentas, dependiendo de las
especies del metal, propiedades del suelo, nivel de introduccin y tiempo (Han et
al., 2003). Los factores que influyen en la movilizacin de metales pesados en el
suelo son caractersticas del suelo: pH, potencial redox, composicin inica de la
solucin del suelo, capacidad de intercambio (catinico y/o aninico), presencia de
carbonatos, materia orgnica, textura, entre otras. La naturaleza de la
contaminacin y el origen de los metales y formas de deposicin y condiciones
medio ambientales producen acidificacin, cambios en las condiciones redox,
variacin de temperatura y humedad en los suelos (Sauquillo et al., 2003). En
general, los metales pesados incorporados al suelo pueden seguir cuatro diferentes
vas: 1) Quedar retenidos en el suelo, ya sea disueltos en la fase acuosa del suelo
u ocupando sitios de intercambio, 2) Especficamente adsorbidos sobre
constituyentes inorgnicos del suelo, 3) Asociados con la materia orgnica del
suelo y 4) Precipitados como slidos puros o mixtos. Por otra parte, pueden ser
absorbidos por las plantas y as incorporarse a las cadenas trficas; pueden pasar
a la atmsfera por volatilizacin y pueden ser movilizados a las aguas superficiales
o subterrneas (Garca y Dorronsoro, 2005). Para elucidar el comportamiento de
los metales pesados en los suelos y prevenir riesgos txicos potenciales se
requiere la evaluacin de la disponibilidad y movilidad de los mismos (Banat et al.,
2005). La toxicidad de los metales depende no slo de su concentracin, sino
tambin de su movilidad y reactividad con otros componentes
del ecosistema (Abollino et al., 2002).

La cantidad de metales disponibles en el suelo est en funcin del pH, el contenido

de arcillas, contenido de materia orgnica, la capacidad de intercambio catinico y
otras propiedades que las hacen nicas en trminos de manejo de la
contaminacin (Sauve et al., 2000). El plomo (Pb), por ejemplo, es un contaminante
ambiental altamente txico, su presencia en el ambiente se debe principalmente a
las actividades antropognicas como la industria, la minera y la fundicin. En los
suelos contaminados con Pb se suele encontrar tambin Cd y Zn (Hettiarchchi &
Pierzynski, 2002) por analoga entre sus propiedades y caractersticas metlicas
algo similar a lo que ocurre para la triada de Fe-Ni-Co. En estos casos la barrera
suelo-planta limita la traslocacin de Pb a la cadena alimenticia, ya sea por
procesos de inmovilizacin qumica en el suelo segn se ha reportado (Laperche et
al., 1997) o limitando el crecimiento de la planta antes de que el Pb absorbido
alcance valores que puedan ser dainos al ser humano. El Pb presente en suelos
contaminados puede llegar a inhibirse mediante la aplicacin de fsforo y xidos de
magnesio; sin embargo estos tratamientos pueden llegar a afectar la
biodisponibilidad de otros metales esenciales como el Zn (Hettiarchchi &Pierzynski,
2002). Por otra parte, en lugares donde se han venido utilizando aguas residuales
para el riego agrcola, se reporta una tendencia creciente en las concentraciones
de metales en los suelos, por efecto en el tiempo (aos) de uso de esta agua,
donde las cantidades de metal que se extraen y se miden en estos suelos, se han
asociado positivamente con el tiempo de uso de agua residual; mostrando una
mayor tasa anual de acumulacin el Ni y Pb. En suelos estudiados con diferente
pH y contenidos de arcilla y materia orgnica, y donde se han aadido
intencionalmente concentraciones de Pb y Zn, ha sido determinada la capacidad de
la absorcin de los mismos en cada tipo de suelo. Se sembr lechuga y despus
de cosechar las mismas se evaluaron nuevamente los suelos y se observ que
disminuy la concentracin de estos metales en los suelos (Stevens, et al., 2003),
lo que pone de manifiesto que stos suelos contaminados son un riesgo para la
salud porque las plantas pueden absorber estos metales.

Tambin el uso de fertilizantes ha venido a causar incremento de algunos

compuestos en los suelos, que en ocasiones han causado algunos cambios en las
caractersticas. Algunos fertilizantes como los nitrogenados que incluyen los
nitratos, de amonio (NH4NO3) y de sodio (NaNO3); la urea ((NH2)2CO); el fosfato
de amonio (NH4H2PO4); los polifosfatos amnicos, entre otros, aportan al suelo
los nutrientes bsicos para el desarrollo de las plantas (Gaur & Adholeya, 2004),
permitiendo que aumenten la disponibilidad de los mismos, ya que
son productos todos solubles en agua. Estos tienen algunos inconvenientes para lo
suelos, entre ellos, que pueden contener residuos de metales pesados como
impurezas y que pueden quedar igualmente disponibles para las plantas y provocar
daos en las mismas. Tambin en estudios realizados a suelos europeos, que
variaban en sus caractersticas fisicoqumicas y con el objetivo de cuantificar la
absorcin de cobre (Cu) en plantas, fueron enmendados utilizando CuCl2 para
obtener una gama de siete concentraciones incluyendo un control sin enmiendas.
Para estos estudios se sembraron cebada y tomates en dichos suelos y se evalu
en las plantas, alargamiento de la raz (para la cebada) y el crecimiento general
(para eltomate). Las concentraciones de Cu causaron inhibicin para el
alargamiento de raz y el crecimiento global de la planta de tomate; por su parte los
suelos mas calcreos, demostraron ser los de mayor retencin de Cu, lo que
demuestra una vez ms que las caractersticas del suelo influyen de manera
directa y determinantes con la concentraciones de metales en stos y con los
niveles de disponibilidad hacia las plantas (Rooney et al., 2006; Zhao et al., 2006.).
Los niveles de concentracin de metales pesados consideran no slo el contenido
total en suelos, si no tambin el nivel asimilable por las plantas, por ejemplo, por
extraccin con HCl de 0.1M (Wang et al., 2007). En la Tabla 1, se pueden apreciar
algunos de estos valores propuestos para tres metales txicos (Cd, Cr y Pb) y para
el As. Por su parte algunos trabajos, indican valores como los que se muestran en
la Tabla 2, sobre las concentraciones tpicas de metales pesados encontradas en
hortalizas (Lin, 1991). Como se observa en las dos tablas, los valores que reporta
Lin (1991) son varias veces inferiores a los valores indicados como A, B y/o C en el
sentido de estndares de metales pesados para suelos.

Tabla 1. Estndares de evaluacin para suelos contaminados por metales pesados.

Tabla 2. Estndares de evaluacin de contaminacin por metales pesados en

hortalizas. Entre parntesis las desviaciones estndares (Lin, 1991).
1.2. Movilidad de los metales en el suelo

La movilidad relativa de los elementos traza en suelos es de suma importancia

para su disponibilidad y su potencial para lixiviar a travs de los diferentes perfiles
del suelo hasta el agua subterrnea (Burt et al., 2003). En general, los metales
pesados incorporados al suelo pueden seguir diferentes vas de movilizacin como
las que se sealan en la Figura 1. stos pueden quedar retenidos en el suelo, ya
sea disueltos en la fase acuosa, ocupando sitios de intercambio, o especficamente
adsorbidos sobre constituyentes inorgnicos, asociados con la materia orgnica y/o
precipitados como slidos puros o mixtos. Pueden ser absorbidos por las plantas y
as incorporarse a las cadenas trficas, pueden pasar a la atmsfera por
volatilizacin (Se y Hg) y pueden movilizarse a aguas superficiales o subterrneas
(Garca y Dorronsoro, 2005).

Figura 1. Movilizacin de metales pesados en el suelo (Fuente: Hernndez, 2009)

Para elucidar el comportamiento de los metales pesados en los suelos y prevenir

los riesgos txicos potenciales, se requiere la evaluacin de la disponibilidad y
movilidad de los mismos (Banat et al., 2005). Los principales factores que influyen
en la movilizacin de metales pesados en el suelo son: 1) Caractersticas del suelo
 (pH, potencial redox, composicin inica de la solucin del suelo, capacidad de
intercambio, presencia de carbonatos, materia orgnica, textura), 2) Naturaleza de
la contaminacin (origen de los metales y forma de deposicin) y 3) Condiciones
medioambientales (acidificacin, cambios en las condiciones redox, variacin de
temperatura y humedad) (Sauquillo et al., 2003). Adems otro factor que interviene
en la movilizacin de los metales en el suelo, es la presencia de agentes quelantes
sintticos o cidos orgnicos de bajo peso molecular (Mc Grath et al., 2002).

2. Fito extraccin de metales pesados

2.1. Relacin metal-planta

Todas las plantas absorben metales del suelo donde se encuentran pero en distinto
grado, dependiendo de la especie vegetal, y de las caractersticas y contenido en
metales del suelo. Las plantas pueden adoptar distintas estrategias frente a la
presencia de metales en su entorno (Baker, 1981; Barcel et al., 2003). Unas
basan su resistencia a los metales con la estrategia de una eficiente exclusin del
metal, restringiendo su transporte a la parte area. Otras prefieren acumular el
metal en la parte area en una forma no txica para la planta. La exclusin es ms
caracterstica de especies sensibles y tolerantes a los metales, mientras que la
acumulacin es ms comn de especies que aparecen siempre en suelos
contaminados o metalferos. Algunos metales como el Ni por ejemplo, que puede
llegar a ser menos adsorbido en suelos, puede ser fcilmente adsorbido por las
plantas y ser ligeramente txico para las mismas, siendo un elemento mvil en los
tejidos de las plantas, se acumulan preferiblemente en las hojas y en las semillas
(Moral et al., 1994; Corinne et al., 2006). Algunos cultivos como el de maz, cuando
crece en un suelo de tpicamente arcilloso, tienen una capacidad asimilativa ms
alta que para el lmite de absorcin de Cd, Ni, Pb y de Cu que en otros suelos y
que marcan la diferencia tambin con otros cultivos (Mahdy, et al., 2007). Algunas
de las caractersticas que influencian la biodisponibilidad del Ni a las plantas,
incluyen el pH, y el contenido de la materia orgnica, de arcilla y de
xidoshidrxidos. (Weng et al., 2003, 2004). En la Figura 2, se puede apreciar un
esquema donde se muestra el porcentaje de metales que puede ser absorbido por
el suelo dependiendo del pH. La mayora de los metales tienden a estar ms
disponibles a pH cido, excepto el As, Mo, Se y Cr, los cuales tienden a estar ms
disponibles a pH alcalino (Kabata-Pendias, 2000). El pH es un parmetro
importante para definir la movilidad del catin, debido a que en medios de pH
moderadamente alto se produce la precipitacin como hidrxidos. En medios muy
alcalinos, pueden nuevamente pasar a la solucin como hidroxicomplejos. Por otra
parte, algunos metales pueden estar en la disolucin del suelo como aniones
solubles. Tal es el caso de los siguientes metales: Se (Selenato y/o Selenito), V
(Vanadato), As (Arseniato y/o Arsenito), Cr (Cromatos).

Figura 2. Influencia del pH sobre la adsorcin de algunos metales, a diferentes pH

(Kabata-Pendias, 2000).
 La adsorcin de los metales pesados est fuertemente condicionada por el pH del
suelo y por lo tanto, tambin su solubilidad. Otros metales como el cadmio (Cd) y el
zinc (Zn), se pueden absorber en mayor grado en plantas como rbanos y
zanahorias, en las hojas de los rbanos se llegan a acumular mayores contenidos
del metal, provocando en la hojas un marchitamiento y disminucin en la longitud
de sus races y de la biomasa; para zanahorias se reporta en igual grado
acortamiento en races y acumulacin mayor en las mismas del metal (Intawongse
y Dean, 2006). Algunos autores sealan que la biodisponibilidad de algunos
metales presentes en el suelo, para las plantas, tienen mayores niveles de
absorcin. Por ejemplo la absorcin del Mn disponible en suelos por parte de las
plantas es mayor que para el Zn, seguidos en orden por el Cd, el Cu y por ltimo y
menos biodisponible, para pasar la barrera suelo raz-planta, el Pb (Figura 3). Esta
biodisponibilidad va asociada a la concentracin de cada uno de estos metales en
el suelo y al tipo de planta, pero en general se muestra la tendencia de estos
metales presentes en suelo a bioacumularse en plantas (Sauerbeck, 1991;
Intawongse y Dean, 2006). Tambin se reporta que en lugares donde se ha regado
con aguas residuales y a consecuencia de la acumulacin de metales por estos
usos en suelos, ha llegado a acumularse en plantas como maz, trigo y alfalfa,
metales pesados como cadmio, nquel y plomo en las mismas, principalmente en
tejido foliar, en hojas de la alfalfa e incluso en granos de trigo (Lucho et al., 2005).

Figura 3. Representacin esquemtica de la biodisponibilidad de metales presentes

en el suelo para plantas.

En estudios realizados en plantas de rbano y espinacas, se observ la tendencia

del Mn a acumularse en las hojas de rbano y un alto contenido en las hojas de
espinacas y menos concentraciones en races de ambas plantas (Inohue et. al.,
2000). Por lo que se puede ver, la tendencia de este metal a pesar que puede ser
un metal en menor grado absorbido por los suelos, es mas fcilmente absorbido
por las plantas y tiene mayor movilidad para llegar a las diferentes partes u rganos
de la planta causando daos en las mismas.

2.2. Fitoextraccin en suelos contaminados

Las tcnicas utilizadas para la fitorremediacin de metales incluyen:1)

Fitoextraccin (el uso de plantas para remover metales desde el suelo,
transportarlos y concentrarlos como biomasa en la parte superficial del terreno), 2)
Fitoestabilizacin (el uso de plantas para minimizar la movilidad del metal en el
suelo contaminado por medio de la acumulacin en las races o precipitacin
dentro de la rizsfera) y 3) Fitovolatilizacin (el uso de plantas para desviar a las
especies qumicas de metales voltiles en el suelo)(Chaney et al.,1997;Garbisu &
Alkorta,2001;Mc Grath et al., 2002;Lasat,2002; Singh et al., 2003, Prasad y Freitas
2003y Ernst, 2005) (Figura 2).

Figura 4. Esquema general de la descontaminacin de iones metlicos en un

proceso natural de fitorremediacin (Fuente: Singh et al., 2003).

La fitoextraccin parece ser la tcnica ms prometedora y ha recibido una

creciente atencin a partir del momento en que las investigaciones fueron
propuestas por Chaney (1983) como una tecnologa para la recuperacin de
metales en los suelos contaminados. Confa en el uso las plantas para extraer y
traslocar metales a sus partes cosechables (Figura 5). El objetivo de la
fitoextraccin es reducir la concentracin de metales en suelos contaminados, para
regular los niveles de estos en el interior de la planta en un tiempo razonablemente
marcado. Este proceso de extraccin depende de la habilidad para seleccionar las
plantas que crecen y acumulan metales bajo el clima y las condiciones especficas
del suelo existentes en el lugar remediado.
 Figura 5.Representacin esquemtica de los procesos involucrados en la
fitoextraccin de metales desde los suelos (Fuente: Singh et al., 2003)

Actualmente tienen que utilizarse dos caminos, para alcanzar este objetivo:1) El
uso de plantas con una excepcional capacidad natural de acumulacin de metales
(hiperacumuladoras) y 2) La utilizacin de plantas con biomasa cosechable elevada
(como: maz, cebada, avena arroz y mostaza de la India) y con un mecanismo de
fitoextraccion qumica incrementado (Hueng et al., 1997; Salt et al., 1998; Lombi et
al., 2001; Chen et al., 2004). Las principales caractersticas de estos dos sistemas,
se resumen en la Tabla 3.

Tabla 3. Principales caractersticas de las dos estrategias de fitoextraccin de

metales pasados desde suelo contaminado

Fitoextraccin inducida qumicamente Fitoextraccin natural

La plantas son excluyentes Las plantas hiperacumulan

naturalmente de metal naturalmente metales

Rpido crecimiento, elevada biomasa Lento crecimiento,

en las plantas baja produccin de biomasa
 Son utilizados quelantes sintticos y Habilidad natural para extraer
cidos orgnicos para incrementar la cantidades elevadas de metal del
absorcin de metales suelo

Correcciones qumicas incrementan la

Traslocacin eficiente de metales
transferencia de metales dese la raz
desde la raz hasta los brotes
hacia los brotes

Baja tolerancia a metales, el Elevada tolerancia; la planta

incremento en la absorcin conduce sobrevive con elevada concentracin
a la muerte de la planta de metales en los tejidos

No se presentan desventajas
Riesgo de lixiviado de metales
ambientales en cuanto a lixiviado de
quelados en suelos hmedos
metales

2.3. Coeficiente de fitoextraccin y factor de traslocacin

El factor de bioconcentracin (FB) o coeficiente de fitoextraccin (CF), se define

como la relacin entre la concentracin del metal en la parte area y races, con
respecto a la concentracin total inicial del metal en el medio de crecimiento. El
factor de translocacin (FT), se define como la relacin entre la concentracin del
metal en la parte area, con respecto a su concentracin en las races (Mndez y
Maier, 2008). En la Tabla 4, se muestran algunas caractersticas clave para definir
si una planta es fitoextractora o fitoestabilizadora de metales. Estas definiciones
han sido aplicadas a especies de plantas que colonizan sitios contaminados con
metales y a plantas que crecen en medios artificiales. Para la fitoextraccin, las
concentraciones de metales en parte area son usadas como criterio para definir si
una planta es o no hiperacumuladora, de acuerdo a criterios establecidos
previamente (Baker et al., 1989). Mientras que para la fitoestabilizacin, las
concentraciones de los metales en la parte area se basan en los lmites de
toxicidad para animales domsticos (Mentaberry et al., 2009). Adems el
coeficiente de fitoextraccin puede ser empleado para saber cuntos ciclos de
cultivo se requieren para remover los metales del suelo y dejarlos en niveles
aceptables (Zhao et al., 2003).

2.4. Hiperacumulacin para la fitoextraccion de metales pesados

Todas las plantas poseen un potencial para absorber una amplia variedad de
metales del suelo pero la mayor parte de las plantas tienden solamente a absorber
los que les son esenciales para su supervivencia y desarrollo. Existe una notable
excepcin de esta regla en un pequeo grupo de plantas que pueden tolerar,
absorber y translocar altos niveles de ciertos metales, estas plantas reciben el
 nombre de "hiperacumuladoras" (Chen et al., 2001); este trmino fue introducido
primero por Brooks y colaboradores (1977), refirindose originalmente a las plantas
que adquirieron una concentracin excesiva del nquel (1000 mg/g) sobre una base
del peso seco. El concepto fue ampliado ms adelante a otros elementos tales
como cadmio, cobalto, cobre, plomo, selenio y zinc. Las plantas hiperacumuladoras
generalmente tienen poca biomasa debido a que ellas utilizan ms energa en los
mecanismos necesarios para adaptarse a las altas concentraciones de metal en
sus tejidos (Kabata-Pendias, 2000). La capacidad de las plantas para bioacumular
metales y otros posibles contaminantes vara segn la especie vegetal y la
naturaleza de los contaminantes. Estas diferencias en la absorcin de metales,
pueden ser atribuidas precisamente a la capacidad de retencin del metal en
cuestin, por el suelo de cultivo y a la interaccin planta-raz-metal y al
metabolismo vegetal propio (Vig et al., 2003). De acuerdo con la estrategia de
acumulacin de Baker (1981), las plantas hiperacumuladoras pueden superar en
100 ms veces los valores normales de metales acumulados. Estas plantas son
especies muy tolerantes a uno o ms metales pesados y a menudo
su distribucin est restringida a suelos ricos en un amplio rango de
concentraciones de metales, pues no son competitivas en zonas no contaminadas.
Una definicin propone que si una planta contiene ms de 0.1% de Ni, Co, Cu, Cr y
Pb 1% de Zn en sus hojas sobre una base del peso seco, puede ser llamada
"hiperacumuladora", independientemente de la concentracin del metal en el suelo
(Robinson et al., 2003). La absorcin de metales pesados por las plantas es
generalmente el primer paso para la entrada de stos en la cadena alimenticia. La
absorcin y posterior acumulacin dependen en primera instancia
del movimiento (movilidad de las especies) de los metales desde la solucin en el
suelo a la raz de la planta. En las plantas, el concepto de bioacumulacin se
refiere a la agregacin de contaminantes; siendo algunos de ellos ms susceptibles
a ser fitodisponibles que otros (Kabata-Pendias, 2000).

La hiperacumulacin ha evolucionado en ms de 400 especies de plantas

repartidas en 45 familias botnicas, siendo la familia Brassicaceae una de las que
cuenta con ms gneros de este tipo; familia que se encuentra distribuida por todo
el mundo, predominando en Nueva Caledonia, Cuba y la regin Mediterrnea,
entre otros lugares (Baker et al., 2000). Existen varias hiptesis de cmo se
pueden adaptar las especies a la hiperacumulacin, pero la ms actual es su
funcin en la proteccin de la planta contra el estrs bitico causado por patgenos
y herbvoros. Esta propuesta es muy atractiva para explicar la razn de ser de las
plantas hiperacumuladoras y difiere de la defensa qumica natural existente en
todas las plantas, basada en la sntesis de productos orgnicos procedentes del
metabolismo secundario (Llugany et al., 2007).

Este tipo de proteccin requiere ciertas condiciones: 1) Que el metal sea ms

txico para el patgeno o herbvoro que para la planta, 2) Que el metal impida la
virulencia del patgeno o herbvoro y finalmente, 3) Que el metal incremente la
resistencia de la planta frente al factor causante del estrs bitico.

2.5. Hiptesis sobre la ventaja adaptativa de la hiperacumulacin para las plantas

Todos los organismos vivos estn expuestos a diferentes tipos de estrs, los cuales
pueden ser originados por la actividad del hombre o causas naturales como
la contaminacin del aire, sequia, temperatura, intensidad luminosa y limitaciones
nutricionales. Debido a que las plantas poseen limitados mecanismos para evitar
el stress, estas han desarrollado vas flexibles para adaptarse a los cambios
medioambientales (Zhu, 2001).

El estrs abitico o ambiental, incluye desde deficiencias o excesos de agua y

nutrientes minerales, pasando por altos contenidos salinos de los suelos, altas o
bajas temperaturas extremas, excesiva radiacin solar (PAR, UVB), excesiva
alcalinizacin o acidificacin de los suelos y factores mecnicos (compactacin de
los suelos, viento, nieve, granizo) hasta la presencia de contaminantes qumicos en
 los suelos (metales pesados, agentes xenobiticos, etc.) o en el aire (SO2, O3,
xidos de nitrgeno (NOx), HF, nitrato de peroxiacetilo, etc.).

Hasta el momento son numerosos los estudios realizados para dilucidar las
implicaciones a nivel molecular y los mecanismos bioqumicos que se desarrollan
en los organismos vivos, a partir de este estrs ambiental (Iwata et al., 2001; Jian
et al., 1997; Zhu 2002).

Existen varias hiptesis sobre el valor adaptativo de la hiperacumulacin, pero la

ms actual es su funcin en la proteccin de la planta contra el estrs bitico
causado por patgenos y herbvoros. Esta propuesta es muy atractiva para explicar
la razn de ser de las plantas hiperacumuladoras, y difiere de la defensa qumica
natural existente en todas las plantas, basada en la sntesis de productos orgnicos
procedentes del metabolismo secundario (Meers et al., 2004). Este tipo de
proteccin requiere ciertas condiciones: la primera es que el metal sea ms txico
para el patgeno o herbvoro que para la planta; la segunda, que el metal impida la
virulencia del patgeno o herbvoro, y finalmente, la tercera, que el metal
incremente la resistencia de la planta frente al factor causante del estrs bitico.

2.6. Rol de los exudados de la raz en la fitoextraccin de metales pesados

El conocimiento actual de la forma como los exudados de la raz, cidos orgnicos

y quelantes sintticos corregidos; potencian la fitoextraccin de metales desde
el suelo y su traslocacin de la raz hacia los brotes, es muy importante. Mientras
que la habilidad de las plantas para acumular metales hasta cierto punto depende
de su capacidad para tolerar elevadas niveles de metal, hasta cierto punto
dependiente de su capacidad para tolerar elevados niveles de metal en los tejidos,
algunos mecanismos implicados en la acumulacin por pate de las plantas,
parecido a la compartimentacin en la vacuola y la quelacin en el citoplasma,
deben tambin investigarse (Warsel et al., 2003). El conocimiento acerca de
los procesos rizosfricos ms complejos mediados por exudados de la raz, no se
pueden desarrollar sobre el mismo avance referido al conocimiento de
la biologa de las races (Bais et al., 2004), y muchos buenos sistemas de
fitoextraccin permanecen para su investigacin. Sin embargo el destino de los
exudados en la rizsfera, y las reacciones naturales involucradas en la
fitoextraccin y el buen transporte de metales por las plantas, an no es entendido
completamente, esto es admitido porque ellos contribuyen significativamente para
la acumulacin de metales en las plantas. Los compuestos qumicos que
probablemente se encuentran en la rizsfera estn claramente asociados con el
incremento de la absorcin de metales desde el suelo y su traslocacin a las
races.(Mench & Martin,1991:Salt et al.,1995;Krishnamurti et al.,1997;Lin et
al.,2003;Wensel et al.,2003).

El bajo peso molecular de los cidos orgnicos probablemente indica que los
exudados son los ms importantes en los sistemas de fitoextraccin natural. Ellos
influencian la adquisicin de metales por cualquiera de los complejos formados con
iones metlicos o disminuyendo el pH alrededor de las races y alterando las
caractersticas del suelo. Sin embargo a pesar del hecho de que la absorcin de
metales puede ser incrementada debido a la disminucin del pH(Brown et
al.,1994),esta claro que la compleja capacidad de los cidos orgnicos, antes que
su capacidad para disminuir el pH, es el principal factor relacionado con la
movilizacin de los metales en el suelo y su acumulacin en las plantas (Bernal et
al.,1994;Mc Grath et al.,1997;Gupta et al.,2000;Quartancci et al.,2005).Los efectos
indirectos de los exudados de la raz sobre la actividad microbiana, las propiedades
fsicas de la rizsfera y el crecimiento dinmico de las races, pueden producirse
tambin por la solubilidad y absorcin de iones (Marshner,1995;Walker et
al.,2003).Por ejemplo, los microorganismos pueden estar presentes para movilizar
Zn por hiperacumulacin en Thlaspi caerulescens (Whiting et al.,2001), mediante la
disolucin de Zn a partir de la parte no productiva en el suelo.

Algunas plantas liberan quelantes metlicos especficos o reducen compuestos

dentro de la rizsfera para ayudar a la absorcin de Fe y Zn, cuando la
disponibilidad de estos micronutrientes es baja(Marschner,1995).Otro estimulo
ambiental que tiene que asociarse con la exudacin de cidos orgnicos de las
raz, incluyendo la anoxia(Marschner,1995) y la exposicin a Al(Ma,2000;Piero
setal.,2002).Esto significa que los metales acumulaos pueden incrementar la
solubilidad por liberacin de quelantes desde las races. Sin embargo, solamente
algunos reportes, sobre la implicancia de exudados especficos en la absorcin y
acumulacin de metales potencialmente txicos por las plantas, son poco
conocidos. En suma, los coeficientes de exudacin y composicin qumica de los
exudados hiperacumuladores son virtualmente desconocidos.

Salt et al. (2000) no pudieron identificar alguna afinidad entre el Ni y el compuesto

quelante de Ni en la rizsfera del planta hiperacumuladora Thlaspi goesingense. En
contraste, ellos establecieron que los quelantes de Ni histidina y citrato acumulado
en los exudados de en los exudados de la raz de la planta no
hiperacumuladora Thalspi arvense, expuesta a Ni. Aquellos descubrimientos
realizados por lo autores para sugerir que la liberacin de estos exudados
por T. arvense puede ser una estrategia para reducir la absorcin y toxicidad del Ni,
pero Persons et al. (1999), tambin establecen que la hiperacumulacin de Ni
por T. goesingense , no es determinada por la sobreproduccin de histidina es
respuesta al Ni. Puesto que concentraciones no txicas de Ni, ambas especies de
plantas traslocan Ni a las races en coeficientes equivalentes (Krmer etal., 1997),
la existencia de un mecanismo ms eficiente de estas especies en la acumulacin
de Ni. Krmer et al. (2000), presentan evidencias con respecto a que la histidina
libre puede estar tambin involucrada en el transporte de Ni a travs del citoplasma
dentro de la vacuola en T. goesingense, la cual puede ser responsable para
la tolerancia y acumulacin de Ni. Krmer et al. (1996), reportaron anteriormente un
incremento de 36 veces en la concentracin de histidina libre, en los exudados del
xilema dela planta hiperacumuladora de Ni Alysium lesbiacum despus de su
exposicin a Ni, sugiriendo que la histidina puede estar involucrada en el transporte
 y almacenamiento de Ni en aquellas especies. Kerkeb &Krmer.(2003)
recientemente presentaron nueva evidencia acerca de que el aumento de histidina
produce liberacin de Ni desde las races dentro del xilema, no solamente en A.
lesbiacum sino tambin en la especie no hiperacumuladora B. juncea. Salt et al.
(2000) identificaron complejos Zn-histidina en las races de la especie
hiperacumuladora Thlaspi caerulesens, pero Knight et al. (1997), McGrath et al.
(1997) y Zhan et al.(2001) no detectaron algn exudado especifico relacionado con
la acumulacin de Zn por estas especies.

No solamente el rol que juegan los exudados de la rizsfera en la acumulacin de

Ni y Zn no es totalmente entendido, all tambin existe una carencia
de informacin acerca del rol de la exudacin de las races en la fitoextraccin de la
mayor parte de metales ambientalmente relacionados. De esta manera es una
realidad muy concreta, que all no existe una evidencia concluyente, que los
exudados hiperacumuladores quelantes especficos en la rizsfera para aumentar
la absorcin de metal. Por lo tanto, la liberacin y la traslocacin necesita ser
investigad de una manera ms profunda. En efecto, incrementar la absorcin de la
raz, es el primer paso para la remocin exitosa desde el suelo. Suposiciones
acerca de la compresin de estos procesos y los compontes involucrados, son
esenciales para la tecnologa de la fitoextraccin. Las investigacionesconcluidas
por Ryan et al. (2001), indican que la verdad acerca de que las plantas pueden ser
aprovechadas a partir de la exudacin de cido orgnico, en un gran nmero de
vas, fue un estimulo interesante de ingeniera gentica para el incremento de la
exudacin de acido orgnico en la copa en especies de pastura. Estos autores
sostienen que grandes cambios en la produccin de cido orgnico pueden
obtenerse en levaduras y bacterias por la inactivacin o sobreexposicin de genes
especficos, cuyos productos estn involucrados en la biosntesis de acido
orgnico. Estos estudios con microorganismos pueden ser tiles en la
determinacin puedan manipularse con xito pata altera la biosntesis de cidos
orgnicos y exudacin de cidos orgnicos en las plantas.

Por supuesto, este avance sobre el conocimiento del control gentico de los
exudados de la raz puede ser utilizado para acelerar la habilidad de las plantas en
la extraccin de metales desde el suelo. Anteriormente exudados especficos de la
raz, relacionados con el incremento de la absorcin de metales del suelo fueron
identificados, en las plantas pueden ser dirigidos, mediante la ingeniera
gentica una elevada exudacin de aquellos componentes naturalmente
biodegradables. La manipulacin gentica de la rizsfera de la planta para
aumentar la solubilidad del metal puede ser de esta manera una buena opcin, y
no solamente puede hacer ms eficiente la fitorremediacin; si no tambin vencer
las fuerzas ambientales asociadas con la fitoextraccin qumicamente inducida.

2.7. Los agentes quelantes para la fitoextraccin

 El nombre "quelante" deriva de la palabra griega "chela", que significa pinza,
porque el anillo que se forma entre el quelante y el metal es similar, en apariencia,
a los brazos de un cangrejo con el metal en sus pinzas. En la Figura 6, se
muestran algunos ejemplos de agentes quelantes. Se ha demostrado que el cido
etilen diamino tetra actico (EDTA) es uno de los agentes quelantes sintticos ms
eficientes para incrementar la solubilidad de varios metales en el suelo como el
plomo, cromo y cobre. (Blaylock et al., 1997). La capacidad del EDTA para
aumentar la concentracin de metales solubles en el suelo est influenciada por
varios factores como la concentracin y tipo de metales, el pH del suelo, y el tipo
de partculas del suelo, entre otras. Sin embargo, su uso tiene algunas desventajas
como que no es selectivo para extraer un solo metal (Barona et al., 2001) debido a
que forma complejos con cationes como Al3+, Ca2+, Fe2+ Mg2+ (Waisel et al.,
1996). Una alternativa para movilizar metales en el suelo es el uso de cidos
orgnicos de bajo peso molecular (acido mlico, tartrico, ctrico, glucnico y
lctico), identificados en los exudados de las races de vegetales comunes,
cereales y soya. Hoy en da est muy bien documentado que los exudados de las
races estn involucrados en la liberacin de nutrimentos en el suelo (Schnitzer,
2000). La importancia de los agentes quelantes en el suelo, se debe a su
capacidad para incrementar la solubilidad de cationes metlicos, logrando as que
las races de las plantas los absorban fcilmente, pero cuando la concentracin de
metales disponibles en el suelo es excesiva, las plantas pueden presentar
sntomas de toxicidad como respuesta al estrsocasionado por los mismos (Ann et
al., 2005).

Figura 6. Ejemplo de agentes quelantes. (Fuente: Hernndez, 2009)

3. Fito extraccin una tecnologa con un futuro prometedor

Algunos avances importantes se hicieron en los ltimos aos, referidos al proceso de
entendimiento de los procesos involucrados en la fitoextraccin de metales
desde suelos contaminados, especialmente en aquellos que contribuyen a la absorcin e
hiperacumulacin de metales.

Sin embargo, muchos vacios con respecto al conocimiento a la fisiologa del suelo y sus
componentes qumicos y microbiolgicos, tiene que ser resueltos antes de que la
fitorremediacin pueda convertirse en una tecnologa comercial. Por ejemplo, un mejor
 entendimiento de la interaccin que se produce en la rizsfera, ser importante para el
xito definitivo de la fitoextraccin, como una tcnica apropiada para limpiar la superficie de
los suelos. Se esperan futuros avances en este campo de investigacin, que produzcan un
impacto sustancial sobre el potencial de la fitoextraccin. La identificacin de exudados
especficos asociados con la solubilizacin de metales en el suelo, puede facilitar la
utilizacin de caminos alternativos para la manipulacin de la rizsfera de la planta, y
aumentar de esta manera la biodisponibilidad del metal. Para la fitoextraccin
qumicamente inducida, la dinmica de los metales quelados en la rizsfera, necesita para
ser examinada, cualquiera de los dos caminos para poder superar los riesgos asociados
con la baja degradabilidad de los quelantes sintticos, o para optimizar el uso de ms
componentes biodegradables. Adicionalmente, las investigaciones y polticas diseadas
tienen que tambin dentro de las uniones qumicas de metales en los suelos e identificar
cuales d e ellas son los objetivos para la fitoextraccin. No obstante, es un consenso que la
concentracin total no esta correlacionada con biodisponibilidad, la mayor parte de
enfoques que hace la legislacin sobre la remediacin de suelos sobre las concentraciones
tolerantes de metal en los suelos. Aunque este parece ser seguido, correcciones qumicas
pueden ser suficientemente reactivas, para extraer metales estrechamente limitada para
los xidos y silicatos minerales y quelados por materia orgnica, lo cual representa unas
fracciones amplias de metales en los suelos contaminados, promoviendo en el exterior, el
lixiviado de metales en el perfil del suelo.

El conocimiento completo de la tolerancia de la planta al metal, ser esencial para

desarrollar estrategias para incrementar genticamente la habilidad de las plantas para la
acumulacin de metal. Esto tendr significativas implicancias para la fitorremediacin.
Dado que la mayora de las especies hiperacumuladoras conocidas, crecen lentamente y
tiene biomasa pequea, expresando sus genes acumuladores de metales en el crecimiento
rpido, elevada biomasa de plantas, es una prometedora aproximacin para desarrollar
plantas que puedan ser utilizadas en la tecnologa de fitoextraccin.
Las tcnicas agronmicas para el exitoso crecimiento de plantas para la fitoextraccin
propuestas en la fertilizacin, mediante la aplicacin de quelantes y prcticas para
minimizar la propagacin de metales a travs dela cadena alimenticia, tambin se espera
una investigacin ms detallada.

Podemos esperar que en un futuro cada vez ms cercano, y gracias a las especies
hiperacumuladoras transgnicas, estos problemas se puedan solucionar, desarrollando
variedades artificiales a medida, que sean ms tolerantes al contaminante, posean
mayor eficacia absorbente, resistan al clima de la regin que se desee descontaminar y
acumulen el contaminante en las hojas y partes superiores de la planta, de forma que sea
ms fcil de recolectar. Por ltimo, sera deseable que su cosecha se pudiera automatizar
fcilmente y que el metal fuera recuperado para ser reciclado y obtener as un beneficio
econmico adicional.

4. FITOEXTRACCIN DE PLOMO Y CADMIO EN SUELOS CONTAMINADOS

USANDO QUELITE (Amaranthus hybridus L.) Y MICORRIZAS

4.1. Resumen

Las actividades mineras y metalrgicas practicadas en la Comarca Lagunera,

Mxico han contaminado el suelo, el aire y el agua. El uso de plantas es una de las
estrategias para la remediacin de suelos contaminados con metales pesados. Sin
embargo, son pocos los estudios sobre remediacin con plantas de zonas ridas y
su asociacin con micorrizas. El objetivo de este estudio fue evaluar la capacidad
extractora de Plomo (Pb) y Cadmio (Cd) del quelite (Amaranthus hybridus L.) al
adicionar una mezcla de micorrizas arbusculares (Entrophospora columbiana,
Glomus intraradices, G. etunicatum, G clarum) al sustrato contaminado con Pb o
 Cd. Dos experimentos, uno por cada metal, con diseo experimental de bloques al
azar con cuatro repeticiones fueron desarrollados. En el primero se adicionaron
tres cantidades de micorrizas (0, 2.5 y 5.0 gkg 1) en suelos con 300 mgkg1 de Pb.
En el segundo experimento, las mismas cantidades de micorrizas fueron probadas
en suelos contaminados con 15 mgkg 1 de Cd. Las concentraciones de Pb y Cd en
raz, hoja y tallo a los 65, 95 y 125 das de edad de la planta se determinaron con
un espectrofotmetro de absorcin atmica. Los resultados indican que la adicin
de micorrizas increment significativamente (P<0.05) la concentracin de Pb y Cd
en raz, tallo y hoja de quelite. Las concentraciones de estos metales se
incrementaron significativamente conforme la edad de la planta.

4.2. MATERIALES Y MTODOS

4.2.1. Localizacin del rea experimental

Dos experimentos en macetas contaminadas con Pb y Cd se realizaron dentro

del invernadero de la Unidad Regional Universitaria de Zonas ridas de la
Universidad Autnoma Chapingo, (URUZAUACh) en Bermejillo, Durango,
cuyas coordenadas geogrficas 25 53' 31.99'' latitud norte y 103 36' 11.23''
longitud oeste, y una altitud de 1,117 m.

4.2.2. Establecimiento de los experimentos

Semillas de plantas silvestres de quelite (A. hybridus) se colectaron durante el

mes de octubre de 2007 del rea que circunda a la comunidad de Bermejillo,
Durango, Mxico. Para colectar las semillas, se recogieron infrutescencias que
luego se maceraron. Despus, las semillas se almacenaron en recipientes de
plstico hasta que se usaron para establecer un almcigo durante la tercera
semana de mayo de 2008. Las plntulas se colocaron en bolsas de plstico
negro (macetas) con 2 kg de suelo, durante la tercera semana de junio de
2008. El suelo superficial (030 cm) usado se colect de manera previa en el
rea de Bermejillo, Durango, Mxico. En el Cuadro 1 se aprecian sus
principales caractersticas. Una vez homogeneizado y deshidratado, el suelo se
verti en 72 macetas (36 de cada experimento).
Ambos experimentos se establecieron al considerar el diseo de bloques al
azar con cuatro repeticiones. Los tratamientos contemplados se definieron al
tomar en cuenta al factor dosis de micorrizas para el cual se emple el
producto comercial PHC HORTIC PLUS, que contiene la mezcla de micorrizas
(Entrophospora columbiana, Glomus intraradices, G. etunicatum y G.
1
clarum) en las cantidades de 0, 2.5 y 5 gkg de suelo; as como al factor
tiempo de muestreo en sus niveles de 65, 95 y 125 das de edad de la planta,
que coincidieron aproximadamente con la etapa vegetativa, etapa de formacin
de inflorescencia y etapa de llenado de grano, respectivamente. De esta
manera se tuvieron nueve tratamientos en cada experimento (Cuadro 2).
 La diferencia entre los dos experimentos consisti en el metal con que se
contamin el suelo contenido en las macetas. En el experimento con Pb, se
adicionaron 300 mgkg1 de plomo (Pb) a cada una de las 36 macetas; mientras
que para el caso del experimento con cadmio (Cd), se aplicaron 15 mgkg 1 de
Cd, tambin a cada maceta. Las concentraciones de metal empleadas se
encuentran por arriba de las concentraciones consideradas como txicas o
perjudiciales para los ecosistemas. La incorporacin de las fuentes
contaminantes Pb (NO3)2 o Cl2Cd, as como de las micorrizas se realiz durante
la primer semana de julio de 2008 a los 50 das de edad de la planta. Las
micorrizas se distribuyeron en seis sitios alrededor del tallo a una distancia de
entre 1 y 2 cm, a una profundidad de 5 a 10 cm.

Los riegos se aplicaron cada tres das mediante la aplicacin de un litro de

agua por maceta, cantidad suficiente para evitar que las plantas padecieran
estrs hdrico.

4.3. RESULTADOS Y DISCUSIN

4.3.1. Experimento con plomo (Pb)

A) Colonizacin de races con micorrizas

En la Figura 1 se aprecia que la colonizacin en las races de las plantas que

crecieron en las condiciones de los tratamientos sin adicin de micorrizas fue
significativamente (P<0.05) menor que la que presentaron las plantas que
crecieron en las macetas con suelo inoculado 2.5 y 5 gkg 1 de suelo, cuyas
caractersticas se aprecian en el Cuadro 1. Esto indica afinidad entre el quelite
(A. hybridus) y las especies de hongos del complejo de micorrizas
(Entrophospora columbiana, Glomus intraradices, G. etunicatum, G
clarum) usado. La colonizacin detectada en races de plantas sin adicin de
micorrizas puede atribuirse a que actuaron especies de hongos micorrzicos
arbusculares nativos, tal y como fue reportado por Baum et al. (2006) y
Wang et al. (2007) en sus experiencias con plantas de sauce y maz,
respectivamente.

En la Figura 1 se puede apreciar una tendencia general de incremento de

colonizacin de micorrizas en las races de A. hybridus conforme pas el
tiempo desde que se incorporaron micorrizas al sustrato (de 50 hasta 125 das
de edad de la planta). Los dos tratamientos con adicin de micorrizas
produjeron porcentajes de colonizacin significativamente diferentes (P0.05)
entre ellos, respecto al tiempo; y tambin fueron diferentes en comparacin con
los resultados asociados al testigo (sin adicin de micorrizas). Inclusive, las
diferencias son mayores conforme el tiempo de colonizacin es tambin mayor.
El tratamiento con micorrizas de 5 gkg1present el mximo porcentaje de
colonizacin (83%) a los 125 das de edad de la planta (i.e. 75 das despus de
la inoculacin).

El incremento de colonizacin micorrzica aparentemente constante a travs

del tiempo puede deberse a que se desarrollaron en una rizsfera propia para
una recolonizacin sostenida (Sawers et al., 2008) de los 65 a los 125 das de
edad de la planta (en las condiciones del sustrato contaminado con Pb (300
mgkg1 suelo) y ambas dosis de inoculacin (2.5 y 5 gkg1 de micorrizas), a
pesar de que los arbsculos son estructuras de vida corta y empiezan a
senescer despus de 410 das de actividad (Strack et al., 2003).

B) Concentracin de Pb
En la Figura 2 se aprecia que la concentracin de Pb en hoja, tallo y raz de
plantas de quelite (A. hybridus L.) tendi a incrementarse conforme aument su
edad, cuando crecieron y se desarrollaron en macetas con suelo contaminado
con 300 mgkg1 de Pb, con y sin la adicin de micorrizas. Ello significa que
esta especie tiene capacidad extractora de Pb. Este resultado coincide con lo
reportado por Puschenreiter et al. (2001).

Tambin, se pudo observar la capacidad del quelite de concentrar ms Pb en

sus tejidos conforme se incrementa la adicin de micorrizas al sustrato en el
rango de 0 a 5 gkg1 de suelo (Figura 2). Los resultados coinciden con lo
reportado por Puschenreiter et al. (2001) y Khan et al. (2000), en el sentido de
que es preciso, adems de seleccionar la especie vegetal adecuada, el
manipular la rizsfera a fin de mejorar la absorcin de metales pesados durante
el proceso de desarrollo de tecnologas de fitoextraccin. En el presente caso,
la manipulacin del sustrato se realiz mediante la incorporacin de micorrizas.
Tal prctica permiti que las plantas de quelite absorbieran o metabolizaran el
Pb o que dicho metal se acumulara dentro de los tejidos hoja, tallo y raz, o
bien, que los microbios en la rizsfera promovieran su movilizacin a los tejidos
radiculares y subsecuentemente su translocacin (Puschenreiter et al., 2001).
Esto contradice lo mencionado por Martin y Ruby (2004) sobre la acumulacin
de metal durante el proceso de fitorremediacin, pues segn ellos se limita
nicamente a los tejidos de la raz.

El efecto de las micorrizas sobre la fitoextraccin de metales pesados ha sido

poco investigado (Mahony, 2005; Baum et al., 2006). Giasson et al. (2006)
 encontraron una baja capacidad fitoextractora de Pb en experimentos de
pastos con la adicin de micorrizas arbusculares. Por el contrario, la presente
experiencia demuestra que las micorrizas afectaron positivamente la
transferencia de Pb del suelo a las plantas de quelite, conforme se increment
su adicin de 0 a 5 gkg1 suelo ligeramente bsico, de textura franca y
contaminado con 300 mgkg1 de Pb (Figura 2).

Al tomar en cuenta el sustrato sin adicin de micorrizas, el tallo tiene menor

capacidad de concentrar Pb que la raz y la hoja, lo cual se manifiesta ms
conforme se incrementa la edad de la planta de A. hybridus (Figura 2).
Asimismo, la raz de quelite presenta mayor capacidad de concentrar Pb que la
hoja, resultados que coincide con lo observado por Kadukova et al. (2006) en el
sentido de la capacidad de concentrar ms Pb en los tejidos de la raz que en
la hoja en plantas de Nerium oleander, en particular cuando la planta es
madura (125 das de edad). Ello es explicado, en parte, porque la absorcin de
Pb por las plantas es afectada de manera frecuente por la difusin lenta de
este elemento en el suelo, razn por la cual la raz lleva cierta ventaja sobre el
tallo y la hoja en especial en edad temprana. Por lo tanto, las plantas de quelite
presentaron significativamente (P0.05) mayores concentraciones de Pb, en los
tres rganos, en su etapa de madurez (125 das de edad) que en sus etapas
jvenes (65 y 95 das de edad).

Los resultados de la edad de la planta en la fitoextraccin de Pb, concuerdan

con lo estudiado por Mensah et al. (2008) quienes reportaron que la
concentracin de Pb en algunos cultivos se incrementa durante su periodo de
crecimiento. En este contexto, estudios como el realizado por Grubor (2008)
indican una relacin de la edad de la planta con la tasa de translocacin de
plomo en plantas de Sedum spectabile y Urtica dioica.

4.3.2. Experimento con cadmio (Cd)

A) Colonizacin de races con micorrizas

La mayora de las diferencias de colonizacin entre tratamientos por rgano, al

considerar la misma edad, fueron estadsticamente significativas
(P0.05; Figura 3). La mxima colonizacin fue observada a los 125 das de
edad de la planta por efecto de las dos dosis de micorrizas. De manera clara y
general, la colonizacin se increment significativamente conforme al tiempo
(65, 95 y 125 das) por efecto de los tratamientos que involucraron inoculacin
1
micorrizica. En el caso de los tratamientos con 2.5 gkg y 5 gkg 1, a los 65 y
95 das en el primer caso y a los 65 das de edad de la planta en el segundo
caso, las diferencias fueron no significativas (Figura 3). Esto sugiere que el
incremento significativo de colonizacin, cuando se aplicaron 2.5 gkg 1, se
manifest en el lapso de 65 a 125 das de edad de la planta.

1
Para el caso de la adicin de 5 gkg de micorrizas, el porcentaje mximo de
colonizacin corresponde a 125 das de edad de la planta, en este caso, las
diferencias entre fechas de muestreo (i.e. edad de la planta) fueron
significativas. Este resultado coincide con lo reportado por Gonzlez et al.
(2004) y Snchez et al. (2004) en el sentido de que las especies de micorrizas
arbusculares (Gisaspora rosea, Glomus mossae, G. caledonium y G.
clareideum) se vuelven ms tolerantes a As, Cu, Cd, Pb y Mn en sustratos
contaminados conforme pasa el tiempo.

B) Concentracin de Cd

El quelite present una tendencia general a concentrar mayor nivel de Cd

conforme se increment la edad de la planta, cuando no se adicionaron hongos
al sustrato (Figura 4). Esta tendencia puede estar relacionada con la formacin
de complejos bioqumicos durante el metabolismo en A. hybridus. Esto ltimo
puede asociarse a que el Cd es un metal que puede desplazar otros iones
metlicos e incorporarse rpidamente a los diferentes tejidos de la planta (Hall,
2002)
Es apreciable la habilidad del quelite de concentrar ms Cd en sus tejidos
conforme se incrementa la adicin de micorrizas al sustrato en el rango de 0 a
5 gkg1 de suelo, aunque las diferencias son no significativas (P0.05) al
considerar las edades mayores (95 y 125 das) en hoja y las menores (65 y 95
das) en tallo y raz (Figura 4). Los resultados sugieren que los efectos
fitoextractores de Cd se manifiestan de manera importante a los 125 das de
edad de la planta (75 das despus de la inoculacin) de quelite en simbiosis
con micorrizas, en particular en raz.

En general, los resultados coinciden con lo reportado por Puschenreiter et al.

(2001) en el sentido de que es preciso, adems de seleccionar la especie
adecuada, el manipular la rizsfera a fin de mejorar la absorcin de metales
pesados durante el proceso de desarrollo de tecnologas de fitoextraccin. En
el presente caso, la manipulacin del sustrato se realiz mediante la
incorporacin de micorrizas. Quiz, tal prctica permiti que las plantas de
quelite absorbieran o metabolizaran el Cd en compuestos no txicos dentro de
sus tejidos hoja, tallo y raz, o bien, que soportaran su degradacin por los
microbios en la rizsfera (Puschenreiter et al., 2001).

Aunque el efecto de las micorrizas sobre la fitoextraccin de metales pesados

ha sido poco investigado (Mahony, 2005; Baum et al., 2006), la presente
experiencia ha demostrado que las micorrizas afectaron positivamente la
transferencia de Cd del suelo a las plantas de quelite, conforme se increment
 la adicin de 0 a 5 gkg1 de suelo ligeramente bsico de textura franca
contaminado con Cd a razn de 15 mgkg1 de suelo.

En particular, al considerar el sustrato sin adicin de micorrizas, la capacidad

de concentrar Cd en los tejidos de A. hybridus presentan una tendencia de
incremento conforme transcurri el tiempo, lo cual sugiere que esta especie
vegetal tiene la capacidad de absorber el metal sin la asociacin con micorrizas
o bien que pudo haber establecido asociaciones con hongos micorrzicos
nativos. La raz y el tallo (a los 65 y 95 das de edad de la planta) no
presentaron un incremento significativo (P<0.05) de la concentracin de Cd a
diferencia de la hoja, en los casos de no adicin de micorrizas y la adicin de
2.5 gkg1 de micorrizas al sustrato. En los tres tejidos, la mxima concentracin
de Cd se manifest asociada a la mayor edad de la planta de A. hybridus (125
das de edad). Asimismo, la raz de quelite presenta mayor capacidad de
concentrar Cd que la hoja, en particular cuando la planta es madura (125 das
de edad). Sin embargo, es importante resaltar que el comportamiento de la
concentracin de Cd en hoja, por efecto de las dosis bajas de micorrizas, es de
incremento quasilineal conforme aumenta la edad de la planta, a diferencia
del comportamiento asociado a la raz y el tallo.

Adems, la colonizacin micorrzica asociada a ambos casos de inoculacin

con el complejo usado refiere cierta asincrona, considerada como el
crecimiento asociado de las micorrizas con el de la planta a travs del tiempo,
al considerar el comportamiento de la concentracin de Cd en los tres rganos
evaluados (Figura 4), con la excepcin del caso de Cd en hoja por efecto de la
dosis de 2.5 gkg1 de micorrizas.

5. ABSORCIN Y ACUMULACIN DE METALESPESADOS EN TRES

ESPECIES VEGETALES EN SUELOS ENMENDADOSCON LODOS DE
DEPURADORA.

5.1. Resumen

En el presente estudio se ha evaluado la capacidad de absorcin y acumulacin de

metales pesados (Pb, Cu, Ni, Zn y Cr) en parte area (tallos y hojas) y races de
tres especies vegetales, Vicia sativa L. (veza), Hordeum vulgare (cebada) y
Helianthus annuus L. (girasol), sembradas en suelos enmendados con lodos de
depuradora en condiciones de invernadero. Se aplicaron lodos compostados con
restos de poda a un suelo degradado de carcter bsico procedente de un cultivo
abandonado en la zona Centro de Espaa (Alcal de Henares) Se realizaron 3
tratamientos distintos para cada una de las especies ensayadas: Testigo (sin
adicin de lodo); Dosis baja-media de lodo (42,5 t/ha) y Dosis alta de lodo (85 t/ha)
y 3 repeticiones por tratamiento. Se analiz el efecto de la dosis de lodo aplicada en
 la capacidad de acumulacin de metales en distintas partes de la planta, con el fin
de evaluar la absorcin y traslocacin de cada elemento. Este hecho podra limitar
la aplicacin de este tipo de enmiendas en suelos agrcolas. Del mismo modo se ha
evaluado la posibilidad de uso de estas especies en procesos de fitoextraccin.

Las concentraciones totales de Cu, Zn, Cr y Pb en suelos incrementaron

lineaimente con la dosis de lodo aplicada en los ensayos con las tres especias
vegetales, no observndose el mismo efecto para el Ni. En todos los casos, los
valores de metales en los suelos fueron menores que los lmites establecidos en la
legislacin (Directiva 86/278/CEE). En el anlisis de metales en planta se observ
en la cebada un incremento lineal en el contenido de todos los metales (excepto el
Zn) en la parte area con la aplicacin de lodos, sin embargo este efecto no se
produjo tan marcadamente en el girasol y ia veza aunque si aument el contenido
de metales en las plantas cultivadas en suelos enmendados con lodos. El contenido
de metales totales en el sistema radicular de la cebada increment con la dosis de
lodo aplicada. Esta misma tendencia se produjo en la veza para el Pb, Cu y Zn, y en
el girasol para el Cu. En general las cantidades de metales acumuladas en la planta
fueron mayores en la cebada que en la veza y el girasol, siendo significativos los
valores en el caso del Cu, Ni y Cr. Este hecho implica la necesidad del control de
los contenidos en metales pesados en cereales para evitar su paso a la cadena
alimentaria.

5.2. MATERIALES Y MTODOS

5.2.1. Materiales

Se aplicaron lodos compostados con restos de poda (CP) procedentes de una

depuradora de aguas residuales urbanas a un suelo degradado (S) en macetas
circulares de polietilerto en condiciones de invernadero. El suelo utilizado fue
un Typic calcixerept procedente de un cultivo abandonado en la zona Centro de
Espaa, (Alcal de Henares), cuyas caractersticas se muestran en la tabla 1.

Se realizaron 3 tratamientos distintos para cada una de las especies

ensayadas: Testigo (sin adicin de lodo); Dosis baja-media de lodo (42,5 t/ha) y
Dosis alta de lodo (85 t/ha) y 3 repeticiones por tratamiento. En cada una de las
macetas se sembraron 4 semillas para cada una de las tres especies: Vicia
sativa L. (veza comn), Hordeum vulgare (cebada var. Reinette) y Helianthus
annuus L. (girasol var. Toledo II). La experiencia se mantuvo durante 150 das,
regando segn requerimientos hdricos, al cabo de los cuales se muestrearon
 los suelos y se recogi la planta entera, tanto raz como parte area, para
estimar su biomasa y sus dimensiones.

5.2.2. Mtodos

El pH se determin en la relacin suelo/agua 1:2,5 al igual que la conductividad

elctrica. El nitrgeno total se determin por el mtodo Kjeldahl. La materia
orgnica de acuerdo con el mtodo de Walkey Black. El fsforo se determin
por el mtodo Olsen y los nutrientes asimilables se extrajeron con acetato
amnico y posterior determinacin por espectrofotometra de Absorcin
Atmica. La concentracin de metales pesados se determin por
espectrofotometra de emisin por plasma (ICP), previa digestin acida en
digestor por microondas en el caso de suelos y lodos, y previa digestin acida
de las cenizas en el material vegetal. En todos los casos se siguieron los
mtodos oficiales de anlisis en Espaa (Ministerio de Agricultura, 1994).

5.3. RESULTADOS Y DISCUSIN.

5.3.1. Efecto en el suelo.

La aplicacin de los lodos produjo una ligera acidificacin de los suelos as

como un aumento considerable de la conductividad elctrica (tabla 2),
obtenindose un elevado coeficiente de correlacin inverso entre ellos (tabla 4).
Se produjeron diferencias significativas en ambos parmetros en funcin de la
aplicacin o no de iodo y de la dosis de lodo aplicada. Este es un importante
aspecto a considerar y controlar de cara a la aplicacin de este tipo de residuos
en suelos pues pueden aparecer problemas por salinidad. El contenido en
cationes disponibles (Ca, K, Na y Mg) en el suelo no vari significativamente
con la adicin de lodos, si bien en la cebada se produjo un ligero aumento de
Ca y Mg segn la dosis de lodo aplicada. Sin embargo, s que se encontraron
diferencias significativas en el contenido de K y Mg en los suelos en funcin de
la planta cultivada. De esta forma, la cebada y el girasol se comportaron de una
forma similar en cuanto al contenido de estos dos macronutrientes en suelos
mientras que la veza constituy otro grupo independiente (figura 1).
Figura 1: Diferencias significativas (P<0,05) por especie cultivada para el contenido de K y Mg
en suelos.

El N total se increment lineaimente con la aplicacin de lodos, si bien no se

encontraron diferencias significativas entre las dosis. El contenido en P
asimilable aument significativamente con la aplicacin de lodos,
encontrndose diferencias significativas entre las dosis ensayadas. El anlisis
de la materia orgnica oxidable en los suelos, mostr un incremento
significativo con la aplicacin de lodos, aunque no se encontraron diferencias
significativas entre las dos dosis de lodos ensayadas.

La aplicacin de lodos compostados produjo un aumento en los valores de

extracto hmico total de los suelos (EHT), siendo las fracciones de menor peso
molecular (cidos Flvicos) las que experimentron el incremento al
proporcionar los residuos utilizados formas de materia orgnica poco
transformadas. Este aumento qued reflejado en diferencias significativas en el
contenido de carbono en los cidos flvicos en suelos entre los tratamientos
que aplicaban lodos y los testigos (no se encontraron diferencias significativas
para los cidos Hmicos).
Tabla 2: Caractersticas fsico-qumicas del suelo y fraccionamiento de la materia orgnica (AH:
cidos Hmicos, AF: cidos Flvicos y EHT: Extracto Hmico Total).

5.3.2. Efecto en la planta.

No se apreciaron sntomas de toxicidad, ni de deficiencia en los cultivos
desarrollados en las macetas tratadas con lodos. No existieron diferencias
significativas entre el porcentaje de germinacin de las semillas sembradas en
los tratamientos con lodos y el control, obtenindose un porcentaje de
germinacin cercano al 90% para las tres especies ensayadas.
La biomasa seca se increment en los tratamientos con lodos frente al control,
en las tres especies ensayadas (figura 2). Este incremento de biomasa debe
estar relacionado con el incremento de macronutrient.es (especialmente el
fsforo), micronutrientes (Cu y Zn, deficitarios en suelos calcreos) y materia
orgnica en los suelos enmendados con lodos.
La altura de la parte area, as como la longitud del sistema radical,
aumentaron ligeramente con la aplicacin de lodos en la veza (figura 2). Sin
embargo, la respuesta fue la opuesta para la para la cebada y el girasol ya que
la altura disminuy ligeramente con la adicin de lodos y la longitud media de
las races se redujo significativamente con respecto a los testigos. De esta
forma, el incremento de biomasa asociado a la aplicacin de lodos no se
tradujo en un aumento significativo en la altura de la cebada y el girasol. Este
mismo efecto ha sido descrito por otros autores (Gil, et al. 2001).
Figura 2: Caractersticas morfolgicas de las plantas: Altura media, longitud media races y
Biomasa media total por planta.

Se produjo un incremento en el contenido de N en la parte area de las plantas

con la aplicacin de lodos, sin embargo solamente se obtuvieron diferencias
significativas entre el tratamiento con lodos a dosis alta (85 t/ha) y el control.
Los cationes (Ca, Mg, Na y K) en parte area de la planta aumentaron con la
aplicacin de lodos en las tres especies ensayadas, obtenindose diferencias
significativas entre las tres especies para el Ca y el Mg. Para el K se
encontraron diferencias significativas entre la cebada y las otras dos plantas, y
para el Na entre la cebada y el girasol. Asimismo se obtuvieron diferencias
significativas para el Mg y el K entre la dosis alta de lodos y el control y para el
Na entre los tratamientos que aplicaban lodos y el control.

5.3.3. Estudio de los metales pesados. Interaccin suelo-planta.

A) Metales en suelos.

Las concentraciones totales de Cu, Zn, Cr y Pb en suelos se incrementaron

linealmente con la dosis de lodo aplicada (con diferencias significativas
entre los tratamientos y las dosis) en los ensayos con las tres especias
vegetales, no observndose el mismo efecto para el Ni (tabla 3).

Metal Cebada Girasol Veza

(mg/kg) T 42,5 85 T 42,5 85 T 42,5 85
Suelo 18,7 22,0 27,3 19,0 22,3 27,3 18,0 23,0 24,7
Pb P. area 3,9 4,5 s;2 4,2 5,0 4,8 4,9 6,4 5,1
 Raz 2,0 7,0 13,5 2,1 3,7 6,5 3,7 6,6 8,4
Suelo 9,8 12,3 16,7 9,8 13,7 16,3 10,1 14,3 16,7
Cu P. area 8,7 16,7 18,5 6,6 8,0 12,0 9,3 7,5 9,3
Raz 6,6 13,7 30,0 12,3 12,0 19,0 18,5 19,5 24,0
Suelo 18,0 17,0 25,0 15,3 23,0 16,3 11,6 13,0 13,3
Ni P. area 3,7 7,0 9,5 2,1 2,0 1,7 3,4 4,3 3,4
Raz 11,2 20,0 19,5 9,5 3,6 8,0 14,5 7,2 7,8
Suelo 68,7 84,7 107,3 57,0 85,3 108,0 63,7 106,7 98,3
Zn P. area 27,0 63,7 62,3 32,3 43,7 27,0 55,0 71,5 87,0
Raiz 61,5 69,0 119,5 27,0 39,0 27,0 60,5 97,0 101,0
Cr Suelo 30,0 36,7 40,3 28,0 36,3 40,7 28,7 35,7 40,3
P. area 15,7 26,7 37,0 2,1 1,9 4,5 2,9 3,5 2,3
Raiz 18,5 37,0 65,0 9,1 7,6 11,0 28,0 10,5 12,0
Estos cuatro metales, Cu, Zn, Cr y Pb, mostraron un elevado ndice de
correlacin (con nivel de significacin de 0,01) entre ellos, sin embargo, el
Ni no mostr ninguna relacin con el resto de los metales (tabla 4).

Tabla 4: Coeficientes simples de correlacin (r) entre distintos parmetros

del suelo.

pH C.E. M.O. Pb Cu Ni Zn Cr
PH 1,000 -,953** -,639** -,870** -,858** -,228 -,793** -,793**
C.E. 1,000 ,617** ,865** ,851** ,140 ,786** ,719**
M.O. 1,000 ,681** ,656** ,265 ,639** ,639**
Pb 1,000 ,891** ,314 ,817** 786**
Cu 1,000 ,132 ,879** ,852**
Ni 1,000 ,188 ,147
Zn 1,000 ,769**
Cr 1,000
*: Nivel de significacin de 0,05. **: Nivel de significacin de 0,01.

En estudios anteriores de larga duracin de aplicacin de lodos residuales

en campo realizados por nuestro grupo de investigacin, Sastre et al.
(2001) encontraron que el Ni queda unido a las fracciones de hidrxidos de
Fe y Mn, quedando en forma ms soluble que los metales asociados a la
materia orgnica. Precisamente el Ni fue el nico metal del suelo para el
que se obtuvieron diferencias en funcin de la planta cultivada y, al igual
que para el K y Mg en suelos, se encontraron diferencias significativas
entre la veza y el grupo formado por la cebada y el girasol (figura 3).
Figura 3: Diferencias significativas (P<0,05) obtenidas del anlisis del contenido de Nquel en
suelos en funcin de la planta cultivada.

La materia orgnica en el suelo mostr una elevada correlacin (con nivel

de significacin 0,01) con los metales Pb, Cu, Zn y Cr en los suelos (tabla
4), lo que implica que estos metales estn asociados a la materia orgnica
oxidable. Tanto el contenido en metales pesados, como el porcentaje de
materia orgnica en los suelos aumentan con la dosis aplicada de lodos. El
incremento de Cu y Zn en estos suelos tras la aplicacin de los lodos
puede ser incluso beneficioso, pues constituyen micronutrientes
indispensables para el desarrollo de las plantas y que suelen estar en
deficiencia en este tipo de suelos calcreos (Gil, et al, 2001). Sin embargo,
otros metales como el Cr o el Pb que no son esenciales biolgicamente
para las plantas pueden tener consecuencias ms perjudiciales. En todos
los casos, los valores de metales en los suelos fueron menores que los
lmites establecidos en la legislacin vigente en Europa (Directiva
86/278/CEE).

B) Metales en plantas

En el anlisis de metales en la parte area de la planta (tallos y hojas), se

observ en la cebada un incremento lineal en el contenido de todos los
metales (excepto el Zn) con la aplicacin de lodos, sin embargo este efecto
no se produjo tan marcadamente en el girasol y la veza aunque si aument
el contenido de metales en las plantas cultivadas en suelos enmendados
con lodos (tabla 3). Se encontraron diferencias significativas para el Cu
entre la dosis de 85 t/ha y el testigo, aunque no entre las dos dosis
aplicadas de lodos. Tambin se observaron diferencias significativas en el
contenido de metales en la parte area en funcin de la planta ensayada,
siendo la cebada la que acumul ms metales seguida de la veza y por
ltimo del girasol, lo que corrobora los resultados obtenidos por Madrid y
Kirkham (2002). De esta forma, se encontraron diferencias significativas
para el Cu, Ni y Cr entre la cebada y las otras dos especies ensayadas. En
el caso del Zn las diferencias significativas se obtuvieron entre la veza y las
otras dos especies. Se encontraron unos altos coeficientes de correlacin
entre algunos metales; Zn, Ni, Cu y Cr, de las partes areas de las plantas
y el Mg y el K en el suelo (figura 4), de lo que se deduce la influencia de
estos cationes en el suelo para la absorcin y acumulacin de metales en
la planta.
 Figura 4: Grficas de regresin para los cationes asimilables del suelo, K y
Mg, y el Zn, Cu, Ni y Cr en la parte area de las plantas.

El contenido de metales totales en el sistema radicular de la cebada se

increment con la dosis de lodo aplicada. Esta misma tendencia se produjo
en la veza para el Pb, Cu y Zn, y en el girasol para el Cu (tabla 3). Sin
embargo, no se encontraron diferencias significativas entre los tres
tratamientos ensayados. Al igual que en la parte area, la cebada fue la
especie que acumul ms metales en la parte radical, seguida de la veza,
siendo el girasol la especie que menos metales acumul. Se encontraron
diferencias significativas entre los contenidos de Ni y Cr en las races de la
cebada y el girasol, asi como entre los contenidos Zn entre el girasol y las
otras dos especies.

C) ndices de traslocacin y acumulacin de metales

Con el objetivo se evaluar la translocacin de metales pesados desde el

suelo hacia la planta y su acumulacin en las mismas, se elaboraron dos
ndices: un coeficiente de translocacin del suelo a la planta y un ndice de
 acumulacin de metales pesados en la parte area de las plantas
cultivadas en los suelos enmendados con lodos frente a los testigos (tabla
5).

El primer ndice se calcul mediante el ratio de concentracin de metal en

planta frente a concentracin total en suelo. El segundo ndice representa
la relacin entre la concentracin de metales en plantas enmendadas con
lodos y la concentracin de metales en las plantas testigo. El estudio de los
valores de los ndices anteriores muestra diferencias significativas en la
translocacin y acumulacin de metales en las plantas dependiendo de la
naturaleza de la planta y del elemento qumico estudiado. As, el ndice de
translocacin aumenta con la aplicacin de lodos en la cebada en todos los
elementos, salvo el Pb. Sin embargo, este efecto no se produjo para el
girasol y la veza. Especialmente interesante resulta la capacidad de la
cebada para traslocar y acumular Cu y Zn. De igual forma, la acumulacin
de todos los metales estudiados en las plantas de cebada enmendadas con
lodos frente a los testigos aument con la dosis aplicada. Este efecto se
produjo tambin en el Pb, Cu y Cr para el girasol y en el Zn para la veza.

Tabla 5: ndice de translocacin (I.T.) de metales entre el suelo y la parte area

de la planta e ndice de Acumulacin (LA.) de metales en las plantas
enmendadas frente a los testigos.

Met ndic Cebad Giras Veza

al e a ol
T 42,5 85 T 42,5 85 T 42,5 85

Pb I.T. 0,2 0,20 0,1 0,2 0,22 0,18 0,27 0,28 0,2
1 9 2 1
I.A. 1,0 1,15 1,3 1,0 1,19 1,14 1,00 1,31 1,0
0 3 0 4
Cu I.T. 0,8 1,11 1,1 0,6 0,59 0,74 0,92 0,52 0,5
9 1 7 6
I.A. 1,0 1,57 2,1 1,0 1,22 1,83 1,00 0,80 1.0
0 2 0 0
Ni I.T. 0,2 0,41 0,3 0,1 0,09 0,11 0,30 0,33 0,2
1 8 4 5
I.A. 1,0 1,89 2,5 1,0 0,94 0,82 1,00 1,24 0,9
0 7 0 8
Zn I.T. 0,3 0,75 0,5 0,5 0,51 0,25 0,86 0,67 0,8
9 8 7 9
I.A. 1,0 2,36 2,3 1,0 1,35 0,84 1,00 1,30 1,5
0 1 0 8
Cr I.T. 0,5 0,73 0,9 0,0 0,05 0,11 0,10 0,10 0,0
 2 2 8 6
I.A. 1,0 1,70 2,3 1,0 0,89 2,16 1,00 1,22 0,8
0 6 0 1

6. Hongos micorrzicos arbusculares y la fitorremediacin de plomo

6.1. HONGOS MICORRIZICOS ARBUSCULARES EN SUELOS CONTAMINADOS

CON PLOMO

Los HMA son un componente natural de los suelos en la mayora de los

ecosistemas terrestres. Se sabe que ms del 80 % de las plantas terrestres son
capaces de presentar una asociacin simbitica con ellos y pueden ser
considerados como una extensin de las races de las plantas ya que amplan
considerablemente el volumen de suelo que puede ser explorado y por ende se
incrementa la cantidad de nutrientes que pueden ser obtenidos por la planta
(Harrison 1999). El incremento de nutrimentos es ms evidente cuando las plantas
micorrizadas se encuentran en condiciones adversas para su crecimiento, como es
el caso de suelos contaminados con plomo. Bajo esta condicin, se ha reportado
que en algunos casos las plantas micorrizadas pueden mostrar mayor captacin de
metales pesados por la raz y aumentar el transporte de estos a la parte area de
la planta (fitoextraccin) (Rabie 2005), mientras que en otros casos el uso de HMA
contribuye a la inmovilizacin del metal en las races de las plantas (Gaur y
Andholeya 2004) o en el suelo (GonzlezChvez et al. 2004) (fitoestabilizacin)
(Fig. 1). Esto muestra que el resultado de la micorrizacin de plantas con fines de
fitorremediacin de suelos contaminados depende de la combinacin planta
hongometal y est influenciado por las condiciones del suelo.

Las esporas de los HMA normalmente tienen diferente nivel de sensibilidad a la

presencia de metales pesados en ausencia de las plantas dependiendo de la
especie del hongo. En la fase presimbitica, Glomus intrarradices es uno de los
hongos micorrzicos que ha mostrado mayor tolerancia a metales como Cd y Pb
(Pawlowska y Charvat 2004). En fase simbitica, este hongo tambin ha mostrado
tolerancia a metales pesados; un ejemplo de ello es la mayor acumulacin de Pb
 en las races micorrizadas de Vetiveria zizanioides con dicho hongo (Wong et
al. 2007).

Los mecanismos de transporte de Pb en el micelio externo de los HMA han sido

poco estudiados. Sin embargo, existen datos que sugieren que el movimiento del
Pb hacia el micelio interno podra ser a travs del fsforo. El fsforo en HMA es
transportado del micelio externo al interno principalmente en forma de polifosfato
(Harrison y Van Buuren 1995, MaldonadoMendoza et al. 2001). La unin del Pb y
polifosfato ha sido observada como un mecanismo de estabilizacin de Pb en suelo
(Gaur y Adholeya 2004). El complejo Pbpolifosfato tambin ha sido observado en
el micelio interno de HMA (Turnau et al. 1993). Por lo tanto, existe la posibilidad de
que el Pb sea transportado a la raz micorrizada va el micelio externo. Sin
embargo, se requiere profundizar aun ms en el estudio de los mecanismos del
transporte de Pb a travs del micelio de HMA.

6.2. HONGOS MICORRIZICOS ARBUSCULARES EN LA FITOESTABILIZACIN DE

PLOMO

La fitoestabilizacin consiste en inmovilizar metales pesados mediante el uso de

especies de plantas tolerantes, con un sistema radicular que provea una buena
cobertura de suelo. Las plantas con este tipo de sistemas radiculares pueden
acumular una gran cantidad de Pb en las races. Adems la presencia de HMA
puede contribuir a una mayor inmovilizacin del metal. Entre las posibles
estrategias de inmovilizacin de Pb por el hongo se encuentran: la inmovilizacin
del Pb soluble mediante glicoprotenas secretadas por el hongo, la adsorcin del
Pb en las paredes celulares y la quelacin de metales al interior de la hifa, siendo
estas estrategias similares a las utilizadas por las plantas (Gaur y Andholeya 2004).

La glomalina es una glicoprotena insoluble secretada por el hongo que se ha

encontrado en el suelo ligada a metales pesados. Para el caso especfico de
suelos contaminados con Pb se ha logrado extraer hasta 1.12 mg de Pb por gramo
de glomalina (GonzlezChvez et al. 2004) y recientemente se ha observado que
la concentracin de Pb en la glomalina puede variar entre 0.8 y 15.5 % del total de
Pb en el suelo (Vodnik et al. 2008).

Por otro lado, es ampliamente conocido que los HMA pueden producir una gran
cantidad de micelio externo. Tambin es conocido que la pared celular de este
micelio est compuesta mayormente por quitina y que este compuesto estructural
provee una eficiente superficie para la adsorcin de los metales pesados del suelo
(Galli et al. 1994, GonzlezChvez et al. 2004). Este potencial de adsorcin se
debe a que las hifas del hongo presentan una mayor afinidad (2 a 4 veces ms)
que las races (Joner et al. 2000), por lo que la inoculacin de plantas tolerantes
con HMA podran incrementar significativamente la estabilizacin de metales
pesados contenidos en el suelo.

Otros agentes potenciales de retencin del Pb en el micelio de los HMA son las
metalotioneinas. En plantas acumuladoras de metales (Clemens 2001) y en hongos
ectomicorrzicos (Morselt et al. 1986, Galli et al. 1994) se ha observado la
presencia de estos polipptidos capaces de adsorber metales pesados. Aunque
estos compuestos no han sido an observados en unin con Pb, se ha detectado
en el micelio de HMA una alta expresin de un gen que codifica para la sntesis de
este tipo de polipptido en presencia de metales pesados (Lanfranco et al. 2002).

La absorcin e inmovilizacin del Pb es mayor por las races que se encuentran

micorrizadas en comparacin con las races no micorrizadas (Gaur y Andholeya
2004, Chen et al. 2005). La forma en que el metal se incorpora al interior de la raz
micorrizada es desconocida. Sin embargo, el hecho de que se ha observado un
aumento en el nmero de vesculas con el incremento de concentracin de Pb en
el suelo (Joner et al. 2000) sugiere que el Pb en las races micorrizadas podra ser
inmovilizado en las vesculas o en el interior del micelio interno.

Se ha documentado la acumulacin de metales pesados, tales como Cd, Zn y Cu,

en el interior del micelio interno de HMA especialmente en grnulos de polifosfato
en el interior de la vacuola (Turnau et al. 1993). En el caso de hongos micorrzicos
arbusculares no se ha observado la acumulacin de Pb en grnulos de polifosfato.
Sin embargo los HMA se caracterizan por adquirir una gran cantidad de fsforo y
transportarlo de la solucin del suelo al interior de la raz en forma de polifosfato.
Una vez que el polifosfato llega a los arbsculos, es liberado en la reaccin de
hidrlisis del polifosfato en las vacuolas de las clulas (Capaccio y Callow 1982,
Saito 1995, Kojima et al. 1998, Ezawa et al. 2001). Lo anterior refleja el gran
potencial de los HMA con fines de fitoestabilizacin. Sin embargo, se desconoce si
la mayor estabilizacin de Pb en las races micorrizadas se realiza mediante: a)
acumulacin de Pb en vesculas, b) absorcin en pared celular y en vacuolas en
micelio interno, y c) absorcin en pared celular y en polipptidos en micelio externo.
Probablemente la estabilizacin podra darse a travs de un mecanismo como el
propuesto por Ezawa et al. (2001) para el fsforo, donde el metal pesado podra
quedarse en la vacuola o incorporarse a la pared celular del micelio (Fig. 2).
 Tambin se debe tener en cuenta que el sistema es muy complejo y que el
mecanismo no puede ser predicho de antemano, ya que cada sitio contaminado
tiene sus caractersticas especficas, por lo que la eleccin de los genotipos de la
planta y el hongo podran determinar el comportamiento del sistema como
fitoestabilizador o como fitoextractor. Ejemplo de todo lo anterior es la inoculacin
de Vetiveria zizanioides con Glomus intrarradices creciendo en suelo contaminado
con concentraciones crecientes de Pb, donde se observ que a baja concentracin
de Pb (10 a 100 mg Pb kg1 suelo) est funcionando esta relacin simbitica como
fitoestabilizador, mientras que a elevada concentracin de Pb (1000 mg Pb kg
1
suelo) se obtuvo un aumento en la concentracin de Pb en las partes areas
(Wong 2007), lo cual indica que tambin esta relacin simbitica puede
posiblemente ayudar en el proceso de fitoextraccin.

6.3. HONGOS MICORRZICOS Y FITOEXTRACCIN DE PLOMO

La fitoextraccin es la tecnologa ms atractiva para limpiar suelos contaminados

con metales pesados (Kramer 2005). Mediante esta tecnologa los metales son
adquiridos por las races de las plantas y transportados a las partes areas (hojas y
tallos), posteriormente hojas y tallos conteniendo los metales pesados pueden ser
cosechadas, logrando as la remocin del contaminante e incluso su posterior
recuperacin (fitominera). Para esto se busca emplear plantas con caractersticas
especficas, como son las hiperacumuladoras de metales pesados que que son
muy tolerantes a los metales pesados y tambin gran capacidad para acumularlas.
La desventaja encontrada en plantas con dichas caractersticas es que no tienen
una buena generacin de biomasa en un tiempo corto (Ernst 1998). Una de las
principales limitaciones que encuentra la fitoextraccin es la biodisponibilidad de
los metales pesados para ser obtenidos por la planta. Una de las formas ms
comunes de mejorar esta deficiencia es la adicin de quelantes sintticos para
aumentar la biodisponibiladad de los metales (Salt et al. 1995). Blaylock et
al. (1997) demostraron la alta capacidad del quelante sinttico EDTA (acido
etilendiamino tetraactico) para aumentar la fitoextraccin de Pb usando la
planta Brassicajncea, esto debido a que el EDTA presenta una afinidad por el Pb y
contribuye a ponerlo en forma biodisponible para la planta. Sin embargo, se
considera que este mtodo causa un dao secundario en el ambiente por la
lixiviacin del Pb hacia los mantos acuferos (Chaney 2008), ya que los metales no
pueden ser absorbidos por la planta a la misma velocidad en que son quelados.

Con la finalidad de volver estos procesos ms amigables con el ambiente, se est

buscado utilizar nuevas estrategias para mejorar la fitoextraccin, como puede ser
la utilizacin de HMA. Estos hongos podran ayudar a incrementar la tolerancia de
las plantas al Pb, el transporte de ste a la parte area debido a una mejor
adquisicin de nutrientes del suelo y contribuir en general al mejor desarrollo de la
planta (Ghre y Paszkowski 2006).

La cantidad de Pb transportado a la parte area podra depender de factores como

la combinacin de planta y hongo, as como de la cantidad de Pb en el suelo. En
este sentido se observ que la simbiosis Glomus deserticola Eucalyptus
globulus increment significativamente la concentracin de Pb en hojas y tallo en
comparacin con la simbiosis G. mosseae E. globulus. Esta tolerancia a metales
pesados por parte de las plantas micorrizadas podra estar relacionada con la
acumulacin en zonas metablicamente menos activas como lo es el tallo
(Arriagada et al. 2005). Con relacin a la especie de planta, se observ que en
suelos con una concentracin de Pb de 1500 mg Pb Kg 1 suelo (Rabie 2005), las
platas de frijol inoculadas con G. mosseae acumulan mayor cantidad de Pb en la
parte area con relacin a su raz, mientras que las plantas de trigo tratadas con la
misma concentracin de Pb e inoculadas con el hongo acumulan menor cantidad
de Pb en la parte area en relacin a la raz (Rabie 2005). Esta mayor acumulacin
de Pb en la parte area de las plantas de frijol podra estar relacionada con la
mayor absorcin de fsforo, mejorando con ello la sntesis de protenas y de
enzimas antioxidantes.

Tambin se ha observado el incremento del transporte de Pb hacia la parte area

en suelos con valores inferiores a 1500 mg Pb kg 1 (Arriagada et al. 2005, Nowak
2007). Este comportamiento en el transporte de Pb coincide con la absorcin de
nutrientes como nitrgeno y fsforo, lo cual sugiere que la fitoextraccin podra
 depender en gran medida de una mayor toma de nutrientes por parte de la planta
micorrizada.

6.4. PERSPECTIVAS DE LA APLICACIN DE HONGOS MICORRZICOS

ARBUSCULARES EN LA FITORREMEDIACIN DE PLOMO

La presencia de metales pesados en la solucin del suelo altera la disponibilidad

de nutrimentos para las plantas. La baja disponibilidad de fsforo provoca una
reduccin del crecimiento y por ende un menor potencial de fitorremediacin. La
utilizacin de hongos micorrzicos arbusculares en procesos de fitorremediacin ha
sido propuesta debido a que mejora la adquisicin de fsforo va el micelio externo.

Hasta el momento se pueden encontrar observaciones contradictorias, con una

amplia variacin en los resultados, como lo muestran las revisiones recientes (Gaur
y Adholeya 2004, Khan 2005). Sin embargo, es importante llevar a cabo ms
estudios en torno a la interaccin HMAplanta en suelos contaminados, con el
objeto de aumentar la eficacia de la fitorremediacin (Ghre y Paszkowski 2006).
Los HMA podran adems tener un impacto a nivel de fitoestabilizacin debido a la
aparente incapacidad de los hongos para transportar el Pb a la interfase hongo
planta, quedando la mayora del Pb unido al micelio interno del hongo.

Al respecto, en nuestro grupo de trabajo se est estudiando la interaccin

simbitica entre Tagetes erecta y el HMA Glomus intrarradices utilizando una forma
insoluble de Pb. Los resultados hasta ahora obtenidos muestran una buena
tolerancia de T. erecta en presencia de altas concentraciones de Pb, as como un
aumento en la concentracin de Pb en las races micorrizadas con relacin a las
races no micorrizadas (datos no publicados).

Aunque la mayora de los resultados indican que los hongos promueven la

fitoestabilizacin, existen algunos indicios de que tambin podran participar
activamente en la fitoextraccin. En este contexto se ha observado que la
obtencin de hierro en suelos contaminados con Pb disminuye significativamente a
1500 mg Pb Kg1 de suelo, mientras que otros elementos como el fsforo no
reducen su acumulacin (Arriagada et al. 2005). Dicha disminucin altera
directamente la asimilacin de carbono, puesto que el hierro es parte importante de
la clorofila, lo cual podra dar lugar a una disminucin en el transporte de Pb a la
parte area. Con relacin en esto, Punamiya et al. (2008) observaron que la
inoculacin de pasto con hongos micorrzicos facilita el transporte de Pb a la parte
area y que esto tal vez fue producto de la elevada actividad de la clorofila. La
fitoextraccin con hongos micorrzicos arbusculares podra darse tambin en
combinacin con otros organismos reductores de hierro, sin embargo, hay que
realizar ms estudios para confirmar esta hiptesis.
 La utilizacin de hongos micorrzicos asociados a plantas leosas con fines de
fitorremediacin es un campo que ha sido poco explorado. No obstante, existen
trabajos (Arriagada et al. 2005) en los que se ha observado que dicha combinacin
cuenta con un futuro promisorio para fines de fitoextraccin. Por lo que tambin es
necesario evaluar en trabajos futuros el efecto de estas asociaciones en la
fitorremediacin.

7. APLICACIN DE LA FITORREMEDIACIN A SUELOS CONTAMINADOS

POR METALES PESADOS
7.1. Resumen

Los metales pesados constituyen uno de los grupos de contaminantes ambientales

sujetos a una mayor investigacin y preocupacin, fundamentalmente debido a su
persistencia, a las bajas concentraciones a las que pueden manifestar sus efectos
txicos. Todo esto, junto con su acumulacin progresiva y/o su transferencia a otros
medios naturales (como las aguas subterrneas), su entrada en la cadena trfica,
etc., suponen una amenaza para la salud humana y la de los ecosistemas. Por
todo esto, la legislacin europea obliga a restaurar de dichos suelos mediante
acciones de remediacin que permitan extraer, controlar, contener o reducir los
contaminantes de un rea determinada. Dentro del amplio abanico de tecnologas
existentes para ello, la fitorremediacin, que implica la utilizacin de plantas, y en
especial la fitoextraccin, se presenta como una tcnica emergente que supone,
generalmente, unos menores costes y una menor destruccin y alteracin del
medio. Sin embargo, se encuentra todava en fase experimental y presenta
grandes limitaciones que la convierten en un proceso lento y difcil de llevar a la
prctica, dada la competencia con otras tcnicas usualmente empleadas. Esto se
advierte por el escaso nmero de artculos, aunque se percibe en aumento en las
bases de datos ISI Web of Science y Science Direct. Las ltimas tendencias se
dirigen a la identificacin de los genes que codifican la hiperacumulacin de
metales pesados especficos. Es de vital importancia, ya que nos dara la
posibilidad de crear plantas transgnicas combinando las caractersticas deseables
en una sola especie vegetal, sin embargo existe una carencia de estudios de
campo que permitan comprobar su viabilidad.

7.2. Metodologa

En la bsqueda bibliogrfica realizada se han utilizado las bases de datos Science

Direct e ISI Web of Science a travs de la web del Consorcio Madroo que nos
permite consultar todos los recursos electrnicos que contienen artculos de
revistas, libros, informes, tesis... Las etapas que se han seguido incluyen:

Etapa 1. Revisin de todos los artculos que hacan referencia a las siguientes
palabras clave: soil, phytoremediation, heavy metals, soil contamination, soil-heavy
metals. Los artculos revisados se encuentran datados entre los aos 1996 y 2015.
 Etapa 2. A partir de los artculos obtenidos en la Etapa 1, se ha realizado un
anlisis preliminar de los estudios relacionados con el suelo y su contaminacin; en
especial por metales pesados y, tanto sus fuentes como su impacto en los
ecosistemas y en la salud pblica. Tambin se ha revisado la legislacin actual
sobre residuos y suelos contaminados.

Etapa 3. Se ha desarrollado un segundo trabajo de revisin, con mayor detalle, de

aquellos artculos relacionados con la fitorremediacin en general. Se integraron en
una sola lista los artculos de ambas bases de datos (en relacin con las palabras
clave soil, phytoremediation, heavy metals, soil contamination, soil-heavy metals).
Para completar esta etapa se realiz un anlisis de las tendencias temporales
sobre dichos artculos.

Etapa 4. Se han estudiado con mayor profundidad aquellos artculos

correspondientes a las tcnicas de fitorremediacin, en concreto de fitoextraccin
de metales pesados relacionada con la biodisponibilidad de stos en el suelo; los
tipos de mecanismos de absorcin, traslocacin y tolerancia de los metales
pesados en las plantas conocidos hasta el momento; y las limitaciones y las
tendencias de estas tcnicas. Esta ltima etapa se inici a partir de los artculos
localizados en las bases de datos descritas, pero el proceso de revisin se ampli

con nuevas referencias que aparecan en la bibliografa de los trabajos

previamente revisados.

7.3. RESULTADOS Y DISCUSIN

En este apartado se consideran dos aspectos diferentes. Por un lado los resultados
obtenidos del anlisis bibliogrfico expuesto en el punto anterior de metodologa. A
continuacin se desarrolla el contenido de los artculos analizados sobre
recuperacin de suelos atendiendo a las tcnicas de fitorremediacin, en particular
las caractersticas que definen a cada una de ellas. Se hace especial nfasis en la
tcnica de fitocorreccin al ser la ms investigada, la relacin de esta tcnica con la
biodisponibilidad de los metales y la forma en que dicha biodisponibilidad puede
ser incrementada. As mismo se detallan los mecanismos de absorcin,
translocacin y tolerancia por la vegetacin, las limitaciones de estas estrategias de
fitorremediacin y las tendencias investigadoras.

7.3.1. Anlisis bibliogrfico

Desde el ao 1996 hasta el 2015, existen un total de 227.348 artculos en la

base de datos Science Direct y 118.606 artculos en ISI Web, que relacionan el
suelo con las diferentes palabras clave, como se muestra en la Figura 2. Las
diferencias observadas en el nmero de artculos ha justificado la utilizacin
conjunta e integrada de ambas bases de datos. Se excluye la informacin
previa a 1996 en este apartado dado que las bases de datos no muestran los
datos desglosados a partir de esta fecha.
Figura 2. Grafica del nmero de artculos en cada una de las bases de datos
por palabras clave. Bases de datos Science Direct e ISI Web (1996-2014).

En la Figura 3 se muestra la evolucin temporal creciente de las

investigaciones sobre fitorremediacin en el periodo de tiempo considerado. Se
puede percibir que hasta el ao 1999 no se comenz a investigar la
fitorremediacin de suelos contaminados con metales pesados con mayor
intensidad, como refleja la pendiente. Esto podra atribuirse a la preocupacin
progresiva por la bsqueda de tecnologas menos invasivas para la extraccin
de metales pesados de los suelos.

Figura 3. Grfica de la evolucin temporal de las investigaciones de la

fitorremediacin en las bases de datos elegidas. Bases de datos Science Direct
e ISI Web (1996-2014).
 En la Figura 4, obtenida a partir de la evolucin temporal de las investigaciones
sobre fitorremediacin y, posteriormente, filtrando con el trmino contaminacin
de los suelos y metales pesados, se observa que el nmero de artculos,
aunque en aumento progresivo es muy inferior a la bsqueda anterior, ms
general.

Figura 4. Evolucin temporal de las investigaciones sobre fitorremediacin

filtrando los artculos relacionados con la contaminacin de los suelos por
metales pesados. Base de datos Science Direct (1996-2014).

7.3.2. Recuperacin de los suelos. Tcnicas de fitorremediacin.

La eleccin de una estrategia de remediacin depender de la naturaleza de

los contaminantes. Los suelos contaminados con metales pesados son
extremadamente difciles de remediar y normalmente son excavados y
sustituidos con suelo nuevo. Adems, algunas zonas contaminadas con
metales son tratadas con otras tcnicas, como la lixiviacin cida, separacin
fsica del contaminante o procesos electroqumicos que tienen costes muy
elevados (Cunningham, 1995). Por ello, se busca utilizar tcnicas de
remediacin biolgicas menos invasivas y costosas.

La fitorremediacin es considerada a menudo como una alternativa para las

tecnologas de remediacin convencionales por ser una actividad
econmicamente sostenible, eficaz y respetuosa con el medio ambiente
(Kumar P., 1995).

Las tcnicas de fitorremediacin son de diverso tipo: fitoextraccin,

fitoestabilizacin o fitomovilizacin, fitodegradacin, rizodegradacin,
rizofiltracin, fitovolatilizacin y fitosalinizacin (Figura 5).

Figura 5. Representacin esquemtica de los distintos mecanismos de

fitocorreccin (Dez, 2008).

La fitoextraccin (tambin conocida como fitoacumulacin, fitoabsorcin o

fitosequestracin) emplea la capacidad de las plantas para absorber y extraer
el contaminante del suelo, especialmente metales, y acumularlo en sus tallos y
hojas (Sekara et. Al., 2005; Yoon et al.; Rafati et al., 2011). Segn
Vangronsveld (2009), las plantas fitoextractoras ideales deberan poseer las
siguientes caractersticas:

- Elevado ndice de crecimiento.

- Elevada produccin de biomasa.
- Sistema radicular ampliamente distribuido y muy ramificado.
- Acumular metales pesados del suelo.
- Translocar los metales pesados acumulados desde la raz hasta los
brotes.
- Tolerar los efectos txicos de los metales pesados.
- Presentar buena adaptacin a las condiciones ambientales y climticas
de la zona y resistencia a patgenos y plagas.
- Deben ser de fcil cultivo y cosecha.
- Y repeler a los herbvoros para evitar la contaminacin de la cadena
alimentaria.

En el proceso de fitoextraccin, tal y como indica la Figura 6, primero se elegir

la especie apropiada que ser cultivada en un suelo contaminado determinado.
Tras haberse llevado a cabo la extraccin del contaminante por la planta, se
retirar la cosecha, ahora convertida en biomasa enriquecida por el metal
pesado que contaminaba el suelo. Posteriormente, se llevar a cabo el
tratamiento de la cosecha; por compostaje, compresin o tratamientos termales
por ejemplo, para reducir el volumen y/o el peso de biomasa. Por ltimo sta
materia prima se procesar como si se tratara de un residuo peligroso, o se
reciclar para recuperar los elementos que podrn tener valor econmico
(Vangronsveld et al., 2009).

Figura 6. Proceso implicado en la fitoextraccin de contaminantes del suelo

(Cunningham, 1995).

La fitoestabilizacin o fitoinmobilizacin (Figura 7) es el uso de plantas para

estabilizar los contaminantes en suelos contaminados (Singh, 2012). Esta
tcnica es utilizada para inmovilizar y reducir la biodisponibilidad de
contaminantes en el suelo, previniendo su migracin a aguas subterrneas o su
entrada en la cadena trfica. Las plantas pueden inmovilizar los metales
pesados en los suelos a travs de adsorcin por la raz, precipitacin,
complejacin o reduccin de la valencia del metal en la rizosferea (que hace el
metal menos txico como sucede, por ejemplo, con la reduccin del Cr VI a Cr
III). Esta tcnica no es una solucin permanente porque los metales pesados
permanecen en el suelo, solo se limita su movimiento, por ello actualmente es
una estrategia utilizada para estabilizar o inactivar contaminantes
potencialmente txicos (Hazrat Ali et al., 2013).
 Fi
gura 7. Procesos implicados en la fitoestabilizacin de los suelos
contaminados.

La fitodegradacin (Figura 8) es la degradacin de contaminantes orgnicos

por las plantas con la ayuda de enzimas como la deshalogenasa y la
oxigenasa, no dependientes de los microorganismos de la rizosfera (Vishnoi
and Srivastava, 2008). Las plantas pueden acumular xenobiticos orgnicos de
suelos contaminados y detoxificarlos por sus actividades metablicas. Esta
estrategia est limitada solo a contaminantes orgnicos, ya que los metales
pesados no son biodegradables (Doty et al., 2007).

Figura 8. Procesos de fitodegradacin de contaminantes orgnicos en el suelo

(Cunningham, 1995).

La rizodegradacin refiere a la descomposicin de contaminantes orgnicos

en el suelo por microorganismos presentes en la rizosfera (Mukhopadhyay and
Maiti, 2010). En esta zona del suelo las plantas secretan exudados ricos en
carbohidratos, aminocidos y flavonoides; creando as un entorno rico en
nutrientes que estimula la actividad metablica microbiolgica hasta cien veces
mayor de lo normal.

La rizofiltracin se basa en que algunas plantas acuticas, de humedales,

algas, bacterias y hongos, resultan ser buenos biosorbentes de metales
presentes en las aguas contaminadas a travs de las races. Aunque los
estudios en este sentido son prometedores, la limpieza a gran escala utilizando
esta tcnica no est demostrada excepto para algunas aplicaciones limitadas
(Dez, 2008).

La fitovolatilizacin es la absorcin de contaminantes del suelo por plantas,

su conversin a formas voltiles y su posterior liberacin a la atmsfera. Es una
estrategia utilizada con contaminantes orgnicos y algunos metales pesados
como Hg y Se; pero en esta tcnica existe una controversia, ya que no se
excluye completamente el contaminante, sino que se transfiere del suelo a la
atmsfera, donde puede volver a ser redepositado (Hazrat et al., 2013).

La fitodesalinacin es una tcnica reciente emergente. Se refiere al uso de

plantas halfitas para suprimir el cloruro sdico de suelos salinos que hacen
imposible el crecimiento normal de otras plantas (Hazrat et al., 2013).
7.3.3. Fitoextraccin de metales pesados. Relacin con la biodisponibilidad y
forma de aumentarla.

La fitoextraccin es la tcnica de fitorremediacin ms til para eliminar los

metales pesados de los suelos contaminados (Hazrat et al., 2013). Sin
embargo, la eficiencia de esta tcnica depende de las formas qumicas en las
que se encuentran los metales en el suelo, cuya movilidad y biodisponibilidad
viene determinada, en gran medida, por el conjunto de los diferentes
componentes del suelo, as como por los factores qumicos, fsicos y biolgicos
que influyen en la reactividad de los componentes. Los procesos que
gobiernan la compartimentalizacin de metales en los suelos se traducen en
reacciones de adsorcin-desorcin y precipitacin-disolucin, que afectan
directamente al reparto de metales entre la fase slida y la acuosa, as como
reacciones de complejacin y oxidacin-reduccin que afectan a la reactividad
del propio metal (solubilidad y biodisponibilidad). Como se dijo anteriormente,
estas reacciones estn controladas por factores ambientales como el pH, la
capacidad de intercambio de cationes, el contenido de humedad de los suelos,
el potencial redox y el propio tipo y especiacin qumica de los elementos
(Dez, 2008).

La biodisponibilidad de un elemento se refiere a las formas biolgicamente

disponibles que pueden llegar a ser absorbidas por un organismo e integrarse
en su metabolismo y va a depender fundamentalmente de las formas o
especiacin en las que se encuentren los metales en el suelo y de la capacidad
de absorcin del propio organismo. A causa de esto, las plantas han
desarrollado ciertos mecanismos de solubilizacin de metales pesados en el
suelo:

- Las races pueden secretar ala rizosfera sustancias capaces de

movilizar metales, denominadas fitosiderforos (Lone et al., 2008).
- Tambin pueden excretar protones, que acidifican la rizosfera e
incrementan la disolucin de metales ya que pueden desplazar los
cationes de metales pesados adsorbidos en partculas del suelo (Alford
et al., 2010). Los exudados radiculares pueden disminuir el pH de la
rizosfera en una o dos unidades, esto hace que aumente la
concentracin de metales pesados en disolucin promoviendo su
desorcin (Thangavel and Subbhuraam, 2004).
- Adems de esto, los microorganismos rizosfricos (mayoritariamente
bacterias y hongos micorriza) pueden aumentar considerablemente la
biodisponibilidad de metales pesados en el suelo, ya que las
interacciones de siderforos microbianos puede aumentar la labilidad
de los metales y aumentar la absorcin radicular (Mench et al., 2009).
 La fitoextraccin inducida es otra forma de aumentar la biodisponibilidad de
metales pesados en el suelo. Se hace aadiendo diferentes quelantes, como el
EDTA, el cido ctrico, el sulfuro elemental y el sulfato amnico. Los quelatos
forman complejos solubles en agua con los metales pesados y ayudan a la
desorcin de las partculas del suelo. En contraposicin, estos tratamientos
qumicos causan problemas de contaminacin secundaria, por ejemplo, el
EDTA es no biodegradable y puede filtrarse y contaminar las aguas
subterrneas, por ejemplo. Por ello se buscan quelantes biodegradables, como
el cido ctrico, de origen natural (Ali, 2013).

7.3.4. Mecanismos de absorcin, translocacin y tolerancia.

Los metales pesados son transportados al interior de la planta en forma de

iones. Estos atraviesan una serie de transportadores especializados o
acoplados a protenas portadoras de protones en la membrana plasmtica de
la raz (Greipsson, 2011). Posteriormente, los iones podrn ser almacenados en
las races o translocados a los tejidos a travs de los vasos del xilema (Prasad,
2004) donde sern depositados en vacuolas, eliminando as el exceso de iones
metlicos del citosol y as reducir las interacciones con los procesos
metablicos celulares. La compartimentalizacin de complejos metlicos en
vacuolas es parte de los mecanismos de tolerancia en hiperacumuladoras, que
se basan en la unin de la pared celular, activar el transporte de iones a la
vacuola y la quelacin a travs de la formacin de complejos metlicos
(Sheoran et al., 2011).

El viaje de los metales pesados desde el suelo hasta las vacuolas est
controlado y regulado por gran variedad de molculas especializadas en
distintas funciones de transporte, complejacin y secuestro. Las molculas ms
importantes en los procesos de acumulacin y tolerancia de metales son las
fitoquelatinas (PCs) y las metalotioninas (MTs). Estas molculas son ricas en
grupos cisteinsulfidrilo que unen y secuestran iones de metales pesados
formando complejos muy estables. Las plantas las expresan de manera natural
para facilitar la translocacin a travs del xilema. Las PCs son pptidos
sintetizados por la enzima fitoquelatina sintetasa, que se unen a los metales y
son parte del sistema de detoxificacin vegetal (Ali, 2013). Se expresan
mayormente en las races y en menor medida en las hojas (Gomez et al.,
2009). Por otro lado, MTs son un grupo de genes modificados, de bajo peso
molecular, que unen protenas a metales y cuya funcin es la de proteger las
plantas de los efectos txicos de los iones metlicos (Sheoran et al., 2011).

8. ESTUDIO DE LOS PARMETROS FISICOQUMICOS PARA LA

FITORREMEDIACIN DE CADMIO (II) Y MERCURIO (II) CON LA
ESPECIE Eichhornia crassipes (JACINTO DE AGUA)

8.1. RESUMEN
En este trabajo se realiz estudios para medir la capacidad de sorcin de los iones
metlicos Cd (II) y Hg (II) de la especie Eichhornia crassipes (jacinto de agua). Este
estudio incluye ensayos donde se optimizan concentracin de nutrientes, pH y
concentracin de iones metlicos, lo que se llev a cabo a temperatura ambiente y
con soluciones acuosas de Cd (II) y Hg (II), a las que fueron sometidas las
muestras de Eichhornia crassipes. Para corroborar la remocin de dichos metales,
las soluciones residuales, despus de haber sido sometidas con la especie vegetal,
fueron tratadas usando el mtodo APHA 3030-e y las muestras de Eichhornia
crassipes fueron tratadas usando el mtodo EPA 200.3. La concentracin de Cd (II)
fue determinada por un equipo ICP-OES y la del Hg (II), por un equipo de
absorcin atmica. Los resultados obtenidos fueron: Dosis ptima 1mL de A y 0,5
mL de B, pH ptimo 5, concentracin ptima de Cd (II) y Hg (II) 5 mg/L para cada
ion. Con estos parmetros se inici la remocin de 5 mg/L de los iones metlicos
contenidos en 1 litro de solucin. Los porcentajes de sorcin fueron de 16,56 %
para Cd (II) y 15,6 % para elHg (II) en un periodo de 7 das.

8.2. PARTE EXPERIMENTAL

8.2.1. Muestreo de la especie vegetal Eichhornia crassipes (jacinto de agua):

La especie vegetal jacinto de agua fue colectada en el valle Chilln, en el

distrito de Carabayllo, provincia y departamento de Lima, el 20 de setiembre del
2012. En este lugar crecen en humedales, estanques y piscinas. Luego del
muestreo, estas plantas se llevaron a una piscina construida de ladrillo y
cemento de dimensiones 1,80 m (largo), 1,20 m (ancho) y 20 cm (alto), que se
utiliz exclusivamente para su almacenamiento y cultivo, las mismas que se
llevaran al laboratorio para realizar los ensayos correspondientes.

8.2.2. Determinacin de la dosis ptima de nutrientes para la viabilidad de Eichhornia

crassipes (jacinto de agua):

Para determinar la dosis ptima de nutrientes se prepar diferentes dosis de

solucin A y solucin B mostrados en la tabla 1, cuya composicin qumica se
muestra en la tabla 2, en 1 litro, en las cuales se someti muestras de un
tamao y peso promedio y se midi el tiempo de supervivencia de cada planta
a diferentes dosis de las soluciones A y B. Luego de ser sometidas cada
muestra con las diferentes dosis de nutrientes se realiz un seguimiento de
cada muestra en funcin de tiempo (das) y se observ cualitativamente todas
 las partes de la planta, anotando cualquier diferencia con el aspecto que
presenta al inicio.

8.2.3. Efecto del pH sobre la viabilidad de Eichhornia crassipes (jacinto de agua) y la

solubilidad del metal:

Para observar el efecto que ocasiona la variacin de pH en el Eichhornia

crassipes (jacinto de agua) se prepar diferentes soluciones con la
concentracin conocida de nutriente ya optimizado, variando el rango de pH
desde 1,5 a 8 y a cada solucin se le adicion 1 ppm de cadmio (II) y 1 ppm de
mercurio (II), esto con la finalidad de determinar la solubilidad del ion metlico
con respecto al pH de cada solucin, tal como lo muestra la tabla 3.

8.2.4. Determinacin de la concentracin ptima de los metales para la viabilidad de

Eichhornia crassipes (jacinto de agua):

Con la finalidad de determinar la concentracin ptima de metales cadmio (II) y

mercurio (II) a la cual la especie Eichhornia crassipes (jacinto de agua) ser
sometido y soportar el mayor tiempo de vida. Para ello se prepar 1 litro de
las diferentes soluciones para cadmio (II) y mercurio (II), a una determinada
concentracin de nutrientes y pH ya conocidos. La concentracin de cadmio
(II), desde 1 a 20 ppm y la del mercurio (II) desde 1 a 25 ppm como se muestra
en la tabla 4. Las muestras de jacinto de agua se sometieron simultneamente
a cada una de estas soluciones cuya concentracin del metal es conocida.

8.2.5. Determinacin de cadmio (II) y mercurio (II) en la misma planta:

Para este ensayo, se sometieron ocho muestras de Eichhornia crassipes

(jacinto de agua) en soluciones con los parmetros necesarios ya optimizados.
La recoleccin se dio cada 24 horas donde se colocaron las muestras en
bolsas ziploc y se identificaron como se muestra en la tabla 5, para luego ser
digestadas segn los mtodos establecidos.

8.2.6. Determinacin de cadmio (II) y mercurio (II) en las soluciones residuales

tratadas con Eichhornia crassipes (jacinto de agua)

Para determinar las concentraciones en ppm de cadmio (II) y mercurio (II) en

las soluciones residuales correspondientes a las muestras de la tabla 4, de las
cuales eran conocidos las dosis de nutrientes, el pH y la concentracin inicial
de cadmio (II) y mercurio (II). Las muestras sometidas fueron recolectadas
cada 24 horas hasta el da ocho; simultneamente se tom alcuotas de 50 mL
de solucin en digitubos del mismo volumen, los cuales fueron preservados con
1mL HNO3 1:1 y etiquetados como se muestra en la tabla 6. Finalmente
digestados con HNO3 concentrado segn el mtodo APHA 3030-e. Se escogi
a la muestra 5 por duplicado y un blanco reactivo como control. La muestra 5
 es representativa porque representa un rango intermedio del tiempo de
contacto con la planta (jacinto de agua).

8.2.7. Determinacin de cadmio (II) y mercurio (II) independientemente en cada

planta

Para determinar la concentracin de cadmio (II) y mercurio (II)

independientemente en Eichhornia crassipes (jacinto de agua), se procedi de
la misma manera en la que se determinaron ambos metales juntos; un litro de
solucin y a las mismas condiciones optimizadas; es decir concentracin de
nutrientes, pH y concentracin del metal. Cada una de las ocho muestras
previamente pesadas e identificadas fue sometida de manera simultnea a
cada recipiente. En la tabla 6 se muestran los pesos de cada muestra (planta)
con su respectiva identificacin y el peso de muestra que se utiliz para el
anlisis cada 24 horas hasta el da ocho. La muestra del octavo da se analiz
por duplicado, siempre acompaado de una muestra de jacinto de agua como
blanco. Determinacin de cadmio (II) y mercurio (II) independientemente en
cada solucin residual deEichhornia crassipes La concentracin de cadmio (II)
y mercurio (II) fue determinada en cada solucin residual luego de ser removida
cada una de las ocho muestras de jacinto de agua. Para cada ion metlico
(tabla 7) se tomaron alcuotas de 50 mLen digitubos, cada una de ellas se
preserv con HNO3 1:1 y se etiquetaron segn se muestra en la tabla 8.
Finalmente fueron digestados con cido ntrico concentrado (HNO3) segn el
mtodo APHA 3030-e. Para todas estas muestras se escogi a la muestra 8 por
duplicado y un blanco reactivo como control, luego se procedi a analizar las
muestras con el equipo ICP-OES para cadmio (II) y con el equipo de absorcin
atmica acoplado a un generador de hidruros (vapor frio) para el mercurio (II).
8.3. RESULTADOS Y DISCUSIN
8.3.1. Determinacin de la dosis ptima de nutrientes para la viabilidad de Eichhornia
crassipes (jacinto de agua)
Luego que las muestras de jacinto de agua fueron sometidas a diferentes dosis
de nutrientes durante varios das en el laboratorio a temperatura de 25 2 C,
se observ que algunas de estas se secaban, moran y otras crecan con
nuevas hojas y tallos. Luego de 25 das la muestra con dosis A= 1 mL y B= 0,5
mL se mantuvo con hojas y tallos verdes, desarrollando algunas hojas en
tamao, gracias a los nutrientes que aprovech y a partir de este tiempo
comenz a secar y perder tamao lentamente, por falta de nutrientes hasta el
da 28, siendo esta dosis la ptima para nuestros objetivos.
8.3.2. Efecto del pH sobre la viabilidad de Eichhornia crassipes (jacinto de agua) y la
solubilidad del metal.
Los iones cadmio (II) y mercurio (II) empiezan a precipitar como hidrxidos en
presencia de los nutrientes alrededor de pH>7. Combinando ambos aspectos,
se dedujo que pH 5 es el valor ptimo porque mantiene viva a la planta por
ms de 18 das para el cadmio (II) y 20 das para el mercurio (II). Estudios
realizados determinaron el rol del pH en un proceso similar, encontrando que el
pH ejerce un fuerte efecto: (i) en la formacin de iones complejos del metal en
solucin acuosa, los cuales presentan diferentes ligandos que modifican la
acidez y morfologa del metal en solucin, y (ii) en el estado qumico de los
centros activos de los adsorbentes.3,4 Asimismo, debemos tener en cuenta
que la solubilidad del cadmio (II) y mercurio (II) tambin es afectada por la
presencia de diversos aniones quelantes provenientes de las soluciones
nutrientes (por ejemplo fosfatos, nitratos y sulfatos), tornando ms complejo
an este fenmeno.
8.3.3. Determinacin de la concentracin ptima de los metales para la viabilidad de
las plantas
Se determin la concentracin de cadmio (II) y mercurio (II) a la cual la planta
presenta fitotoxicidad. A una concentracin de 5 mg/L, la planta permanece
viva por tiempo suficiente para cumplir su tarea destoxificante. No todas las
plantas son capaces de resistir altas concentraciones de metales pesados,
Eichhornia crassipes (jacinto de agua), es una de las pocas especies capaces
de acumular metales txicos, hasta ciertos lmites, sin alterar su metabolismo.
Se piensa que el reemplazo de cationes divalentes como magnesio y calcio
intracelular por metales pesados isovalentes como cobre, plomo y cadmio
causa desequilibrio en los sistemas vivos al insertarse en los sistemas
enzimticos de forma irreversible.
8.3.4. Determinacin de la concentracin de cadmio (II) y mercurio (II) presentes en
Eichhornia crassipes (jacinto de agua) y en las soluciones residuales.
Estos metales pesados, Cd (II) y Hg (II), son no esenciales, ni cumplen una
funcin fisiolgica conocida en plantas. Otros elementos como Co, Cu, Fe, Mn,
Mo, Ni y Zn, son esenciales para el crecimiento y el metabolismo normal de las
plantas. Los metales pesados como Cd (II) y Hg (II) son altamente txicos,
debido a su reactividad con los tomos de S y N presentes en los aminocidos
y las protenas. Contrario a los contaminantes de origen orgnico, estos
metales pesados no pueden ser degradados qumica u orgnicamente, por lo
que una de las alternativas para la remocin de aguas contaminadas con estos
iones metlicos es la fitoextraccin. sta consiste en la absorcin y
acumulacin de metales pesados en la parte area de plantas
hiperacumuladoras como Eichhornia crassipes. Esta planta puede presentar
diferentes mecanismos de tolerancia en respuesta al exceso de Cd (II) y Hg
(II), incluida la reduccin del transporte a travs de membrana de exclusin,
formacin de pptidos ricos en grupos tilicos (fitoquelatinas y
metalotionenas), quelatacin por cidos orgnicos, aminocidos y
compartimentacin del metal en estructuras subcelulares. La acumulacin de
los iones metlicos Cd (II) y Hg(II) por Eichhornia crassipes (jacinto de agua)
se da probablemente en un proceso complejo, desarrollado en varias etapas:
a) bioactivacin del ion metlico en la rizosfera, b) transporte del ion metlico a
travs de la membrana plasmtica de las clulas radiculares, c) traslocacin
del ion metlico a travs del xilema, d) destoxificacin y secuestro del ion
metlico porla planta.7 Luego de ser recolectadas las muestras de jacinto de
agua, se las llev a una digestin segn el mtodo EPA 200.3 con HNO3-H2O2
y el digestado fue enrasado a un volumen final de 50 mL con agua ultrapura.
Se procedi a la lectura de estas muestras con el equipo de ICP-OES para el
cadmio y la absorcin atmica (vapor fro) para el mercurio (II). Se realiz los
ensayos por duplicado de la muestra correspondiente al quinto da.
Figura 2. Izquierda; porcentaje de absorcin de Cd (II) y Hg (II) en Eichhornia
crassipes. Derecha; porcentaje de remocin de Cd (II) y Hg (II) en las
soluciones residuales. Estas muestras se sometieron a una solucin conocida
de 5 mg/L de Cd (II) y Hg (II) en una misma solucin durante ocho das.
En la figura 2 se muestra una ligera diferencia entre el porcentaje de absorcin
de estos iones lo cual se debe probablemente a la estabilizacin de los
complejos de cadmio (II) con respecto a los complejos formados con el
mercurio (II) y que guarda relacin con las constantes de estabilidad de cadmio
(II) y mercurio (II) frente a un ligando tiolato, siendo los valores LogKCd =5,6 y
LogKHg =10,2 a un pH 7. Estos valores muestran que hay una mayor
estabilidad por parte del mercurio (II); sin embargo, se debe tener en cuenta
otros factores, como la solubilidad de la especie que libera el ion metlico, la
energa de enlace entre el ion metlico y el azufre (MS) y la accesibilidad del
metal al nuclefilo, siendo este ltimo factor ms favorable para el Cd (II)
debido a su nmero de coordinacin 4 (tetradrico) lo cual explica porque
absorbe un poco ms que elHg (II), siendo ambos muy afines a los complejos
que contiene la planta. En las figuras 3 y 4 se observa los mximos porcentajes
de absorcin y remocin. Siendo 6,41% en un periodo de siete das y un
porcentaje de remocin de 63,4% en un periodo de tres das para el cadmio
(II). Mientras que se observa el porcentaje de absorcin de 15,23% en un
periodo de un da y un porcentaje de remocin de 91,8% en un periodo de
ocho das para el mercurio (II).
Figura 3. Izquierda; porcentaje de absorcin de Cd (II) en Eichhornia crassipes.
Derecha; porcentaje de remocin de Cd (II) en las soluciones residuales. Estas
muestras se sometieron en soluciones de 5 mg/L deCd (II) libre deHg (II), para
un periodo de pcho das.

Figura 4. Izquierda; porcentaje de absorcin de Hg (II) en Eichhornia crassipes.

Derecha; porcentaje de remocin de Hg (II) en las soluciones residuales. Estas
muestras se sometieron en soluciones de 5 mg/L deHg (II) libre deCd (II).