VIBRIO

Historia

El gnero Vibrio es uno de los cuatro gneros que conforman la

familia Vibrionaceae; sus miembros son habitantes naturales de las
aguas y el ambiente marino.

Hasta 1960, V. cholerae era el nico

reconocido como patgeno humano. Fue
primeramente descrito por Pacini en 1854,
que lo encontr en el intestino de un
paciente fallecido por el clera, y en ese
momento fue designado como V. cholerae.

En 1906, Gotschlich, en el Tor, Sina, aisl

unos microorganismos muy semejantes a V.
cholerae, pero que diferan de este en su actividad hemoltica, a los
cuales llam V. eltor; en la actualidad se considera este
microorganismo como una variante de V. cholerae. Se reconocen ms
de 30 especies de Vibrio, de las cuales 12 se consideran como
patgenas humanas, estas son: V. alginolyticus, V. carchariae, V.
cholerae, V. cincinnatiensis, V. damsela, V. fluvialis, V. furnissii, V.
hollisae, V. metschnikovii y V. vulnificus. Algunas de estas especies se
limitan a producir enfermedad intestinal, otras provocan enfermedad
extraintestinal, y otras tienen ambas localizaciones.

Morfologa e identificacin

Los vibrios son bacilos cortos, curvos, que semejan

una coma. Su tamao vara considerablemente;van
desde 1 a 5 _m de largo por 0,3 a 0,6 _m de ancho.

Las comas pueden aparecer alargadas, delgadas y

delicadas, o cortas y gruesas. Se presentan como
clulas simples, en forma de S, en parejas o a
veces en cadenas muy cortas. Las formas de
esferoplastos se observan frecuentemente. En los
medios lquidos se aprecian, a menudo, formas
espirilares.

En los cultivos viejos, por el contrario, se ven

formas muy pequeas, semejando grnulos y que no fijan bien las
coloraciones. En los subcultivos, en muchas ocasiones, los vibrios
pierden su forma de coma.
Estos microorganismos son activamente mviles por medio de un
flagelo que en la microscopia electrnica se observa unido al
blefaroplasto. Son grannegativos, pero se colorean mejor cuando se
usa como contraste carbolfucsina por safranina.

Requerimientos nutricionales y caractersticas fisiolgicas

Vibrio puede crecer con facilidad en los medios de cultivo sin altos
requerimientos nutricionales. Una de sus principales caractersticas es
su rpido crecimiento en agua peptona alcalina al 1 % con un 0,5 %
de NaCl.

El crecimiento ocurre, principalmente, en la superficie despus de 6 a

9 horas de incubacin, por lo que se observa una pelcula en la
misma. Los vibrios son fuertemente aerbicos, y es necesaria una
adecuada fuente de oxgeno para su recobrado.

Aunque algunas especies crecen muy pobremente o no crecen a 37

0C, en aquellas asociadas con enfermedad en el hombre se advierte
que su temperatura ptima de crecimiento oscila entre 30 y 40 0C.

La presencia de sal es esencial en los medios de cultivo para el

crecimiento de vibrios; la concentracin de sal requerida para cada
especie de vibrios es diferente y esta caracterstica es uno de los
parmetros utilizados en su identificacin.

Los estudios fisiolgicos para la clasificacin en especie comienzan

con la reaccin de la oxidasa, todas las especies capaces de producir
enfermedad en los humanos son oxidasa positiva, con excepcin de
V. metschnikovii que es oxidasa negativa. La mayora de los vibrios no
reducen los nitratos a nitritos, no fermentan la lactosa y s la glucosa,
la maltosa, el manitol y la sacarosa sin formacin de gas.

El poder hemoltico de las cepas de V. cholerae ha sido uno de los

principales elementos en la diferenciacin de V. cholerae clsico y V.
cholerae, El Tor; se ha determinado que V.
cholerae clsico no produce una verdadera hemolisina soluble,
mientras que V. cholerae, El
Tor, s la produce.

Estructura antignica

Se han detectado, por lo menos, dos componentes antignicos en las

diferentes especies de vibrios. El antgeno O, que es termoestable, y
el antgeno H, el cual es termolbil y su
aglutinabilidad e inmunogenicidad se inactivan por el calentamiento a
100 C durante 15 min
y 2,5 horas respectivamente.
Una caracterstica de las especies de Vibrio es que todas las cepas de
una misma especie poseen los mismos antgenos H, aunque estn
divididas en muchos serogrupos por el antgeno O. Se han descrito
ms de 80 serovariedades en V. cholerae.

Clera

El clera es una enfermedad infecciosa intestinal aguda, de comienzo

brusco, que se manifiesta por diarrea acuosa y profusa, vmitos,
deshidratacin y colapso circulatorio. Es provocada por el Vibrio
cholerae.

El germen presente en el agua y alimentos

contaminados, ingresa al organismo por va
oral (a travsde la boca). Una vez superada
la barrera gstrica (jugos del estmago),
ingresa al intestino delgadoy origina
secrecin de agua y electrolitos, produciendo
diarrea de tipo secretoria.

El hbitat natural del vibrio son las aguas

dulces y saladas. Son resistentes al fro y
sensibles al calor, desecacin y acidez.

El nico reservorio natural es el hombre. En l, puede actuar como

portador convaleciente o crnico eliminando vibriones en forma
intermitente con sus excretas, contaminado agua de consumo,
alimentos y otros vehculos de transmisin como moscas y
cucarachas.

La principal va de transmisin es la ingestin de agua o alimentos

contaminados con el vibrio cholerae.

El clera se transmite a travs del agua no potabilizada, frutos de

mar, pescado, o por malos hbitos de higiene. Los sntomas son
diarreas muy abundantes que deshidratan rpidamente a la persona,
vmitos, fiebre, calambres y trastornos renales.

Vibrio Cholerae

El Vibrio cholerae es una bacteria Gram negativa con forma de

bastn Hay dos cepas principales de V. cholerae, clsica y El Tor, y
80 serogrupos.
Patogenia Vibrio Cholerae

Vibrio cholerae penetra por va oral, la dosis infectante es de 108 a

109; los vibrios son muy sensibles al cido y, por lo tanto, el estmago
es una importante barrera para evitar que los vibrios lleguen a
colonizar el intestino, lo cual debe ocurrir para lograr la infeccin y
causar enfermedad. La colonizacin del intestino delgado depende de
funciones como son: la motilidad, la quimiotaxis, las enzimas
proteolticas, las hemaglutininas, los factores de colonizacin (pili) y,
finalmente, la produccin de toxina, clera toxina (CT).

La adherencia a la mucosa del intestino delgado proximal, es un paso

previo a la produccin de enterotoxinas y la posterior secrecin de
agua y electrlitos. Este proceso sucede sin la destruccin del borde
en cepillo de los enterocitos, sin causar invasin de la mucosa
intestinal y sin provocar lesiones histopatolgicas reconocibles al
microscopio de luz.

La toxina CT es una protena grande, periplasmtica, compuesta por

un 98 % de protenas, un 1 % de lpidos y un 1 % de hidratos de
carbono, cuyos genes estructurales, ctxA y ctxB, codifican cinco
subunidades B que ligan la molcula de toxina a los receptores de las
clulas intestinales y una subunidad A, enzimticamente activa.

Las cepas clsicas poseen dos copias de ctxB no ligadas, pero las
cepas El Tor tienen, a menudo, una copia.

Una primera toxina produce cambio en la funcin de los enterocitos,

hay un incremento en la secrecin por los enterocitos de las criptas
intestinales y una disminucin de la funcin de absorcin por los
enterocitos situados en los pices de las vellosidades intestinales.

Se ha descrito el papel de una segunda toxina producida por V.

cholerae, que tiene como funcin alterar uniones intercelulares,
haciendo que la mucosa intestinal se haga ms permeable, y por la
accin de la presin hidrosttica se filtre hacia la luz intestinal agua y
electrlitos; debido a esto aparece diarrea, lo cual se ha puesto en
evidencia al producirse

Una tercera enterotoxina, denominada enterotoxina accesoria del

clera (ace), ha sido descrita; esta tambin tiene participacin en el
cuadro clnico del clera.

Se ha sealado en V. cholerae, al igual que en otros patgenos

entricos, la presencia de un islote de patogenicidad que contiene
toda la informacin para los factores de virulencia.
Entre los factores de patogenicidad se plantean las enterotoxinas, la
cholerae-like toxina, las hemolisinas, los pilis, las citotoxinas, factores
que aumentan la invasividad como las proteasas y la resistencia a la
actividad bactericida del suero.

Cuadro Clnico Clera

Vibrio cholerae produce diarrea aguda que se caracteriza por ser de

comienzo repentino, diarreas acuosas y profusas; no hay dolor; los
vmitos pueden estar presentes; hayrpida deshidratacin, acidosis y
colapso perifrico.

La infeccin asintomtica es mucho ms frecuente que la aparicin

del cuadro clnico caracterstico, especialmente en las infecciones por
el biotipo El Tor, siendo comn en los nios la presencia de diarreas
leves.

En los casos graves no tratados, la persona puede morir en horas y la

tasa de letalidad excede al 50 %.

Tratamiento Clera

En el clera, el principal aspecto a considerar es la reposicin de

lquidos.
Los antibiticos de eleccin son la tetraciclina y el trimetoprim-
sulfametoxazol en nios pequeos. En las infecciones
extraintestinales se indica el uso de antibiticos

Diagnostico en el laboratorio Vibrio Cholerae

El diagnstico del clera se hace sobre el estudio de tres aspectos: los

casos clnicos,los portadores y el medio ambiente.

En los casos clnicos, las muestras tiles para el diagnstico son las
heces fecales y los vmitos. En los portadores se estudian las heces
fecales despus de suministrar purgante salino. El medio ambiente se
analiza mediante las muestras obtenidas del alcantarillado por hisopo
de Moore, estudio del plancton o la vegetacin costera y estudios de
moluscos, aguas y alimentos.
Examen directo. Los mtodos del examen directo en campo oscuro
o contraste de fase se pueden utilizar en las muestras (provenientes
de enfermos) de las heces fecales y el vmito, donde se observarn
los microorganismos activamente mviles. La fluorescencia con
anticuerpos marcados se emplea en los enfermos en la fase aguda de
la enfermedad.

Cultivo. El diagnstico de certeza se basa en la obtencin de los

microorganismos a partir de los cultivos. Si se plantea la demora del
procesamiento de las muestras, se recomienda el uso de un medio de
transporte como el medio de Cary y Blair. La conservacin debe
hacerse a temperatura ambiente, pues las temperaturas bajas
ocasionan la muerte de los vibrios.
Se recomienda el uso de medios de enriquecimiento especialmente
para el aislamiento a partir de muestras provenientes de pacientes
convalecientes o de personas asintomticas. El agua peptona alcalina
pH 9,0 con 1 % de NaCl es el medio recomendado, aunque se puede
utilizar otro ms selectivo, como el medio de Monsur. La incubacin
del agua peptona alcalina no debe sobrepasar las 8 horas.

A partir de las muestras a estudiar o de los medios de

enriquecimiento se siembran las placas de medios selectivos para
vibrios como son el TCBS agar (tiosulfato-citrato-bilis sacarosa) o el
medio de Vibrio agar o TG agar (gelatina-taurocolato-telurito).

La identificacin de V. cholerae en muestras de pacientes se efecta

sin dificultad a partir de las placas de agar selectivo, no as cuando la
identificacin se hace a partir de muestras como el agua o productos
marinos que pueden tener como contaminantes otros
vibrios.

Las colonias sospechosas de corresponderse con V. cholerae se

inoculan en el medio de agar Kligler-hierro, y despus de incubadas
se pasa a la identificacin utilizando los esquemas establecidos.
Se recomienda hacer la identificacin comenzando por una primera
etapa en la cual se realiza la prueba de la oxidasa, la fermentacin de
la glucosa, la reduccin de nitratos a nitritos y el crecimiento en
caldos con concentracin de NaCl al 1 % y sin este, as como la
decarboxilacin de la lisina e hidrlisis de la arginina.

En una segunda etapa se deben estudiar la reaccin de Voges-

Proskauer, la produccin de indol y la produccin de cido a partir de:
L-arabinosa, lactosa, sacarosa, manitol y salicina

La complementacin de la caracterizacin de las cepas se hace con la

clasificacin serolgica para determinar los serogrupos, as como con
el estudio de la hemlisis para la determinacin del biotipo.

Otros mtodos utilizados pueden ser: la sonda del ADN para el

estudio de genes relacionados con la produccin de hemlisis (hyl/A)
y el estudio de la clera toxina por PCR y la clasificacin por
bacterifagos

Para la identificacin de vibrios a partir de muestras extraintestinales

se pueden emplear medios universales con la adicin de NaCl al 1 %.