UNIVERSIDAD DE CHILE

FACULTAD DE MEDICINA
ESCUELA DE KINESIOLOGA

COMPARACIN DE LA EFICACIA HIPOLIPEMIANTE DE Commiphora mukul

Y Monascus purpureus EN RATAS

Jacqueline Vanessa Biere Chales

Camila Paz Toh Gonzlez

2007

COMPARACIN DE LA EFICACIA HIPOLIPEMIANTE DE Commiphora mukul

Y Monascus purpureus EN RATAS

Tesis
Entregada a la
UNIVERSIDAD DE CHILE
En cumplimiento parcial de los requisitos
para optar al grado de
LICENCIADO EN KINESIOLOGIA
FACULTAD DE MEDICINA

por
JACQUELINE VANESSA BIERE CHALES
CAMILA PAZ TOH GONZLEZ

2007

PROF. SANDRO EDGARDO BUSTAMANTE DELGADO, M.Sc.

PATROCINANTE DE TESIS SYLVIA ORTIZ ZUIGA

FACULTAD DE MEDICINA
UNIVERSIDAD DE CHILE

INFORME DE APROBACION
TESIS DE LICENCIATURA

Se informa a la Escuela de Kinesiologa de la Facultad de Medicina que la

Tesis de
Licenciatura presentada por los candidatos:
JACQUELINE VANESSA BIERE CHALES
CAMILA PAZ TOH GONZLEZ
Ha sido aprobada por la Comisin Informante de Tesis como requisito para
optar al grado de Licenciado en Kinesiologa, en el examen de defensa de
Tesis rendido el
.......................................................................................................

DIRECTOR DE TESIS
Prof. Sandro Bustamante Delgado

.........................................

COMISION INFORMANTE DE TESIS.

NOMBRE

FIRMA

Sylvia Ortiz
.............................................................................................................................................
.............................................................................................................................................

A nuestras familias por su amor, paciencia y comprensin.

AGRADECIMIENTOS

A Don Juan por brindarnos su ayuda durante el periodo experimental, por su

disposicin y amabilidad, y a nuestro tutor por guiarnos constantemente.
A nuestros amigos (as) por su colaboracin, tiempo y preocupacin.

INDICE

RESUMEN ......................................................................................................................... i
ABSTRACT ......................................................................................................................ii
ABREVIATURAS ........................................................................................................... iii
INTRODUCCIN............................................................................................................. 1
PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA .......................................................................... 2
1.

Pregunta de investigacin .................................................................................. 2

2.

Justificacin .......................................................................................................... 2

MARCO TERICO ......................................................................................................... 4

1.

2.

Dislipidemias ........................................................................................................ 4
1.1.

Colesterol y sus roles fisiolgicos ............................................................. 4

1.2.

Trastornos en el perfil lipdico ................................................................... 6

1.3.

Tipos de dislipidemias ................................................................................ 6

TERAPIA HIPOLIPEMIANTE ............................................................................ 7

2.1.

Manejo Dietario ............................................................................................ 7

2.2.

Farmacoterapia aloptica........................................................................... 8

2.3.

Farmacoterapia con Fitofrmacos .......................................................... 11

OBJETIVOS ................................................................................................................... 14
1.

Objetivo general................................................................................................. 14

2.

Objetivos Especficos ....................................................................................... 14

HIPTESIS .................................................................................................................... 14
MATERIALES Y MTODOS ....................................................................................... 15
1.

Mtodo ................................................................................................................ 15
1.1.

Diseo de Investigacin ........................................................................... 15

1.2.

Poblacin de estudio. ............................................................................... 15

1.3.

Diseo Experimental ................................................................................. 15

1.4.

Variables ..................................................................................................... 16

2.

3.

Materiales ........................................................................................................... 17
2.1.

Infraestructura fsica ................................................................................. 17

2.2.

Animales ..................................................................................................... 17

2.3.

Reactivos y Soluciones ............................................................................ 18

2.4.

Equipos e Instrumentos ............................................................................ 18

Procedimiento .................................................................................................... 19
3.1.

Determinacin de parmetros bsicos .................................................. 19

3.2.

Determinacin de niveles plasmticos de CT y TG. ............................ 19

3.3.

Administracin de Fitofrmacos y Vehculo .......................................... 19

3.4.

Descripcin del procedimiento ................................................................ 19

RESULTADOS............................................................................................................... 21
DISCUSIN ................................................................................................................... 25
CONCLUSIN ............................................................................................................... 29
PROYECCIONES ......................................................................................................... 30
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS ........................................................................... 31
ANEXOS ......................................................................................................................... 34

RESUMEN

Las enfermedades cardiovasculares son un problema a nivel mundial y

nacional debido al aumento de factores de riesgo como obesidad,
sedentarismo, diabetes, dislipidemia y malos hbitos alimenticios. El gran
aumento de los niveles de colesterol en la poblacin chilena ha motivado la
busqueda de nuevas terapias farmacolgicas para el control y tratamiento de
dislipidemias cuando el control dietario no ha sido eficaz. Los fitofrmacos como
Monascus

purpureus

Commiphora

mukul

ya

han

sido

utilizados

tradicionalmente en China y en la India, para disminuir los niveles plasmticos

de colesterol.

El presente estudio tiene como objetivo comparar la eficacia de los

fitofrmacos Monascus purpureus y Commiphora mukul en la disminucin de
los niveles de colesterol total (CT) y de triglicridos (TG) en ratas normales.
Para esto se realiz un estudio in vivo en ratas, a las que se les administraron
los fitofrmacos Monascus purpureus (150 mg/Kg) y Commiphora mukul
(75 mg/Kg) durante 21 das, realizando determinaciones peridicas de niveles
de colesterol total y triglicridos mediante bioamperometra. Para analizar los
valores obtenidos en las distintas determinaciones de cada grupo experimental,
se utiliz la mediana, el valor mximo, mnimo y las pruebas no paramtricas de
Kruskal-Willis, Friedman y Wilcoxon.

Segn nuestros resultados experimentales, tanto en el grupo control como

en los tratados con fitofrmacos se apreci una disminucin de los niveles de
CT y TG, sin poder establecer si entre los tres grupos hubo una diferencia
estadsticamente significativa del efecto hipolipemiante.

ABSTRACT

Cardiovascular diseases are a subject of concern both national and

worldwide, because of the raising on risk factors such as obesity, sedentary
lifestyle, diabetes, dyslipidemia and bad eating habits. The great increase on
cholesterol levels within chilean population has motivated scientist to look for
new farmacological therapies for control and treatment of dyslipidemia when diet
control has failed. Phytodrugs such as Monascus purpureus and Commiphora
mukul have already been used by diverse cultures like Chinese and
Ayuverdican, to reduce plasmatic cholesterol levels.

The present work aims to determinate which phytodrug, Monascus

purpureus or, are more effective reducing total cholesterol levels and tryglicerids
on normal lab rats. For that purpose was performed an in vivo lab rat study,
administrating both, Monascus purpureus (150mg/Kg/2,5 ml) and Commiphora
mukul (75mg/Kg/2,5ml), for a 21 days period, carrying out

periodical total

cholesterol and triglicerids determination by means of a bioamperometric

system. To analyze the values obtained in the various determinations of each
experimental group, was used the median, the maximum, minimum and the nonparametric tests Kruskal-Willis, Friedman and Wilcoxon.

According to our experimental results, both in the control group as in those

treated with phytodrugs appreciated a decrease in the levels of TC and TG,
unable to establish whether the three groups, there was a statistically significant
difference of lipid lowering effects.

ii

ABREVIATURAS

CT: Colesterol Total

TG: Triglicridos
HDL: Lipoprotenas de alta densidad
LDL: Lipoprotenas de baja densidad
VLDL: Lipoprotenas de muy baja densidad
SREBP: Protena de unin a elementos reguladores de esteroles
SRE: Elemento regulador de esteroles
HMG-CoA-reductasa: Hidroxi-metil-glutaril Coenzima A-reductasa
HMG-CoA: 3-hidroxi-3-metilglutaril-coenzima A
Cl- : in Cloro
FXR: Receptor nuclear farnesoide
CM: Commiphora mukul
MP: Monascus purpureus

iii

INTRODUCCIN

El colesterol es un componente importante en la estructura y

funcionamiento de las clulas del organismo y adems participa en la formacin
de ciertos tipos de hormonas, sin embargo se convierte en un problema de
salud cuando se encuentra en exceso y, sus diversas alteraciones, dan cuenta
de la mayor parte de la morbilidad y mortalidad por enfermedades cerebrocardiovasculares entre adultos de edad media y avanzada.
La hipercolesterolemia es una importante causa de aumento de riesgo de
aterosclerosis, enfermedad cerebro vascular de origen isqumico, cardiopata
coronaria y vasculopata perifrica. Dietas con alto contenido en grasas
saturadas y colesterol y, en menor medida, algunas alteraciones genticas, son
el origen de las altas concentraciones plasmticas de lpidos observadas en la
poblacin chilena como tambin en otros pases. Se estima que un 60% de la
poblacin mundial y un 55% de la poblacin chilena, presenta riesgo
cardiovascular elevado o muy elevado, producto de la obesidad, altos niveles
de colesterol y un estilo de vida sedentaria (Valenzuela y cols., 2002). La
Organizacin Mundial de la Salud y la Organizacin de Naciones Unidas para la
Agricultura y la Alimentacin, proyectan para el ao 2020 que las enfermedades
crnicas no transmisibles representarn casi el 75% del total de defunciones, de
las cuales un 71% de las defunciones sern atribuidas por cardiopata
isqumica y un 75% por accidentes cerebrovasculares.
Es por esto que el reconocimiento de la hipercolesterolemia como un
factor de riesgo ha conducido al desarrollo de frmacos que disminuyan los
niveles de colesterol, motivando a determinar la eficacia de la llamada
farmacologa alternativa, como el uso de diversos fitofrmacos que contienen
extractos estandarizados de Monascus purpureus o Commiphora mukul.
1

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

1. Pregunta de investigacin
La eficacia de Monascus purpureus es mayor que la de Commiphora mukul
en la disminucin del colesterol total y triglicridos en ratas normales?

2. Justificacin
Los cambios en los estilos de vida y dietario de la poblacin mundial
parecen ser responsables en el incremento observado de enfermedades
metablicas como diabetes y dislipidemias, ambas con demostrada incidencia
en la generacin de enfermedades cerebro y cardiovasculares (hipertensin,
infarto agudo al miocardio, accidente cerebrovascular, aterosclerosis, entre
otras). Por esta razn, la industria farmacutica ha orientado el desarrollo de
frmacos que permitan prevenir el desarrollo de estos trastornos metablicos,
de modo que sea posible revertir o enlentecer el progreso de ellos.
La actual farmacoterapia para el tratamiento de las dislipidemias cuenta con
gran variedad de frmacos alopticos, tales como Estatinas, Ezetimibe y
Fibratos, muchos de ellos con reacciones adversas graves e potencialmente
letales como la rabdomilisis, lo que ha llevado al retiro del mercado de algunos
frmacos como Cerivastatina (Charatan, 2001). A partir de la etnomedicina, la
industria farmacutica mundial ha desarrollado fitofrmacos con accin
hipolipemiante, los cuales han demostrado cierta eficacia en estudios animales
y clnicos. Dichos estudios clnicos revelan que Monascus purpureus y
Commiphora mukul producen una diferencia porcentual en el efecto sobre los

niveles de CT y TG (MP un 21, 5% en CT y 15, 8% en TG, segn Lin y cols,

2005 y 13-26% para CT y 13-34% para TG segn Journoud y cols, 2004. Por
otra parte, CM reporta una disminucin CT en un 11% y de un 15% para TG
segn Szapary y cols, 2003).
Adems existen reportes de reacciones adversas de baja incidencia e
intensidad leve, asegurando un margen de seguridad mayor que en el caso de
los frmacos alopticos.
Sin embargo, pese a existir estudios de fase III con estos fitofrmacos, no
hay estudios comparativos respecto a sus eficacias, informacin til para el
mdico al momento de tener que tomar una decisin para la instauracin de
una farmacoterapia.

MARCO TERICO

1. Dislipidemias

1.1.

Colesterol y sus roles fisiolgicos

El colesterol es un lpido que se encuentra en todos los tejidos y en el

plasma sanguneo. Es un componente importante en la estructura y
funcionamiento de las clulas y participa en la formacin de ciertos tipos de
hormonas y vitaminas (hormonas sexuales, aldosterona, cortisol y
Vitamina D). Sin embargo, se convierte en un problema cuando sus niveles
sobrepasan los lmites considerados normales (Ganong, 2005).

1.1.1. Sntesis de colesterol.

Aproximadamente dos tercios de la sntesis endgena de colesterol
se realiza en el hgado a partir de acetil-coenzima A (Anexo 1), mientras
que un 30% se adquiere a travs de la ingesta de alimentos que lo
contienen, como carnes, leche, huevos y otros alimentos.

1.1.2. Transporte del colesterol

Para circular en la sangre, el colesterol se combina con protenas
llamadas lipoprotenas, cuya funcin es transportar el colesterol y los
triglicridos en la sangre.
Las lipoprotenas son macromolculas que se sintetizan en el
hgado y en el intestino. Estn compuestas por un ncleo que consta de
triglicridos y ster de colesterol y una superficie donde se encuentran
los fosfolpidos, el colesterol libre y las apoprotenas (Florez y cols.,

2003) (Anexo 2). Existen cuatro clases de lipoprotenas plasmticas

(Anexo 3), que varan en densidad de acuerdo con la composicin de
componentes

lipdicos

proteicos.

Estas

lipoprotenas

pueden

clasificarse en quilomicrones, lipoprotenas de muy baja densidad

(VLDL), lipoprotenas de baja densidad (LDL) y lipoprotenas de alta
densidad (HDL). Las lipoprotenas de baja densidad (VLDL y LDL),
transportan lpidos desde el hgado a los tejidos extrahepticos como el
tejido vascular, adiposo y muscular. Los quilomicrones, transportan los
lpidos ingeridos en la dieta desde el intestino hacia el hgado y tejidos
perifricos. En tanto, las lipoprotenas de alta densidad (HDL) remueven
y transportan colesterol desde los tejidos perifricos como los vasos
sanguneos, de regreso al hgado (Ganong, 2005).
La lipoprotena HDL generalmente conocida como colesterol
bueno, arrastra el colesterol de las arterias al hgado para ser eliminado,
transformndose as en un factor protector del organismo para evitar la
acumulacin de colesterol en clulas y arterias. La lipoprotena LDL, por
el contrario, corresponde al denominado colesterol malo, por cuanto es
responsable de su depsito en las arterias cuando los niveles
plasmticos de colesterol estn sobre los valores normales (Anexo 4)
(Goodman y cols., 2003).

1.1.3. Regulacin del colesterol

La produccin del colesterol es regulada directamente por la
concentracin del colesterol presente en las clulas. Una alta ingesta de
colesterol por los alimentos conduce a una disminucin neta de la
produccin endgena y viceversa.

Existen protenas como el factor de transcripcin SREBP, que

detectan el colesterol intracelular. Estas protenas son reguladoras,
debido a que se asocian con factores de trascripcin gentica (SRE) que
controlan los genes responsables de la sntesis de LDL y de la enzima
3-hidroximetilglutaril coenzima A reductasa

(HMG-CoA-reductasa),

enzima responsable de la etapa limitante de la va biosinttica del

colesterol.
A pesar que el colesterol es un componente importante en el cuerpo
humano,

cuando

se

encuentra

sobre

los

niveles

considerados

fisiolgicos, puede acumularse en las arterias lo que aumenta el riesgo

de infartos, isquemias cerebrales y otras enfermedades cardiovasculares
(Florez y cols., 2003).

1.2.

Trastornos en el perfil lipdico

Un perfil lipdico anormal constituye una condicin patolgica, que se

caracteriza por una alteracin del metabolismo lipdico que determina una
concentracin fuera del rango de normalidad de lpidos y protenas en la
sangre. La dislipidemia es uno de estos trastornos, en el cual se observa un
aumento en las concentraciones de triglicridos y/o colesterol plasmtico, o
bien un bajo nivel de HDL, los que contribuyen al desarrollo de
enfermedades cardiovasculares como aterosclerosis (Beers y cols., 1999).

1.3.

Tipos de dislipidemias

Las dislipidemias pueden ser secundarias a una vida sedentaria, dietas

con alto consumo de grasas o, a enfermedades como diabetes mellitus,
insuficiencia renal crnica, cirrosis y alcoholismo. Se han descrito tambin

algunas dislipidemias de origen gentico y de transmisin familiar, las que

constituyen una menor incidencia dentro del cuadro de las dislipidemias.
Las dislipidemias clsicamente se clasifican segn el perfil lipdico de la
hipercolesterolemia (Anexo 5), pero una clasificacin ms sencilla y prctica
las agrupa en las siguientes categoras (Florez y cols., 2003):
a)

Aumento de colesterol LDL

b)

Aumento de triglicridos (VLDL)

c)

Aumento de colesterol y triglicridos, por alza de LDL y VLDL

2. TERAPIA HIPOLIPEMIANTE
Consiste en identificar las posibles causas de la dislipidemia secundaria.
stas pueden ser atribuidas a enfermedades como hipotiroidismo, anorexia
nerviosa, enfermedad biliar, mieloma, lupus eritematoso, porfiria, diabetes
mellitus tipo 2, alcoholismo y algunas lipodistrofias. Es necesario identificar
frmacos como corticoides, diurticos tiazdicos, ciclosporina o -bloqueadores,
los cuales tienen entre sus efectos adversos la alteracin srica de
lipoprotenas. Una vez corregida las causas de dislipidemia secundarias, se
inicia el manejo a travs de la dieta.

2.1.

Manejo Dietario

Consiste en reducir la ingestin de colesterol a menos de 300 mg/da,

excepto en hipertrigliceridemia pura. Se plantea una reduccin de la ingesta
de grasas saturadas a menos del 7% del total de caloras y elevar por
encima de uno la relacin entre cidos grasos no saturados y saturados.

The National Cholesterol Education Program recomienda un consumo de

55%-60% de protenas de ingesta diaria, mientras que la grasa total y
grasas saturadas no deben sobrepasar el 30% y 7% respectivamente (Yuan
y cols., 2007).

2.2.

Farmacoterapia aloptica

2.2.1. Inhibidores de la enzima HMG-CoA-reductasa (Estatinas)

Tienen una estructura similar al compuesto 3-metilglutarilcoenzima A, precursor inmediato del cido mevalnico y ste, a su vez,
precursor del colesterol. La lovastatina demostr ser un profrmaco que
en hgado se transforma por hidrlisis en un hidroxicido activo. De la
modificacin estructural de la lovastatina se obtuvieron la simbastatina,
pravastatina, fluvastatina, atorvastatina y la rosuvastatina. La lovastatina
y sus derivados son inhibidores competitivos y reversibles de la HMGCoA Reductasa, por lo que inhiben la biosntesis intracelular heptica del
colesterol y disminuyen su depsito celular.
Todas las estatinas reducen el LDL entre un 20-35% en dosis
bajas y hasta un 60% a dosis mayores. Adems reducen los niveles de
TG y VLDL entre un 10-30%. Sus primeros efectos se observan despus
de una semana de administracin y su efecto mximo entre 4 y
6 semanas.
Sus

efectos

adversos

ms

frecuentes

son

molestias

gastrointestinales, miopatas, rabdomilisis, miopata mitocondrial y

dermatomiositis.

2.2.2. Ezetimibe
Es un frmaco inhibidor de la absorcin de colesterol en el intestino
delgado, al bloquear el transportador de esterol Niemann-Pick C1-Like 1.
(Staprans y cols, 2006). Esta inhibicin es especfica, ya que no inhibe la
absorcin de vitamina D, estrgenos, cidos biliares o progesterona
(Gupta y cols, 2002).
La reduccin de la absorcin de colesterol induce un aumento de su
sntesis. Aumenta tambin el nmero de receptores a la partcula
APO-B100 de las LDL, lo que provoca una mayor captacin de colesterol
sanguneo por las clulas.
El ezetimibe se absorbe casi por completo y es eliminado por la bilis.
Posee recirculacin enteroheptica, con un mnimo efecto sistmico
(Toht y cols., 2005). La biodisponibilidad aumenta si se asocia con la
comida. No se han descrito efectos adversos especiales. Reduce los
niveles plasmticos de LDL en un 15-20% y causa generalmente
aumentos leves de HDL y un pequeo descenso de TG.

2.2.3. Fibratos
Son frmacos que estimulan al receptor activado por proliferador de
peroxisomas (PPAR) en el hgado, reducen la secrecin heptica de
VLDL e incrementan la liplisis de los triglicridos del plasma.
Generalmente son bien tolerados y sus reacciones adversas ms
probables incluyen alrgicas, astenia, impotencia sexual y alopecia; se
ha descrito casos de hepatitis y miositis con una baja incidencia (Yuan y
cols., 2007).

Se usan como terapia complementaria a la dieta, en casos de

hiperlipoproteinemias tipo III y IV. Reducen principalmente los TG
plasmticos entre un 10-40%.

2.2.4. Otros

cido Nicotnico (Niacina)

Reduce la produccin y secrecin heptica de VLDL, y por

consiguiente, la produccin de LDL. El efecto biolgico dura 4 horas,
seguido de un efecto rebote con aumento de cidos grasos libres, por lo
que debe administrarse constantemente.
Son frecuentes las reacciones adversas como prrito, erupciones
cutneas, molestias gastrointestinales e incremento de cido rico. Se
usa en hipercolesterolemias tipo II,III,IV y V, junto a una dieta apropiada.

Molculas fijadoras de cidos biliares

Son resinas catinicas capaces de intercambiar el Cl- con los

cidos y sales biliares. As se unen a las sales biliares formando un

complejo, que ser eliminado por las heces, impidiendo la recirculacin
de estas sustancias (Schulz, 2006). Disminuyen el LDL en un 15-25%,
pudiendo aumentar los TG en un 20% (Kreisberg, 2003). Pueden alterar
la absorcin de compuestos, como el cido flico y frmacos
anticoagulantes orales, adems de entorpecer la absorcin de vitaminas
liposolubles (A, D, K) y la digestin de las grasas. Como efectos
adversos, produce flatulencia, nauseas y estreimiento.

10

2.3.

Farmacoterapia con Fitofrmacos

2.3.1. Monascus purpureus

Monascus purpureus es una levadura que ha sido utilizada
tradicionalmente en Asia desde la dinasta Tang (Li y cols., 1998; ChangChih y cols., 2006). Se ha utilizado para hacer el vino del arroz, como
preservante de alimentos, para mantener el color y el gusto de pescados
y carnes y, en la medicina tradicional, para problemas relacionados a
dislipidemias. (Heber y cols., 1999).
El proceso de fermentacin da una familia de componentes
conocidos colectivamente como monocolinas (Nies y cols., 2006). En
particular la monocolina K, tambin conocida como lovastatina, la cual
inhibe la sntesis endgena de colesterol. Adems contiene 2-6% cidos
grasos, cido palmtico, cido linoleico y cido estearico (Zhang y cols.,
1998). Al ser la monocolina K un inhibidor de la HMG-Reductasa CoA,
reduce la produccin de la enzima Q10 (CoQ10) por lo que es necesario
administrar suplementariamente CoQ10 cuando se use por un tiempo
prolongado (Lyn y cols., 2001).
Estudios en animales han demostrado que Monascus purpureus
disminuye los niveles de colesterol y TG en conejos alimentados con una
dieta aterognica (Li y cols., 1998). Estudios clnicos randomizados,
doble

ciego

placebo

controlado

en

79 personas

con

hipercolesterolemia, han demostrado que a las 8 semanas de terapia con

Monascus purpureus una reduccin de 27,7% de LDL, 21,5% de CT y los
15,8% de TG (Lin y cols., 2005). Estudios de meta-anlisis demostraron
los efectos de la reduccin de CT y TG, administrados durante cuatro a
12 semanas (ocho semanas promedio), observndose continuidad de los

11

efectos hasta la semana 24 (Liu y cols., 2006). Se ha reportado baja

incidencia

de

efectos

adversos,

los

que

incluyen

malestar

gastrointestinal, flatulencia, alergias y vrtigo (Journoud, 2004).

2.3.2. Commiphora mukul

Commiphora mukul es un rbol de la familia Burseraceae, nativo de
India, y su extracto a sido parte de la medicina holstica Ayurvdica por
ms de 2.500 aos (Firenzuoli y cols., 2003). Se ha utilizado con fines
antirreumticos, antispticos, antiinflamatorios y expectorantes, pero lo
ms notable es su efecto sobre el metabolismo del colesterol. Diversos
estudios avalan que dicho extracto produce una reduccin del colesterol
total, principalmente de la lipoprotena LDL y de los triglicridos (Meyer y
cols., 2005), en un 10 a 20% (Urizar y cols., 2002).
Commiphora mukul tiene como principio activo las gugulosteronas E
y Z [4,17(20)-pregnadien-3,16-diona] (Urizar y cols., 2003) (Anexo 6),
que explican su efecto hipocolesterolemiante (Wang y cols., 2003). Las
gugulosteronas, adems de tener efecto antioxidantes de LDL (Ulbrich y
cols., 2005; Wang y cols., 2004), pueden disminuir la absorcin de
colesterol en el intestino, inhibir la secrecin de cidos biliares desde los
hepatocitos, disminuir los niveles de lpidos por inhibicin de lipasas
hepticas y de ciertos receptores que median el catabolismo del LDL y
la sntesis de colesterol heptico (Saxena y cols., 2007). La accin de
las gugulosteronas sobre los receptores nucleares es un aspecto
pivotante en la regulacin del metabolismo del colesterol y los cidos
biliares, ya que stas actan como antagonista competitivo del receptor
nuclear farnesoide FXR y del receptor del cido biliar BAR. El FXR es un
receptor nuclear que regula la expresin de genes involucrados en la
homeostasis del colesterol y la sntesis de cidos biliares. Para que el

12

FXR acte, primero debe ser activado por el cido quenodesoxiclico

(CDCA), por un agonista no esteroidal (GW4064) y por la fexeramina.
Cuando esto ocurre, participa en la regulacin de la sntesis de cidos
biliares,

inhibiendo

la

expresin

de

algunos

genes

(colesterol

7-hidroxilasa y esterol 12-hidroxilasa), regulando la expresin de

polipptidos que transportan cidos biliares (Na+/tarocolato, BSEP,
MDR3 y MRP2), interviniendo en la expresin de protenas de unin a
cidos biliares en el intestino y controlando a las lipoprotenas A-I, C-I y
C-III.
La administracin de gugulosteronas impiden la activacin del FXR,
inhibiendo la accin del CDCA (Meyer y cols., 2005). Cuando el FXR no
es activado, se libera 7-hidroxilasa que estimula el catabolismo del
colesterol, produce un incremento del metabolismo de cidos biliares en
el hgado y una reduccin del colesterol heptico (Szapary y cols., 2003).
A pesar de los efectos descritos anteriormente para el extracto de
Commiphora mukul, existen autores (Shields y cols., 2005; Sahni y cols.,
2005) que refieren que los cambios producidos sobre los niveles de
colesterol y triglicridos no son clnicamente relevantes.

13

OBJETIVOS

1. Objetivo general
Determinar si Monascus purpureus tiene mayor eficacia que Commiphora
mukul para disminuir los niveles de triglicridos y colesterol total en ratas
normales.

2. Objetivos Especficos

Cuantificar el efecto sobre los niveles plasmticos de colesterol total y

triglicridos de Monascus purpureus en ratas normales.

Cuantificar el efecto sobre los niveles plasmticos de colesterol total y

triglicridos de Commiphora mukul en ratas normales.

Comparar la eficacia hipolipemiante de Monascus purpureus y

Commiphora mukul en ratas normales

HIPTESIS
H1: Monascus purpureus posee mayor eficacia que Commiphora mukul en
disminuir los niveles plasmticos de colesterol total y triglicridos

14

MATERIALES Y MTODOS

1. Mtodo

1.1.

Diseo de Investigacin: Experimental puro in vivo

1.2.

Poblacin de estudio: Ratas Sprague-Dawley. N=12.

Criterios de Inclusin:

Rata (Ratus ratus) cepa Sprage-Dawley

Ratas macho.

Perfiles lipdico:
Colesterol total ( 200 mg/dl)
Triglicridos ( 150 mg/dl).

Peso entre 265 y 400 gramos.

Criterios de exclusin:

Animales que no cumplan con los criterios de inclusin sealados.

Animales no sanos.

1.3.

Diseo Experimental

Las ratas fueron asignadas a cada grupo segn aleatorizacin simple. Se

obtuvieron 20 ratas del Bioterio Central del Instituto de Ciencias Biomdicas
(ICBM), de las cuales se seleccionaron 12 ratas que cumplan con los
criterios de inclusin. A cada rata se le asign un nmero por sorteo y luego
del mismo modo se conformaron tres grupos experimentales de cuatro
animales cada uno.

15

Grupo 1 (G1): Control.

Se le administr NaCl al 0,9%. Slo estuvo afectado por las variables
desconcertantes.
Grupo 2 (G2): Tratamiento 1
Se le administr por va oral Monascus purpureus (150 mg/Kg), diluida en de
2,5 ml/Kg de NaCl al 0,9%, durante 21 das.
Grupo 3 (G3): Tratamiento 2.
Se le administr por va oral Commiphora mukul (75 mg/Kg), diluida en de
2,5 ml/Kg de NaCl al 0,9%, durante 21 das.

1.4.

Variables

Variable Independiente: Fitofrmaco

Definicin Conceptual: Producto de origen animal, vegetal o mineral,
terminado y etiquetado, cuyo ingrediente activo, orgnico o inorgnico,
proviene de plantas, animales o del reino mineral, y que pueden contener
excipientes (Decreto Supremo 1.876, 1996).
Definicin

Operacional:

Administracin

de

Monascus

purpureus

Commiphora mukul (150 mg/Kg y 75mg/Kg respectivamente)

Variable Dependiente: Nivel plasmtico de colesterol.
Definicin Conceptual: Colesterol en el plasma sanguneo.
Definicin Operacional: Cuantificacin de Colesterol total (mg/dl) en sangre
capilar determinada por bioamperometra (AccutrendGCT, Laboratorio
Roche).
Variable Dependiente: Nivel plasmtico de triglicridos
Definicin Conceptual: Triglicridos en el plasma sanguneo

16

Definicin Operacional: Cuantificacin de Triglicridos (mg/dl) en sangre

capilar determinada por bioamperometra (AccutrendGCT, Laboratorio
Roche).
Variables Desconcertantes:

Diferencias inter e intramanipulador durante la aplicacin del protocolo

experimental.

Variaciones individuales del animal de experimentacin durante la

aplicacin del protocolo experimental.

Efectos ambientales durante la aplicacin del protocolo experimental.

2. Materiales

2.1.

Infraestructura fsica

Los experimentos se realizaron utilizando la infraestructura instalada del

Laboratorio

de

Farmacodinamia

Fitofarmacologa,

Programa

de

Farmacologa Molecular y Clnica, Instituto de Ciencias Biomdicas (ICBM),

Facultad de Medicina, Universidad de Chile. Todos los experimentos fueron
llevados a cabo en la estacin de trabajos de animales de experimentacin
del Programa de Farmacologa Molecular y Clnica, entre las 14:00 y 16:00
horas con luz de da, a 25 1C.

2.2.

Animales

Se utilizaron ratas macho Sprague-Dawley, entre 265 - 400 gramos de

peso, obtenidas del Bioterio Central del Instituto de Ciencias Biomdicas
(ICBM). A cada una de estas ratas, se les asign aleatoriamente un nmero,
el que fue marcado en el pabelln auricular. Las ratas habitaron en jaulas
individuales durante el periodo experimental, en el bioterio del laboratorio de
Farmacologa Molecular y Clnica. Se mantuvieron con una dieta normal de
17

alimento

(Champion

Nutricin

Animal,

Santiago,

Chile)

agua

proporcionados ad libitum hasta completar el estudio, de acuerdo a las

normas internacionales dadas por la Gua para el Cuidado y uso de
Animales de Laboratorio, publicada por el National Institute of Health
(Bennett y cols., 1994).
Los animales fueron utilizados una sola vez y no intercambiados entre
grupos. Se les practic eutanasia, administrando una sobredosis de
Isofluorano en cmara cerrada al experimentador.

2.3.

Reactivos y Soluciones

Extracto estandarizado de Monascus purpureus y Commiphora mukul

(Laboratorio Garden House S.A., Santiago Chile), NaCl (Sigma- Aldrich, MO,
EEUU)

Isofluorano

(Zeneca,

Inglaterra).

Monascus

purpureus

Commiphora mukul se disolvieron en solucin salina 0,9%. Se utiliz NaCl

0,9% como vehculo.

2.4.

Equipos e Instrumentos
Accutrend GCT (Laboratorio Roche)

Equipo diseado para el control de glicemia, colesterol y TG.

Utiliza cintas reactivas reactivas Accutrend Cholesterol y Triglycerides.
Rangos de lectura:
Colesterol: 150-300 mg/dl
Triglicridos: 70-600 mg/dl.

Balanza analtica Sartorius (unidad de medicin: mg)

Sonda aguda intraesofgica

Material quirrgico ad hoc

18

3. Procedimiento

3.1.

Determinacin de parmetros bsicos

Se constataron el peso, la condicin de salud del animal (basada en

signologa clnica elemental) y los niveles basales de CT y TG.

3.2.

Determinacin de niveles plasmticos de CT y TG.

Las determinaciones de los niveles plasmticos de CT y TG (Anexo 7),

se realizaron en cuatro instancias (T0, T1, T2 y T3), mediante un corte de
2 mm en la punta de la cola con una tijera, para obtener una gota de sangre
capilar, la cual se dej caer sobre la cinta reactiva que permiti obtener un
resultado mediante bioamperometra (Anexo 8).

3.3.

Administracin de Fitofrmacos y Vehculo

Los fitofrmacos Monascus purpureus y Commiphora mukul fueron

administrados todos los das, durante 21 das de tratamiento, mediante una
sonda

aguda

intraesofgica

(Anexo

9),

en

las

siguientes

dosis:

150mg/Kg/2,5 ml y 75mg/Kg/2,5ml respectivamente; mientras que al grupo

Control (G1) se le administr todos los das, durante 21 das, un vehculo por
va oral de 2,5 ml de NaCl al 0,9%.

3.4.

Descripcin del procedimiento

Las administraciones y determinaciones para todos los

grupos

experimentales, se realizaron segn la lnea de evolucin temporal del

protocolo experimental presentada en el anexo 9.
Nuestro experimento se realiz en un periodo total de 22 das, se defini
T0 para el da 1, T1 para el da 8, T2 para el da 15 y T3 para el 22. Las

19

determinaciones de TG y CT, se llevaron a cabo a T0, T1, T2 y T3, mientras

que la administracin de ambos fitofrmacos y del vehiculo; y las
determinaciones de peso, se efectuaron todos los das desde el inicio del
experimento hasta el da 21. Dichas determinaciones y administraciones se
llevaron a cabo a la misma hora a lo largo del proceso de experimentacin
(Anexo 10).
Cada investigador tuvo a su cargo tareas especificas durante todo el
protocolo experimental, uno de ellos realiz la calibracin de la balanza
analtica, pes a los animales y carg las jeringas, mientras que el otro,
calculaba la dosis de acuerdo al peso y realizaba las determinaciones de CT
y TG, esto es cortar la cola y colocar la muestra de sangre sobre la tira
reactiva. La administracin de los fitofrmacos y el vehiculo, estuvo a cargo
de un ayudante de laboratorio especializado. Ambos investigadores se
preocupaban de proporcionar alimento y agua ad libitum.

20

RESULTADOS

Para analizar los valores obtenidos en las distintas determinaciones de

cada grupo experimental, se realiz un anlisis descriptivo estimando la
mediana, el valor mximo y mnimo (Anexo 12). Para comparar las diferencias
entre los grupos se utiliz la prueba no paramtrica de Kruskal-Wallis y luego
para determinar las diferencias a distintos tiempos dentro de un grupo
experimental, utilizamos las pruebas de Friedman y Wilcoxon.
La figura 1 muestra la evolucin temporal de los niveles plasmticos de
CT (mg/dL) en los grupos Control, Monascus purpureus y Commiphora mukul.
Muestra adems la mediana y los valores mximos y mnimos obtenidos de
cada uno de los grupos, a las diferentes determinaciones (T0, T1, T2 y T3).
Al observar esta figura se evidencia una clara tendencia a disminuir la
concentracin plasmtica de CT en funcin del tiempo, alcanzando un mnimo
en la ltima determinacin (T3).
La figura 2 muestra la evolucin temporal de los niveles plasmticos de
TG (mg/dL), la mediana y los valores mximos y mnimos obtenidos en cada
uno de los grupos a las distintas determinaciones.
Los niveles plasmticos de TG (mg/dL) observados en esta figura,
muestran una disminucin de todos los grupos respecto de T0, alcanzando un
mnimo en T1 y T2, para luego reflejar una tendencia a aumentar sus valores en
T3.

21

Figura 1. Evolucin temporal de las concentraciones plasmticas de CT de los

grupos experimentales determinados a T0, T1, T2 y T3, correspondiendo T0 al
da experimental 1, T1 al da 8, T2 al da 15 y finalmente T3 al da 22.

22

Figura 2. Evolucin temporal de las concentraciones plasmticas de TG de los

grupos experimentales determinados a T0, T1, T2 y T3, correspondiendo T0 al
da experimental 1, T1 al da 8, T2 al da 15 y finalmente T3 al da 22

23

Inicialmente, cuando los animales fueron asignados aleatoriamente a sus

respectivos grupos experimentales (T0), la determinacin de los niveles basales
de colesterol total (CT) y de triglicridos (TG) no difiri estadsticamente entre
ellos.
Los resultados obtenidos de la comparacin entre grupos a los distintos
tiempos para CT no muestran diferencias significativas entre ellos. Sin
embargo, al comparar los valores de TG de los grupos a distintos tiempos, si
hubo diferencias estadsticamente significativas a T1 (p = 0,024), encontrndose
esta diferencia especficamente entre el grupo Control y el grupo tratado con
CM (p = 0,013).
Al realizar la comparacin entre los distintos tiempos dentro de un mismo
grupo

mediante

la

prueba

de

Friedman,

se

encontraron

diferencias

estadsticamente significativas para las concentraciones de CT en los grupos de

tratamiento MP (p = 0,08) y CM (p = 0,021). Para los valores de TG, tambin
existieron diferencias estadsticamente significativas en el grupo MP (p = 0,017)
y en el CM (p = 0,015).
Finalmente se utiliz la prueba de Wilcoxon para realizar comparaciones
especficas entre los tiempos T0-T1, T0-T2, T0-T3, T1-T2, T1-T3 y T2-T3 para cada
uno de los grupos experimentales, relevando que en ninguna de las
comparaciones existieron diferencias estadsticamente significativas.
En un 35,4% de las determinaciones, los valores de CT y TG
descendieron por debajo del lmite de deteccin del sistema (70 mg/dl para TG
y 150 mg/dl para CT). Dado que resultaba imposible poder precisar con
exactitud el valor de TG y CT en estas circunstancias, decidimos conservar los
datos experimentales y reemplazar las lecturas bajo rango con el valor
inmediatamente inferior al lmite de deteccin; esto es 69 mg/dl para TG y
149 mg/dl para CT.
24

DISCUSIN

Diversos estudios sugieren que Monascus purpureus y Commiphora mukul

tienen un efecto importante sobre la disminucin de CT y TG, en diferentes
modelos experimentales, pero bsicamente en ensayos clnicos con seres
humanos (Li y cols., 2005; Meyer y cols., 2005; Szapary y cols., 2003). Sin
embargo, nuestros resultados se alejaron de lo esperado, esto es que se
observara una disminucin de los niveles plasmticos de TG y CT respecto de
los valores control. Es evidente que si bien se observ dicha disminucin en los
lpidos sanguneos, no es menos cierto que tambin hubo un cambio en el
grupo Control, por lo cual los cambios en la concentracin plasmtica de CT y
TG no puede ser atribuida a los fitofrmacos MP y CM, hallazgo que coincide
con el de Shields y cols, autor que propone que los cambios producidos por CM
son insignificantes.
Las posibles explicaciones pueden ser varias, sin embargo, creemos que
dos fuentes de variabilidad podran tener mayor ingerencia.
1. Diseo experimental.
Para poder realizar esta investigacin y medir los niveles plasmticos de
CT y TG de cada uno de los grupos a las distintas determinaciones, utilizamos
el equipo Accutrend GCT de Laboratorio Roche (equipo especialmente
diseado para el control de glicemia, colesterol y triglicridos). La explicacin
ms

probable

de

no

haber

encontrado

diferencias

estadsticamente

significativas entre el grupo control y los tratados con fitofrmacos, y entre MP y

CM, radica en la utilizacin de un instrumento con rangos de lectura muy

25

pequeos (150-300 mg/dL para Colesterol total y 70-600 mg/dL para

Triglicridos). Del total de las mediciones realizadas, un 35,4% de ellas no pudo
ser detectada por el instrumento, es decir los valores descendieron bajo el limite
de deteccin del sistema y se les asign arbitrariamente un valor
inmediatamente inferior al lmite de deteccin; esto es 149 mg/dL para CT y
69 mg/dL para TG. En varios de estos casos, pudo haber ocurrido que las
concentraciones plasmticas de CT y TG hayan disminuido mucho ms que
149 y 69 mg/dL, y si hubisemos podido medir estas concentraciones o
hubisemos utilizado otro instrumento con rangos de lectura ms amplios, estos
valores hubieran representado una diferencia estadsticamente significativa.

El diseo experimental del estudio, contemplaba la utilizacin de ratas

normales en su perfil lipdico, sin inducir hipercolesterolemia por administracin
de tiloxapol, por una dieta suplementada con colesterol 3%, o usando ratas
genticamente hipercolesterolmicas (Berk y cols., 1997; Kurtz y cols., 1989).
Razones presupuestarias no permitieron contar con ratas genticamente
hipercolesterolmicas. Las dieta suplementada con colesterol 3% implicaba
encargar la preparacin especial del alimento en pellet, con una formulacin ad
hoc y por una cantidad mnima de media tonelada. Adems es importante
recordar que las dietas suplementadas con colesterol 3% tienen un tiempo de
induccin de hipercolesterolemia superior a los seis meses para poder iniciar el
tratamiento (Czak y cols., 2007).
Por tanto, se intent determinar el efecto hipocolesterolmico de los
fitofrmacos en ratas con perfil lipdico normal. Tambin por consideraciones de
presupuesto acotado, el tiempo de determinacin se limit al mnimo reportado
para observar cambios en la concentracin de CT y TG, de acuerdo al

26

mecanismo de accin descrito para los fitofrmacos MP y CM (Liu y cols., 2006)

esto es 21 das.
2. Condiciones experimentales.
Las ratas fueron obtenidas del Bioterio Central del ICBM, donde fueron
criadas desde su nacimiento en condiciones que se ajustan a la norma del NIH
para el trabajo con animales de experimentacin (Bennett y cols., 1994). En la
estacin de trabajo del bioterio del Programa de Farmacologa Molecular y
Clnica, las condiciones tienden a ser equivalentes a las del Bioterio Central,
manteniendo los parmetros de temperatura, ciclo de luz, acceso restringido,
agua y alimento disponibles ad limitum. Al analizar los resultados revisamos los
protocolos experimentales y la nica diferencia notable dice relacin con el
alimento. Las ratas inicialmente fueron alimentadas con pellet para roedores de
la empresa Cisternas y, en la estacin de trabajo, donde se les aclimat por
24 horas y se realiz el procedimiento experimental por 21 das, fueron
alimentadas con pellet de la empresa Champion Nutricion Animal . El aspecto
de ambos pellet era claramente distinto en compactacin y coloracin. No
realizamos anlisis qumico de los alimentos ni obtuvimos respuesta de la
formulacin por parte de las empresas citadas.
Se ha descrito que el estrs puede alterar varias funciones, tanto
neuronales como hormonales, siendo el parmetro ms sensible la modificacin
del eje renina-angiotensina-aldosterona (Dumont y cols., 1999). El CT y los TG
se modifican en respuesta al estrs, propio de la manipulacin y aplicacin de
los procedimientos realizados; sin embargo, diversas publicaciones sugieren
que tanto el CT como los TG aumentan su concentracin plasmtica como
consecuencia del estrs (Agarwal y cols., 1997).

27

Otra fuente de error posible est en las tiras reactivas. Sin embargo
descartamos esta posibilidad ya que se usaron en todas las determinaciones
plasmticas tiras Accutrend con fecha de caducidad a octubre de 2008, lo que
nos asegura que los resultados arrojados por el instrumento de medicin fueran
los correctos.
Finalmente, descartamos que pudiera existir cambio inadvertido de los
animales de experimentacin de un grupo a otro, dado que fueron marcados
mediante perforaciones en el pabelln auricular, siguiendo un riguroso protocolo
de registro y habitacin en jaulas individuales.

28

CONCLUSIN

Nuestros resultados no nos permiten asegurar que Monascus purpureus y

Commiphora mukul tengan un efecto positivo o negativo sobre la concentracin
plasmtica de colesterol total y triglicridos. Por lo tanto no se puede afirmar
que

Monascus

purpureus

tiene

un

mayor

efecto

hipolipemiante

que

Commiphora mukul.

29

PROYECCIONES

Son necesarias futuras investigaciones en las que se empleen

instrumentos o tcnicas analticas con un rango de medicin ms amplio y un
diseo experimental que mantenga las condiciones en las cuales se puedan
controlar la mayor parte de las variables desconcertantes.
Sugerimos que un futuro seguimiento de nuestra hiptesis de trabajo, se
extienda el diseo para incorporar un grupo al que se le administre MP y CM,
para

explorar

la

posible

sinergia

hipolipemiante,

pues

los

extractos

estandarizados de MP bajan LDL-colesterol y, CM disminuye LDL-colesterol y

en mayor grado TG.
La finalidad de estas investigaciones debe enfocarse en la necesidad de
dar una alternativa de tratamiento a la enfermedad dislipidemia, a travs de la
creacin de fitofrmacos con acciones hipolipemiamtes, que tengan menores
reacciones adversas que los frmacos alopticos.
La investigacin de los parmetros farmacocinticos de
purpureus

Commiphora

mukul

como

absorcin,

Monascus

biodisponibilidad,

metabolizacin, unin a protenas plasmticas y toxicidad aumentaran los

conocimientos en general estos fitofrmacos, lo cual constituye una de las
principales crticas farmacolgicas.

30

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33

ANEXOS

Anexo 1
1. Biosntesis del colesterol
Acetil CoA -- Aceto acetil CoA -- Acetoacetato -3-hidroxi-3-metilglutaril-CoA
Mevalonato Escualeno -- Colesterol

Despus de varios procesos Acetil-CoA se transforma a mevalonato mediante

la accin de la enzima Reductasa de HMG-CoA. Seis molculas de mevalonato
se convierten en escualeno, el cual luego se hidroxila para transformarse en
colesterol (Ganong, 2005).

Anexo 2
Apoprotenas
Las apoprotenas son muy importantes porque proporcionan estabilidad
estructural a las lipoprotenas, y diversas apoproteinas funcionan como ligandos
en interacciones entre lipoprotena y receptor, o son cofactores en procesos
enzimticos que regulan el metabolismo de lipoprotena (Goodman y cols.
2003)
Apolipoprotena

Concentracin

Sitios de sntesis

Funciones

Hgado, intestino

Estructural en HDL; cofactor de

[mg/dl]
ApoA-I

130

LCAT; ligando para receptor de

HDL;

transporte

inverso

de

colesterol
ApoA-II

40

Hgado

Forma complejo con ApoE

ApoB-100

85

Hgado

Protena estructural de VLDL,

IDL y LDL

34

ApoB-48

Flucta

Intestino

Protena

estructural

de

quilomicrones
ApoC-I

Hgado

Activador de LCAT, regula la

unin de remanentes a receptor

ApoC-II

Hgado

Cofactor

de

lipasa

de

lipoprotena
ApoC-III

12

Hgado

Regula la unin de remanentes

a receptor

ApoE

Hgado, encfalo, piel,

Ligando para receptor de LDL y

gnadas, bazo

receptores

que

unen

remanentes; transporte inverso

de colesterol
Apo(a)

Variable

Regulador de Fibrinolisis

Anexo 3
Tipos de lipoprotenas: Principales lipoprotenas.
Composicin %
Esteres de
Lipoprotenas

Tamao

Protena

Colesterol

(nm)
Qms.

75-1000

R. de Qms.

30-80

VLDL

30-80

Origen
TGs

Fosfolpidos

90

Colesterilo

libre
2

Intestino
capilares

16

55

17

Higado

intestino
IDL

25-40

10

25

40

20

VLDL

LDL

20

20

46

21

IDL

HDL

7.5-10

50

16

25

Higado
intestino

Qms: Quilomicrones. R: Remanentes

35

Anexo 4
Valores normales de colesterol
CT (mg/dl)

LDL (mg/dl)

HDL (mg/dl)

TG (mg/dl)

Deseable

<200

<130

>40

<150

Riesgo bajo

200-239

130-159

<35

>200

Riesgo alto

>240

>160

<35

>400

Anexo 5
Tipo de dislipidemias

Fenotipo

Lipoprotena elevada

Lpido elevado

Quilomicrones

TG

IIa

LDL

Colesterol

IIb

LDL-VLDL

TG y colesterol

III

VLDL

Quilomicrones

TG y colesterol

remanentes
IV

VLDL

TG

VLDL y quilomicrones

TG y colesterol

Anexo 6
Esqueleto general de gugulosterona

36

Anexo 7
Tabla 1 Determinacin temporal de Peso, TG y CT.

Parmetro

Tiempo (das)
1

10

11

12

13

14

15

16

17

18

19

20

21

22

Peso

TGs

CT

Nota: Las determinaciones de los parmetros se realizarn en el tiempo

indicado por (+) en todos los grupos experimentales.

Anexo 8
Accutrend GCT (Laboratorio Roche)
Equipo diseado para el control de glicemia, colesterol y TGs Utiliza cintas
reactivas reactivas Accutrend Cholesterol y Triglycerides.
Rangos de lectura:
Colesterol: 150-300 mg/dl; Triglicridos: 70-600 mg/dl
Material de Muestra:
Sangre capilar fresca
Tiempo de reaccin:
Colesterol: 180 segundos; Triglicridos: 174 segundos

37

Anexo 9
Esquema temporal del protocolo Experimental

1
T0
A
D

8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22
T1
T2
T3
A A A A A A A A A A A A A A A
D
D
D

Nmeros: indican los tiempos destinados al estudio

A: Administracin de los Fitofrmacos (Monascus purpureus y Commiphora
mukul) y el vehculo a los grupos experimentales correspondientes.
D: Determinacin de CT y TG
T0: Determinacin basal
T1: 2 Determinacin
T2: 3 Determinacin
T3: Determinacin final

38

Anexo 10
Temporalidad de las intervenciones de cada grupo experimental.
Grupo/

Tiempo (das)

Parmetro
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22
G1 Nacl

+ + + + + + + + +

MP
CM
Medicin

G2 Nacl
MP

+ + + + + + + + + +

CM
Medicin

G3 Nacl
MP
CM
Medicin

+ + + + + + + + + +
+

Nota: Las intervenciones de cada grupo experimental estn sealadas por (+).

39

Anexo 11

FICHA CLNICA
Grupo:
Numero Rata:
Da

Hora

Fecha

Peso

Dosis

(gr)

(mg/Kg)

TG
(mg/dl )

CT

Observaciones:

( mg/dl)

Otras Observaciones:

40

Anexo 12
Tabla Descriptiva

T0

Grupo

MP

Parmetro

CM

NaCl

Media

Mediana

Percentil 50

Mximo

Mnimo

Desviacin Estndar

CT

174,25

177

177

180

163

7,804912983

TG

96,5

98,5

98,5

108

81

11,61895004

CT

173,25

173,5

173,5

178

168

4,991659711

TG

91

93,5

93,5

105

72

14,07124728

CT

175

174,5

174,5

182

169

6,480740698

TG

110,5

104,5

104,5

150

83

28,87328638

T1
CT

Grupo

MP

Parmetro

CM

NaCl

Media

Mediana

Percentil 50

Mximo

Mnimo

161,75

165

165

168

149

Desviacin Estndar
8,770214745

TG

69

69

69

69

69

CT

164,25

164

164

167

162

2,217355783

TG

71

69

69

77

69

CT

166,5

170

170

171

155

7,681145748

TG

85,75

82

82

106

73

15,94521872

T2

Grupo

MP

Parmetro

CM

NaCl

Media

Mediana

Percentil 50

Mximo

Mnimo

CT

149

149

149

149

149

Desviacin Estndar
0

TG

74,75

74

74

82

69

6,751543034

CT

149

149

149

149

149

TG

93,75

88

88

130

69

25,97915831

CT

154,75

149

149

172

149

11,5

TG

79,75

73,5

73,5

103

69

16,07015868

T3

Grupo

MP
NaCl

Parmetro

CM

Media

Mediana

Percentil 50

Mximo

Mnimo

Desviacin Estndar

CT

149

149

149

149

149

TG

103,5

104

104

128

78

22,30844384

CT

149,25

149

149

150

149

0,5

TG

129,5

124

124

160

110

23,86769085

CT

149,25

149

149

150

149

0,5

TG

100,25

93

93

135

80

26,20909511

41