DIAGNOSTICO

INMUNOLGICO DE
HEPATITIS VIRALES
M G . R O B E RT C A B A L L E R O B A R D A L E S

VIRUS DE LA HEPATITIS B
HEPADNAVIRUS
Hepatotropo
No citoptico
Dimetro: 42 nm
Env:

7 nm

Core: 28 nm

PRINCIPALES GENES Y PRODUCTOS

GEN
S

P. M.

(Da)

25 000 30 000

17 000 22 000

65 000

17 000 28 000

FUNCIN
Codifica las proteinas de envoltura.
( S, pre S2 y pre S1 )
Codifica las proteinas de la
nucleocapside
HBcAg y HBeAg antignicamente
distinto.
Codifica la polimerasa de DNA viral.

Codifica la proteina X

CICLO INFECCIOSO
CORRIENTE
ADN pol

SANGUINEA

ARN Pregenmico

NCLEO

cccDNA

virin
ARNm

HBsAg

CORRIENTE

SANGUINEA

HEPATOCITO

CITOPLASMA

CICLO VITAL DEL HBV

FASE NO REPLICATIVA

FASE REPLICATIVA
Hepatocito
Tiempo; sexo

HBV DNA libre

HBsAg

Edad de la infeccin
inmunocompetencia
Factores antivirales

HBV DNA
integrado

HBsAg

HBeAg
HBV

antiHBe

PATOGENIA DE LA HEPATITIS B
INMUNIDAD CELULAR

Hepatocito
LT CD4

LT CD8
HLA I

antiHBs
INFg

HLAII

FNTa

Hepatocito

INMUNIDAD
HUMORAL

SUPRESIN DE LA INFECCIN

VIRUS DE LA HEPATITIS B
El VHB pertenece a la familia hepadnaviridae DNA.
Estructura de VHB
1.

Parte externa o envoltura

Contiene HBsAg, liberados de celulas infectadas
como pequeas particulas de 22nm
El HBsAg puede ser identificado en suero
despues de 30-60dias despues de la
exposicion.

2.

Parte interna o
nucleocapside
DNA bicatenario
incompleto.
Dos proteinas DNA
polimerasa y proteina
que ayuda a la sintesis
de la cadena larga.
HBcAg ( no se encuentra
en el suero)
HBeAg ( se encuentra en
suero)

GENOMA VIRAL
Posee cadena de ADN (cadena corta y
larga)
La cadena corta posee 4 regiones que
codifican protenas virales.
Regin S .- codifica protenas que
componen la envoltura del virus
(HbsAg).
Region C .- sintetisa protenas del core
(HbcAg).
Region P .- sintesis de DNA
polimerasa.
Region X .- sintesis de la proteina X.

PATOGENIA
HEPATITIS B AGUDA
Periodo de incubacin 4-28 semanas con
promedio de 60-110 dias.
FASES
1era Fase .- se manifiesta la replicacion viral.

2da Fase .- proceso viral agudo. Fase anicterica.

3era Fase .- fase icterica puede verse que la
bilirrubina excede 2.5-3mg.
4ta Fase .- fase de convalescencia.

HEPATITIS B CRONICA
Enfermedad hepatica necroinflamatoria

HBsAg presente enperiodo de 6 meses a mas.

Diagnostico de la HB cronica en tres situaciones

Hepatitis B aguda aument de la transaminasa

Sintomas inespecificos con aumento de la
transaminasa
Pacientes asintomaticos detctados en estudios
rutinarios

HEPATITIS POR VIRUS B

Vas de transmisin

Sexual

Vertical

Percutnea

Exposicin a sangre o fluidos contaminados (semen,

saliva, leche, lgrimas, orina, secreciones vaginales,
sudor, menbranas mucosaspercutanea)
Sexual - Prostitutas y homosexuales presentan
riesgo elevado. Promiscuidad.
Parenteral , Trabajadores Sanitarios. Transmisin
horizontal en convivientes

Perinatal Madres que son AgHBe positivo

transmiten la infeccin con mucha mayor frecuencia.
Es la principal forma de transmisin en
poblaciones con alta prevalencia del Virus B.

CONCENTRACIN DEL VIRUS DE LA

HEPATITIS B EN DIVERSOS FLUIDOS
CORPORALES

Alto
sangre
suero

Moderado
semen
secreciones
vaginales
saliva

Bajo/N
Detectable
o
orina
heces
sudor
lgrimas
leche humana

EPIDEMIOLOGA
La OMS estima mas de 2000 millones de
infectados por VHB en el mundo.
300millones son portadores cronicos
250 000 mueren anualmente
El HVB causa importante cirrosis y
hepatocarcinoma.
cirrosis (5-8%).
hepatocarcinoma (80%)

HEPATITIS POR VIRUS B

Zona de baja endemicidad: <2 % de portadores
Zona de endemicidad intermedia: 2-7 %
Zona de alta endemicidad:> 7 %

El Per se ubica entre los paises de endemia

intermedia.
Es variable de acuerdo a las regiones y de las
zonas.
El departamento con mayor letalidad se ubica
Apurimac con un 17% seguido de ayacucho (9%) ,
Loreto (8%).

DIAGNSTICO DE LABORATORIO
Alteraciones bioquimicas
Bilirrubinemia elevada (directa e indirecta)
Transaminasas elevadas (20 - 40 veces sobre lo
normal). Mas elevada la (GPT)
Fosfatasa alcalina y GGPT moderadamente elevada

Hemograma y pruebas de coagulacin normales

Rara vez se requiere de biopsia

MARCADORES
INMUNOLOGICOS

MARCADORES INMUNOLOGICOS
DIRECTOS

INDIRECTOS

HBsAg

antiHBs

HBeAg

antiHBe

DNA

antiHBc-Total

antiHBc-IgM

HEPATITIS B
AGUDA
HBsAg
Periodo clnico

Ac antiHBc TOTAL
Ac anti HBc IgM Ac Anti HBs

HBeAg

Ac Anti HBe
ADN vrico
2

10

12

MESES

HEPATITIS B CRNICA

Periodo clnico
Ac anti HBc IgM
HBeAg

Ac anti HBcTOTAL

ADN vrico
Ac Anti HBe

HBsAg
2

10

12

MESES

PRUEBAS INMUNOLOGICAS
PRUEBAS DE TAMIZAJE
Aglutinacin indirecta
Hemaglutinacin.
Enzimoinmunoensayo
Radioinmunoensayo
Inmunodifusin
PRUEBAS CONFIRMATORIAS
Neutralizacin previa.
Estudio histolgico heptico.

Marcadores
Existe marcadores sricos para el diagnstico de Hepatitis B
aguda o crnica.
Ag HBs marcador general de infeccin.
Anti-HBs recuperacin y/o inmunidad.
IgM Anti-HBc marcador de infeccin aguda.
IgG Anti-HBc infeccin pasada o crnica.
Ag HBe replicacin del virus y por tanto infectividad.
Anti-HBe indica que el virus ya no se replica. Sin embargo,
el paciente puede ser todava Ag HBs positivo a partir del
VHB integrado.
DNA-VHB - indica replicacin del virus. Se usa sobre todo
para la monitorizacin del tratamiento.

HEPATITIS C
Familia: Flaviviridae
Es un virus RNA de cadena simple que
codifica un poliproteina viral.
Presenta una capside icosaedrica (core) y una
envoltura que contiene las glucoproteinas E1
y E2 .
Los genes estructurales: el gen C codifica la
protena del core; genes E1 de 37 Kd y E2 de
61 Kd codifican las protenas de la envoltura
Genes no estructurales ( NS2 , NS3, NS4A,
NS4B, NS5A, NS5B)

REPLICACIN VIRAL
El VHC no se integra con el
genoma de la clula infectada
una vez que entra al citoplasma
de la clula husped, perder la
cubierta y el genoma viral
actuara como un templete de
trascripcin de una molcula de
RNA complementaria
(negativa).Esta molcula negativa
servir a su vez como un
templete para la sntesis de la
molcula RNA genomica positiva.
Este fenmeno explica que,
inhibiendo la replicacin viral,
sea posible la erradicacin y
curacin de la infeccin por el
VHC.
Las enzimas capaces de realizar
estos pasos, normalmente seran
protenas codificadas por el
virus.

HEPATITIS C
Modo de transmisin:
Transfusiones sanguneas
Compartir jeringuillas

Los tatuajes y piercing

Va sexual
Va materno fetal

Compartir cepillos de
dientes o maquinillas de
afeitar.

CLNICA
Un alto porcentaje de estos pacientes se produce una
infeccin crnica; (esto ocurre en cerca del 50-60%
de las hepatitis post transfusionales por virus C).
Aproximadamente en la mitad de los pacientes que
presentan una infeccin crnica por virus C, se
desarrolla lentamente una cirrosis, la que puede
asociarse en algunas ocasiones a la aparicin de un
hepatocarcinoma. Otra caracterstica descrita con
frecuencia en la evolucin de estos pacientes, es la
gran fluctuacin en el nivel srico de transaminasas,
las que puede variar hasta en 10 veces con respecto
al valor anterior, en perodos de pocos das. Sin
embargo, la enfermedad es mas frecuentemente
reconocida en adultos; los casos informados son
infrecuentes en nios menores de 15 aos.

Reservorio: El hombre; se ha
transmitido experimentalmente a los
chimpancs.
Perodo de Incubacin: Oscila de dos
semanas a seis meses, pero por lo
comn es de seis a nueve semanas.

DIAGNOSTICO DE LABORATORIO
Pruebas serologicas
Elisa de 1ra generacin NS4 (C100-3).
Elisa de 2da generacin c22-3 de la regin del core, c33c
(NS3) y el c100-3 (NS4).
Elisa de 3ra generacin NS4, NS3 y NS5.

Test Confirmatorios
RIBA, LIA TEST e INNO-LIA
Test Moleculares

PCR

Las alteraciones ms constantes son el

aumento de la bilirrubina en sangre y el
aumento de la actividad de las
transaminasas (enzimas hepticos,
conocidos por sus iniciales ALT o GPT y
AST o GOT). Se hallan entre 20 y 40
veces ms elevadas de los valores
normales.

ELISA
Contiene una mezcla de pptidos
sintticos o recombinantes o una
combinacin de estos, se mide los Ac Ig
G que contiene la muestra.
La presencia de Acs Anti-HCV media la
unin del trazador en la fase slida.
La actividad enzimatica resulta
directamente proporcional a la
concentracin de acs presentes en la
muestra.

ELISA INDIRECTO

PRUEBA CONFIRMATORIA
RIBA
Es una tecnica por la cual se separan proteinas por electroforesis
en gel de poliacrilamida y se depsues se transfieren
electroforeticamente a un papel de nitrocelulosa donde son
detectados con ac que reconocen los ag que hay en ellas.
RIBA-1: contena unas bandas que comprendan Ag original que
codificaba 5-1-1 producido por E. coli y el Ag c100-3 producido
en clulas de levadura, as como otras 2 bandas de control de las
IgG.
RIBA-2: dos Ag, uno del gen no estructural (c33c) y otro del
core (c22-3).
RIBA-3: se aadio una protena modificada y 2 Ag
sintticos (c100p y c22p), as como la protena
recombinante NS5.

PRUEBAS MOLECULARES
PCR
Identifica la infeccin aguda en un 80% antes de la
seroconvercion y de 80 a 100% en enfermedad heptica
activa.
Determina el RNA viral como expresin de fase infectiva
y replicativa.
Un ciclo consta de los siguientes pasos:
desnaturalizacin, unin y extensin.

AMPLICOR PCR
El mtodo consta de cuatro pasos:
Preparacin del reactivo

Preparacin de la muestra
Amplificacin (PCR)
Deteccin