1.

LIQUIDO CEFALORAQUIDEO (LCR)

Un cultivo de lquido cefalorraqudeo es un examen de laboratorio que
se realiza para buscar bacterias, hongos y virus en el lquido normalmente
transparente que circula en el espacio alrededor de la mdula espinal.
El lquido cefalorraqudeo tiene cuatro funciones principales: (1) es un
amortiguador mecnico que impide traumas, (2) regula el volumen de los
contenidos intracraneales, (3) es un medio nutriente del sistema nervioso
central, y (4) es un canal excretor para productos metablicos del sistema
nervioso central.
Material
Campos estriles
Guantes estriles
Gasas estriles
Alcohol etlico o isoproplico al 70%
Yodo povidona al 10%
Jeringas de 5-10 ml.
Agujas de puncin IM
Trcares de puncin lumbar de varios tamaos
Tubos cnicos limpios y estriles con tapn de rosca
Es necesario que estn totalmente limpios, no alcanza con que estn
slo estriles pues la presencia de bacterias muertas por la
esterilizacin puede inducir a errores por tinciones falsamente
positivas. No se deben usar tampoco frascos que hayan contenido
medicamentos como por ejemplo antibiticos aunque estn
estriles, porque restos de medicacin pueden tener efecto
antimicrobiano y negativizar los cultivos.
METODO
Lavado previo de las manos, colocarse sobretnica y guantes
estriles.
Se localiza la zona elegida para la puncin lumbar, colocado el
paciente en la posicin adecuada
Se desinfecta con alcohol al 70% una zona de uso 10 cm de dimetro
en el rea elegida.
Se coloca campo estril
Se repite la operacin con Yodo povidona que se deja secar durante
un minuto
Realizar la puncin entre los espacios intervertebrales L3-L4, L4-L5 o
L5-S1, siguiendo las normas de la ms estricta asepsia
Al llegar al espacio subaracnoideo retirar el estilete y dejar salir
libremente el lquido cefalorraqudeo que se recoger en tres tubos,
sin conservantes, con tapn de rosca. 1. El primer tubo: Estudio
bioqumico
2. El segundo: Estudio microbiolgico

3. El tercero: Investigacin de clulas (este suele ser el ms

transparente aunque la puncin haya sido traumtica). No obstante,
el tubo ms turbio se enviar a Microbiologa.

Volumen Mnimo
Para el estudio bacteriolgico rutinario: 1 ml, aunque es preferible
disponer de volmenes superiores.
Para hongos o mico bacterias: 2 ml adicionales ms por cada uno de
los estudios, siendo deseable llegar a los 10 ml.
Para estudio de virus: 1 ml ms.
Transporte
La muestra se enva a un laboratorio donde se coloca en un plato
especial, llamado medio de cultivo. El personal del laboratorio vigila para
ver si hay proliferacin de bacterias, hongos o virus en el plato. La
proliferacin significa que hay una infeccin.
Las muestras para el estudio de virus se enviarn en hielo, si el envo
se retrasa ms de 24 horas, se deber de conservar a -70C.

Valores normales: Un resultado normal significa que no hubo

proliferacin de ninguna bacteria, virus u hongo en la caja de Petri.
Esto se denomina resultado negativo.

Significado De Los Resultados Anormales

Si hay bacterias presentes: Meningitis Bacteriana. Otras posibles
infecciones incluyen tuberculosis e infecciones micticas. Algunas bacterias
o virus tambin se pueden detectar usando exmenes especiales.
El hecho de encontrar bacterias no necesariamente significa que la
infeccin sea contagiosa, a menos que se trate de meningitis
Meningoccica. Incluyendo Tambin:

 Meningitis asptica
Criptococosis
Enfermedades Que Se Pueden Encontrar:
Un anlisis anormal de LCR puede deberse a muchas causas,
incluyendo:
Cncer
Encefalitis
Encefalopata heptica
Infeccin
Inflamacin
Meningitis debido a bacterias, hongo, tuberculosis o virus

CULTIVOS
Para los tipos de meningitis bacteriana, los medios de cultivo
anaerobio ofrecen una sensibilidad de alrededor del 80-90%.
Proceso de la muestra para el cultivo
Las muestras deben trasportarse rpidamente al laboratorio y ser
procesadas inmediatamente no despus de 30 minutos de la
recoleccin.
Rotular con el nombre del paciente
nmero de registro
fecha y naturaleza de la muestra
Si el mdico sospecha que la muestra puede contener bacilos alcohol
cidos resistentes debe hacerlo saber en su solicitud al laboratorio.
El sedimento se siembra en placas con gelosa chocolate y gelosa
sangre.
Las placas se incuban a 37C en tensin parcial de CO2 de 24 a 48
horas.
Si hay desarrollo bacteriano identificar colonias.
Si despus de 48 horas no hay desarrollo bacteriano pueden ser
descartados.

Sembrar una asada del sedimento en cada uno de estos medios:

Agar sangre de carnero

Agar Chocolate.
Agar Mac Conkey
Thayer Martin.
Sabouraud (hongos)
Lowenstein Jensen (solo si se investiga BAAR)

TINCIONES:

Tincin Gram (60-80 % de sensibilidad): Neisseria meningitidis

Ziehl-Nielsen
Auramina: Mycobacterium Tb
Tinta China: Criptococo.

CULTIVO DE LIQUIDO SEMINAL

ESPERMOCULTIVO
Qu es el semen? El semen o esperma es una secrecin semilquida
de aspecto viscoso y blanquecino que se sintetiza en los genitales
masculinos, a partir de los testculos, la prstata y glndulas sexuales
secundarias y que contiene los espermatozoides.
ORIGEN DEL SEMEN
El semen comienza su formacin en los tbulos seminferos de los
testculos (donde se fabrican los espermatozoides), de ah son retenidos en
el epiddimo, donde maduran los espermatozoides y son conducidos por los
conductos deferentes a las vesculas seminales donde el semen adquiere
volumen y fructosa (que sirve de fuente de energa y alimento a los
espermatozoides), finalmente, tras pasar por la prstata y aadir el lquido
prosttico.
El semen proporciona a los espermatozoides un medio ptimo para
alcanzar el vulo y poder ser fecundado.
Menos de 10% del volumen del semen de una eyaculacin
corresponde a los espermatozoides, y ms de 90% al lquido seminal. La
densidad de espermatozoides en el semen vara de 50 a 150 millones por
mililitro, por lo que cada eyaculacin contiene entre 200 y 400 millones de
ellos.
ELEMENTOS QUE LO COMPONEN
principalmente
Fructosa
Prostaglandinas (E2, A, B)
Aminocidos
Fsforo
Potasio
Hormonas
ESPERMOGRAMA
Consiste en analizar el semen, y evaluar sus caractersticas
macroscpicas y microscpicas, en el estudio de sus caractersticas:
volumen, composicin celular (nmero, movilidad, morfologa).
METODOS DE OBTENCIN
Masturbacin.
Recolector seminal.
Coito interrumpido.

RECOLECCION DE LA MUESTRA
La muestra seminal debe ser tomada con un perodo de abstinencia
sexual de 2 a 7 das, debe ser depositada en un recipiente estril o
limpio, de boca ancha, que permita que todo el lquido seminal se
deposite en el recipiente. El recipiente debe ser tapado en forma
hermtica, marcado con el nombre del paciente, transportado a
temperatura corporal (30C- 36C)
EL ESPERMOGRAMA SE DIVIDE EN DOS
Examen Macroscpico

Examen Microscpico

Recuento de espermatozoides

El recuento de espermatozoides se realiza mediante

cmaras de recuento especficas en cmara de recuento de glbulos
blancos.
Motilidad: El espermatozoide tiene una estructura flagelar que le
permite su desplazamiento en el lquido seminal, en la cavidad
vaginal, tero y trompas uterinas. Grado a. Grado b. Grado c.
Morfologa
Cabeza: se encuentra el material nuclear y grnulos densos,
que se conocen con el nombre de acrosoma.
Cuerpo: el metabolismo proporciona energa para el
movimiento.
Cola: un flagelo tpico, empuja el espermatozoide en su
camino.

QUE ES EL CULTIVO DE LIQUIDO SEMINAL?

El cultivo de semen consiste en analizar el semen en busca de

infecciones causadas por bacterias, hongos, etc.

 LOS BACTERIAS CAUSANTES PUEDEN SER:

Escherichia coli,

Klebsiella pneumonia,
Proteus mirabilis,

Pseudomona aeruginosa

Staphilococus aureus.
RECOMENDACIONES PARA LA OBTENCION DE LA MUESTRA
Se recomienda al paciente tener abstinencia sexual 2-5 das como mximo.
La muestra ms representativa es la que se obtiene por el mtodo de la
masturbacin y debe de eyacularse dentro del recipiente.
La muestra deber ser llevada lo mas antes posible al laboratorio, si la
muestra es tomado en su domicilio; si no la muestra debe tomarse dentro
del laboratorio en una dependencia prxima para su anlisis
La muestra incompleta no se debe de analizar en particular si se pierde la
primera porcin del eyaculado

FORMAS
Coito interrumpido
Post-coito
Aspiracin vaginal
Lavador salinos
Condn
RECOLECCION DE LA MUESTRA
Frasco de vidrio (transparente), no frasco de plstico porque baja la
motilidad.
Boca ancha
Limpio

OTR

 Seco
Estril
RECEPCIN DE LA MUESTRA
La muestra es enviada en frasco en vidrio estril conteniendo la muestra
identificado correctamente con el N de registro del paciente.
Debe adems ser acompaada por la boleta o solicitud del cultivo
respectivamente con los datos del paciente que son: nombre completo, N
de registro, edad, sexo, servicio y diagnostico con letra legible.
SEMBRADO DEL ESPERMA
Sembrar 0.1 ml de semen en:
Placa de Agar Sangre.
Placa de Agar Chocolate.
Placa entera de EMB.
SIEMBRA INICIAL
La muestra debe ser sembrada en agar Chocolate que se incuban a 35 C
por 48 horas, adems un frotis para coloracin de gram , y un directo al
fresco con solucin salina al 0.85% entre lamina y laminilla.
La primera lectura 18-24 horas.

a. Si no hay crecimiento incubar 24 horas ms.

b. Si hay crecimiento de un solo tipo de colonia se procede a una

identificacin y sensibilidad ya sea por mtodo manual o automatizado.

c. Si hay ms de un tipo de colonia se procede a examinarlas

detenidamente en busca de colonias gris que pudieran ser Neisseria o
pseudomonas o colonias blancas sospechosas de levaduras.
PRUEBA DE OXIDASA
Mtodo en placa directa
Realizacin de la prueba:
Mtodo en placa directa
Agregar directamente 2-3 gotas de reactivo a algunas colonias. No inundar
toda la placa y no invertirla.
Observar los cambios de color. Con el reactivo de Kovacs la reaccin se
produce en unos 10-15 segundos (UN COLOR VIOLETA), mientras que con el
de Gordon y McLeod es dentro de los 10-30 minutos.

LIQUIDO CINOVIAL
Bacterias:
Staphylococcus aureus
Haemophilus influenzae tipo B
especies de estreptococos
bacilos gramnegativos
Neisseria
Enfermedades como:
Artritis Infecciosa

ESTUDIO MICROBIOLOGICO
La artritis sptica es una reaccin inflamatoria del espacio articular
producida por el crecimiento de un microorganismo.
La tincin de Gram constituye una de las pruebas de mayor inters en el
estudio microbiolgico del lquido sinovial.
Los microorganismos que con mayor frecuencia se aslan en la artritis
infecciosa son los pertenecientes al gnero de Staphylococcus y
Streptococcus.
Streptococcus pyogenes es el microorganismo que con mayor frecuencia
se asla en las artritis infecciosas asociadas a trastornos autoinmunes o
lesiones traumticas. Streptococcus agalactiae se suele aislar en
lactantes o pacientes tratados con glucocorticoides.
ESTUDIO (LS)

Se Debe Incluir:

Recuento de leucocitos y diferencial

Estudio de cristales
Tincin de Gram
Tincin con rojo alizarina
Cultivos
Pruebas Bioqumicas
Tincin diferencial con colorante de Wright
Tincin con rojo Congo

CULTIVOS

Agar gelosa sangre

Agar sal y manitol
Agar MacConkey
Agar Biggy
Agar Soya tripticasa
Agar chocolate
Caldo tioglicolato

OTROS:
Hemograma
Radiografa

LIQUIDO PLEURAL
Se necesita una muestra de lquido pleural.
La muestra se enva a un laboratorio y se examina bajo un microscopio
en busca de signos de infeccin.

BACTERIAS
Bacterias:
Streptococcus pneumoniae,
Staphylococcus aureus
Pseudomonas aeruginosa
Haemophilus influenzae
Legionella spp
Mycobacterium tuberculosi

Enfermedades:

Derrame pleural tuberculoso

ANALISIS MICRBIOLOGICO

 Hay que hacer estudios microbiolgicos de rutina que incluyan tincin de

Gram para detectar precozmente la presencia de grmenes, cultivos en
medios de aerobios y anaerobios.
Tambin pueden hacerse cultivos de micobacterias y para hongos
cuando haya sospecha clnica.
Actualmente se pueden detectar antgenos bacterianos para
Streptococcus pneumoniae, Staphylococcus aureus y Haemophilus
influenzae. Tambin pueden detectarse virus por PCR.
La cromatografa de gas-lquido puede detectar anaerobios, pero es cara
y compleja.
Radiografas y Tomografas.
La baciloscopia con tnica de auramina o Ziehl- Neelsen
Cultivos:
Lvenstein Jensen
Agar MacConkey
Biopsia pleural

LIQUIDO PERITONEAL
Enfermedades:
Peritonitis Bacteriana Espontnea
Encefalopata
Inflamacin retroperitoneal
Peritonitis
Peritonitis espontnea
Peritonitis secundaria
Bacterias:
E. Coli
S. aereus
M. tuberculosis.

 Algunas bacterias Gram negativos aerbios entricos.

DIAGNOSTICO
Tincion de Gram:
Pruebas Bioquimicas
Cultivos:
Agar MacConkey
Agar Sangre
Agar Chocolate.
Exmenes de Sangre
Radiografas
Tomografas

LIQUIDO PERICARDIO
El pericardio envuelve el corazn y los primeros centmetros de los
grandes vasos en un saco pericrdico conteniendo normalmente cerca de
50 ml de lquido pericrdico claro y cristalino . En distintos estados
anormales.
TOMADA DE MUESTRA
La puncin evacuadora puede salvar la vida del paciente cuando existe un
taponamiento. Esto se lleva acabo con el paciente en decbito y con aguja
larga, que se introduce a la izquierda del apndice xifoides y se dirige hacia
la izquierda, arriba y atrs.
Examen Microbiologico:
Mediante la tincin de Gram. para valorar la pericarditis bacteriana, la
sensibilidad al cidoalcohol resistente para valorar la pericarditis
tuberculosa.
Examen Microscopico:
El recuento de hemates y el hematocrito se utiliza para diagnosticar
derrames hemorrgicos. El recuento leucocitario sirve para el diagnostico
diferencial, recuento mayores que 10,000 / l sugiere:
Pericarditis bacteriana
Tuberculosa o neoplsica, el recuento diferencial posee escaso valor
diagnostico.

 HEMOCULTIVO

Un hemocultivo es una prueba que consiste en la extraccin de una

muestra de sangre y puesto en cultivo para detectar la presencia de:
Grmenes aerobios (grmenes cuyo organismo necesita aire para
desarrollarse).
Grmenes anaerbicos (grmenes incapaces de vivir en una atmsfera
que contiene oxgeno).
Se puede hacer la tincin de Gram.
MEDIOS DE CULTIVO

Agar Mac Conkey

Agar EMB
Agar Gelosa Sangre
Medio Sal Y Manitol
Agar Biggy
Agar Agar Chocolate

BACTERIAS

E. Coli
Streptococcus grupo A
Staphylococcus sp
Corynebacterium sp
Pseudomona auruginosa

SEMEN
En el area de Microbiologia se hace cultivos de semen llamados
Espermocultivo.
El espermocultiv es un mtodo bacteriolgico que consiste en el cultivo
del liquido espermtico o esperma para el diagnostico de infecciones
bacterianas, principalmente de la prstata.
Para diagnosticar se tiene que hacer:
Cultivos
Pruebas Bioquimicas
Tincin de Gram
BACTERIAS

Staphylococcus aureus
Escherichia coli
Streptococcus sp
Neisseria gonohrroeae
Cndida albicans.

CULTIVO


El paciente tendr abstinencia sexual 5 - 7 das antes de la toma de la
muestra. Para hacer dicha toma, deber orinar primero, lavarse las manos y los
genitales y recoger el semen en frasco estril. Se debe procesar antes de 3 horas
tras la recogida. Se sembrar con asa calibrada en agar sangre, agar chocolate y
Tayer-Martin incubndose 48 - 72 horas en CO, y se har recuento. Si se aslan
>10 UFC/ml de un solo microorganismo de los habituales debe considerarse
positivo. Si el recuento es <10 UFC/ml de un solo microorganismo, o ms de una
especie de microorganismos, deber considerarse negativo o contaminado y
valorarse la posibilidad de repetir la toma de muestras.

FLUJO VAGINAL

La vaginosis bacteriana (VB) es una condicin caracterizada por el

reemplazo de los lactobacilos vaginales con otras bacterias, sobre todo
microorganismos anaerbicos, tales como
Gardnerella vaginalis
Peptostreptococcus
Bacteroides spp.
DIACNOSTICO
Medios de cultivos:
Agar Thayer Martin
Agar 110 o sal y manitol
Medio Biggy o Nickerson
Agar sangre de cassman
Agar Chocolate.
Agar MacConkey
Tincin de Gram

 HEMOCULTIVO
MATERIAL NECESARIO
Frascos de hemocultivo proporcionados por el Laboratorio de Microbiologa
ligadura de goma
jeringas y agujas de puncin
gasas estriles
guantes estriles
alcohol etlico o isoproplico al 70%
Yodo povidona al 10%

METODO

El procedimiento de extraccin de sangre para la realizacin de

hemocultivos se debe realizar cumpliendo las mximas precauciones de asepsia.
Lavarse las manos
Colocar ligadura y campo estril
Palpar la vena a puncionar
Realizar antisepsia con alcohol 70% en una zona de piel de unos 10 cm de
dimetro alrededor del sitio de puncin. Se comenzar por el centro y se
irn haciendo crculos concntricos hacia el exterior
Repetir el procedimiento utilizando Yodo povidona al 10%
Dejar actuar 1-2 minutos, esto es : hasta que se seque el antisptico sobre
la piel
Mientras acta el iodforo, desinfectar el tapn de goma del frasco de
hemocultivo con alcohol 70%
Colocarse los guantes estriles
Extraer la sangre sin tocar en ningn momento el campo desinfectado. Si
fuera necesario palpar nuevamente la vena se cambiarn los guantes
estriles y se realizar nueva antisepsia de piel
Inyectar directamente la sangre en el frasco. No es necesario cambiar de
aguja
Mover los frascos para que la sangre y el medio de cultivo se mezclen
Para frascos de sistemas automatizados, retirar las tirillas de las botellas y
pegarlas en la hoja de pedido correspondiente al paciente. En ningn caso
se rotular o pegar ningn tipo de etiqueta adhesiva sobre los cdigos de
barras de las botellas

Volumen De La Muestra
Asultos: 10 ml
Peditricos:
Neonatos:

Nmero De Muestras. Dos hemocultivos por paciente, previos al

tratamiento antimicrobiano. El intervalo de tiempo entre las extracciones es
suficiente con una hora, en caso de emergencia se realiza en 15min, se
pueden extraer dos muestras simultaneas de diferentes sitios de puncin. En
caso de endocarditis subaguda se recomienda aumentar a tres frascos de
hemocultivo repartidos en 24 horas y en caso de que la primera serie sea
negativa, obtener tres muestras ms al da siguiente. Si el paciente est

recibiendo antibiticos puede ser necesario obtener otra serie de

hemocultivos al tercer da.
Transporte: Deben enviarse en forma inmediata al laboratorio una vez
finalizada la seria, mientras tanto mantener a temperatura ambiente. Nunca
debe refrigerarse ni congelarse.
Observaciones: Cuando no haya venas accesibles puede realizarse la
extraccin de sangre arterial (No son adecuadas las muestras extradas a
travs de catteres).
En caso de sospecha de determinados microorganismos (Brucella spp,
Leptospiras, Micobacterias, Hongos, etc) ponerse en contacto con el
Laboratorio de Microbiologa.
En caso que el paciente est recibiendo antibiticos realizar la toma previa a
la administracin de la dosis de antimicrobiano.
Si se evita conversar durante la toma de la muestra, no es necesario
colocarse tapabocas.
En sala de inmunodeprimidos s es aconsejable el uso de gorro y tapabocas.

 UROCULTIVO
Muestra de orina para descartar o evidenciar infecciones urinarias, obtenida
por Chorro medio.
Material Necesario:
gasas estriles
jabn neutro
recipiente de boca ancha con tapa de rosca hermtico y estril

Obtencin: La muestra idnea es la primera miccin de la maana, ya que

permite la multiplicacin de bacterias durante la noche.
METODO

MUJERES
Lavado de manos con agua y jabn
enjuagar con abundante agua y secar con una toalla limpia
Se separarn los labios mayores y menores, mantenerlos separados en
todo momento hasta que se haya recogido la orina
con una gasa enjabonada se lava bien la vulva pasndola de delante
hacia atrs (4 veces)
enjuagar cuidadosamente con agua para eliminar los restos de jabn
desechar el primer chorro ( 20-25 primeros mililitros), sin interrumpir la
miccin
recoger el resto de la orina en el recipiente, cerrar inmediatamente
sujetar bien el frasco para que no haya contacto con la pierna, vulva o
ropa del paciente
Los dedos no deben tocar el borde del frasco o su superficie interior.

HOMBRES
lavado de las manos con agua y jabn
retraer completamente el prepucio, hasta que se haya recogido la orina
limpiar el glande con jabn neutro
eliminar los restos de jabn enjuagndolo con agua
se pedir al paciente que orine desechando el primer chorro ( los primeros
20-25 mililitros) sin interrumpir la miccin, recoger el resto de la orina en
el recipiente estril.