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1. DATOS GENERALES
1.1 Categora a la cual se inscribe
Innovacin cientfica (Categora A)
Universidad a la que pertenece: UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN MARCOS Facultad Farmacia y Bioqumica
Direccin Centro: Jirn Puno 1002
Ciudad: Lima 1
Distrito: Cercado
Provincia: Lima
Pas: Per
Telf./Fax:
3284737
Cargo que ocupa:
:
PASANTE ANALISTA FISICOQUIMICA
I. RESUMEN DE LA PROPUESTA
2
con sus contrapartes obtenidas de otras fuentes. El proyecto contempla la descripcin, extraccin,
anlisis y
II OBJETIVOS
III INTRODUCCION
Las especies marinas, en particular las algas marinas microscpicas (microalgas), han sido utilizadas por la
humanidad desde tiempos inmemoriales, sin embargo, es en los ltimos 50 aos en que se ha desarrollado
la biotecnologa aplicada a las microalgas. Los comienzos de la Biotecnologa de las Algas se remontan a la
II Guerra Mundial, cuando cientficos alemanes empezaron a cultivar masivamente microalgas para obtener
lpidos y protenas para la alimentacin humana. Las investigaciones sobre produccin de microalgas se
iniciaron despus de terminada dicha guerra, con proyectos en Estados Unidos, Japn y Alemania. Se pens
que las microalgas eran mucho ms productivas que las plantas superiores y se esperaba que su cultivo
pudiera proveer de alimentos alternativos de bajo costo, necesarios para la poblacin mundial que
aumentaba con rapidez.
Uno de los productos que se podran obtener en grandes cantidades y a la vez de una muy buena calidad
para la industria son los carotenoides. Varias especies de microalgas, especialmente las algas verdes,
acumulan altas concentraciones de carotenoides como el -caroteno, la astaxantina y la cantaxantina. Estos
carotenoides tienen amplias aplicaciones como colorantes y antioxidantes naturales por ejemplo el caroteno fue el primero de estos carotenoides en ser comercializado a partir del alga biflagelada Dunaliella
salina. Las condiciones extremas bajo las que crece esta alga, implica que se pueden emplear sistemas de
cultivo relativamente simples y de fcil implementacin, tal es asi que Australia es el mayor productor de caroteno natural a partir de Dunaliella salina. A pesar de que el Per cuenta con las condiciones climticas y
geogrficas necesarias para ser un productor no hay un avance concreto principalmente debido a que las
investigaciones respectivas actualmente son casi nulas.
De otro lado un carotenoide de mayor inters, aunque menos investigado es la astaxantina (3,3-dihidroxi,-caroteno-4,4-diona), que se describi por primera vez en crustceos (langostas, cangrejos y camarones)
como una forma oxidada del -caroteno, que da a los invertebrados y peces marinos un distintivo color
naranja-rojo. La astaxantina es utilizada como pigmento para los peces salmnidos de granja, as como
antioxidante dietario.
El alga verde unicelular, Haematococcus spp., ha sido reportada como un microorganismo prometedor para
la produccin comercial de astaxantina. Este organismo produce compuestos carotenoides primarios, como
-caroteno, lutena, zeaxantina, violaxantina y neoxantina, adems de poder acumular una cantidad de hasta
6%-8% de astaxantina en la biomasa.
Sin embargo todas estas posibles aplicaciones industriales en nuestro pas solo dependeran de diversos
estudios ms a profundidad que permita seguir a una posterior etapa de aplicacin y desarrollo tecnolgico,
por esta razn es muy importante un estudio ms sistemtico y detallado de estas especies y con mayor
razn si este conocimiento se puede aplicar a la bsqueda de mejores mtodos y procesos industriales de
gran aplicabilidad en nuestro pas.
3
Se han identificado y aislado ms de 600 carotenoides diferentes de fuentes naturales .
Afortunadamente los carotenoides pueden ser considerados como un grupo en trminos de su
estructura qumica bsica y de sus propiedades fsicas.
Los carotenoides se sintetizan por la unin extremo-extremo de molculas de 20 carbonos de
geranio-geranil difosfato, por lo que se produce un esqueleto comn de 40 carbonos a partir del cual se
derivan las variaciones individuales. En la figura 1 pueden verse dos estructuras que muestran los extremos
estructurales y funcionales de este grupo de compuestos.
de stas. El estudio
transporte
la
funcionalidad
de
los
carotenoides
asociacin con los dominios hidrfobos de las protenas. Las interacciones con protenas, tambin
modifican las propiedades fisicoqumicas. En la interaccin de la astaxantina con protenas en los
crustceos, para formar caroteno-protenas como la -crustacianina, se produce un efecto batocrmico del
enfermedades
cardiovasculares, tienen en alguna etapa como factor comn procesos de oxidacin que son mediados
por radicales libres. Para ser un antioxidante efectivo, una molcula debe ser capaz de retirar esos
radicales ya sea reaccionando con ellos para dar productos inocuos o frenando las reacciones en cascada
6
de los radicales libres , aspectos que se describen ampliamente para la astaxantina ms adelante.
4.2. Astaxantina
La astaxantina es una xantofila u oxicarotenoide (3,3-dihidroxi-, - caroteno-4, 4-diona) responsable
de la coloracin de los salmones, truchas, langostas, langostinos, flamencos; as como de varias
especies de algas y levaduras. Histricamente este pigmento se ha obtenido de fuentes naturales, con el
fin de aumentar la pigmentacin de salmnidos criados de manera intensiva, ya que la coloracin del
msculo es uno de los criterios ms importantes en la calidad de estos productos que determina su valor en
el mercado. Debido a que las fuentes naturales de astaxantina no aseguraban una calidad constante
del pigmento, algunas empresas de importancia en el rea de la qumica intentaron la sntesis en el
laboratorio. Es a partir de la mitad de la dcada de los 80 cuando se tiene disponible este producto en el
7
mercado en dos presentaciones: una con el 5% y otra con el 10% de pigmento . A partir del uso en la
cra de peces se observan una serie de ventajas en su utilizacin, que no solamente se refieren a la
coloracin de los productos, sino al rendimiento de los sistemas de produccin donde se utilizan,
ya que la mortalidad de los animales se reduce, presentan menos estrs fisiolgico y les permite un
8
mayor crecimiento .
En la figura 2 se muestra la estructura qumica de la astaxantina que se puede encontrar en tres
ismeros pticos 3R,3R; 3R,3S; 3S,3S. Estructuralmente est relacionada con el -caroteno, la
lutena y la zeaxantina, sin embargo, tiene caractersticas muy particulares debido a la presencia de
grupos OH y ceto (C=O) en los dos anillos extremos. Esto le confiere una serie de caractersticas nicas
como la posibilidad de esterificarse, un poder antioxidante no solamente limitado a sus dobles enlaces
conjugados sino a los grupos mencionados en sus dos anillos, y una polaridad alta con respecto a la
9
generalidad de xantofilas .
Se encuentra en forma natural conjugada con protenas o esterificada con uno o dos cidos grasos y en
forma libre es especialmente susceptible a la oxidacin. Debido a su estructura de dobles enlaces
conjugados, es capaz de absorber luz en el intervalo de la luz visible por lo que es un cromforo. Las
variaciones en la luz absorbida vienen dadas por la concentracin de la astaxantina8 as como por su
asociacin con otras molculas. Es insoluble en agua, soluble en la mayora de los solventes orgnicos, ya
que debido a su mayor polaridad es soluble en solventes donde otros carotenoides no lo son como el
etanol y el metanol.
En la figura 3 se muestran resumidas sus propiedades fsicas y qumicas. Muchas de las actividades
biolgicas de esta molcula han sido atribuidas a su capacidad antioxidante. Algunos autores han resaltado
su capacidad de desactivar radicales libres y sobre todo de estabilizar el oxgeno singlete. Otros autores
mencionan que esa capacidad antioxidante es debida a sus grupos C=O por lo que al compararlo con
9
el -caroteno y la zeaxantina resulta interesante esta capacidad especialmente alta . Irnicamente, la
misma cadena de polieno y los grupos C=O son la principal causa de su inestabilidad qumica.
Debido a su alta capacidad como antioxidante, se le han atribuido diversas propiedades y beneficios para la
salud, aspecto que se revisa ms adelante.
anticancergenas,
como
inmuno-modulador,
su
aplicacin
en
enfermedades
10
14
Existen varios trabajos que describen propiedades anticancergenas de la astaxantina, entre stos cabe
mencionar el de Tanaka y col.,
16
un carcingeno qumico en vas urinarias de ratones. En otro estudio donde se alimentan ratas con un
carcingeno y con astaxantina, sta reduce de manera significativa la incidencia de cncer en la cavidad
17
bucal de las ratas con resultados superiores a los del -caroteno . Del mismo modo se ha visto una
18
ratones la administracin de astaxantina reduce en ms del 50% la incidencia de tumores, los resultados
son superiores a los mostrados por el -caroteno y la cantaxantina
19
.
Se ha propuesto el uso de astaxantina en humanos para inhibir la enzima 5- -reductasa, responsable del
20
crecimiento de la prstata en hiperplasia prosttica benigna . Al parecer el papel de la astaxantina y de
otros carotenoides estara relacionado con la regulacin al alza de la conectina 43 y la comunicacin
21
intercelular .
Entre las funciones ms importantes del hgado destacan la oxidacin de lpidos para producir energa,
la desintoxicacin por eliminacin de contaminantes y la destruccin de microorganismos, as como de
glbulos rojos muertos. En todos estos procesos se libera una cantidad significativa de radicales libres y
subproductos de la oxidacin por lo que un buen balance de mecanismos antioxidantes en las clulas
hepticas es importante. En este sentido algunos trabajos indican que la astaxantina es
11ms efectiva que
Se ha demostrado en varios ensayos in vitro e in vivo, usando diferentes modelos animales, que la
astaxantina influye significativamente en la funcin inmune. Por ejemplo en glbulos rojos de ratn tratados
24
. Tambin
25
se ha indicado que es capaz de restablecer la respuesta inmune en ratones de edad avanzada .
26,27
Otras evidencias en el mismo sentido refuerzan un papel inmuno-modulador de la astaxantina
.
En cuanto a las enfermedades neurodegenerativas solamente se ha comentado el papel cada vez
ms relevante del estrs oxidativo en la patognesis de enfermedades como la de Alzheimer,
Huntington, Parkinson
esclerosis
amiotrfica
lateral
28,29,30,31
Debido
las propiedades
antioxidantes de la astaxantina, se considera que pudiera ser un buen candidato para evaluar su efecto
en los estados patolgicos mencionados.
En el sistema cardiovascular, las ERO juegan un papel fisiolgico esencial para mantener la integridad del
sistema y en la generacin de situaciones patolgicas como la hipertensin arterial (HTA), diabetes y
aterosclerosis. Entre las ERO asociadas a estos estados destacan: el O2 , perxido de hidrgeno
(H2O2), radical hidroxilo (HO ), especies reactivas de nitrgeno (ERN), xido ntrico (NO) y peroxinitritos
(ONOO ).
En condiciones normales, las ERO se producen en concentraciones bajas, de manera controlada y
funcionan como molculas de sealizacin en la regulacin de la contraccin y relajacin del tejido
muscular liso as como de su crecimiento. Por otro lado, en condiciones patolgicas el incremento en las
ERO lleva, entre otras cosas, a
32
Disfuncin endotelial.
Incremento de la contractilidad.
Migracin de monocitos.
Peroxidacin de lpidos.
Inflamacin.
12
Existen excelentes revisiones sobre el papel de los antioxidantes en la proteccin del endotelio y su
33
34,35
funcin . Sin embargo cabe destacar que los trabajos de la astaxantina como cardioprotector
o
36,37
.
En uno de ellos se demuestra un claro efecto antihipertensivo debido a un mecanismo relacionado con la
produccin de NO. Del mismo modo se considera que la astaxantina tiene un efecto neuroprotector
presumiblemente debido a su capacidad antioxidante
36
el efecto antihipertensivo tambin est relacionado con un efecto modulador de la fluidez de la sangre, no
relacionado con los cambios de fibringeno, ya que ste mantiene sus valores en los grupos
experimentales y control. En el mismo estudio no se encontr una mejor relajacin dependiente del
endotelio por la administracin de astaxantina, por lo que los cambios los pueden atribuir a la capacidad de
deformacin o flexibilidad y de agregacin de las clulas sanguneas, sin embargo, sugieren profundizar en
37
estos estudios .
13
V.-
CONCLUSIONES
El escaso desarrollo industrial de productos que utilizan carotenoides con valor agregado en el Per, es
causado principalmente por:
14
potente
VI.-
RECOMENDACIONES
Las posibles aplicaciones industriales de los carotenoides en nuestro pas slo dependeran de
diversos estudios ms a profundidad que permita seguir a una posterior etapa de aplicacin y
desarrollo tecnolgico, por esta razn es muy importante un estudio ms sistemtico y detallado de
estas especies y con mayor razn si este conocimiento se puede aplicar a la bsqueda de mejores
mtodos y procesos industriales de gran aplicabilidad en nuestro pas.
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1
Rodriguez-Amaya D. Carotenoids and food preparation: The retention of provitamin A carotenoids in
prepared, processed and stored foods. pp 3-13. OMNI Proyect. Office of Health and Nutrition. U.S. Agency
for International Development. Washington DC, 1997.
2
Krinsky N- Actions of carotenoids in biological systems. Annu Rev Nutr. 1993; 13:561-587.
3
Kull D and Phander H. Appendix: List of new carotenoids. pp 295-317. In Britton G, Liaaen-Jensen S,
and Pfander, H (Eds) Carotenoids: Isolation and Analysis. Volumen 1A. 1995. Birkhuser. Basel.
4
IUPAC Commission on the Nomenclature of Organic Chemistry and IUPAC- IUB. Commission on
Biochemical Nomenclature. Nomenclature of carotenoides (Rules approved 1974). Pure Appl Chem. 1975.
41:407-431.
5
Weesie R, Askin D, Hansen F, de Groot H, Lugtenburg J and Brirtton G. Protein-chromophore
interactions in crustacyanin, the mayor blue carotenoprotein from the carapace of the lobster Homarus
gammarus. A study by 13C magic angle spinning NMR. FEBS Lett. 1995; 362:34-38.
6
Halliwell B, Gutteridge J. Free radicals in biology and medicine. 2nd Edition. Clarendon. 1989.
Oxford.
7
Coral G, Huberman A, De la Lanza G, Monroy-Ruiz J. Muscle pigmentation of rainbow trout
(Oncorhynchus mykiss) fed on oil-extracted pigment from langostilla (Pleuroncodes planipes) compared with
two commercial sources of astaxanthin. J Aquatic Food Prod Tech. 1998; 7:31-45.
8
Civera R, Goytorta E, Rocha S, Nolasco H, Vega-Villasante F, Balart E, Amador E, Ponce G, Colado
G, Lucero J, Rodriguez C, Solano J, Flores-Tom A, Monroy-Ruiz J, Coral G. Uso de la langostilla roja
Pleuroncodes planipes en la nutricin de organismos acuticos. pp 349-365 En: Civera-Cerecedo R, PrezEstrada C, Ricque-Marie D, Cruz-Surez E. (Eds.) Avances en Nutricin Acucola IV. 2000. Mxico.
9
10
Coral-Hinostroza G, Ytrestbyl T, Ruyter B, Bjerkeng B. Plasma appearance of unesterified
astaxanthin geometrical E/Z and optical R/S isomers in men given single doses of a mixture of optical 3 and
3R/S isomers of astaxanthin fatty acyl diesters. Comp Biochem Physiol C Toxicol Pharmacol. 2004; 139:99110.
11
Mercke J, Lignell A, Pettersson A, Hoglund P. Oral bioavailability of the antioxidant astaxanthin in
humans is enhanced by incorporation of lipid based formulations. Eur J Pharm Sci. 2003; 19:299-304.
12
OConnor I, OBrien N. Modulation of UVA light-induced oxidative stress by beta-carotene, lutein and
astaxanthin in cultured fibroblasts. J Dermatol Sci. 1998;16:226-230.
13
Guerin M, Huntley M, Olaizola M. Haematococcus astaxanthin: applications for human health and
nutrition. Trends Biotechnol. 2003; 21:210-216.
14
Landrum J, Bone R, Moore L, Gmez C. Analysis of zeaxanthin distribution within individual human
retinas. Methods Enzymol. 1999; 299:457-467.
15
Bennedsen M, Wang X, Willen R, Wadstrom T, Andersen L. Treatment of H. pylori infected mice with
antioxidant astaxanthin reduces gastric inflammation, bacterial load and modulates cytokine release by
splenocytes. Immunol Lett. 1999; 70:185-189.
16
Tanaka T, Morishita Y, Suzui M, Kojima T, Okumura A, Mori H. Chemoprevention of mouse urinary
bladder carcinogenesis by the naturally occurring carotenoid astaxanthin. Carcinogenesis. 1994; 15:15-19.
16
17
Tanaka T, Makita H, Ohnishi M, Mori H, Satoh K, Hara A. Chemoprevention of rat oral carcinogenesis
by naturally occurring xanthophylls, astaxanthin and canthaxanthin. Cancer Res. 1995; 55:4059-4064.
18
Tanaka T, Kawamori T, Ohnishi M, Makita H, Mori H, Satoh K, Hara A Suppression of azomethaneinduced rat colon carcinogenesis by dietary administration of naturally occurring xanthophylls astaxanthin and
canthaxanthin during the postinitiation phase. Carcinogenesis. 1995; 16:2957-2963.
19
Chew B, Park J, Wong M, Wong T. A comparison of the anticancer activities of dietary beta-carotene,
canthaxanthin and astaxanthin in mice in vivo. Anticancer Res. 1999; 19:1849-1854.
20
Anderson M. Method of inhibiting 5- reductase with astaxanthin to prevent and treat begnign
prostate hyperplasia (BPH) and prostate cancer in human males. 2001. US Patent #6277417.
21
22
Kurashige M, Okimasu E, Inoue M, Utsumi K. Inhibition of oxidative injury of biological membranes by
astaxanthin. Physiol Chem Phys Med NMR. 1990; 22:27-38.
23
Gradelet S, Le Bon A, Berges R, Suschetet M, Astorg P. Dietary carotenoids inhibit aflatoxin B1induced liver preneoplastic foci and DNA damage in the rat: role of the modulation of aflatoxin B1 metabolism.
Carcinogenesis. 1998; 19:403- 411.
24
Jyonouchi H, Zhang L, Tomita Y. Studies of immunomodulating actions of carotenoids. II. Astaxanthin
enhances in vitro antibody production to T-dependent antigens without facilitating polyclonal -cell activation.
Nutr Cancer. 1993; 19:269-280.
25
Jyonouchi H, Zhang L, Gross M, Tomita Y. Immunomodulating actions of carotenoids: enhancement
of in vivo and in vitro antibody production to T- dependent antigens. Nutr Cancer. 1994; 21:47-58.
26
Okai Y, Higashi-Okai K. Possible immunomodulating activities of carotenoids
in vitro cell culture experiments. Int J Immunopharmacol. 1996; 18:753-758.
27
Jyonouchi H, Sun S, Tomita Y, Gross M. Astaxanthin, a carotenoid without vitamin A activity,
augments antibody responses in cultures including T-helper cell clones and suboptimal doses of antigen. J
Nutr. 1995; 124:2483-2492.
28
Grant W. Dietary links to Alzheimers disease. J Alzheimers Dis. 1997; 2:42- 55.
29
Borlongan C, Kanning K, Poulos S, Freeman T, Cahill D, Sanberg P. Free radical damage and
oxidative stress in Huntingtons disease. Folia Med. 1996; 83:335-341.
30
de Rijk M, Breteler M, den Breeijen J, Launer L, Grobbee D, van der Meche F, Hofman A. Dietary
antioxidants and Parkinson disease. The Rotterdam Study Arch Neurol. 1997; 54:762-765.
31
Ferrante R, Browne S, Shinobu L, Bowling A, Baik M, MacGarvey U, Kowall N, Brown R, Beal M.
Evidence of increased oxidative damage in both sporadic and familial amyotrophic lateral sclerosis. J
Neurochem. 1997; 69:2064-2074.
32
Touyz R, Schiffrin E. Reactive oxygen species in vascular biology: implications in hypertension.
Histochem Cell Biol. 2004; 122:339-352.
33
34
Gross G, Lockwood S. Cardioprotection and myocardial salvage by disodium diuccinate astaxanthin
derivative (CardaxTM). Life Sci. 2004; 75:215-224.
35
Gross G, Hazen S, Lockwood S. Seven day oral supplementation with cardaxTM (disodium
disuccinate astaxanthin) provides significant cardioprotection and reduces oxidative stress in rats. Mol Cell
17
Biochem. 2006; 283:23-30.
36
Hussein G, Nakamura M, Zhao Q, Iguchi T, Goto H, Sankawa U, Watanabe H. Antihypertensive and
neuroprotective effects of astaxanthin in experimental animals. Biol Pharm Bull. 2005; 28:967-971.
37
Hussein G, Goto H, Oda S, Iguchi T, Sankawa U, Matsumoto K, Watanabe H. Antihypertensive
potential and mechanism of action of astaxanthin: II. Vascular reactivity and hemorheology in spontaneously
hypertensive rats effects of astaxanthin in experimental animals. Biol Pharm Bull. 2005; 28:47-52.
18