Los avances en los animales y las Ciencias Veterinarias

Artculo de revisin

La virulencia de los virus de la enfermedad de Newcastle y retos

diagnsticos

Namdeo Rajendra Bulbule, Dhananjay Shesharao Madale, Chandraprakash

Dinanath Meshram, Ravi Bhagwan Pardeshi, Milind Madhukar Chawak *

Centro de Investigacin, Divisin de Venkateshwara criaderos Private

Limited, Loni-Kalbhor las aves de corral y de diagnstico,

Pune, India.

Resumen | la enfermedad de Newcastle (ND) es econmicamente

enfermedad de las aves de corral ms importante y distribuido en todo el
mundo causando devastadoras prdidas en la industria avcola. virus de la
enfermedad de Newcastle (NDV) tiene una amplia gama de huspedes y ha
sido reportado para infectar ms de 240 especies de aves. En los pollos
virulencia vara desde no virulento, asociados con infecciones asintomticas
entricos o enfermedad inaparente o leve de las vas respiratorias (cepas
lentognicas), enfermedad respiratoria leve y tasas de mortalidad
moderadas (cepas mesognicas) a enfermedad grave con altas tasas de
mortalidad de hasta 100% ( velognicos cepas).

La virulencia de las cepas de NDV dependen en gran medida de la respuesta

del husped. La virulencia de los virus ND se mide anotando incidencia de la
enfermedad despus de la inoculacin intracerebral de los pollos de un da.
cepas altamente virulentas de NDV pueden ser discriminados de los bajos
cepas virulentas por la presencia de motivo de aminocidos multibsica en
el sitio de escisin proteoltica de la fusin

protena (F). Clasificacin gentica ha dividido en 2 clases de NDV (I y II),

con la clase I compone de slo el 1 genotipo

(Clase I, el genotipo I) y con clase II dividido en 18 genotipos (clase II, los

genotipos I-XVIII). Genotipos V, VI, y VII son los virus virulentos y genotipos
predominantes que circulan en todo el mundo. De estos, el genotipo VII es
particularmente importante, ya que se asocia con muchos o los ms
recientes brotes en Asia, frica y Oriente Medio. Para un rpido y preciso
diagnstico en tiempo real las pruebas de RT-PCR son tanto o ms sensibles
que el aislamiento del virus y son siempre ms rpido que el aislamiento del
virus. La vacunacin contra la enfermedad de Newcastle es una prctica
generalizada. Sin embargo, ND an se reconoce que es endmica en
muchas partes del mundo, particularmente en los pases en desarrollo.

Palabras clave | NDV, virulencia, PCR en tiempo real

editor | Muhammad Zubair Shabbir, Profesor Asistente, Laboratorio de

Operaciones de Calidad de la Universidad de Ciencias Veterinarias y
Pecuarias, Lahore, Pakistn. Nmero especial | 5 (2015) "emergentes,
reemergentes Enfermedades Infecciosas importantes de Animales y"

recibido | 03 de junio de, 2015; revisado | 13 de de julio de, 2015; aceptado

| 15 de de julio de, 2015; Publicado | 29 de de julio de, el ao 2015

* Correspondencia | Milind Madhukar Chawak, Aves de Diagnstico y Centro

de Investigacin, Divisin de Venkateshwara criaderos Private Limited, LoniKalbhor,

Pune, India; E-mail: chawakmm@rediffmail.com

citacin | Bulbule NR, Madale DS, Meshram CD, Pardeshi RB, Chawak MM
(2015). La virulencia de los virus de la enfermedad de Newcastle y retos
diagnsticos. Adv. Anim. Veterinario. Sci. 3 (5s): 14-21.

DOI | http://dx.doi.org/10.14737/journal.aavs/2015/3.5s.14.21

ISSN (Online) | 2307-8316; ISSN (Imprimir) | 2309-3331

Copyright 2015 Bulbule et al. Este es un artculo de acceso abierto

distribuido bajo la licencia Creative Commons Attribution License, que
permite el uso ilimitado, distribucin y reproduccin en cualquier medio,
siempre que la obra original est debidamente citados.

INTRODUCCIN

enfermedad de Newcastle es de mayor importancia econmica enfermedad

Poul-tratar de distribuir en todo el mundo causando devas-Tating pierde en
la industria avcola. virus de la enfermedad de Newcastle

(NDV) son, con mucho, el patgeno ms importante para las aves de todo
tipo y en la mayora de pases de la infeccin con formas virulentas
representa una enfermedad de declaracin obligatoria. virus de la
enfermedad virulenta de Newcastle (NDV) es una oficina de epizootias
internacionales (OIE) enumerar una enfermedad y sujeto a las normas
internacionales. NDV tiene una amplia gama de huspedes y ha sido
reportado para infectar ms de 240 especies de aves (Alexander, 2003). No
solo

virus ND muestran extremos de patogenicidad, sino tambin a los virus de

baja virulencia son enzotica en las aves salvajes. En la mayora de pas

intentos, el uso de vacunas vivas es la exacerbacin casi universal de las

infecciones con virus de baja virulencia pueden imitar el malestar producido
por el virus altamente virulento (Alexander, 2003).

Los signos y sntomas clnicos varan ampliamente en las aves infectadas

con el NDV y depende de factores tales como la cepa de virus, las especies
huspedes, edad de las aves, la presencia de otro patgeno, el estrs
ambiental y el estado de inmunidad del husped. En pollos diferentes cepas
de NDV causan la muerte sbita con un 100% de mortalidad a la infeccin

subclnica y la influencia de las especies puede ser igual de marcado, como

los virus que causan enfermedad grave en los pollos y los pavos puede
causar algunos sntomas de la enfermedad en gansos y patos. signos Clinical que pueden estar asociados con ND son las respiratorias

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la angustia, la diarrea, el cese de la produccin de huevos, la depresin, el

edema de la cabeza, cara, zarzo, muestra nervioso y la muerte. Algunos,
todos o ninguno de estos sntomas pueden ser comunes. Es muy difcil
evaluar la prevalencia exacta de ND en el mundo en GIV-en el tiempo. En
algunos pases o regiones de la enfermedad no se informe de opinin en
absoluto o slo se produce en la avicultura comercial, mientras que su
presencia en aves de traspatio o corrales domsticos se ignora (Alexander
et al., 2004). Los pases que han sido reconocidos como libres de la
enfermedad de Newcastle, el seguimiento de las encuestas revelan a
menudo infecciones asintomticas con virus virulentos que
presumiblemente se han diseminado de aves acuticas u otras aves
silvestres.

paramixovirus aviares son virus de ARN con helicoidal symentry cap-sid,

envuelto, sentido negativo y no-ed segmento sola hebra del genoma. La
longitud es de aproximadamente 15 kb y es divisible por seis debido a que
el genoma debe ser de longitud polyhexameric de replicarse eficientemente
( "regla de seis ') (Peeters et al., 1999). Codifica por seis protenas que en la
direccin 3 'a 5' se nucleoprotena (NP), phosphopro-TEIN (P) y la protena de
matriz (M) que recubre la superficie interna de la envoltura del virus, la
glicoprotena de superficie HE-magglutinin- neuraminidasa (HN), que
reconoce y se une a las molculas que contienen cido silico en la
superficie de la clula husped, la protena de fusin (F), que es responsable

de la fusin de la envoltura viral con la membrana celular, y el ARN

dependiente de ARN la polimerasa (L, gen grande), que junto con las
protenas NP y P estn unidos a los genoma de ARN para formar la
nucleocpside (Steward et al., 1993). El ARN tiene un peso molecular 5 x
108 que representan alrededor del 5% en peso de la partcula de virus. La
cpside de paramixovirus aviar se assmbled en el citoplasma y envuelto por
la membrana glicoprotena clula modificada debido a la gemacin desde la
superficie celular. Dos virus glico-protenas funcionales se insertan en sobre,
uno poseen hemaggluti-nacin-neuraamindase actividades (HN), y otra es la
fusin

protena (F). Las proyecciones de la superficie de envoltura aproxi

madamente 8-nm representan siempre las molculas con la HN

F molcula formando pequeas proyecciones. protena HN es re-responsable

de la unin del virus a la clula y F pro-protena provoca la fusin entre la
clula y la membrana del virus para permitir que el material gentico para
entrar en la clula para la rplica-cin. La enfermedad de Newcastle se
inform por primera vez a mediados de la dcada de 1920 en Newcastleupon-Tyne, Inglaterra (Snoeck et al., 2013). Unos aos ms tarde ND haba
extendido por todo el mundo y se convirti en endmica en muchos pases.
Una cepa virulenta de NDV surgi entre 1995 y 2000 que afecta

Doble cresta Cormoranes en Canad. Esta cepa es CAU-mortalidad

significativa en cormoranes de menores y supone un riesgo para otras
especies de aves, incluyendo aves de corral. India, ser-ing un pas endmico
de este virus, los brotes se sigue produciendo a pesar de los programas de
vacunacin regulares.

GENOTIPADO y la tipificacin patognica

Sobre la base de la gravedad de la enfermedad en los pollos, y las cepas de

NDV

aislamientos se han agrupado en cuatro patotipos (velogen-IC, mesgenos,

lentgenas y asintomticos), que se relacionan con los signos de la
enfermedad producidos en pollos infectados totalmente susceptibles.

Velognico cepas de NDV son altamente patgena / vir-ulent causando tasas

de mortalidad de hasta el 100%. cepas velognicos se clasifican adems en
que viserotropic velognicos NDV, que produce infecciones letales agudos
en los que las lesiones Hemor-hemorrgica ocupan un lugar destacado en el
intestino y neurotrpico velognicos NDV, que produce una alta mortalidad
precedido por sntomas respiratorios y neurolgicos, lesiones del aparato
digestivo estn ausentes con-spicuously . El NDV mesgena, produeces baja
mortalidad, enfermedad aguda, respiratorio y nervioso signo en los que
algunas aves. El lentgena NDV, que produce infecciones respiratorias leves
y no aparente. El asintomtica introducir ic-NDV, que son los virus virulentos
que parece REPLI-cado principalmente en el intestino. Estos grupos no son
del todo clara y cierta superposicin entre los signos associat-ed con la que
se ha reportado los diferentes grupos.

Un sistema ampliamente aceptado que se utiliza para implementar la

clasificacin de virulencia es el ndice de patogenicidad intracerebral (IPIC)
en pollitos de un da, lo que da una puntuacin numrica en una escala de
0-2, con puntuaciones cercanas al 2 siendo tpico de cepas muy vir-ulent
(Alexander et al, 2008;. OIE). De acuerdo con la Organizacin Mundial de
Sanidad Animal (antigua Oficina

International des Epizooties [OIE]), cepas virulentas de NDV (de declaracin

obligatoria a la comunidad internacional) son aquellos VI-ruses que tienen
un ICPI igual o mayor que 0,7, o una secuencia de aminocidos del sitio de
escisin protena de fusin con al menos 3 arginina o residuos de lisina
entre las posiciones

113 y 116 y un residuo de fenilalanina en la posicin 117 (OIE). Aunque

todas las cepas de NDV pertenecen a un solo tipo sero (serotipo-1), existe
una gran variabilidad gentica entre

NDV asla (Miller et al, 2009a, 2010;.. Afonso et al,

2013). Una aplicacin reciente de esta gentica CLASIFICAC-cin ha dividido

NDV en 2 clases (I y II), con la clase I compone de slo el 1 genotipo (clase I,
el genotipo I) y con clase II divididos en 18 genotipos (clase II, los genotipos
I-

XVIII) (Courtney et al, 2012;.. Snoeck et al, 2013). Mientras que la clase I
abarca las cepas de NDV solamente no virulentas (a excepcin de 1, APMV-1
/ pollo / Ireland48 / 904) se encuentra principalmente en wa-terfowl, clase II
incluye ambas cepas virulentas y no virulentas (Miller et al, 2009a, 2010;.
Afonso et al., 2013).

cepas de NDV virulentas tienen una con-figuracin de aminocidos

polibsico que permite la escisin de la protena de fusin por las proteasas
de tipo furina encontrado de forma ubicua en el organismo, lo que permite
la propagacin viral sistmica. Las secuencias de sitio de escisin de la
protena F (CPF) es un bien caracterizado, ma-jor determinante de NDV
patogenicidad en pollos. Sobre la base del anlisis phylogenitic con
secuencias de nucletidos hiper-variable de parcial del gen F, las cepas de
NDV han sido clasificadas en diez genotipos (I- X) (Alexan-der, 2003).
Genotipo VI y VII se dividen en siete y ocho de genotipo sub
respectivamente. A pesar de la

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un amplio uso de las vacunas, se ha informado de varios brotes de

enfermedad de Newcastle. Las vacunas no es razonable esperar que para
proteger a cientos porcentaje del rebao bajo condiciones comerciales de
aves. La proteccin real obtenido ser determinado por la combinacin de
todos los factores que pueden afectar a la eficacia de la vacuna. Sin
embargo, la eficacia de la vacuna se Nev-er ser mayor que el mximo
obtenible bajo condiciones exper-imental para una vacuna dada. Genotipos
V, VI, y VII son los virus virulentos y genotipos predominantes que circulan
en todo el mundo. De stos, el genotipo VII es particu-larmente importante,
ya que se asocia con muchos o los ms recientes brotes en Asia, frica y

Oriente Medio (Liu et al., 2003). Posteriormente, subgenotipos, VIIa-VIIe

representan los aislados procedentes de China, Malasia, Kazajstn y

Kirguistn (Bogoyavlenskiy et al., 2009 y Wang et al., 2006) y VII f-VII h

representan aislamientos africanos (Snoeck et al., 2009). Ms
recientemente, Miller et al. (2014) identificaron el virus virulento de la
enfermedad de Newcastle (NDV) aislados de los nuevos sub-genotipos
dentro VII genotipo se estn extendiendo rpidamente a travs de Asia y
Oriente Medio, la generacin de brotes de enfermedad de Newcastle que se
caracterizan por la enfermedad y la mortalidad en las aves de corral, lo que
sugiere la existencia de una quinta panzootia. La secuencia completa del
genoma (15.192 nucletidos de longitud) de un NDVstrain (NDV / Pollo /
Nagpur / 01/12) se iso-RELAClONADAS de granjas de pollos vacunados en la
India durante out-breaks en 2012 y est clasificado como el genotipo VII en
la clase II ( Gogoi et al., 2015).

Hay tres factores que pueden aumentar el riesgo de un brote y predecir la

necesidad de realizar estudios sobre los mecanismos evolutivos que afectan
NDV genoma son: (1) slo unos pocos cambios nu-cleotide en el gen de
fusin son suficientes para el cambio

NDV de baja virulencia de alta virulencia, (2) no son depsitos grandes y de

gran movilidad de los virus de baja virulencia en la naturaleza que pueden
entrar en contacto con aves de corral, y (3) miles de millones de dosis de
virus de la vacuna viva baja virulencia estn en inoculados en las aves de
corral al ao, por lo tanto probable que la liberacin de virus de la vacuna
en el medio ambiente.

cepas de la vacuna NDV de genotipo I y II se utilizan para controlar la

enfermedad clnica durante el brote. Adems-aliado, el control de factores
de riesgo que incluyen agentes inmunosupresores, saltos de bioseguridad,
manejo de la insuficiencia de cas-cas y duro ambiente en conjunto se
requieren para Dimin-ish el impacto econmico de los brotes de Dakota del
Norte.

aislados virulentos de brotes en Australia se mostr a ser genticamente

similares a los virus de baja virulencia que se sabe que estar circulando
previamente en el Coun-try (Kattenbelt et al., 2006). Estos virus de baja
virulencia endmicas requieren slo dos mutaciones puntuales para

convertirse en vir-ulent (Westbury, 2001). Adems de las condiciones del

campo, algunos bajos NDV virulento demostrado que tiene la capacidad de
ser-venir virulenta bajo condicin experimental (de Leeuw et al., 2003;.
Shengqing et al., 2002, Zanetti y otros, 2008). por

el propsito de la prevencin de la enfermedad sera ideal para pre-dict el

potencial de cada genotipo de baja virulencia NDV a mutar en una forma
virulenta (Miller et al., 2010). La forma altamente patgena de ND es un
problema grave, ei-Ther como una enfermedad enzotica o como una causa
de, epizootias regulares y frecuentes a lo largo de frica, Asia, Amrica
Central y partes de Amrica del Sur (Copland, 1987; Spradbrow, 1988;
Rweyemamu et otros, 1991;. Aldeas y Spradbrow, 2001).

En Europa epizootias espordicos da a pesar de los programas de vacciniacin (Kaleta y Heffels-Redmann, 1992). En Europa Occidental hubo un
marcado aumento en los brotes notificados durante la dcada de 1990 se
inform. Entre 1995 y 1999 se registraron brotes de la enfermedad de
Newcastle en las todas las reas de Europa Occidental que haban sido
declarados libres de enfermedad de Newcastle. Dos brotes de la virulenta
ocurrieron en Aus-tralia en 1998 y se reportaron nuevos brotes en 1999 y
2000 (Kirkland, 2000; Westbury, 2001). La secuencia del genoma de una
nueva cepa de NDV (pollo / Pak / Calidad

Operaciones de Laboratorio / SFR-611/13) se inform de un grupo de pollos

vaccinat de opinin en Pakistn en 2013 y tiene caractersticas panzootia se
clasifica en las subgenotype VIII del genotipo VII, clase II (Wajid et al., 2015).

BASE MOLECULAR DE LA

Patogenicidad de ND

El enfoque molecular para la identificacin de NDV y pato-typing using PCR

transcriptasa inversa seguida de la secuenciacin y el anlisis de la protena
de fusin sitio de escisin directa de genes se utiliza actualmente para la
investigacin y la vigilancia NDV

(Aldous et al., 2003). partculas NDV se producen con una glicoprotena

precursora, F0, que tiene que ser escindido para F1 y F2 para las partculas
de virus para ser infecciosas mientras repli-catinico (Rott y Klenk, 1988).
Este cleav-edad posterior a la traduccin es mediada por las proteasas de la
clula husped (Nagai et al., 1976a).

La tripsina es capaz de escindir F0 para todas las cepas de NDV y en el

tratamiento in vitro de virus no infeccioso inducir en-infectividad (Nagai et
al., 1976b). Rott (1985) informaron el de escisin de la molcula F0 estaba
directamente relacionado con la virulencia de los virus in vivo. Parecera que
las molculas F0 de virus virulentos para los pollos pueden ser escindidos
por una proteasa host o proteasas que se encuentran en una amplia gama
de clulas y tejidos. Esto permite que estos virus se extiendan por el
anfitrin, daando rganos vitales. En las molculas F0 de contraste en los
virus de baja virulencia parece estar restringida en su sensibilidad a la sede
de proteasas que resulta en la restriccin de estos virus para crecer slo en
ciertos tipos de clulas husped. Collins et al.

(1993) llevaron a cabo estudios iniciales comparando las secuencias de

aminocidos deducidas en el sitio de escisin de la F0 precur-sor de una
serie de cepas virulentas y no virulentas ND. Despus de que gran nmero
de estudios han confirmado la presencia de mltiples aminocidos bsicos
en ese sitio en los virus virulentos.

Por lo general, la secuencia ha sido 113/117 RQK / RR F0 en los virus

virulentos tienen un aminocido bsico en la posicin 112 tambin. Por el
contrario, los virus de baja virulencia suelen tener

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la secuencia 113 / 117K / RQG / ER. La mayor influencia en la

patogenicidad de NDV es depende del motivo de aminocidos en el sitio de
escisin de F0, la presencia de aminocidos bsicos en las posiciones 113,
115 y 116 y la fenilalanina en la

117 en las cepas virulentas significa que la escisin se puede efectuar

mediante la proteasa o proteasas presentes en una amplia gama de
anfitriones TIS-Sues y rganos. Para los virus de baja virulencia, la escisin
puede ocurrir slo con proteasas reconocer un solo arginina, enzimas es
decir, similar a la tripsina. Por tanto, estos virus estn restringidos en la
variedad de sitios en los que son capaces de replicarse en ar-EAS con
enzimas de tipo tripsina, tales como las vas respiratorias e intestinales,
mientras que los virus virulentos pueden replicarse en una variedad de
tejidos y rganos que resulta en un fatal infeccin sistmica (Rott, 1979).

PAPEL DE ND vacunas en la

EVOLUCIN DE virulentas de NDV

Mayormente reservorio del virus virulento de la enfermedad de Newcastle

(VNDV) es la poblacin de aves de corral vacunadas hay ev-idence que las

aves silvestres pueden representar reservorios naturales de los virus
mesgenos (Aldous et al, 2007;.. Czegldi et al, 2006). aves acuticas
salvajes y aves costeras estn infectadas con un grupo grande y diverso de
virus virulentos que normalmente no producen ningn sntoma clnico de las
aves de corral. Filogenticamente relacionada vNDV del genotipo V han sido
aislados de Dou-ble-cresta cormoranes (Phalacrocorax auritus) desde 1975
hasta 2008 y que han sido implicados en anteriores brotes ND (Allison et al,
2005;. Blaxland, 1951;. Heckert et al, 1996). paloma virulenta
paramixovirus-1 (paramixovirus-1) de los aislamientos, que son clnicamente
neurotrpico en pollos, eran

aislado por primera vez en 1981 en palomas (Columba livia), y concontinuar circulando entre las aves salvajes de la familia Columbidae en
todo el mundo (Kaleta et al, 1985;.. Kim et al, 2008;. Mase et al, 2009).

El vNDV aislado de cormoranes y palomas son considerados mesgena

porque sus valores ICPI en chick-ens varan de> 0,7 a <1,5 y no suelen
causar enfermedad significativa en aves de corral. Sin embargo,
recientemente los EE.UU. designados todos NDV con los valores ICPI> 0,7 o
que contienen una secuencia de aminocidos consistente con cepas
virulentas de NDV virulento y los clasificados como agentes seleccionados,
para seguir la Organizacin Mundial de Sanidad Animal (OIE) y las normas
de la Unin Europea (OIE). Weingartl et al. (2003) reportaron que el
cormorn y la paloma virus-es seguir evolucionando y visualizacin de ao a
ao los cambios genmicos y no hay cambios significativos en la virulencia
se han observado en muestras de aves silvestres. La casi exclusiva predominacin de clase baja virulencia I y virus mesgenos de clase II, los
genotipos V o VI en cormoranes y palomas, en contraste con la prevalencia
de viscerotrpico vNDV (clase

II, los genotipos V-X) en aves de corral vacunadas (Czegldi et al.,

2006), que sugiere que la vacunacin induce la presin inmunolgica para la

seleccin de las formas variantes de vNDV.

distancias antignica y filogenticas entre cepas de la vacuna y que circulan

cepas virulentas actuales pueden jugar un papel importante en la evolucin
de NDV virulenta (Miller et al., 2007). Muchos estudios han informado de
que las vacunas actuales prevenir la enfermedad, pero no pueden detener
la diseminacin viral

(Kapczynski y King, 2005;. Miller y otros, 2009a; Absoluta-back y Schwartz,

1973). Adems, hay informes de utilizacin de las vacunas genotipo de
concordancia que puede signifi-cativamente reducir la diseminacin viral.
Dos vacunas antignicamente emparejados han demostrado una mayor
capacidad para prevenir la diseminacin viral del virus de genotipo VII y V,
respec tivamente-(Hu et al, 2009;. Miller et al, 2009b.). La existencia de
variantes aislado de campo-que escapan a la vacunacin tambin se ha
informado (Cho et al., 2008).

Se ha observado que las vacunas actuales no ND pro proteger contra la

morbilidad y la mortalidad causadas por las nuevas Vari-hormigas del
genotipo VII, es un contraversial. Liu et al. (2003) reportaron que los pollos
vacunados ya sea con un vivo o muerto una emulsin de aceite-La Sota
vacuna (genotipo II), fueron completamente protegidos contra las cepas
heterlogas reto de genotipos VIg, VIB, VIId y IX. Hallazgos similares se
observaron mediante el uso de dos cepas de vacunas comerciales de pollos
libres de patgenos SPE-espe- (SPF) contra dos virus virulento de genotipo
VII (Jeon et al., 2008). De-A pesar de la controversia, existe suficiente
evidencia para sugerir que las variantes de NDV pueden evolucionaron en
aves de corral, como resultado de la vacunacin subptima.
Independientemente del genotipo differenc-es en todo el mundo entre las
cepas circulantes de NDV, todos los aislamientos del NDV pertenecen al
mismo serotipo. Si la vacunacin GIV-in correctamente, vacunas contra esta
enfermedad preparados con cualquier NDV debe proteger a las aves de
corral de la enfermedad clnica y la mortalidad en el caso de un desafo
virulento (OIE).

retos diagnsticos

El diagnstico de la enfermedad de Newcastle se realiza generalmente

mediante el aislamiento del NDV en SPF embriones de pollo (ECE), la
confirmacin por parte de la transcriptasa inversa reaccin en cadena de la
polimerasa (RT-PCR) o por tiempo real de RT-PCR (RT-PCR) y por serologa
usando la hemaglutinacin-inhibi-cin (HI). Todos los aislados de NDV son
conocidos para replicarse en ECE y el MDT para matar el embrin vara
dependiendo de la virulencia del virus. La prueba de HI se utiliza para
identificar un virus como NDV. Un panel de pruebas de anticuerpos
monoclonales (mAb) se puede utilizar para caracterizar NDV. La mayor parte
del mAb fueron desarrollados y optimizados para reconocer virus de clase II
y no reconocer los virus de clase I (Collins et al, 1998;. Kim et al, 2007b.).
Enzimoinmunoensayo (ELI-SA) tambin se utilizan para evaluar la respuesta
de anticuerpos despus de la vacunacin, pero tienen un valor en la
vigilancia y di-agnosis limitado debido a la utilizacin de las vacunas en
aves domsticas.

Tras la identificacin, se requiere la tipificacin patognica de aislamientos

para determinar las caractersticas de virulencia. Los mtodos utilizados
para

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patotipo cepas recin aisladas del virus incluyen los mtodos de cebado al
azar
ndice de patogenicidad intracerebral (IPIC) de prueba, MDT y la alta
capacidad de mutacin en los virus de ARN (genetdeterminar el motivo de aminocidos en el sitio de escisin de la deriva ic) y
la gran diversidad de genotipos de NDV a menudo
la protena de fusin. Como las pruebas son patotipificacin tiempo de
consumacin hace que sea difcil predecir la composicin gentica de nuevo
ING y costosas pruebas serolgicas son aislados y complicados. la
secuenciacin del genoma Random representa un unbipor el uso universal de vacunas de virus vivos en las aves de corral, la
rpida alternativa ASED y completa que ha sido ampliamente utilizada para
ensayos basados en cido nucleico se han desarrollado. RT-PCR,
caracterizan a los genomas de los virus de ADN de gran tamao (Afonso
ensayo de gen de la matriz y mltiple de un solo tubo, sensible, rpida- et
al., 2006), pero slo recientemente ha sido utilizado con NDV
Identificacin en tiempo real reaccin en cadena de la polimerasa de
transcripcin inversa (Djikeng et al., 2008). Un protocolo que sigue dos
bsico
cin ensayos (RRT-PCR) se han desarrollado en los ltimos principios: (i) la
amplificacin al azar de ARN total, y (ii)
dcada en todo el mundo para detectar los virus que circulan seleccin
aleatoria de colonias seguido de secuenciacin y
en esos lugares (Antal et al, 2007;.. Fuller et al, 2009;. montaje se ha
desarrollado este protocolo, una modificacin

Pham et al., 2005; Tan et al., 2004; Wise et al., 2004). Mento de la
amplificacin de un solo cebador de secuencia independiente,
pendiente en condiciones de ensayo, estas pruebas RRT-PCR pueden
mtodo SISPA, desarrollado por primera vez por Reyes y Kim (1991),
ser igual o ms sensibles que el aislamiento del virus y son y recientemente
adaptado para NDV implica la ligadura direccional
siempre ms rpido que el aislamiento del virus y se han adoptado como la
de un cebador asimtrico en cualquier extremo de un extremo romo
el mtodo estndar para la vigilancia en la molcula de ADN EE.UU.. El
mtodo descrito es de gran utilidad en
PCR en tiempo real PARA LOS generan conjuntos de todo el genoma de los
virus con poco
o ninguna informacin de la secuencia disponible, en gran medida que los
virus
DETECCIN DE familias divergentes NDV, virus previamente no, o para
describir ms completamente las infecciones virales mixtos (Djikeng et al.,
Los cebadores y sondas para el ensayo M-gen se disearon 2008).
para detectar el gen de la matriz altamente conservada (M) de NDV
CONCLUSIN
y, como tal, detecta la mayora de los genotipos de NDV de clase II, reindependientemente del tipo patgeno. Sin embargo, debido a los nuevos
genotipos heterogneos de NDV segn se ha informado que circula
naturaleza gentica de este virus, los virus de clase I, probados a menudo
fallan
en todo el mundo. Hasta la fecha, 18 de clase II genotipos de NDV tienen
para ser detectado (Kim et al., 2007a). Evaluacin de la nuha descrito. Debido al aumento de la diversidad genmica de
alineacin de secuencias cleotide de la sonda de ensayo de M-gen
NDV plantea varios problemas para la prevencin y el control de
El sitio de clase I y II virus revel un alto nmero de
ND. Los genotipos implicados en los brotes ms recientes
desajustes entre las dos clases, y esto es probablemente la

en todo el mundo son los genotipos V (Amrica Central y del Sur),

razn por la que la clase que los virus detectados por este ensayo.
VI (Europa) y VII (China, frica del Sur y la India). ReKim et al. (2008) desarrollaron una nueva matriz independientemente de la
polimerasa de diferencias genotpicas entre cuito en todo el mundo
culating cepas de NDV, todas las cepas del virus ND pertenecen
multiplex RRT-PCR para la deteccin de una amplia gama de
a un serogrupo, la vacunacin de modo adecuado protege las aves de corral
clase I y II NDV aislamientos. Una regin conservada de la
de la enfermedad clnica de la enfermedad de Newcastle. Si la vacunacin
dado corSe identific la polimerasa (L) de genes de clase I NDV genoma
tamente, se debe proteger a las aves de corral de la enfermedad clnica y
y usada en el diseo y evaluacin de un multiplex RRTla mortalidad en el caso de un reto virulento. En general,
PCR de ensayo (L-TET) que identifica una amplia gama de NDV.
fracaso de la vacuna se produce debido a factores del estado inmune
Aunque el hecho de que los cidos nucleicos virales no eran detectable del
anfitrin, el incorrecto almacenamiento de la vacuna (vacuna viva
DE en todas las muestras que fueron positivas en el aislamiento del virus,
son termolbiles, pobres cadena de fro reduce titter de la vacuna),
se sugiere que la PCR en tiempo real no puede reemplazar el aislamiento
del virus de la vacunacin inadecuada y cepa del virus patgeno. A pesar
por completo de base de una muestra individual.
de tomar todas las medidas, en algn momento falla de la vacuna tiene
La capacidad de detectar virus virulentos rpidamente es clave para conocurrido. Para este tipo de brotes son el motivo an desconocido.
La bioseguridad de las instalaciones avcolas comerciales es una
importancia
que contiene un brote. La sonda del gen F creado especficamente tante
paso en la prevencin de la transmisin de la enfermedad de Newcastle y
evitar

para detectar virulentas de NDV a partir de frotis de campo durante las

fuertes prdidas econmicas exteriores. Genotipo o subgenotype especfica
ruptura de 2002, en los EE.UU., se utiliza ampliamente, ya que era de NDV
las cepas predominantes en esa regin estn incluidos en el
campo validado. Es imperativo que los laboratorios de diagnstico Esquema
de vacunacin. Una vigilancia epidemiolgica rigurosa
Uso de la USDA validado o se requiere otra lanza a base de protenas de
fusin para decidir el impacto real de la enfermedad
Los ensayos de PCR continan vigilando los cambios genmicos y de la
poblacin de aves de corral.
re-diseo de cebadores y sondas alternativos para evitar el conflicto Fail DE
INTERS
ure de deteccin de VMDP-1. Alternativamente, el uso de virus
el aislamiento en huevos en conjunto con los ensayos de PCR voluntad hay
ningn conflicto de intereses.
identificar estas cepas con la mortalidad embrionaria.