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UNIVERSIDAD DE BUENOS AIRES

FACULTAD DE MEDICINA

DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGA, PARASITOLOGA

E INMUNOLOGA - CTEDRA I

SEMINARIO N 8

Mecanismos de invasin, establecimiento y patogenia de

infecciones causadas por los Apicomplexa:
Toxoplasma gondii y Plasmodium spp.

OBJETIVOS

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ReconocerlascaractersticasbiolgicasdelosApicomplexa.

Estudiarsuprocesodeinvasinyestablecimientoenlaclulahusped.

Conocerelciclodevida,laepidemiologaeimportanciaclnica delos
Apicomplexa:Toxoplasmagondii yPlasmodiumspp.
Estudiaralgunosmecanismosdepatogenia deestosprotozoarios.

CONTENIDOS

1.UbicacintaxnomicadelosApicomplexa.
2.Caractersticasmorfolgicasydemultiplicacin.
3.Mecanismosdeinvasinyestablecimientoenlaclulahusped.
4.GeneralidadesyciclodevidadeToxoplasmagondiiyPlasmodiumspp.
5.Mecanismosdeinfeccin,respuestainmuneysurelacinconlapatogenia
deambasparasitosis.

Reino: PROTISTA

UBICACION TAXONOMICA

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Subreino: PROTOZOA
Phylum: APICOMPLEXA

Subclase: COCCIDIA

Suborden: EIMERIINA

Gnero: Toxoplasma

Especie: T. gondii

Suborden: HAEMOSPORINA

Gnero: Plasmodium

Especie: P.vivax
P.ovale
P.falciparum
P.malariae

APICOMPLEXA:Generalidades

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Complejo apical

Taquizoito de
Toxoplasma gondii

Conoide
Anillo apical polar

Merozoito de
Plasmodium falciparum

Micronemas
Roptrias
Grnulos densos

Todos los miembros

del phylum son
parsitos
Diferentes estados
infectantes

Microtbulos
subpeliculares
Complejo interno de
membrana

nicamente se
replican
intracelularmente

Mitocondria

Apicoplasto
Nucleo
Rticulo
endoplsmico

Membraba plasmtica

Dentro de la clulas
husped se desarrolla y
multiplica dentro de una
vacuola parasitfora.

Polo posterior

Nature Review-Microbiology 2006

APICOMPLEXA TISULARES

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PARASITOS HETEROXENOS CON CICLOS DE VIDA

COMPLEJOS QUE INVOLUCRAN MAS DE UN HOSPEDADOR
Sexual

Gametas

Gamogonia

Esporogonia

Gametogonia

Merozoitos

Zigoto

Esporozoitos

Merogonia

Multiplicacin Asexual en los APICOMPLEXA

ESQUIZOGONIA

ENDODIOGENIA

(en merogonia y en esporogonia de Plasmodium sp.)

Formacin de dos clulas hijas dentro de la

clula madre

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Fisin mltiple de ncleos seguida de citocinesis

dando como resultado mltiples clulas hijas

(slo en T. gondii en ciclo tisular en H.D. y H.I.)

merozoitos

Nucleo

esquizonte

Mitosis mltiples

ME

citocinesis

Merogonia de Plasmodium spp durante de la fase

eritroctica.

Meronte (Esquizonte)
de Plasmodium
falciparum

Fisin binaria longitudinal

GIEMSA

Striepen y col, 2008.

En verde complejo interno

de membrana
En rojo ADN nuclear

TRAP/ MIC2:
familia de protenas conservada en los
Apicomplexa

Sebastion Hkansson

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Es un proceso activo
de penetracin del
parsito

Apicomplexa e invasin celular I

no fagocitosis

Movilidad por deslizamiento

(gliding) sobre substrato

Conecta el motor de actina/miosina del

parsito con la superficie de la clula
husped mediante un ligando an no
determinado

Depende exclusivamante de la movilizacin de

actina /miosina parasitaria.

Schmitz y col. 2008

Complejo interno de membrana

Polo
apical

Direccin de motilidad

Sibley y col, 2004

Actina/
miosina

Parsito

Membrana
plasmtica
Clula husped

El parsito avanza por la polimerizacin y despolimerizacin

unidireccional de la actina y el impulso de los motores de miosina
(velociodad crucero: 1 a 10 micrones/sec)

Membrana
parasitaria

TRAP

superficie
cel.
husped

Sibley y col, 2004

Apicomplexa e invasin
celular II

Membrana Externa
Roptrias

Micronemas

Complejo de
membrana interno

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Proceso que se inicia con el

reconocimiento de la clula a invadir

Plasmodium sp.

TIPO CELULAR

Mecanismo de
reconocimiento

Adhesin
Reorientacin
Toxoplasma gondii

Invasin

Hepatocitos (Esporozoitos)

Enterocitos (Esporozoitos)

Glbulos rojos (Merozoitos )

Todas las clulas nucleadas (Taquizoitos)

Uniones receptor -ligando especficas

Unin de adhesinas a protenas ubicuas (p.ej.

SAG1 y SAG3)

Protenas de superficie
CSP proteoglicanos del hepatocito
MSP-1 banda 3 del eritrocito

Protenas secretadas localmente

a travs del polo apical
EBA 175 (P. falciparum) glicoforina A
DBP (P. vivax) protena Duffy
RBP (de unin al reticulocito en P. vivax) y
sus homlogos PfRh en P. falciparum

Insercin de protenas del parsito en la

membrana de clula husped?
(p.ej. RON 2, 4 y 5)

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Interviene la secrecin secuencial de protenas de

tres organelas del complejo apical:

Apicomplexa: invasin y establecimiento

en la vacuola parasitfora

Cintica de la Secrecin en Toxoplasma

Micronemas

1.Micronemas
adhesin y
motilidad

2. Roptrias

formacin de la
vacuola parasitfora
no-fusognica y de
. la unin mvil
Exclusin selectiva
de protenas de
membrana del
hospedero

Roptrias

Grnulos densos

3.Grnulos densos

modificacin de la vacuola parasitofora y

entorno de la clula husped

trofozoito

clula husped

Red tubular y
poros en la
vacuola
parasitfora
que permiten
el paso de
nutrientes
Reclutamiento
de RE y
mitocondras
de la clula
husped
alrededor de la
vacuola

Dos trofozoitos de T.gondi dentro de la vacuola parasitfora. C:Conoide;

HC clula husped; M:mitocondria; N:Ncleo; R:roptrias

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TOXOPLASMOSIS

Zoonosis parasitaria
de distribucin mundial

Hospedero definitivo : felino.

Alta especificidad

Hospedero intermediario: Aves y mamferos.

Baja especificidad

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Ciclo de vida de Toxoplasma gondii

Quistes tisulares

Fecalismo

Los gatos eliminan ooquistes nicamente durante su primoinfeccin

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Elementos infectantes

Contaminacin de alimentos y agua por

ooquistes presentes en deyecciones del gato.

Elementos infectantes

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Ingesta de carne cruda o mal cocida.

Ms relevante

Trasplantes de rganos

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Elementos infectantes

Transmisin congnita: cuando la primoinfeccin

de la madre ocurre durante la gestacin.

Transmisin humana de la Toxoplasmosis

Tejidos conteniendo bradizoitos
en las presas

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ooquistes

Ooquistes

Ooquistes ingeridos por

animales

Ooquistes
fecales

contaminan la
litera del gato.

Suelo, agua y pastos

contaminandos
con
ooquistes

> I 2 das de
maduracin

Ooquistes
sobre
vegetales
y frutas
no
lavados

Ooquistes
ingeridos
por animales

ooquistes

ooquistes

Taquizoitos
transmitidos
transplacentariamente al
feto

Tejidos conteniendo
bradizoitos en carne
poco cocida o cruda

Organos conteniendo
bradizoitos o sangre
con taquizoitos (muy
poco relevante!!!)

El parsito atraviesa diferentes barreras biolgicas

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Atraviesa transversalmente epitelios y/o co-opta monocitos

Barrera hemato-enceflica

Placenta

Barrera sangre- retina

Mucosa intestinal

IMPORTANCIA CLNICA DE LA TOXOPLASMOSIS

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Se estima que el 25% de la poblacin general esta infectada por T.

gondii. Sin embargo, en una persona sana, slo provoca sntomas leves.
Enfermedad congnita:
Primoinfeccin de la madre durante la gestacin
Puede causar retardo mental, ceguera, parlisis cerebral
muerte intrauterina y aborto espontneo
Individuos inmunocomprometidos (SNC)
Reactivacin de infeccin latente (>95% casos)
Primoinfeccin
Toxoplasmosis ocular

Tanto inmunocompetentes como

inmunocomprometidos

Mecanismos de control del husped

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Respuesta inmune innata.

Astrocitos

IDO

iNOS

NO

Kinurenina

Deprivacin de triptfano

IFN-

NK

Epitelio alveolar

IDO

Kinurenina

IDO: Indolamina 2,3-dioxigenasa

W: Triptfano
R: Arginina
NO: xido ntrico

Esquematizado a partir de Fujigaki y col., 2003 y Heseler y col., 2008

Mecanismos de control del husped

Respuesta inmune adapatativa

Respuesta inmune humoral:

Anticuerpos opsonizantes: Lisis medida
por complemento solo Ac contra antgenos

Lisis de clulas infectadas

Inducir la formacin de quistes tisulares.

estado especficos (presentes en Taquizoitos no

en bradizoitos)

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Respuesta inmune celular

principal brazo efector:

Toxo aguda: IgA, IgE, IgM, IgG.

Toxo crnica: La IgG se detecta an en
cronicidad liberacin ocasional de
taquizoitos?

Deprivacin de
triptofano

Macrfago

citotoxicidad

Luder y col, 2006

Evasin Respuesta Inmune innata

Reclusin intracelular:

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La invasin celular ocurre en menos

de 30 segundos, lo que disminuye
drsticamente el tiempo de
exposicin con los Ac y el sistema de
complemento.

Formacin de una vacuola que no se fusiona completamente

con la clula husped:
Le permite resistir la fusin fago-lisosomal tpica. No hay acidificacin

Modificacin de la membrana de la vacuola.

Inserta protenas derivadas del parsito, para ganar nutrientes y manipular la fisiologa de
la clula husped

Inhibe la produccin de NO por MQ.

Inhibiendo la trascripcin de iNOS.

Evasin Respuesta Inmune celular I

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Estimula la produccin de citoquinas antiinflamatorias como IL-10,

TGF- e IFN-/.
Inhibe la produccin de citoquinas inflamatorias como TNF- e
IFN- .

Inhibicin mediada por HSP70 de la

translocacin de NF-B .

Inhibicin de la expresin de
MHCII va JakSTAT en MQ.

Disminuye la produccin de IL-12 por

clulas dendrticas

Estimula la apoptosis de LT CD4+ e Inhibe la apoptosis de cl. infectadas

por el parsito.
Regulacin positiva de molculas antiapoptticas, interferencia en la activacin de caspasas

T. gondii: de la invasin a la formacin de quistes tisulares

y viceversa

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PRIMOINFECCION

Taquizoito

multiplicacin rpida +/- 2 semanas

Respuesta inmune

Bradizoito

quistes tisulares
(multiplicacin lenta; persisten por aos)

Cambios en el pH
Protenas de choque trmico
Inhibicin de actividad mitocondrial
Presencia de xido ntrico
Inmunidad celular (IFN-gamma)

xido ntrico
IFN-
TNF-alfa
IL-12
Linfocitos T

REACTIVACIN

Disminucin de la respuesta inmune

La interconversin taqui bradizoito es central en la patognesis de la enfermedad

No comer carne cruda o mal cocida.

Medidas Preventivas

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Lavarse las manos luego de manipular carne cruda.

Lavar con abundante agua las frutas y verduras antes de consumirlas crudas.
Lavar los utensilios y superficies que han estado en contacto con carne cruda o
vegetales sin lavar.
Utilizar guantes y lvarse bien las manos luego de realizar trabajos de jardinera.
Evitar contacto con sustancias que pueden estar contaminadas con heces de gato
( tierra, arena, etc).
No alimentar a su gato con carne cruda.

Monitorear serolgicamente a las embarazadas

Tratar embarazadas con infeccin aguda

Hacer serologa en donantes y receptores de rganos

MALARIA

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Incidenciaglobal:247
millones de personas.
Afecta especialmente
personas que viven en los
pases ms pobres.
3.3 billones de personas en
riesgo.
881.000 mueren a causa
de esta enfermedad.
85% de las muertes son en
nios menores de 5 aos.
Fuente: Roll Back Malaria 2011

Hembra de Anopheles sp

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Distribucin Mundial de la Malaria

Pases o reas donde existe transmisin de malaria

Pases o reas de riesgo con riesgo limitado de transmisin de malaria,

Pases o reas de riesgo de transmisin de Malaria, 2009

http://gamapserver.who.int/mapLibrary/Files/Maps/Global_Malaria_ITHRiskMap.JPG

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Distribucin de la Malaria en Argentina

Plasmodium vivax

Alto riesgo de transmisin

Se recomienda el uso de antimalricos

Pases limtrofes con transmisin

de malaria
Bajo riesgo de transmisin

Vas de Transmisin:
- Vectorial
- Transfusional
- Con-natal

CICLO BIOLGICO DE PLASMODIUM SPP

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merozoitos

esporozoitos

Paroxismo malrico
y fase eritroctica
Malaria terciana maligna
fiebre alta e irregular (P. falciparum)

Malaria terciana benigna

48h entre picos febriles (P. vivax y P. ovale)

Malaria cuartana
72h entre picos febriles (P. malariae)

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Modificado de Neva y Brown, 1994.

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Paroxismo malrico

Adaptada de Karunaweera y col., 2003

Patogenia de Malaria- Anemia

Destruccin intravascular de eritrocitos

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1.
2.

Aumento de la eritrofagocitosis esplnica

3.

Desvo de hierro y toxicidad de la hemozoina

4.

Anemia hemoltica inmune

5.

Diseritropoyesis

6.

Modificacin de la citoadherencia del eritrocito

slo por Plasmodium falciparum

Pigmento malrico

Fagocitosis de
GR parasitados
Fagocitosis de
GR noparasitados

Hemlisis inmune

Formacin de
vesculas

Anemia Inmune /
Diseritropoyesis

Fagocitosis de
parsitos libres

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Complemento
HEMLISIS

Promovida por:

Deseritropoyesis

Expresin de Ag parasitarios
en la membrana celular de
eritrocitos infectados
Fagocitosis

EPO

Citoquinas pro-inflamatorias

Eritrofagocitosis

Lisis mediada por

Complemento

CLAVE

GR Parasitados

GR no parasitados

Precursor eritroide

Linfocito T activado

Macrfago

IgG

Eritrocito hemolizado

Antgeno parasitario

Trofozoto de P. falciparum

Mdula sea

Modulacin de la
eritropoyetina

falciparum

clumps

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Formacin de knobs por P.

Modificacin de la citoadherencia del eritrocito y su

relacin con la patogenia

citoadherencia

Rosetas

Extrado de Moreno y col., 2008

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Citoadherencia y patogenia de P. falciparum

Protenas parasitarias asociadas a la formacin de Knobs

Glbulo rojo sin
knobs

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Glbulo rojo con

knobs

Protenas
parasitarias

Protenas del
Banda 3
eritrocito
Glicoforina
Banda 3

Glicoforina

Protenas del
citoesqueleto

PfEMP1 (P. falciparum erytrocite membrane protein)

KAHRP (knob associated histidine rich protein)

Adaptada de Wiser y col., 2005

Estructura y caractersticas de PfEMP-1

- PfEMP-1 es miembro de la Familia de genes var (altamente variable, 40-50

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genes)

Evasin del sistema inmune

Citoadherencia diferencial

Regin interdominio rica

en cistena (CIDR)
Unin a CD36

Dominio Duffy
binding-like (DBL)

Dominio
transmembrana

DBL

Dominio formacin
de rosetas

Dominio
Extracelular
(variable)

Dominio intracelular
de unin a
citoesqueleto y
KAHRP (conservado)

Adaptada de Wiser y col., 2005

E-selectina
Trombospondina
ICAM-1

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Condritn sulfato A
cido hialurnico

Receptores de PfEMP-1 en el husped

Cerebro

Malaria
Placentaria

Malaria
Cerebral

Microvasculatura

Adhesin
microvascular

Malaria grave por P. falciparum

FALLA DE MLTIPLES
RGANOS

Inmunopatogenia por Plasmodium falciparum

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Malaria cerebral

vasodilatacin

sinapsis

Endotelio (cerebro)

Isquemia
Efectos metablicos

Malaria
cerebral

BEC: clulas endoteliales de cerebro

NO: xido ntrico

Adaptada de Wiser y col., 2005

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Inmunopatogenia de Plasmodium spp.

Glomerulopatas

P. falciparum

- Hemlisis
- Hipoperfusin (citoadherencia)
- Complejos inmunes

P. malariae

- Complejos inmunes

(Dao en la estructura
del glomrulo)

Evasin de la Respuesta Inmune I

Reclusin intracelular

2.

Respuesta Inmune policlonal no protectiva

3.

Variacin antignica

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1.

Variantes antignicas de PfEMP1

Diferentes olas de parasitemia

PfEMP1 (P. falciparum erythrocyte membrane protein) es miembro de la

familia de genes var, exhiben un gran grado de variabilidad y tienen
expresin regulada

MALARIA - PROFILAXIS

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Atacar el parsito en el hospedero humano

-Tratamiento parasiticida del hospedero efectivo (resistencia)
-Quimioprofilaxis del viajero
Reducir el contacto con el vector
-Usar repelentes, ropa adecuada y mosquiteros embebidos en
repelentes
-Fumigacin de la vivienda e implementacin de mosquiteros en
las ventanas
Reducir la poblacin del insecto vector
- Identificacin y eliminacin de los sitios de cra
- Adecuada aplicacin de insecticidas para el control de estados
larvales y adultos
- Control biolgico

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