UNIVERSIDAD NACIONAL ABIERTA Y A DISTANCIA-UNAD

Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente- ECAPMA

Programa: Agronoma
PREINFORME: Laboratorio Bioqumica Metablica-LBM
Nombre y Apellido: Mnica Johanna Olaya Rodrguez ; Cdigo: 94062500039 ; Fecha: Mayo- 05- 2013.

TTULO DE LA PRCTICA:
ACTIVIDAD URESICA EN MUESTRAS DE ORIGEN
BIOLGICO
INTRODUCCIN

1.3.2 En Laboratorio

Producir la hidrlisis de la urea por medio de la enzima

amidohidrolosa denominada ureasa. Con el fin de
cuantificar la actividad uresica (AU) en muestras de origen
biolgico tales como la harina, el forraje y suelo, mediante la
tcnica volumtrica de Berthelot en la cual llegamos a el
ltimo punto dado por la titulacin con HCL de las muestras
que obtuvimos de resultado en el mtodo anterior.

3. TABLA DE DATOS
Tubos
Tipo de muestra
B
H2O
St
Estndar
1
EHAU
2
ESAU
3
EFAU

1. MATERIALES Y MTODOS
1.1. Materiales y equipos requeridos
Material / Equipo
Tubos de ensayo

Buretra

Tubos de centrifuga

Soporte universal

Gradilla

Papel filtrado

Pinzas para buretra

Embudo

Elenmeyer

Agitador

Pipetas

Harina

Bao termostato

Forraje

Beaker

Suelo

mL gastados de HCL 0.1 N

2.4
1.6
1.5

3. RESULTADOS ESPERADOS:
La ureasa, se encuentra en varios tejidos vegetales, lo cual implica
que pueda ser usada en anlisis de alimentos para determina
urea, ya sea por elmtodo de Kjeldhal o por titulacin del amonio
liberado. De esta forma, al titular el hidrxido de amonio producido
por la hidrlisis.
GLOSARIO:
Hidrolisis: Descomposicin de sustancias orgnicas e inorgnicas
complejas en otras ms sencillas por accin de agua.

Ureasa: Es
1.2 Reactivos a utilizar
Reactivo
Frmula
Concentracin
(NH2)2CO + H2O CO2 + 2NH3
Ureasa
0.5 %
Bufer de
fosfato
Cloruro
HgCl2
1%
de
mercurio
Acido
HCl 0.1N
1%
Clorhidric
o
Indicador C15H14N3O2Na+C16H18N3SC13H2O+C2H6O
de tachiro
Cloruro de
N NaCl
1%
sodio
1.3 Procedimiento
1.3.1. En campo:
Suelo extrado de Mesitas de del Colegio Kilometro 26
Forraje llamado cayena Hibiscus rosa-sinensis

una enzima que cataliza la hidrlisis de urea a dixido de

carbono y amonaco.
Hidrxido de amonio: dicho trmino da una fiel descripcin de
cmo se comporta una solucin de amonaco, siendo incluso este
trmino usado por cientficos e ingenieros.
BIBLIOGRAFIA

Granados, J.,(2010),Mdulo Bioqumica Metablica, Unidad 2, cap

2; ECAPMA; UNAD
Granados, J.,(2010),Protocolo prcticas de laboratorio, Pg 3-8;
ECAPMA; UNAD
Granados., J; Garca,J.,(2000),Fisicoqumica Aplicada; Cap 11, Ed
Antropos, Bogot, Colombia

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Programa: Agronoma
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Harina extrada de comida (concentrado)para gatos wiskas

TTULO DE LA PRCTICA:

CAPACIDAD AMORTIGUADORA Y POTENCIAL

AMORTIGUADOR DE MUESTRAS BIOLGICAS
INTRODUCCIN
La capacidad amortiguadora es la capacidad de un sistema
biolgico para resistir cambios de PH, cuando el pasa a la
sangre se transforma en bicarbonato o BUFFER controlando
el PH. Los procesos biolgicos dependen del PH un
pequeo cambio lleva a un gran cambio de velocidad de un
proceso. Las clulas y organismos tienen un PH constante o
estado
inico ptimo que por lo general se encuentra en
7.0. La constancia en el pH se logra gracias a los
amortiguadores biolgicos que son mezclas de cidos
dbiles y sus bases conjugadas.

DATOS VOLUMETRICOS PARA CAPACIDAD

AMORTIGUADORA
Muestras
Vm (ml)
V NaOH 0,1 N
Buffer
20
2.5
H2O Destilada
20
1
Sangre
250/5
9.8
Datos potenciometro
VALORES EVALUADOS

2. MATERIALES Y MTODOS
2.1. Materiales y equipos requeridos
Material / Equipo
Tubos de ensayo

Potencimetro

Tubos de centrifuga

Soporte universal

Gradilla

Orina

Buretra

Sangre

Elenmeyer

Agitador

Pipetas graduadas

Harina

Esptula

Forraje

Beaker

Suelo

1.2 Reactivos a utilizar

Reactivo
Frmula
NAOH
Hidrxido
de sodio
fenolftaleni C20H14O4C15H15N3O2
a
H2O
Cloruro de
HgCl2
mercurio
Acido
HCl 0.1N
Clorhidrico
Rojo de
metileno
Cloruro de
N NaCl
sodio

1.3 Procedimiento
1.3.1. En campo:
Se muestrearn 250 g suelo, 200g de forraje y 100g de
concentrado, de acuerdo a los protocolos establecidos para ta
efecto; las muestras se empacarn en bolsas negras, las cuales se
rotularn con los datos de origen.
1.3.2 En Laboratorio

Concentracin
0.1 N

1%
1%

1%

MUESTRA

WG(g)

Vm (Ml)

pH1

pH2

HARINA

4.9345

20

4.33

3.81

SUELO

4.2951

18

6.26

3.67

FORRAJE

5.1296

19.2

5.7

1.88

ORINA

40

5.47

2.97

RESULTADOS ESPERADOS:
Se determina la capacidad amortiguadora mediante dos mtodo
Volumtrico y Potencio mtrico con muestras biolgicas. A
reaccionar con los reactivos NaOH 0,1N (ml) se observa que la
sangre necesito mayor cantidad de NaOH 0,1N para ver la
capacidad amortiguadora de esta muestra, lo contrario ocurre con
el agua destilada y buffer fosfato
En el procedimiento potencio mtrico ocurre
La incorporacin del cido fuerte en suelos, harina, forraje y agua
destilada acidifica las muestras siendo el forraje la muestra que
obtuvo mayor acidificacin. Por otro lado la orina con el reactivo
cambia de cido a bsico por por la sal fuerte proveniente de un
acido debil.

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GLOSARIO:
ATP: La adenosina trifostato (ATP) es una molcula que
consta de una purina (adenina), un azcar (ribosa), y
tres grupos fosfato.
CAPACIDAD AMORTIGUADORA: La capacidad
amortiguadora de una solucin buffer se define en la
cantidad de nmero de moles de un cido o base fuerte
que se requiere para modificar el PH.
SOLUCION BUFFER: Solucin que contiene acido dbil
es una solucin cuyo PH tiende hacia valores bajos
cidos, mientras que una solucin que tiene disuelta una
sal fuerte, proveniente de este mismo acido dbil, es
una solucin que tiende hacia valores altos o bsicos.

4. MATERIALES Y MTODOS
4.1. Materiales y equipos requeridos
Material / Equipo
Tubos de ensayo

Potencimetro

Tubos de centrifuga

Soporte universal

Gradilla

Papel filtro

Buretra

Termostato

Elenmeyer

Agitador

Pipetas graduadas

Harina

Esptula

Forraje

Beaker

Suelo

BIBLIOGRAFIA
Granados, J.,(2010),Mdulo Bioqumica Metablica, Unidad
2, cap 2; ECAPMA; UNAD
Granados, J.,(2010),Protocolo prcticas de laboratorio, Pg
3-8; ECAPMA; UNAD
Granados., J; Garca,J.,(2000),Fisicoqumica Aplicada; Cap
11, Ed Antropos, Bogot, Colombia
TTULO DE LA PRCTICA:

DETERMINACIN DE CARBOHIDRATOS NO
ESTRUCTURALES (CNE), POR EL
MTODO DE FENOL-CIDO SULFRICO
INTRODUCCIN
Los carbohidratos son sustancias naturales compuestas de
carbono, hidrgeno y oxgeno. Antiguamente se les conoca
como hidratos de carbono, La glucosa es el carbohidrato
ms abundante en la naturaleza. Tambin se le conoce
como azcar sangunea, azcar de uva, o dextrosa. Los
animales obtienen glucosa al comer plantas o al comer
alimentos que la contienen. Las plantas obtienen glucosa por
un proceso llamado fotosntesis. Teniendo en cuenta estos
conceptos entraremos a analizar estas molculas por el
mtodo FENOL-CIDO SULFRICO .Este mtodo
determina la cantidad de carbohidratos totales No
estructurales, basndose. En su contenido de almidones
hidrolizables
y
azcares
solubles.

1.2 Reactivos a utilizar

Reactivo
Frmula
Concentracin
NAOH
Hidrxido
0.1 N
de sodio
Acido
HCl 0.1N
1%
Clorhidrico
Agua
H2O
destilada
1.3 Procedimiento.
1.3.2 En Laboratorio
Pesar +/- 1.0g de muestra en balanza analtica y registrar como:
(Wm) depositarla luego en un vaso de precipitado y agregar 50 mL
de solucin de HCl 0,6N. Agitar constantemente con la varilla de
vidrio durante 3 minutos. Llevar el beaker con la solucin al bao
termostatado y calentar a 90C durante 20 min Dejar enfriar por 5
min y filtrar sobre papel filtro. Medir el volumen del filtrado(Vf) y
pasar 5mL a un tubo de ensayo, adicionar a ste 5mL de NaOH
0,6N, agitar por 15 segundos, tapar y rotular as: FCNE: Filtrado
para carbohidratos no estructurales.

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TTULO DE LA PRCTICA:

ACTIVIDAD CATALTICA DE LA CATALASA (ACAT)

OBJETIVOS
INTRODUCCIN

Indicadore
s
Wm

Descripcin

Valor

Peso de la muestra

2.35
6

Vf

Volumen del filtrado

5.3

Ast

Absorbancia del estndar

0.04
2

Am

Absorbancia del tubo que contena

el

0.19
6

Las enzimas son protenas globulares responsables de la mayo

parte de la actividad qumica de los organismos vivos. Actan como
catalizadores, que son sustancias que aceleran las reaccione
qumicas sin ser destruidas o alteradas durante el proceso. La
enzimas son extremadamente eficientes y se pueden utilizar una
otra vez repetidamente. Una enzima puede catalizarmiles d
reacciones en cada segundo.El H2O2 es txico para la mayora de
los organismos vivos. Muchos organismos son capaces de destrui
el H2O2 mediante la accin de enzimas antes de que pueda
realizar mucho dao.

FCNE
RESULTADOS ESPERADOS:
Se determina CNE, basndose en su contenido de
almidones hidrolizables y azcares solubles.
GLOSARIO
Carbohidratos solubles: Los disacridos se producen
cuando se combinan qumicamente dos monosacridos.
Glucosa: La glucosa es un monosacrido con frmula
molecular C6H12O6.
Los monosacridos: azcares simples o carboxilos son los
glcidos ms sencillos, que no se hidrolizan, es decir, que no
se descomponen para dar otros compuestos, conteniendo de
tres a seis tomos de carbono.
BIBLIOGRAFIA
Protocolo de Prcticas para la Escuela, Bioqumica
Metablica
http://es.wikipedia.org/wiki/Bioqu%C3%ADmica

5. MATERIALES Y MTODOS
5.1. Materiales y equipos requeridos
Material / Equipo
Tubos de ensayo

Potencimetro

Tubos de centrifuga

Soporte universal

Gradilla

Papel filtro

Buretra

Pinzas para crisol

Elenmeyer

Agitador

Pipetas graduadas

Harina

Esptula

Forraje

Beaker

Suelo

1.2 Reactivos a utilizar

Reactivo
Frmula
Perxido de H2O2H2SO4KMnO4
hidrogeno

Concentracin
0,05M
2N
0,01M

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TTULO DE LA PRCTICA:
NITRGENO NO PROTECO
INTRODUCCIN

Se nombra como Nitrgeno no proteico a los compuestos de

nitrgeno que pueden ser convertidos en protenas por alguno

organismos vivos El nitrgeno no proteico puede emplearse solo o

con una pequea cantidad de caloras. Los bovinos que consumen

exclusivamente forraje de mala calidad suelen tener una ingesta de

protenas y caloras demasiado baja. Si se suministra nitrgeno

adicional, la ingesta de materia seca aumentar generalmente, y la

1.3 Procedimiento.
1.3.2 En Laboratorio
Pesar 2g de muestra picada pulverizada y colocarla en un
tubo de centrifuga, luego Adicionar 10mL de solucin fra de
buffer fosfato 0,05M,pH=6,8-7,0, agitar, con agitador de
vidrio (3min) y centrifugar a 2500rpm ,durante 5min Sacar el
sobrenadante, pasarlo a una probeta, medir su volumen,
registrarlo como : Vs y tomar 5 mL de ste para depositarlo
en un tubo de ensayo ,taparlo.

situacin nutricional mejorar.

6. MATERIALES Y MTODOS
6.1. Materiales y equipos requeridos
Material / Equipo

Indicadores

Muestras
Suelo

Wm (g)

Harina

1.0995

Forraje

1.0649

1.382

VF (ml)

V KMmO4 (ml)

8.5

5.7

13.2

RESULTADOS ESPERADOS

Determina la actividad de la catalasa por mtodo

permanganomtrico. Se cuantifica la actividad
catalasa en muestras de origen vegetal y animal.
GLOSARIO
CAT: La catalasa como biocatalizador de origen
proteco, es una enzima xido-reductasa que participa
en la degradacin del perxido de hidrgeno (H2O2)
hasta Oxgeno molecular
(O2) y agua (H2O).
Dicha biomolecular, est presente en peroxisomas y
mitocondrias de clulas animales y vegetales,

Tubos de ensayo

Potencimetro

Tubos de centrifuga

Soporte universal

Gradilla

Papel filtro

Buretra

Pinzas para crisol

Elenmeyer

Agitador

Pipetas graduadas

Harina

Esptula

Forraje

Beaker

Suelo

1.2 Reactivos a utilizar

Reactivo
Frmula
Acido
(Cl3-C-COOH )
tricoloacido

Concentracin
10 %

1.3 Procedimiento
1.3.1. En campo:
Toma de muestra cuando se requiere Es un
procedimiento de la investigacin que permite conocer
los componentes de un ejemplar slido, liquido o
de otro orden; mostrando sus respectivas
propiedades y reacciones, arrojando datos cuantitativos
llamados resultados.

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protegindolas de la toxicidad de los radicales libres

perxido, impidiendo su acumulacin y beneficiando el
metabolismo celular.
Granados, J.,(2010),Mdulo Bioqumica Metablica, Unidad
2, cap 2; ECAPMA; UNAD
Granados, J.,(2010),Protocolo prcticas de laboratorio, Pg
3-8; ECAPMA; UNAD
Granados., J; Garca,J.,(2000),Fisicoqumica Aplicada; Cap
11, Ed Antropos, Bogot, Colombia

balanza analtica y registrar como (Wm) y colocar en

vaso de precipitado
-Adicionar 30 ml de agua destilada fra, agitar por 1min
-Dejar reposar la mezcla por 15 min
-Adicionar 20 ml de solucin de ATA, agitar por 1min
-Reposar a ambiente por 15 min
-Filtrar con papel filtro sobre probeta
-Medir el volumen del filtrado (Vf)
-Recolectar 5 ml del filtrado, colocarlos en un tubo de
ensayo y rotularlo: FNNP: filtrado para nitrgeno no
proteico
-Colocar el papel filtro con el residuo, en una cpsula de
porcelana y secar en el horno por 30min a 105C
Indicadores
Descripcin
Valor
Wn
Vf
Ast
AMm
RESULTADOS ESPERADOS:
Realizar la extraccin con cido Tricloroactoco
utilizar el espectrofotomtrica para conocer el contenido de
NNP y leer las absorbancias.
GLOSARIO:
Titulacin:
La titulacin o valoracin qumica es un proceso por el
que se mide la cantidad o la concentracin de una sustancia
en una muestra. Puede ser de varios tipos y tambin se
llama anlisis volumtrico.
Cintica qumica
La Cintica Qumica es la rama de la ciencia que estudia las
velocidades con que ocurren las reacciones.
Principales Factores que afectan la velocidad de
reaccin:
Concentracin de reactivos
Temperatura
Catalizador
rea Superficial

En Laboratorio
-Pesar +/- 1,0 g de muestra (picada pulverizada) en
TTULO DE LA PRCTICA:
CLOROFILAS
INTRODUCCIN

son una familia de pigmentos de color verde que se encuentra

enlascianobacterias y en todos aquellos organismos qu
contienen cloroplastos en sus clulas, lo que incluye a las plantas
a los diversos grupos deprotistas que son llamados algas. L
clorofila es una biomolcula extremadamente importante, crtica e
la fotosntesis, proceso que permite a las plantas absorber energa
a partir de la luz.
Tabla de muestra
() (nm)
630

ABS
0.018

645

0.004

665

0.029

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Escuela de Ciencias Agrcolas, Pecuarias y del Medio Ambiente- ECAPMA
Programa: Agronoma
PREINFORME: Laboratorio Bioqumica Metablica-LBM
Nombre y Apellido: Mnica Johanna Olaya Rodrguez ; Cdigo: 94062500039 ; Fecha: Mayo- 05- 2013.

Solucin buffer:
Un tampn o buffer es una o varias sustancias qumicas que
afectan a la concentracin de los iones de hidrgeno (o
hidronios) en el agua. Siendo que pH no
significa otra cosa que potencial de hidrogeniones (o
peso de hidrgeno), un "buffer" (o "amortiguador") lo que
hace es regular el pH.
Granados, J.,(2010),Mdulo Bioqumica Metablica, Unidad
2, cap 2; ECAPMA; UNAD
Granados, J.,(2010),Protocolo prcticas de laboratorio, Pg
3-8; ECAPMA; UNAD
Granados., J; Garca,J.,(2000),Fisicoqumica Aplicada; Cap
11, Ed Antropos, Bogot, Colombia

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