En 1884 el doctor Christian Gram desarroll la tincin ms famosa y utilizada en

los laboratorios de bacteriologa, la cual posteriormente se denominara tincin de

Gram, que permite clasificar a las bacterias de acuerdo a su estructura y grosor de
la pared bacteriana, en Gram positivas o Gram negativas. Las bacterias Gram
positivas poseen una capa gruesa de peptidoglucano, pero carecen de una
membrana externa, mientras que las Gram negativas poseen una capa de
peptidoglucano ms delgada, as como una membrana externa. Cabe aclarar que
existen bacterias que simultneamente presentan tincin de Gram positivas y de
Gram negativas, esto incluso en las condiciones ptimas de cultivo, por lo cual
reciben el nombre de bacterias Gram variables, sin embargo, la estructura de este
tipo de bacterias se asemeja ms a las Gram positivas, aunque la capa de
peptidoglucano en estas suele ser de menor grosor al compararse con las Gram
positivas.
Existen muchas modificaciones de esta tincin, pero en todos los casos se
realizan los pasos esenciales de, extensin de las clulas y fijacin por calor en
una porta objetos, tincin de modo sucesivo con un colorante bsico, el violeta de
cristal, y con una disolucin diluida de yodo, seguido de un tratamiento con un
disolvente orgnico que puede ser alcohol o acetona para decolorar el complejo
formado entre el yodo y el cristal violeta, las bacterias Gram positivas resisten esta
decoloracin y permanecen teidas de un color azul obscuro-negro, la
decoloracin se da en las bacterias Gram negativas, por lo cual luego de esta
decoloracin, se efecta una contra tincin en la cual las bacterias Gram negativas
vuelven a ser teidas con safranina o fucsina obteniendo una coloracin rosada,
esta contra tincin no afecta a las Gram positivas, que permanecen con su tincin
azul obscuro o bien, morada, lo cual permite distinguir entre ambos tipos de
bacterias al momento de observar en el microscopio el porta objetos.
Es importante diferenciar las bacterias bajo esta clasificacin, ya que las bacterias
Gram-negativas suelen presentar mayores problemas de permeabilidad a ciertos
antibiticos que las Gram-positivas, debido a la doble membrana.