UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

UPG FARMACIA Y BIOQUMICA

Ejercicios de aplicacin
1.- Predgase el orden de salida de las distintas protenas cuando se filtra una disolucin
que contiene lo siguiente: mioglobina, catalasa, citocromo c, miosina,
quimiotripsingeno, seroalbmina y tiroglobulina, a travs de una columna
empaquetada con Sephadex G-150.
Nota: Buscar el Peso molecular de cada una de las protenas antes mencionadas.

2.- En una columna de G-150 (2,6 x 50 cm) equilibrada con tampn fosfato, 10 mM, pH
7,0 se aplica una muestra de 1 mL que contiene azul dextrano y agua tritiada. Se
recogen fracciones de 8 mL y en cada una de ellas se mide la absorcin a 620 nm (azul
dextrano) y la radioactividad (agua tritiada). A partir de los datos indicados en la figura
se pide:
a) Determinar el volumen de exclusin y el volumen total de la fase lquida del sistema.
b) Indicar una forma ms precisa de realizar esta determinacin.
c) Por qu no se corresponde el Vt con el V de la columna empaquetada, obtenido a
partir de sus dimensiones?

3.- Al determinar la movilidad relativa de varias protenas en electroforesis en gel de

poliacrilamida PAGE-SDS al 7.5% se obtienen los siguientes resultados.
Protenas
Seroalbmina
Catalasa
Glutamato
deshidrogenasa
Gliceraldehido-3-P
deshidrogenasa
Tripsina
Mioglobina
Lactato
deshidrogenasa

Rm
0.18
0.22
0.29
0.40
0.60
0.74
0.45

Se pide determinar el peso molecular de la lactato deshidrogenasa

Nota: Buscar el Peso molecular de cada una de las protenas antes mencionadas.

Mg Acela Ins Arnao Salas

Encargada del curso.