Facultad de Ingeniera Qumica

Cultivo de clulas y tejidos animales

Actividad 1.1

Claudia Herrera Mexicano

Mrida, Yucatn

21/08/16

Effects of Peptone Supplementation in Different Culture Media on Metabolic

Pathway and Productivity of CHO DG44 Cells; a New Insight into Amino Acid
Profiles
El uso de sistemas de expresin de origen animal es ampliamente utilizado en la
industria biofarmacetica, debido a que ofrece una serie de beneficios
relacionados con la produccin. Actualmente, uno de los principales sistemas de
expresin empleados a nivel industrial son las llamadas clulas CHO (del ingls
Chinese hamster ovary).
A nivel comercial los medios de cultivo para dichos sistemas se basan en el uso de
aquellos que no contengan suero, esto con el fin de disminuir costos de
produccin. No obstante, diversas investigaciones han recalcado la importancia
del enriquecimiento de los medios de cultivo comerciales con diversas fuentes de
nutrientes, como es el caso de las peptonas, para mejorar las condiciones del
cultivo y lograr optimizar los procesos de obtencin de los biofrmacos.
Debido a que no se conoce con claridad el mecanismo de accin de las peptonas
sobre el metabolismo en las clulas CHO, es necesario realizar anlisis de
optimizacin para cada tipo de lnea celular. Por lo que el propsito del artculo
consisti en evaluar el efecto de la composicin de distintos medios de cultivo
comerciales y la concentracin de seis diferentes tipos de peptonas en el
incremento de la biomasa y la productividad de las clulas CHO.
Para la experimentacin se emplearon dos medios de cultivo comerciales,
ProCHO 5 y CD DG44 respectivamente, adems de un tercer medio (BRC CDM)
elaborado manualmente en el laboratorio. La lnea celular utilizada fue la CHO
DG44 productora de t-PA (activador tisular plasmingeno), ya que es una de las
lneas ms estudiadas en la produccin de biofrmacos.
El anlisis comparativo de los distintos medios y concentraciones de peptona, se
llev a cabo por medio de la determinacin de la biomasa, viabilidad y metabolito
producido. Dichos anlisis se realizaron a partir de un inculo en fase exponencial
y un muestreo con duracin de diez das.

Los resultados de la determinacin de biomasa y viabilidad arrojaron que el medio

ProCHO 5 obtuvo mejores resultados que los medios CD DG44 y BRC CDM,
aunque los dos ltimos mostraron resultados similares.
Por otro lado, los efectos de la concentracin de los distintos tipos de peptona en
la formacin de biomasa mostraron que para cada medio de cultivo cierta peptona
o grupo de peptonas, a alta concentracin incrementaban la cantidad de biomasa.
De igual manera, resultados similares se observaron en la determinacin de
produccin de t-PA, es decir, se obtuvieron mayores rendimientos a mayores
concentraciones de peptona.
Como se ha mencionado anteriormente, las peptonas son ampliamente utilizadas
como suplementos de los medios de cultivo comerciales, sin embargo, no hay que
olvidar que cada peptona tiene un perfil de aminocidos distinto, lo cual les
confiere propiedades especficas que permiten un mejoramiento metablico en las
lneas celulares.
A partir de los resultados anteriores es posible destacar que el medio de cultivo
ProCHO 5 al tener un mayor perfil de aminocidos y nutrientes obtuvo mejores
resultados en cuanto a formacin de biomasa y produccin de t-PA, en
comparacin con los otros medios de cultivo con bajo perfil de aminocidos.
Sin embargo, si analizamos solamente los resultados del rendimiento, se obtuvo
que el medio de cultivo BCR CDM fue el que present un mayor porcentaje de
incremento en el rendimiento. Lo anterior nos sugiere que, a pesar de tener un
medio de cultivo bajo en nutrientes y no alcanzar la misma concentracin de
produccin de t-PA que el medio ProCHO 5, la correcta combinacin de peptonas
permiti aumentar el rendimiento en un 139%.
De este modo, es fcil observar cmo el correcto enriquecimiento de los medios
de cultivo puede generar un incremento en el rendimiento de la produccin del
metabolito de inters, por lo que es importante tomar en cuenta el perfil de
aminocidos de los distintos componentes aadidos, en este caso las peptonas,
ya que modificando las concentraciones de aminocidos especficos se pueden
obtener o mejorar los resultados deseados.

Referencias
Davami, F., Eghbalpour, F., Nematollahi, L., Barkhordari, F., & Mahboudi, F. (2015).
Effects of Peptone Supplementation in Different Culture Media on Growth,
Metabolic Pathway and Productivity of CHO DG44 Cells; a New Insight into Amino
Acid

Profiles.

Iranian

Biomedical

Journal,

19(4),

194205.

http://doi.org/10.7508/ibj.2015.04.002
Ficha tcnica de la lnea celular
https://tools.thermofisher.com/content/sfs/manuals/CHO_DG44_Cells_cGMP_Medi
aKit_PI.pdf