INTRODUCCIN

La bacteria es el ms simple y abundante de los organismos y puede vivir en tierra, agua, materia orgnica o en
plantas y animales.
Tienen una gran importancia en la naturaleza, pues estn presentes en los ciclos naturales del nitrgeno, del
carbono, del fsforo, etc. y pueden transformar sustancias orgnicas en inorgnicas y viceversa. Son tambin muy
importantes en las fermentaciones aprovechadas por la industria y en la produccin de antibiticos. Desempean un
factor importante en la descomposicin de plantas y animales muertos.
Las bacterias son organismos unicelulares microscpicos, pertenecen a la clase procariota debido a que su ncleo no
est rodeado por una membrana y consiste de una sola molcula de ADN y poseen una pared.

Figura de la estructura de una bacteria.

Existen bacterias Hetertrofas y auttrofas.

Las hetertrofas: se alimentan con las sustancias orgnicas sintetizadas por otros organismos y puede ser su
respiracin puede ser :

Anaerobia que consiste en que la clula obtiene energa de una sustancia sin utilizar oxgeno; al hacerlo,
divide esa sustancia en otras; a la respiracin anaerobia tambin se le llama fermentacin.
Aerobias que utiliza oxgeno para extraer energa de la glucosa. Se efecta en el interior de las clulas, en los
organelos llamados mitocondrias.

Las bacterias auttrofas son las que generan sus propios alimentos, a travs de sustancias inorgnicas para su
metabolismo y son anaerobias.

Reproduccin de las bacterias

Generalmente las bacterias se reproducen por biparticin

Alimentacin
El xito evolutivo de las bacterias se debe en parte a su versatilidad metablica. Todos los mecanismos posibles de
obtencin de materia y energa podemos encontrarlos en las bacterias. Segn la fuente de carbono que utilizan, los

seres vivos se dividen en auttrofos, cuya principal fuente de carbono es el CO2, y hetertrofos cuando su fuente de
carbono es materia orgnica. Por otra parte segn la fuente de energa, los organismos o seres vivos pueden ser
fottrofos, cuya principal fuente de energa es la luz, y quimitrofos, cuya fuente de energa es un compuesto
qumico que se oxida.
En las bacterias podemos encontrar las siguientes formas:
1. Las bacterias quimiohetertrofas, utilizan un compuesto qumico como fuente de carbono, y a su vez, este
mismo compuesto es la fuente de energa. La mayor parte de las bacterias cultivadas en laboratorios y las
bacterias patgenas son de este grupo.
2. Las bacterias quimioauttrofas, utilizan compuestos inorgnicos reducidos como fuente de energa y el CO2
como fuente de carbono.
3. Las bacterias fotoauttrofas, utilizan la luz como fuente de energa y el CO2 como fuente de carbono.
4. Las bacterias fotohetertrofas, utilizan la luz como fuente de energa y biomolculas como fuente de carbono.
Tcnica Gram
Tincin diferencial empleado en bacteriologa para la visualizacin de bacterias, sobre todo en muestras clnicas.
Gram+: aquellas bacterias que se tien de azul oscuro o violeta, su pared es de Murina.
Gram-: aquellas bacterias que se tien color rojo o rosa, su pared es de lipopolisacaridos.
OBJETIVOS
General
Elaborar un medio de cultivo, aislar y caracterizar una colonia bacteriana.
Particulares
Preparacin y esterilizacin de material y un medio de cultivo general para cultivar bacterias.
Realizar la tcnica de siembra en caja Petri de una cepa bacteriana.
Caracterizar y aislar alguna de las colonias presentes en el medio de cultivo.
Diferenciar las bacterias por la tincin de la pared celular con la tcnica Gram.
Reconocer formas bacterianas

MATERIAL
Material Diverso
Algodn
Asa bacteriolgica

Reactivos
Aceite de inmersin
Agar bacteriolgico o medios de cultivo

Mechero de gas
Bandeja de teido
Guantes de cirujano
Cubre boca desechable

Alcohol etlico 96%

Cristal violeta
Lugol
Acetona
Safranina

Material Cristalera
Cajas Petri
Porta objetos
Cubre objetos

Equipo
Autoclave
Microscopio

Material biolgico
Cepas bacterianas
PROCEDIMIENTO
1. Recoleccin de la muestra
Las muestras que utilizamos fueron:
mucosa nasal
Yakult (Producto lacteo)
Agua de estancada de lluvia
Saliva

 Aire del laboratorio

2. Preparacin del medio de cultivo
Los integrantes de otros equipos lograron hacer el medio de cultivo.
Para un litro de medio de cultivo se agregan de 15 a 20g de agrar.
3. Esterilizacin del material y del medio de cultivo
En la microbiologa es fundamental emplear tcnicas de esterilizacin y desinfeccin que permiten asegurar el
trabajo libre de agentes biolgicos contaminantes.
En la desinfeccin lavamos la campana con jabn y agua, y en la esterilizacin limpiamos con alcohol y
utilizamos Autoclave en el momento de agregar las muestras al medio de cultivo.
4. Llenado de cajas
El la campana colocamos un mechero para delimitar una zona estril (10cm) alrededor. Vertimos el medio de
cultivos aproximadamente 10 ml a cada una de las 5 cajas Petri en la zona estril.
5. Sembrado bacteriolgico o inoculacin
Utilizamos un asa bacteriolgica y un mechero. En el rea estril colocamos una caja Petri es inoculada con
una de las muestras por la tcnica de estra. El asa fue esterilizada entre cada inoculacin.
6. Observacin de las bacterias
En cada una de las muestras obtenidas observamos, notamos que en cada una de las cajas haba ms de 1
cultivo. Para la caracterizacin de cada colonia obtenida tomamos en cuenta las siguientes caractersticas:
Tamao
Forma
Borde
Color
7. Tincin de la pared celular (Tincin Gram)
Se flameo el Asa
Tocamos el centro de la colonia con el extremo del Asa
La porcin tomada de la colonia para examinar se emulsifico una gota de agua en un porta objetos para
dispersar las clulas bacterianas.
Se fij en material al porta objetos pasndolo 3 veces a travs de la llama de un mechero de Bunsen,
para que l no se lave mediante la tincin.
Colocamos el extendido en una bandeja de tincin y cubrimos la superficie de solucin de cristal
violeta.
Dejamos pasar un minuto de la exposicin del colorante cristal violeta, lavamos con Agua destilada.

Cubrimos el extendido con la solucin de Yodo para Gram durante un minuto. Lavamos nuevamente con
agua.
Cubrimos la superficie con decolorante alcohol acetona hasta que no se arrastrara ms violeta.
Dejamos pasar 10 min.
Lavamos con agua y colocamos en extendido sobre la bandeja de tincin. Aadimos safranina de
contraste durante un minuto, despus volvimos a lavar con agua.
Colocamos el extendido de manera vertical en la bandeja de tincin para dejar escurrir el exceso y el
extendido se sec.
Examinamos el extendido con un objetivo de inmersin x100. Las bacterias Gram+ se tien de azul o
violeta y las bacterias Gram- se tien de rojo o rosa.

RESULTADOS
Muestra

Color

Nariz

Amarillo

Superfic
ie
Cultivad
a
(Toda10
0%)
10%

Forma

Cantida
d
aproxim
ada de
colonias

Borde

Puntiform
ey
Circular

Ms de
700

Ondulad
o

Observaciones

Encontramos
hongos en un
cuadrante de
la caja Petri el
cual ocupo en
30% de l.
Bacterias
agrupadas en
forma circular
y puntiforme

Fotos

Informacin
bibliogrfica

Staphylococcus aureus
Es un coco que crece
agrupado en racimos
(de ah su raz
"Staphylo"), que
responde positivamente
a la tincin de Gram, es
aerobio y anaerobio
facultativo por lo que
puede crecer tanto en
una atmsfera con
oxgeno y tambin sin el
mismo, no presenta
movilidad ni forma
cpsula. Es capaz de
crecer hasta con un 10
% de sal comn. Por
esto puede crecer en el
agua del mar. Produce la
fermentacin lctica. Es
catalasa positivo y
coagulasa positivo.

Aire

Naranja
claro y
obscuro,
rosa y
amarillo

15%

Circular

150
aprox.

Entero

Hongos en
cada uno de
los
cuadrantes de
la caja Petri,
en uno de
esos
cuadrantes
ocupa un
70%.
Donde se
encuentras
las bacterias
es ms
consistente.
5 Tipos de
bacterias

Algunas bacterias
pueden viajar grandes
distancias y otras
pueden afectar
solamente a nivel local y
su supervivencia es por
corto tiempo.
Las aerobacterias son
ms numerosas en las
ciudades (4000 m-3,
promedio 850) que en
reas rurales (3400 m-3,
promedio 99).25, 26, 27
Hasta este momento,
utilizando el mismo
muestreador y las
mismas condiciones de
cultivo, se obtuvieron
los siguientes datos: las
bacterias Gram positivas
(73-90%) son el grupo
predominante entre las
aerobacterias, siendo
abundantes las
Micrococaceas y los
Staphylococcus; las
formas esporuladas
registran altas
concentraciones en los
bosques, entre
intermedias y altas en
zonas rurales, y bajas
proporciones en zonas
costeras.21 No ha sido

posible identificar
aproximadamente 21%
de las Gram positivas
cultivables.

Saliva

Blanco y
amarillo

10%

Puntiform
e, circular

Aprox.
500

Entero

Bacterias con
forma
circulares y
Bacterias
puntiformes
en dos
cuadrantes.

Las Gram negativas

representan una baja
proporcin de la
poblacin de las
aerobacterias, donde los
grupos representativos
son las Pseudomonas
(5.5-10.7%),
principalmente en zonas
rurales, y las
Xanthomonas (0-7.6%)
en zonas costeras
(cuadro 2).
En Mxico se encuentras
bacterias Escherichia
coli,
Enterobacter,
Aeromonas.
Los gneros bacterianos
que encontramos en la
boca son Streptococcus,
Lactobacillus,
Fusobacterium,
Veillonella,
Corynebacterium,
Neisseria, Actinomyces,
Capnocytophaga,
Eikenella, Prevotella y
varios gneros de
Espiroquetas.

Yakult

Blancas

15%

Puntiform
e

500

Lobulado

Agua
estancad
a de
lluvia

Amarilla

7%

Filamento
s,
puntiform
e

Ms de
700

Entero

Se encuentran
hongos en los
cuadrantes
Colonias
agrupadas de
bacterias.

Bacterias con
forma
puntiforme,
colonias
agrupadas.

El trmino Bacterias
cido Lcticas (BAL) se
usa para referirse a las
bacterias que utilizan
los azcares como la
glucosa y lactosa, para
producir cido lctico
mediante. Estas
bacterias se encuentran
prcticamente en toda
la naturaleza, se han
aislado de tierra, plantas
verdes, la vagina y el
tracto intestinal en
humanos y animales

Muestra

Gram+

Gram-

Observaciones

1 Aire

Bacterias
encontradas Gram
+ color Violeta

Bacterias
encontradas Gram
color Rosa

Con la tincin Gram

observamos que en
las bacterias de la
muestra del Aire
encontramos
Bacterias con pared
celular de Mureina
y Lipopolisacarida.
Las bacterias Gram
+ son las de color
Violeta y las Gram
son color Rosa
Observamos
bacterias en forma
de Bacilos y Cocos.

Informacin
Bibliogrfica
Las grampositivas
se tien de morado
ya que el colorante
se queda atrapad
en la capa gruesa
de peptidoglucano
que rodea a la
clula.

Imagen

2 Saliva

Bacterias
encontradas Gram
color Rosa.

Con la tincin Gram

observamos que en
las bacterias de la
muestra de Saliva
encontramos
Bacterias con pared
celular de
Lipopolisacarida.
las Gram son
color Rosa.
Observamos las
bacterias en forma
de Cocos

Las gramnegativas
tienen una capa
Lipopolisacarida, es
por ello que no
retiene el violeta
cristal y por esto
las clulas se tien
con safranina y las
observamos rojas o
rosas.

CONCLUSIN

Formamos el medio de cultivo el cual al agregar las bacterias para aislarlas, pudimos identificar por medio de
observacin cada una de ellas. Nosotros utilizamos bacterias de Yakult, nariz, saliva, agua estancada de lluvia
y aire del laboratorio. Observamos su forma, borde, la superficie que abarcada del medio de cultivo, su color,
la cantidad de bacterias y colonias.

Para lograr aislar las bacterias en el medio de cultivo tuvimos que utilizar medios de esterilizacin y
preparacin.

La preparacin del medio de cultivo de agar y el llenado de las cajas Petri. En la esterilizacin ocupamos el medio de
autoclave y zona estril alrededor de un mechero.

Realizamos la tcnica de siembra gracias a la zona estril dada por la flama del mechero, as otros agentes
bacterianos no afectaron nuestro cultivo de las cepas bacterianas. Por medio de un asa de siembra colocamos
los tipos de bacterias de las muestras que elegimos por inoculacin con tcnica de estra, as pudimos
aislarlas.

Observamos las estructuras de las bacterias, las diferentes cepas en cada medio de cultivo, color y borde.
Llegamos a la conclusin que existen diferentes bacterias en algunos cultivos de muestras que utilizamos,
como el del aire (Cepas de diferente color) y saliva (forma puntiforme y circular).

Diferenciamos los medios de cultivos de nariz y aire, con la ayuda de la tcnica Gram. En Gram + se tien del
color Azul o Violeta si la pared es de peptidoglucano, y en la Gram se tie de color Rojo o Rosa si su pared es
de Lipopolisacaridos. Gracias a esta tcnica observamos que en las bacterias de la Nariz su pared es de
Lipopolisacaridos ya que la tincin fue de color rosa. En las bacterias del Aire pudimos observar que la tincin
fue color Rosa y Violeta, llegamos a la conclusin que en la muestra de aire existen varios tipos de bacterias
Gram+ y Gram-.

Observamos las formas que existen con las muestras que utilizamos en tincin Gram.

En las cepas de la Nariz identificamos que su forma era de Cocos y en la del Aire su forma era Cocos y Bacilos.

BIBLIOGRAFA
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