PREINFORME CUANTIFICACIN DE CAFENA

Arciniegas, C., Hernndez, C., Hernndez, S., Zapata, J.

Departamento de Ingeniera Qumica, Agosto de 2016

Introduccin
La cafena es un estimulante del sistema nervioso utilizado comnmente en la
elaboracin de productos farmacuticos y de consumo habitual como bebidas
gaseosas y energizantes. Esta se encuentra generalmente en los granos de caf y
en las hojas de t, la extraccin de cafena se realiza de tres maneras comunes,
dependiendo del producto deseado, las cuales son extraccin con agua, dixido
de carbono (CO2) como fluido supercrtico y solventes orgnicos. Cuando se
utilizan solventes orgnicos como medios de extraccin, posterior a esta prosiguen
los mtodos de purificacin, el ms utilizado es la sublimacin, gracias a las
caractersticas de la cafena para sublimar a 178C a una atmsfera.
Actualmente Colombia ocupa el tercer puesto en la produccin de caf a nivel
mundial superado por Vietnam y Brasil. En Colombia los principales
departamentos productores de caf son Caldas, Risaralda, Quindo, el norte del
valle del Cauca y el noroccidente del Tolima, en donde se produce el caf
Colombiano el cual es un caf de indicacin geogrfica protegida. Sin embargo las
condiciones geogrficas del pas permiten que el caf crezca en otras zonas como
Cundinamarca y Boyac, sin embargo el caf de estas zonas no es un caf
indicacin geogrfica protegida y por tal razn su estudio ha sido limitado.
Con el fin de determinar la cantidad de cafena presente en un caf del
departamento de Boyac, se realiz la extraccin con tres solventes Etanol,
Acetato de Etilo y 1-Propanol, esta extraccin fue realizada en un extractor tipo
Soxhlet. Una vez obtenida la mezcla de solvente y cafena y el caf slido
descafeinado prosigue el proceso de purificacin de la cafena la cual ser
realizada por sublimacin.

El estudio de este tipo de caf surge con el fin de determinar el contenido cafena
para saber si es factible iniciar la produccin de dos productos nuevos en la regin
como los son la cafena pura y el caf descafeinado.

Objetivos

Cuantificar el contenido de Cafena en una muestra de caf verde del

departamento de Boyac.
Realizar la purificacin de cafena por sublimacin.
Determinar el rendimiento de la extraccin para cada solvente

Marco Terico
Metodologa Propuesta
Determinacin del rendimiento de extraccin.

El rendimiento de cada solvente ser evaluado a partir de un balance de materia,

definiendo el rendimiento (Y) como se muestra en la ecuacin 1.

Y=

masa de cafena
[ Ec . 1]
masa de caf en base seca

El caf verde inicial, con el que se realizar la prctica tiene un contenido de

humedad desconocido, para conocer la humedad inicial del caf se utilizar una
mufla de secado. Para determinar la humedad promedio de la muestra, se tomar
una cantidad aleatoria de caf verde y se medir la masa inicial. Una vez
determinada la masa inicial, la muestra se lleva al secador durante 4 horas a una
temperatura de 100C. La masa del caf se medir cada hora para determinar si el
contenido de humedad vara o si el secado ha llegado a su final. En caso de que la
masa de caf no vare de una hora a otra el proceso de secado se detiene. El
contenido de humedad promedio (HP) se estima como se muestra en la ecuacin
2.

H P=

masade caf seco

[ Ec . 2]
masade caf inicial

Para determinar el contenido de cafena obtenida durante la extraccin se toma la

muestra el volumen de solvente inicial, una vez terminada la extraccin se toma el
volumen de mezcla lquida resultante. La torta de caf con solvente resultante se
deja secar a condiciones ambientales, debido a motivos de seguridad ninguno de
los solventes ser calentado en el secador. La mezcla de solvente y cafena se
lleva a un rotaevaporador y por re-cristalizacin de se obtiene la cafena de una
alta pureza, la cual se pesa y de esta manera se determina el rendimiento de la
mezcla.

Cuantificacin e identificacin de cafena.

Debido a la variedad de componentes que se encuentran en el caf existe la

posibilidad de obtener ms que cafena pura durante el proceso de sublimacin,
adems de obtener trazas de solvente en los cristales, con el fin de cuantificar y e
identificar la cafena se utilizar un refractmetro, es necesario realizar una curva
de calibracin previa del equipo para lo cual se utilizar una solucin madre de
cafena pura la cual ser diluida diez veces. La solucin inicial ser de 500 ppm de
cafena en agua destilada y se realizarn diluciones de 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70,
80, 90 y 100 ppm. Dependiendo de la masa recolectada en la cafena se realiza
una dilucin la cual est incluida en la curva y se observa el resultado.

EXTRACCIN
Extraccin solido-liquido

La lixiviacin es la disolucin preferente de uno o ms componentes de una

mezcla slida por contacto con un disolvente lquido, tambin es comn llamarla
extraccin [2]. Para la experimentacin se utilizaran tres disolventes orgnicos:
Acetato de etilo, 1-propanol y metil carbonato.
Uno de los inconvenientes que se tiene a la hora de utilizar la lixiviacin como
mtodo de separacin, es la decisin del solvente que se utilizara para extraer la
sustancia de inters, en este caso la cafena. Para esta importante decisin se
tom como punto de partida y criterio de seleccin, la gua de solventes que

presenta GSK, esta muestra parmetros claves como punto de ebullicin,

reactividad, peligro de explosin, impacto ambiental, y efectos en la salud se
asigna una puntuacin a la sustancia de 1 a 10 en donde 10 es lo ms deseable y
1 lo ms inconveniente a continuacin se presenta la matriz de seleccin que se
tuvo en cuenta:
Tabla 1. Caracteristicas de solventes para seleccin
Compuest
o

Punto de Impacto Efecto

ebullici ambienta s en
n, C
l
la
salud

Etanol
1-propanol
Eetil
acetato
Etil lactato
dicloromet
ano
Dimethyl
carbonate

Flamabilid
ad y
explosin

Reactivida
d

78
97
77

6
7
8

8
5
8

6
7
4

9
10
8

Impacto
ambienta
l para su
producci
n
9
7
6

154
40

7
6

5
4

4
6

8
9

10
7

91

10

Haciendo un anlisis de la anterior matriz de seleccin con algunos de los

solventes compatibles con la cafena se infiere que los ms convenientes a usar
son el Etil acetato, 1 propanol y el etanol. El dimetil carbonato no se puede usar
debido a que la cantidad de reactivo disponible no es suficiente.

Extractor Soxhlet

El extractor Soxhlet es utilizado para la extraccin solido-lquida a escala

laboratorio. Este equipo est compuesto por dos cmaras: Una superior o cmara
donde se deposita la muestra slida y una inferior o cmara donde se encuentra el
disolvente, un condensador ubicado a continuacin de la cmara superior, un sifn
y un brazo, estos dos ltimos conectan la cmara superior e inferior (ver imagen
3).

El funcionamiento de este equipo es muy sencillo, los vapores del disolvente

suben por la cmara inferior y luego por el brazo hasta el condensador, all, al caer
regresa a la cmara de la muestra para separar los compuestos. El compuesto de

inters y el disolvente regresan a la cmara inferior por medio del sifn para
repetirse el proceso.

Ilustracin 1. Extractor Soxhlet

A una muestra de caf verde, disponerlo en el secador indirecto o en una mufla a

95 C por 2 horas para retirar la humedad inicial presente y con ese valor,
determinar la cantidad de materia seca empleada en la extraccin. Se hace de
esta forma para prevenir accidentes e inconvenientes que puede representar el
secado del caf con la humedad del solvente empleado en cada ensayo.
Con los tres solventes, utilizar el evaporador rotatorio (rotavapor) para eliminar el
exceso de solvente para realizar la sublimacin.

EVAPORADOR ROTATORIO.
Procedimiento bsico para poner en funcionamiento el evaporador rotatorio a
presin reducida, con el fin de concentrar muestras o llevarlas a sequedad
retirando el solvente.
Uso del rotavapor
Verificar que el rotavapor est conectado
1.
Verificar el funcionamiento de la motobomba, utilizada para generar el vaco
en el sistema del rotavapor.

2.
Verificar los niveles del agua del bao termostatado. Este bao debe ser
llenado con agua destilada.
3.

Verificar que la llave de nivelacin de presin este correctamente lubricada.

4.

Verificar las conexiones de entrada y salida del agua de refrigeracin.

5.
Verificar que la muestra est en un baln de vidrio con boca esmerilada de
tamao adecuado con respecto al volumen de la muestra. Adicionalmente verificar
que la boca esmerilada del baln acopl correctamente con el rotavapor o que
exista la adaptacin que permita el acople del baln al rotavapor.

PRECAUCION: Para estos equipos solo se utiliza material de vidrio con bocas
esmeriladas que resistan el vaco, no todo el material de vidrio del laboratorio es
apto para trabajar bajo vaco. No hacer adaptaciones de corchos.

Procedimiento para el secado de muestras

Encender la bomba de vaco y verificar la recirculacin del agua en la

bomba.

Abrir la llave del agua verificando que esta circule correctamente en el

espiral del refrigerante. El agua que sale del refrigerante DEBE caer en el balde de
recirculacin del agua, con el fin de refrigerar la motobomba.

Encender el rotavapor (sistema de rotacin y bao termostatado).

Precalentar a la temperatura necesaria el bao termostatado. La

temperatura deber ajustarse de acuerdo al tipo de solvente a evaporar, buscando
la menor temperatura necesaria para evaporar el solvente de la muestra y obtener
el mximo de recuperacin posible.

Con la llave de nivelacin de presin abierta, colocar el baln con la

muestra y sujetarlo con las pinzas.

Se sumerge el baln girando en el bao termostatado.

Poner a girar la muestra con el control de rotacin.

Cerrar la llave de nivelacin de presin.

Esperar hasta que el solvente haya sido completamente removido por

evaporacin a presin reducida.

Una vez se ha secado la muestra, para desmontar el baln del sistema:

Se para la rotacin del sistema.

Se eleva el sistema para retirar el baln del calentamiento.

Se libera la presin abriendo la llave de nivelacin.

Una vez se han nivelado las presiones se puede apagar la motobomba.

Se retiran las pinzas y el baln de la muestra.

Si no se va a utilizar ms, se cerrar la llave de flujo de agua, se apaga el

bao termostatado y el sistema de rotacin.

Si se va a continuar utilizando se realiza el montaje de la nueva muestra

siguiendo las instrucciones de este documento desde el numeral 5 hasta finalizar
de concentrar la muestra.

Una vez terminado el trabajo en este equipo se desconectar de la toma

corriente.

Precaucin: Si se apaga la motobomba antes de nivelar las presiones, el vaco

del sistema har que el agua de recirculacin pase al baln de muestras.

SUBLIMACIN
La sublimacin es el proceso que consiste en el cambio de estado de slido al
estado gaseoso sin pasar por el estado lquido. Al proceso inverso se le denomina
deposicin o sublimacin regresiva; es decir, el paso directo del estado gaseoso al
estado slido.
Si se estudia la sublimacin para una sustancia pura con la ilustracin 1 de
equilibrio de fases T vs P, se ver el siguiente comportamiento.
Ilustracin 2. Diagrama de fases para
una sustancia pura. P vs T

La flecha en la ilustracin 1 representa las condiciones de presin y temperatura

que se debe seguir para que una sustancia pura experimente la sublimacin. Se
ha encontrado en la literatura [5] que la cafena presenta sublimacin a
condiciones normales de presin a 178C, esta temperatura es relativamente alta
para el caso de estudio ya que la cafena en la muestra est acompaada de
trazas de solvente que no se retiraron y otros compuestos arrastrados por el
mismo, debido a la presencia de estos compuestos la cafena puede llegar a
reaccionar y como resultado no sera posible la sublimacin y como tal la
separacin propuesta para la obtencin de la cafena anhidra[6]. Se deben llevar
las condiciones del proceso de sublimacin de la cafena a bajas presiones, para
que la temperatura de esta sea ms baja y la cafena sublime en lugar de
reaccionar. En el laboratorio se cuenta con una bomba de vaco que alcanza una
presin de succin de p 20 cm de mercurio lo cual equivale a una presin en
Bogot de 562 mmHg se espera que a estas condiciones de presin lograda, 362
mmHg, se logre la sublimacin de la muestra sin que los efectos de reacciones no
deseadas en la cafena aparezcan en gran medida.
Para lograr el objetivo de separar la cafena de la muestra se debe llegar a las
condiciones mencionadas anteriormente y lograr la sublimacin, acto seguido el
vapor debe ponerse en contacto con una superficie a baja temperatura (con medio
de refrigeracin por ejemplo hielo) donde el vapor se deposite como cristales.

Metodologa experimental propuesta para la sublimacin.

1. Se va a purificar la cafena en bruto utilizando un equipo de sublimacin sencillo
similar a la ilustracin 3. Consiste en un matraz de filtracin de 100 ml que tiene
un dedo frio (tubo de ensayo con hielo en el interior) insertado a travs de un
tapn de goma.
Ilustracin 3. Erlenmeyer con
desprendimiento lateral

2. Montar el equipo de sublimacin sobre la plancha de calentamiento como se

muestra en la ilustracin4.
Ilustracin 4. Conexin de vaco vaco
sobre plancha de calentamiento

3. Ajuste la plancha de calentamiento en la mitad de la capacidad debe concluir la

sublimacin en 10 o 15 minutos
Ilustracin 5. Incremento de la temperatura en la
plancha para la sublimacin

4. Despus de la sublimacin, retire la plancha caliente y deje que el matraz de

filtracin se enfre a temperatura ambiente. Deje la lnea de vaco conectado
mientras se enfra.
Ilustracin 6. Retiro de calor del montaje

5) Despus de enfriar, retirar la lnea de vaco del montaje. A continuacin, retire

con cuidado el dedo fro del aparato y raspar su contenido en un vaso de
precipitados
Ilustracin 7. Retiro de los cristales sublimados.

6) Registre el peso de cristal recolectado rpidamente ya que la cafena se hidrata

fcilmente con la humedad del ambiente.

Resultados esperados
Se espera que a las condiciones de vaco que permite el montaje, se pueda lograr
una sublimacin de la cafena en bruto y posterior deposicin de los cristales en el
dedo frio que permita cuantificar un grado de recuperacin que se pueda
comparar con datos reportados en la literatura.

REACCION COLORIMETRICA PARA IDENTIFICACION DE LA CAFEINA

Las xantinas (grupo al que pertenece la cafena) se caracterizan a travs de la

reaccin de murexida, que consiste en evaporar hasta sequedad total una solucin
de cido ntrico con la muestra y tratar el residuo con amoniaco, con lo que se
desarrolla un color rojo purpureo debido a la formacin de murexida[9]. En la figura
1 se muestran las reacciones que se llevan a cabo.

Figura 1: Reaccin para identificacin de cafena [10]

La cafena es oxidada primero con el cido ntrico, donde se pueden formar dos
compuestos (ver figura 1). La reaccin anterior da un color amarillo.
Posteriormente una la adicin de amoniaco, el color amarillo se transforma en un
color rojo purpureo debido a la formacin de murexion. Solo el compuesto I
reacciona con el amoniaco.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

En un tubo de ensayo agregar 0,5 g de cafena.

Agregar 1 o 2 mL de HNO3.
Evaporar la mezcla calentndola en la campana a bao Mara.
Al residuo amarillo aadir una gota de NH3.

PLAN EXPERIMENTAL

EQUIPOS

Cantidad

Extractor Soxhlet

Rotoevaporador

Balanza analtica

Secador indirecto

Refractmetro

Balanza analtica

Plancha de calentamiento

MATERIAL LABORATORIO

Embudo de vidrio para lquido

Erlenmeyer con desprendimiento lateral

Tubo de ensayo

Esptula pequea

Vidrio de reloj

Frascos de vidrio con tapa de 360 mL

Tapn erlenmeyer con orificio

Erlenmeyer

REACTIVOS

Acetato de etilo

130

mL

1-Propanol

130

mL

Etanol

130

mL

Solucin de Yodo

mL

Solucin cido clorhdrico 10%

mL

Cafena anhidra grado USP

Solucin amoniaco 0,1 M

10

mL

Solucin cido ntrico

xx xx

Tablas de recoleccin de datos

Tabla 2. Recoleccin de datos para ensayo de extraccin Soxhlet

Ensayo Solvente

Ciclos
de Masa
caf Volumen
extraccin
verde, g
solvente

Acetato de etilo

1-propanol

Etanol

Observaciones:
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________

Tabla 3. Datos concentracin muestra en rotavapor

Muestra
disolucin

Temperatura
ebullicn
rotavapor, C

Presin rotavapor, Peso

mmHg
final

muestra

Etanol
1-Propanol
Acetato de etilo
Observaciones:
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________

Tabla 4. Recoleccin de datos para ensayo de sublimacin.

Masa de vidrio reloj vaco (g)
Masa de vidrio reloj con los cristales
(g)
Observaciones:
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________

Tabla 5. Identificacin cafena

Muestra
disolucin
Etanol
1-Propanol
Acetato de etilo

Cafena, g

Volumen
HNO3 Volumen
adicionado
adicionado

NH3

Observaciones:
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________

Caracterizacin de
cafena

Moler el caf
Con unaenmuestra
verde
el
patrn de bolas
cafena
molino
realizar
para
aumentarcurva
el
calibracin
en un
rea
de contacto
refractmetro
entre
solvente con
y
soluciones
desde
slido.
500 hasta 0 ppm
con un paso de 50
ppm.
Con
la
En un
Disponer
la
muestra
rotaevaporador
muestra
en
el
recolectada realizar
disponer las
cartucho
del
las
mismas
muestras desoxhlet.
extractor
disoluciones
y
solventes
(una por
En
el baln
del
hacer
las
una) (ver anexo
A)
extractor
disponer
mediciones en el
120 mL de solvente
refractmetro.

Pasar el caf
molido
por
una serie de
tamices tayler
que contenga
la
malla
nmero 8

Dejar evaporar
el solvente del
baln hasta que
Extracci
la cantidad sea
n de 2 mL.

Llevar
al
agitador
de
tamices la serie,
dejar agitar por
2
minutos
y
utilizar 40 g del
caf retenido en
Disponer
la
muestra en un
En
dedo frascos
fro para de
la
Realizar con cada
vidrio
con tapa
sublimacin.
solvente 4 ciclos
disponer
cada
Pesar un en
vidrio
de
de
extraccin.
uno
aparte la
reloj.por Recolectar
Dejar
enfriar,
muestra
desobre
los
los cristales
desmontar
el
tres
el vidrio solventes
de reloj.
soxhlet.
Secar
despus
de
la
Pesar la muestra
muestra de caf
extraccin
recolectada.y en
para
determinar

Preparaci
n

Purificaci
n

Identificaci
n

A la cafena
restante
agregar 1 mL
de
HNO3.
Evaporar
disolucin
en
cabina
de
extraccin.

Adicionar 1 a 3
gotas
de
disolucin
de
NH3.
Esperar
color rojizo en la
muestra
(OK
cafena)

BIBLIOGRAFA

[1]Villanueva, D., Luna, P. , Manic,M., Najdanovic-Visakb,V.,Reglero,G.,

Fornari,T.,Extraction of caffeine from natural matter using a bio-renewable
agrochemical solvent, Chem.Eng.,91 (2013) 303309.
[2] Treybal,R E.,.Operaciones de transferencia de masa.
Mxico.

McGrawHill. 2 Ed.

[3] DETERMINACIN DEL CONTENIDO GRASO DE LECHE EN POLVO:

EXTRACCIN SOXHLET, UNIVERSIDAD PABLO DE OLAVIDE, DE SEVILLA
[4] McCabe, W., Smith, J., Harriot, P.,Operaciones unitarias en ingeniera
qumica. McGrawHill. 7 Ed. Mxico. 2007.

[5] Li. Shufen, G.S. Varadarajan , Stanley Hartland, Solubilities of theobromine and
caffeine in supercritical carbon dioxide: correlation with density-based models,.
Journal of Aerosol Science Volume 21, Issue 3, 1990, Pages 453-462
[6] N.P.Vughan., The generation of monodisperse fibres of caffeine., J. Aerosol
Sci., Vol. 21. No. 3, pp. 453-462, 1990.
[7] http://www2.volstate.edu/CHEM/2010/Labs/Caffeine_Extraction.htm
[8] https://www.khanacademy.org/test-prep/mcat/physical-sciencespractice/physical-sciences-practice-tut/e/purification-of-caffeine
[9] Remington: Farmacia. Editorial Panamericana. Pagina
[10]Hiroshi K, Matajiro K, Tomoaki O. Murexide reaction of caffeine using Nitric
Acid. Faculty of Pharmaceutical Siencies, Tomoya Medical and Pharmaceutical
University.