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VERACRUZ, VER.
JULIO 2010
DEDICATORIAS
A Dios
Por permitirme realizar esta meta, por darle salud a mis seres queridos y
principalmente por cuidar a mi Pap que est en el cielo apoyndome y dndome
sus bendiciones en todo momento.
ii
AGRADECIMIENTOS
Al mdico Canseco (Yopo) por apo yarme en la presentacin del trabajo, por
aclarar mis dudas, por su apoyo, y sobre todo enorme paciencia.
A Mvz. Jacqueline Pantoja O. (Jackita) por dejarme tomar fotos a sus pacientes, y
por dejarme realizar las tcnicas necesarias para este manual, tambin por
proporcionarme informacin sobre el tema.
iii
INDICE GENERAL
Introduccin
Justificacin
Objetivo general
Objetivos especficos
1.1. Material
11
1.4. Manejo
12
1.5. Envo
12
14
2.1 Material
14
15
2.3 Conservacin
16
17
3.1. Material
17
3.2. Tcnica
17
3.3. Conservacin
19
20
4.1. Raspados
20
20
4.1.1.1. Material
20
4.1.1.2. Tcnica
21
23
4.1.2.1. Material
23
4.1.2.2. Tcnica
23
26
iv
5.1. Material
26
5.2. Tcnica
26
5.3. Conservacin
28
5.4. Tricograma
29
5.4.1 Material
29
5.4.2 Tcnica
29
30
6.1 Material
30
6.2 Tcnica
30
7. Cultivo bacteriano
32
7.1 Material
32
7.2 Tcnica
33
34
8.1 Material
34
8.2 Tcnica
35
8.3 Envo
38
39
9.1 Material
39
9.2 Tcnica
39
9.3 Tincin
40
41
42
42
10.1.1.1 Material
42
10.1.1.2 Tcnica
42
44
10.2.1 Material
44
10.2.2 Tcnica
44
46
46
46
v
47
10.3.4 Impresiones
48
50
51
51
11.3 Material
52
11.4 Tcnica
52
11.5 Envo
55
56
12.1 Tcnica
56
60
61
61
12.4.1 Material
62
63
63
64
66
67
67
13.1.1 Material
67
13.1.2 Tcnica
67
13.2 Cistocentsis
69
13.2.1 Material
69
13.2.2 Tcnica
69
13.3 Cateterizacin
71
13.3.1 Material
72
13.3.2 Tcnica
72
13.4 Conservacin
74
76
14.1 Toracocentsis
76
vi
14.1.1 Material
76
14.1.2 Tcnica
76
14.2 Abdominocentsis
79
14.2.1 Material
79
14.2.2 Tcnica
79
14.2.3 Conservacin
81
14.2.4 Envo
82
15. Bibliografas
84
vii
FIGURAS
Figura 1. Agujas
Figura 2. Tubos
Figura 7. Embrocado
10
10
13
14
16
16
16
Figura 15.Cubreobjetos
16
17
18
18
21
22
22
22
23
23
24
24
25
viii
25
Figura 29. Un cepillo dental estril puede ser empleado para recolectar pelos.
27
Figura 30. La superficie del agar es tocada delicadamente con las cerdas del
27
cepillo.
Figura 31. Inoculando el medio cultural
27
29
29
29
30
31
34
36
36
36
36
37
37
37
37
42
42
43
43
43
43
44
44
45
45
45
ix
45
47
48
53
53
54
54
55
69
71
71
71
73
74
74
77
77
77
78
78
78
78
79
80
80
68
CUADROS
Cuadro 1. Tubos para la obtencin de muestras
57
60
62
62
xi
INTRODUCCIN
JUSTIFICACIN
Aunque existe una gran variedad de libros, revistas, pginas de internet, etctera,
donde podemos encontrar tcnicas para la toma de muestras, no siempre
podemos obtenerlas en un mismo texto, y nos vemos en la necesidad de acudir a
varios, esa fue la razn por la cual se decidi realizar un manual donde explique
de manera sencilla y didctica, las tcnicas ms comunes que se utilizan en la
prctica diaria de clnica de perros y gatos.
ste trabajo rene los mtodos necesarios para la obtencin, conservacin y
envo de la muestra en un solo manual, evitando con esto que el mdico tenga
que acudir a diversos textos, que tenga como consecuencia una prdida de tiempo
que podra aplicar al paciente.
Ya que no hay material fotogrfico en un solo texto, que contenga las tcnicas
ms comunes que se practican en clnica de perros y gatos, en este manual se
incluyen imgenes, que explique detalladamente las tcnicas y procedimientos
adecuados para la toma, conservacin y envo de muestras en perros y gatos,
tanto para mdicos que estn en la prctica profesional, as como para los que
estn en formacin,
realizarla adecuadamente.
OBJETIVO GENERAL
OBJETIVOS ESPECFICOS
las tcnicas
Figura 1. Agujas
Tomado de: www.klinika-medical.del/.../venble/kanuelen.jpg
Figura 2. Tubos
Tomado de: www.proveedormedico.com/TUBOSVACUTAINER.jpeg
TAPON
ANTICOAGULANTE
SECTOR
MATERIAL
Vidrio
EDTA
Hematologa
o
plstico
Gel separador
Serologa
Vidrio
com ativador de
cogulo
bioqumica
plstico
Citrato
de
Sodio
Hematologa
(Coagulacin)
Vidrio
Siliconizado
Serologa
Vidrio
sin
anti-coagulante
bioqumica
plstico
Heparina
Sdica
Fluorato de
sdio + EDTA
Bioqumica
e
Vidrio
Inmunologa
Vidrio
Bioqumica
o
plstico
SISTEMA VACUTAINER
AGUJA.
CAMISA.
El ayudante sujetar el cuello y la cabeza del animal con una mano y con la
otra mano sujetar ambos miembros torcicos, para evitar que el perro los
mueva durante el procedimiento.
Figura 7. Embrocado
Para tomar la muestra se debe tomar con una mano el miembro torcico del
perro, de manera de evitar movimiento indeseable.
misma
apuntando
hacia
arriba,
en
un
ngulo
de
45
grados
1.5. ENVO
12
13
2.1. MATERIAL
14
2.2.
poder
extraer
la
muestra
de
excremento,
se
necesitan
15
2.3.
Conservacin
3.1. MATERIAL
Vagina artificial
Tubo recolector estril
3.2. TCNICA
Figura 16
Extremo de vagina artificial bovina, adherida a un tubo estril.
17
3.3 CONSERVACIN
19
Si se sospecha de sarna, las reas preferidas para el raspado son los hombros,
corvejones y vientre. El borde de las orejas debe rasparse minuciosamente si se
observa algn prurito o descamacin en esta rea. Alguna veces, la descamacin
es ligera y solo se hace evidente durante un examen detallado.
Debe hacrsele raspado a cualquier perro o gato con una posible demodicosis.
De esta manera, todo paciente alopcico y todo paciente con ppulas, pstulas,
costras y particularmente con pododermatitis interdigital, debe ser raspado en
busca de demodicosis. Para un raspado profundo eficaz de la piel de las patas
puede necesitarse sedacin o anestesia general.
4.1.1.1. MATERIAL
Portaobjetos
Cubreobjetos
Aceite de inmersin
Hoja de bistur
20
4.1.1.2. TCNICA
Un primer ayudante
debe
sujetar al perro
que
deber
estar en
21
22
4.1.2.1. MATERIAL
Portaobjetos
Cubreobjetos
Aceite de inmersin
Hoja de bistur
Mquina para rasurar
4.1.2.2. TCNICA
Puesto que los caros de Demdex canis y felis viven en el folculo piloso, es til
presionar la piel tan fuerte como lo tolere el paciente antes del raspado con el fin
de sacar a los caros de la profundidad de los folculos. Como se muestra en la
figura 25. [Consultado el 8 de abril del 2010].
(http//:www.ivis.org/advances/mueller/part1chap3-es/chapter.asp?LA=2).
23
24
25
Est indicado un cultivo de hongos en cualquier perro o gato con posible infeccin
por hongos y por ello en cualquier paciente con alopecia, ppulas, pstulas y/o
costras. [Consultado el 8 de abril del 2010].
(http//:www.ivis.org/advances/mueller/part1chap3-es/chapter.asp?LA=2).
5.1. MATERIAL
Portaobjetos
Hoja de bistur
Cinta adhesiva
Papel higinico
5.2. TCNICA
26
Figura 29. Un cepillo dental estril puede ser empleado para recolectar pelos.
Figuras 30 y 31. La superficie del agar es tocada delicadamente con las cerdas del
cepillo, inoculando el medio cultural. Tomado de:
(http://www.ivis.org/advances/mueller/part1chap3-es/chapter.asp?LA=2).
27
5.3 CONSERVACIN
Despus de ser inoculado, la caja de cultivo debe ser incubada entre 25C
y 30C con 30% de humedad, o en un rincn oscuro y calientito, sin cerrar
la tapa de rosca completamente hasta abajo.
28
5. 4. TRICOGRAMA
Los tricogramas pueden ser tiles en cualquier animal alopcico as como tambin
en animales sospechosos de dermatofitosis ppulas, pstulas o costras
asociadas. (Ackerman, 2008).
5.4.1. MATERIAL
5.4.2. TCNICA
Los pelos son colocados sobre una lmina y se evala con bajo aumento.
Se coloca aceite mineral y cubre objeto para prevenir que la muestra de
pelo se vuele sobre la mesa en vez de permanecer bajo el microscopio.
Figura 34.
Cualquier perro o gato con posible infeccin con Microsporum canis debe ser
examinado con la lmpara de Wood.
Cualquier paciente con alopecia, ppulas, pstulas
6.1.
MATERIAL
Lmpara de wood
6.2.
TCNICA
Los pelos invadidos por M. canis pueden mostrar una fluorescencia amarilla
verdosa. Esta fluorescencia se presenta lo largo del tallo del pelo, a
diferencia de la fluorescencia discreta de escamas individuales ocasionales
que puede verse en animales y humanos normales.
7. CULTIVO BACTERIANO
emprica
es
suficiente
en
la
mayora
de
los
pacientes.
7.1. Material
Gasas
Solucin salina
Recipiente estril
32
7.2. TCNICA
Los frotis son tomados de los canales auditivos como se describe en las
muestras para citologa. [consultado el 25 de abril del 2010].
(http://www.ivis.org/advances/mueller/part1chap3-es/chapter.asp?LA=2).
33
Se usan en sitios donde no hay fcil acceso para las otras tcnicas de coleccin,
como en el canal del odo, en la vagina, prepucio, ano, mucosa conjuntival,
mucosa oral o en lesiones fistulosas. (Feldman y Nelson, 2000).
8.1. MATERIAL
Hisopos estriles
Portaobjetos
Solucin salina
34
8.2. TCNICA
Se introduce el hisopo dentro del canal lentamente, en los pacientes con
piel seca, (Figuras 38, 39, 40, 41 y 42), el hisopo de algodn puede
humedecerse con solucin salina y frotarlo sobre la superficie de la piel
afectada antes de ser rotada sobre la lmina. (Aguilar et al, 2005).
Se hace girar rotndolo con los dedos ndice y pulgar, y se retira con
cuidado para no contaminarlo con otros tejidos.
35
36
8.3 ENVO
38
9.1. MATERIAL
Cinta adhesiva
Portaobjetos
Azul de metileno
Cubreobjetos
Aceite de inmersin
9.2. TCNICA
Luego, se presiona (de nuevo con el lado adhesivo hacia abajo) sobre una
gota de azul de metileno o tincin azul de DiffQuick sobre una laminilla.
Se presiona luego con el lado pegante hacia abajo sobre una gota de azul
de metileno sobre una lmina.
39
Se puede utilizar una coloracin de Wright modificada (por ejemplo, Diff Quick)
para colorear las laminillas secadas al aire. Es mucho ms rpida y ms fcil que
la coloracin de Gram y suficiente para evaluar casi todas las muestras citolgicas
de piel. Sin embargo, la coloracin de Gram es igualmente adecuada. (Ackerman,
2008).
40
a) Descripcin detallada
b) Breve historia clnica
c) Hallazgos relevantes del examen fsico,
d) Terapia previa,
e) Resumen de los resultados de los exmenes
f) Diagnsticos pertinentes,
g) Diagnstico tentativo, y sitio donde se tom la muestra.
h) Esta informacin es til para que patlogo realice la interpretacin.
41
10.1.1.
ASPIRACIN DE NDULOS
10.1.1.1 MATERIAL
Jeringas de 10, 12 ml y aguja calibre 21 a 25.
Mquina para rasurar
Alcohol al 70%
Torundas de algodn o gasas estriles.
10.1.1.2 TCNICA
43
10.2.1 MATERIAL
10.2.2. TCNICA
44
46
5.3.4. IMPRESIONES
Son las huellas que quedan en una laminilla cuando se pone en contacto con un
tejido. Resultan adecuadas para las lesiones externas o durante cirugas, biopsias
o necropsias. (Aguilar et al, 2005).
Cuando la lesin cutnea esta ulcerada, hay que tomar tres impresiones
antes de limpiar la lcera y tres despus de limpiarla.
48
Las impresiones se efectan hasta que el papel absorba poco lquido, esto
indica que la muestra esta lista para realizar las impresiones sobre las
laminillas.
Una vez que el tejido esta seco, se recomienda realizar varias impresiones
sobre la misma laminilla para tener mayor superficie de evaluacin.
49
Las biopsias pueden ser obtenidas mediante escisin de toda la patologa, incisin
lesional y remocin de una parte representativa o, con mayor frecuencia, con
sacabocados. Cuando se realiza el procedimiento, es importante brindar
preferencias a lesiones primarias o secundarias tempranas.
50
Si hay presencia de costras, estas deben dejarse sobre la piel. Si stas son
desalojadas accidentalmente stas deben ser colocadas en formalina y se
debe aadir una nota "por favor corte en la costra" en el formulario de
solicitud.
1. Biopsia incisional
2. Biopsia de perforacin
51
11.3. MATERIAL
11.4. TCNICA
52
53
Figura 62
El instrumento de perforacin se coloca verticalmente sobre la superficie y se hace
rotacin en una sola direccin.
Tomado de: Atlas de dermatologa en pequeos animales, Ackerman 2008.
Figura 63
La muestra es quitada sujetando su base con una pinza y cortndola.
54
Figura 64
Si la muestra de la biopsia es delgada, sta se coloca sobre un cartn o abate
11.5. ENVO
55
Cuando
las
muestras
son
predominantemente
liquidas
suelen
56
Tipo de biopsia
Piel
Escisional
Incisional
Exfoliacin (improntas)
Ndulos linfticos
perifricos
Incisional (aguja)
Escisional (impronta)
Comentarios
-Consideraciones de lugar y
tamao.
-Lesiones solitarias, mltiples
o generalizadas
-Agujas normalmente no tiles.
-Perforador de keyes.
-til en ulceraciones o
neoplasias.
-Las agujas son tiles
Escisional
Incisional (aguja fina)
Aparato reproductor:
Macho: Testculos
Exfoliacin
Incisional (aguja)
Prstata
Exfoliacin
Escisional/incisional
-Consideraciones de lugar y
tamao.
Hembra: Vagina
Escisional; incisional
Escisional
Incisional
Mamas
Exfoliacin (secreciones)
Aparato urinario:
Rin
Incisional
Escisional
Vejiga
Exfoliacin
Incisional
Hgado
Incisional
Tracto digestivo:
Cavidad oral
Exfoliacin (improntas)
Escisional; incisional
Tracto superior:
Esfago
Estmago
Tracto intermedio:
Intestino delgado
Exfoliacin
Escisional
Escisional; incisional
Escisional
Pocas veces incisional
deterioro.
-Consideraciones de tamao y
lugar
-La reseccin en forma de
cua requiere laparotoma.
-til aguja de gran calibre
(Menghini)
-Dificultad para interpretar la
aspiracin con aguja fina.
Consideraciones de tamao;
endoscopia con pinzas de
biopsia si es pequea.
Tracto inferior:
Colon
Recto
Escisional
Pocas veces incisional
Ano
Escisional; incisional
Exfoliacin (improntas)
Consideraciones de lugar y
tamao.
til si es accesible o mediante
legrado de la lesin.
Exfoliacin
Secreciones nasales o
Tracto respiratorio:
Cavidad nasal
58
Escisional; incisional
Vas areas
Exfoliacin
Escisional; incisional
Pulmones
Escisional
Incisional
59
Tipos de biopsia
Escisional
Incisional
Con trocar
Con aguja
Endoscpica
Exfoliativa
60
61
12.4.1. MATERIAL
Las agujas para realizar biopsias son de dos tipos: las de gran calibre y las de
pequeo calibre, y su longitud vara entre los 12 mm y los 15 cm.
Denominacin
Nombre
Vim-silverman
modificada
Tru-cut
14
14
Osgood
15/16
Jamshidi
15
Menghini
Hipodrmica
15
21-25
Gran calibre
Aguja fina
Muestra
Ventajas
-Poco invasivas
localizacin.
pero
depende
Desventajas
de
fina).
-Relacin coste-eficacia,
ya
que
instrumental de muestreo no es caro.
Cuando no sea posible procesar un lquido fresco sin fijar, deben realizarse
extensiones sobre portaobjetos. Si el lquido tiene una de gran densidad celular,
63
64
Las muestras histolgicas pequeas deben colocarse en una placa de Petri sobre
un soporte de espuma no vellosa o una base similar y deben humedecerse con
suero salino isotnico estril o con medio de cultivo para tejidos hasta el momento
de su fijacin, alternativamente, y si es posible, se fijan dentro de los 5-20 minutos
posteriores a su obtencin.
Las muestras grandes se colocan sobre placas o bandejas limpias y estriles (por
ejemplo, placas de petri o bandejas de acero inoxidable) antes de seleccionar las
reas que van a ser fijadas para el examen histopatolgico o utilizadas para otros
exmenes (por ejemplo, bacteriolgico o bioqumico).
Las muestras grandes siempre plantean un problema para los clnicos remitentes,
ya que el dogma tradicional de la fijacin de las muestras de tejido con formalina a
razn de un volumen de tejido por 10 volmenes de formalina, dejado de lado
por los anatomopatologos, a menudo queda anulado por el tamao y complejidad
de estas muestras. En el caso de masas bien definidas o encapsuladas, como las
neoplasias de la superficie cutnea de unos 3-4 cm de dimetro, la fijacin con
formalina a razn 1:10 todava es factible, pero permanece el problema de la
penetracin adecuada del fijador en la muestra. Si no se produce una correcta
penetracin, la muestra de tejido sufre una autolisis, lo que dificulta o imposibilita
la interpretacin histopatolgica.
El problema tiene una solucin lgica que puede aportar una informacin til
adicional para el diagnostico. En el caso de masas pequeas o de lesiones bien
definidas, nicamente con una biseccin es suficiente y la muestra puede fijarse
en forma de dos mitades (preferiblemente seccionadas de forma longitudinal). Si la
lesin debe ser dividida en dos, hay que hacerlo completa y uniformemente.
66
13.1.1. MATERIAL
67
68
13.2. CISTOCENTSIS
13.2.1. MATERIAL
69
70
13.3. CATETERIZACIN
71
13.3.1. MATERIAL
13.3.2. TCNICA
Un segundo ayudante debe limpiar con una gasa que contenga un poco de
solucin salina isotnica la punta del prepucio del perro. Con otra gasa, se
realiza el mismo procedimiento sobre la punta del pene.
72
Se retrae la piel del prepucio de manera que quede expuesta la punta del
pene y se visualice el orificio uretral, por donde se introducir gentilmente el
catter urinario, previamente lubricado con gel estril. Ver figura 70
73
13.4. CONSERVACIN
74
-Congelacin: se emplea para llevar a cabo los exmenes fsico y qumico. Este
mtodo es til cuando se van a hacer determinaciones fotomtricas o
colorimtricas como urea, creatinina y minerales.
Es muy importante que cuando se vaya a analizar una muestra que ha estado en
refrigeracin, se permita que esta alcance nuevamente la temperatura ambiente
(15-25C) para que se disuelvan los solutos que se precipitaron con la baja
temperatura. Antes de implementar cualquier tipo de terapia, es necesario realizar
un urianlisis o cualquier otra prueba de laboratorio.
75
14.1. TORACOCENTSIS
14.1.1. MATERIAL
14.1.2. TCNICA
76
78
14.2. ABDOMINOCENTSIS
14.2.1. MATERIAL
14.2.2. TCNICA
La puncin suele realizarse 1-2 cm por detrs del ombligo en la lnea media
ventral.
Se utiliza una aguja de 20-22 G, con una longitud suficiente para penetrar el
grosor de la pared abdominal, catter color negro.
14.3. CONSERVACIN
Hay que anotar el aspecto del lquido aspirado. El color y la turbidez indican la
presencia de pigmentos y de clulas respectivamente; hay que anotar y tener en
cuenta el aspecto original para poder realizar una interpretacin correcta.
(Davidson et al, 2000).
81
14.4. ENVO
Las muestras de lquidos hay que depositarlas en tubos con acido etilendiamino tetractico (EDTA) para poder realizar el recuento celular y el
examen citolgico. (Davidson et al, 2000).
adhesiva.
[consultado
el
de
mayo
del
2010].
http://www.cenavece.salud.gob.mx/.../procedimientos_basicos_en_la_toma
_de_muestras_finales.pdf.
82
No olvidar que las muestras deben estar acompaadas de una carta u oficio
en el que se especifique claramente que tipo de prueba se solicita y un
resumen clnico enfatizando la fecha de inicio del padecimiento y la fecha
de la toma de la muestra, edad y sexo, estos documentos (original y copia),
se colocan dentro del paquete en una bolsa de plstico sellada para evitar
la prdida de esta informacin.
83
15. BIBLIOGRAFIAS
LIBROS
84
MANUALES
ARTCULOS ACADMICOS
Biertuempfel, P. H. Ling. G.V. Ling G. A, <<urinary tract infection resulting from
catheterisation in healthy adult dogs>>, J Am Vet Med Assoc. 1981 May 1; 178
(9):989-91.
Smarick SD, Haskins SC, Aldrich J, Foley JE, Kass PH, Fudge M, Ling GV.
Incidence of catheter-associated urinary tract infection among dogs in a small
animal intensive care unit, J Am Vet Med Assoc. 2004 Jun 15; 224(12):193640.
Scott-Moncrieff, C.R. <<Dysuria>>, Manual of canine and feline Nephrology
and Urology; ed. J. Bain bridge y J. Elliot, B SAVA Publications, Cheltenham,
1996, p. 18-27.
85
Citologa
Veterinaria.
2010.
[consultado
el
de
abril
del
2010].
http://www.ivis.org/advances/mueller/part1chap3-es/chapter.asp?LA=2
Citologa vaginal canina. 2007. [consultado el 20 de marzo del 2010].
http://www.foyel.com/cartillas/20/citologiavaginalcanina .html.
Tubos
vacutainer.[consultado
el
10
de
marzo
del
2010].
www.proveedormedico.com/TUBOSVACUTAINER.jpeg.
Agujas vacutainer [consultado el 13 de marzo del 2010]. www.Klinikamedical.de//venble/kanuelen.jpg.
86