U

NIVERSIDAD NACIONAL DEL

ALTIPLANO PUNO
FACULTAD DE CIENCIAS
BIOLGICAS
ESCUELA PROFESIONAL DE
BIOLOGA

CURSO:
MICOLOGA CLINICA
INFORME:

AISLAMIENTO Y EVALUACION DE LA ACTIVIDAD

PARASITARIA DE BEAUVERIA BASSIANA SOBRE
INSECTOS PLAGA
DOCENTE:
Dra. Vicky C. Gonzales Alcos
PRESENTADO POR:
-

EDWIN CUTIMBO QUISPE

MABEL LUZA CUNO
YANETH ZEA QUISPE

Puno 2016
AISLAMIENTO Y EVALUACION DE LA ACTIVIDAD PARASITARIA
DE BEAUVERIA BASSIANA SOBRE INSECTOS PLAGA

INTRODUCCIN
Los hongos por lo comn son filamentosos. Los filamentos individuales se les
denominan hifas y estn rodeadas por una pared que contiene quitina como
componente principal (Deacon, 1988). Son eucariontes, hetertrofos. Se reproducen
por esporas sexuales y asexuales, no poseen cloroplasto por lo tanto su nutricin
siempre es por absorcin de sustancias orgnicas simples o elaboradas; se realiza de
dos maneras: la primera como saprofitos cuando toman materias orgnicas muertas o
en descomposicin, y la segunda como parsitos cuando se nutren de materia viva
(Bonifaz 2012). El hongo entomopatgeno Beauveria bassiana ha sido ampliamente
usado como controlador biolgico de insectos (Ferrn 1978; Charnley 1991).
Beauberia bassiana

es un hongo patgeno que fue

usado como insecticida y

tambin puede formar intima asociacin con plantas (Zhang et al. 2016). Pero cmo
actan estos hongos sobre los insectos? Los tubos germinativos en la cutcula est
sujeto a condiciones de stress ambiental, parecidas a altas temperaturas o cambios
por la exposicin a rayos UV, y a respuestas de defensa de insectos en la cutcula.
Ruptura acelerada de la cutcula puede reducir el tiempo de exposicin a estas
condiciones y as aumentar la probabilidad de una infeccin exitosa, as positivamente
que contribuyen a la virulencia del hongo (Zhang et al. 2016; Valero-Jimnez et al.
2016)
La polilla de la papa (Phthorimaea operculella) y no es ms ni menos que una
mariposa de un centmetro que vuela durante la tarde y noche. Adems de atacar a la
patata, tambin lo hace con la berenjena, el pimiento y el tomate. (Tapia and Fries
2007) la papa sufre un ataque por las larvas de Lepidoptera: Gelechiidae, (Kroschel,
Alcazar, and Poma 2009).
OBJETIVO
-

aislar el hongo presumiblemente de la especie Beauveria bassiana encontrado

en atuncolla, Puno

observar y diferenciar la actividad degradadora del hongo aislado frente a la

polilla de la papa (insecto plaga) en sus diferentes estados morfolgicos (larva
y adulto).

ANTECEDENTES
Aliaga & Cruz, 2009 realizo la investigacin de la plaga Spodoptera frugiperda
(Lepidopteroa: Noctuidae) una especie polfaga que se encuentra difundida en todos
los pases americanos, provocando grandes prdidas en los rendimientos de varios
cultivos y la plaga Aphis craccivora, para evaluar la susceptibilidad de estas dos
plagas a la cepa Beauveria bassiana, no se encontr letalidad con la cepa estudiada.
As como para las ninfas de Aphis craccivora no tuvo efecto alguno la cepa estudiada,
por lo que se concluye que la cepa Beauveria bassiana CBLE-265 no es adecuada
para el control de Plaga como Aphis Craccivora, no teniendo un efecto significativo,
como justificacin a este proyecto podemos decir que SENASA no cuenta con
informacin de la letalidad de Beauveria bassiana sobre Aphis Craccivora y
Spodoptera frugiperda, por lo que se requiere determinar la Concentracin Letal del
hongo sobre ambas plagas lo que an nos da esperanzas de poder encontrar
resultados esperados en nuestra investigacin.
Malpartida et al, 2013 afirmo que los hongos entomopatgenos constituyen una
alternativa en el manejo integrado de muchas plagas. En el cual determin la
patogenicidad del hongo Beauveria bassiana (Bals.) Vuill., para uso potencial como
agente de control biolgico contra larvas de tercer estado del defoliador del
maracuy Dione juno (Lepidoptera: Nymphalidae), una plaga importante del
maracuy. Los resultados registraron una mortalidad en las larvas de D. juno, entre
20% y 84% al cuarto da. Concluyendo que la cepa CCB-LE 262 de Beauveria
bassiana (Bb SENASA) tiene un gran potencial como controlador biolgico de D.
juno.demostrando su capacidad parasitaria lo cual aporta mucho para obtener
resultados positivos en este presente trabajo.
Cabrera & Pinedo, 1994 analizo la efectividad del hongo beauveria bassiana en el
control de algunas plagas agrcolas, se ensayaron a diferentes niveles de dosificacin
y en algunos casos en distintas pocas y niveles de pH, se obtuvieron buenos
resultados demostrando su capacidad entomopatogena la cual queremos demostrar.
Cazorla et al, 2015 realiz pruebas de bioseguridad para evaluar los posibles efectos
patognicos del aislamiento autctono LF14 de Beauveria bassiana en ratones albinos
NMRI; Asimismo, se estim el aclaramiento fngico mediante examen directo y cultivo
de muestras intranasales, y de infectividad con la toma de muestras de tejidos de
varios rganos, incluyendo un estudio histopatolgico a los 3, 7 y 14 das despus de
la inoculacin. No ocurrieron muertes ni alteraciones clnico-patolgicas discernibles,
siendo el tipo de comportamiento activonormal en el 100% de los casos. El peso
promedio corporal se increment, tanto en los animales expuestos a LF14 B. bassiana
como los controles, habiendo diferencias entre sexos (p<0.0000). No se detectaron
anormalidades en la inspeccin anatomopatolgica ni hubo reacciones tisulares de
consideracin. Solo se obtuvieron conidias viables sin germinar al da tres de la
necropsia en pulmn y trquea, sugiriendo que no existe evidencia de multiplicacin

fngica. Los resultados obtenidos permiten sugerir que el aislamiento B. bassiana

LF14 no es patognico por va inhalatoria en Mus musculus (NMRI) demostrando que
la cepa es exclusivamente un hongo entomopatogeno incapaz de producir
patogenecidad por va inhalatoria a seres humanos y animales cordados.

MARCO TEORICO
Beauveria bassiana es un hongo ascomiceto mitosprico que crece de forma natural en
los suelos de todo el mundo. Su poder entomopatgeno le hace capaz de parasitar a
insectos de diferentes especies, causando la conocida enfermedad blanca de la
muscardina. Pertenece a los hongos entomopatgenos y actualmente es utilizado
como insecticida biolgico o biopesticida controlando un gran nmero de parsitos de las
plantas como son las orugas, las termitas, las moscas blancas, los fidos, los escarabajos
o los tisanpteros.
La especie lleva el nombre del entomlogo italiano Agostino Bassi, el cual observ en
1835 la aparicin de la enfermedad muscardina sobre los cuerpos de algunos gusanos de
seda (Bombyx mori). En medios de cultivo especficos, el hongo Beauveria bassiana crece
formando un moho blanquecino.

Ciclo infectivo
El modo de accin de este hongo entomopatgeno consta de diferentes etapas. Cuando
las esporas microscpicas del hongo entran en contacto con las clulas de la epicutcula
del insecto, estas se adhirieren e hidratan. Las esporas germinan y penetran la cutcula del
insecto. Una vez dentro, las hifas crecen destruyendo las estructuras internas del insecto y
produciendo su muerte al cabo de unas horas. Tras ello, si las condiciones ambientales
son favorables, pueden emerger del cadver esporas del hongo con capacidad para ser
propagadas de nuevo y reinfectar a nuevos insectos.

Utilizacin en el control biolgico de plagas

Algunos productos basados en el poder entomopatgeno de Beauveria bassiana se estn
empleando como Insecticidas Biolgicos o Biopesticidas registrados, si bien deben tenerse
en cuenta tanto el poder patgeno de cada una de las cepas como la concentracin de los
productos y los tipos de formulacin que protegen las esporas vivas del hongo.
Actualmente, en la ciudad de Elche se est utilizando para acabar con la plaga de picudo
rojo que afecta al Palmeral de Elche, Patrimonio de la Humanidad compuesto por cientos
de miles de palmeras en entorno urbano y rural. Actualmente se utilizan como insecticidas
especficos bajos diferentes nombres comerciales. Estos pesticidas son considerados
amigables con el ambiente por su especificacin, ya que su efecto sobre los humanos,

sobre la vida silvestre, sin embargo tienen el mismo efecto perjudicial sobre los
polinizadores y sobre muchos otros insectos beneficiosos.

Mecanismo de accin

MATERIALES Y MTODOS

Recoleccin de la muestra inoculada con hongo patgeno. Fue hecha en el distrito de

atuncolla segn se detalla en el mapa en la Figura 1, la muestra fue encontrada en un
terreno abandonado en la superficie de tierra con poca humedad, luego colocada en un frasco
para su posterior uso.
Para el aislamiento del hongo fueron realizadas en una placa con agar sabouraud. Para luego
ser separadas en distintas placas con insectos recolectados de la universidad nacional del
altiplano, pero para evitar contaminacin previamente fueron desinfectados con alcohol al
70 % durante treinta segundos y enjuagndolo por 5 repeticiones con agua destilada, tcnica
usada para eliminar bacterias y hongos de una superficie comn.

Figura 1. Zona de muestreo de la primera muestra, A) mapa de Atuncolla B) lugar preciso del
muestreo (Juriapata): Latitud 1541'58.91"S; Longitud 70 8'39.06"O, creditos (kewin otazu)

Con la muestra aislada se coloca diferentes especies de insectos en una primera placa para
observar la accin de esta cepa, mientras tanto en otra placa se introduce la especie polilla de la
papa (Phthorimaea operculella) en sus estados de larva y adulto, cabe
mencionar que el agar utilizado fue Agar Sabouraud y se esper para ver la

reaccin de cada una de ellas hacia los insectos.

RESULTADOS
Figura 2. Crecimiento mayor en la larva de la polilla de la papa que en estado adulto

Figura 3. Insectos encontrados alrededor de la facultad de Ciencias Biologicas

puesto aprueba frente a la accion del hongo

El aislamiento revelo que

el hongo identificado como Beauveria bassiana encontr mayor

crecimiento en la pared de la larva en comparacin con el estado adulto probablemente porque

encontr mayor nutrimento en la cuticula, cabe destacar, que el desarrollo infectivo se suscit
entre el tercer y cuarto dia (figura 2). Asi mismo se observa una serie de colepteros infectados
por el hongo, crecimiento en aproximadamente 3 semanas (figura 3)

El crecimiento de los hongos en los insectos es como se esperaba, tal como revela en la tabla 1
y figura 2.

Tabla 1. Se aprecia actividad sobre los insectos inoculados en la placa uno, pero hay buen
crecimiento de la cepa cultivada
tiempo
da 1
da 2
da 3
Da 4

actividad sobre el
insecto

no
no
no
si

Crecimiento del cultivo Cm

3.8
3.8
3.8
4

CONCLUSIONES

Se aisl el hongo identificndolo como Beauveria bassiana mostrando halos en su

crecimiento, color blanquecino, contundencia algodonosa.

Se observ mayor actividad en la cutcula de la larva que en el estado adulto de la
polilla de la papa probablemente debido a que encontr mejor nutrimento en este
estado.

RECOMENDACIONES

Se recomienda seguir realizando estudios similares con nuevas cepas para el

control de Phthorimaea operculella y otros insectos plagas que afectan la
cosecha y por tanto al sector agricultor.

BIBLIOGRAFIA

Juan Aliaga Fuentes & Joel Cruz Gutierrez, Determinacin de las CL50 y CL90 del hongo
Beauveria bassiana CBLE-265 para EL control de las plagas Spodoptera frugiperda y Aphis
craccivora, lima.2009
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interamericana.
Deacon, J., 1988. Introduccion a la Micologia Moderna. 1 ed. Mexico: Limusa.
Dalmiro Cazorla, Maria Acosta & Pedro Morales,Evaluacin de la
Patogenicidad Inhalatoria del Micoinsecticida Beauveria bassiana LF14 en
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Jenny Malpartida, Monica Narrea & Williama Dale Larrabure, Patogenicidad de beauveria
bassiana (bals) vuill., sobre el gusano defoliador del maracuy dione juno (cramer)
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Javier Vasquez & Agustin Martos, Susceptibilidad de Spodoptera (lepidoptera:Noctuidae a
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Anpe-Per.
Valero-Jimnez, Claudio A., Harm Wiegers, Bas J. Zwaan, Constantianus J M Koenraadt, and
Jan A L van Kan. 2016. Genes Involved in Virulence of the Entomopathogenic Fungus

Beauveria

Bassiana.

Journal

of

Invertebrate

Pathology

133:

4149.

doi:10.1016/j.jip.2015.11.011.
Zhang, Chen, Wei Wang, Ruili Lu, Song Jin, Yihui Chen, Meizhen Fan, Bo Huang, Zengzhi Li,
and Fenglin Hu. 2016. Metabolic Responses of Beauveria Bassiana to Hydrogen
Peroxide-Induced Oxidative Stress Using an LC-MS-Based Metabolomics Approach.
Journal of Invertebrate Pathology 137. Elsevier Inc.: 19. doi:10.1016/j.jip.2016.04.005.

ANEXOS

Figura 4 y 5. Observacin microscpica de las conidias de Beauveria bassiana