UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO

FACULTAD DE INGENIERIA AMBIENTAL Y DE

RECURSOS NATURALES

CURSO: ANLISIS

INSTRUMENTAL

Tema: Tcnicas de muestreo para

la material biolgico.
INTEGRANTES:
Lara Romero Diego
Rojas Chavez Axel
Vergara Ventura Franco
DOCENTE:
Ing. Mara Aliaga

2015
Callao - Per

MUESTRAS BIOLGICAS
El muestreo biolgico o dosimetra interna consiste en la
determinacin cuantitativa de la concentracin del txico o sus
metabolitos en uno o ms medios corporales del organismo expuesto.
Esta informacin se usa para estimar la exposicin que experimentan
cada uno de los tejidos del cuerpo, con el fin de estimar la magnitud
de la exposicin ambiental y para demostrar que existi una
exposicin efectiva. El simple hecho de que el txico se encuentre
dentro del organismo es la prueba de que existi la exposicin.
El diseo del muestreo biolgico consiste en seleccionar el medio
biolgico que se va a muestrear, la especie qumica que se deber
analizar y el tiempo al que se deber tomar la muestra. Es necesario
asegurarse que las condiciones de muestreo sean las que
proporcionen observaciones de valores representativos del nivel del
txico en el organismo.

Factores principales que se consideran al disear el muestreo.

TIEMPO DE EXPOSICIN
El tiempo transcurrido desde la exposicin es muy importante debido
a que la concentracin del agente puede variar rpidamente con el
tiempo

MOVILIDAD Y METABOLISMO
Dependiendo de las propiedades fsico qumicas y bioqumicas del
txico ste se transportar a distintas velocidades hacia los rganos,
se acumular y se transformar a velocidades diferentes en cada uno
de los rganos en los que penetr

FACILIDAD DE MUESTREO
Se prefiere analizar los medios de los que se puedan obtener las
muestras ms fcilmente, invadiendo el organismo lo menos posible.
Se prefiere el medio en el que se encuentre la especie qumica
relevante en forma ms fcil de analizar.

Metales Pesados en las Muestra de Peces

Metales
Pesados

Contenido maximo
(mg/Kg fresco)

PLOMO (Pb)

0,03

CADMIO (Cd)

0,05

MERCURIO
(Hg)

1,0

ARSENICO
(Inorganico)

Muestreo de peces para el anlisis de Mercurio

El mercurio (Hg) es considerado histricamente como un contaminante
ambiental devastador y est situado en la lista negra de la Comunidad
Econmica Europea debido a su alta toxicidad, persistencia y
bioacumulacin en el ecosistema por lo que es considerado como un
contaminante de prioridad
El mercurio inorgnico es poco txico, pero es transformado en la cadena
trfica marina en metil mercurio, que s es muy txico. El mercurio
contamina principalmente el pescado y los productos de la pesca.
Los peces, por representar varios niveles de la cadena alimenticia acutica,
son excelentes indicadores de contaminacin por metales pesados. por
razones fisiolgicas, determinadas especies concentran el mercurio en sus
tejidos con mas facilidad que otras

La Concentracin de Mercurio en la Cadena Alimenticia Acutica

El Metil-Mercurio (MeHg), es producido por las bacterias naturales del
mercurio metlico en el fondo de lagos y ros

1) MeHg es absorbido por algas y plantas acuticas

2) Peces pequeos comen las plantas contaminadas con MeHg
3) Peces ms grandes comen los peces pequeos contaminados
Cada ves que un pez come otro se concentra ms el mercurio
4) El ser humano captura y come los pescados contaminados y
absorbe el 95% del mercurio contenido en los pescados

BIOCONCENTRACIN
Capacidad de algunos elementos o compuestos qumicos de concentrarse
(incrementar progresivamente su cantidad acumulada) en tejidos de algn
organismo vivo a causa de tener ms afinidad con tejidos de organismos
que con el medio (como el aire o agua.
Este hecho hace que los seres vivos puedan concentrar en su organismo los
contaminantes que se encuentran en el medio.
BIOMAGNIFICACIN
Ocurre cuando el contaminante se va acumulando a medida que va pasando
de un ser vivo a otro en la cadena alimentaria

BIOACUMULACIN
Es el aumento de la concentracin de una sustancia en el organismo
expuesto a partir de fuentes tanto biticas (otros organismos) como
abiticas (sol, aire agua). Por ejemplo, cuando la concentracin de una
sustancia es ms alta en los peces adultos que en los jvenes del mismo
sitio, se dice que hay bioacumulacin

EQUIPO Y MATERIAL DE MUESTREO

Bolsas de plstico de cierre hermtico

Papel de aluminio , Hieleras
Etiquetas para identificacin de muestras
Hoja de campo
Cinta mtrica o flexmetro
Cadena de custodia(donde se describen los datos del cliente, la
identificacin de las muestras, matrices, parmetros y mtodos
analticos requeridos, fechas y horas de muestreo, as como el
numero y tipo de envases a ingresar en el laboratorio.)

Recoleccin y caracterizacin de la Muestra

1. Los peces fueron colectados, los cuales fueron transportados en
Cooler con hielo hasta el Laboratorio
2. Los especmenes fueron pesados y se midi el largo y el ancho de
cada uno de ellos.
3. Los especmenes deben de estar completos, frescos y sin abrir
4. Una vez colectados retirar el el hgado y tejido muscular colocndolo
en bolsas hermticas, las cuales fueron almacenadas en congelador a
-4C, hasta el momento de realizar el anlisis respectivo. Se espera
tener mas presencia de contaminantes en el hgado que en el
msculo porque estos compuestos se acumulan en el tejido graso.
5. La metodologa empleada para la determinacin de mercurio fue el
mtodo de espectrofotometra de absorcin atmica (EEA), acoplado
la Cmara de vapor frio(Vaporiza las muestras y mide el mercurio en
el vapor )

Las branquias representan un rgano crtico para los peces, ya que

representan el principal sitio de intercambio gaseoso, contacto constante
con el ambiente externo, es el primer blanco de contaminantes transmitidos
por el agua
El hgado,es uno de los indicadores ms fiables para el deterioro de salud
de peces causada por las actividades antropognicas

En hueso, grasa, piel y escamas, las concentraciones de MeHg son las

muestras que tienden a presentar menor concentracin
En cerebro y rin las concentraciones de MeHg son menores, mientras
que en el bazo, el intestino, y gnadas, se consideran bajas
En relacin a otros rganos, diversos estudios evidencian concentraciones
altas de MeHg a nivel de tejido muscular

ESTUDIO REALIZADO PARA DETERMINAR MERCURIO EN TEJIDO

DE PECES
1. Recoleccin de muestras
Para obtener las muestras se compraron peces vivos directamente de
los pescadores locales cuando llegaban stos a tierra o bien peces
que al momento de la captura haban sido sacrificados y refrigerados
para su envo a las instalaciones de procesamiento, en cuyo caso los
datos secundarios (peso y longitud) haban sido recabados en el
momento de la pesca.
En el caso de los ejemplares ms grandes, se cortaron uno o dos
gramos de tejido a partir del filete, sin piel; estas muestras de tejido
se guardaron en bolsas dobles, se etiquetaron y congelaron a -15 C
como mnimo. Los peces ms pequeos o carpas se congelaron
intactos
2. Anlisis del contenido total de mercurio en peces
Los tejidos se digirieron en una mezcla de HNO3: cido HCl (10 mL: 1
mL) .
Se calentaron a 120 C durante cuatro horas en un tubo de Pyrex
destapado.
La parte superior del tubo se enfri con un sistema ventilador para
propiciar la condensacin de vapores y evitar la prdida de mercurio
por evaporacin.
Luego se analiz mediante fluorescencia atmica con vapor fro, que
mide el mercurio liberado luego de su reduccin por Sn(II)
Mtodo para el anlisis de la concentracin de los Metales Pesados
EN CAMPO:
En cada punto de muestreo se efectuaron capturas diurnas y
nocturnas con una red de arrastre de 12 m de abertura de trabajo y
malla de 4,5 cm.
Se seleccionaron 8 a 10 especmenes dependiendo de su peso
Despus de la colecta, los organismos fueron identificados y su
diseccin se realiz a bordo para obtener muestras de tejido
muscular.

Las muestras se almacenaron en frascos de tefln a 4C hasta su

posterior anlisis
DURANTE EN EL LABORATORIO:
Las muestras fueron secadas a 35C y se homogeneizaron en un
mortero de tefln.
Se pes 0,5 g de muestra y se coloc en un vaso de digestin,
Para luego agregar 5 mL de HNO3 suprapur Merck, 1,5 mL de HCl
suprapur Merck y 10 mL de agua tipo Milli-Q-Gradiente A10Millipore
Realizar la digestin en un horno de microondas (MARS-5, CEM)
durante 90min
Para el anlisis se utiliz un espectrofotmetro de absorcin atmica .

NORMATIVA
En Estados Unidos, la Administracin de Alimentos y Frmacos (FDA)
establece un lmite de 1.0 partes por milln (ppm) de metilmercurio
en peces marinos y de agua dulce como nivel para emprender
medidas.
Canad el lmite de contenido total de mercurio para la mayora de
las especies comerciales de peces es de 0.5 ppm, con una norma de
1.0 ppm aplicada a ciertas especies depredadoras.
Todas las especies de peces sujetas a la norma de 1.0 ppm tambin
estn incluidas en las recomendaciones sobre consumo de pescado.
El nivel de accin de la FDA de 1.0 g/g de peso hmedo para el
metilmercurio en peces se aplica con objeto de regular la venta de
pescado para consumo humano.
Recientemente, la Agencia de Proteccin Ambiental (EPA) estableci
una concentracin mxima de metilmercurio de 0.30 g/g de peso
hmedo como criterio aplicable a los residuos de tejidos de peces
para proteger la salud humana

Los lmites para los niveles permisibles de mercurio en la carne de

pescado corresponden a 0.5 mg/kg de pescado en general, pero 1.0
para algunas especies predadoras grandes como por ejemplo el
tiburn, pez espada, atn; segn lo establecido por el Codex
Alimentarius y la Unin Europea.
El limite maximo de mercurio del OMS (0.5 ppm) del 2008
MUESTRAS BIOLOGICAS EN PLANTAS

OBJETIVO:
Determinar la concentracin de contaminantes
Obtener suficiente informacin para estimar los posibles riesgos (a la
salud y el ambiente) debido al tipo de contaminante
Determinar si se requieren medidas de remediacin
FORMAS DE ABSORCION DE METALES PESADOS
Por medio del suelo
Por medio del agua de riego
Por medio del aire
Los metales pesados en plantas pueden ser
Esenciales
Algunos metales pesados como el Mn,Ni,Cu,Zn constituyen elementos
esenciales en el metabolismo de las plantas
No esenciales
Algunos son fitotoxicos como As,Cd,Hg y Pb

CUADRO : NIVELES DE CADMIO, PLOMO, COBRE Y ZINC EN

HORTALIZAS CULTIVADAS EN UNA ZONA ALTAMENTE
URBANIZADA DE LA CIUDAD DE LA HABANA, CUBA

Segn la Unin Europea

UNION EUROPEA. CONTENIDOS MAXIMOS EN METALES PESADOS EN
PRODUCTOS ALIMENTICIOS

PLOMO

Contenido mximo
(mg / Kg peso fresco)

Hortalizas, excluidas las del gnero Brassica, las

hortalizas de hoja, las hierbas frescas, las setas
y las algas marinas . En el caso de las patatas,
el contenido mximo se aplica a las patatas
peladas

0.10

CADMIO

Contenido mximo
(mg / Kg peso fresco)

Hortalizas y frutas, excluidas las hortalizas de

raz y tubrculo, las hortalizas de hoja, las
hierbas frescas, las hortalizas de hoja del
gnero Brassica, los tallos Jvenes, las setas y
las algas marinas

0.050

Hortalizas de raz y tubrculo ( excluidos los

apionabos, chirivas, salsifes y rbanos
rsticanos ), tallos jvenes ( excluido el apio).
En el caso de las patatas, el contenido mximo
se aplica a las patatas peladas

0.10

Hortalizas de hoja, hierbas frescas, hortalizas de

hoja del gnero Brassica, apio,apionabos,
chirivas, salsifes, rbanos rusticanos y las
siguientes setas: Agaricus bisporus
( champin),Pleurotus ostreatus ( seta de
ostra) y Lentinula edodes (seta shiitake)

0.20

CRITERIOS PARA EL MUESTREO

1. SELECCIN DE LAS UNIDADES DE MUESTREO

Se divide las parcelas en unidades de muestreo. Estas unidades

deben ser una superficie homognea en: cultivo, edad, variedad,
patrn, suelo, riego, tcnicas culturales, etc.
Por cada unidad es indispensable tomar una muestra. Solo en el caso
de existir una pequea zona claramente diferente al resto, para no
contaminar el resultado de la muestra no la incluya. En el caso de que
desee conocer sus valores especficos de esta parte diferente tome
una muestra aparte.

2. PARTE DE LA PLANTA

Dado que la hoja es el rgano en donde se realiza la mayor actividad

de la planta, generalmente constituye el mejor tejido para reflejar el
estado nutricional de planta. No obstante, existen otros cultivos en
donde el estado nutricional se refleja en otros rganos. Recuerde
tomar siempre el mismo tejido en una ubicacin determinada en la
planta y a una edad especfica.
Se deben de colectar estructuras reproductivas para facilitar la
identificacin.
Se debe usar guantes y proteccin adecuada para no tocar a las hojas
3. REGISTROS DE CAMPO

Identificacin del Sitio de Muestreo

Coordenadas del sitio de muestreo (lectura del GPS).
Altitud de sitio de muestreo (lectura del GPS)
Fecha y Hora de captura
Nombre de la localidad
Nombre del colector
Nombre comn y nombre cientfico
Hbito de la planta
Dimetro del tronco a la altura del pecho y a 1.3 m de altura.
Color de las flores
Profundidad de la raz
Abundancia de la planta
Caractersticas del lugar de recoleccin y ubicacin.
Tipo de suelo
Patrones de coloracin
4. TRANSPORTE Y CONSERVACION DE LA MUESTRA

Para el transporte y almacn, la muestra se mantendr en las

condiciones ms parecidas a las de campo. Pueden ser refrigeradas,
conservadas en bolsas de papel o de plstico, pero en stas el tiempo
de permanencia ha de ser el mnimo posible, ya que las reacciones
enzimticas pueden llevar a cambios en la estructura qumica.
No deben guardarse en recipientes hermticos o impermeables, que
al impedir la evaporacin de la humedad, provocan la podredumbre
de las hojas.
En la bolsa se marcar de forma clara la referencia de la parcela a la
que corresponde la muestra.
Si las hojas estn mojadas en el momento de su recogida, es
conveniente secarlas con un papel absorbente antes de introducirlas
en las bolsas.
Cuando sea necesario guardar las muestras durante un cierto tiempo,
antes de su envo al laboratorio, se pueden mantener en un frigorfico
a la temperatura de 1-4C. De cualquier forma, se recomienda que el
tiempo transcurrido entre la toma de muestras y la recepcin de
stas en el laboratorio, sea lo ms corto posible.

5. TABLAS DE CRITERIO E INTERPRETACION

6. TIPOS DE ANALISIS PRACTICADOS

QUMICO COMPLETO
Nitrgeno(N), Fsforo(P), Potasio(K), Calcio(Ca), Magnesio(Mg), Azufre(S),
Hierro(Fe), Cobre(Cu), Zinc(Zn), Manganeso(Mn), Boro(B)
ANALIS ADICIONALES
Peso Fresco(PF), Peso Seco, Aluminio(Al), Silicio(Si), Molibdeno(Mo), Cloruros
y Sodio(Na)
ANALISIS DE METALES PESADOS
Cadmio (Cd), Plomo (Pb), Mercurio (Hg), Arsnico (As), Nquel (Ni), Selenio
(Se), Cobalto (Co) y Cromo (Cr).

Anlisis de los vegetales

Absorcin atmica o plasma : inductivamente acoplado, requiere la

disolucin de las muestras mediante digestin cida. El mtodo describe la
determinacin multielemental de trazas de arsnico por espectrometra de
plasma inductivamente acoplado con detector de masas. La muestra es
introducida por nebulizacin neumtica a travs de la cmara de roco al
plasma. El aerosol de la muestra es llevado al centro del plasma de argn de
alta temperatura donde la muestra es atomizada e ionizada para producir
una nube de iones cargados positivamente. Los iones son extrados,
identificados y cuantificados mediante un analizador de masas cuadrupolo,
que puede barrer todo el rango de masas y realizar el anlisis
multielemental. Las cuentas obtenidas para un ion concreto se comparan
con la recta de calibracin para obtener la concentracin del elemento en la
muestra. Las interferencias isobricas y poliatmicas potenciales se corrigen
mediante ecuaciones de interferencias basadas en la abundancia isotpica
natural. El uso de estndar interno compensa las interferencias fsicas
como: viscosidad, tensin superficial y efecto carga en el proceso de
trasporte de la muestra al plasma y la transferencia de iones al
espectrmetro de masas

 Fluorescencia de rayos x : stas deben ser primero secadas,

pulverizadas y procesadas, realizndose el anlisis directo del polvo
obtenido o a travs de una pastilla prensada (pressed pellet). una vez
realizado este procedimiento, las muestras estn en condiciones
ptimas para la determinacin de elementos macronutrientes (calcio,
magnesio, potasio, fsforo y azufre), micronutrientes (hierro,
manganeso, cobre y cinc) y otros elementos importantes tales como
sodio, aluminio, silicio, cloruro y plomo.
La preparacin de las muestras para FrX se caracteriza por su simplicidad,
rapidez y mnima manipulacin de la muestra. otra ventaja es el reducido
tiempo de anlisis, ya que slo en unos pocos minutos se pueden
determinar cuantitativamente entre 10 a 20 elementos qumicos.

8. METODOS DE ANALISIS QUIMICO

BILBLIOGRAFIA

http://agroanalisiscr.com/foliares.html

http://www2.inecc.gob.mx/dgcenica/proname/informes/manual_de_m
etodos_de__muestreo_inecc_2013.pdf

http://agroanalisiscr.com/foliares.html

http://www.utadeo.edu.co/files/collections/documents/field_attached_
file/muestreo_para_analisis_foliares.pdf

http://biblioteca.idict.villaclara.cu/UserFiles/File/consideraciones
%20generales%20de%20las%20plantas%20medicinales/5.pdf