Cosas Sobre Cisteina Npagfuncionalizadas

FUNCIONALIZACIN DE NANOPARTCULAS DE PLATA (AgNP) CON
L-CISTENA
YULY ANDREA PRADA VARGAS
UNIVERSIDAD INDUSTRIAL DE SANTANDER

FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE QUMICA
BUCARAMANGA
2012
1
FUNCIONALIZACIN DE NANOPARTCULAS DE PLATA (AgNP)

CON L-CISTENA
Trabajo de grado presentado como requisito

Para optar el ttulo de:
Qumica
DIRECTORES
ENRIQUE MEJA OSPINO, Qumico, Ph.D.,
RODRIGO GONZALO TORRES SAZ, Qumico, Ph.D.,
CO-DIRECTORA
JOHANNA ALEXANDRA GMEZ SANTOS, Qumica, M.Sc.,
UNIVERSIDAD INDUSTRIAL DE SANTANDER

FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA DE QUMICA
BUCARAMANGA
2012
2
ENTREGA DE TRABAJOS DE GRADO, TRABAJOS DE

INVESTIGACION O TESIS Y AUTORIZACIN DE SU USO A
FAVOR DE LA UIS
Yo, YULY ANDREA PARDA VARGAS, mayor de edad, vecino de Bucaramanga,
identificado con la Cdula de Ciudadana No. 1.098.622.374 de Bucaramanga, actuando
en nombre propio, en mi calidad de autor del trabajo de grado, del trabajo de
investigacin, o de la tesis denominada(o):
FUNCIONALIZACIN DE NANOPARTCULA DE PLATA (AgNP) CON L-CISTENA
Hago entrega del ejemplar respectivo y de sus anexos de ser el caso, en formato digital o
electrnico (CD o DVD) y autorizo a LA UNIVERSIDAD INDUSTRIAL DE SANTANDER,
para que en los trminos establecidos en la Ley 23 de 1982, Ley 44 de 1993, decisin
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corresponden como creador de la obra objeto del presente documento. PARGRAFO: La
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efectos la Universidad acta como un tercero de buena fe.
Para constancia se firma el presente documento en dos (02) ejemplares del mismo valor y
tenor, en Bucaramanga , a los (27) das del mes de Febrero de Dos Mil Doce
2012
.
EL AUTOR / ESTUDIANTE:
(Firma) .
Nombre
...Verde, come quando si va in bicicletta e il vento ti

colpisce in faccia...blu come il mare...
AGRADECIMIENOS
Entrego mis agradecimientos ms sinceros a las personas que han motivado mi

crecimiento personal, mi formacin acadmica y profesional.
A mis padres, Israel y Mariela, por su amor inagotable, su apoyo incondicional y por
desear siempre para m y para mis hermanos las cosas ms grandes y hermosas.
A mis hermanos, Javier y Anglica, por su afecto y su presencia.
A mi abuela Teresa, por todas sus oraciones, por su comprensin Por creer
siempre en m. Tambin a mi ta Gloria, por todo su cario y por motivar desde muy
pequea mi crecimiento intelectual.
Ao Meu Cu Verde e Azul, pelas coisas maravilhosas Pela confiana e tudo seu
amor. Abrigada, porque voc est presente em os momentos mais importantes.
A los directores de esta investigacin:

Doctor Enrique Meja Ospino, por todas sus enseanzas y conocimiento
transmitido; por su apoyo y disposicin en la realizacin de este trabajo; por la
admiracin que despierta al ser un gran ser humano y gran cientifico.
Doctor Rodrigo Torres Saez, por su buena energa y por todos sus aportes en esta
investigacin; por ser una persona con grandes virtudes y una labor cientifica
inmensamente grande.
A Johanna Gmez, por codirigir este trabajo; por guiarme en la busqueda de
soluciones cuando la metodologa se tornaba rocosa y escarpada.
Al Laboratorio de Investigacin Rinaldi, Universidad de Puerto Rico, Recinto de
Mayagez. Por los anlisis por Microscopa de Transmisin Electrnica.
A mis compaeras del Laboratorio de Espectroscopa Atmica y Molecular: Lelys
Vargas y Lucia Novoa por sus aportes en la sntesis de nanopartculas.
TABLA DE CONTENIDO
Pg.
INTRODUCCIN.15
1. CONCEPTOS GENERALES ............................................................. 17

1.1 NANOPARTCULAS .................................................................... 17
1.2 MTODOS DE OBTENCIN DE NANOPARTCULA
METLICAS ...................................................................................... 17
1.2.1 Reduccin qumica de una sal metlica ...................... 17
1.2.2 Sntesis por mtodos de descomposicin.................... 18
1.2.3 Sntesis por micelas ..................................................... 19
1.2.4 Sntesis electroqumica ................................................ 19
1.3 ESTABILIDAD DE NANOPARTCULAS ...................................... 20
1.4 RESONANCIA DEL PLASMN SUPERFICIAL ........................... 22
1.5 POTENCIAL ZETA DE NANOPARTCULAS ............................... 23
1.6 NANOPARTCULAS METLICAS CONJUGADAS ..................... 24
1.7 L-CISTENA ................................................................................. 25
1.8 TCNICAS DE CARACTERIZACIN .......................................... 26
1.8.1 Espectroscopa ultravioleta visible (UV-Vis) ............... 26
1.8.2 Microscopa de transmisin electrnica (TEM) ........... 26
1.8.3 Dispersin de luz dinmica (DLS) ............................... 27
1.8.4 Medida de potencial zeta () ........................................ 27
1.8.5 Espectroscopa infrarroja (IR)28
2. ESTADO DEL ARTE ......................................................................... 29
3. DESARROLLO EXPERIMENTAL ..................................................... 32
3.1 PREPARACIN DE AgNP ........................................................... 33
3.2 CARACTERIZACIN DE AgNP................................................... 34
3.2.1 Espectroscopa ultravioleta visible ................................ 34
3.2.2 Dispersin de luz dinmica ........................................... 34
7
3.3 FUNCIONALIZACIN DE AgNP CON L-CISTENA .................... 36

3.3.1 Estudio del efecto de la concentracin de L-cistena .... 36
3.3.2 Estudio del efecto de la relacin volumtrica ............... 37
3.3.3 Estudio del efecto del pH .............................................. 37
3.3.4 Estudio del tiempo de interaccin Ag-Cys ..................... 39
4. RESULTADOS Y ANALISIS DE RESULTADOS .............................. 40
4.1 CARACTERIZACIN DE AgNP .............................................. 40
4.2 FUNCIONALIZACIN.............................................................. 43
4.2.1 Anlisis UV-Vis del efecto de la concentracin
de L-cistena ................................................................. 43
4.2.2 Anlisis UV-Vis del efecto de la relacin
volumtrica y el pH ........................................................ 43
4.2.3 Anlisis DLS del efecto de la relacin
volumtrica y el pH ........................................................ 53
4.2.4 Anlisis UV-Vis del tiempo de interaccin ..................... 54
de agregados Ag-Cys
5. CONCLUSIONES .............................................................................. 57
RECOMENDACIONES ...................................................................................................59
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS ...........................................................................60
ANEXOS ..............................................................................................................................64
LISTA DE FIGURA
Pg
Figura 1. Estabilizacin de NP metlicas.
21
Figura 2. Representacin del potencial zeta de una AgNP.
24
Figura 3. Esquema de metodologa implementada en la

funcionalizacin de AgNP con L-cistena.
32
Figura 4. A) Montaje de sntesis. B) Coloide de plata formado
33
Figura 5. A) Celda capilar para medicin de potencial zeta

B) Celda para medicin de tamao de partcula.
Figura 6. Parmetros estudiados en la funcionalizacin Ag-Cys.
35
36
Figura 7. Espectro UV-Vis de Coloide de plata sintetizado
40
Figura 8. Microfotografa TEM de AgNP sintetizadas.
41
Figura 9. Potencial zeta del coloide de plata sintitezado.
41
Figura 10. Tamao de partcula del coloide de plata sintetizado.
42
Figura 11. Cambio de coloracin del coloide en la funcionalizacin

con L-Cys 10mM en relacin 1:2 a diferentes valores de pH.
44
Figura 12. Espectro UV-Vis. Funcionalizacin AgNP con

L-cys 10mM a pH 1.5 y diferentes relaciones volumtricas.
45

46

47

L-cys 10mM a pH 7,5 y diferentes relaciones volumtricas.
48

49

50

L-cys 10mM a pH 1.5 en relacin volumtrica 1:2.
54

55

56
Figura 21. Esquema forma inica de la L-cistena en funcin del pH.
64
Figura 22. Espectro UV-Vis funcionalizacin Ag-Cys con

L-Cys [0,5mM] a diferentes relaciones volumtricas.
65

L-Cys [1mM] a diferentes relaciones volumtricas.
66
67

68

69
10
LISTA DE TABLAS
Pg
Tabla 1. Condiciones de medida de tamao de partcula
y potencial zeta.
35
Tabla 2. Anlisis UV-Vis de funcionalizacin Ag-Cys con

L-cys [10mM] a pH 1,5 y diferentes relaciones volumtricas.
45

46

47

48

49

50

L-cys [0,5mM] en diferentes relaciones volumtricas a pH neutro.
66

L-cys [1mM] en diferentes relaciones volumtricas a pH neutro.
67

68

69

70
Tabla 13. Anlisis por DLS y potencial zeta Ag-Cys 10mM pH 1,5.
71
11
71
71
72
72
Tabla 18. Anlisis por DLS y potencial zeta. Ag-Cys 10mM pH 11,0.
73
12
RESUMEN
TTULO: FUNCIONALIZACIN DE NANOPARTCULAS DE PLATA (AgNP) CON LCISTENA*
AUTORA: YULY ANDREA PRADA VARGAS**
PALABRAS CLAVES: NANOPARTCULAS DE

CISTENA, ENSAMBLE DE NANOPARTCULAS
PLATA,
FUNCIONALIZACIN,
L-
El presente trabajo se inici con la preparacin de AgNP por reduccin qumica de nitrato de
plata usando como reductor el borohidruro de sodio, por medio de esta sntesis se obtuvo un
sistema coloidal con distribucin estrecha de tamaos, alrededor de 13 nm de dimetro
hidrodinmico , de forma aproximadamente esfrica y termodinmicamente estables.
Las AgNP fueron funcionalizadas con L-cistena, un aminocido apolar de cadena corta con
actividad ptica. Para realizar la conjugacin efectiva de las AgNP con este aminocido fue
necesario el estudio de las condiciones experimentales requeridas en dicho proceso, como
el pH y la concentracin molar del aminocido, la relacin volumtrica y el tiempo de
interaccin.
Tanto las AgNP preparadas como los agregados, Ag-Cys, producto de la
funcionalizacin fueron estudiados y caracterizados mediante tcnicas microscpicas y
espectroscpicas como: Microscopia de Transmisin Electrnica (TEM), tcnica que permiti
conocer la forma, tamao y textura de las NP preparadas; Dispersin de Dinmica de la Luz
(DLS) por medio de la cual se medi el tamao de las nanopartculas y adicionalmente se
realizaron medidas del potencial zeta de los sistemas formados. La Espectroscopa
Ultravioleta Visible (Uv-Vis) fue empleada ya que es una tcnica til para conocer la longitud
de resonancia plasmnica de las AgNP y observar los efectos batocrmicos producto de las
interacciones Ag-Cys. De los estudios de estabilidad en el tiempo, se verific la baja
estabilidad de estos nuevos sistemas debido a la perturbacin que sufre el sistema al
adicionarse otros iones provenientes del ajuste de pH y de la misma funcionalizacin.
__________________________
*Trabajo de grado
** Facultad de Ciencias. Escuela de Qumica. Directores: Enrique Meja Ospino, Ph.D.,
Rodrigo Torres Saz, Ph.D., Codirectora Johanna Alexandra Gmez, M.Sc.
13
SUMMARY
TITLE: Functionalization of silver nanoparticles (AgNP) with L-cysteine*
AUTHOR: YULY ANDREA PRADA VARGAS**

KEYWORDS: Silver nanoparticles, Functionalization, L-cysteine, Nanoparticles assembly
This work began with the preparation of AgNP by chemical reduction of silver nitrate used as
a reducing agent sodium borohydride. By means of this synthesis was obtained a colloidal
system with narrow size distribution around 13 nm hydrodynamic diameter of approximately
spherical shape and thermodynamically stable.
The AgNP were functionalized with L-cysteine, an apolar amino acid short chain optical
activity. Effective to perform the conjugation of AgNP with this amino acid was necessary to
study the experimental conditions required in this process, such as pH and the molar
concentration of amino acid, the volumetric ratio and the interaction time. Both AgNP
prepared as aggregates, Ag-Cys, resulting from the functionalization were studied and
characterized by microscopic and spectroscopic techniques such as transmission electron
microscopy (TEM) technique yielded information on the shape, size and texture of NP
prepared; Dynamic scattering of Light (DLS) through which mediated the size of the
nanoparticles and further measurements were made of the zeta potential of the systems
formed. The Ultraviolet Visible Spectroscopy (UV-Vis) was used because it is a useful
technique to know the length of the plasmon resonance and observe the effects AgNP
bathochromic product of interactions Ag-Cys. Studies of stability over time, we verified the
low stability of these new systems due to the disruption that the system suffers from other
ions by adding the adjustment of pH and the same functionalization.
________________________
* Degree work
** Faculty of Science. School of Chemistry. Directors: Enrique Mejia Ospino, Ph.D., Rodrigo
Torres Saez, Ph.D., Codirector: Johanna Alexandra Gmez, M.Sc.
14
INTRODUCCIN
La nanotecnologa es un campo de investigacin que se ha desarrollado

desde la primera mitad del siglo XX, gracias a la invencin de materiales
nanoscpicos, fabricados a partir de metales como: oro, plata, cobre, zinc,
platino, hierro, y tambin de compuestos orgnicos como derivados
aromticos y polmeros.
Es sorprendente observar como estos agregados
metlicos no pueden ser tratados como el material macroscpico de la

misma composicin, debido a que en las nanopartculas, los electrones de
valencia se disponen en estados discretos, como consecuencia de este
confinamiento, los electrones ocupan un nmero finito de estados
energticos cuantizados; de esta manera, se pueden obtener nanopartculas
de un mismo metal con propiedades pticas, electromagnticas, qumicas, y
catalticas diferentes, ya que stas cualidades varan de acuerdo con su
tamao y morfologa, dando lugar a una amplia gama de aplicaciones en
campos como la espectroscopia, la bioqumica, la fisicoqumica, las ciencias
ambientales, la ciencia de nuevos materiales y la medicina; es por sta razn
que las nanopartculas tienen el papel ms importante en la innovacin
nanotecnolgica.
Esa dependencia de las nanopartculas, de su tamao y forma, ha llevado a
la ciencia a indagar e investigar en los mtodos de obtencin, que incluyen:
la sntesis qumica, la sntesis electroqumica, reduccin de compuestos
organometlicos,
mtodos
de
descomposicin
la
sntesis
por
microemulsin, todos estos procedimientos encaminados al obtencin de NP

con caractersticas especificas 1,2. Por otra parte, las NP se han convertido,
en una fuente de soluciones a problemas que han aquejado a la comunidad
cientfica.
1
2
A. ROUCOUX et al., Chem. Rev. (2002), Vol. 102, p. 3757-3778

S. GNTER., Nanoparticles: From theory to application (2004), Wiley.
15
Las nanopartculas de plata (AgNP) especialmente, poseen alta actividad

antimicrobiana por lo cual son utilizadas en tratamientos mdicos para
combatir bacterias causantes de enfermedades y clulas infectadas con
virus 3, 4 ; su capacidad de difusin y tamao disminuido, permiten el paso
facilitado a travs de la membrana celular, por lo cual tambin son utilizadas
como transportadores de frmacos y molculas biolgicamente activas al
interior de las clulas, un sitio que para molculas de gran peso molecular y
mayor volumen es inaccesible 5.
Las nanopartculas son comnmente usadas en la identificacin de otros
analitos por tcnicas espectroscpicas, debido a la intensificacin de las
seales que se obtienen al darse la interaccin. De este modo, se da paso a
otro campo de exploracin bastante importante para la ciencia: la
funcionalizacin de las NP metlicas con molculas orgnicas; en especial,
aquellas con grupos funcionales como alcoholes, steres, aminas, cidos,
tioles y tiosteres, y ms importante an, la conjugacin de NP con polmeros
y molculas biolgicas como: protenas, pptidos, aminocido y cidos
nuclecos; conduciendo a la existencia de millones de acoplamientos y la
aparicin de nuevos materiales con propiedades nicas, que se traduce en
la investigacin constante y exhaustiva alrededor de este campo 6,7.
C. BAKER et al., Journal of Nanoscience and Nanotechnology. (2005), Vol. 5(2), p. 244-249
J.S. KIM et al., Nanomedicine: Nanotechnology, Biology and Medicine. (2007), Vol. 3(1), p.
95101
5
S. JAISWALA et al., Journal of Antimicrobial Agents. (2010), Vol. 36 (3), p. 280-283.
6
XIA OMING DOU et al., Society for Applied Spectroscopy. (1999), Vol. 53(11), p. 14401441.
7
S.K. BASIRUDDIN et al., J. Phys. Chem. C. (2010), Vol. 114, p. 11009-11017.
4
16
1. CONCEPTOS GENERALES
1.1 NANOPARTCULAS
De acuerdo con la definicin utilizada por la IUPAC (International Union of
Pure and Applied Chemistry) 8 , una nanopartcula es una partcula cuyo
tamao se mide en nanmetros, a menudo restringida a las partculas de
tamao nano, es decir, con un dimetro entre 1 a 100 nm.
Las
nanopartculas pueden formar sistemas coloidales al estar dispersas en un

solvente.
1.2 MTODOS DE OBTENCIN DE NANOPARTCULAS MTALICAS

Existen varios mtodos para la preparacin de nanopartculas; en el caso de
NP metlicas se pueden citar:
1.2.1 Reduccin qumica de una sal metlica: Uno de los mtodos ms

antiguos y ms empleado para la preparacin de las nanopartculas, es la
reduccin qumica de sales metlicas en presencia de agentes estabilizantes
en ausencia de stos. El mecanismo de formacin de nanopartculas se
basa primordialmente, en la reduccin de la sal metlica al tomo cero
valente y seguidamente, estos tomos actan como centros de nucleacin
dando lugar a la formacin de clusters cuyo crecimiento continuar a
medida que se sigan agregando los tomos, formndose as partculas de
mayor tamao y diversas formas9.
Las ventajas del mtodo de reduccin qumica son su reproducibilidad y la
posibilidad de obtener coloides monodispersos con una distribucin estrecha
en el tamao de la partcula; logrando manipular desde la sntesis misma la
8
J.H. DUFFUS et al. IUPAC: Glossary Of Terms Used In Toxicology, 2 Edicin. Pure appl.
Chem. (2007) Vol. 79 (7), p. 11531344
9
. SIFONTES et al., Quim Nova (2010), Vol. 33(6), p. 1266-1269.
17
morfologa de las NP. Adems es un procedimiento de bajo costo y de fcil

ejecucin.
Los agentes reductores usados con mayor frecuencia van desde los cidos
orgnicos, alcoholes, polialcoholes, aldehdos, azcares hasta agentes
inorgnicos; donde la efectividad de la sntesis depende en gran medida en
el poder reductor de estos 10.
1.1.2 Sntesis por mtodos de descomposicin: Estos mtodos se basan

en la descomposicin de precursores metlicos, generalmente complejos
metlicos con grupos carbonilos que se encuentran disueltos en un solvente
orgnico.
El mtodo sonoqumico inicia con la formacin, seguida del
crecimiento y colapso de burbujas dentro de un lquido; el colapso de estas

burbujas calienta el medio hasta alcanzar temperaturas muy altas, dando
lugar
que
los
componentes
organometlicos
se
descompongan
rpidamente, liberando tomos metlicos que en presencia de agentes

estabilizantes se aglomeran y forman partculas nanomtricas 11.
La
sntesis
sonoqumica
tiene
como
dificultad
la
produccin
de
nanopartculas amorfas y polidispersas.

Otro proceso es, la descomposicin fotoqumica la cual consiste en la
reduccin de sales y complejos metlicos por accin de la radiacin de luz
ultravioleta visible, este mtodo puede combinarse con la adicin de
estabilizantes como polmeros o agentes formadores de micelas, ya que en
ausencia de estos se forman NP altamente inestables 12.
Por ltimo, se encuentra un mtodo de descomposicin basado en el
calentamiento progresivo de xidos metlicos a altas temperaturas en
presencia de solventes orgnicos y surfactantes, por el cual se originan NP
con una amplia dispersin de tamaos. Para favorecer la monodispersin
10
P.C. LEE AND D. MEISEL., J. Phys. Chem. (1982), Vol. 86, p. 3391-3395
S. KENNETH et al., J. Am. Chem. Soc. (1996), Vol. 118, p. 11960-11961
12
TAPAN K., JACS Comunication, (2004)
11
18
es necesario modular el tiempo de exposicin y la temperatura, pero tambin

la concentracin, la proporcin entre reaccionantes y en algunos casos la
adicin de semillas ms pequeas de NP 13.
1.2.3 Sntesis por micelas: Es una tcnica que tambin se conoce como
microemulsiones que consiste en la utilizacin de gotas de agua sostenidas
en una fase orgnica, donde por accin de un agente surfactante, se forma
una especie de reactor micelar, dentro del cual se lleva a cabo la reduccin
de sales metlicas previamente disueltas. Este mtodo tiene la ventaja que
el crecimiento de la nanopartcula est dado por la disponibilidad de la sal
precursora dentro de la gota, que a su vez se encuentra limitada por el
volumen de la micela, este parmetro puede ser controlado mediante la
relacin agua-surfactante de la mezcla.
La microemulsin resulta ser un
mtodo novedoso que ha permitido la obtencin de nanopartculas

monodispersas y con estructuras conocidas como ncleo-coraza.
Sin
embargo es un mtodo muy costoso, ya que antes de dar inicio a la sntesis

de la NP, es necesario un procedimiento de fraccionamiento de las micelas
formadas, para escoger los tamaos adecuados de stas 14.
1.2.4 Sntesis electroqumica: Este proceso consiste en la preparacin de

agregados metlicos en donde la fuente es una lmina de metal.
Esta
lmina se dispone en una celda electroqumica como nodo; en el nodo se

generan los cationes metlicos que se mueven hacia el ctodo formndose
tomos cero valentes, que se agregan sobre el ctodo o se precipitan,
generando NP metlicas que se dispersan en la solucin electroltica; el
control de la densidad de corriente hace posible la versatilidad de tamaos
13
S. MARTNEZ et al., Aci. (2011), Vol. 2(2), p. 47-57

S. BUENDIA ACEVES., Tesis para obtener el grado de Maestro en Ciencia en Ingeniera
Qumica. Instituto Politcnico Nacional, Mxico. 2009
14
19
que pueden obtenerse mediante esta tcnica. Los primeros en implementar

esta sntesis fueron Reetz et al,.
1.3 ESTABILIDAD DE NANOPARTCULAS

La estabilidad de las NP en suspensin, depende del carcter liofbico del
coloide, es decir, en su mayora las NP obtenidas son termodinmicamente
inestables lo cual lleva a la separacin de las fases por coagulacin y
agregacin de las nanopartculas. Sin embargo la velocidad de separacin
de las fases presentes en la suspensin puede ser tanto rpida como
infinitamente lenta.
sta tendencia de los sistemas coloidales ha sido
descrita en la teora clsica llamada DLVO por las iniciales de sus

descubridores (Derjaguin, Landau, Verweert y Overbeek) 15; la cual plantea
que la estabilidad de los coloides depende de la energa potencial total,
UDLVO, que est dada en primer lugar, por las fuerzas de repulsin
electrosttica, en segundo lugar por las fuerzas atractivas de Van der Waals
y finalmente por la energa potencial derivada del solvente, que est
relacionada estrechamente con su constante dielctrica, sin embargo sta
ltima contribucin es depreciable para la mayora de sistemas; sta teora
predice sustancialmente la estabilidad de los coloides cuando se trata de NP
en sistemas estabilizados por cargas electrostticas. Sin embargo, no toma
en consideracin el efecto mayormente significativo de la estabilizacin
estrica, que tiene lugar cuando en el medio de sntesis se incorporan
agentes polimricos y surfactantes de alto peso molecular, que se extienden
desde la superficie de la nanopartcula creando una envoltura alrededor de
ella, hasta una distancia donde la fuerza atractiva de Van der Waals ya no es
lo suficientemente grande, y por tanto suprime la atraccin entre partculas,
15
I. LEVINE. Fisicoqumica: Qumica de superficies. Vol. 2 Edicin, editorial McGraw-Hill.

Madrid (1996), p. 379405
20
de este modo, se hace posible la estabilizacin del coloide dejando de lado

las fuerzas de repulsin electrosttica 16,17.
Estos dos tipos de estabilizacin son ilustrados a continuacin en la figura 1.
(a)
(b)
Figura 1. Estabilizacin de NP metlicas. (a) Estabilizacin por fuerzas

electrostticas. (b) Estabilizacin estrica.
Muchos investigadores han reportado el uso de estos agentes estabilizantes

adicionados en la sntesis de NP, ente los mas reportados se encuentran: el
polivinil alcohol (PVA), polietilienglicol (PEG), duodecilsulfoxido de sodio
(SDS) y bromuro de celtiltrimetilamonio (CTAB), entre otros. La naturaleza
qumica de estos agentes puede ser catinica, aninica y no-inica, la cual
vara de acuerdo a la carga superficial en las nanopartculas metlicas y con
la finalidad de la sntesis 18.
16
J. ISRAELACHVILI., Intermolecular and Surface Forces. 2 Ed. San Diego (CA):

Academic Press. (1992)
17
SOMASUNDARAN et al., In Concentrated Dispersions ACS Symposium Series;
American Chemical Society: Washington, DC. (2004)
18
O. V. DEMENTEVA et al., Colloid Journal. (2008), Vol. 70(5), p. 561573
21
1.4 RESONANCIA DEL PLASMN SUPERFICIAL

El color visible que se percibe de las suspensiones coloidales, depende del
tamao de las nanopartculas, y es debido a lo que se conoce como
plasmn de superficie, definido por Aroca 19 como los cuantos, producto de
las oscilaciones de cargas superficiales, producidas por un campo elctrico
externo. El fenmeno del plasmn se observa tanto en pelculas ultra
delgadas como en nanopartculas y se relaciona estrechamente con la
cantidad de superficie.
El primero en hacer una descripcin terica del
plasmn de superficie en las nanopartculas fue Mie 20, quien predijo para las
NP, la absorcin y dispersin en la longitud visible, como suma de las
oscilaciones magnticas y elctricas.
Las observaciones espectroscpicas de NP se correlacionan, en general,
con la teora de Mie, haciendo algunos ajustes relativos a la dispersin de
tamaos y el ndice de refraccin del solvente. Por ejemplo, la dispersin en
el tamao de las partculas reales (en oposicin a las calculadas) produce un
ensanchamiento en la banda de absorcin al visible.
El mximo de absorcin del plasmn para las
AgNP
en el desarrollo
experimental se ubica en un rango entre 380-400 nm para tamaos entre 150 nm esta longitud de onda corresponde al color violeta, y es la luz que las
NP absorben. La luz que se transmite hace que el coloide se vea de un color
amarillo muy llamativo.
Cuando las AgNP se agregan, ese mximo de
absorbancia se desplaza hacia longitudes de onda ms largas, es decir tiene

lugar un comportamiento batocrmico; es por esta razn que el plasmn de
superficie es de vital importancia para la caracterizacin de nanopartculas
por anlisis en el ultravioleta visible.
19
20
R.F. AROCA R.F., John Wiley & Sons. (2006), p. 35-71

G. MIE., Ann. Phys. (1908), Vol. 25(3), p. 377445
22
1.5 POTENCIAL ZETA DE NANOPARTCULAS

Las nanopartculas de plata con tamaos entre 1-100 nm, son las que han
recibido mayor atencin debido al amplio rango de aplicaciones, ya que el
rea superficial del plasmn aumenta en la medida en que disminuye el
tamao. Las nanopartculas pueden tomar mltiples formas, sin embargo las
preparaciones ms comunes son la que conllevan a formas esfricas, ya que
resulta ms fcil la prediccin de su comportamiento frente a los fenmenos
de luz mediante la teora clsica propuesta por Mie, como se ha comentado
anteriormente.
En general las partculas dispersas en un sistema acuoso adquieren una
carga superficial.
En el caso de las AgNP sta medida, conocida como
potencial zeta, se encuentra dada por los tomos de plata no reducidos que
se ubican superficialmente en la nanopartcula, y por la adsorcin de los
iones negativos que circundan en la fase dispersante. sta carga intrnseca
de la partcula ms los iones fijos adsorbidos conforman lo que se conoce
como la doble capa elctrica. El espesor de sta doble capa es, lo que se
conoce en la teora clsica como la longitud de Debye, las cargas que
quedan por dentro de esta longitud no ejercen fuerza efectiva, por eso se
habla de apantallamiento. Las cargas superficiales modifican la distribucin
de los iones presentes, lo que da origen a una zona alrededor de la partcula
que es elctricamente diferente al medio de la suspensin. Esta zona a su
vez se divide en dos partes: una capa interior atrada fuertemente a la
partcula producto de los tomos Ag+, y que se mueve junto con la partcula,
llamada capa de Stern, y una regin exterior, que se hace difusa a medida
que aumenta la distancia desde la superficie formada por los iones negativos
absorbidos, el lmite de sta es lo que se conoce como plano de
deslizamiento o plano de corte hidrodinmico y corresponde al final de la
doble capa elctrica (Figura 2). El potencial zeta () se mide en Milivoltios
(mV) y su magnitud se correlaciona con la estabilidad coloidal; las partculas
con un alto potencial zeta, ya sea positivo o negativo, se repelern unas con
23
otras. Los valores reportados para AgNP en medio acuoso varan entre < 30 mV > +30 mV, lo cuales son considerados ptimos21,22.
Figura 2. Representacin del potencial zeta de una AgNP. Se observa la

zona interior de iones Ag+ fuertemente atrados y la zona exterior difusa de
iones negativos absorbidos. [Tomado de A. Guerrero., Santiago de Chile,
2008]
1.6 NANOPARTCULAS METLICAS CONJUGADAS

Para otorgar funcionalidad o estabilidad a las NP, stas pueden conjugarse
con diversos compuestos orgnicos. El tamao significativamente pequeo
de estos agregados les confiere propiedades de difusin y de movilidad de
gran inters en varios campos de investigacin. Para el caso de las AgNP,
se ha promovido la investigacin y la bsqueda de aplicaciones biomdicas
21
I. OLMEDO., Memoria para optar al ttulo de Qumico-Farmacutico. Universidad de Chile.

Santiago, Chile (2007)
22
Malvern Instruments. Zeta Potential Theory Zetasizer Nano Series User Manual.
Worcestershire, Inglaterra. (2004)
24
ya que, poseen actividad antibacteriana. En tales experimentos sobresale la

conjugacin de molculas orgnicas con grupos funcionales caractersticos
como lo son los aminocidos, tioles, tiosteres, cidos nucleicos, alcoholes y
otras molculas con actividad biolgica 23.
Se ha descrito que las nanopartculas metlicas, al ser sometidas a un
campo magntico oscilante, pueden absorber energa de forma eficaz,
disipando dicha energa solo al medio local, es decir, slo a lo que est
directamente unido a la nanopartculas. Partiendo de esto, los conjugados
de nanopartculas han sido usados en tratamientos de enfermedades
causadas por bacterias y para combatir virus destruyendo las clulas
directamente afectadas 24.
1.7 L-CISTEINA
La L-cistena es una aminocido de cadena corta, no cargado a pH neutro, el
cual posee una cadena lateral apolar debido a la presencia de un grupo
sulfhdrilo (-SH). El sulfhdrilo altamente nuclefilo es quien le confiere las
propiedades qumicas y reaccionantes a la cistena.
Este aminocido no
esencial (que los organismos vivos pueden sintetizarlo) es muy importante

en los procesos metablicos que tienen lugar en nuestro organismo ya que
forma una de las estructuras ms importantes, como lo es el glutation, un
tripptido constituido por glicina, cido glutmico y cistena, este pptido es el
encargado de ayudar en las tareas de desintoxicacin del hgado, siendo
principalmente el grupo SH proveniente de la cistena el encargado de
atrapar los radicales libres, metales pesados y dems productos secundarios
originados en procesos hormonales y metablicos para facilitar su
eliminacin.
La cistena por s misma, en su forma modificada N-
acetilcistena (NAC) o formando estructuras peptdicas, tiene propiedades
23
24
Q.A. PANKHURST et al. J Phys D: Appl Phys. (2003), Vol. 36(13), p. 167-181
H. WEI et al. Nanotechnolgy. (2007), Vol. 18, p. 175610
25
antioxidantes y cumple un papel muy importante en la prevencin de

enfermedades cardacas dado que evita la oxidacin del colesterol12.
1.8 TCNICAS DE CARACTERIZACIN

Dadas las propiedades pticas y electrnicas de las NP y el comportamiento
del plasmn superficial, las NP y sus conjugados pueden ser estudiados
haciendo uso de tcnicas espectroscpicas y microscpicas; de ellas, las
que se mencionan a continuacin fueron consideradas y utilizadas en el
desarrollo del presente trabajo.
1.8.1 Espectroscopa ultravioleta visible (UV-Vis): La espectroscopa UVVis, permite tener un espectro de la regin electromagntica comprendida
entre longitudes de onda de 350 a 800 nm, dando lugar a las transiciones
que involucran a los electrones de valencia. Esta regin espectral, es la
nica detectable por el ojo humano, en el cual las soluciones coloreadas
absorben selectivamente, como producto de las transiciones electrnicas de
ms baja energa 25.
1.8.2 Microscopa de transmisin electrnica (TEM): Este anlisis se

realiza en un microscopio, que utiliza un haz de electrones para visualizar un
objeto;
la
imagen
es
producto
de
la
interaccin,
los
electrones
termoinizados de bajas longitudes de onda atraviesan los tomos del

material; la pantalla que conforma este equipo est recubierta de pintura de
fluoruros, que se ilumina al ser bombardeada por los electrones, creando la
imagen en el rango de longitudes de onda del espectro visible. La tcnica de
TEM brinda informacin interna y ultraestructural de las nanopartculas 26.
25
D.A. SKOOG and J.J. LEARY., "Anlisis Instrumental". Ed. McGraw-Hill. Madrid, 2008
A. NAIK., Fundamentos del microscopio electrnico y su aplicacin en la investigacin
textil (2009)
26
26
1.8.3 Dispersin de luz dinmica (DLS): Es una tcnica ptica utilizada

para medir el dimetro de las partculas en sistemas coloidales metlicos y
polimricos con partculas de tamao nanomtrico.
instrumental
empleado
consiste
en:
A)
una
fuente
Bsicamente, el
de
luz
lser
monocromtica que incide sobre la una solucin muy diluida a analizar; B) un

fotmetro posicionado a un dado ngulo de deteccin, r, medido con
respecto a la direccin de incidencia del lser sobre la muestra, y que colecta
la luz dispersada por las partculas; y C) un correlador digital que
conjuntamente con un software especfico, permiten obtener la funcin de
autocorrelacin de primer orden de la intensidad de luz dispersada a cada
ngulo22.
1.8.4 Medida de potencial zeta (): Es una medida de la estabilidad de una

suspensin e indica el potencial que se requiere para penetrar la capa de
iones circundantes alrededor de las partculas y as desestabilizarla. Por lo
tanto, el potencial zeta es la potencia electrosttica que existe entre la
separacin de las capas que rodean a la partcula. Las medidas de potencial
zeta son hechas
usando la
tcnica llamada microelectroforesis.
Un
microscopio de alta calidad es usado para observar cmodamente las

partculas coloidales que se encuentran dentro de una cmara llamada celda
electrofortica. Dos electrodos colocados en los extremos de la cmara son
conectados a una fuente de poder crendose un campo elctrico que cruza
la celda. Las partculas cargadas presentes en el sistema coloidal migran
por efecto del campo elctrico, su movimiento y direccin estn relacionados
con su potencial zeta, el cual se calcula a partir de la movilidad
electrofortica 27
27
T. VISHAL et al., Electrophoresis (2008),Vol 29, p.10921101
27
1.8.5 Espectroscopa infrarroja (IR): Es una tcnica que se emplea para

realizar el anlisis del espectro vibracional de las molculas y de las formas
cristalinas de un compuesto. El rango espectral se encuentra entre 4000 a
600 cm-1. Los espectros de absorcin, emisin y reflexin en el infrarrojo son
resultado de distintos cambios energticos producidos por las molculas
desde unos estados vibracionales y rotacionales a otros. De este modo, se
presentan un conjunto de bandas caractersticas de la estructura del sistema
molecular, permitiendo la identificacin de grupos funcionales, interacciones,
conformaciones estereoqumicas y cristalinidad del analito 23,28.
28
L.A. CLEMENTI. Asociacion Argentina de Materiales. 2| Encuentro de Jvenes

Investigadores en Ciencia y Tecnologa de Materiales Posadas Misiones, 16 - 17
Octubre 2008
28
2. ESTADO DEL ARTE
Las bondades de las NP, especficamente las nanopartculas de plata

(AgNP) son aprovechadas en aplicaciones biomdicas como lo propone el
autor C. Baker et al, quienes en su trabajo exploran en las propiedades
antimicrobianas de la AgNPs, al intentar combatir e inhibir el crecimiento de
microorganismos como las E. coli 29; tres aos ms tarde aparece J.S. Kim y
su grupo de investigacin, quienes tambin dirigen su atencin hacia la
actividad antimicrobiana de las AgNP sobre cultivos de Levaduras, E. coli y
S. aureu; el resultado de este estudio tuvo por resultado efectos de inhibicin
en el crecimiento de levaduras y E.coli, a bajas concentraciones de AgNP
mientras que no produce efecto significativo en las S. aureu 30. El alto poder
antibacterial de la AgNP hace necesario un uso moderado de stas, ya que
ataca tanto clulas malficas como benficas de acuerdo con las
investigaciones citas, es por esto que S. Jaiswa et al, plantea en su trabajo
encapsular las AgNP con -ciclodextrin, un compuesto no txico y soluble en
medio fisiolgico, el cual crea una envoltura alrededor de la AgNP para evitar
la interaccin con clulas sanas y bacterias benficas, el ingreso a travs de
la pared celular es facilitado por efectos de quimioabsorcin; ya en el interior
de la bacteria la capsula se rompe y se liberan la AgNP, arrojando resultados
positivos en la inhibicin del crecimiento de estos microorganismos31.
El estudio de las interacciones de NP con otras molculas es tema de
actualidad, y es lo que a un grupo grande de investigadores motiva
continuamente, prcticamente el desarrollo nanotecnolgico y creacin de
nuevos materiales ha ido siempre de la mano de la produccin intelectual y
29
C. BAKER., Journal of Nanoscience and Nanotechnology. (2005), Vol. 5(2), p. 244-249

J.S KIM et al., Nanomedicine: Nanotechnology, Biology and Medicine. (2007), Vol. 3(1), p.
95101
31
S. JAISWALA et al.,Journal of Antimicrobial Agents. (2010), Vol. 36 (3), p. 280-283
30
29
cientfica de los estudiosos del tema.
Es por esto, que es de gran
importancia citar autores como: X. Oming et al 32 , quienes centraron su

inters en las interacciones con molculas biolgicas como la glicina,
realizando un estudio el efecto del pH en la funcionalizacin con AuNP y
AgNP; ellos observaron que la glicina con valores de pH igual a 6.0 y 3.9
interaccionaba fuertemente con los coloides de oro, llevando a la formacin
de agregados que en los anlisis por ultravioleta visible fueron evidentes al
presentarse una segunda banda de absorbancia entre 800-830 nm; las
observaciones en cuanto al comportamiento del coloide de plata, mostraron
fuerte interaccin con la glicina a un valor de pH igual a 2.3.
De esta manera, las investigaciones realizadas sobre lo que se conoce como

ensamble es de gran inters para la comunidad cientfica, ya que
representa la clave hacia la funcionalidad y especificidad de las NP, como lo
menciona el investigador, S.K. Basiruddin, junto con R. Nikhin, en un trabajo
desarrollado alrededor de este tema, en el cual se plantea que la conjugacin
de estos materiales con cientos de molculas diferentes ofrece la
oportunidad de indagar sobre millones de acoplamientos con una afinidad
establecida para cierto grupos de molculas como pptidos, anticuerpos,
oligonucletidos, vitaminas, etc. 33. En este aspecto convergen gran cantidad
de trabajos como el desarrollado por A. Guerrero, quien investig acerca de
las estructuras de pptidos conjugados con NP metlicas con fines
teraputicos 34 bajo la direccin y supervisin del investigador M. Kogan 35, el
cual ha dedicado sus investigaciones a profundizar en las aplicaciones
biomdicas de NP metlicas, y disear, especialmente AuNP funcionalizadas
con protenas y polipptidos con fines mdicos.
32
X. OMING et al., Society for Applied Spectroscopy. (1999), Vol. 53(11), p. 1440-1441
S.K BASIRUDDIN et al., J. Phys. Chem. C. (2010) Vol. 114, p. 11009-11017
34
A. GUERRERO., Memoria para optar al ttulo de Qumico-Farmacutico. Universidad de
Santiago, Chile 2008.
33
35
M. KOGAN et al., Nano Lett. (2006), Vol. 6(1), p. 110115
30
La aparicin constante de publicaciones en lo concerniente a este tema, y en

especial dos investigaciones divulgadas el ao pasado, las cuales son
citadas
continuacin,
han
confirmado
la
vigencia
que
tiene
la
funcionalizacin de NP de metales nobles. La primera de ellas, realizada por

Estevez-Hernadez et al, basado en el estudio de la conjugacin de AuNP con
benzoil-mercatoacetil-triglicina, que es un precursor de Thecnetium 99, un
frmaco que tiene efecto sobre la funcin tubular renal, el cual fue conjugado
con AuNP para obtener una imagen diagnostico de esta funcin renal; y por
otra parte, la conjugacin con metilester-L-cistena, un derivado de la Lcistena, como modelo en el estudio del comportamiento del grupo tiol y su
absorcin sobre la superficie de AuNP; los anlisis por ultravioleta visible,
espectroscopia Raman y por espectroscopa infrarroja revelaron la existencia
de fuertes interacciones a determinados valores de pH 36.
Y por ltimo, la investigacin realizada por A. Majzik et al, tambin en el
mismo ao, que consisti en la funcionalizacin de AuNP con L-cistena y
con fragmentos de pptidos -amiloides, asociados en algunos caso a la
enfermedad de Alzheimer37.
36
O. ESTEVEZ-HERNANDEZ et at., Journal of Colloid and Interface Science. (2010), Vol.

350, p. 161167
37
A. MAJZIK et al., Colloids and Surfaces B: Biointerfaces. (2010), p. 235241
31
3. DESARROLLO EXPERIMENTAL
La metodologa seguida para la realizacin del presente trabajo de

investigacin se encuentra ilustrada en el siguiente esquema. (Figura 3).
Caracterizacin:
UV-Vis
DLS (Tamao y Potencial zeta)
TEM
AgNP
Estudio de Parmetros:
-Concentracin
-pH
-Relacin Volumtrica
Lcistena
Agregados
producto dela
interaccin
Ag-Cys
-Caracterizacin por: UV-Vis DLS y

Potencial Zeta
-Estudio del tiempo de interaccin
Figura 3. Esquema de metodologa implementada en la Funcionalizacin de

AgNP con L-cistena.
32
3.1 PREPARACIN DE AgNP

Las AgNP fueron preparadas por reduccin qumica de una solucin 1mM de
AgNO3
usando como agente reductor, NaBH4, preparado en solucin
acuosa en una concentracin de 1mM. La solucin reductora se dispuso en

un erlenmeyer de 250 mL en un bao de hielo, registrando una temperatura
aproximada a 8C. Seguidamente se adicion la solucin de AgNO3 gota a
gota desde una bureta, como se ilustra en la figura 4.
La relacin
volumtrica entre los reactivos fue de [Reductor]/[Oxidante] igual a 3 (J.A

Creighton et al., 1978).
La reaccin se llevo a cabo bajo agitacin
magntica, con velocidad de agitacin aproximadamente de 1268 rpm.

Concluida la adicin del AgNO3, la agitacin fue suspendida.
El coloide
formado se dej durante 30 minutos en el bao del hielo y fue diluido en una
relacin 1:1.
Figura 4. A) Montaje de sntesis. B) Coloide de plata formado.
33
Todas las soluciones requeridas en el desarrollo de este trabajo fueron

preparadas con agua desionizada tipo I, con resistividad elctrica de 18.2m,
procesada en un equipo MilliQ; suministrada por el Laboratorio de
Instrumentacin Qumica de la Universidad Industrial de Santander.
3.2 CARACTERIZACIN DE AgNP

3.2.1 Espectroscopa ultravioleta visible
Se dispuso de 3 mL de coloide de plata formado, en una cubeta cuadrada de
poliestireno (Ref:DTS0012, por Malvern Instrument). El anlisis fue realizado
en un espectrofotmetro ultravioleta visible, marca SHIMADZU modelo UV2401 PC, con lmpara de deuterio y un fotomultiplicador R-928; operado en
un rango entre 300-900 nm con ancho de banda espectral de 1.0 slit. El
espectro UV-Vis de las AgNP permiti conocer la longitud de mxima
resonancia del plasmn y de esta manera tener indicios previos de la
morfologa y distribucin aproximada de tamaos de partcula presentes en
el coloide.
3.2.2. Dispersin dinmica de la luz

TAMAO DE PARTCULA
Se colocaron 1.5 mL del coloide de plata obtenido, en una cubeta cuadrada
de poliestireno (Ref DTS0012, by Malvern Instrument) como se muestra en la
figura 5. Las medidas de tamao de partcula se realizaron en un equipo
Zetasizer Nano Series marca MALVERN INSTRUMENT. De acuerdo con los
parmetros establecidos en la tabla 1.
34
POTENCIAL ZETA
Se introdujo el coloide de plata preparado en una celda capilar para potencial
zeta (Ref: DTS1061 por Malvern Instrument), como se ilustra en la figura 5.
La medida fue tomada en un equipo Zetasizer Nano Series marca MALVERN
INSTRUMENT, bajo las condiciones presentadas en la tabla 1.
Tabla 1. Condiciones de medida de tamao de partcula y potencial zeta

Nmero de mediciones
1/1
Nmero de Corridas
Mnimo 50; Mximo 100
Temperatura
25C
Dispersante
Agua
ndice Refraccin Dispersante 1,333
Figura 5. A) Celda capilar para medicin de potencial zeta. B) Celda para

medicin de tamao de partcula
35
3.3 FUNCIONALIZACIN DE AgNP CON L-CISTENA

La funcionalizacin se realiz de acuerdo al esquema presentado en la figura
6.
Se estudiaron los parmetros: concentracin de aminocido, relacin
volumtrica Ag:Cys, pH del aminocido y finalmente tiempo de duracin de la

interaccin.
Concentracin
L-cistena
Rango 0.1- 10mM
Relacin
volumtrica
AgNP a Cys
Relacin Ag-Cys 1:1 ; 1:2 ;

1:3 ; 1:5 ; 1:8
pH de
Rango de pH entre 1.5 a

11.0
Agregados Ag-Cys
L-cistena
Rango tiempo entre 1-30

minutos
Tiempo de
Interaccin
Figura 6. Parmetros estudiados en la funcionalizacin Ag-Cys
3.3.1 Estudio del efecto de la concentracin de L-cistena

Se prepar una solucin de L-cistena de concentracin 10 mM, para lo cual
se pes en la balanza analtica la cantidad en gramos requerida del
aminocido y se adicion un volumen de agua determinado.
36
De sta
solucin de partida se obtuvieron por dilucin las siguientes concentraciones:

0,5 mM; 1mM; 3mM; 5mM.
A un volumen definido de cada solucin se adicion un volumen de AgNP en
una relacin volumtrica 1:1. Cada una de ellas, fue agitada en un agitador
magntico a una velocidad aproximada de 1078 rpm durante 10 minutos.
Cada uno de los agregados, Ag-Cy, fueron analizados por espectroscopa
ultravioleta visible con el fin de detectar algn cambio en la banda de
resonancia plasmnica del coloide por efecto de la presencia de L-cistena a
diferentes concentraciones.
3.3.2 Estudio del efecto de relacin volumtrica

Se mantuvo fija la concentracin de aminocido en un valor de 10mM; la cual
mostr fuertes interacciones con el coloide, dando lugar a la aparicin de una
segunda banda de absorcin a mayores longitudes de onda en el espectro
UV-Vis.
Las relaciones volumtricas que se estudiaron fueron 1:1; 1:2; 1:3; 1:5 y 1:8.
A un volumen fijo de solucin de L-cistena se adicion otro volumen
establecido de AgNP que cumpliera con cada una de las relaciones
mencionadas. Los agregados formados, Ag-Cys, fueron analizados por UVVis. Debe considerarse que en todos los ensayos se observ interaccin,
siendo la relacin 1:2 la escogida, ya que mostr un espectro con mayor
definicin en los picos, el espectro UV-Vis present claramente la longitud de
onda correspondiente a los agregados producto de la funcionalizacin.
3.3.3 Estudio del efecto del pH

Ya establecidas, la concentracin de aminocido y la relacin volumtrica
Ag:Cys.
Se estudio el efecto del pH, para tal fin fueron preparadas

37
soluciones de L-cistena de concentracin 10mM a las que se ajusto el pH

con HCl concentrado y NaOH al 99% p/p. Los valores de pH estudiados
fueron (Seccin de anexos, figura A1. Formas inicas de la L-cistena en
funcin del pH):
pH igual a 1,5; que es un valor inferior al pka1 de la L-cys, al cual el

grupo -carboxilo an se encontrar protonado.
pH igual a 3,0; que es un valor por encima del pKa1, a este valor el
grupo -carboxilo se encontrar desprotonado.
pH igual a 6,0; que es 0,5 unidades por encima del punto isoelctrico
del aminocido, el cual se encontrar con carga neta igual a cero.
Prevalecer la forma zwitteinica.
pH igual a 7,5; que es un valor cercano al pH fisiolgico en sangre.
pH igual a 8,6; valor por alrededor del pKa3, al que ocurre la

desprotonacin del grupo lateral sulfhdrilo.
Y finalmente un pH igual a 11,0; cercano al pKa2, al cual el grupo amino sufre la desprotonacin.
Estos ensayos se realizaron bajo agitacin magntica a una velocidad de

agitacin aproximada a 1078 rpm. La funcionalizacin se realiz durante 10
minutos a una temperatura de 18 C.
Los agregados producto del
acoplamiento Ag-Cys fueron caracterizados por UV-Vis, as como por DLS

para medir el tamao de las partculas y conocer el valor de potencial zeta
para cada uno de los sistemas formados.
38
3.3.4 Estudio del tiempo de interaccin Ag-Cys

Los agregados de Ag-Cys formados a los valores de pH establecidos
anteriormente, fueron analizados por ultravioleta visible.
Se recolectaron
espectros UV-Vis durante un tiempo de 30 minutos para cada uno de los

ensayos, con el fin de establecer la susceptibilidad e inestabilidad de la
interaccin Ag-Cys en estos sistemas.
39
4.
RESULTADOS Y ANALISIS RESULTADOS
4.1 CARACTERIZACIN DE AgNP

El espectro UV-Vis obtenido del coloide de plata cuya coloracin
caracterstica fue amarillo intenso, es presentado en la figura 7. En l puede
observarse la longitud de onda de mxima absorbancia de plasmn a 396
nm caracterstica para partculas esfricas con una distribucin de tamaos
inferiores a 50 nm, la intensidad de la absorbancia fue de 1,46 unidades.
El pico presenta una forma bien definida, con alta simetra y una lnea base
bastante ceida al lmite inferior con denominacin cero, esto indica una
distribucin estrecha de tamaos de partculas.
Para asegurar esto se
realizaron los anlisis correspondientes a TEM y DLS, las microfografas

corroboraron la presencia de partculas de morfologa esfrica (figura 8) con
una distribucin estrecha de tamaos inferiores a 20 nm. Los anlisis por
DLS mostraron radios hidrodinmicos comprendidos entre rAg = 1,6 nm
(6,7%) y rAg = 13,5 nm (93,7%).
Figura 7. Espectro UV-Vis de Coloide de plata sintetizado

40
Figura 8. Microfotografa TEM de AgNP sintetizadas
Figura 9. Potencial zeta del coloide de plata sintitezado
41
Figura 10. Tamao de partcula del coloide de plata sintetizado
Adicionalmente, el sistema coloidal registro un potencial zeta de -36 mV

como puede ser observado en la figura 9.
Esta medida indica que la
suspensin es termodinmicamente estable, en un lapso de tiempo

considerable, ya que las fuerzas de repulsin electrostticas que deben
vencer las partculas para acercarse y aglomerarse son significativamente
altas, dentro de un rango especifico de < -30 mV y > 30 mV16.
42
4.2 FUNCIONALIZACIN
4.2.1 Anlisis UV-Vis del efecto de concentracin

Los resultados obtenidos han sido condensados en las figuras A2-A6 en la
seccin de anexos.
Se incluyen los espectros UV-Vis para las
concentraciones de L-cistena de 0.5mM, 1mM, 3mM, 5mM y 10mM

funcionalizadas con AgNP a diferentes relaciones volumtricas.
Los resultados obtenidos mostraron que existe interaccin en cada uno de
los
ensayos
realizados,
en
algunos
caso
se manifiesta
como
el
desplazamiento de la longitud de onda desde los 396 nm que fue la

registrada para el coloide de plata inicialmente, hacia longitudes de onda que
van hasta los 415 nm.
Este efecto batocrmico indica el crecimiento y
agregacin de las nanopartculas bajo las condiciones trabajadas. En otros

casos puede apreciarse la aparicin de un hombro al lado derecho del pico,
tambin dirigido hacia longitudes de onda mayores.
Por observacin de los comportamientos presentados en los espectros UVVis se escogi la concentracin de L-cistena 10mM, ya que se lograron
resultados ms evidentes de la interaccin, por los efectos batocrmicos
observados, lo cual coincide con lo reportado por otros autores31.
4.2.2 Anlisis UV-Vis del efecto de la relacin volumtrica y el pH

En la fotografa mostrada en la figura 11 puede observarse los cambios de
coloracin registrados a estos valores de pH.
43
Figura 11. Cambio de coloracin del coloide en la funcionalizacin con LCys 10mM en relacin 1:2 a diferentes valores de pH
A continuacin se presentan los espectros UV-Vis de la funcionalizacin de

L-cys 10mM a los diferentes valores de pH estudiados, variando la relacin
volumtrica anteriormente descrita, tambin se muestra la informacin en
forma de tablas para las longitudes de onda con su respectiva absorbancia y
los valores de potencial zeta y tamao de partcula medido para cada uno de
los nuevos sistemas estos ltimos incluidos en la seccin de anexos. Los
anlisis por DLS y UV-Vis se realizaron simultneamente, despus de
transcurridos 10 minutos de agitacin magntica a una velocidad aproximada
de 1078 rpm para cada ensayo.
44
Figura 12. Espectro UV-Vis. Funcionalizacin AgNP con L-cys 10mM a pH

1,5 y diferentes relaciones volumtricas a pH aproximadamente neutro
Tabla 2. Anlisis UV-Vis de funcionalizacin Ag-Cys con L-cis [10mM] a pH

1,5 y diferentes relaciones volumtricas
ENSAYO
1(nm) Abs(uni)
2 (nm) Abs(uni)
*AgNP
396
1,476
Ag-Cys. Relacin 1:1
390
0,247
596
0,242
Ag-Cys. Relacin 1:2
323
0,111
607
0,111
Ag-Cys. Relacin 1:3
393
0,173
598
0,177
Ag-Cys. Relacin 1:5
401
0,117
582
0,126
Ag-Cys. Relacin 1:8
397
0,174
577
0,174
45


ENSAYO
1(nm) Abs(uni)
2 (nm) Abs(uni)
*AgNP
396
1,476
Ag-Cys. Relacin 1:1
419
0,602
Ag-Cys. Relacin 1:2
415
0,328
572
0,329
Ag-Cys. Relacin 1:3
405
0,235
565
0,212
Ag-Cys. Relacin 1:5
391
0,144
587
0,130
Ag-Cys. Relacin 1:8
394
0,118
574
0,102
46


ENSAYO
1(nm) Abs(uni)
2 (nm) Abs(uni)
*AgNP
396
1,476
Ag-Cys. Relacin 1:1
400
0,610
Ag-Cys. Relacin 1:2
400
0,437
Ag-Cys. Relacin 1:3
398
0,321
Ag-Cys. Relacin 1:5
398
0,221
Ag-Cys. Relacin 1:8
395
0,166
47

7,5 y diferentes relaciones volumtricas.

ENSAYO
1(nm) Abs(uni)
*AgNP
396
1,476
Ag-Cys. Relacin 1:1
397
0,595
Ag-Cys. Relacin 1:2
396
0,535
Ag-Cys. Relacin 1:3
394
0,251
Ag-Cys. Relacin 1:5
397
0,220
Ag-Cys. Relacin 1:8
397
0,186
48
2 (nm) Abs(uni)


ENSAYO
1(nm) Abs(uni)
*AgNP
396
1,476
Ag-Cys. Relacin 1:1
398
0,608
Ag-Cys. Relacin 1:2
395
0,387
Ag-Cys. Relacin 1:3
393
0,238
Ag-Cys. Relacin 1:5
397
0,209
Ag-Cys. Relacin 1:8
396
0,191
49
2 (nm) Abs(uni)


ENSAYO
2 (nm) Abs(uni)
396
1,476
Ag-Cys. Relacin 1:1
399
0,131
563
0,130
Ag-Cys. Relacin 1:2
396
0,175
557
0,177
Ag-Cys. Relacin 1:3
396
0,120
553
0,107
Ag-Cys. Relacin 1:5
396
0,106
556
0,094
Ag-Cys. Relacin 1:8
394
0,094
554
0,080
AgNP
1(nm) Abs(uni)
Datos obtenidos para el coloide de plata sintetizado inicialmente.
50
Como puede observarse en los espectros UV-Vis registrados, el parmetro

ms influyente en la funcionalizacin es el pH del aminocido.
A un pH igual 1,5; valor por debajo del pka1 (1.9), es atribuida una carga
positiva (+1) al aminocido, producto del estado protonado del grupo -amino
(-NH+3); adicional a esto, el grupo -carboxilo se encuentra an en su forma
inica protonada.
Dados estos parmetros, ha de esperarse que la
interaccin con estos dos grupo no sea favorecida significativamente, ya que

las AgNP con superficie electropositiva tendrn mayor afinidad por grupos
funcionales de naturaleza nucleoflica, de este modo ser mucho ms factible
la absorcin de las molculas de L-cistena a travs su grupo lateral libre
sulfhdrilo (-SH), que pese a no encontrarse an ionizado es un grupo
altamente donador de electrones.
La funcionalizacin bajo este pH se
evidenci por un cambio de coloracin en la solucin, desde amarillo a

morado y finalmente permaneci con una coloracin rosada.
En el espectro UV-Vis (figura 12) se observa la disminucin en la
absorbancia correspondiente a la banda de resonancia plasmnica del
coloide de plata, y tambin se hace evidente la aparicin de una segunda
banda de absorcin entre 577-607 nm, de acuerdo con la relacin
volumtrica usada. ste comportamiento en el espectro, indica la presencia
de agregados Ag-Cys que bajo este valor de pH ha sido favorecida.
Por otra parte, s aumentamos un poco el pH a un valor igual a 3,0; por
encima del pKa1, el grupo -carboxilo se encontrar en su forma
desprotonada, otorgando al aminocido una carga neta igual a cero.
El
anlisis UV-Vis mostr un comportamiento similar al alcanzado con un pH

igual a 1,5. Sin embargo a este valor de pH igual a 3,0 la interaccin de las
molculas del aminocido es favorecida para dos grupos funcionales, tanto
para el carboxilato (COO-) como por el sulfhdrilo (-SH). La funcionalizacin
a este valor de pH, dio como resultado una solucin de coloracin rosada
intensa que con el tiempo se fue debilitando y la aparicin de una segunda
51
banda de absorcin ubicada alrededor de 575-587 nm que se observa en el

espectro UV-Vis (figura 13).
Al evaluar un pH igual a 11,0; valor por encima de los tres pKa; el
aminocido
tendr
atribuida
una
carga
neta
(-2)
producto
de
la
desprotonacin que sufren: el grupos -amino, -carboxilo y el sulfhdrilo.

Este comportamiento inico de las molculas de L-cistena favorece tres
posibles interacciones con las AgNP. Siendo la interaccin con el grupo amino la menos favorecida por el impedimento estrico causado por los
tomos de hidrogeno enlazados al nitrgeno, este ltimo, quien sera el
donador de electrones.
Los resultados obtenidos para los valores de pH iguales a 6,0 y 7,5, cercanos
a la neutralidad,
mostraron interacciones muy dbiles, no se observ la
presencia de otras bandas de absorbancia diferentes a las del coloide, sin

embargo se dio lugar al ensanchamiento del pico y disminucin de la
abosrbancia de ste, lo cual puede indica el crecimiento de las
nanopartculas y la formacin de agregados.
A los valores de pH
mencionados se presenta en gran medida el comportamiento zwitteinico del

aminocido, lo que dar lugar a fuertes interacciones intermoleculares de las
molculas de L-cistena en solucin.
Por tanto, la interaccin que pueda existir entre molculas de L-cys y AgNP
es dbil y favorecida en menor proporcin comparada con otros valores de
pH.
Al fijar el pH en 8,6; muy cercano al pKa3, al cual el grupo sulfhdrilo se
encuentra en su forma desprotonada, dando al aminocido una carga neta
(-1).
El anlisis por ultravioleta visible mostr el ensanchamiento de los
picos, lo cual est relacionado como ya se ha mencionado al crecimiento y

agregacin de las NP.
Sin embargo se observ que para las relaciones
volumtricas 1:2 y 1:3 aparece un hombro a lado derecho del pico, atribuido
a la interaccin Ag-Cys que puede tener lugar. Este pH en comparacin con
52
valores cidos, no mostr interacciones fuertes, posiblemente como

resultado de la abundancia de iones OH- que resultan ser ms lbiles en la
absorcin de iones negativos sobre la superficie de AgNP.
4.2.3 Anlisis DLS del efecto de la relacin volumtrica y el pH

Los anlisis por DLS confirmaron la formacin de agregados, Ag-Cys, en los
cuales se observ el crecimiento elevado de las partculas, ya que el coloide
de plata de partida present dimetros de 1,6 nm en un 6,7% y 13,4 nm en
un 93,3%. Como producto de la funcionalizacin se alcanzaron dimetros
desde 210-300 nm para L-cys a pH 1,5; 180-685 nm para L-cys a pH 3,0;
266-414 nm para L-cys a pH 11,0. Los agregados presentes en los sistemas
a pH 6,0; 7,5 y 8,6 presentaron distribuciones de tamaos muy amplias y
polidispersin en las medidas, entre las cuales se observan dimetros an
alrededor de 6,5-169 nm para L-cys a pH 6,0; 1-300 nm para L-cys a pH 7,5;
2-212 nm para L-cys a pH 8,6. (Esta informacin se recopilo a manera de
tablas en la seccin de Anexos)
El efecto del pH fue altamente significativo sobre las fuerzas de repulsin
electrostticas, por las cuales se estabiliz el coloide de plata formado; la
presencia de iones H+ provenientes de la soluciones acidas del aminocido,
extraen y equilibran muchos de los iones OH- que en un principio fueron
absorbidos por la superficie de las AgNP, este efecto crea una
descompensacin y por ende la inestabilidad del coloide; por otra parte, la
presencia de ms iones OH-, aumenta la cantidad de iones absorbidos y por
tanto el potencial zeta del sistema tomar valores ms negativos.
Este
comportamiento es observado en las mediciones de potencial zeta para cada

uno de los ensayos realizados, los cuales se presentan a manera de tablas
en la seccin de anexos.
53
4.2.4 Anlisis UV-Vis de la estabilidad en el tiempo de la interaccin

Ag-Cys
El estudio cintico se inici 1 minuto despus de haber introducido la
muestra en el espectrofotmetro.
La adquisicin de espectros se realiz
cada 5 minutos hasta alcanzar un tiempo total de 30 minutos, acumulando un

total de 7 espectros.
Para estos ensayos se considero la relacin
volumtrica 1:2. Se escogi los valores de pH iguales a 1,5; 3,0 y 11,0

respectivamente.

1,5 en relacin volumtrica 1:2
54

55

En los anlisis UV-Vis se observ la fuerte tendencia en la disminucin de la

absorbancia para los ensayos realizados en un lapso de tiempo de 30
minutos.
Esta disminucin es producto de la inestabilidad de las
interacciones electrostticas que tienen lugar en la funcionalizacin.
La
presencia de otros iones circundantes, tanto negativos como positivos

generados en la sntesis de la AgNP, y los provenientes del proceso de
funcionalizacin y los ajustes de pH con cido y base, influyen drsticamente
sobre la estabilidad del sistema ya que modifican las fuerzas electrostticas
que all tienen lugar, beneficiando la agregacin y sedimentacin de las
partculas en un corto periodo de tiempo.
56
5.
CONCLUSIONES
La efectividad de los procesos de funcionalizacin de nanopartculas de plata

con aminocidos est directamente relacionada con el control estricto que se
realice sobre los parmetros experimentales, como lo es, especialmente el
pH.
Ya que bajo ciertos valores ser favorecida en gran medida o
medianamente, la interaccin entre la AgNP con alguno de los grupos

funcionales presentes en la molcula, no solo por la forma inica del
aminocido dependiente del pH, sino adems por el efecto significativo que
tiene este parmetro sobre los valores de potencial zeta del sistema. Las
nanopartculas
de
plata
absorbieron
satisfactoriamente
los
grupos
funcionales donadores de electrones como lo son la forma desprotonada del

grupo -carboxilo y el grupo sulfhdrilo, sin embargo puede existir clara
competencia entre ellos, o an ms, ambos grupos pueden estar siendo
absorbidos simultneamente, cuando el valor de pH del medio supera el
pKa1 (1,9). La experimentacin a valores de pH bsicos, tambin favoreci
el acoplamiento entre las molculas del aminocido y las NP.
Por medio de este trabajo se logr establecer un mnimo de concentracin
molar para la L-cistena, que bajo las condiciones trabajadas arroj
resultados ptimos para la funcionalizacin, sin embargo debe considerarse
que prcticamente para un rango entre 0,5-10mM se observ una respuesta
positiva frente a la conjugacin con AgNP, siendo la mayor concentracin
dentro de este rango, la que brindo apreciaciones ms significativa de los
fenmenos que tiene lugar en dicho proceso.
En cuanto a la relacin
volumtrica se puede inferir que a medida que las se aumenta esta relacin,
las intensidades de absorbancia tanto para el coloide de plata, como para los
conjugados formados disminuyen.
Este comportamiento se relaciona
directamente con el efecto que tienen la presencia de contra iones, H+

circundantes, para el caso de valores de pH cido, estos iones aumentan en
la medida en que es adicionada ms solucin de L-cistena, los cuales
57
equilibran los iones negativos presentes en lo que se conoce como la capa

difusa de iones absorbidos, reduciendo la distancia de sta, lo cual conlleva
finalmente a la reduccin de las fuerzas de repulsin electrostticas y por
ende la agregacin y sedimentacin.
Es imprescindible para estos estudio de funcionalizacin, hacer uso de las
tcnicas espectroscpicas como: ultravioleta visible, la cual permiti
profundizar acerca de los efectos significativos sobre la longitud de
absorbancia del plasmn que tiene lugar por cambios en de los parmetros
de funcionalizacin; UV-Vis es una tcnica rpida, no destructiva que fue
utilizada en este trabajo para realizar un seguimiento continuo en cada uno
de los experimentos realizados. El uso de tcnicas microscpicas como:
microscopia de transmisin electrnica y dispersin de luz dinmica, son de
gran utilidad en el momento de caracterizar sistemas coloidales, permitiendo
el anlisis profundo de la estructura, tamao y morfologa de las partculas
presentes en dichos sistemas.
Adicionalmente, las medidas de potencial
zeta son una herramienta eficaz para predecir la estabilidad termodinmica

de las nanopartculas as como de los agregados funcionalizadas.
58
RECOMENDACIONES
Es necesario estandarizar un mtodo de sntesis de nanopartculas de

plata por reduccin con borohidruro de sodio, que permita ejercer el
control estricto sobre las variables del proceso de reduccin, para as
obtener con precisin NP con tamao y forma especificas.
Para investigaciones futuras en el campo de la funcionalizacin de

aminocidos, s se desea orientar el acoplamiento de las NP con un sitio
especfico de la molcula, especialmente, la interaccin con el grupo
sulfhdrilo, (SH), se recomienda usar derivados del aminocido que
tengan el grupo -carboxilo metilado; esto evita significativamente la
competencia de estos dos grupos donadores de electrones por ser
absorbidos sobre la superficie de las nanopartculas.
59
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63
ANEXOS
FORMA IINCA DE LA L-CISTENA EN FUNCIN DEL pH
Carga Neta = +1
Carga Neta = 0
SH
CH2
CH
OH
SH
CH2
+ NH3
CH
pH > pK1
CH2
CH
+ NH3
pH < pK1
+ NH3
CH2
CH
NH2
pK3 < pH < pK2
pH > pK2
Carga Neta = -1
Carga Neta = -2
pK1 = 1,9 (-COOH)

pK2 = 10,8 (NH2)
pK3 = 8,3 (-SH)
Figura 21. Esquema forma inica de la L-cistena en funcin del pH.
64
ESPECTROS UV-Vis PARA LA FUNCIONALIZACIN DE AgNP CON LCISTENA DE DIFERENTE CONCENTRACIN MOLAR.
Figura 22. Espectro UV-Vis funcionalizacin Ag-Cys con L-Cys [0.5mM] en

diferentes relaciones volumtricas
Tabla 8. Anlisis UV-Vis de funcionalizacin Ag-Cys con L-cys [0,5mM] en
diferentes relaciones volumtricas a pH neutro
ENSAYO
Mx, (nm)
Abs, (unidades)
*AgNP
396
1,476
Ag-Cys. Relacin 1:1
408
0,550
Ag-Cys. Relacin 1:2
408
0,406
Ag-Cys. Relacin 1:3
412
0,261
Ag-Cys. Relacin 1:5
415
0,192
Ag-Cys. Relacin 1:8
414
0,131
*Datos obtenidos para el coloide de plata sintetizado inicialmente.

65
Figura 23. Espectro UV-Vis funcionalizacin Ag-Cys con L-Cys [1mM] en

diferentes relaciones volumtricas
Tabla 9. Anlisis UV-Vis de funcionalizacin Ag-Cys con L-cys [1mM] en

ENSAYO
Mx, (nm)
Abs, (unidades)
*AgNP
396
1,476
Ag-Cys. Relacin 1:1
397
0,630
Ag-Cys. Relacin 1:2
397
0,586
Ag-Cys. Relacin 1:3
401
0,374
Ag-Cys. Relacin 1:5
402
0,218
Ag-Cys. Relacin 1:8
402
0,182
66


ENSAYO
Mx, (nm)
Abs, (unidades)
*AgNP
396
1,476
Ag-Cys. Relacin 1:1
398
0,621
Ag-Cys. Relacin 1:2
395
0,450
Ag-Cys. Relacin 1:3
401
0,260
Ag-Cys. Relacin 1:5
401
0,243
Ag-Cys. Relacin 1:8
399
0,195
67


ENSAYO
Mx, (nm)
Abs, (unidades)
*AgNP
396
1,476
Ag-Cys. Relacin 1:1
397
0,663
Ag-Cys. Relacin 1:2
398
0,369
Ag-Cys. Relacin 1:3
396
0,313
Ag-Cys. Relacin 1:5
395
0,270
Ag-Cys. Relacin 1:8
394
0,147
68

diferentes relaciones volumtricas a pH neutro.

ENSAYO
Mx, (nm)
Abs, (unidades)
*AgNP
396
1,476
Ag-Cys. Relacin 1:1
397
0,663
Ag-Cys. Relacin 1:2
398
0,369
Ag-Cys. Relacin 1:3
396
0,313
Ag-Cys. Relacin 1:5
395
0,270
Ag-Cys. Relacin 1:8
394
0,147
69
TABLAS DE POTENCIAL ZETA Y TAMAO DE PARTICLULA MEDIDO A

DIFERENTES VALORES DE pH Y A DIFERENTES RELACIONES
VOLUMTRICAS DE AgNP A L-CYS
Tabla 13. Anlisis por DLS y potencial zeta. Ag-Cys 10mM pH 1,5
Ensayo
dimetro, (nm)
Potencial Zeta (mV)
Ag-Cys. Relacin
1:1
300 (100)*
-0,0043
Ag-Cys. Relacin
1:2
254 (100%)*
-10,4
Ag-Cys. Relacin
1:3
223 (100%)
12,4
Ag-Cys. Relacin
1:5
210 (100%)
4,5
Ag-Cys. Relacin
1:8
240 (100%)*
0,056
Ensayo
dimetro, (nm)
Potencial Zeta (mV)
Ag-Cys. Relacin
350 (93,2%);
-0,106
1:1
73,7(6,8%) *
Ag-Cys. Relacin
685 (100%) *
-23,6
1:2
Ag-Cys. Relacin
180 (100%)
0,0277
1:3
Ag-Cys. Relacin
524 (100%)
16
1:5
Ag-Cys. Relacin
467 (100%)
0.00456
1:8
Ensayo
dimetro, (nm)
Potencial Zeta (mV)
Ag-Cys. Relacin
1:1
16,9(47,2%);
46,9(27,7%)
56,5(24,8%);
-34,6
70
Ag-Cys. Relacin
1:2
Ag-Cys. Relacin
1:3
Ag-Cys. Relacin
1:5
Ag-Cys. Relacin
1:8
7,56(7,8%);
26,7(39,8%);
169,8(52,9%)
-0,812
63,6(100%)
-0,177
6,5(7,9%);
90,7(92,1%)
0,0148
110 (100%)
-35,8
Ensayo
Ag-Cys. Relacin
1:1
Ag-Cys. Relacin
1:2
Ag-Cys. Relacin
1:3
Ag-Cys. Relacin
1:5
Ag-Cys. Relacin
1:8
dimetro, (nm)
1,1(5,4%);
11(80%);
48,2(64,5%)
21,6(2,22%);
376,6(77,8%)
45,2(73,1%);
203,5(26,4%)
26,6(28,7%);
404,1(71,3%)
20,79(17,3%);
300(82,7%)
Potencial Zeta (mV)

-0,0194
-37
-29,9
0,118
-39
Ensayo
dimetro, (nm)
Potencial Zeta (mV)
Ag-Cys. Relacin
1:1
2,15(10,4%);
31,29(77,5%);
225,4(10,6%)
-25
66,4(100%)
-0,171
Ag-Cys. Relacin
1:2
Ag-Cys. Relacin
1:3
Ag-Cys. Relacin
1:5
Ag-Cys. Relacin
1:8
94,64(97,8%);
5115(2,2%) *
28,4(70,4%);
164(29,6%)
28,3(56,2%);
212,3(43,8%)
71
-24,8
-0,0798
-25,5
Tabla 18. Anlisis por DLS y potencial zeta. Ag-Cys 10mM pH

11,0
Ensayo
Ag-Cys. Relacin
1:1
Ag-Cys. Relacin
1:2
Ag-Cys. Relacin
1:3
Ag-Cys. Relacin
1:5
Ag-Cys. Relacin
1:8
dimetro, (nm)
Potencial Zeta (mV)
342(100%)
-23,3
266(53%);
953(47%)
-25
300(100%)*
-22,5
414(100%)
-0,0436
406,3(100%)
-19,5
72

Cosas Sobre Cisteina Npagfuncionalizadas

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FUNCIONALIZACIN DE NANOPARTCULAS DE PLATA (AgNP) CON

YULY ANDREA PRADA VARGAS

UNIVERSIDAD INDUSTRIAL DE SANTANDER

FUNCIONALIZACIN DE NANOPARTCULAS DE PLATA (AgNP)

YULY ANDREA PRADA VARGAS

Trabajo de grado presentado como requisito

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ENTREGA DE TRABAJOS DE GRADO, TRABAJOS DE

...Verde, come quando si va in bicicletta e il vento ti

Entrego mis agradecimientos ms sinceros a las personas que han motivado mi

A los directores de esta investigacin:

1. CONCEPTOS GENERALES ............................................................. 17

3.3 FUNCIONALIZACIN DE AgNP CON L-CISTENA .................... 36

Figura 1. Estabilizacin de NP metlicas.

Figura 2. Representacin del potencial zeta de una AgNP.

Figura 3. Esquema de metodologa implementada en la

Figura 4. A) Montaje de sntesis. B) Coloide de plata formado

Figura 5. A) Celda capilar para medicin de potencial zeta

Figura 7. Espectro UV-Vis de Coloide de plata sintetizado

Figura 8. Microfotografa TEM de AgNP sintetizadas.

Figura 9. Potencial zeta del coloide de plata sintitezado.

Figura 10. Tamao de partcula del coloide de plata sintetizado.

Figura 11. Cambio de coloracin del coloide en la funcionalizacin

Figura 12. Espectro UV-Vis. Funcionalizacin AgNP con

Figura 13. Espectro UV-Vis. Funcionalizacin AgNP con

Figura 14. Espectro UV-Vis. Funcionalizacin AgNP con

Figura 15. Espectro UV-Vis. Funcionalizacin AgNP con

Figura 16. Espectro UV-Vis. Funcionalizacin AgNP con

Figura 17. Espectro UV-Vis. Funcionalizacin AgNP con

Figura 18. Espectro UV-Vis. Funcionalizacin AgNP con

Figura 19. Espectro UV-Vis. Funcionalizacin AgNP con

Figura 20. Espectro UV-Vis. Funcionalizacin AgNP con

Figura 21. Esquema forma inica de la L-cistena en funcin del pH.

Figura 22. Espectro UV-Vis funcionalizacin Ag-Cys con

Figura 23. Espectro UV-Vis funcionalizacin Ag-Cys con

Figura 25. Espectro UV-Vis funcionalizacin Ag-Cys con

Figura 26. Espectro UV-Vis funcionalizacin Ag-Cys con

Tabla 2. Anlisis UV-Vis de funcionalizacin Ag-Cys con

Tabla 3. Anlisis UV-Vis de funcionalizacin Ag-Cys con

Tabla 4. Anlisis UV-Vis de funcionalizacin Ag-Cys con

Tabla 5. Anlisis UV-Vis de funcionalizacin Ag-Cys con

Tabla 6. Anlisis UV-Vis de funcionalizacin Ag-Cys con

Tabla 7. Anlisis UV-Vis de funcionalizacin Ag-Cys con

Tabla 8. Anlisis UV-Vis de funcionalizacin Ag-Cys con

Tabla 9. Anlisis UV-Vis de funcionalizacin Ag-Cys con

Tabla 10. Anlisis UV-Vis de funcionalizacin Ag-Cys con

Tabla 11. Anlisis UV-Vis de funcionalizacin Ag-Cys con

Tabla 12. Anlisis UV-Vis de funcionalizacin Ag-Cys con

AUTORA: YULY ANDREA PRADA VARGAS**

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