UNIDAD N21:

PRODUCCION DE
VITAMINAS.
BIOTECNOLOGIA
2015
SUAREZ ROMINA
SERVANT JACQUELINE
FLEURY SARA
ORREGO SOLEDAD
BONADONNA FERNANDO

INTRODUCCION
Se desarrolla a continuacin la produccin de vitamina

B 12 , su importancia en el

mercado tanto econmica como social. Cul es su estructura, como se lleva a cabo su
biosntesis. Cules son los mtodos de produccin.
Se va a desarrollar el proceso de produccin de rivoflavina (vitamina B), comentando su
existencia y significado econmico, su estructura y biosntesis.
Tambin el proceso productivo de b-caroteno. Su existencia y significado econmico, su
estructura y biosntesis.
Se har un anlisis sobre la disponibilidad de materia prima y recursos humanos para la
produccin de dichas sustancias en Argentina. Y se har mencin explicndose como
corresponda, a Producto estratgico.

Las vitaminas (del latn vita vida y el griego ammoniaks que significa amoniaco, con el
sufijo latino ina sustancia) son compuestos heterogneos imprescindibles para la vida,
que al ingerirlos de forma equilibrada y en dosis esenciales promueven el correcto
funcionamiento fisiolgico. La mayora de las vitaminas esenciales no pueden ser
sintetizadas (elaboradas) por el organismo, por lo que ste no puede obtenerlas ms que
a travs de la ingesta equilibrada de vitaminas contenidas en los alimentos naturales. Las
vitaminas son nutrientes que junto con otros elementos nutricionales actan como
catalizadoras de todos los procesos fisiolgicos
Est demostrado que las vitaminas del grupo B son imprescindibles para el correcto
funcionamiento del cerebro y el metabolismo corporal. Este grupo es hidrosoluble
(solubles en agua) debido a esto son eliminadas principalmente por la orina, lo cual hace
que sea necesaria la ingesta diaria y constante de todas las vitaminas del complejo B.

CLASIFICICACION DE LAS VITAMINAS

Vitaminas liposolubles
Las vitaminas liposolubles, A, D, E y K, se consumen junto con alimentos que contienen
grasa.
Son las que se disuelven en grasas y aceites. Se almacenan en el hgado y en los tejidos
grasos, debido a que se pueden almacenar en la grasa del cuerpo no es necesario
tomarlas todos los das por lo que es posible, tras un consumo suficiente, subsistir una
poca sin su aporte.
Las vitaminas liposolubles son:
Vitamina A (retinolftalina)
Vitamina D (calciferol)
Vitamina E (tocoferol)
Vitamina K (antihemorrgica)
Estas vitaminas no contienen nitrgeno, son solubles en grasa, y por tanto, son
transportadas en la grasa de los alimentos que la contienen. Por otra parte, son bastante
estables frente al calor (la vitamina C se degrada a 90 en oxalatos txicos). Se absorben
en el intestino delgado con la grasa alimentaria y pueden almacenarse en el cuerpo en
mayor o menor grado (no se excretan en la orina). Dada a la capacidad de
almacenamiento que tienen estas vitaminas no se requiere una ingesta diaria.

Vitaminas hidrosolubles
Las vitaminas hidrosolubles son aquellas que se disuelven en agua. Se trata de
coenzimas o precursores de coenzimas, necesarias para muchas reacciones qumicas del
metabolismo.

En
este
grupo
de
vitaminas,
se
incluyen
las
vitaminas B1 (tiamina), B2 (riboflavina), B3 (niacina
o
cido
nicotnico), B5 (cido
pantotnico), B6 (piridoxina), B7/B8 (biotina), B9(cido flico), B12 (cobalamina) y vitamina C
(cido ascrbico).
Estas vitaminas contienen nitrgeno en su molcula (excepto la vitamina C) y no se
almacenan en el organismo, a excepcin de la vitamina

B 12 , que lo hace de modo

importante en el hgado. El exceso de vitaminas ingeridas se excreta en la orina, por lo

cual se requiere una ingesta prcticamente diaria, ya que al no almacenarse se depende
de la dieta. Por otro lado, estas vitaminas se disuelven en el agua de coccin de los
alimentos con facilidad, por lo que resulta conveniente aprovechar esa agua para preparar
caldos o sopas.
En esta monografa nos dedicaremos al estudio de la Cobalamina, la Rivoflavina y el beta
caroteno.

VITAMINA B12
La vitamina

B 12

(tambin llamada cobalamina, debido a que contiene cobalto) es

esencial para el funcionamiento normal del cerebro, del sistema nervioso, y para la
formacin de la sangre y de varias protenas. Es una de las ocho vitaminas del grupo B.
Normalmente est implicada en el metabolismo de las clulas del cuerpo humano,
especialmente en la sntesis y regulacin del ADN; tambin en la metabolizacin de los
aminocidos, de los cidos grasos y de los glcidos.
Ni los hongos, ni las plantas, ni los animales pueden producir esta vitamina. Solo las
bacterias y las arqueobacterias (grupo de microorganismos unicelulares de morfologa
procariota (sin ncleo ni, en general, orgnulos membranosos internos), que forman uno
de los tres grandes dominios de los seres vivos, y que son diferentes de las bacterias)
tienen las enzimas necesarias para su sntesis, no obstante muchos alimentos son fuente
natural de

B 12 debido a la simbiosis bacteriana. Estructuralmente hablando, esta es la

vitamina ms compleja y puede ser producida industrialmente nicamente por

fermentacin bacteriana.
Est conformada por una clase de compuestos qumicamente relacionados (vitmeros)
los
cuales
actan
como
vitaminas.
El cobalto,
un oligoelemento
(son bioelementos presentes en pequeas cantidades (menos de un 0,05 %) en los seres
vivos y tanto su ausencia como su exceso puede ser perjudicial para el organismo), est
en el centro del anillo tetrapirrol llamado corrina. La biosntesis es llevada a cabo solo por
bacterias, que por lo general producen hidroxicobalamina, pero la conversin entre las
diferentes formas de la vitamina se logra en el cuerpo humano. Una forma semisinttica
comn es la cianocobalamina, la cual es producida a partir de la hidroxicobalamina
bacteriana, que es luego usada en muchos productos farmacuticos y suplementos
vitamnicos, y como un aditivo alimentario debido a su estabilidad y menor costo de
produccin. En el cuerpo humano adquiere la forma de metilcobalamina y 5desoxiadenosilcobalamina, dejando tras de s pequeas cantidades de cianuro.
La vitamina B12 fue descubierta por su relacin con la anemia perniciosa, una enfermedad
autoinmune que destruye las clulas parietales del estmago, encargadas de la secrecin
del factor intrnseco gstrico, estas clulas adems son responsables de la secrecin del
cido estomacal. El factor intrnseco es crucial para la normal absorcin de la vitamina B 12,
por lo que la ausencia del factor intrnseco, como se ve en la anemia perniciosa, ocasiona
una deficiencia de vitamina B12.

ESTRUCTURA
Bioqumicamente hablando la vitamina B12 es la ms compleja de las vitaminas. La B 12 es
una de estas cobalaminas que resulta de la unin asimtrica de cuatro anillos pirrlicos,
formando un grupo macrocclico casi planar (ncleo de corrina) en torno a un ion central

de cobalto. El anillo de corrina es similar al anillo porfirnico, que tambin pude ser
encontrado en el grupo hemo, la clorofila y en los citocromos; y se diferencia de estos por
su asimetra en las uniones entre los grupos pirrlicos. En esta estructura, el cobalto
posee seis valencias, cuatro de las cuales forman un enlace covalente con los tomos
de nitrgeno de los anillos pirrlicos. La quinta valencia de coordinacin siempre se
encuentra unida a un pseudonucletido complejo, el 5,6-dimetilbencimidazol, casi
perpendicular al ncleo y, finalmente, cuando la sexta valencia se une a
diversos radicales produce los diferentes derivados de la cobalamina. Cuando se une un
grupo de cianuro (CN-) forma la cianocobalamina, cuando la unin es con un grupo
hidroxilo compone la hidroxicobalamina, cuando se conecta a un grupo metilo (CH3-) crea
la metilcobalamina o la desoxiadenosilcobalamina; con el grupo de C5 de la
desoxirribosa de esta ltima, forma el enlace covalente con el Co.
La vitamina B12 es un descriptor genrico de un grupo de molculas de cobalto y sus
anillos de corrina, que son definidos por su particular funcin en el cuerpo. Todas las
molculas de sustrato corrina-cobalto de la B12, solo son sintetizadas por bacterias. Sin
embargo, y excepto en los poco frecuentes casos y despus de que esta sntesis est
completa, el cuerpo humano tiene la capacidad de convertir cualquier forma de B 12 en una
forma activa, por medio de la eliminacin enzimtica de ciertos grupos prostticos de
qumicos desde el tomo de cobalto y su posterior sustitucin por otros grupos.
Todas las diversas formas de B12 (vitmeros), cristales y soluciones a base de agua, son
de color rojo muy oscuro debido al complejo de corrina-cobalto.

SINTESIS Y PRODUCCION INDUSTRIAL

La produccin industrial de la vitamina B12 es posible gracias a la fermentacin de
microorganismos seleccionados. La STREPTOMYCES griseus, una bacteria que fue
considerada una levadura, fue durante muchos aos la fuente de B 12 en el medio
comercial. La especie PSEUDOMONAS denitrificans y la PROPIONBACTERIUM
shermanii son las de mayor uso en la actualidad. Dado que un buen nmero de especies
de propionibacterium no producen exotoxinas o endotoxinas y son consideradas, en
general, como seguras para uso humano segn la Administracin de alimentos y
medicamentos de Estados Unidos, quien le ha concedido la condicin de Generalmente
reconocido como seguro para los organismos que son usados para la fermentacin,
siendo estas bacterias modificadas las preferidas por esta administracin para la
produccin de vitamina B12.

La mayor parte de los procesos de fermentacin de vitamina

B 12 utilizan glucosa como

fuente de carbono. Se conocen varias cepas productoras, que se enumeran a

continuacin:
BACILLUS megaterium que produce 0,45 mg/l
BUTYRIBACTERIUM rettgeria que produce 5 mg/l
PROPIONBACTERIUM fredenrichii que produce 19 mg/l
PSEUDOMONAS denitrifans que producen 60 mg/l
Actualmente se han mejorado los rendimientos debido al uso de tcnicas modernas de
ingeniera gentica.

PROCESO CON PROPIONBACTERIAS:

Se utiliza la PROPIONBACTERIUM fredenrichii. El proceso comienza en una fase
anaerobia (2-4 das) en donde se produce el 5-desoxiadenosilcobinamida, luego en una
segunda fase aerobia (3-4 das) tiene lugar la sntesis de 5,6-dimetilbenzimidazol, de
forma que se produce la 5-desoxianosilcobalamina (coenzima

B 12 ).

Ambas etapas pueden llevarse a cabo en dos tanques operados en cascada. Durante el
proceso de recuperacin, las cianocobalaminas que estn unidas a la clula son llevadas
a la solucin por tratamiento con calor (10-30 minutos a 80-120C, pH 6,5-8,5), entonces
son convertidas qumicamente en cianocobalaminas. El producto crudo tiene un 80% de
pureza y etapas adicionales de purificacin llevan al producto a un 95-98% de pureza
(utilizacin mdica mayormente).
PROPIONBACTERIUM
fredenrichii
Anaerobia

El proceso puede ser discontinuo

en dos etapas en un fermentador o
continuo en dos tanques de
cascada.

5-desoxiadenosile
Aerbica
5,6-dimetilbenzimidazol

Coenzima

B 12

(5-desoxiadenosilcobalamina)

Proceso de recuperacin: las cobalamidas son

llevadas a la solucin por calor (10-30 minutos, 80120C, pH 6,5-8,5) y convertidas qumicamente en
cianocobalamidas.

PROCESO CON PSEUDOMONAS:

Se ha encontrado que PSEUDOMONAS denitrifans es la especie ms productiva entre
las diferentes PSEUDOMONAS que producen vitamina
En este proceso en una etapa, la vitamina

B 12 .

B 12 se produce durante toda la fermentacin.

Deben aadirse como suplemento cobalto y 5,6-bendzimidasol.

Se ha encontrado tambin que la adicin del compuesto betaina da lugar a un aumento
del rendimiento, la melaza de remolacha se usa con una fuente de betaina de bajo precio.
PSEUDOMONAS denitrifans.
MB2436

Cultivo de inoculo

Pre inoculo

Cultivo de
produccin

Mantenimiento del inoculo:

liofilizado en leche seca

Tubo de agar inclinado con medio

de incubacin: 96 hs 28C
Matraz, Erlenmeyer de 1 litro con
150 ml de medio b, incubacin: 72
hs 28C con agitacin.
Fermentador de 5 litros con 3,3
litros de medio c, esterilizacin 75
min 120C. Inoculo 150 ml de
preinoculo. Incubacin 90 hs 29C,
agitacin a 420 rpm. Aireacin
1vvm

Medio a (g/l) Melaza de remolacha 60; extracto de levadura 1; N-Z-Amina 1;

(NH 4 )2 HPO4 2;
0,02;

Mg SO 4 .7 H 2 O

Na 2 Mo O4 .2 H 2 O

1;

Mn SO 4 . H 2 O

0,2;

Zn SO 4 .7 H 2 O

0,005; agar 25; Agua corriente; Ph7, 4.

Medio b (g/l): Medio a sin agar

Medio c (g/l): Melaza de remolacha 100; extracto de levadura 2; ( NH 4 )2 HPO4

Mg SO 4 .7 H 2 O

3;

Mn SO 4 . H 2 O

dimetilbenzimidazol 0,025;

0,2;

NO
Co( 3)2 .6

H2O

Zn SO 4 .7 H 2 O ; Na2 Mo O4 .2 H 2 O

5;

0,118; 5,6-

0,005; agua

corriente; pH 7,4.

DISEO DE EXPERIMENTOS
Eleccin del proceso de produccin de la Vitamina V12
Substrato: Sacarosa proveniente de azcar comercial con un 99,8% de pureza
Medio de Cultivo:
Para PSEUDOMONAS: composicin en g/L:
Substrato=100
Extracto de Levadura=2
(NH4)2 HPO4 = 5
MgSO4 7H2O = 3
MnSO4 H2O = 0,2
CoCl2 6 H2O = 0,02
ZnSO4 7H2O = 0,02
Na2MoO4 2 H2O = 0,005
Betana = 10
5,6 DMI = 0,025
pH=7,4
T= 29 C
Agitacin 300 rpm
Aireacin 1 VVM
Nmero de Experimentos a Realizar
N= 2n= 24 =16 (experimentos)
estudio
Niveles de las variables:
BAJO (INFERIOR) = 1

donde: n= numero de variables en

ALTO (SUPERIOR) = 2

Variables en estudio:
A.
B.
C.
D.

Substrato: Sacarosa
(NH4)2 HPO4
MnSO4 H2O
CoCl2 6 H2O

VARIABLES
CORRIDAS A
B
1
1
1
2
2
1
3
1
2
4
2
2
5
1
1
6
2
1
7
1
2
8
2
2
9
1
1
10
1
2
11
2
1
12
2
2
13
1
1
14
1
2
15
2
1
16
2
2

C
1
1
1
1
2
2
2
2
1
1
1
1
2
2
2
2

D
1
1
1
1
1
1
1
1
2
2
2
2
2
2
2
2

Composicin de referencia (g/L)

Niveles
Inf

Sup

(A) Sacarosa

100

85

115

(B) (NH4)2 HPO4

4,25

5,75

( C ) MnSO4 H2O

0,2

0,17

0,37

(D) COCl2 6 H2O

0,02

0,017

0,037

VITAMINA B2
La riboflavina es una vitamina hidrosoluble ampliamente distribuida en el reino vegetal y
animal, habiendo sido obtenida por primera vez a partir del suero de leche por Giorgy y
colaboradores en 1.933 (Arnold L.Demain, Giancarlo Lancini 1.983). La vitamina

B2 ,

pertenece al grupo de pigmentos amarillos fluorescentes llamados flavinas. Es un

micronutriente con un rol clave en el mantenimiento de la salud de hombres y animales.
Es el componente principal de los cofactores FAD y FMN y por ende es requerida por
todas las flavoprotenas, as como para una amplia variedad de procesos celulares. Como
otras vitaminas del complejo B, juega un papel importante en el metabolismo energtico y
se requiere en el metabolismo de lpidos, carbohidratos, protenas y aminocidos.
Esta vitamina es sensible a la luz solar y a ciertos tratamientos como la pasteurizacin,
proceso que hace perder el 20% de su contenido. Por ejemplo, la exposicin a la luz solar
de un vaso de leche durante dos horas hace perder el 50% del contenido de vitamina.
Algunas fuentes de vitamina B2 son: leche, queso, vegetales de hoja verde, hgado y
legumbres.
Es necesaria para la integridad de la piel, las mucosas y de forma especial para
la crnea, por su actividad oxigenadora, siendo imprescindible para la buena visin. Su

requerimiento se incrementa en funcin de las caloras consumidas en la dieta: a mayor

consumo calrico, mayor es la necesidad de vitamina B2. Esta vitamina es crucial para la
produccin de energa en el organismo.
Otra de sus funciones consiste en desintoxicar el organismo de sustancias nocivas,
adems de participar en el metabolismo de otras vitaminas.
La sntesis de riboflavina por microorganismos puede ser dividida segn el grado de
acumulacin de la vitamina; as, se encuentran sobreproducciones dbiles, moderadas y
fuertes, tal como la presentan varias bacterias, algunas levaduras y hongos (Presscott,
Dunn 1.962). Al ser de gran importancia teraputica y alimenticia es producida
comercialmente por sntesis qumica. Los procesos fermentativos con el empleo de
microorganismos originan la forma que tiene aplicacin como suplemento en los alimentos
concentrados para la alimentacin animal, este es un proceso mucho ms econmico que
la sntesis qumica y no ha sido explotado a cabalidad.

ESTRUCTURA DE LA RIBOFLAVINA
Constituida por un anillo de isoaloxazina dimetilado al que se une el ribitol, un alcohol
derivado de la ribosa. Los tres anillos forman la isoaloxazina y el ribitol es la cadena de
cinco carbonos en la parte superior

PRODUCCION DE LA RIBOFLAVINA
Para la sntesis de riboflavina a escala industrial, se han desarrollado numerosos
procesos biotecnolgicos, utilizando diferentes microorganismos, entre los que se pueden
mencionar hongos filamentosos y levaduras como ASHYBA gossypii, CANDIDA
famata y CANDIDA
flaveri,
y
bacterias
como CORYNEBACTERIUM
ammoniagenes o BACILLUS subtilis.
Con el objeto de producir riboflavina se estudia el microorganismo ASHYBA gossypii, el
cual se hace crecer en cultivo sumergido en un fermentador de 10 litros, obtenindose
0.125 gs de riboflavina por ml. Al finalizar el tiempo de fermentacin, el medio de cultivo

se filtra y el filtrado se seca en estufa a 30C, la vitamina contenida en el producto seco se

extrae con butanol. La vitamina obtenida en forma bruta se purifica en columna seca de
gel de slice. En el aislamiento en cromatografa en capa fina se obtiene un Rf de 0.55
Tanto para la muestra control (Merk), como para la muestra obtenida de la purificacin. En
el espectro UV-visible las bandas de absorcin del control y de la muestra son similares.
La biomasa de ASHYBA gossypii se analiza obtenindose 21.5 % en protenas, 2.5 % en
grasas, 5.7 % en cenizas, 0.2 % en calcio y 0.32 % en fsforo.
Materiales y mtodos
Microorganismo: Para la realizacin de este trabajo se utiliza la cepa ASHYBA gossypii
ATCC 10895 productora de vitamina B2, proveniente del cepario de Microbiologa. La
cepa utilizada se mantiene en cuas de agar M-200.
Medio de Produccin: Basndonos en los resultados obtenidos a nivel de fiolas se
incrementa la escala en un fermentador LKB de 10 litros, el cual contiene sacarosa 1.5 %,
aceite de maz 2 %, extracto de malta 0.5 %, extracto de levadura (SACCHAROMYCES
cerevisiae) 0.5 %, fosfato di amnico 0.025 %. El pH del medio de cultivo es de 6.5 este
se esteriliza a 121C por 20 minutos.
Inculos: Los inculos se obtienen transfiriendo el microorganismo, mantenido en cuas
de agar M-200, primero a 100 ml de medio de produccin y despus a 1000 ml del mismo
medio. En ambos casos la incubacin se realiza a 30C en un agitador orbital a 200 rpm
durante 24 horas.
Proceso fermentativo: Con los valores ptimos obtenidos en volmenes de 50 ml se
estudia la produccin de la vitamina en un fermentador LKB de 10 litros. La incubacin se
realiza a 30C con aireacin (0.4 v.v.m), 7 das de fermentacin y sin agitacin para evitar
que se rompa el micelio. Cada 24 horas se toman muestras, se llevan a un autoclave y se
filtran. En cada filtrado se determina la concentracin de riboflavina que se mide por
espectrofotometra a 445 nm, segn mtodo espectrofotomtrico reportado por Manzur y
Ul-Haque 1.972. Posteriormente en una curva de calibracin se obtiene su concentracin.
La concentracin de azcares se mide por el mtodo de Antrona (AOAC 1.980).
Extraccin y Purificacin: La riboflavina contenida en el producto seco, se extrae con
butanol en embudo de decantacin (Sebrell, Harris 1.972), posteriormente se lleva a un
rotavapor bajo vaco a 80C. La purificacin se realiza en una columna seca de silica gel
utilizando una mezcla de solventes formada por butanol/etanol/agua en proporcin 7:2:1.
El empleo de la cromatografa en columna con slica gel, no es el mtodo ms adecuado
si se desea obtener la vitamina altamente pura. La aplicacin de la riboflavina para usos
teraputicos requiere de un grado de pureza elevado y de la eliminacin de
contaminantes que pudieran actuar como agentes pirognicos o txicos. Aunque se est
consciente de ambas limitaciones, decidimos emplear este mtodo por su sencillez.
Anlisis de Identificacin: Estos se realizan mediante cromatografa en capa fina,
empleando para ello una placa de slica gel de 10 cm de ancho por 12 cm de largo; una

muestra de riboflavina marca Merck se utilizada como patrn. Otro mtodo de anlisis es
la espectroscopia de absorcin ultravioleta visible (Silvertein, R. M; Bassler, G. C and
Morill, T. C 1.991).
Caracterizacin de la Biomasa: Se determina el porcentaje de protenas (Boscan, L
1.982), cenizas (AOAC 1.980), calcio segn norma COVENIN 1158-82, fsforo segn
norma COVENIN 1178-829 y grasa cruda segn mtodo gravimtrico reportado por
Boscn, L 1.982.

Ashbya gossypii
V = 10 l
sacarosa 1.5 % aceite de maz 2 %
Fermentacin 30C, 7 das
extracto de malta 0.5 %,
Saccharomyces cerevisiae 0.5 % fosfato di amnico 0.025 %
pH 6.5
Autoclave

Filtracin

Espectrofotometra 445nm
Determinacin de concentracin

Extraccin

Purificacin

Identificacin
de riboflavina

Caracterizacin
de biomasa

Utilizando butanol

Columna de silica gel con

butanol/etanol/agua

Por cromatografa

BETA CAROTENO
El -caroteno es un caroteno cclico perteneciente al gran grupo de los terpenoides. Su
frmula es C40H56 y es un hidrocarburo de origen biolgico con una estructura -ionona
como anillo terminal a cada lado de la cadena de polieno. La preparacin de beta
caroteno tiene importancia en mtodos teraputicos para una variedad de cnceres. Se
utiliza como un agente colorante para alimentos, un antioxidante y una fuente de
provitamina importante.

ESTRUCTURA

SINTESIS Y PRODUCCION INDUSTRIAL

El verde unicelular flagelado DUNALIELLA salina es la ms rica fuente natural del
carotenoide -caroteno Cuando se expone a condiciones de estrs como la alta
intensidad de la luz o la falta de nutrientes, dos estereoismeros de -caroteno, todo el
trans y el 9-cis -caroteno acumulado alcanza hasta el 14% de la peso en seco de la
clula. Ahora sabemos que no todas las especies DUNALIELLA producir grandes
cantidades de caroteno y los que pueden hacerlo slo bajo condiciones adecuadas.
DUNALIELLA salina tiene una muy amplia tolerancia pH que oscila entre pH 1 a pH 11,
es uno de los eucariotas ms tolerante con el medio ambiente y pueden hacer frente a
una amplia gama de salinidad agua de mar 3% de NaCl hasta su saturacin 31%, y un
intervalo de temperatura de 0C a 38C. Cuando la luz del sol, los fertilizantes, y la
temperatura del agua son excelentes, la fotosntesis es a menudo limitada por la
concentracin de dixido de carbono. Con respecto al cultivo a gran escala de D. salina
requiere un buen entendimiento de la fisiologa y la ecologa del alga:

Medio de cultivo: Medio Johnsons Modificado

pH ptimo: 9.

Temperatura ptima: 20C-40C

Fisiologa de carotenognesis

Los sistemas de cultivo cerrados son una opcin para el cultivo de DUNALIELLA salina.
Evitan la contaminacin y proveen un mayor control en las condiciones de crecimiento, lo
que conduce a mayores densidades celulares y mejor recuperacin de -caroteno. La
recuperacin est compuesta por la cosecha, DUNALIELLA salina constituye un reto
para los productores comerciales puesto que es unicelular, no posee pared celular, es

muy pequea y presenta una densidad celular muy baja en cultivo lo que obliga a
procesar ms volumen-. Adems, la centrifugacin y filtracin podran conducir a la
oxidacin del -caroteno por lo que se ha buscado implementar mtodos variados para
evitarlo, como la filtracin hiperbrica usando diatomita. La extraccin depende tanto de la
cosecha as como de los requerimientos del mercado, pues aunque el uso de solventes
orgnicos es eficiente podra no contar con la aceptacin de los consumidores. Al no tener
pared celular, la disrupcin celular no requiere ser muy agresiva.
La purificacin est compuesta por la concentracin del extracto, donde se sugiere una
segunda extraccin en solvente y despus una re suspensin en aceite. Tambin, se ha
probado que los aceites vegetales usados como matriz proveen una gran estabilidad para
el -caroteno. La metodologa ms extendida para la separacin de carotenoides es el
HPLC preparativo de fase reversa. El -caroteno es el pigmento con mayor presencia en
los concentrados (Fig. 12).
En la etapa de pulimiento, los suplementos nutricionales pueden prepararse por
encapsulamiento de suspensiones oleosas o soluciones, o presentarse en forma de
tabletas.

Cultivo

Cosecha

Estanques de crecimiento

Hemocitmetro

Biomas
a
Secado en fro

Extracto de beta caroteno

Concentracin

Purificacin

Molino

Suspensin vegetal

Aceite de jojoba

Centrfuga de flujo continuo

BIBLIOGRAFIA
Wikipedia
Google Patents
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Mysore, India.
Revista de la Facultad de Farmacia vol.42
Carpeta de monografas de la Biblioteca de Ing. Qumica
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Kapralet, F. 1962. The physiology of riboflavin production by Eremothecium ashbyii. J. Gen
Microbiology. 29: 403-419.
Prescott, S. D and Dunn, C. G. 1962. Microbiologa industrial. 3a edicin. Impreso en
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