METABOLISMO ENERGETICO Y FERMENTATIVO

METABOLISMO
El trmino metabolismo se refiere al conjunto de reacciones qumicas que
tiene lugar en la clula, y tiene 3 funciones especficas a saber:
- obtener energa qumica del entorno, almacenarla, para utilizar luego en
diferentes funciones celulares,
-convertir los nutrientes exgenos en unidades precursoras de los
componentes macromoleculares de la clula bacteriana,
- formar y degradar molculas necesarias para funciones celulares
especficas, como por ejemplo, movilidad y captacin de nutrientes.

METABOLISMO
El metabolismo es, entonces, un sistema complejo de reacciones qumicas
llevadas a cabo por las enzimas que son las responsables de la transformacin
de los nutrientes en molculas tiles para la bacteria.
El metabolismo es el conjunto de reacciones bioqumicas que permiten el
crecimiento de un organismo (por lo tanto, en bacterias, que conduce a la
creacin de nuevas clulas). El metabolismo de la clula comprende dos
grandes tipos de reacciones:
1. Reacciones de mantenimiento, que suministran
energa
poder reductor
precursores metablicos
2. Reacciones del anabolismo (biosntesis), que usan
energa y poder reductor procedente de las reacciones de
mantenimiento.

METABOLISMO CELULAR
El metabolismo, la suma
total de todas la
reacciones qumicas que
tienen lugar en la clula,
puede dividirse en
catabolismo y
anabolismo. En
catabolismo se reduce la
complejidad de las
molculas y se libra
energa. El anabolismo
requiere el uso de energa
libre para aumentar la
complejidad de las
molculas.

METABOLISMO:
la suma de las
reacciones qumicas
dentro de la clula

CATABOLISMO
reacciones de
degradacin,
algunas de las
cuales producen
energa y materias
primas
Impulsa

ANABOLISMO:
sntesis en la cual
se construyen
grandes molculas
complejas a partir
de subunidades

El metabolismo celular comprende:

1. Todas las reacciones qumicas individuales:
Exergnicas---- Produccin de energa
Endergnicas ---Consumen energa
2. Las secuencias de esas reacciones
3. Las relaciones existentes entre las secuencias de
reaccin, y
4. Los diferentes mecanismos que regulan esas
reacciones.

Metabolismo celular
El conjunto de las secuencias de reaccin pueden clasificarse
como:CATABOLICAS (es decir degradadoras) si se considera que
los productos terminales de las secuencias de reaccin son
subunidades o partes del sustrato original. En forma alternativa, si los
productos son el resultado de las combinacin de dos o ms sustratos
distintos se considera que la secuencia es ANABOLICA.
Una secuencia de reacciones suele conocerse como VIA
METABOLICA.
Algunas vas metablicas son comunes a todos los organismos o
clulas vivas. Algunas son especialmente activas y reciben como
sustratos a los productos de varias otras vas menores activas. A
su vez estas vas centrales pueden proporcionar sustratos a varias
otras vas menos activas.

VENTAJAS DE LAS RUTAS METABOLICAS

1. Se pueden hacer que las reacciones bioqumicas avancen, ya
que nunca se alcanza el equilibrio, puesto que los productos se
convierten en sustratos de reacciones posteriores.
2. Los reactivos pueden modificarse en una serie de pequeas
etapas; de esta forma, la energa se libera en cantidades
controladas o se pueden hacer ajustes menores en la estructura
de las molculas.
3. Cada etapa es catalizada por un enzima especfico y cada
enzima representa un punto para el control de la ruta completa.
4. Las etapas de la ruta pueden disponerse espacialmente de
modo que el producto de una reaccin est ubicado de forma
ideal para ser el sustrato del siguiente enzima. Esto permite la
acumulacin de elevadas concentraciones locales de molculas
de sustrato y las reacciones bioqumicas avanzan rpidamente.
Una ruta dispuesta de esta forma puede ser catalizada por un
complejo multienzimtico.

LEYES DE LA TERMODINAMICA

Primera Ley de la Termodinmica

La energa no se crea ni se destruye pero puede convertirse de una
forma a otra: durante dicha conversin, la cantidad total de energa
del sistema permanece constante
Se aplica a todos los niveles de organizacin del mundo vivo; se aplica a los organismos,
clulas, organelos y las reacciones qumicas individuales que caracterizan el
METABOLISMO.

Segunda Ley de la Termodinmica

En todos los procesos que implican cambios de energa dentro de
un sistema, la ENTROPIA (medida del grado de desorden de un
sistema) de este ltimo aumenta hasta que se alcanza el equilibrio.

METABOLISMO DE CARBOHIDRATOS
En el estudio del metabolismo de los carbohidratos se considerarn:
1.

Las rutas usadas para la degradacin de carbohidratos.

2.

Losa mecanismos usados para la produccin de energa en forma de ATP, que

es generado ya sea va:

3.

a.

Fosforilacin a nivel de sustrato, o

b.

Fosforilacin oxidativa

Los pasos metablicos en los cuales la actividad reductora es generada y usada:

a.

Para reducir el piruvato u otros sustratos en la formacin de productos

finales, o

b.

Para las reacciones de biosntesis que requieren poder reductor.

4.

La produccin de intermediarios que sirven como precursores de la sntesis de

aminocidos, purinas y pirimidinas y otros constituyentes celulares vitales.

5.

Reacciones anapleurticas o de reposicin de intermediarios para biosntesis.

6.

El efecto del oxgeno en las reacciones metablicas y de generacin de energa,

es decir si las reacciones son aerbicas, anaerbicas o facultativas.

ANABOLISMO

CATABOLISMO
HEXOSAS

CO2

1
3

Monmeros
(unidades
elementales)

Polmeros
(macromolculas)

aminocidos

protenas

azcares

polisacridos

nucletidos

polinucletidos

ATP
1

Va de la fructosa-1,6-bifosfato

Va de la pentosafosfato

Va KDPG

Ciclo de los cidos tricarboxlicos

Cadena respiratoria

Fosforilacin del sustrato

Fosforilacin oxidativa

Sntesis de monmeros

Sntesis de polmeros

CO2

CO2

CO2

O2

H2O

Esquema del metabolismo en el que se representa el proceso de degradacin de las

hexosas mediante clulas que utilizan el tipo de respiracin aerobia

VIAS CATABOLICAS
DEGRADACION DE AZUCARES

Sistema EMP
Sistema Entner-Doudoroff (KDPG)
Sistema de Hexosa monofosfato (HMP) Warburg-Dickens)
Sistema de la Fosfocetolasa o heterolctica

SISTEMA EMBDEMMEYERHOFF-PARMAS
(EMP) O GLUCOLISIS
Fenmenos que caracterizan a EMP

- Fosforilacin preliminar; se
consumen 2 ATP
-Rompimiento de la molcula
-Oxidacin y formacin de
enlace fosfatdico de alta energa;
se produce NADH y ATP
- Reordenamiento molecular par
la formacin de un enlace
fosfatdico de alta energa, se
genera otro ATP

Va del Monofosfato de Hexosa

(Warburg -Dickens) o Pentosas fosfato
La
glucosa
6-P
puede
convertirse en diversos azcares,
producindose NADPH al mismo
tiempo.
Ribulosa 5-P

Ribosa 5-P

Transcetolasa

Va que permite usar pentosas

como fuente de energa por
organismos que carecen de la
enzima FOSFOCETOLASA

Xilulosa 5-P

Permite la sntesis de Hexosa (

en bacterias) cuando crecen en
pentosas y sintetiza H-7P y E-4P

Transaldolasa

Seudoheptulosa 7-P

Eritrosa 4-P

Va del Fosfogluconato

Xilulosa 5-P

Producen precursores para

biosntesis de: Acidos nucleicos,
pentosas, aminocidos
aromticos, vitaminas, ATP.
Ej. Acetobacter xilinum

Va ENTNER -DOUDOROFF
Comienza con las mismas reacciones de
las pentosas fosfato. Se forma 2-ceto-3
desoxi-6-fosfogluconato o KDPG
Se produce 1NADPH y 1 NADH por
molcula de glucosa metabolizada.
La mayora de las bacterias tienen las vas
glucoltica y de las pentosas fosfato, pero algunas
sustituyen la gluclisis por la Va EntnerDoudoroff
Ejemplo:
Pseudomonas G(-)
Streptococcus faecalis G(+)
Rhizobium G(-)
Agrobacterium G(-)
Azotobacter G(-)

FERMENTACION
- Se realiza en ausencia de oxgeno
- Proceso de generacin de energa en el cual molculas
orgnicas sirven como dadoras y aceptoras de electrones.
- Proceso que no posee aceptor externo de electrones (sin
oxgeno)
- En ausencia de oxgeno puede llegar a un proceso txico
ya que el NAD debe ser reducido.
.-El NADH2 (reducido) deber ser oxidado y esos
hidrgenos deben perderlos.

pH 5-6

FERMENTACION

Zimomonas movilis
Saccharomices
Mucor, Rhizopus

FERMENTACION LACTICA

Fermentacin homolctica
Lactobacillus
Usado: Aditivo alimenticio,
quesos, yogurth

1- FERMENTACION LACTICA
Las bacterias lcticas son un grupo heterogneo de microrganismos
anaerobios pero aerotolerantes que fermentan glucosa a cido lctico
como nico o mayor producto.
Incluyen los gneros: Lactobacillus, Streptococcus, Leuconostoc,
Pediococcus, Sporolactobacillus y Bifidobacterium.
Son de distribucin abundante en la naturaleza
Tienen gran importancia econmica y en algunos casos medica.
Si bien toleran oxigeno, crecen en glucosa solo de modo
fermentativo.
Derivan ATP de la fosforilacin a nivel de sustrato.

HETEROFERMENTATIVA: Emplea la va de las pentosas en las etapas

de decarboxilacion e isomerizacin. Luego la pentosa se cliva por una
fosfocetolasa especifica

Tambin conocida como

Sistema de la Fosfocetolas.
Leuconostoc mesenteroides
produce cido lctico,
etanol, CO2 y
eventualmente acetato.

Va de la Fermentacin Acido Mixta

Es caracterstica de muchos miembros
de la familia Enterobacteriaceae como
E. coli, Salmonella, Proteus y Shigella
Da lugar a la excrecin de etanol y de
una mezcla compleja de cidos:
actico, lctico, succnico y frmico.
La relacin de producto cido:neutro
es de 4:1
La relacin C02: H2 es de 1:1
*No todas las bacterias las presentan.

FERMENTACION ACIDO-MIXTA
En enterobacterias (anaerobias facultativas) la adaptacin desde
un ambiente aerobio al crecimiento en anaerobiosis se acompaa
de un conjunto de cambios:

Las oxidasas terminales son reemplazadas por reductasas

El ciclo del acido citrico se transforma en reductivo (aparece

fumarato reductasa)

Las clulas oxidan Pyr a acetilCoA + formato

Realizan una fermentacin mixta o forman butanodiol.

Serratia, Erwinia y Enterobacter forman 2,3 butanodiol, acetoina,

CO2, H2 y etanol.
Escherichia, Salmonella y Shigella producen acidos (succinato,
acetato, lactato), CO2, H2 y etanol. Shigella y Erwinia no pueden
descomponer formato a CO2 por lo cual no producen gas.

FERMENTACION 2-3 BUTANODIOL

La produccion de 2,3
butanodiol se ve favorecida
cuando el medio es
ligeramente acido pues de este
modo se evita la excesiva
formacion de acidos organicos.
Se presenta en Aeromonas y Bacillus
Tambin en Enterobacterias:
Klebsiella y Serratia. Esta ltima
bacteria puede presentar fermentacin
cido mixta.
La relacin de producto cido:neutro
es de 1:6

PRODUCTOS, REACCIONES Y GRUPOS MICROBIANOS RESPONSABLES

DE LOS PROCESOS FERMENTATIVOS MAS IMPORTANTES
Lactico+ etanol+ CO2

Zimomonas
Lactobacilos.
Streptococcus
Leuconostoc

Clostridium
propionicum y
Propioniobacterium

levaduras

Clostridium
butiricum
enterobacterias

Los grupos que mas interesan desde el punto de vista alimentario son: enterobacterias y clostridium
(Sanitario) y bacterias lacticas , propionibacterias y levaduras (Productivo)

RESUMEN
Estudiar en libros las nociones bsicas (productos, balance energtico, microorganismos
implicados, inters industrial) de las siguientes fermentaciones:
- Fermentacin alcohlica :
glucosa + 2ADP -----> 2 etanol + CO2 + 2 ATP
-Fermentacin lctica :
Homolctica: glucosa + 2ADP -----> 2 c. lctico + 2 ATP
Heterolctica: glucosa + ADP -----> c. lctico + etanol + CO2 + ATP
- Fermentacin propinica:
glucosa ------> c. propinico + c. actico + CO2 + 3 ATP
- Fermentacin cido-mixta:
glucosa ----> lactato + frmico + acetato + etanol+ CO2 + H2 +ATP
- Fermentacin acetona-butanol.
glucosa -----> acetona + n-butanol + c. butrico + CO2 + 2 ATP

FERMENTACION BUTIRICA
Es realizada por microorganismos del genero Clostridium que fermentan H de C.
Durante la fermentacin se producen: cido butrico, H2, CO2 y pequeas
cantidades de acetato.
La secuencia incluye: 1- formacin de Pyr (por EMP); 2- Decarboxilacion a
AcCoA, CO2 e H2; 3- condensacin de AcCoA y reduccin, con consumo de los
NADH generados previamente.
Algunos Clostridium realizan esta fermentacin en sus primeras etapas pero
luego, cuando se acumula el acido y el pH desciende, cambian para producir
butanol y acetona, empleando el mismo cido como sustrato.
Se reconocen pues dos fases (acidogenica y solventogenica) durante el crecimiento
de estos organismos, que pueden emplear hexosas o pentosas.
A pH menores de 6 se formarn productos neutros y a pH mayores de 6, productos
cidos.
Clostridium butiricum forma cido butrico e isopropanol.
Clostridium acetobutilicum forma butanol y acetona
Clostridium thermocellum forma etanol y cido actico.

FERMENTACION DE AMINOACIDOS
Esta clase de fermentacin es realizada exclusivamente por los
clostridios, por ejemplo: Clostridium perfringes. Esta bacteria
presenta la REACCION DE STICLAND que viene a ser la
reaccin acoplada de dos aminocidos, uno funciona como donador
de electrones y el otro como aceptor.
AMINOACIDOS OXIDADOS:
Alanina, leucina, isoleucina, vaina, histidina
AMINOACIDOS REDUCIDOS:
Glicina, prolina, hidroxiprolina, triptofano.

METABOLISMO CELULAR
RESPIRACION CELULAR

RESPIRACION AEROBICA

CADENA TRANSPORTADORA DE ELECTRONES

BIOLUMINISCENCIA
Ruta alternativa y permite la produccin de la luz ms que de ATP,
por ejemplo, los gneros Beneckea y Photobacterium (bacilos gram
negativos) los cuales presentan la enzima LUCIFERASA y un
aldehido aliftico de cadena larga ( ej. Dodecanal). La luciferasa
capta los electrones de FMN y la luz es emitida cuando la enzima
activada retorna a su estado original.

FOTOSINTESIS

FOSFORILACIN A NIVEL DE SUSTRATO. FERMENTACIONES

La fosforilacin a nivel de sustrato es un sistema usado por ciertas bacterias
quimiorganotrofas. El sustrato orgnico (donador de electrones) es oxidado por un
coenzima (p. ej., NAD+), de manera que se origina un intermediario no fosforilado con una
gran energa de hidrlisis. Dicho intermediario experimenta una sustitucin con un fosfato,
para dar la correspondiente forma acil-fosfato (siendo este enlace de alta energa).
Finalmente, este acil-fosfato dona su fosfato de alta energa al ADP, que pasa a ATP.

gliceraldehido-3-P-->1,3-difosfoglicrico -->3-fosfoglicrico
La fosforilacin a nivel de sustrato est acoplada a un proceso metablico denominado
Fermentacin. Durante la fermentacin, el sustrato orgnico reducido (DH2) es catabolizado,
de modo que se produce ATP. Este catabolismo genera, adems:

equivalentes de reduccin (en forma de NADH y otros cofactores reducidos), e

intermediarios oxidados de la ruta catablica.

Pues bien, es caracterstico de las fermentaciones que los equivalentes de reduccin

reaccionen con uno de esos intermediarios (A), que de este modo se reduce a AH2 (producto
de la fermentacin), regenerndose el cofactor en forma oxidada (NAD+) para el siguiente
ciclo.
El rendimiento de las fermentaciones, expresado como variacin de energa libre, es bajo. En
la fermentacin homolctica se producen 2 moles de ATP por cada mol de glucosa
consumido (frente a los 28 moles de ATP/mol de glucosa en la respiracin aerobia). Esto
significa que para que el microorganismo crezca en estas condiciones, degrada grandes
cantidades de sustrato fermentable.

Las fermentaciones se dan en determinados microorganismos

quimiorganotrofos, que pueden ser anaerobios obligados o
anaerobios facultativos (cuando crecen en ausencia de O2).
Hay una gran variedad de fermentaciones microbianas, y
cada tipo libera uno o varios productos de fermentacin
caractersticos. Algunos ejemplos:
Fermentacin lctica

Lactato

Fermentacin alcohlica

Etanol, CO2

Fermentacin cida-mixta

Etanol, succinato, acetato, formiato, lactato, CO2, H2

Fermentacin butilngliclica Butilnglicol, CO2

Fermentacin aceto-butrica
CO2, H2

Acetato, acetona, butirato, butanol, etanol,

FOSFORILACIN OXIDATIVA. RESPIRACIONES

Respiracin es la obtencin de energa por oxidacin de sustratos
orgnicos (en quimiorganotrofas) o inorgnicos (quimiolitotrofas), pero
los coenzimas reducidos (ej., NADH) transfieren los electrones a un
aceptor final oxidado, no directamente (como en la fermentacin), sino a
travs de una cadena transportadora de electrones.
Si el aceptor final es el O2, hablamos de respiracin aerobia;
Si el aceptor final es distinto del O2 (nitrato, sulfato, etc.),
respiracin anaerobia.
En ambos casos, la transferencia se da ordenadamente, en la direccin
de mayor potencial redox positivo, con la consiguiente liberacin de
energa libre. Como veremos enseguida, esta energa libre se va a
traducir en un potencial electroqumico de protones, cuya disipacin a
travs de ATP-asas de membrana origina ATP, conocindose este
proceso como fosforilacin oxidativa.

Esquema y balance de la fosforilacin oxidativa

Como el alumno seguramente sabr, el mecanismo de la fosforilacin oxidativa se suele explicar en
base a la teora quimiosmtica de Mitchell (1961 y aos siguientes).
Recordemos que la c.t.e. est formada por una serie ordenada de molculas transportadoras situadas
(en bacterias) en la membrana citoplsmica (y en sus invaginaciones), molculas que sufren
oxidaciones y reducciones reversibles:

DH2 + A ---------> AH2 + D

Principales tipos de componentes de las c.t.e. respiratorias
flavoprotenas (Fp), dotadas de grupos FAD o FMN
protenas no hmicas de Fe-S
quinonas:
ubiquinona (UQ)
menaquinona (MQ), ms frecuente en bacterias Gram-positivas.
citocromos (protenas hmicas con Fe quelado).
Observar que algunos de estos transportadores transportan tomos de H (o sea, protones y electrones),
mientras que otros transportan nicamente electrones.
La situacin de los transportadores dentro de la membrana es asimtrica, lo que condiciona que el
transporte sea un proceso vectorial (es decir, tiene un sentido determinado), de modo que los H salen
hacia afuera y los electrones tienden a entrar al interior.
Como resultado de todo ello, tenemos que existen determinados puntos de la c.t.e. (llamados bucles o
lazos translocadores de protones) en los que el efecto neto es la salida de protones al exterior de la
membrana citoplsmica (concretamente, en los puntos donde confluyen un transportador de H y otro
de electrones). Es decir, existe una translocacin de protones hacia el exterior ligada a las reacciones
redox que ocurren en la c.t.e.

sntesis de ATP a partir del gradiente de protones:

La sntesis de ATP ocurre gracias al complejo ATP-asa, funcionando como ATP-sintetasa. Este complejo consta
de varios polipptidos que conforman dos porciones: la hidrofbica BF0, inserta en la membrana citoplsmica, y la BF1 a modo
de tallo que se proyecta hacia el interior celular.
La porcin BF0 forma un canal a travs de la membrana, por donde pueden pasar H+ desde el exterior al
interior, y agua desde dentro hacia afuera.
La porcin BF1 es la parte enzimticamente activa del complejo.
Esencialmente, el mecanismo consiste en que la disipacin del gradiente de protones a travs de BF0 suministra la energa
para la sntesis de ATP por parte de la BF1. La reaccin se puede expresar as:
2H+ (ext) + ADP (int) + P (int) -------> 2H+ (int) + ATP (int) + H2O (ext)
El balance final del funcionamiento de la c.t.e. es:
DH2(int) + A(int) + ADP(int) + P(int) D(int) + AH2 + ATP(int) + H2O (ext)
El esquema anterior hace referencia al funcionamiento de una cadena transportadora con un solo bucle translocador de
protones. Pero en la realidad las c.t.e. suelen poseer ms de uno de estos bucles.
Vase en la Fig. la c.t.e. de Paracoccus, una bacteria que posee un sistema similar al de las mitocondrias, donde se
observan 3 sitios donde termodinmicamente la variacin de energa libre es suficiente para apoyar la sntesis de una
molcula de ATP.
Vase tambin la c.t.e. de E. coli, cuando usa el O2 como aceptor final de electrones. En esta cadena podemos constatar algo
relativamente frecuente en las cadenas bacterianas:
En los quimiolitotrofos, la c.t.e. respiratoria funciona en los dos sentidos:
En su sentido "normal", ya estudiado. Un donador inorgnico de electrones cede electrones, que llegan a la c.t.e., que crea un
gradiente de protones, cuya disipacin a travs de ATP-asa genera ATP;
Pero estas bacterias necesitan equivalentes de reduccin (NADPH) para reducir el CO2 (su fuente exclusiva de C) hasta
material orgnico celular [CH2O]. Este NADPH lo logran merced a un flujo invertido de electrones a travs de la c.t.e., usando
para ello como energa parte del potencial de protones generado por el flujo normal.

Por otro lado, la membrana es impermeable a los protones, por lo que

los protones translocados a resultas del funcionamiento de las c.t.e. no
pueden entrar directamente. Por lo tanto, se crea un gradiente
electroqumico de protones, compuesto de gradiente osmtico de esos
iones H+ (pH) y un gradiente de carga elctrica ( ). Este gradiente es
una forma de energa potencial que puede realizar trabajo.
El valor de este gradiente electroqumico de protones o fuerza protn
motriz (f.p.m.) es:
p = -ZH (expresado en milivoltios, mV),
donde Z = 2,3 RT/F, siendo R= constante de los gases, T= temperatura
absoluta, F= constante de Faraday
Como ya dijimos, esta p (f.p.m.) es capaz de realizar trabajo, bajo la
forma de:
transporte activo,
alimentar el motor flagelar
sntesis de ATP.