I.

INDICE

Caratula
ndice

Pgina 1

Introduccin

Pgina 2

Objetivos

Pgina 3

Marco Terico

Pgina 4

Marco Terico

Pgina 5

Marco Terico

Pgina 6

Marco Terico

Pgina 7

Marco Terico

Pgina 8

Marco Terico

Pgina 9

Materiales

Pgina 10

Materiales

Pgina 11

Materiales

Pgina 12

Materiales

Pgina 13

Materiales

Pgina 14

Mtodos

Pgina 15

Mtodos

Pgina 16

Resultados

Pgina 16

Conclusiones

Pgina 17

Recomendaciones

Pgina 18

Bibliografas

Pgina 19

Anexos

II.

INTRODUCCIN

En el presente informe se presentaran los procesos de recoleccin,

sembrado y recoleccin de resultados de la recoleccin de aguas de rio
recolectada en Chaupihuaranga, ubicada en ambo.
Para dicho proceso realizamos una caminata para dar con el rea apropiada
para la recoleccin, una vez tomada la muestra posterior de los datos
recolectados se almaceno hasta que se realizado el proceso de sembrado en
los diversos tipo de agar, logrado el proceso mantuvo almacenado a
temperatura ambiente para lograr el desarrollo de los microorganismos y
para identificar si llegaban a ser perjudiciales se us el proceso de coloracin
Gram para ello sus previos pasos debieron ser realizado de manera
apropiada que ser explicada de manera ms adelante.
El objetivo del presente informe es el desarrollo de los procesos de
recoleccin, siembra y recoleccin de resultados segn indicadores de la
coloracin de manera prctica en conclusin aunque en el rio no resulto
hallarse escherichia coli un peligro para consumo humano se hall bacterias
patgenas.

III.

OBJETIVOS
-

Es obtener una muestra representativa del agua para poder

determinar a partir de ella su calidad microbiolgica de inters
sanitario.
Obtener de un agua una muestra representativa de sus
caractersticas, respetando la composicin microbiolgica del agua
captada para asegurar unos resultados fiables.
Determina presuntos Estreptococos fecales en la muestra de agua.
Comprobacin de microorganismos en el agua.

IV.

MARCO TERICO

4.1 Definicin:
4.1.1 Microbiologa
La microbiologa es el campo cientfico que se ocupa del estudio de los
organismos microscpicos, comnmente conocidos como microorganismos.
4.1.1 Microorganismos
Todas las criaturas vivientes estn formadas por clulas. Las clulas son
unas muy pequeas unidades bsicas de la vida. Son las estructuras mas
pequeas capaces de realizar los procesos bsicos de la vida, tales como
absorcin de nutrientes y expulsin de desechos. Las clulas solo se pueden
observar al microscopio.
Los microorganismos son organismos normalmente formados por una sola
clula.
Debido a esto, a veces se les denomina organismos unicelulares.
Son tan pequeos que los humanos no los podemos visualizar. Solo los
podemos ver a travs de un microscopio, mediante el cual las clulas son
agrandadas enormemente.
Al principio, los microorganismos no eran vistos como un tipo diferente de
organismo. Los microorganismos que realizaban fotosntesis eran incluidos
en el reino vegetal, y los microorganismos que ingeran alimentos eran
situados en el reino animal. Sin embargo, en el siglo XIX, los cientficos
identificaron una amplia variedad de microorganismos con diversas
estructuras celulares, estructuras internas muy especficas, y patrones de
reproduccin muy especficos que les hicieron darse cuenta de que estos
organismos no pertenecan a los reinos vegetal ni animal.

4.2 Tipos de microorganismos

Los microorganismos se clasifican segn sus caractersticas celulares, de la
misma forma que los vegetales y los animales. Existen dos tipos de
microorganismos. El primer tipo es el organismo eucarionte (protista). La
mayora de los organismos son eucariontes, lo que bsicamente significa que
las clulas por las que estn formados contienen ncleo y otras partes
internas rodeados por membrana. El segundo tipo de microorganismos es el
microorganismo procarionte (mnera).
4

Las clulas procariotas estn rodeadas de una membrana, pero no contienen

ncleo ni otras partes internas (orgnulos), al contrario que las clulas
eucariotas.

4.2.1 Mnera y protistas

Las mneras son las bacterias y cianobacterias. Son organismos
procariontes unicelulares, como mencionamos anteriormente. Las bacterias
son muy importantes para otros organismos, porque descomponen la materia
orgnica. Durante este proceso se forman nutrientes, que son reutilizados
por los vegetales y animales. Algunas de las bacterias que viven en el suelo
pueden causar enfermedades, pero la mayora de ellos son bastante tiles
ya que ayudan a los animales a descomponer los alimentos en su cuerpo.
Las bacterias difieren de otros tipos celulares en el hecho de que no tienen
ncleo. En los vegetales y animales es all donde se encuentra el ADN
(informacin gentica). En las bacterias el material gentico flota dentro de la
clula. Se reproducen copiando primero su ADN y luego realizando la
divisin celular.
Las bacterias tampoco tienen orgnulos rodeados de membrana, tales como
las mitocondrias, las estructuras celulares implicadas en el metabolismo
energtico.
Las clulas bacterianas son tan pequeas que los cientficos las miden en
unidades llamadas micrmetros (m), una millonsima de metro. Una
bacteria
promedio
mide
alrededor
de
un
micrmetro.
Las bacterias tienen diferentes tipos de apariencia, tales como bacterias
esfricas (cocos) y filamentosas (bacilos).

Bacteria esfrica
Bacteria filamentosa
Los protistas son microorganismos eucariontes unicelulares, como hemos
mencionado anteriormente. Algunos ejemplos son las amebas, las

diatomeas, las algas y los protozoos. stos pueden ser un peligro para la
salud humana y animal, ya que ciertos protistas pueden ocasionar
enfermedades, tales como la malaria o la enfermedad del sueo.
Hay una gran variedad de protistas, y habitan diferentes ambientes; agua
dulce, agua salada, suelos, y el tracto intestinal de los animales, donde llevan
a cabo procesos digestivos decisivos.
Muchas especies de protistas son capaces de producir sus propios nutrientes
mediante el proceso de la fotosntesis y muchos protistas tambin pueden
moverse por s mismos. Los protistas varan enormemente en forma y
tamao; el alga verde Nanochlorum mide solamente 0.001 mm de largo, pero
las laminarias pueden crecer hasta los 65 m de largo o ms.

4.3 Microorganismos acuticos

A veces se pueden encontrar en el agua potable microorganismos causantes
de enfermedades. Sin embargo, como hoy en da el agua potable es
meticulosamente desinfectada, las enfermedades provocadas por
microorganismos son raramente causadas por beber agua.
Las personas que nadan en las piscinas encontrarn que el agua en el que
nadan est desinfectada con cloro, ozono, UV o dixido de cloro. Pero hay
personas que nadan en el exterior en aguas superficiales todos los aos.
Estas son las personas ms susceptibles de contraer infecciones bacterianas
e infecciones causadas por otros microorganismos, porque los
microorganismos a menudo acaban en las aguas superficiales a travs de
vertidos industriales y excrementos animales. Los nadadores de espacios
exteriores deben ser cuidadosos y leer los carteles situados en las orillas,
porque el agua en la que pretenden nadar puede estar infectada, por ejemplo
con el botulismo.
Hay varias bacterias y protozoos que pueden provocar enfermedades
cuando estn presentes en aguas superficiales.
Las bacterias no solo pueden provocar enfermedades cuando entran en el
cuerpo humano a travs de los alimentos, las aguas superficiales tambin
pueden ser una fuente importante de infecciones bacterianas. En la siguiente
tabla puede ver varias bacterias que se pueden encontrar en aguas
superficiales, y las enfermedades que causan cuando son ingeridas en
grandes cantidades, junto con los sntomas.
Bacteria

Enfermedad/infecci

Sntomas
6

Enteritis

Diarrea muy
sangre y moco

Campylobacter jejuni

Campilobacteriosis

Gripe, diarres, dolor de cabeza

y estmago, fiebre, calambres
y nuseas

Escherichia coli

Infecciones del tracto

urinario,
meningitis Diarrea acuosa, dolores de
neonatal,
cabeza,
fiebre,
uremia
enfermedades
homiltica, daos hepticos
intestinales

Aeromonas

lquida,

con

Plesiomonas
shigelloides

Plesiomonas-infeccin

Nuseas, dolores de estmago

y diarrea acuosa, a veces
fiebre, dolores de cabeza y
vmitos

Salmonella typhi

Fiebre tifoidea

Fiebre

Salmonella sp.

Salmonelosis

Mareos,
calambres
intestinales, vmitos, diarrea y
a veces fiebre leve

Streptococcus

Enfermedad
intestinal

Vibrio El
dulce)

Tor

(agua

(gastro) Dolores de estmago, diarrea y

fiebre, a veces vmitos

Clera (forma leve)

Fuerte diarrea

Los protozoos se pueden acumular en ciertas partes del cuerpo, despus de

haber penetrado en el cuerpo humano. Las acumulaciones se llaman cistos
debido a su naturaleza parasitaria, los protozoos pueden provocar diferentes
enfermedades.
7

En esta tabla puede ver diversos protozoos que se pueden encontrar en

aguas superficiales, y las enfermedades que causan cuando son ingeridos
en grandes cantidades, junto con los sntomas.
Microorganismo

Amoeba

Cryptosporidium
parvum

Giardia

Toxoplasm gondii

Enfermedad

Sntomas

Disenteria ameboide

Fuerte diarrea, dolor de

cabeza,
dolor
abdominal,
escalofros, fiebre; si no se
trata puede causar abscesos
en el hgado, perforacin
intestinal y muerte

Criptosporidiosis

Sensacin de mareo, diarrea

acuosa, vmitos, falta de
apetito

Giardiasis

Diarrea,
abdominales,
eruptos, fatiga

Toxoplasmosis

Gripe, inflamacin de las

glndulas
linfticas
En
mujeres
embarazadas
aborto e infecciones cerebrales

calambres
flatulencia,

4.3.1 Cmo eliminamos del agua los microorganismos dainos?

Para eliminar del agua los microorganismos dainos solemos usar
desinfectantes. Algunos ejemplos de desinfectantes son cloro, UV, ozono
(O3) y dixido de cloro (ClO2). Existen unas cuantas ventajas y desventajas
diferentes entre las diversas tcnicas de desinfeccin, como se muestra en
nuestra pgina de desinfeccin
Los compuestos qumicos que son dainos para cierto tipo de
microorganismos se utilizan a menudo para eliminarlos. Estos compuestos
qumicos son conocidos como biocidas, porque son mortales para los
microorganismos.

4.3.2 Cmo se pueden utilizar los microorganismos durante el

tratamiento del agua?
Los microorganismos se pueden utilizar para descomponer contaminantes en
aguas residuales. Este tipo de tratamiento de agua se denomina tratamiento
biolgico del agua.
Durante el tratamiento biolgico del agua los microorganismos descomponen
la materia orgnica del agua, nitratos y fosfatos. Esta es una breve
explicacin de cmo funcionan esos procesos de tratamiento biolgico del
agua.
4.3.3 Eliminacin de amoniaco y nitratos
Es un proceso de tratamiento del agua que necesita conversin tanto
aerbica como anaerbica para eliminar los contaminantes.
En la fase de conversin aerbica hay dos especies bacterianas implicadas.
Primero, las bacterias Nitrosomonas convierten el amoniaco en nitrito.
Segundo, las bacterias Nitrobacter convierten los nitritos en nitratos. Estos
dos procesos juntos son comnmente conocidos como el proceso de
nitrificacin.
Despus de eso, las bacterias anaerbicas entran a actuar. Estas bacterias
convierten los nitratos en nitrgeno gaseoso atmosfrico. Este proceso se
llama desnitrificacin. La desnitrificacin es realizada por con muchas
bacterias anaerbicas, tales como Achromobacter, Bacillus y Pseudomonas.
La primera fase de la desnitrificacin es el proceso inverso a la nitrificacin,
vuelve a transformar el nitrato en nitrito. La segunda fase de la
desnitrificacin transforma el nitrito en nitrgeno gas. Este gas puede ser
liberado a la atmsfera sin causar daos ambientales.
4.3.4 Eliminacin de fosfatos
Los fosfatos pueden ser eliminados de las aguas residuales por una bacteria
aerbica (oxgeno-dependiente), llamada Acinetobacter. Esta bacteria
acumula polifosfatos en los tejidos celulares.
Acinetobacter puede absorber una mayor cantidad de fosfatos de la que
necesita para su sntesis celular. La cantidad extra de fosfatos es
almacenada en las clulas en forma de polifosfatos.
El almacenamiento de polifosfatos hace que las Acinetobacter sean capaces
de sobrevivir temporalmente en circunstancias anaerbicas. Cuando las
Acinetobacter residen en una zona anaerbica en las aguas residuales,
absorbe cidos grasos y los almacena como sustancias de reserva. Durante
9

este proceso, los polifosfatos se descomponen para obtencin de energa,

haciendo que se liberen fosfatos en la zona aerbica. Cuando las
Acinetobacter entran en la zona aerbica absorben fosfatos y los almacenan
en forma de polifosfatos en los tejidos celulares. Esto hace que el contenido
en fosfatos del agua residual disminuya.

V.

MATERIALES

5.1. Tcnicas de recoleccin de muestra

5.1.1 Botas

5.1.2 Wincha

5.1.3 Botella esterilizada

10

5.1.4 Hielo

51.5 Caja de tecnopor

5.2 Materiales de Tcnicas de Muestreo para sembrar microorganismos

5.2.1 Agars.
-

Agar sabonad.
Agar SS.
Agar sangre.

- Agar mccankey.
- agar nutritivo.

11

5.2.2 Botella con la Muestra de agua.

5.2.3 Placas Petri

-

5 Placas.

5.2.4 Asa de cole

12

5.2.5 Mechero

5.6.5 Autoclave

5.3 Materiales de los Resultados de la Muestra y Coloracin:

5.3.1 Placas Petri:

5.3.2 Mechero:

13

5.3.3 Isopo para el Agar:

5.3.4 Coloracin Gram:

-

Cristal violeta:

Lugol:

14

VI.

Alcohol Acetona:

Safranina:

MTODOS

6.1 Recoleccin de muestra del Rio Chaupihuaranga

o Hacer una medicin desde la orilla del ro a 20 metros para obtener
nuestra muestra.
o Una vez ya obtenida la muestra de agua se pondr en la caja de
tecnopor junto con el hielo.
o Una vez terminado el procedimiento tendremos que tener en cuenta
en que momento fue sacada la muestra (hora, fecha, GPS, y
temperatura).
6.1.1 Datos obtenidos en la recoleccin de muestra de agua
o Temperatura de la localidad de Ambo : 13 C
o Fecha : 08/10/2015
o Nombre del rio : Rio Chaupihuaranga
o Hora de la obtencin de la muestra : 10:00 am
o Profundidad del rio : 50 cm
o Referencia : Al costado del mercado general de Ambo
6.2 Mantenimiento de muestra obtenida del Rio Chaupihuaranga

15

o Tenemos que tener en cuenta ya hora en que fue sacada la muestra

ya que las condiciones cambian de acuerdo al tiempo
o La muestra de agua estuvo 12 das en la refrigeradora para conservar
a los microorganismos.
6.3 Mtodo de preparacin de la muestra

Con la ayuda de un mechero, flamear un asa de micrn o

bacteriolgica hasta el rojo vivo y esperar a que enfri un poco.
Tomar con el asa un poco de muestra bacteriana a partir de una
colonia aislada.
Despus agregar la muestra en la gota de agua que est en el
portaobjetos y homogeneizar suavemente con movimientos circulares.
Esperar que seque al aire o poner durante uno o dos segundos con la
llama de un mechero para fijar la muestra, teniendo en cuenta que el
calor no debe ser directo (solo se pasa por la llama), puesto que el
calor excesivo puede cambiar la morfologa celular de las bacterias a
observar.

6.4 Mtodo de Coloracin Gram

VII.

Agregar cristal violeta solo el suficiente para que se cubra el extendido

bacteriano dejar actuar durante 60 segundos enjuagar con agua
corriente.
Agregar el Lugol solo el suficiente, dejar actuar durante 60 segundos,
enjuagar con agua corriente.
Agregar una o dos gotas de alcohol acetona e inmediatamente
enjuagar con agua corriente.
Agregar safranina, solo la suficiente, dejar actuar durante 60
segundos, enjuagar con agua corriente. Dejar secar a temperatura de
ambiente.
Observar en un microscopio ptico con un objetivo 100x usando aceite
de inmersin.

RESUSTADOS

7.1 Rio Chaupihuaranga

16

o En la muestra de agua del rio Chaupihuaranga hemos podido

observar en las placas colonias de bacterias y hongos.
o Al observar en el microscopio logramos identificar que eran cocos
gran negativo (patgeno).
o Hemos podido observar tambin muestra de agua del rio Huallaga
y podramos decir que entre ambos ros existen Estreptococos y
bacilos gram negativo.
7.2 Coloracin Gram
En nuestra muestra se observaron:

VIII.

Bacilos Gram negativos.

Cocos Gram negativos.

CONCLUSIONES

El agua constituye un elemento esencial, ya que es esencial para la

vida por lo que es necesario llevar un seguimiento de calidad. Para
saber si es apto para el consumo humano.
Importancia de conocer las especies presentes en los sistemas
acuosos naturales y el comportamiento en su ambiente.
Con este trabajo de siembra hemos podido determinar el estado del
agua en que se encuentra el rio, tambin sabemos que no son
buenas para el consumo humano.
Es importante monitorear los parmetros biolgicos del agua para as
determinar el estado de la misma, con ello podemos determinar el
tratamiento a realizar para su descontaminacin y el uso que le
podemos dar dependiendo del anlisis.

17

IX.

RECOMENDACIONES
Utilizar envases estriles a la hora de hacer el muestreo de agua.
Conservar la muestra de agua en la refrigeradora.
Tener la muestra debidamente cerrada e identificada.
Se recomienda la utilizacin de mascarilla, guardapolvo y guantes al
momento de manipular la muestra de agua.
Lavarse las manos continuamente.
Al momento de extraer las colonias para su posterior observacin al
microscopio evitar hablar.

18

X.

BIBLIOGRAFIA
www.ciat,org/..../log001-anexos -rev1-instructivo%20toma20de%20m
http://virus.usal.es/Web/demo_fundacua/demo2/toma_muestra/toma_
muestras.html
http://www.ciati.org/ciatiac/Documentos/LOG001-Anexo7-rev1Instructivo%20toma%20de%20muestras%20Aguas.pdf
http://riohenares.org/index.php/rio-henares/medio-fisico/36-estudiocalidad-microbiologica-.html
http://www.redalyc.org/pdf/1812/181226874006.pdf
https://www.upct.es/~minaeees/analisis_microbiologico_aguas.pdf
http://tecnologosencontrolambientalsenacicuc.blogspot.pe/p/manualde-procedimiento-de-toma-de.html
http://ocw.um.es/cc.-de-la-salud/higiene-inspeccion-y-controlalimentario/practicas-1/practica-1-analisis-microbiologico-de-aguas-por
http://www.condalab.com/industrias/aguas.html
http://www.monografias.com/trabajos15/analisis-agua/analisisagua.shtml

19

20