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UNIVERSIDAD NACIONAL DE PIURA

FACULTAD DE MEDICINA HUMANA


DEPARTAMENTO DE MEDICINA
AREA CLNICO - QUIRRGICA

ENTEROBACTERIAS CLINICAMENTE SIGNIFICATIVAS EN


Anadara tuberculosa Y Argopecten purpuratus PROCEDENTES
DEL TERMINAL PESQUERO DE PIURA
AUTORES:
-

ANTN CHECA, JUSTO


SMBALA JALCA, GIENNIER
ZAPATA MASAS, VANESSA

Mcblgo. JAIME FERNANDEZ PONCE

ASESOR:

COLABORADOR:
-

Blgo. HUMBERTO RIVERA CALLE.

PIURA PER

SUMARIO

ENTEROBACTERIAS EN CONCHAS NEGRAS Y DE ABANICO


OCTUBRE DICIEMBRE 2012.

1. DATOS GENERALES
1.1. Ttulo del Anteproyecto de Tesis
1.2. Autor
1.3. Asesor
1.4. Asesor Estadstico
1.5. Facultad
1.6. Departamento acadmico
1.7. Lugar de estudio
1.8. rea de estudio
2. DEFINICION DEL PROBLEMA
2.1. Ttulo
2.2. Antecedentes
2.3. Justificacin
2.4. Objetivos
2.4.1.1. Objetivos Generales
2.4.1.2. Objetivos Especficos
2.5. Enunciado del Problema
2.6. Hiptesis
3. MARCO TEORICO
3.1. Marco conceptual
3.2. Bases Tericas
3.3. Definicin de Trminos
4. DEFINICIN DE LAS POBLACIONES DE ESTUDIO
4.1. Caractersticas Generales
4.1.1.1.1. Criterios de Inclusin
4.1.1.1.2. Criterios de Exclusin
4.2. Ubicacin Temporo Espacial
5. METODOLOGA
5.1. Tipo de Investigacin
5.2. Universo
5.3. Poblacin
5.4. Tamao y seleccin de la muestra.
6. OPERACIONALIZACIN DE VARIABLES Y ESCALAS DE MEDICIN

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7. RESULTADOS
8. DISCUSIN
9. CONCLUSIONES
10. RECOMENDACIONES
11. ANEXOS
12. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

RESUMEN
Este estudio tiene como objetivo determinar y comparar las especies de
enterobacterias presentes en Anadara tuberculosa (conchas negras) y Argopecten
purpuratus (conchas de abanico) adquiridas en el terminal pesquero de Piura
durante el periodo de Octubre - Diciembre del 2012.
Para este estudio adems se contabilizar la carga bacteria presentes en cada
uno de estas especies de conchas. Esto nos reflejar el impacto que tienen estos
alimentos al ser consumidos.
Resultados (an no se hace la parte prctica).

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INTRODUCCIN

Las conchas marinas en el Per son un producto no slo de consumo sino


tambin de exportacin; adems de ser uno de los elementos principales de uno
de las comidas representativas del Norte peruano.
En este trabajo se va a determinar y comparar las especies de enterobacterias
presentes en Anadara tuberculosa (conchas negras) y Argopecten purpuratus
(conchas de abanico adquiridas en el terminal pesquero de Piura durante el
periodo de Octubre - Diciembre del 2012, esperando encontrar tambin la carga
bacteriana en cada uno de ellos y tener un indicio de cuan expuesto est el
consumidor a las intoxicaciones producidas por enterobacterias.
Esto nos lleva a desarrollar propuestas de prevencin y control en el trato de estas
especies de conchas que nos permitan disminuir la carga bacteriana y tambin a
identificar las especies presentes en estas.

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OCTUBRE DICIEMBRE 2012.

1. DATOS GENERALES
1.1. Ttulo
Enterobacterias clnicamente significativas en Anadara tuberculosa
(conchas negras) y Argopecten purpuratus (conchas de abanico)
procedentes del terminal pesquero de Piura durante el periodo de
Octubre Diciembre del 2012.
1.2. Autores
-

Antn Checa, Justo. Estudiante de Medicina. 2do Ao.


Smbala Jalca, Giennier. Estudiante de Medicina. 2do Ao.
Zapata Masas, Vanessa. Estudiante de Medicina. 2do Ao.

1.3. Asesor
Mcblgo. Jaime Fernndez Ponce.
1.4. Colaborador
Blgo. Humberto Rivera Calle.
1.5. Facultad
Facultad de Medicina Humana
Escuela de Medicina Humana.
1.6. Departamento acadmico
Departamento acadmico de Medicina.
rea clnico quirrgica.
1.7. Lugar de estudio
Piura
1.8. rea de estudio
Terminal pesquero de Piura
2. DEFINICIN DEL PROBLEMA
2.1. Ttulo
Enterobacterias clnicamente significativas en Anadara tuberculosa
(conchas negras) y Argopecten purpuratus (conchas de abanico)
procedentes del terminal pesquero de Piura durante el periodo de
Octubre Diciembre del 2012.

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2.2. Antecedentes
En noviembre del 2000 en un trabajo presentado por la Facultad de
Ciencias de Ingeniera de la Universidad Tecnolgica Equinoccial, sobre
AISLAMIENTO

IDENTIFICACIN

DE

ENTEROBACTERIAS

PRESENTES EN LA CONCHA NEGRA (Anadara tuberculosa) en la que


utilizaron

diversas

tcnicas

como

enriquecimiento,

aislamiento

propiamente, purificacin e identificacin; las cuales dieron como


resultado la presencia de dos enterobacterias: Klebsiella planticola,
Escherichia coli, llegando a la conclusin de que haba un posible riesgo
de intoxicacin para el consumidor.
2.3. Justificacin
Se sabe que las enterobacterias suelen encontrarse en el intestino de los
mamferos y algunas de ellas son capaces de provocar intoxicaciones
alimentarias es por esto que se indaga su presencia en conchas negras y
conchas de abanico.

Ahora bien, por qu especficamente en conchas negras y de abanico?;


pues la eleccin de estos alimentos tambin responden a razones
concretas, empezando desde la extraccin no se cumple con las
medidas de seguridad necesarias por ser casi siempre pesca artesanal;
adems, a las conchas se les considera un filtrador de microorganismos
y es un alimento muy consumido en el medio.
2.4. Objetivos
2.4.1.1.
-

Objetivos Generales

Determinar y comparar las especies de enterobacterias presentes en


Anadara tuberculosa (conchas negras) y Argopecten purpuratus
(conchas de abanico adquiridas en el terminal pesquero de Piura
durante el periodo de Octubre - Diciembre del 2012.

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2.4.1.2.

Objetivos Especficos

.
-

Aislar enterobacterias.
Identificar las enterobacterias obtenidas en las siembras.
Recuento de la carga bacteriana en las conchas negras y de abanico.

2.5. Enunciado del Problema


Sern diferentes las especies de enterobacterias encontradas en Anadara
tuberculosa (concha negra) y Argopecten purpuratus (concha de abanico)?

2.6. Hiptesis
Se sabe que Anadara tuberculosa habitan en aguas estuarinas mientras que
Argopecten purpuratus habitan exclusivamente en aguas de mar; por ende se
supone que las especies de enterobacterias se encuentren en ambas sern
distintas.
3. MARCO TEORICO
3.1. Marco conceptual
ENTEROBACTERIA
La familia

Enterobacteriaceae constituye un grupo grande y heterogneo de

bacterias gramnegativas. Reciben su nombre por la localizacin habitual como


saprofitos en el tubo digestivo, aunque se trata de grmenes ubicuos,
encontrndose de forma universal en el suelo, el agua y la vegetacin, as como

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formando parte de la flora intestinal normal de muchos animales adems del


hombre.
Escherichia coli, el microorganismo ms prevalente de esta familia, es una de las
bacterias prototpicas sometidas a estudio.
a). ESTRUCTURA:

Los miembros de la familia Enterobacteriaceae son microorganismos con forma de


bastn, por lo general de 1-3 m de largo y 0,5 m de dimetro. Como en otras
bacterias gramnegativas, su envoltura celular se caracteriza por una estructura
multilaminar. La membrana interna (o citoplasmtica) consiste en una doble capa
de fosfolpidos que regula el paso de nutrientes, metabolitos y macromolculas. La
capa siguiente, o capa externa, consiste en un peptidoglucano delgado junto con
un espacio periplsmico que contiene una elevada concentracin de protenas. La
membrana externa compleja consiste en otra doble capa de fosfolpidos que
incluyen lipopolisacrido (LPS) (en la parte ms externa, son un importante factor
de virulencia de estas bacterias), lipoprotenas (que estn fijadas laterales de
oligosacrido de repeticin. El lpido A, tambin conocido como endotoxina, es la
parte biolgicamente activa de la molcula que el husped reconoce. El
oligosacrido de repeticin unido al LPS se conoce como antgeno O. Este
antgeno es la base para la clasificacin de los serogrupos. Junto con otros
factores, la presencia del antgeno O media la resistencia bacteriana al efecto
bactericida del suero normal, siendo capaces por tanto de sobrevivir ms tiempo
en sangre y causando infecciones hematgenas, diseminadas y ms graves.
b). PATGENOS ESPECFICOS
b.1). ESCHERICHIA COLI:

Escherichia coli es el microorganismo de vida libre que mejor se ha


estudiado. Estas bacterias pueden ser mviles (la mayora) o inmviles,

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la mayor parte de ellas fermentan la lactosa y son capaces de producir


indol a partir de triptfano.
b.1.1). INFECCIONES ENTRICAS CAUSADAS POR ESCHERICHIA COLI
b.1.1.1). Escherichia coli enterotoxgeno.

Es una de las causas ms frecuentes de deshidratacin por diarrea en


nios de menos de dos aos y es la principal causa de la diarrea del
viajero, que en general se desarrolla en un individuo por lo dems sano
proveniente de un pas industrializado que visita regiones tropicales o
subtropicales caracterizadas por condiciones de higiene deficientes.
En general, los sntomas tienden a ser leves, con diarrea acuosa.
Ocasionalmente los sntomas pueden ser ms graves, con fiebre,
escalofros y vmitos. La enterotoxina estimula la secrecin masiva de
lquido por las clulas mucosas. Se supone que la ausencia de
gastroenteritis entre los residentes adultos de reas asociadas a la
diarrea del viajero se debe a su exposicin previa a estos antgenos de
colonizacin y al desarrollo de una inmunidad humoral apropiada.
El diagnstico de la infeccin por Escherichia coli enterotoxgena (ECET)
no suele confirmarse, pues se basa en la deteccin de los genes que
codifican la toxina termolbil (TL) y la toxina termoestable (TE) mediante
reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) o sondas de ADN.
b.1.1.2). Escherichia coli enteropatgeno.
Es una causa importante de diarrea en neonatos en los pases
subdesarrollados, causando enfermedad muy raramente en adultos en el
mundo desarrollado. Producen una lesin tpica en la mucosa, con la
formacin de microcolonias y la prdida de las microvellosidades
adyacentes.

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La patogenia incluye tres pasos: a) adherencia de los microorganismos a


los enterocitos; b) induccin de una seal de transduccin en los
enterocitos y c) desarrollo de adherencia ntima con los enterocitos.
Clnicamente se caracteriza por producir diarrea acuosa con ms o
menos fiebre o vmitos.
El diagnstico de infecciones por E. coli enteropatgena (ECEP) radica
en la deteccin de los genes codificadores de los factores de virulencia
especficos mediante el uso de sondas de ADN o PCR. Para su
prevencin son diversos los estudios que han demostrado el importante
papel de la lactancia materna en los primeros seis meses de vida.

b.1.1.3). Escherichia coli enteroagregativo.


Debe su nombre a la capacidad para agregarse en el cultivo en medio
celular. Puede considerarse una verdadera infeccin emergente. Los
estudios han relacionado las cepas de E. coli enteroagregativa (ECEA)
con diarrea aguda y crnica en los pases en vas de desarrollo y diarrea
aguda en pases desarrollados. Se ha descrito de forma excepcional
como causa de diarrea del viajero y, con mayor frecuencia, de diarrea
persistente en sujetos infectados por el virus de la inmunodeficiencia
humana (VIH).
La confirmacin diagnstica requiere que se realicen ensayos de
adhesin en cultivos tisulares. Es difcil asegurar que una cepa de ECEA
aislada en un paciente con diarrea sea la causa del cuadro, porque
tambin se encuentran en pacientes asintomticos.
b.1.2). INFECCIONES EXTRAINTESTINALES POR E. COLI

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b.1.2.1). Infecciones urinarias.


Si bien el sitio ms importante de colonizacin normal de las
enterobacterias es el tracto gastrointestinal, el sitio ms comn de
infeccin es el tracto urinario. E. coli es la causa ms frecuente de
infeccin urinaria. Las cepas de E. coli uropatgena (ECUP) tienen ms
probabilidades que las cepas fecales de generar fimbrias P que se unen
a los receptores de glucolpidos en la superficie de las clulas husped,
de encapsularse, de producir la toxina citoltica hemolisina y de tener
mltiples sistemas de adquisicin de hierro. Sin embargo, cada vez se
admite ms que la distincin entre ECUP y otras cepas que provocan
otras infecciones extraintestinales es artificial, y que estas cepas
deberan englobarse dentro de un patotipo nico denominado E. coli
Patognica extraintestinal (ECPEx). Esta observacin es vlida tanto
para las cepas que causan infeccin del tracto urinario (ITU) en
pacientes

con

tractos

urinarios

patolgicos

(litiasis,

anomalas

anatmicas, etc.) como para las infecciones de otras localizaciones (por


ejemplo, colangitis en pacientes con obstruccin de las vas biliares).
b.1.2.2). Infecciones respiratorias.
Las infecciones del tracto respiratorio suelen ser oportunistas. En los
pacientes con enfermedades graves, la alteracin de la fisiologa permite
la colonizacin de la va respiratoria y gstrica. El cuadro clnico suele ser
el de una bronconeumona que compromete ms a los lbulos inferiores,
con empiema en un tercio de los pacientes y bacteriemia en otro. La tasa
de mortalidad es alta (50% o ms) favorecida sobre todo porque afecta a
personas debilitadas.
b.1.2.3). Infecciones del sistema nervioso central.

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Los neonatos, durante su primer mes de vida estn particularmente


predispuestos a la meningitis bacteriana. E. coli y los estreptococos del
grupo B son responsables de la mayora de los casos.
Las cepas aisladas de pacientes con meningitis neonatal tienen ms
probabilidades que las cepas fecales de producir la cpsula K1 que dota
a la bacteria de mayor resistencia frente al suero y frente a la fagocitosis.
El embarazo se asocia con una tasa aumentada de colonizacin por
cepas K1. En la poblacin adulta la meningitis por E. coli se observa
asociada a: a) inmunodepresin, b) edad superior a 60 aos y c)
manipulacin quirrgica previa.

b.2). Salmonella sp:


Los serotipos de Salmonella sp se engloban dentro de una especie,
Salmonella choleraesuis. Existen ms de 2.000 serotipos diferentes que
se agrupan en seis grupos. Grupo A: S. paratyphi A; grupo B: S.
typhimurium y S. bredeney; grupo C1: S.choleraesuis, S. montevideo y S.
oranienburg; grupo C2: S. neuport; grupo D: S. typhi, S. enteritidis, S.
dublin y S. gallinarum; grupo E1: S. butantan, S. anatum y S. give. La
salmonelosis puede observarse bajo cinco diferentes sndromes clnicos,
que se presentan de forma exclusiva o superpuesta, y que corresponden
a

los

siguientes:

portador

asintomtico,

gastroenteritis

aguda,

bacteriemia (la presencia de una bacteriemia por Salmonella obliga a


descartar la existencia de una infeccin por el VIH), infecciones focales
(meningitis, osteomielitis o abscesos) y fiebre tifoidea. Se trata de un
gnero de enterobacterias no formadores de esporas, anaerobias
facultativas y mviles. Son oxidasa negativas y prcticamente todas
lactosa negativas.

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b.2.1). Fiebre tifoidea:


La fiebre tifoidea es una enfermedad sistmica febril causada por S.
typhi,

S.

paratyphi

ocasionalmente,

S.

typhimurium18.

Es

especialmente prevalente en el centro y sudeste asitico, sur de frica,


Hispanoamrica y Oceana, excepto Australia y Nueva Zelanda. El
reservorio es el hombre enfermo y el portador crnico que elimina bacilos
por las heces, producindose transmisin fecal-oral.
Se caracteriza por la aparicin de fiebre progresiva asociada a
estreimiento o diarrea profusa de carcter inflamatorio. Clsicamente se
ha asociado a esta enfermedad la bradicardia relativa, pero en realidad
es un dato con baja sensibilidad y especificidad. Las complicaciones ms
graves son la hemorragia digestiva, la perforacin intestinal y los
aneurismas miclicos.
b.3). Enterobacter:
Hasta la dcada de 1960 estos grmenes estaban agrupados en la
clasificacin de Klebsiella-Aerobacter. A diferencia de Klebsiella, los
Enterobacter son mviles y su cpsula tiende a ser menos notable. Las
cepas de Enterobacter suelen colonizar a los pacientes hospitalizados,
en particular a los tratados con antibiticos, y han sido asociados con
infecciones de quemaduras, de heridas, de las vas respiratorias y del
tracto urinario.
b.4). Yersinia:
Para el hombre los microorganismos patgenos son Yersinia pestis,
Yersinia enterocolitica y

Yersinia pseudotuberculosis. Se trata de

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zoonosis que habitualmente afectan a roedores, cerdos y aves, siendo el


ser humano un husped accidental de la infeccin. Y. pestis se desarrolla
de forma aerobia en la mayora de los medios de cultivo y no fermenta la
lactosa. Hay estudios

genticos que han demostrado que Y. pestis

deriva de la Yersinia enterocoltica


. Es el agente etiolgico de la peste, enfermedad que se considera
erradicada en Espaa. Y. enterocolitica e Y. pseudotuberculosis
producen enfermedad con frecuencia en Europa, sobre todo en los
pases del Norte de la misma. Esta predisposicin regional se puede
explicar por: a) mayor sensibilidad de los clnicos y los microbilogos
para su diagnstico y b) mayor exposicin a fuentes ambientales, sobre
todo a productos del cerdo Y. enterocoltica es una causa relativamente
infrecuente de diarrea, siendo algo ms frecuente en los pases
escandinavos. La infeccin por Y. pseudotuberculosis es la ms rara de
las yersiniosis. La manifestacin ms frecuente es la adenitis
mesentrica. Tambin se han descrito casos de eritema nodoso, que en
ocasiones se han presentado de forma epidmica
Los pacientes con septicemia por Y. enterocolitica deben recibir
antibioterapia, aunque la mortalidad es elevada a pesar del tratamiento
(50%).
b.5). Shigella:
Shigella spp. es responsable de la disentera bacilar. Se trata de un
cuadro muy similar al producido por las cepas enterohemorrgicas o
enteroinvasivas de E. coli. El origen de la infeccin se produce a travs
de la contaminacin de vegetales.

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El diagnstico se realiza a travs del coprocultivo. El tratamiento se basa


en la rehidratacin y tratamiento antibitico, que estara indicado en
todos los casos.
b.6). Citrobacter:
Los miembros del gnero Citrobacter se denominan as por su capacidad
para usar citrato como su nica fuente de carbono.
Se diferencian por su capacidad para convertir el triptfano en indol,
fermentar la lactosa y utilizar malonato. C. freundii produce H2S de ah
que pueda confundirse con Salmonella. El tracto urinario es el lugar de
origen ms frecuente de los cultivos de Citrobacter, a menudo asociado a
un catter insertado.
Estas bacterias tambin pueden cultivarse a partir de las vas
respiratorias,

un

hallazgo

que

representa

con

ms

frecuencia

colonizacin que infeccin sintomtica. Adems, las cepas de Citrobacter


estn implicadas en infecciones intraabdominales, infecciones de tejidos
blandos y osteomielitis. C. diversus ha provocado frecuentes brotes
nosocomiales de meningitis neonatal. Las cepas de C. freundii tienen
genes ampC inducibles que codifican la resistencia a la ampicilina y
cefalosporinas de primera generacin.
c). Importancia de recuento de enterobacterias en alimentos:
c.1). Microorganismos indicadores
Los moluscos, puesto que son animales ssiles que se alimentan filtrando
el agua, concentran sus bacterias y virus y pueden convertirse en
vehiculizadores peligrosos de microorganismos patgenos entricos. Su

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peligrosidad es doble porque muchos se consumen crudos o ligeramente


cocidos.
Por ello la presencia de determinados microorganismos en los alimentos
en este caso las conchas negras se puede aprovechar como un indicador
potente sobre algunos aspectos fundamentales relacionados con los
mismos.
Este tipo de microorganismos recibe la denominacin comn de
microorganismos indicadores y su investigacin y cuantificacin nos puede
aportar informacin sobre la seguridad sanitaria del alimento, su grado de
alteracin, su nivel de envejecimiento, la bondad de su proceso de
elaboracin, de transporte, etc.

c.2).Enterobacterias con significacin clnica

Citrobacter freundii, Citrobacter Koseri


Enterobacter aerogenes, Enterobacter cloacae
Escherichia coli
Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oxytoca
Morganella morganii
Proteus mirabilis
Salmonella entrica
Serratia marcescens
Shigella sonnei, Shigella flexneri
Yersinia pestis, Yersinia enterocoltica, Yersinia pseudotuberculo.
CONCHAS MARINAS

Una concha es la cobertura dura, rgida y exterior que poseen ciertos animales.
Solo se consideran conchas los exoesqueletos de los moluscos.

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Las conchas tienen tres capas, aunque alguna de ellas puede desaparecer en
ciertos grupos de moluscos. La ms interna es el ncar o endostraco. Es una
mezcla orgnica de capas de conquiolina (una escleroprotena) y cristales
de aragonito.

La

intermedia

es

el mesostraco,

donde

aparecen

cristales

prismticos de carbonato clcico (CaCO3), en forma de aragonito o calcita.


Por ltimo, el periostraco es una capa orgnica de conquiolina. A veces se dice
que las conchas contienen quitina, pero este es un material que no guarda
ninguna relacin, ya que es un polisacrido. Solamente podra decirse que la
conquiolina se parece a la queratina, porque ambas son escleroprotenas.

a). Conchas de Abanico:


IDENTIDAD TAXONOMICA
Familia

: Pectinidae

Nombre Cientfico

: Argopecten purpuratus (Lamarck, 1861)

Nombre comn

: concha de abanico

Nombre ingls

: Scallop

Nombre FAO

: Espaol: Ostin abanico

Ingls

: Peruvian callico scallop

DISTRIBUCIN
Argopecten purpuratus se distribuye desde Paita, Per (Alamo y
Valdivieso, 1987) hasta Valparaso, Chile (Bore y Martnez, 1980), dentro
de bahas semi-protegidas con sustratos sedimentarios (Brand, 1991).
Verticalmente ocupa la zona infralitoral de fondos arenosos, areno-

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pedregosos, areno-fangosos, con presencia de algas (Paredes et al,


1998; Valdivieso y Alarcn, 1985), en profundidades de 2 a 40m.
Los principales bancos naturales se ubican en la Baha de Sechura, Isla
Lobos de Tierra, Baha de Samanco, Baha Los Chimus, Isla Santa, Isla
Blanca, Callao y Baha Independencia.
ASPECTOS BIOLGICOS
Caractersticas de la especie Molusco bivalvo de la Familia Pectinidae
que presenta dos valvas comprimidas, articuladas dorsalmente, con 23 a
26 costillas radiales que delimitan surcos en los que se encuentran
estriaciones transversales.
La cavidad del manto es espaciosa y presenta branquias grandes que
han adquirido la funcin de acumular alimento, adems de la respiratoria.
Tiene un pie comprimido en forma de hacha y un msculo central que
sirve para cerrar las valvas con fuerza.
a.1). Importancia y caractersticas:
Las conchas de abanico son un producto conocido internacionalmente
como Scallopos (Peruvian Scallops) o Vieiras Concentradas bajo sus
distintos rubros (congeladas, frescas o refrigeradas y en conservas).
Las mismas se comercializan con un precio internacional, en nuestro
caso bajo el tipo de operacin exportacin, que vara entre 15 y 30
dlares por kilo y mayormente la modalidad de compra del cliente son
las de sellado al vaco. Sin embargo, las modalidades fluctan segn
los deseos del cliente.
Asimismo, la eleccin de las conchas de abanico como un producto a
exportar fue porque es un mercado en expansin debido a la

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tendencia actual del consumo de productos hidrobiolgicos a nivel


mundial. Esto se debe a la garanta que ofrecen en tanto salubridad y
sostenibilidad econmica.
Por otro lado, contamos con una ventaja competitiva en cuanto al
cultivo de las mismas pues en nuestro pas se da la posibilidad de
sembrar conchas de abanico durante todo el ao, as como estar
salvos de pocas de veda. Esta ltima razn nos permite aprovechar
la demanda insatisfecha existente en el mercado internacional.
No obstante, dentro de sus bondades se encuentran: menor riesgo a
problemas del corazn, desarrollo del cerebro, tendencia a la baja en
la presin, mejora la funcin del rin y contrarresta las inflamaciones.

b). Conchas negras:


Anadara tuberculosa (Sowerbi, 1833) es un molusco bivalvo de la familia
Arcidae, subfamilia Anadarinae, que se distribuye ampliamente en las
Costas del Pacfico, desde la Laguna de Ballenas (Baja California),
Mazatln (Sinaloa), Salina Cruz (Oaxaca), hasta llegar a Per (Squires et
al. 1977).
Anadara tuberculosa es un organismo que alcanza una talla promedio de
62 mm de altura por 49 mm de longitud; es tpico de la zona de mareas,
y alcanza su mxima densidad en las races de mangle. El intervalo de
temperaturas en las zonas donde se desarrolla se encuentra entre los
17 C y los 27C y en mangles pantanosos desde los 20.5C a 35C. En
cuanto a la salinidad, los lmites estn entre los 30-40% para una
poblacin de mangles localizados en el Mogote, de la Baha de la Paz
Baja California Sur (Baqueiro et al. 1982).

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En muchos grupos de vertebrados e invertebrados en los que se ha


estudiado el epitelio de los tbulos seminferos se encuentra que ste
est compuesto de una poblacin de clulas germinales en diferentes
fases de su desarrollo y de clulas de soporte usualmente denominadas
clulas de Sertoli. En el caso de Anadara tuberculosa los tbulos tienen
un

curso

irregular

con

clulas

en

diferentes

estadios

de

la

espermatognesis: espermatogonias, espermatocitos, espermtidas y


espermatozoides, los cuales se organizan conformando estructuras
piramidales en los tbulos (descritos con microscopia de luz por Ortiz y
Ura, 1998).
Por lo tanto en este trabajo se analiza por primera vez la ultraestructura
de las clulas germinales y se describen las principales diferencias entre
dichas clulas, as como la forma del acrosoma del espermatozoide, lo
cual puede contribuir a una mejor caracterizacin taxonmica de las
especies de sta familia.

MEDIOS DE CULTIVO
Los medios de la familia Enterobacteriaceae crecen fcilmente en los
medios de cultivo.
Las muestras de materiales generalmente estriles, como el lquido
cefalorraqudeo o un tejido que se obtienen durante la ciruga, se pueden
inocular en medios de agar sangre no selectivos. Los medios selectivos
(p.ej., agar de Mac Conkey, agar eosina-azul de metileno [EMB]) se usan
para el cultivo de muestras que suelen estar contaminadas por otros
microorganismos (p. ej., esputo, heces)
selectivos diferenciales

El uso de estos medios

permite separar las enterobacterias que

fermentan la lactosa de las cepas que no la fermentan.

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a). Medios no selectivos: agar sangre.


b): Medios selectivos-diferenciales: agar Mc Conkey, agar EMB.
Mc

Conkey:

colonias

rosadas

(fermentan

transparentes (no fermentan lactosa).


Agar EMB: colonias azules (fermentan

lactosa),

colonias

lactosa),

colonias

transparentes (no fermentan lactosa).


c): Medios altamente selectivos: SS agar, agar XLD, agar Hektoen entrico.

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OCTUBRE DICIEMBRE 2012.

METODOS DE ENSAYO PARA MARISCOS (MOLUSCOS BIVALVOS)


ANLISIS MICROBIOLGICOS
Transporte de la muestra
Se llevan las muestras de bivalvos al laboratorio lo ms rpido posible. Se
transportan en un recipiente fro o con bolsas o almohadillas congeladas para
mantener la temperatura a 4C. Se procura que las muestras no toquen las
bolsas o almohadillas congeladas.
Se procura que el tiempo transcurrido entre la toma de la muestra y el comienzo
del anlisis no debe superar las 24 horas Se mantiene a 4C durante este perodo
y no se congela la muestra.
Preparacin de la muestra.
Se usan guantes durante la preparacin de la muestra.
Se descarte cualquier marisco abierto o daado
Se selecciona al menos 15 ejemplares de mariscos grandes o el doble de los
pequeos.
Se raspan las valvas bajo el chorro de agua potable del grifo
Se secan con papel toalla
Se abren las valvas con un cuchillo o cuchara abrevalvas estril (flameado y
enfriado)

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Se inserte el cuchillo entre las dos valvas hacia la charnela del marisco. Se
empuje el cuchillo haca el interior y abra la valva superior hacia fuera, dejando
que el lquido intervalvar drene a un recipiente estril pesado, bolsa o matraz.
Se pasa el filo a travs del msculo separando los ligamentos que lo atan a la
valva.
Se retire la concha superior y se raspa el msculo vaciando el contenido en el
recipiente, bolsa o matraz. Se repita la operacin con los ejemplares
seleccionados.
Homogenizacin y dilucin usando el homogenizador o licuadora.
Se pesa 50g del alimento en un vaso de licuadora estril de alta velocidad y se
aade 450 ml de agua para dilucin estabilizada con fosfato de Butterfield y se
mezcla durante 2 minutos.
O en su defecto se pesa el matraz que contiene el msculo y lquido tisular y se
resta el peso del matraz para obtener el peso de la muestra. Se agrega el lquido
de dilucin estril a razn de 2 partes por peso. Se transfiere al recipiente del
homogenizador y se somete a alta velocidad (12000 rev/min) durante 60 segundos
a 4 sesiones de velocidad de 15 segundos de intervalo. Se deja reposar 30
segundos y se transfiere 30 ml del homogenizado a 70 ml del lquido de dilucin
estril. Esto constituye la dilucin 10-1 (1 en 10).
Se prepara la siguiente dilucin 10-2 (1 en 100) aadiendo 10 ml de la primera
dilucin en 90 ml del lquido de dilucin. Si se espera que los niveles del
microorganismo sean altos, se preparan entonces las diluciones 10-3 y 10-4 de la
misma forma. Se guarda el remanente a 4C.
* Homogenizacin y dilucin Usando el Stomacher (optativo)

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RECUENTO DE E. COLI y COLIFORMES FECALES


Determinacin del NMP de E. coli /Coliformes en mariscos con medio EC-Mug
Referencia
Manual de Anlisis Bacteriolgico del FDA, USA. 2001
Materiales
Medio de cultivo Caldo EC- Mug
Procedimiento
Prueba presuntiva para Coliformes
Se procede como en el acpite homogenizacin de la muestra
Se preparan diluciones decimales con 90 mL de agua para dilucin ms 10 ml
del homogenizado, se procede del mismo modo para las siguientes diluciones; el
nmero de diluciones a ser preparadas depender de la densidad de coliformes.
Se agitan todas las suspensiones 25 veces en un arco de 30 cm por 7s. Se utilizan
pipetas apropiadas para no verter < 10% del volumen real. Se transfiere porciones
de 1ml a cinco tubos de caldo lauril triptosa por cada dilucin consecutiva; se
sostiene la pipeta en un ngulo de manera que su lado inferior descanse contra el
tubo y se deja desaguar de 2-3 s. Se procura no pasar ms de 15 min. desde el
momento en que se licua la muestra.
Se incuban los tubos 483h a 35 C, al cabo de este tiempo se examina la
produccin de gas, es decir el desplazamiento del medio en los tubos de Durham
efervescencia cuando los tubos son agitados suavemente.
Se transfiere una asada de cada uno de estos tubos a uno de caldo EC- MUG y
se incuba 48 2h a 45.5 0.2 C. Se siembra a la vez controles positivos con una
cepa de coleccin (ATCC) de E. coli y como control negativo una cepa de
coleccin de Klebsiella pneumoniae y un tubo de caldo EC - MUG sin inocular

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OCTUBRE DICIEMBRE 2012.

como control del medio. Se verifica la produccin de gas a las 24 2h; si el


resultado es negativo, se examina nuevamente a las 48 2h.
Se determina la fluorescencia con una lmpara UV de onda larga en una cmara
oscura, a una distancia de 5 a 10 mm de los tubos de EC MUG. Se usan los
tubos de caldo EC MUG de control como referencia para determinar la
fluorescencia positiva o negativa de los tubos.
Clculo del NMP
Se obtiene el clculo de E. coli ubicando en las tablas de Nmero Ms Probable,
el cdigo obtenido por el nmero de tubos positivos de las tres diluciones de
cultivos en caldo EC MUG que presentan fluorescencia bajo irradiacin UV.
* Nota: Este mtodo usando el caldo EC sin el reactivo cromognico Mug se usa
tambin para determinar Coliformes fecales incubando a 450.2C

ANLISIS DE E. COLI (Mtodo alternativo)


Referencia:
Mtodo Estndar del NMP con 5 tubos recomendado para el cumplimiento de la
Directiva 91/492/CEE. (Publicado en Communicable Diseases and Public Health,
Vol 1, N3 Setiembre 1998, Revista del Laboratorio de Salud Pblica de Colindale,
Londres)
Materiales
Se utilizan los siguientes medios:
Caldo Glutamato con Minerales Modificado (CGMM), por ejemplo el medio base
preparado por Oxoid CM607 con Glutamato Sdico 1124 u otra preparacin
equivalente de otra marca. Este medio es preparado en forma simple o a doble
concentracin y distribuido en tubos o frascos a razn de 10 ml.

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Simple concentracin: Se disuelve 2,5 g de cloruro de amonio en 1 L de agua


destilada. Se aade 11,4 g del medio base de minerales modificado y 6,4 g de
glutamato sdico.
Doble concentracin: Se disuelve 5 g de cloruro de amonio en 1 L de agua
destilada.
Aadir 22,7 g del medio base de minerales modificado y 12,7 g de glutamato
sdico.
Se mezcla hasta disolver completamente. Se ajusta el pH a 6,7 despus de
esterilizar.
Se distribuye en 10 ml. Se esteriliza al autoclave 10 minutos a 116 C.
Medios alternativos: Agar 5-bromo-4-cloro-3-indolil--D-glucurnido (BCIG); Agar
Bilis Triptona (TBX) con 75mg /l del reactivo anterior (ej. Oxoid CM 945); Lab M
LAB 162 (Agar Triptona Bilis Glucurnido)
Cepas control:
NCTC 9001 Escherichia coli (-glucuronidasa positiva)
NCTC 9528 Klebsiella aerogenes (-glucuronidasa negativa)
Procedimiento:
Primera etapa:
Inoculacin:
Se Inocula 10 ml de la primera dilucin 10-1 a cada uno de los 5 tubos que
contienen 10 ml del medio CGMM a doble concentracin. Cada tubo contiene el
equivalente a 1 g de tejido.
Se inocula 1 ml de la primera dilucin 10-1 a cada uno de los 5 tubos que
contienen 10 ml del medio CGMM a simple concentracin. Cada tubo contiene el
equivalente a 0,1 g de tejido.
Se inocula 1 ml de la dilucin 10-2 a cada uno de los 5 tubos que contienen 10
ml del medio CGMM a simple concentracin. Cada tubo contiene el equivalente a
0,01 g de tejido.

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Si se han preparado ms diluciones se inocula 1ml de cada dilucin en cada


serie correspondiente de 5 tubos conteniendo 10 ml de medio a simple
concentracin.
Incubacin:
Se incuban los tubos inoculados a 37C durante 242 horas
Al final del perodo de incubacin, examine los tubos para apreciar la presencia
de acidez, que se nota por una coloracin amarilla del medio. Note que la
presencia de cualquier cantidad de cido se considera como resultado positivo. La
ausencia de cido se considera como resultado negativo para E. coli.
Segunda etapa
Al momento de la deteccin se repica todos los tubos que muestren acidez sobre
la superficie del Agar BCIG en forma estriada en cinco secciones hasta el
agotamiento para obtener colonias bien aisladas. No se refrigeran los tubos antes
del subcultivo o estriado.
Se incuban las placas a 44C1 por 20-24 horas.
Se examinan las placas para ver colonias verdiazules que significa una actividad
glucuronid sica. Los tubos de CGMM que muestran crecimiento de estas colonia
se considera que contienen E. coli. La ausencia de colonias verdiazules denota un
resultado negativo para E.coli.
Clculo de E. coli
Despus de terminar la segunda etapa de la prueba se determina el nmero de
tubos con CGMM positivos para E.coli. Se consulta el nmero ms probable de la
tabla respectivo al rango de diluciones utilizadas. Se reportan los resultados como
el nmero de E. coli por 100 g de marisco.
Si la combinacin de tubos positivos obtenida no se encuentra en la tabla del
NMP respectiva se reporta la prueba como nula o se repite la prueba con el
homogenizado remanente guardado a 4C.

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ANLISIS DE SALMONELLA
Generalidades:
Los mtodos que se aplican para el anlisis de mariscos son solo para los
productos que se destinan al consumo humano directo, pero no son utilizados
para la clasificacin de reas de recoleccin o cultivo de mariscos.
El siguiente mtodo es vlido para el aislamiento de los numerosos serotipos de
Salmonella pero no para Salmonella Typhi, para el cual se utiliza otro mtodo ms
adecuado.
Materiales
Medios de cultivo:
Agua Peptonada Tamponada (APT) (ej, Oxoid CM 509 o equivalente)
Caldo Peptonado Rappaport Vassiliadis Soya (RVS) (ej. Oxoid CM 866 o
equivalente)
Agar XLD (ej. Oxoid CM 469 o equivalente)
Agar Verde Brillante (BGA) (ej. Oxoid CM 329 modificado o equivalente)
Preparacin de la muestra
Se sigue el procedimiento del mtodo para E. coli anterior.
Procedimiento:
Homogenizacin y pre-enriquecimiento
Con homogenizador o licuadora. Se pesa una cantidad separada de 25 g en un
matraz estril. Se aade 50 ml procedente de un volumen medido de 225 ml de
Agua Peptonada Tamponada y se homogeniza a alta velocidad por un total de 60
segundos (ver mtodo de E.coli). Se agrega el restante del APT y se mezcla bien.
Se incuba a 37C1 por 18-24 h.

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Con el Stomacher (optativo): Se retira 25 g del homogenizado (preparado como en


el Mtodo para E. coli anterior) y se mezcla con 225 ml de Agua Peptonada
Tamponada (APT) en un recipiente o matraz de 250 ml. Se incuba a 37C1
durante 18-24 horas.
Enriquecimiento Selectivo
Se transfiere 0,1 ml de los tubos incubados con APT a 10 ml de Caldo Peptona
Rappaport Vassiliadis Soya (RVS). Se incuba a 41-42C por 482 h.
Subcultivo
Se vuelve a cultivar el caldo RVS despus de 18 a 24 horas y de nuevo despus
de 48 h. Con un asa de metal de 2-3 mm de dimetro se repica sobre placas de
Agar XLD y Agar Verde Brillante (BGA) hasta el agotamiento para obtener colonias
aisladas. Se incuban ambas placas a 37C1 por 18-24 h. Al final de la incubacin
se examinan las colonias de las placas sospechosas de Salmonella y se contina
con las pruebas bioqumicas y serolgicas.
METODO PARA SALMONELLA TYPHI
Materiales:
Medios de Cultivo:
Agua Peptonada Tamponada (APT) (ej. Oxoid CM 509
Caldo Selenito F (ej. Oxoid CM 399 con biselenito sdico L 121 para alcanzar
0,4% de concentracin.
Agar Citrato Desoxicolato modificado por Ins (ej. Oxoid CM 227, Lab M LAB65)
Agar Sulfito Bismuto (ej. Lab M LAB13A y LAB13B)
Preparacin de la muestra:
Homogenizacin y Pre-enriquecimiento
Como en la anterior

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Enriquecimiento Selectivo
Se transfiere 10 ml del cultivo en APT a 100 ml de Caldo Selenito F. Se incuba a
37C1 por 242 h.
Subcultivo
Al final del perodo de incubacin, se repica el cultivo en Selenito al Agar Citrato
Desoxicolato (DCA) y al Agar Bismuto Selenito. Se utiliza un asa de metal de 2- 3
mm de dimetro para estriar hasta el agotamiento para obtener colonias aisladas.
Se incuban las placas a 37C por 18 a 24 h. Se examinan las placas para ubicar
las colonias sospechosas de Salmonella. Se incuban de nuevo las placas por 24 h
ms (482 h en total) y se examinan de nuevo al fin de la incubacin.
Se comprueban las colonias por medio de pruebas bioqumicas y serolgicas.

ANLISIS DE VIBRIONES
Referencia:
Manual de Anlisis Bacteriolgico del FDA, USA. 2001
Materiales:
Medio de cultivo Agar Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa (TCBS).
Procedimiento:
Se pesa 30 g de tejido entero del bivalvo y se homogeniza con 200 mL de agua
peptonada alcalina (APA) a doble concentracin, se homogeniza e incuba a 36 C
por 6-18 horas.
Se retiran los frascos de la incubadora con cuidado, evitando mover demasiado
el caldo; se toma con un asa de siembra una asada de la pelcula superficial
formada por el crecimiento bacteriano y se estra en placas con agar Tiosulfato
Citrato Bilis Sacarosa (TCBS). Se incuba a 36C por 18-20 horas.
Se observan las colonias de color amarillo o del color del medio (verdes) y se
repican en tubos con agar triptona soya (TSA) inclinado, para realizar luego las
pruebas bioqumicas respectivas.

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OCTUBRE DICIEMBRE 2012.

ANLISIS BIOQUIMICOS
Para obtener identificar las especies de enterobacterias presentes en conchas
negras y conchas de abanico, es necesario interpretar los resultados.
Se sigue el siguiente esquemai para realizar el procedimiento:

Adems. El laboratorio regional de referencia de Salud Regin de Salud Piura.


Tiene resultados especficos para identificacin de enterobacterias usando Agar
TSI y LIA.

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REACCIONES ESPECFICAS PARA ESPECIES DE ENTEROBACTERIAS:


a). BIOQUMICA PARA DETECTAR Shiguella sp
a.1). TSI: K/A
Alcalina (rojo) en la superficie inclinada.
cida (amarillo) en el fondo.
Sin produccin de SH2 (sin ennegrecimiento del fondo del tubo) y sin
produccin de gas.
a.2). LIA: K/A
Alcalina (color prpura) en la superficie inclinada.
cida (amarillo) en el fondo.
Sin Produccin de SH2 (ennegrecimiento del fondo del tubo).
a.3). UREA:
No son capaces de utilizar urea. El medio urea contiene un indicador de pH
que varia a color rosa fuerte cuando la reaccin es positiva.
La reaccin debe ser negativa: urea (-).
Permanece el mismo color que antes de la incubacin.

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a.4). SIM: Shiguella sp no tiene movilidad en este agar.


a.5). CITRATO: Shiguella sp es Citrato negativo

b). BIOQUMICA PARA DETECTAR E. coli


b.1). Resultados para TSI: A/A o K/A: Glucosa y lactosa y/o sacarosa
fermentadas.
Puede producirse SH2 o no.
Puede haber presencia de gas o no.
b.2). Resultados para LIA: K/A o K/K, sin produccin de cido. Sulfhdrico.
-

Prueba citrato ( - ) Escherichia Coli

INDOL(+) Escherichia coli

Caldo urea negativo.

Si presenta motilidad en agar SIM


c). BIOQUMICA PARA DETECTAR Salmonella sp
c.1). TSI: K/A: Glucosa y lactosa y/o sacarosa fermentadas.
Puede haber presencia de gas o no.
Con produccin de SH2.
c.2). LIA: K/K con produccin de SH2.
c.3). UREA: Caldo urea negativo.
c.4).Presenta movilidad en agar SIM.
c.5). Citrato de Simmons +/ -

3.2. Bases Tericas

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1. Bacterias entricas indicadoras: Escherichia coli, coliformes y


Enterobacteriaceae
E.coli tiene como hbitat natural el tracto intestinal de hombre y animales =
indicador de contaminacin fecal E. coli es el indicador clsico de la posible
presencia de patgenos entricos en el agua, en los moluscos, en los
productos lcteos y en otros alimentos crudos.
Una prctica comn es utilizar las pruebas para coliformes, que incluyen E.
coli, en los ensayos de screening o preliminares. Si de estas pruebas
iniciales se deduce la posibilidad de contaminacin fecal, los coliformes y
otras Enterobacteriaceae se someten a posteriores estudios para
determinar si entre ellos est presente E. coli.
El trmino habitual coliformes comprende E. coli y diversas especies
pertenecientes

otros

gneros

de

la

familia

Enterobacteriaceae

fermentadores de la lactosa con produccin de gas a 31-37C. Pueden ser


o no fecales.
Los

coliformes

fecales

incluyen

un

grupo

de

microorganismos

seleccionados por incubacin de los inculos procedentes de un caldo de


enriquecimiento de coliformes a temperaturas superiores a las normales
(44-45C), dependiendo del mtodo.
Tales cultivos de enriquecimiento contienen por lo general un alto
porcentaje de E. coli y son, por ello, muy indicativos de una probable
contaminacin de origen fecal del alimento.
Hay laboratorios que prefieren determinar la familia entera de las
Enterobacteriaceae (es decir, todos los tipos lactosa+ y lactosa -) por las
siguientes razones:
a) El recuento de coliformes puede incluir toda una serie de bacterias
diferentes, segn la muestra, el medio, la temperatura de incubacin y los

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OCTUBRE DICIEMBRE 2012.

criterios utilizados para la lectura. Esta variabilidad puede ser la causa de


discrepancias entre los datos obtenidos en laboratorios diferentes.
b) Una prueba slo para las bacterias lactosa positivas puede llevar a
resultados falsamente seguros en los casos en los que predominan las
lactosa negativas (ej salmonella).
c) Salmonella puede ser en los alimentos, ms resistente frente a las
influencias desfavorables que E. coli y otros coliformes. De nuevo, la
ausencia de estos ltimos microorganismos puede llevar a conclusiones de
seguridad falsas.
1.1 Funcin como microorganismo ndice
E. coli es el nico microorganismo ndice vlido en el anlisis de los
alimentos vegetales frescos. En los alimentos frescos o naturales de origen
animal,

la

mayor

parte

de

las

Enterobacteriaceae

proceden

de

contaminaciones de origen fecal y su presencia en gran nmero puede


indicar una manipulacin no higinica y/o un almacenamiento inadecuado.
1.2 Funcin como microorganismo indicador
En los alimentos que han recibido un tratamiento para garantizar su sanidad,
la presencia de niveles considerables de Enterobacteriaceae o de coliformes
considerables de Enterobacteriaceae o de coliformes indica:
1.2.1). Tratamiento inadecuado y/o contaminacin posterior al tratamiento,
ms frecuentemente a partir de materias primas, equipos sucios o
manejo no higinico.
1.2.2).

Multiplicacin

crecimiento
toxignicos.

microbiana

que

pudiera

haber

permitido

el

de toda la serie de microorganismos patgenos y

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3.3. Definicin de Trminos


Conchas negras: Es un molusco perteneciente a los bivalvos, son
animales filtradores que viven en los mares enterrados en la arena o
sujetos a las rocas.
Moluscos: Forman uno de los grandes filos del reino animal. Son
invertebrados protstomos celomados, triblsticos con simetra bilateral
(aunque algunos pueden tener una asimetra secundaria) y no
segmentados, de cuerpo blando, desnudo o protegido por una concha.
Los moluscos son una importante fuente de alimentacin para la
especie humana.
Enterobacteriaceae: Las enterobactericeas (Enterobacteriaceae) son
una familia de bacterias Gram negativas que contiene ms de 30
gneros y ms de 100 especies que pueden tener morfologa de
bacilos o cocos.
Conchas Blancas: Ella se caracteriza por ser un molusco filtrador de 2
valvas (es decir, dos placas). Su especie, conocida como Argopecten
Purpuratus, habita en zonas costeras, entre profundidades que van
entre los 5 metros hasta los 30 metros y bajo las temperaturas que
varan entre los 13 y 28C.
Septicemia: Es una infeccin grave y potencialmente mortal que
empeora en forma muy rpida y que puede surgir de infecciones en
todo el cuerpo, entre ellas, infecciones en los pulmones, el abdomen y
las vas urinarias.
Eritema nodoso: Es un trastorno inflamatorio que consiste en
protuberancias (ndulos) rojas y sensibles bajo la piel.

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OCTUBRE DICIEMBRE 2012.

4. DEFINICION DE LAS POBLACIONES DE ESTUDIO


4.1 Caractersticas Generales:
4.1.1 Criterios de Inclusin:

Conchas negras y conchas de abanico adquiridas en el

Terminal pesquero de Piura.


Diferentes especies de enterobacterias.

4.1.2 Criterios de Exclusin:

Conchas negras y de abanico que no sean adquiridas en

el Terminal pesquero de Piura.


Bacterias distintas (que no sean enterobacterias).

4.2 Ubicacin Temporo Espacial:


El estudio se va a realizar durante el periodo de Octubre Diciembre
del 2012 en el Terminal pesquero de Piura.
5

METODOLOGIA
5.1 Tipo de Investigacin:

Tipo de estudio: Cientfico

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Por intervencin del investigador: Experimental

Segn diseo de anlisis de los resultados: Descriptivo - comparativo.

Segn la temporalidad: Prospectivo

5.2 Universo:
Conchas negras y de abanico procedentes de diversos lugares de la
Regin llegadas al terminal pesquero de Piura.
5.3 Poblacin:

Conchas negras (25) y de abanico (25) adquiridas en el terminal


pesquero de Piura.

5.4 Tamao y seleccin de la muestra:

Tamao de muestra: 12 conchas negras y 12 conchas de abanico.


Seleccin de la muestra: Mediante nmeros aleatorios.

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6. OPERACIONALIZACIN DE VARIABLES Y ESCALAS DE MEDICIN


VARIABLE

DEFINICIN
CONCEPTUAL

DEFINICIN
OPERACION
AL

INDICAD
OR

TIPO DE
VARIABL
E

ESCALA
DE
MEDICI
N

VALOR
ES
FINALE
S

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OCTUBRE DICIEMBRE 2012.

Enterobacter
ias

Bacilos
grannegativos, es
el grupos de
mayor especie,
son anaerobios
facultativos,
generalmente
catalasa (+) y
oxidasa (-).

Molusco bivalvo
de la familia
Arcidae, es un
organismo que
alcanza una talla
promedio de 62 mm
de altura por 49 mm
de longitud.

Conchas
negras

Conchas de
abanico

Especie Molusco
bivalvo de la Familia
Pectinidae que
presenta dos valvas
comprimidas,
articuladas
dorsalmente, con 23
a 26 costillas
radiales que
delimitan surcos en
los que se
encuentran
estriaciones
transversales.

7. RESULTADOS
8. DISCUSIN
9. CONCLUSIONES
10. RECOMENDACIONES

Diferentes
especies de
enterobacter
ias a
encontrarse
en conchas
negras y
conchas de
abanico.

Conchas
obtenidas
del terminal
pesquero de
Piura.

1.
Ausencia
2.
Presencia
(cantidad
)

Cuantitati
va
Cualitativ
a

NMP
(Nmer
o ms
probabl
e).

1
2

1
1. Buen
estado
2.
Tamao
promedio

Cualitativ
a

- Buen
estado
Tamao

1
Conchas
obtenidas
del terminal
pesquero

1. Buen
estado
2.
Tamao
promedio

Cualitativ
a

- Buen
estado
Tamao

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OCTUBRE DICIEMBRE 2012.

11. ANEXOS

12. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS


-

Enterobacterias.

Revisado

el

15/10/12.

Disponible

online

en:

[http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/pdf/Enterobacterias_Med
icine2010.pdf]

ENTEROBACTERIAS EN CONCHAS NEGRAS Y DE ABANICO


OCTUBRE DICIEMBRE 2012.

Conchas de abanico. Revisado el 15/10/12. Disponible online en:


[ http://conchasdeabanico.blogspot.com/]

MURRAY y otros (2009). Microbiologa mdica. Editorial Elsevier.


Barcelona. 6ta Ed.

Test

bioqumicos.

Revisado

el

15/10/12.

Disponible

en:

[http://microbiology.free.fr/Presentations/Biochemicaltests.pdf]
-

BROOKS, CARROLL, BUTEL, MORSE. (20004). Microbiologa mdica.


Editorial El manual moderno. Mxico. 24 Ed.

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