REA DE SUSTENTABILIDAD PARA EL DESARROLLO

PROGRAMA ACADMICO DE QUMICA

ESPECIALIDAD TECNOLOGIA AMBIENTAL
GRUPO
QU-301
MATERIA
MICROBIOLOGIA AMBIENTAL

TITULO
AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE MICROORGANISMOS
DE LA MATRIZ AMBIENTAL: AGUA
ASESORA
Dr. ROSA RICO MATA
DATOS DE IDENTIFICACIN DE LOS ANALISTAS
Fecha de inicio del anlisis: 29 DE JUNIO DE 2015
Fecha de trmino: 10 DE JULIO DEL 2015
Nombre
MARTN DEL CAMPO ORTZ ISRAEL

Cargo
Responsable

GRIMALDO MNDEZ JESS ADIR

Administrador

PEDROZA LVAREZ JESS OMAR

Laboratorista 1

PREZ RAMREZ MIRIAM ALEJANDRA

Laboratorista 2

RAMREZ RAMREZ MIGUEL NGEL

Laboratorista 3

GENERACIN: 2014-2016

MICROBIOLOGA AMBIENTAL UTL

ASESORA:

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DATOS DEL SITIO EN ESTUDIO

1.- Breve descripcin del estatus ambiental del sitio de estudio: La muestra se tom de la planta tratadora de agua
residual de la UTL, se encuentra en buen estado a sus alrededores sin identificacin de focos de contaminacin, a su alrededor
se encuentra una vasta vegetacin.
Nombre
Ubicacin
Imagen de mapa satelital
/coordenadas GPS
Planta Tratadora de
Aguas Residuales de la
UTL

210346.71N
1013456.96O

SITIO DE
MUESTREO

2. Evidencia fotogrfica del sitio

Fecha: 6 de julio de 2015
Hora: 14:48

Fecha: 6 de julio de 2015

Hora: 14:49

DATOS DE LAS MUESTRAS A ANALIZAR

1. Identificacin
Matriz ambiental: Agua

Hora de toma de muestra: 14:55

Punto de Muestreo (ubicacin /coordenadas GPS):

PTAR UTL 210346.71N 1013456.96O
Nombre del/ los analistas que tomaron la muestra:
Miguel ngel Ramrez Ramrez

Hora de siembra: 15:02

Tiempo de exposicin (aplica solo para muestra de aire)

Nombre del/ los analistas que sembr la muestra:
Jess Adir Grimaldo Mndez

2.Parmetros Fisicoqumicos
Color: Caf amarilloso

Temperatura (oC) ambiental: 18C

Olor: Sulfuro de hidrgeno

Describir condiciones climatolgicas: Mayormente nublado

pH: 7

3. Evidencia fotogrfica del sitio de toma de muestra

MICROBIOLOGA AMBIENTAL UTL

ASESORA:

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AISLAMIENTO DE MICROORGANISMOS
1. Justificacin del proceso para la identificacin bacteriana
En una planta de tratamiento de aguas residuales se pueden encontrar un sinfn de microorganismos, que son
responsables de la degradacin de la materia orgnica presente en el agua, para posteriormente convertirla en
un agua provechosa para el medio ambiente como el riego de reas verdes sin que represente un riesgo a la
salud de las personas. Es interesante como una forma de vida microscpica, es de vital importancia para llevar a
cabo procesos de remediacin de agua contaminada y darle un segundo uso.
2. Dos medios de siembra (Nombre y Composicin)
1. Agar MacConkey
Peptona.... 17 g/L
Pluripeptona. 3 g/L
Lactosa.. 10 g/L
Mezcla de sales biliares. 1.5 g/L
Cloruro de sodio.. 5 g/L
Agar 13.5 g/L
Rojo neutro.. 0.03 g/L
Cristal violeta. 0.001 g/L

2. Agar de Eosina y Azul de metileno

Agar 13.5 g/L
Lactosa ... 5.0 g/L
Azul de metileno.. 0.065 g/L
Peptona especial10.0 g/L
Eosina Y0.4 g/L
Fosfato dipotsico.2.0 g/L
Sacarosa5.0 g/L

Morfologa Colonial (Medio 1)

Descripcin

Morfologa Colonial (Medio 2)

Descripcin

Son colonias lisas y brillantes adems de convexas.

Las colonias lactosa positiva en este medio
Poseen un endopigmento color amarillo-naranja, (Staphylococcus Aureus) son colonias de color azul a
banco porcelana.
morada con un brillo metlico o poseen centros
oscuros con periferias transparentes incoloras, adems
de ser convexas y lisas.

Imagen

Imagen

MICROBIOLOGA AMBIENTAL UTL

ASESORA:

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3. Dos Medios selectivos de resiembra (Nombre y Composicin)

1. Levine EMB Agar

2. Simmons Citrato Agar

Peptona. 10 g/L
Lactosa. 10 g/L
Fosfato di potsico... 2 g/L
Agar 15 g/L
Eosina 0.4 g/L
Azul de Metileno.. 0.065 g/L

Amonio de di hidrgeno fosfato.. 1 g

Fosfato de di potasio 1 g
Cloruro de sodio. 5 g
Citrato de sodio.. 2g
Sulfato de magnesio 0.2 g
Azul de bromo timol.. 0.08 g
Agar.. 15 g

Morfologa Colonial (Medio 1)

Morfologa Colonial (Medio 2)

Descripcin

Descripcin

Las colonias lactosa positiva en este medio

(Staphyococcus Aureus) son colonias de color azul a
morada con un brillo metlico o poseen centros oscuros
con periferias transparentes incoloras, adems de ser
convexas y lisas.

Colonias lisas, brillantes y convexas.

Poseen un endopigmento distinguible del color del
medio, el cual cambio de verde a azul. En este medio
las colonias que crecen son puntiformes.

Imagen

Imagen

MICROBIOLOGA AMBIENTAL UTL

ASESORA:

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4. Procedimiento de Aislamiento
(describir detalladamente la cantidad de materiales y los pasos a seguir)
Materiales/Reactivos/Medios de cultivo/ Equipo a utilizar
10 Gasas.
4 Caja Petri.
2 Matraz Erlenmeyer de 250 mL.
2 Charola de pesado.
2 Esptula.
1 Probeta de 100 mL.
1 Asa bacteriolgica.
2 Mechero bunsen.
1 Piceta.
Aluminio.
Algodn.

Agua destilada.
Simmons Citrato Agar.
Agar Mac-Conkey

Autoclave.
Incubadora.
Refrigerador.
Campana de flujo laminar.

Preparacin de medios de cultivo:

Se prepararon 60 mL de Agar Mac-Conkey.
1.
2.
3.
4.

Pesar 3 g de Agar Mac-Conkey.

Con ayuda de una probeta medir 60 mL de agua destilada.
Vaciar en el matraz Erlenmeyer los 1.45 g del agar y disolver con los 60 mL de agua destilada.
Hacer con una gasa y un poco de algodn un tapn para el matraz Erlen-Meyer, taparlo y cubrirlo con
una capucha de aluminio.
5. Esterilizar en l autoclave a 115 lb de presin por 15 minutos a una temperatura de 121C
aproximadamente.
6. Vaciar el agar en las dos cajas Petri dentro de la campana de flujo laminar, esperar a que solidifique y
guardar en el refrigerador hasta la re siembra.
Se prepararon 60 mL de Agar Citrato de Simmons.
7.
8.
9.
10.

Pesar 1.45 g de Simmons Citrato Agar.

Con ayuda de una probeta medir 60 mL de agua destilada.
Vaciar en el matraz Erlenmeyer los 1.45 g del agar y disolver con los 60 mL de agua destilada.
Hacer con una gasa y un poco de algodn un tapn para el matraz Erlenmeyer, taparlo y cubrirlo con
una capucha de aluminio.
11. Esterilizar en l autoclave a 115 lb de presin por 15 minutos a una temperatura de 121C
aproximadamente.
12. Vaciar el agar en las dos cajas Petri dentro de la campana de flujo laminar, esperar a que solidifique y
guardar en el refrigerador hasta la resiembra.

Pasos para el aislamiento del microorganismos (siembra, seleccin de la colonia y resiembra):

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ASESORA:

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1. Sembrar la muestra de forma estriado simple en un medio no selectivo para permitir el crecimiento de
microrganismos y poder identificarla de acuerdo a su morfologa. El medio utilizado para la siembra es
agar Mac Conkey.
2. Incubar por 24 horas a una temperatura de 35-37C.
3. Seleccionar una colonia de acuerdo a sus caractersticas morfolgicas esperadas para resembrar y
obtener una siembra pura.
4. Preparar el medio selectivo para la resiembra del microorganismo.
5. Resembrar en Agar Citrato de Simmons. Se hace un estriado de forma cruzada de manera que se puedan
identificar colonias aisladas.
6. Incubar por 24 horas a una temperatura de 35-37C
7. Comprobar el crecimiento bacteriolgico en el medio selectivo.
8. Seleccionar una colonia aislada para aplicar las pruebas bioqumicas.

Estriado simple para el aislamiento del microorganismo

MICROBIOLOGA AMBIENTAL UTL

ASESORA:

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5. Esquema del Perfil bioqumico (metablico )

para la identificacin del microorganismo seleccionado

Bacterias
Gram +

Gram -

No
Cpsulada

Cpsulada

Catalasa +

Catalasa -

Movilidad +

Movilidad -

Fermenta
lactosa (-)
Vogues
Proscauer (-)
Fermenta
Glucosa (-)

Fermenta
sacarosa (-)

SH2 -

Indol +

Rojo de
Metilo (-)

Citrato +

STAPHYLOCOCCUS
AUREUS

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ASESORA:

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RESULTADOS DEL AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN

1. EVIDENCIA FOTOGRAFICA DEL CULTIVO DE LA MUESTRA (SIEMBRA)
Agar Mac-Conkey

2. MORFOLOGA COLONIAL OBSERVADA

Tipo de colonia 1: Descripcin

FOTO 1

Esta colonia present una forma irregular, con una

superficie convexa, un borde ondulado, con un color rosado
en los extremos y blanquizo de la parte central.

Tipo de colonia 2: Descripcin

FOTO 2

Esta colonia present una forma irregular, con una

elevacin umbilicada, un borde ondulado, con un color
violeta de los extremos y blanquzo en su parte central.

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ASESORA:

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3. EVIDENCIA FOTOGRAFICA DEL CULTIVO PURO ( RESIEMBRA)

Agar Mac-Conkey
Agar Citrato de Simmons
Crecimiento colonial de la Colonia 1 (Crculo rojo) de la
siembra

4. MORFOLOGIA COLONIAL OBSERVADA

Descripcin

Se logr identificar colonias en forma

puntiforme,
algunas de ellas se
agruparon y otras se encuentran
aisladas. Tienen una elevacin
convexa, su borde es redondeado, su
color es azulado y blanco porcelana.

Se encuentran circuladas con color

verde algunas de las colonias que se
seleccionaron
para realizar las
pruebas bioqumicas.

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ASESORA:

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5. EVIDENCIA FOTOGRFICA DEL RESULTADO DEL PERFIL BIOQUMICO

Nombre de la
prueba

1.

Tincin de
Gram.

Medio de cultivo
utilizado

Resultado
obtenido
(positivo/negativo)

Ninguno.

Positivo.

Evidencia fotogrfica

Objetivo: 100x
Fundamento de la prueba
El cristal violeta (colorante catinico) penetra en todas las clulas bacterianas (tanto Gram positivas como Gram
negativas) a travs de la pared bacteriana. El lugol es un compuesto formado por I2 (yodo) en equilibrio con KI
(yoduro de potasio) y Sl (Siulterio), los cuales estn presente para solubilizar el yodo, y actan de mordiente,
haciendo que el cristal violeta se fije con mayor intensidad a la pared de la clula bacteriana. El I2 entra en las
clulas y forma un complejo insoluble en solucin acuosa con el cristal violeta.
La mezcla de alcohol-acetona que se agrega, sirve para realizar la decoloracin, ya que en la misma es soluble el
complejo I2/cristal violeta. Los organismos Gram positivos no se decoloran, mientras que los Gram negativos s
lo hacen. Para poner de manifiesto las clulas Gram negativas se utiliza una coloracin de contraste.
Habitualmente es un colorante de color rojo, como la safranina o la fucsina. Despus de la coloracin de
contraste las clulas Gram negativas son rojas, mientras que las Gram positivas permanecen violetas.
Algunos microorganismos retienen el colorante violeta, an despus de tratarlos con un decolorante, y el color
no se modifica al aadir ste; otros pierden con facilidad el primer tinte, y toman el segundo. Los que fijan el
violeta, se califican de Gram positivos, y los que pierden la primera coloracin y retienen la segunda, de
gramnegativos. Basndonos pues, en la reaccin Gram, podemos clasificar a los microorganismos en uno de los
dos grupos. Los colorantes de p-rosanilina son los que mejores resultados dan en la coloracin Gram. Los
representantes ms usados de este grupo son violeta de metilo y violeta cristal o de genciana. En realidad, violeta
de metilo es el nombre atribuido al compuesto tetrametil-p-rosanilina.
El matiz de color de la p-rosanilina se intensifica al aumentar el nmero de grupos metilo en la molcula; por
consiguiente, de los tres grupos, el tono ms oscuro es la hexametil-p-rosanilina, (violeta cristal), y el tinte ms
ligero, la tetrametil-p-rosanilina (violeta de metilo). Los nombres violeta de metilo 3R, 2R, R, B, 2B, 3B, etc., se
refieren al nmero de grupos metilo contenidos.
La letra R indica matices rojos, y la letra B, tonos azules. El violeta de cristal contiene seis grupos metilo, y se
considera como el mejor colorante primario para teir por el mtodo de Gram.
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Frotis con tinta china

2.

Tincin de
cpsula.

Ninguno.

Positivo.

Aumento 100x
Fundamento de la prueba

Es la prueba que determina si la bacteria tiene capsula la cual es una capa rgida organizada en matriz
impermeable que excluye colorantes como la tinta china. En cambio, la capa de material extracelular que se
deforma con facilidad, es incapaz de excluir partculas y no tiene un lmite definido.
En esta prueba se puede ver si la bacteria cuenta con cpsula la cual no permite que la tinta china penetre en la
bacteria lo cual se observa como un fondo negro (tinta) y una diferenciacin de las bacterias.
3.

Citrato.

Agar Citrato de
Simmons.

Positiva.

Fundamento de la prueba

En su formulacin contiene una mezcla de sales en la cual, el citrato de sodio es la nica fuente de carbono. No
posee azcares ni tampoco inhibidores del crecimiento bacteriano. Un microorganismo que es capaz de utilizar
el citrato como nica fuente de carbono, utiliza tambin las sales de amonio como su nica fuente de nitrgeno.
Debido a la utilizacin de sales de amonio, se libera amoniaco, que alcaliniza el medio, y esto produce un viraje
del indicador azul de bromo timol del color verde al color azul.
Los productos obtenidos del metabolismo del citrato dependen del pH del medio:
pH bsico: Citrato ------> CO2 + cido frmico + 2 cido actico
pH cido: 2 Piruvato -----> acetato + CO2 + lactato
2 Piruvato -----> acetona + 2CO2
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4. Catalasa

Ninguno.

Positivo.

Fundamento de la prueba

La catalasa es una enzima perteneciente a la categora de las oxidorreductasas que cataliza la descomposicin
del perxido de hidrgeno en oxgeno y agua. Lo cual produce un desprendimiento de burbujas.
La reaccin que sucede es la siguiente: 2 H2O2
2H2 + 2 O2
Esta enzima se encuentra en algunas bacterias o cocos y se es posible identificar su presencia aplicado esta
prueba.
5.

Fermentacin de
sacarosa

Triple Sugar
Iron Agar
(T.S.I)

Negativo

Fundamento de la prueba

En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, aportan los nutrientes adecuados para el desarrollo
bacteriano. La sacarosa es un hidrato de carbono fermentable y asimilado por la enzima sacarasa la cual con una
adicin de agua se degrada en glucosa y fructuosa. El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio
mantiene el balance osmtico. El agar es el agente solidificante. Por fermentacin de azcares, se producen
cidos, que se detectan por medio del indicador rojo de fenol, el cual vira al color amarillo en medio cido.
Sacarosa (C12H22O11)+ H2O Glucosa (C6H12O6)+ Fructosa (C6C12O6)

6.

Fermentacin de
glucosa.

Triple Sugar
Iron Agar
(T.S.I)

Negativo

Fundamento de la prueba

En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, aportan los nutrientes adecuados para el desarrollo
bacteriano. La lactosa, sacarosa y glucosa son los hidratos de carbono fermentables. El tiosulfato de sodio es el
sustrato necesario para la produccin de cido sulfhdrico, el sulfato de hierro y amonio, es la fuente de iones
Fe3+ , los cuales se combinan con el cido sulfhdrico y producen sulfuro de hierro, de color negro. El rojo de
fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene el balance osmtico. El agar es el agente solidificante.
Por fermentacin de azcares, se producen cidos, que se detectan por medio del indicador rojo de fenol, el cual
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vira al color amarillo en medio cido. El tiosulfato de sodio se reduce a sulfuro de hidrgeno que reacciona luego
con una sal de hierro proporcionando el tpico sulfuro de hierro de color negro.
C6H12O6 (glucosa)+ 2 Pi + 2ATP+ 2NAD+2 cido Pirvico+ 2ATP +2NADH+ 2H+
Triple Sugar
Negativo
7. Fermentacin de Iron Agar
lactosa.
(T.S.I)

Fundamento de la prueba

En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, aportan los nutrientes adecuados para el desarrollo
bacteriano. La lactosa es un hidrato de carbono fermentable, partiendo del cido pirvico producido por la
fermentacin de glucosa, dando como producto final cido lctico. Se agrega un indicador de pH (rojo fenol) y
cloruro de sodio, el cual mantiene el balance osmtico. El agar es el agente solidificante. Por fermentacin de
azcares, se producen cidos, que se detectan por medio del indicador rojo de fenol, el cual vira al color amarillo
en medio cido.
cido Pirvico+ NADH+ H+ cido lctico+ NAD+
Negativo

Agar SIM
8.

cido sulfhdrico

Triple Sugar
Iron Agar
(T.S.I)
Fundamento de la prueba

En el medio de cultivo, el tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la produccin de cido sulfhdrico, el
sulfato de hierro y amonio, es la fuente de iones Fe3+ , los cuales se combinan con el cido sulfh- drico y
producen sulfuro de hierro, de color negro. El agar es el agente solidificante. El tiosulfato de sodio se reduce a
sulfuro de hidr- geno que reacciona luego con una sal de hierro proporcionando el tpico sulfuro de hierro de
color negro.
La proteolisis de las protenas en aminocidos individuales, algunas especies bacterianas son capaces de liberar
azufre enzimaticamente de los diferentes aminocidos que las contienen, produciendo el gas cido sulfhdrico
(SH2). La peptona, cistena y tiosulfato, todos son fuentes de azufre, pero las diferentes especies utilizan distintos
compuestos o aminocidos que contienen azufre para producir SH2. La enzima responsable de esta actividad es
la cisteinasa.
El gas incoloro SH2 reacciona con una sal pesada, citrato frrico de amonio para producir un precipitado negro
insoluble, sulfuro ferroso.
Bacteria (medio cido) + tiosulfato de sodio gas SH2
SH2 + iones frricos sulfuro ferroso (pp. Negro)

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9.

Indol
Agar SIM

Positivo

Fundamento de la prueba

El triptfano es un aminocido que puede ser oxidado por ciertas bacterias para formar tres metabolitos
principales: indol, escatol e indolactico. Diversas enzimas intracelulares que intervienen en ste proceso reciben
el nombre de triptofanasa, lo que implica el sistema completo de enzimas vinculadas con la produccin del indol.
El principal intermediario en la degradacin del triptfano es el cido indolprvico.
La degradacin del triptfano libera indol, cido pirvico, amoniaco y energa. El cido pirvico puede ser
nuevamente metabolizado por medio del ciclo glucoltico o entrar en el ciclo de Krebs para liberar CO2 y H2O y
una gran produccin de energa.
Triptfano + indolpirvico ----> Indol + cido pirvico + amoniaco + energa

10. Movilidad
Agar SIM

Negativo

Fundamento de la prueba

Determina si un organismo es mvil o inmvil. Las bacterias tienen movilidad por medio de sus flagelos, que se
encuentran principalmente entre los bacilos; sin embargo algunas formas de cocos son inmviles.
Las bacterias mviles pueden contener un solo flagelo o muchos; adems su localizacin vara con su especie
bacteriana y las condiciones de cultivo.
A veces, las bacterias con movilidad producen variantes no mviles que parecen ser estables y raramente se
revierten en formas mviles. Los organismos no mviles carecen de flagelos.
El agar es el agente solidificante y a esta concentracin le otorga al medio la propiedad de ser semislido,
condicin necesaria para detectar movilidad, que se evidencia por el enturbiamiento del medio o por crecimiento
que difunde ms all de la lnea de siembra del microorganismo en estudio.

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11. Rojo de
metilo
(Fermentacin de
glucosa)

Medio MR-VP

Negativo

Fundamento de la prueba

Permite comprobar la capacidad de un organismo de producir y mantener estables los productos terminales
cidos de la fermentacin de la glucosa y vencer la capacidad amortiguadora del sistema. Es una prueba
cualitativa de la produccin de cido (determinacin de pH). Las bacterias que principalmente siguen la va de
fermentacin de cidos mixtos (La fermentacin cido mixta produce cido actico, etanol, H2, CO2 y
proporciones diferentes de cido lctico o frmico segn las especies. Es un tipo de fermentacin que llevan a
cabo las enterobacterias. En esta ruta de fermentacin se produce ATP adems de la reoxidacin del NADH+H+)
a menudo producen suficiente cido para mantener un pH menor de 4.4.
La prueba de rojo de metilo se basa en el empleo de un indicador de pH para determinar la concentracin de
iones hidrgeno presentes cuando un organismo fermenta glucosa. Las bacterias RM positivas producen cidos
estables manteniendo una alta concentracin de iones hidrgeno hasta alcanzar cierta concentracin y entonces
cesa toda actividad.
Los organismos RM negativo tambin producen cidos pero tienen una menor concentracin de iones hidrgeno
porque hay una reversin hacia la neutralidad debida a la nueva degradacin de los cidos orgnicos en
carbonatos.
Ocurre la fermentacin de la glucosa, mediante la glucolisis que es la ruta metablica mediante la que se degrada
la glucosa hasta dos molculas de piruvato, a la vez que se produce energa en forma de ATP y de NADH.
C15H15N3O2 + fermentacin del carbohidrato ----> cidos orgnicos (viraje a rojo en el medio)
12. Vogues
Proscauer

Medio MR-VP

Negativo

Fundamento de la prueba

Determina la capacidad de algunos organismos de producir un producto final neutro, la acetona a partir de la
fermentacin de glucosa.
La reaccin de VP se basa en la deteccin de acetona como producto final neutro derivado del metabolismo de
la glucosa. Esta es metabolizada en cido pirvico, intermediario clave en la gluclisis. A partir del cido pirvico,
una bacteria puede seguir muchas vas. La produccin de acetona (precursor de la produccin de 2,3-butanediol)
es uno de los ciclos para la degradacin de la glucosa en las bacterias.
KOH
condensacin
Alfa-naftol (catalizador) + Acetona -------------> Diacetilo + Ncleo de guanidina ----------------------> Color rojo rosado
O2 oxidado

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IDENTIFICACIN DEL MICROORGANISMO AMBIENTAL

EN LA MATRIZ DE ESTUDIO: Agua
1.- Nombre cientfico del o los microorganismo identificado de acuerdo a los resultados
del perfil bioqumico planteado ( gnero y especie)
Gnero: Staphylococcus
Especie presuntivamente: aureus
2. Taxonoma del o los microorganismo identificados
Reino: Bacteria
Filo: Firmicutes
Clase: Bacilli
Orden: Bacillales
Familia: Staphylococcaceae
Gnero: Staphylococcus
3. Caractersticas generales
Desde el punto de vista estructural de S. Aureus comparte las caractersticas de los grmenes Gram positivos.
La pared celular est compuesta por una gruesa capa de peptidoglicano. La presencia de cpsula es variable pero
es importante a nivel patognico, ya que tiene propiedades antifagocticas. Las cepas de S. Aureus que poseen
cpsula son ms virulentas en modelos animales.
Es un coco inmvil, de 0.8 a 1 micrmetro de dimetro, que se divide en tres planos para formar racimos, es
aerobio y anaerobio facultativo por lo que puede crecer tanto en una atmosfera con o sin oxgeno, no presenta
movilidad. Se pueden encontrar en el agua, polvo, suelo y aguas residuales y todo lo que entre en contacto con
el hombre.
4. Ciclo(s) biogeoqumicos en el(los) que intervienen
Ciclo del fsforo
5. La funcin que juegan en la transformacin de la materia orgnica a travs
de los ciclos biogeoqumicos
Cuando un agua se encuentra contaminada por un metal pesado como lo es el Plomo (Pb), la bacteria
Staphylococcus aureus y Citrobacter Feundii son utilizadas para la remocin de dicho metal de la matriz
contaminada, lo acumulan en su interior inmovilizndolo formando fosfato de plomo, aunque se desconoce el
mecanismo de desintoxicacin. Se pueden encontrar en el agua, polvo, suelo y aguas residuales y todo lo que
entre en contacto con el hombre; en este caso la bacteria se localiz en una planta de tratamiento de aguas
residuales, lo cual es bastante comn porque llega a encontrarse en la materia fecal, su presencia puede
eliminarse con tratamiento y desinfecciones convencionales. En cuanto a la transformacin de la materia, se
estudi la bacteria Staphylococcus aureus mediante pruebas bioqumicas, cabe destacar que utiliza el citrato
como nica fuente de carbono, as como sales de amonio en su nica fuente de nitrgeno, por ello es que libera
amoniaco y alcaliniza el medio Agar Citrato de Simmons virndolo de un color verde a un azulado. En dicho
microorganismo se encuentra la enzima catalasa, que es responsable de la descomposicin del perxido de
hidrgeno, por ello en la prueba bioqumica de la catalasa se pudo observar como ocurra la reaccin en la que
se desprendan burbujas. No es un fermentador de la sacarosa, el microorganismo no lleva consigo la enzima
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sacarosa la cual asimila la sacarosa. No es capaz de fermentar la glucosa ya que de esto dependa la glucosa
producida por la sacarosa. No fermenta la lactosa, ya que se necesita del cido pirvico que es producido por la
fermentacin de la glucosa, por lo tanto no se produjo cido lctico. En el microorganismo no se encuentra la
enzima cisteinasa, que es la responsable de que se produzca SH2, dicha enzima reacciona con tiosulfato de sodio
gas para producir SH2. Es productor de indol, escatol e indolctico, por lo que el microrganismo lleva consigo la
enzima llamada triptofanasa que se encarga de la degradacin del triptfano liberando indol, cido pirvico,
amoniaco y energa. No es un microrganismo que produzca y mantenga estable los productos terminales cidos
de la fermentacin de la glucosa, ya que esta fermentacin no se present. Igualmente no produce la acetona
porque previamente tuvo que fermentarse la glucosa.

6. Conclusin parcial sobre las interacciones bacterianas en la matriz estudiada y la importancia de la

microbiologa en el rea ambiental
En conclusin, podemos decir que la bacteria encontrada en la muestra de agua recolectada de la Planta de
Tratamiento de Aguas Residuales de UTL corresponde al gnero Staphylococcus presuntivamente de especie
Aureus, por otro lado, no se realizaron las pruebas bioqumicas necesarias para lograr afirmar la presencia de
dicha bacteria por lo que se necesita plantear pruebas bioqumicas para diferencias la especie. Cabe destacar
que anteriormente se crea que identificaramos Citrobacter Feundii porque se encuentra en la matriz agua,
acta en el ciclo del fsforo el cual se puede identificar en el agua de una PTAR, pero la bacteria que se logr
aislar es la mencionada al principio, esto tiene una relacin encontrada en la referencia bibliogrfica (Francisco,
C. 2005. Biotecnologa ambiental. Madrid, Espaa: Tbar) en la que se explica que estas dos bacterias tienen la
misma funcin en cuanto a remocin de plomo presente en agua.
Por lo tanto, se identific Staphylococcus mediante la prueba de tincin de gram, ya que al observarse al
microscopio en lugar de observar bacilos correspondientes a Citrobacter Feundii se observaron cocos, algunos
en forma de racimos, diplococos y la mayora separados unos de otros. Para lograr identificar el gnero de la
bacteria aplicamos la prueba de catalasa la cual resulta positiva para cuatro gneros distintos. De estos gneros
se logr distinguir mediante la prueba del indol en la cual se logra apreciar la produccin de indol resultado la
prueba positiva.
La prueba que nos acerca presuntivamente a la especie de la bacteria es cuagulasa, la cual resulta positiva en
diferencia a las otras especies de Staphylococcus las cuales resultan negativas en dicha prueba, para confirmar la
presencia de esta bacteria por lo que se propone haber realizado las pruebas bioqumicas en las cuales la
Staphylocuccus Aureus es resistente a la bacitracina y sensible a furazolidona y novobiocina. En realidad no se
encontr informacin bibliogrfica sobre el microorganismo y su funcin en una PTAR, pero se sostiene que es
capaz de remover el plomo en una muestra de agua.

MICROBIOLOGA AMBIENTAL UTL

ASESORA:

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