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antisueros comerciales
Muestra: Sangre con citrato, EDTA o sangre sin anticoagulante.
Reactivos:
Glbulos testigos A y B
METODO:
a) Colocar en la gradilla 4 tubos para cada uno de los sueros clasificadores, un tubo
para prueba autloga y 2 tubos para los glbulos A y B respectivamente.
b) Colocar en cada tubo una gota de cada uno de los sueros clasificadores, en el
tubo de la prueba autloga colocar suero o plasma y glbulos rojos del paciente y
en los tubos siguientes Glbulos A y glbulos B segn corresponda.
c) Agregar a cada tubo que contiene los sueros clasificadores, 1 gota de glbulos
del paciente que se va a clasificar y a los tubos que tienen los glbulos A y B
colocar dos gotas de suero o plasma del paciente.
d) Mezclar, centrifugar por 1 minuto a 1000 rpm y leer todos los tubos.
e) S se omite la centrifugacin, debe dejar reposar durante 1 hora a temperatura
ambiente.
f) La lectura del grupo ABO debe ser la misma con los sueros clasificadores que con
los glbulos testigos. Si existe alguna duda o los resultados son diferentes se debe
reclasificar usando la misma muestra pero, lavada 4 veces con buffer y utilizando
los sueros clasificadores.
g) Si en el tubo que contiene Suero Anti D, no se observa aglutinacin se debe
realizar la Tcnica Determinacin de Du para confirmar Rh.
h)
Leer
y
resultados en
registro
de
de
receptores.
anotar los
la hoja de
protocolo
Investigacin de la variante DU
a) Colocar en un tubo una gota de suero anti D y una gota de glbulos del paciente
suspendidos en su propio suero o plasma.
b) Incubar a 37C por 15 minutos.
c) Lavar 4 veces en salino o buffer. Eliminar el mximo de sobrenadante despus
del ltimo lavado.
d) Agregar una gota de suero Antiglobulina humana (Coombs).
e) Centrifugar a 1000 rpm durante 1 minuto. Observar si existe aglutinacin
macroscpica.
INTERPRETACIN:
Si el resultado del test muestra ausencia de aglutinacin, se puede afirmar que
corresponde a un Factor Rh NEGATIVO
Si el resultado del test muestra aglutinacin, existen dos posibles interpretaciones:
Leer
NOTA: Terminado el tiempo de centrifugacin se debe leer inmediatamente, si no es
posible retirar de la centrifuga y dejar en espera en la gradilla correspondiente. De
los exmenes realizados en los turnos de noche se debe dejar la tarjeta para cotejar
lectura en la entrega de turno en presencia de un profesional.
Pruebas de coombs indirecta (Tcnica en Gel)
Para la deteccin de anticuerpos irregulares
a) Tomar una tarjeta de gel que contiene suero de Coombs Poliespecfico, ubicados
a temperatura ambiente (no utilizar tarjetas que presenten deshidratacin o
variacin en su presentacin al examen ocular),
b) Marcar cada pocillo con la identificacin del paciente. Retirar el sello que recubre
el pocillo.
c) Diluir los Glbulos Rojos de los frascos de Panoscreen de la siguiente manera:
Al primer frasco I agregar una gota (50 ul.) de Glbulos Rojos I ya agitados y
agregar 200 ul. de Solucin 2
Al frasco marcado II agregar una gota (50 ul.) de Glbulos Rojos II ya agitados
y agregar 200 ul. de Solucin 2.
d) Aadir 50 ul.(una gota) de las solucin de glbulos rojos ya preparada a cada
pocillo segn corresponda (I, II).
e) Aadir 25 ul de suero o plasma del paciente a cada pocillo.
f) Incubar 15 minutos a 37 C.
g) Centrifugar por 10 minutos a la velocidad indicada por la centrfuga.
h) Interpretacin de resultados:
considerar invlido. En este caso la deteccin del anticuerpo debe ser repetida Si se
observa aglutinacin despus de adicionar las clulas controles de Coombs a un
test negativo indica que la antiglobulina humana agregada fue capaz de reaccionar
y que el resultado negativo es vlido.
i) Leer y anotar los resultados.
considerar invlido. En este caso la deteccin del anticuerpo debe ser repetida Si se
observa aglutinacin despus de adicionar las clulas controles de Coombs a un
test negativo indica que la antiglobulina humana agregada fue capaz de reaccionar
y que el resultado negativo es vlido.
n) Leer y anotar los resultados en la unidad a transfundir y libro de PC.
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