El uso de edulcorantes artificiales ha sido objeto de multiples polmicas en lo que se respecta a su seguridad a
largo plazo, un grupo de estos son los ciclamatos
Existen dos grandes grupos de edulcorantes, los naturales (como la sacarosa, fructuosa y glucosa) y los artificiales. Los edulcorantes artificiales se caracterizan por tener un menor aporte calrico o un aporte nulo y no modifican la glucemia en la sangre, a diferencia de los naturales. Al tener un poder edulcorante entre 100 y 600 veces ms alto que los naturales, endulzan con una mnima cantidad. La lista de edulcorantes artificiales la encabezan los acalricos, entre los que estn la famosa sacarina, el primer edulcorante utilizado de forma masiva desde los aos 80; el aspartamo, la sucralosa, el acesulfamo-k, el ciclamato, la taumatina y la neohesperidina. En este grupo tambin se encuentran los polialcoholes o polioles, que estaran de forma natural en algunos vegetales. Los edulcorantes han sido utilizados en todo el mundo durante ms de un siglo de forma segura. En Europa hay autorizados diez de ellos: acesulfamo- K, aspartamo, ciclamato, sucralosa, sacarina, taumatina, neohesperidina DC, glicsidos de esteviol, neotamo y sal de acesulfamo y aspartamo. Tambin estn autorizados los polialcohles sorbitol y xilitol. Como cualquier otro aditivo, en los etiquetados de los productos alimenticios debe figurar la declaracin y descripcin de su presencia como ingredientes.
Ciclamato Acesulfame Aspartamo Sacarina Son compuestos que brindan sabor dulce a los alimentos, pueden clasificarse en dos categoras: los que dan cuerpo o masivos y los intensificadores de dulzura. (Abreu, 2000). Los intensificadores de dulzura son aquellos que en cantidades diminutas incrementan el sabor dulce de los alimentos. Los edulcorantes que dan cuerpo, son aquellos que su dulzura es menor a la sacarosa y son usados como compuestos que brindan consistencia Los edulcorantes artificiales son ampliamente usados en la industria de los alimentos, bebidas, industria confeccionaria y farmacutica a travs del mundo
El uso de los edulcorantes de alta intensidad, tambin llamados edulcorantes artificiales o edulcorantes bajos en caloras, se ha incrementado en alimentos dietticos y algunas bebidas.
Aspartame (AMP) Aspartame (N-L- alpha-asparti-L-fenilalanina-1-metil ester; Nutrasweet) es usado para reemplazar edulcorantes naturales. Es muy popular debido a que es aproximadamente 200 veces ms dulce que la sacarosa y su dulzura depende del tipo de alimento donde se usa,
50% fenilalanina, 40% cido asprtico y 10% alcohol metlico indica que el metanol es extremadamente txico, es fcilmente absorbido despus de la ingestin, inhalacin o exposicin dermal y metabolizado por el hgado a formaldehdo. Adems, debido a un grupo pequeo de personas quienes tienen la enfermedad hereditaria fenilquetonuria, los cuales son sensibles a fenilalanina studiaron 7 grupos de ratas que fueron alimentadas administrndoles concentraciones de 0 a 100,000 ppm de aspartame en la dieta. Fueron alimentadas desde la semana 8 de vida hasta que se produjo la muerte natural. Las ratas fallecidas fueron sometidas a una biopsia completa para revisar el estado de sus rganos. Como resultado observaron por primera vez de forma experimental que, el aspartame aumenta la incidencia de tumores malignos, incrementa la aparicin de linfomas y leucemias, aumenta la incidencia de carcinomas de pelvis renal y urteres, y por ltimo, aumenta la incidencia de Schwannomas de nervios perifricos. Por lo tanto, segn la fundacin Ramazzini APM es un compuesto multicarcinognico
Acesulfame-k (AK) El acesulfame-k una sal de potasio de 3,4,-dihidro-6-metil-1,2,3-oxatiazina-4-uno-2,2- dixido. Es un edulcorante no calrico de alta intensidad, actualmente usado en alimentos, bebidas No aporta caloras en los alimentos debido a que no es metabolizado en el cuerpo humando, es excretado en la orina y es aproximadamente 180 a 200 veces ms dulce que la sacarosa (
El acesulfame-k una sal de potasio de 3,4,-dihidro-6-metil-1,2,3-oxatiazina-4-uno-2,2-dixido algunos se han relacionado con riesgos potenciales de cncer tienen efectos negativos en el hgado, riones y otros rganos estimulan los antojos provocan problemas gastrointestinales problemas de desarrollo en nios y fetos dolores de cabeza
Fundamentos de la electroforesis La electroforesis es la migracin de solutos inicos bajo la influencia de un campo elctrico; Estas partculas migran hacia el ctodo o nodo (electrodos - y +), en dependencia de una combinacin de su carga, peso molecular y estructura tridimensional. Es de destacar que a escala analtica, los mtodos electroforticos son de alta sensibilidad, poder de resolucin y versatilidad, y sirven como mtodo de separacin de mezclas complejas de cidos nucleicos, protenas y otras biomolculas, donde aportan un potente criterio de pureza. Se pueden conocer tambin mediante estas tcnicas, las caractersticas cido-bsicas de las protenas presentes en un extracto crudo, lo que da la informacin necesaria si se pretende realizar una separacin cromatogrfica basada en diferencias de carga. Es til adems para determinar otros parmetros como peso molecular, punto isoelctrico y nmero de cadenas polipeptdicas de las protenas
La electroforesis es una tcnica para la separacin de molculas segn la movilidad de estas en un campo elctrico a travs de una matriz porosa, la cual finalmente las separa por tamaos moleculares y carga elctrica, dependiendo de la tcnica que se use Mtodos electroforticos zonales Son tiles para lograr la separacin de componentes de mezclas complejas. Se aplican pequeas cantidades de la disolucin de protenas a un soporte slido, que se impregna con una solucin de tampn. Los soportes son en general polmeros y forman un gel poroso que restringe el movimiento de las molculas a travs del medio durante la electroforesis y disminuyen los flujos de conveccin del solvente. Como soportes han sido utilizados papel (celulosa), almidn, poliacrilamida, agarosa, acetato de celulosa, etctera. Este mtodo tiene gran poder resolutivo porquese aplica una cantidad pequea de protena a unazona estrecha, mientras que la longitud del trayectoes mucho mayor que la zona de aplicacin. El equipamiento requerido es simple (fuente de poder y cubeta vertical u horizontal donde se coloca el soporte y 2 electrodos). Con el desarrollo de la ciencia se han diseado equipos automatizados de electroforesis como el PhastSystem
Ventajas de la electroforesis capilar Requiere pequeo volumen de muestra (1-10 nl) Rpida separacin (1 a 45 min.) Aplicable a todo tipo de sustancias Automatizacin Cuantificacin (lineal) Reproducibilidad Puede acoplarse a espectrometra de masa Datos fundamentales
Tipos de molculas que pueden ser separadas por CE Protenas Pptidos Amino cidos cidos nucleicos Iones inorgnicos Bases orgnicas cidos orgnicos
Tcnicas Electroforticas Electroforesis capilar en zona o en disolucin libre (CZE) est basada en la separacin de los analitos segn la relacin carga/tamao. En esta tcnica la composicin del tampn es constante manteniendo su fuerza inica y pH en todo el capilar y durante todo el tiempo que dura la separacin. El potencial aplicado hace que los diferentes componentes inicos de la mezcla migren cada uno segn su propia movilidad y se separen en zonas que puedan estar completamente resueltas o parcialmente traslapadas. Entre las zonas completamente resueltas hay huecos ocupados por el tampn. La inyeccin de la muestra al capilar se puede llevar a cabo por gradiente de voltaje (electrocintica) o gradiente de presin (hidrodinmica o hidrosttica) entre los dos extremos del capilar. La deteccin se realiza, por lo general, directamente sobre el capilar (celda de deteccin). El tipo de detector escogido depende de los analitos a determinar, y se escoge aquel que proporcione una sensibilidad elevada para todos los compuestos. La deteccin directa e indirecta ultravioleta-visible (UV- Vis) es uno de los ms usados en EC, aunque tambin es utilizado el mtodo de Fluorescencia, el cual es ms selectivo y sensible. Este mtodo generalmente se combina con el uso de un Lser (fluorescencia inducida por LASER) para la deteccin de sustancias trazas. Se utiliza un lser de moderada intensidad, junto con la capacidad de enfocar un pequeo punto de luz en el interior del capilar. En este procedimiento se realiza una preparacin previa de la muestra para marcar las sustancias a medir con una sustancia fluorescente. La principal dificultad es la alineacin de los componentes pticos de manera tal que la excitacin emisin sean ptimas. En el sistema colineal, la misma lnea ptica es utilizada para enfocar el haz del Lser y para colectar la fluorescencia emitida.
Electroforesis capilar en gel (CGE) combina la tcnica de electroforesis con la cromatografa de reparto. Permite la separacin en funcin de la migracin electrofortica y tambin en funcin del peso molecular de las muestras. Se lleva a cabo en una matriz polimrica con estructura de gel poroso, cuyos poros contienen una mezcla tampn donde ocurre la separacin. Estos geles estn contenidos en un tubo capilar. Los geles utilizados son tambin de agarosa y poliacrilamida. La electroforesis se basa en la migracin de iones presentes en una disolucin por la accin de un campo elctrico en el aparato de electroforesis capilar , aplicando un voltaje de 30kw se pueden separar los componentes de una disolucin dentro de un tubo capilar de slice fundida de 50cm d long y un dimetro interior de 25 -75 um los distintos solutos tienen diferentes movilidades y por consiguiente migran atraves del capilar con diferente velocidad Los capilares para electroforesis pueden ser tan pequeos que pueden ser insertados en una celula viva de suficiente tamao, para analizar su contenido. Alternativamente se pueden tomar con un capilar clulas mas pequeas una a una reventarlas y analizarlas La electroforesis capilar tiene una mejor resolucin