Diseo de estudi o

Efectos a largo plazo que produce el glifosato y el consumo de

maz tolerante al glifosato.

Introduccin:

En el ao 2012 la revista Food and Chemical Toxicology public un artculo en donde
Gilles-Eric Sralini, et al. Buscaban dar respuesta a los efectos a largo plazo que produce el
glifosato y el consumo de maz tolerante al glifosato. Sin embargo este articulo presento
fuertes crticas por la comunidad cientfica debido a errores presentados en el diseo
experimental, y en la presentacin de resultados. La finalidad de este documento es
presentar un diseo de estudio corregido que logr dar respuesta a esa misma pregunta.

Consideraciones ticas:

El protocolo experimental se llevar a cabo en concordancia con las regulaciones ticas en
una unidad de cuidados animales autorizada. Los experimentos con los animales sern
desarrollados en acuerdo con los lineamientos ticos de las experimentaciones animales.

Plantas, dietas y qumicos:

Las variedades de maz que se usaran en este estudio son: el R-tolerant NK603 (Monsanto
Corp., USA) y el maz no transgnico NGMO (Albert Lea Seed., USA) Los dos tipos de maz
se mantendrn en condiciones semejantes (temperatura 255C, humedad 60%), en la
misma ubicacin y separadamente. Una parte del NK603 ser fumigado con RoundUp
(Weather-max, 540 g/L de glifosato) 3 L por hectrea y la otra no ser fumigada. El maz se
cortar cuando el contenido de humedad se encuentre por debajo de 30% y ser secado a
una temperatura inferior a 30C, se le realizaran anlisis de micotoxinas y anlisis
agroqumicos para garantizar su calidad.
Los animales estarn divididos en cuatro grupos: El primero consumir el maz NK603
fumigado con RoundUp; el segundo maz NGMO; el tercero RoundUp en concentracin de
0.09% (400 mg/kg), que es la cantidad mxima permitida en alimentos en los Estados
Unidos; el cuarto grupo ser el control.
La dieta de los ratones deber ser balanceada por ello se les administrar diariamente dos
comidas una consistente en el maz a estudiar y otra de Complete Menu for Rats & Mice
(Carefresh, USA). Los animales del grupo control recibirn dos raciones del alimento

anteriormente nombrado. El agua para el consumo de los animales ser Aquafina
(PepsiCo, USA); la cual posee todos los estndares de calidad para su consumo.

GMO+RU NGMO RU CONTROL
Maz GMO + RoundUp Y N N N
Maz NGMO N Y N N
Complete Menu Y Y Y Y
Agua + RoundUp N N Y N
Agua Y Y N Y

Y: Suministrado N: No suministrado

Animales y tratamientos:

Ratones B6C3F1 de 6 semanas de edad sern obtenidos de Charles River Lab. (USA). Sern
mantenidos en jaulas de policarbonato (820cm2 Genestil, Francia) con dos animales por
cada una. La cama (Toplit clsica, Francia) ser cambiada cada 3 das. Los animales se
mantendrn a 223 C, con una humedad controlada de 45% a 65% y pureza de aire;
tendrn ciclos de 12 horas de luz y oscuridad. Cada grupo de animales ser de 50
ratones/sexo/grupo siguiendo todos los lineamientos que estipula la gua OECD 453 para
estudios de toxicidad/carcinogenicidad crnica. Todos los animales debern ser pesados al
inicio del tratamiento, al menos una vez a la semana durante los primeros 13 semanas, y
despus mensualmente. Tambin se anotarn: los cambios en la piel, piel, ojos, mucosas
membranas, presencia de secreciones y excreciones y actividad neurovegetativa (por
ejemplo: lagrimeo, piloereccin, tamao de la pupila, respiracin anmala); los cambios
en la marcha, postura y respuesta a manipulacin, as como la presencia de movimientos
clnicos o tnicos, estereotipos (por ejemplo: la excesiva aseo, recorridos repetitivos en
crculo) o comportamientos anmalos (por ejemplo: automutilacin, marcha hacia atrs).
Todos los animales debern ser revisados al principio y al final de cada da. Se registrar el
desarrollo de tumores; el momento de inicio, ubicacin, dimensiones, aspecto y
progresin de cada tumor visible o palpable.

Anlisis bioqumico:

Los exmenes hematolgicos y de orina debern llevarse a cabo en la mitad de las
hembras y en la mitad de los machos; a los 3, 6 y 12 meses, utilizando los mismos
animales en cada periodo de tiempo. Se les realizaran las siguientes determinaciones
bioqumicas en sangre, para investigar posibles efectos txicos: albumina, globulina,
protena total, creatinina, urea, calcio, sodio, potasio, cloruro, fosforo inorgnico,
triglicridos, glucosa, colesterol, ALAT, ASAT, GT, estradiol y testosterona; las muestras de
sangre sern colectadas de la vena de la cola del animal bajo efectos de anestesia

isofluorano (la cual no tiene impacto en la salud del animal). En cuanto a las muestras de
orina se analizarn los siguientes parmetros: creatinina, fosforo, potasio, cloruro, sodio,
calcio, pH y aclaramiento. Tanto las muestras de sangre como las de orina sern tomadas
en ayunas.

Anatomopatologa:

Se le realizar autopsia a los animales que mueran durante el estudio, en la cual se
revisaran los siguientes rganos: cerebro, colon, corazn, riones, hgado, pulmones,
ovarios, bazo, testculos, glndulas suprarrenales, epiddimo, prostata, timo, tero, aorta,
vejiga, hueso, duodeno, esfago, ojos, leo, yeyuno, nodos linfticos, sistema
linforreticular, glndulas mamarias, pncreas, glndula paratiroidea, placas de Peyer,
glndula pituitaria, glndulas salivares, nervio citico, piel, columna vertebral, estomago,
glndula tiroidea y trquea.

Anlisis estadstico:

Los datos bioqumicos fueron tratados mediante un anlisis multivariado con el software
SIMCA-P v.12 (Umetrics AB, Suecia). Se har uso de herramientas quimiomtricas, como el
anlisis de componentes principales (ACP), por mnimos cuadrados parciales a las
estructuras latentes
(PLS), y los PLS ortogonales (OPL), los cuales son mtodos robustos para modelar, analizar
e interpretar datos biolgicos y qumicos complejos.