Tecnolgico de Monterrey

Campus Guadalajara









Aplicacin de regresiones lineales para determinar curvas de crecimiento y parmetros
cinticos de Saccharomyces cerevisiae







Claudia Del Toro Runzer A01222071
Vicente Pal Armenta Prez A01112119
Hiram Gmez Villaseor A01112315
Mtodos Numricos
Martha Yolanda Stahl Delgado
Aplicacin de regresiones lineales para determinar curvas de crecimiento y
parmetros cinticos de Saccharomyces cerevisiae
Las levaduras son microorganismos unicelulares importantes en la biotecnologa y en la
industria alimentaria. En especfico la levadura Saccharomyces cerevisiae ha sido de mucho
inters por su capacidad para producir etanol, y para fines en la industria panadera y
vitivincola (Morales, 2007). Entre otros parmetros, se estudia la cintica de crecimiento de
estos organismos, es decir, el aumento del nmero de microorganismos a lo largo del
tiempo que a su vez da lugar a la formacin de colonias o de poblaciones. Conocer datos
cinticos es de suma relevancia para predecir cmo evolucionar un cultivo, cmo se ir
consumiendo el sustrato, y cmo se acumularn los productos del cultivo (metabolitos que
suelen ser de alto inters industrial). Paralelamente la cintica releva informacin sobre las
necesidades ambientales de la clula y el tiempo de vida de los organismos bajo
condiciones especficas (Unavarra, 2006).
S. cerevisiae muestra fases de crecimiento bien definidas cuando es cultivado en medios
lquidos con glucosa como fuente de carbono. La primera es la fase lag, la cual es un
periodo de adaptacin donde la clula se prepara para dividirse; posteriormente viene la
fase logartmica, es en este periodo donde las clulas alcanzan su mxima velocidad de
duplicacin siguiendo por lo tanto un crecimiento exponencial a su vez llevan a cabo un
metabolismo fermentativo en el que se produce etanol. Al disminuir la concentracin de
glucosa la clula entra en una fase llamada estacionaria donde la velocidad de crecimiento
iguala a la velocidad de muerte celular. sta fase se caracteriza por la acumulacin de
carbohidratos de reserva (como trehalosa y glucgeno), y cambios en la estructura celular,
la pared celular se vuelve ms gruesa y resistente, stos son mecanismos de supervivencia
que se adoptan a consecuencia del agotamiento de nutrientes (Folch, et al., 2004).
Sin conocer estos factores es arriesgado y muy imprudente iniciar un cultivo en un
fermentador con el coste que ello supone puesto que no se puede predecir qu va a pasar,
cuando se completar el crecimiento, cmo se va a acumular el producto etc. Es por ello
que de manera experimental se obtienen datos de la concentracin celular a razn del
tiempo. Estos datos se dan como valores discretos y cmo se mencion anteriormente
muchas veces se requiere analizar o estimar el valor de un punto entre estos valores con el
fin de realizar pronsticos o probar hiptesis. Adems se puede necesitar una versin
simplificada de una funcin complicada (Unavarra, 2006).
Un modo de resolver este problema es mediante el ajuste de curvas, por lo general no se
conoce la curva exacta, pero a travs de una curva aproximada se puede obtener mucha
informacin valiosa. A continuacin se emplear el mtodo de regresin por mnimos
cuadrados como una herramienta para estudiar el crecimiento de S. cerevisiae. Este
mtodo se usa comnmente si los datos exhiben grados significativos de error, como los
datos individuales pueden ser incorrectos no se busca interceptar todos los puntos, su
estrategia consiste en construir una curva que siga la tendencia de los puntos registrados
como un grupo. Se emplearn diversos mtodos de regresiones y se determinar cul es el
ms apropiado para explicar el crecimiento de S. cerevisiae mediante la evaluacin de la r
2
,
este valor es un coeficiente de determinacin, un valor de r
2
aproximado a la unidad indica
que el ajuste es apropiado (Chapra, Canale, 2007).
La cintica de crecimiento analizada corresponde a una cepa de Saccharomyces cerevisiae,
tambin conocida como levadura de cerveza, cultivada en un biorreactor. El medio elegido
para el crecimiento fue el caldo glucosa, cuya composicin de 1 litro consiste de:

Imagen 1. Morfologa microscpica de Saccharomyces cerevisiae,

Glucosa 5 g
Peptona 7 g
Fosfato bipotsico 5g
Agua destilada 1000 ml
Tabla 1. Composicin de medio de cultivo caldo glucosa.
La glucosa es la fuente de energa de la levadura, mientras que la peptona es la fuente de
nitrgeno. El fosfato bipotsico acta como estabilizador y el agua como medio mvil para la
levadura. El biorreactor fue inoculado alrededor de las 8 de la maana, y cada hora se
retiraba una muestra para realizar mediciones de turbidez con la ayuda de un
espectrofotmetro y realizar observaciones al microscopio con la finalidad de detectar si el
cultivo fue contaminado. El objetivo de la medicin de la turbidez es determinar la
concentracin de levadura en el medio con el fin de analizar el crecimiento. El
espectrofotmetro emite un haz de luz que atraviesa la muestra y mide la cantidad de luz
que no se dispers. Entre mayor es la cantidad de clulas, mayor es la cantidad de luz
dispersada y por lo tanto, mayor es la turbidez de la muestra. La unidad de la turbidez es la
D.O. a mayor turbidez, mayor densidad ptica y por ende, mayor nmero de clulas en el
medio (Madigan, et al.).
La densidad ptica puede ser utilizada para observar el crecimiento. No obstante, es
preferible utilizar una conversin de la D.O. a la biomasa, es decir, la cantidad de materia de
la levadura en s. La cual tiene la ventaja de ser expresada en g/L. Para hacer la
conversin, se toma el hecho de que el la concentracin de biomasa []es proporcional a la
D.O.
[] ( ) [] ( )
En la prctica, se realiza una curva de peso seco con el objetivo de determinar la relacin de
D.O. con [] Sin embargo, debido a que S. cerevisiae es un m.o. histricamente
reconocido,se recurri a la literatura para encontrar dicho factor, el cual corresponde a 1
D.O. @ 600 nm =35 g de biomasa/L.
Los datos recolectados de la cintica de S. cerevisiae:

Tabla 2. Datos de cintica de S. cerevisiae. Concentracin expresada en densidad ptica y biomasa
Para visualizar mejor la informacin recolectada, es pertinente analizar el crecimiento de S.
cerevisiae con una grfica de Biomasa vs Tiempo.

Grfica 1. Concentracin de biomasa vs tiempo

Como se puede observar, hay primero una fase estacionaria donde no se registran cambios
significativos de biomasa, luego una fase de crecimiento exponencial y finalmente una fase
estacionaria. Para modelar dicho crecimiento, existe el modelo de crecimiento exponencial
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
1
0 5 10 15
B
i
o
m
a
s
a

(
g
/
L
)

Tiempo (h)
t (h) D.O.@ 600 nm Biomasa (g/L)
0 0.253 0.08855
1 0.254 0.0889
2 0.285 0.09975
3 0.287 0.10045
4 0.378 0.1323
5 0.445 0.15575
6 0.66 0.231
7 0.701 0.24535
8 1.297 0.45395
9 1.429 0.50015
10 1.829 0.64015
11 2.321 0.81235
12 2.452 0.8582
13 2.477 0.86695
14 2.494 0.8729

Donde:
=concentracin de biomasa (g/L). t= tiempo (h)
= velocidad especfica de crecimiento (h
-1
).

es especfica de cada m.o. y depende de muchos factores, tanto del medio como la
temperatura. Como se puede apreciar, el modelo de crecimiento exponencial es una
relacin no lineal que puede ser linealizada con distintos mtodos de regresin.
Para realizar dichos clculos, se eligi la fase de crecimiento correspondiente al crecimiento
exponencial y se aplicaron distintos mtodos de regresin

Grfica 2. Conjunto de regresiones lineales realizadas.

A continuacin se muestra un anlisis los coeficientes de correlacin obtenidos en las
regresiones:

Tipo de regresin Coeficiente de correlacin
Lineal 0.9263
Polinmica 0.9866
Potencial 0.9501
Exponencial 0.9837
Crecimiento saturado 0.9726
Tabla 3.Coeficiente de correlacin para cada regresin.
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
0 2 4 6 8 10 12
B
I
O
M
A
S
A

(
G
/
L
)

TIEMPO (HORAS)
Series1 Regresin lineal Regresin exponencial
Regresin potencial Regresin polinmica (m=2)
Posteriormente, se analiz el modelo de regresin exponencial y tomando en cuenta la
relacin de

se obtuvo el modelo de crecimiento exponencial para S. cerevisiae, el cual se prob contra
los datos experimentales:

Tiempo (h) Experimental
Biomasa (g/L)
Modelo Error %
3 0.10045 0.09862845 1.8133875
4 0.1323 0.12898031 2.50921143
5 0.15575 0.16867264 8.29703877
6 0.231 0.22057985 4.51088538
7 0.24535 0.28846097 17.5712116
8 0.45395 0.37723177 16.900149
9 0.50015 0.49332085 1.36541951
10 0.64015 0.64513512 0.7787424
11 0.81235 0.84366862 3.85531065
Tabla 4. Clculo de biomasa a partir del modelo de regresin experimental y su comparacin con los
datos experimentales.

De igual forma, se model la fase de desaceleracin del crecimiento mediante el modelo de
Monod, para esto, hay que recordar que en el medio se encuentra glucosa, la cual es el
sustrato del que el m.o. obtiene energa. La concentracin de glucosa puede ser medida de
sobrenadantes centrifugados mediante la prueba de azcares residuales. Obteniendo as
informacin que nos permita ilustrar la siguiente grfica:

0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
1
0
2
4
6
8
10
12
14
16
0 5 10 15
C
o
n
c
e
n
t
r
a
c
i

n

B
i
o
m
a
s
a

(
g
/
L
)

C
o
n
c
e
n
t
r
a
c
i

n

G
l
u
c
o
s
a

(
g
/
L
)

Tiempo
Sustrato
Biomasa
Grfica 3. Relacin de Concentracin de sustrato (glucosa) con la concentracin de biomasa como funcin del tiempo

Como puede observarse, hay una relacin entre el consumo de sustrato y el crecimiento. El
modelo de Monod es de particular importancia para modelar la fase de desaceleracin
(correspondientes a los puntos 10,11,12, 13 y 14) del crecimiento y se rige por la siguiente
ecuacin:

]
Donde:
= velocidad especfica de crecimiento (h
-1
).

=velocidad especfica de crecimiento mxima (h

-1
).
= concentracin de sustrato.

= constante de Monod.
Dicho modelo se relacion con la regresin de razn de crecimiento :

]

Por ende, mediante el clculo de la regresin fue posible determinar el modelo de Monod
siguiente:



Grfica 4. Modelo de Monot

0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0 0.5 1 1.5

(
h
-
1
)

Concentracin de glucosa (g/L)
Modelo de Monod
Datos experimentales
[

]
R=0.992767
Otra forma de calcular la constante de Monod es mediante la linealizacin de un diagrama
de LinewaverBurk, el cual consiste en el recproco del modelo de Monod:


Grfica 5. linealizacin de LinewaverBurk


Ahora, despejando el valor de Ks y
max
a partir de la ecuacin, obtenemos los siguientes
datos:
Ks=0.0269238
max
=0.261650
Los cuales pueden ser sustituidos en un nuevo modelo de Monod,


Sustrato Experimental Monod por RRC Monod por LLB Error % Error %
0.994000 0.246794 0.254749 0.254750 3.223006 3.223450
0.221800 0.238229 0.233317 0.233327 2.061653 2.057598
0.005500 0.054906 0.044367 0.044383 19.194576 19.164789
0.001200 0.010144 0.011159 0.011164 10.008955 10.055835
0.000700 0.006840 0.006627 0.006630 3.103059 3.061005

Tabla 5. Comparacin de velocidades especficas de crecimiento calculadas a partir de las dos
ecuaciones de Monod (RRV y LLB).

As mismo es conveniente calcular el rendimiento (Y) de biomasa por sustrato; esta
operacin se realiza con la siguiente frmula:

[

] 0,04883319

y = 0.1029x + 3.8219
R = 0.9928
0
20
40
60
80
100
120
140
160
0 500 1000
1
/

(
h
)

1/S
Regresin lineal
[

]
Explicacin de resultados
La Grfica 1 se obtuvo a partir de los datos experimentales de la Tabla 2. En sta se puede
observar claramente un crecimiento exponencial de la biomasa de S. cerevisiae. A partir de
estos datos se realiz un anlisis para evaluar el proceso de produccin y ver si es rentable
en cuanto a la generacin del producto deseado, en este caso cerveza. Para obtener esta
informacin fue importante calcular por lo menos la velocidad especfica mxima de
crecimiento (
max
), la velocidad especfica de crecimiento (), la constante de afinidad por el
sustrato (Ks) y el coeficiente de rendimiento (Y
xs
).
En primer lugar, por la naturaleza de los datos experimentales fue necesario realizar ajustes
y obtener una ecuacin que describiera el comportamiento del crecimiento de la levadura.
Por esta razn se realizaron ajustes mediante distintos mtodos de regresin. En la Tabla 3
se describen los coeficientes de correlacin para los ajustes empleados. Se puede observar
que las regresiones que describan mejor la relacin de los datos fueron la polinmica y la
exponencial con una r2 de 0.9866 y 0.9837 respectivamente, la regresin de crecimiento
saturado y de potencias dieron una r2 aceptable de 0.9726 y 0.9501, la regresin lineal fue
la menos precisa, con una r2 de 0.9263. La alta correlacin obtenida a partir de la regresin
polinomial cuadrtica puede deberse a que el rango que corresponde al crecimiento
exponencial es muy similar a un rango de la parbola. Por otra parte el ajuste lineal, tuvo un
valor de r2 tan menor ya que la relacin entre x y y no es lineal, eso lo sabemos por el
simple hecho de observar la grfica 1.
Para calcular
max
se utiliz la pendiente de la grfica correspondiente a la regresin
exponencial. sta dio un valor de 0.26833 h-1 y representa a la velocidad mxima de
multiplicacin que puede alcanzar un microorganismo bajo las condiciones ambientales que
se le est proporcionando. Las
max
registradas en la literatura para este microorganismo en
la produccin de etanol oscila entre los 0.24 y o.41 h-1 (Zapata & Hoyos, 2005), esto indica
que la obtenida experimentalmente est dentro de un rango apropiado y a su vez es un
indicador de que las condiciones ambientales para S. cerevisiae son adecuadas.
Por otro lado, para el clculo de es necesario estudiar el efecto de la concentracin de
sustrato S cuando ste es limitante. Estos resultados se obtuvieron a partir de la ecuacin
de Monod, y se pueden observar en la Tabla 5. y son importantes ya que nos permitieron
calcular la constante de utilizacin del sustrato limitante Ks. Esta constante explica la
afinidad de los organismos por ese sustrato. Si el organismo tiene gran afinidad por el
sustrato limitante entonces el valor de Ks es bajo por lo general oscilan entre 1.1x10-3 y 25
mg/L (Hernndez, 2002). Para el clculo de la Ks se utiliz una linealizacin del modelo de
Monod llamado diagrama de Linewaver Burk, el cual se puede ver en la Grfica 5. el valor
de Ks fue de 0.0269238. Tambin se calcul el rendimiento de biomasa generada por
sustrato consumido, el valor de esta relacin fue de 0.0488.
El dato obtenido de Ks indica que Saccharomyces cerevisiae tiene una alta afinidad por el
sustrato utilizado que fue glucosa. Ahora bien, se puede observar que el rendimiento de
generacin de biomasa en comparacin con el consumo de sustrato es bajo, esto indica que
el aprovechamiento del sustrato en el medio no se usa para formar biomasa, por
consiguiente la energa que gana de su fuente de carbono la emplea en la formacin de
productos, es decir etanol. Por esta razn se deduce que las condiciones nutricionales y
ambientales para la levadura son favorables ya que se est obteniendo el principal producto
de inters comercial.
Conclusin
Los parmetros cinticos de crecimiento microbiano son herramientas bsicas para escalar
procesos biotecnolgicos evaluados y reducir as fallas por mala planeacin, puesto que
permiten predecir el desarrollo de la fermentacin y evaluar si las condiciones a las que se
est trabajando los las ptimas para el microorganismo. Se obtuvo resultados positivos
sobre los parmetros cinticos estudiados ya que indican que la levadura tiene un alto gusto
por el sustrato proporcionado y adems que la energa proporcionada por la glucosa se
emplea para la formacin de los productos de inters (etanol) y no tanto para crecer.
Las regresiones lineales por mnimos cuadrados fueron una herramienta bsica para
realizar los clculos planteados ya que



Referencias
Chapra, S. & Canale, R. (2007). Mtodos numricos para ingenieros. Mxico: McGraw-Hill
Interamericana.
Folch, J., Garay, A., Lledas, F. & Covarrubias, A. (2004). La respuesta a estrs en la
levadura Saccharomyces cerevisiae. Revista Latinoamericana de microbiologa. Vol. 46,
Nms. 1-2, pp. 24 46.
Hernndez, C. (2002). Microbiologa industrial. MacGraw-Hill: Mxico.
Madigan, M., Martinko, J., Dunlap, P., y Clark, D. P. (2009).Biologa de los microorganismos,
755-765. Madrid, Espaa: Pearson Education.
Morales, R. (2007). Las paredes celulares de levadura de Saccharomyces cerevisiae: un
aditivo natural capaz de mejorar la productvidad y salud del pollo de engorde.
Recuperado de http://www.tdx.cat/handle/10803/5689
Unavarra. (2006). Microbiologa industrial: Crecimiento celular. Recuperado de
http://www.unavarra.es/genmic/micind-2-2.htm
Zapata, J & Hoyos, M. (2005). Parmetros cinticos de crecimiento de Saccharomyces
cerevisiae en presencia de un campo magntico variable de baja intensidad y alta
frecuencia. Vitae, revista de la facultad de qumica farmacutica Volumen 12 nmero 1,
pgs. 39-44.
Anexos
Regresin lineal


















xi (horas)
yi
(concentracin
peso seco g/L)
xiyi xi
2
St=(yi-)
2

Sr=(yi-i)
2
= (yi-a0-
a1*x1)2
3 0.10045 0.30135 9 0.06919238 0.00794752
4 0.1323 0.5292 16 0.05345087 0.00108574
5 0.15575 0.77875 25 0.04315775 0.00100158
6 0.231 1.386 36 0.01755478 0.00197546
7 0.24535 1.71745 49 0.01395811 0.01395811
8 0.45395 3.6316 64 0.00818221 5.7947E-06
9 0.50015 4.50135 81 0.01867474 0.0015556
10 0.64015 6.4015 100 0.0765383 0.00015651
11 0.81235 8.93585 121 0.20147131 0.00934359
63 3.27145 28.18305 501 0.50218045 0.03702991
n 9
x 7
0.363494444
a1
(pendiente) 0.088048333
a0
(interseccin) -0.252843889
y= 0,93292393+0,163082x
S
y|x
0.072732295
r
2
0.926261751
r 0.962424932
y = 0.088x - 0.2528
R = 0.9263
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
0 2 4 6 8 10 12
C
O
N
C
E
N
T
R
A
C
I

N

TIEMPO (HORAS)
Series1 Linear (Series1)
Regresin exponencial
Da Concentracin lny xy x
2

St=(yi-)
2

Sr=(yi-i)
2
= (yi-a0-
a1*x1)2
3 0.10045 -2.29809519 -6.89428556 9 1.11318346 0.000333016
4 0.1323 -2.02268321 -8.09073283 16 0.60787458 0.000641596
5 0.15575 -1.85950312 -9.29751561 25 0.38005133 0.006371412
6 0.231 -1.46533757 -8.79202541 36 0.04942506 0.00211724
7 0.24535 -1.40506952 -9.83548662 49 0.02626002 0.026260017
8 0.45395 -0.78976822 -6.31814575 64 0.20543726 0.034195745
9 0.50015 -0.69284723 -6.23562503 81 0.30269018 0.000182546
10 0.64015 -0.44605276 -4.46052755 100 0.63515693 6.44091E-05
11 0.81235 -0.207824 -2.28606397 121 1.07163095 0.001453723
63 3.27145 -11.1871808 -62.2104083 501 4.39170977 0.071619704













n 9
x 7
-1.24302009
a1 0.26833095
a0 -3.12133677
y= -3,12133677+0,26833x
S
y|x
0.10115032
r
2
0.98369207
r 0.99181252
y=0,044e
0,26833

y = 0.0441e
0.2683x

R = 0.9837
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
0 2 4 6 8 10 12
A
X
I
S

T
I
T
L
E

AXIS TITLE
Series1 Expon. (Series1)
Regresin polinomial
xi yi xi
2
xi
3
xi
4
xiyi xi
2
yi
St=(yi-)
2
Sr=(yi-i)
2

3 0.10045 9 27 81 0.30135 0.90405 0.06919238 1.18962E-05
4 0.1323 16 64 256 0.5292 2.1168 0.05345087 9.60608E-05
5 0.15575 25 125 625 0.77875 3.89375 0.04315775 2.69487E-05
6 0.231 36 216 1296 1.386 8.316 0.01755478 0.000138629
7 0.24535 49 343 2401 1.71745 12.02215 0.01395811 0.002704315
8 0.45395 64 512 4096 3.6316 29.0528 0.00818221 0.003437175
9 0.50015 81 729 6561 4.50135 40.51215 0.01867474 0.000168598
10 0.64015 100 1000 10000 6.4015 64.015 0.0765383 0.000113187
11 0.81235 121 1331 14641 8.93585 98.29435 0.20147131 1.65181E-05
63 3.27145 501 4347 39957 28.18305 259.12705 0.50218045 0.006713328

Matriz


9 63 501
63 501 4347
501 4347 39957

Matriz inversa

6.74632035 -2.04090909 0.13744589
-2.04090909 0.6530303 -0.04545455
0.13744589 -0.04545455 0.00324675

y= 0,3634944-0,0508486x+0,00992121x
2




Matriz solucin
0.167154091
-0.050848636
0.009921212
Matriz resultado
3.27145
28.18305
259.12705
n
9
x 7
0.36349444
a0 0.167154091
a1 -0.05084864
a2 0.00992121
S
y/x
0.03096848
r
2
0.98663164
r 0.99329333
y = 0.0099x
2
- 0.0508x + 0.1672
R = 0.9866
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
0 2 4 6 8 10 12
C
O
N
C
E
N
T
R
A
C
I

N

TIEMPO
Ajuste de saturacin

xi (horas)
yi
(concentracin
peso seco g/L)
1/x 1/y xiyi xi
2
St=(yi-)
2

Sr=(yi-i)
2
= (yi-a0-
a1*x1)2
3 0.10045 0.33333333 9.95520159 3.31840053 0.11111111 31.1888211 0.31304807
4 0.1323 0.25 7.55857899 1.88964475 0.0625 10.1638072 0.02472077
5 0.15575 0.2 6.42054575 1.28410915 0.04 4.20266157 0.78714147
6 0.231 0.16666667 4.32900433 0.72150072 0.02777778 0.00172242 0.00168196
7 0.24535 0.14285714 4.07581007 0.58225858 0.02040816 0.08684589 0.45880072
8 0.45395 0.125 2.20288578 0.27536072 0.015625 4.69857889 0.27923599
9 0.50015 0.11111111 1.99940018 0.22215558 0.01234568 5.62214442 0.04537771
10 0.64015 0.1 1.56213387 0.15621339 0.01 7.8869559 0.05530604
11 0.81235 0.09090909 1.23099649 0.11190877 0.00826446 9.85652208 0.0513796
1.51987734 39.334557 8.56155219 0.30803219 73.7080595 2.01669233















n 9
x 0.16887526
4.37050634
a1 37.3602958
a0
-
1.93872335
y=37.36x-
1.93
S
y|x
0.53674846
r
2
0.97263946
r 0.98622485
Ajuste de potencias

xi (horas)
yi
(concentracin
peso seco g/L)
LOG(x) LOG(y) xiyi xi
2
St=(yi-)
2

Sr=(yi-i)
2
= (yi-a0-
a1*x1)2
3 0.10045 0.47712125 -0.99805006 -0.4761909 0.22764469 0.20995942 0.00886947
4 0.1323 0.60205999 -0.87844016 -0.52887367 0.36247623 0.11465226 5.124E-05
5 0.15575 0.69897 -0.80757194 -0.56446857 0.48855907 0.07168213 0.00676471
6 0.231 0.77815125 -0.63638802 -0.49520613 0.60551937 0.00932214 0.00176548
7 0.24535 0.84509804 -0.61021394 -0.5156906 0.7141907 0.00495295 0.01601825
8 0.45395 0.90308999 -0.34299198 -0.30975262 0.81557152 0.03874787 0.00200247
9 0.50015 0.95424251 -0.30089973 -0.28713131 0.91057877 0.05709091 5.0299E-06
10 0.64015 1 -0.19371825 -0.19371825 1 0.11979803 0.00113895
11 0.81235 1.04139269 -0.09025682 -0.09399279 1.08449872 0.20212213 0.00472692

7.30012572 -4.85853089 -3.46502484 6.20903907 0.82832783 0.04134252


n 9
x 0.81112508
-0.53983677
a1 1.65384673
a0 -1.88131333
y=.0131X^1.653
S
y|x
0.07685099
r
2
0.95008918
r 0.97472518







y = 0.0131x
1.6538

R = 0.9501
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
0.7
0.8
0.9
0 2 4 6 8 10 12
C
O
N
C
E
T
R
A
C
I

N

TIEMPO
Ajuste de Saturacin Monod
Xi
(Sustrato)
Yi (Biomasa) 1/x 1/y xiyi xi
2
St=(yi-)
2

Sr=(yi-i)
2
= (yi-a0-
a1*x1)2
0.994 0.24679447 1.00603622 4.05195465 4.07641313 1.01210887 2519.78449 0.01600597
0.2218 0.23822876 4.50856628 4.19764603 18.9253653 20.3271699 2505.17905 0.00780805
0.0055 0.05490589 181.818182 18.2129819 3311.45126 33057.8512 1298.62413 18.7162878
0.0012 0.01014413 833.333333 98.5791589 82149.2991 694444.444 1965.12666 80.4514187
0.0007 0.0068397 1428.57143 146.205307 208864.724 2040816.33 8455.88706 21.9154171
2449.23755 271.247049 294348.476 2768339.96 16744.6014 121.106938

n 5
x 489.847509
54.2494097
a1 0.10294538
a0 3.82187315
y=
S
y|x
6.35365872
r
2
0.9927674
r 0.99637714












Linealizacinlineweaver-burk
xi (horas)
yi
(concentracin
peso seco g/L)
xiyi xi
2
St=(yi-)
2

Sr=(yi-i)
2
= (yi-a0-
a1*x1)2
1.00603622 4.05195464 4.07641312 1.01210887 2519.78452 0.01600619
4.50856628 4.19764603 18.9253653 20.3271699 2505.17907 0.0078079
181.818182 18.212982 3311.45127 33057.8512 1298.62414 18.7162832
833.333333 98.5791547 82149.2955 694444.444 1965.12627 80.451325
1428.57143 146.205312 208864.732 2040816.33 8455.88799 21.9153892
2449.23755 271.24705 294348.481 2768339.96 16744.602 121.106812

n 5
x 489.847509
54.2494099
a1 (pendiente) 0.10294538
a0
(interseccin) 3.82187228
y= 1,5845966+0,10492477x
S
y|x
6.35365542
r
2
0.99276741
r 0.99637714




y = 0.1029x + 3.8219
R = 0.9928
0
20
40
60
80
100
120
140
160
0 500 1000
A
x
i
s

T
i
t
l
e

Axis Title
Series1
Linear (Series1)
Clculos necesarios para la linealizacin de linealizacin de LinewaverBurk.
Tiempo
(h)
(h-1) Sustrato (h-1) 1/S 1/
10 0.64015 0.994 0.2467945 1.006036217 4.05195464
11 0.81235 0.2218 0.2382288 4.508566276 4.19764603
12 0.8582 0.0055 0.0549059 181.8181818 18.212982
13 0.86695 0.0012 0.0101441 833.3333333 98.5791547
14 0.8729 0.0007 0.0068397 1428.571429 146.205312