Ingeniera gentica

1. Introduccin
Todo organismo, an el ms simple, contiene una enorme cantidad de
informacin. Esta informacin se encuentra almacenada en una macromolcula
que se halla en todas las clulas: el ADN. Este ADN est dividido en gran cantidad
de sub-unidades (la cantidad vara de acuerdo con la especie) llamadas genes.
Cada gen contiene la informacin necesaria para que la clula sintetice una
protena. As, el genoma (y por consecuencia el proteoma), va a ser la
responsable de las caractersticas del individuo. Los genes controlan todos los
aspectos de la vida de cada organismo, incluyendo metabolismo, forma, desarrollo
y reproduccin. Por ejemplo, la sntesis una protena X har que en el individuo se
manifieste el rasgo "pelo oscuro", mientras que la protena Y determinar el rasgo
"pelo claro".
Vemos entonces que la carga gentica de un determinado organismo no puede
ser idntica a la de otro, aunque se trate de la misma especie. Sin embargo, debe
ser en rasgos generales similar para que la reproduccin se pueda concretar. Y es
que una de las propiedades ms importantes del ADN, y gracias a la cual fue
posible la evolucin, es la de dividirse y fusionarse con el ADN de otro individuo de
la misma especie para lograr descendencia diversificada.




2. Definicin de Ingeniera Gentica
La Ingeniera Gentica (en adelante IG) es una rama de la gentica que se
concentra en el estudio del ADN, pero con el fin su manipulacin. En otras
palabras, es la manipulacin gentica de organismos con un propsito
predeterminado.
En este punto se profundizar el conocimiento sobre los mtodos de manipulacin
gnica. El fin con el cual se realizan dichas manipulaciones se tratar ms
adelante, cuando se analicen los alcances de esta ciencia.
Enzimas de restriccin.
Como ya se dijo, la IG consiste la manipulacin del ADN. En este proceso son
muy importantes las llamadas enzimas de restriccin, producidas por varias
bacterias. Estas enzimas tienen la capacidad de reconocer una secuencia
determinada de nucletidos y extraerla del resto de la cadena. Esta secuencia,
que se denomina Restriction Fragment Lenght Polymophism o RLPM, puede
volver a colocarse con la ayuda de otra clase de enzimas, las ligasas.
Anlogamente, la enzima de restriccin se convierte en una "tijera de ADN", y la
ligasa en el "pegamento". Por lo tanto, es posible quitar un gen de la cadena
principal y en su lugar colocar otro.
Vectores.
En el proceso de manipulacin tambin son importantes los vectores: partes de
ADN que se pueden autorreplicar con independencia del ADN de la clula
husped donde crecen. Estos vectores permiten obtener mltiples copias de un
trozo especfico de ADN, lo que proporciona una gran cantidad de material fiable
con el que trabajar. El proceso de transformacin de una porcin de ADN en un
vector se denomina clonacin. Pero el concepto de clonacin que "circula" y est
en boca de todos es ms amplio: se trata de "fabricar", por medios naturales o
artificiales, individuos genticamente idnticos.
ADN polimerasa.
Otro mtodo para la produccin de rplicas de ADN descubierto recientemente es
el de la utilizacin de la enzima polimerasa. ste mtodo, que consiste en una
verdadera reaccin en cadena, es ms rpido, fcil de realizar y econmico que la
tcnica de vectores.



3. Terapia Gnica.
La terapia gnica consiste en la aportacin de un gen funcionante a las clulas
que carecen de esta funcin, con el fin de corregir una alteracin gentica o
enfermedad adquirida. La terapia gnica se divide en dos categoras.
I. Alteracin de clulas germinales (espermatozoides u vulos), lo que origina
un cambio permanente de todo el organismo y generaciones posteriores.
Esta terapia no se utiliza en seres humanos por cuestiones ticas.
II. Terapia somtica celular. Uno o ms tejidos son sometidos a la adicin de
uno o ms genes teraputicos, mediante tratamiento directo o previa
extirpacin del tejido. Esta tcnica se ha utilizado para el tratamiento de
cnceres o enfermedades sanguneas, hepticas o pulmonares.
4. Aplicaciones
La Ingeniera gentica tiene numerosas aplicaciones en campos muy diversos,
que van desde la medicina hasta la industria. Sin embargo, es posible hacer una
clasificacin bastante simple bajo la cual se contemplan todos los usos existentes
de estas tcnicas de manipulacin gentica: aquellos que comprenden la terapia
gnica, y aquellos que se encuentran bajo el ala de la biotecnologa.
5. Usos de la terapia gnica.
"En marzo de 1989, los investigadores norteamericanos Steve Rosenber y Michael
Blease, del Instituto Nacional del Cncer, y French Anderson, del Instituto
Nacional del Corazn, Pulmn y Sangre, anunciaron su intencin de llevar a cabo
un intercambio de genes entre seres humanos, concretamente en enfermos
terminales de cncer.
Los genes trasplantados no haban sido diseados para tratar a los pacientes, sino
para que actuaran como marcadores de las clulas que les fueron inyectados,
unos linfocitos asesinos llamados infiltradores de tumores, encargados de aniquilar
las clulas cancergenas.
Las vctimas de cncer murieron, pero la transferencia haba sido un xito "
Este fue uno de los primeros intentos de utilizar las tcnicas de IG con fines
teraputicos.
Hoy el desafo de los cientficos es, mediante el conocimiento del Genoma
Humano, localizar "genes defectuosos", informacin gentica que provoque
enfermedades, y cambiarlos por otros sin tales defectos.
La ventaja quiz ms importante de este mtodo es que se podran identificar en
una persona enfermedades potenciales que an no se hayan manifestado, para o
bien reemplazar el gen defectuoso, o iniciar un tratamiento preventivo para
atenuar los efectos de la enfermedad. Por ejemplo, se le podra descubrir a una
persona totalmente sana un gen que lo pondra en un riesgo de disfunciones
cardacas severas. Si a esa persona se le iniciara un tratamiento preventivo,
habra posibilidades de que la enfermedad no llegue nunca.
A travs de una tcnica de sondas genticas, se puede rastrear la cadena de ADN
en busca de genes defectuosos, responsables de enfermedades genticas graves.
Si bien la informacin del Genoma Humano fue recientemente descubierta, ya se
han localizado los "locus" de varias enfermedades de origen gentico. He aqu
algunas de ellas:
Hemofilia Alcoholismo Corea de Huntigton Anemia Falciforme Fibrosis
qustica Hipotiroidismo Congnito Retraso Mental Miopata de Duchenne
Manacodepresin Esquizofrenia Sndrome de Lesch Nyhan Deficencia de
ADA Hidrocefalia Microcefalia Labio Leporino Ano Imperfecto o
Imperforacin Espina Bfida.
Pero los alcances de la terapia gnica no slo se limitan a enfermedades
genticas, sino tambin a algunas de origen externo al organismo: virales,
bacterianas, protozoicas, etc. En febrero de este ao, por ejemplo, se anunci que
un grupo de cientficos estadounidenses emple tcnicas de terapia gnica contra
el virus del SIDA. Sintetizaron un gen capaz de detener la multiplicacin del virus
responsable de la inmunodeficiencia, y lo insertaron en clulas humanas
infectadas. El resultado fue exitoso: el virus detuvo su propagacin e incluso
aument la longevidad de ciertas clulas de defensa, las CD4.
Otra tcnica peculiar inventada recientemente es la del xenotransplante. Consiste
en inocular genes humanos en cerdos para que crezcan con sus rganos
compatibles con los humanos, a fin de utilizarlos para transplantes.
Esto nos demuestra que la Ingeniera Gentica aplicada a la medicina podra
significar el futuro reemplazo de las tcnicas teraputicas actuales por otras ms
sofisticadas y con mejores resultados. Sin embargo, la complejidad de estos
mtodos hace que sea todava inalcanzable, tanto por causas cientficas como
econmicas.




6. Biotecnologa.
Pero el conocimiento de los genes no slo se limita a la Medicina. La posibilidad
de obtener plantas y animales trangnicos con fines comerciales es demasiado
tentadora como para no intentarlo.
Las biotecnologas consisten en la utilizacin de bacterias, levaduras y clulas
animales en cultivo para la fabricacin de sustancias especficas. Permiten,
gracias a la aplicacin integrada de los conocimientos y tcnicas de la bioqumica,
la microbiologa y la ingeniera qumica aprovechar en el plano tecnolgico las
propiedades de los microorganismos y los cultivos celulares. Permiten producir a
partir de recursos renovables y disponibles en abundancia gran nmero de
sustancias y compuestos.
Aplicadas a escala industrial, las tales biotecnologas constituyen la bioindustria, la
cual comprende las actividades de la industria qumica: sntesis de sustancias
romticas saborizantes, materias plsticas, productos para la industria textil; en el
campo energtico la produccin de etanol, metanol, biogas e hisrgeno; en la
biomineralurgia la extraccin de minerales. Adems, en algunas actividades
cumplen una funcin motriz esencial: la industria alimentaria (produccin masiva
de levaduras, algas y bacterias con miras al suministro de protenas, aminocidos,
vitaminas y enzimas); produccin agrcola (donacin y seleccin de variedades a
partir de cultivos de clulas y tejidos, especies vegetales y animales trangnicas,
produccin de bioinsecticidas); industria farmacutica (vacunas, sntesis de
hormonas, interferones y antibiticos); proteccin del medio ambiente (tratamiento
de aguas servidas, transformacin de deshechos domsticos, degradacin de
residuos peligrosos y fabricacin de compuestos biodegradables).
Los procesos biotecnolgicos ms recientes se basan en las tcnicas de
recombinacin gentica descritas anteriormente.
A continuacin se detallan las aplicaciones ms comunes.

7. Industria Farmacutica.
Obtencin de protenas de mamferos.
Una serie de hormonas como la insulina, la hormona del crecimiento, factores de
coagulacin, etc. tienen un inters mdico y comercial muy grande. Antes, la
obtencin de estas protenas se realizaba mediante su extraccin directa a partir
de tejidos o fluidos corporales.
En la actualidad, gracias a la tecnologa del ADN recombinante, se clonan los
genes de ciertas protenas humanas en microorganismos adecuados para su
fabricacin comercial. Un ejemplo tpico es la produccin de insulina que se
obtiene a partir de la levadura Sacharomces cerevisae, en la cual se clona el gen
de la insulina humana.
Obtencin de vacunas recombinantes.
El sistema tradicional de obtencin de vacunas a partir de microorganismos
patgenos inactivos, puede comportar un riesgo potencial.
Muchas vacunas, como la de la hepatitis B, se obtienen actualmente por IG. Como
la mayora de los factores antignicos son protenas lo que se hace es clonar el
gen de la protena correspondiente.


8. Agricultura.
Mediante la ingeniera gentica han podido modificarse las caractersticas de gran
cantidad de plantas para hacerlas ms tiles al hombre, son las llamadas plantas
transgnicas. Las primeras plantas obtenidas mediante estas tcnicas fueron un
tipo de tomates, en los que sus frutos tardan en madurar algunas semanas
despus de haber sido cosechados.
Recordando que la clula vegetal posee una rgida pared celular, lo primero que
hay que hacer es obtener protoplastos.
Vamos a ver las tcnicas de modificacin gentica en cultivos celulares. Estas
clulas pueden someterse a tratamientos que modifiquen su patrimonio gentico.
Las tcnicas se clasifican en directas e indirectas.
Entre las tcnicas indirectas cabe destacar la transformacin de clulas mediada
por Agrobacterium tumefaciens.
Esta bacteria puede considerarse como el primer ingeniero gentico, por su
particular mecanismo de accin: es capaz de modificar genticamente la planta
hospedadora, de forma que permite su reproduccin. Esta bacteria es una
autntica provocadora de un cncer en la planta en la que se hospeda.



Las tcnicas directas comprenden la electroporacin, microinyeccin, liposomas y
otros mtodos qumicos.
Entre los principales caracteres que se han transferido a vegetales o se han
ensayado en su transfeccin, merecen destacarse:
Resistencia a herbicidas, insectos y enfermedades microbianas.
Ya se dispone de semillas de algodn, que son insensibles a herbicidas. Para la
resistencia a los insectos se utilizan cepas de Bacillus thuringiensis que producen
una toxina (toxina - Bt) daina para las larvas de muchos insectos, de modo que
no pueden desarrollarse sobre las plantas transgnicas con este gen. Respecto a
los virus se ha demostrado que las plantas transgnicas con el gen de la protena
de la cpsida de un virus, son resistentes a la invasin de dicho virus.
Incremento del rendimiento fotosinttico.
Para ello se transfieren los genes de la ruta fotosinttica de plantas C4 que es ms
eficiente.
Mejora en la calidad de los productos agrcolas.
Tal es el caso de la colza y la soja transgnicas que producen aceites
modificados, que no contienen los caracteres indeseables de las plantas comunes.
Sntesis de productos de inters comercial.
Existen ya plantas transgnicas que producen anticuerpos animales, interfern, e
incluso elementos de un polister destinado a la fabricacin de plsticos
biodegradables
Asimilacin de nitrgeno atmosfrico.
Aunque no hay resultados, se ensaya la transfeccin del gen nif responsable de la
nitrogenasa, existente en microorganismos fijadores de nitrgeno, y que permitira
a las plantas que hospedasen dicho gen, crecer sin necesidad de nitratos o
abonos nitrogenados, aumentando la sntesis de protenas de modo espectacular.
9. Proyecto HUGO
Qu es.
El Proyecto Genoma Humano es una investigacin internacional que busca
seleccionar un modelo de organismo humano por medio del mapeo de la
secuencia de su ADN. Se inici oficialmente en 1990 como un programa de quince
aos con el que se pretenda registrar los 80.000 genes que codifican la
informacin necesaria para construir y mantener la vida. Los rpidos avances
tecnolgicos han acelerado los tiempos esperndose que se termine la
investigacin completa en el 2003.
Cuando faltan slo tres aos (2003) para el cincuentenario del descubrimiento de
la estructura de la doble hlice por parte de Watson & Crick (1953), se ha
producido el mapeo casi completo del mismo.
Los objetivos del Proyecto son:
Identificar los aproximadamente 100.000 genes humanos en el ADN.
Determinar la secuencia de 3 billones de bases qumicas que conforman el
ADN.
Acumular la informacin en bases de datos.
Desarrollar de modo rpido y eficiente tecnologas de secuenciacin.
Desarrollar herramientas para anlisis de datos.
Dirigir las cuestiones ticas, legales y sociales que se derivan del proyecto.
10. Relacin con la Ingeniera Gentica.
Ya que este proyecto se limita slo a la informacin gentica del ser humano, las
aplicaciones se limitan slo a la terapia gnica, apartando las aplicaciones
biotecnolgicas.
El conocimiento del Genoma Humano permitir identificar y caracterizar los genes
que intervienen en las principales enfermedades genticas, lo que har posible el
tratamiento mediante terapia gnica a casi todas las enfermedades que tengan un
posible origen gentico.