Uca Fiaes

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Determinacin de la contaminacin por plaguicidas en

agua, suelo, sedimentos y camarones en los Cantones
Salinas del Potrero y Sisiguayo de la Baha de
Jiquilisco

INFORME FINAL
ABRIL 2007- DICIEMBRE 2008
P PR RO OY YE EC CT TO O U UC CA A F FI IA AE ES S

2

ndice

Presentacin ........................................................................................................... 5
1. Definicin del problema.................................................................................. 10
2. Delimitacin del Problema.............................................................................. 15
2.1 Delimitacin Geogrfica.......................................................................... 15
2.2 Delimitacin de contaminantes a analizar............................................... 16
3. Objetivos de la Investigacin.......................................................................... 23
3.1 Objetivo General ..................................................................................... 23
3.2 Objetivos Especficos.............................................................................. 23
4. Metodologa ................................................................................................... 24
4.1 Revisin Bibliogrfica.............................................................................. 24
4.2 Trabajo de Campo .................................................................................. 24
4.3 Trabajo Experimental .............................................................................. 27
4.3.1 Montaje de Laboratorio ......................................................................... 27
4.3.2 Anlisis.................................................................................................. 28
4.3.3 Control de calidad ................................................................................. 30
5. Resultados ..................................................................................................... 31
5.1 Plan de muestreo.................................................................................... 31
5.2 Medicin de parmetros en puntos de muestreo.................................... 34
5.3 Trabajo Experimental .............................................................................. 39
5.3.1 Tiempos de retencin............................................................................ 39
5.3.2 Curvas de Calibracin........................................................................... 40
5.3.3 Marchas analticas ................................................................................ 43
5.4 Resultado de anlisis de pesticidas ........................................................ 54
5.5 Anlisis de Resultados............................................................................ 67
6. Conclusiones.................................................................................................. 72
7. Recomendaciones ......................................................................................... 74
Bibliografa ............................................................................................................ 76

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ndice de tablas

Tabla 1 Resultados de las encuestas sobre pesticidas utilizados por la comunidad......... 17
Tabla 2 Plaguicidas utilizados en el cultivo de caa de azcar (consulta a experto)......... 18
Tabla 3. Pesticidas organofosforados utilizados en el cultivo de caa de azcar y en las
comunidades para sus labores agrcolas ............................................................................ 19
Tabla 4. Pesticidas organoclorados utilizados histricamente............................................ 22
Tabla 5. Pesticidas seleccionados para el estudio.............................................................. 22
Tabla 6 Manejo y Preservacin de muestras compuestos orgnicos semi-voltiles.......... 26
Tabla 7. Plan de muestro ..................................................................................................... 32
Tabla 8 Parmetros medidos en puntos de muestreo de agua en poca seca ................. 34
Tabla 9 Parmetros medidos en puntos de muestreo de agua en poca lluviosa............. 36
Tabla 10 Parmetros medidos en puntos de muestreo de sedimentos en poca seca..... 37
Tabla 11 Parmetros medidos en puntos de muestreo de sedimentos en poca lluviosa 38
Tabla 12. Tiempo promedio de pesticidas organoclorados................................................. 39
Tabla 13. Tiempos de retencin promedio de pesticidas fosforados.................................. 40
Tabla 14. Resultados de curvas de calibracin estandar interno para pesticidas
organoclorados y organofosforados .................................................................................... 41
Tabla 15. Resultados de curvas de calibracin estndar externo para pesticidas
organoclorados y organofosforados .................................................................................... 42
Tabla 16 Resultados relevantes de la validacin ................................................................ 43
Tabla 17 Porcentajes de recuperacin de extraccin de sedimentos con diferentes
lavados.................................................................................................................................. 45
Tabla 18. Porcentajes de recuperacin para anlisis de organoclorados en camarones.. 53
Tabla 19. Resultados de anlisis de pesticidas organoclorados y organofosforados en
muestreo I y II de aguas, concentracin en ppb.................................................................. 55
Tabla 20 Resultados de anlisis de pesticidas organoclorados y organofosforados en
muestreo I y II de sedimentos, concentracin en ppb......................................................... 59
Tabla 21 Resultados de anlisis de pesticidas organoclorados y organofosforados en
muestreo de sedimentos y suelo dentro de los estanques de cultivo de camarn (Penaeus
sp), concentracin en ppb.................................................................................................... 61
Tabla 22 Resultados de anlisis de pesticidas organoclorados y organofosforados en de
camarones, concentracin en ppb....................................................................................... 63

4

ndice de figuras

Figura 1. Ocho Zonas dedicadas al Cultivo de camarn en la Baha de Jiquilisco12
Figura 2. Sitios seleccionados para realizar la investigacin ................................ 15
Figura 3. Estanques seleccionados para llevar a cabo la investigacin................ 16
Figura 4. Ubicacin de Cultivos de Algodn y Caa de Azcar en el perodo 2005-
2006 en el departamento de Usulutn (Fuente MAG)........................................... 18
Figura 5. Mapa de reas epidemiolgicas de Malaria y cultivo de algodn en los
aos 70 (mapa elaborado en el Laboratorio de SIG de la UCA con informacin de
Rodrguez, M., 2001)............................................................................................. 20
Figura 6. Mapa de puntos de muestreo................................................................. 31
Figura 7. Cromatograma de extraccin con 3 lavados .......................................... 45
Figura 8 Columnas de limpieza rellenas con gel SEPHADEX .............................. 48
Figura 9 Cromatograma muestreo II, punto 12...................................................... 49
Figura 10 Cromatograma muestro III, punto 10..................................................... 49
Figura 11 Muestra de sedimento sometida a limpieza con Florisil ........................ 50
Figura 12. Cromatograma de anlisis de camarones luego de pasar por la columna
de limpieza ............................................................................................................ 52
Figura 13. Extraccin de camarn (Peaneus sp) sin caparazn y utilizando
solvente Acetona:Hexano 1:1................................................................................ 52
Figura 14. Camarones silvestres muestreados en un brazo de la Baha de
Jiquilisco................................................................................................................ 53
Figura 15 Resultados relevantes muestreo de Agua poca lluviosa..................... 64
Figura 16 Resultados relevantes muestreo sedimentos poca seca .................... 65
Figura 17 Resultados relevantes muestreo sedimentos poca lluviosa................ 66
Figura 18 Estaciones de muestreo, Baha de Jiquilisco (Pachecho, 1995)........... 68
Figura 19 Evolucin de concentracin de pesticidas en punto de muestreo 5...... 68
Figura 20 Evolucin de concentracin de pesticidas en punto de muestreo 5...... 69

5

Presentacin

En este documento se presentan los resultados del proyecto UCA-FIAES
Determinacin de la contaminacin por plaguicidas en agua, suelo, sedimentos y
camarones en los Cantones Salinas del Potrero y Sisiguayo de la Baha de
Jiquilisco ejecutado entre abril de 2007 y Diciembre de 2008.

El objetivo principal del proyecto fue la determinacin de los niveles actuales de
contaminacin por pesticidas en una zona de cultivo de camarn (Penaeus
vannamei) en la Baha de Jiquilisco. La motivacin a desarrollar este trabajo
estaba dirigida a investigar sobre posibles causas que afectan a las especies de la
baha de Jiquilisco, particularmente a las de inters comercial como el camarn
(Penaeus sp). Adems generar informacin actualizada que pudiese ser utilizada
en futuras investigaciones y que sirva de base slida para toma de decisiones en
la regulacin del uso de pesticidas a lo largo de la cuenca de los ros, para reducir
su efecto en el ecosistema estuarino.

El proyecto contempl como primera actividad fundamental el montaje y
adecuacin de un laboratorio, en la Universidad Centroamericana Jos Simen
Caas, para el anlisis de pesticidas organoclorados y organofosforados en
diferentes matrices. En el pas existen pocos laboratorios con la capacidad para
analizar este tipo de sustancias por lo que el laboratorio, adems de ser la
herramienta fundamental para la ejecucin de los objetivos del proyecto, es
importante tambin para aumentar la capacidad investigativa de la universidad, lo
cual traer beneficios al pas.

En abril 2007 inici el proceso para el montaje del laboratorio que recibi el
nombre de Laboratorio de Calidad Ambiental, con una capacitacin sobre la
tcnica cromatogrfica impartida por un experto en el rea y con la cotizacin y
compra del mobiliario, equipos y reactivos necesarios para la implementacin de

6

los anlisis. El laboratorio termin su montaje en noviembre del 2007 quedando
totalmente equipado para la extraccin, concentracin y deteccin de muestras.
Por otra parte, para seleccionar los contaminantes a ser analizados se realiz un
estudio de los pesticidas utilizados en la zona, tanto actualmente como
histricamente, para lo que se dise una encuesta (Anexo 1), se levant la
informacin en campo y luego se realiz la tabulacin y anlisis de los datos.
Dicho estudio identific las familias de agroqumicos y las cantidades que las
personas de las comunidades de San Hilario y Sisiguayo utilizan en sus
actividades agrcolas, el detalle de los resultados de dicho estudio se presenta en
la seccin 2.2. Para esta seleccin tambin se tom en cuenta que en la parte
norte de la Baha existen extensas plantaciones, principalmente de caa de
azcar, donde tambin se utilizan grandes cantidades de estas sustancias y
adems que en la Baha de Jiquilisco histricamente se utilizaron muchos
pesticidas organoclorados en el cultivo de algodn y el combate de la Malaria. En
base a lo anterior los pesticidas seleccionados para ser analizados fueron los
siguientes:
Lindano, Ismero gamma del Hexaclorociclohexano (-HCH)

4,4DDT, Diclorodifeniltricloroetano

4,4DDE, Diclorodifenildicloroetileno

4,4DDD, Diclorodifenildicloroetano

Endrin, 1,2,3,4,10,10-hexacloro-6,7-epoxi-1,4,4A,5,6,7,8,8A-octahidro-

1, 4, 5,8-dimetanonaftaleno

Heptacloro, 1,4,5,6,7,8,8-Heptacloro-3a,4,7,7a-tetrahidro-4,7-
metanoindeno

Paratin, p-Nitrofeniltiofosfato de o, o-dietilo

Metil Paratin, o,o-dimetil o-4-nitrofenil fosforotioato
Etroprofos, o-etil S,S-dipropil fosforoditioato

Posteriormente se dise un plan de muestreo, en donde se detall el nmero de
muestras a tomar de cada matriz y los puntos en que dichas muestras seran
recolectadas. Los mapas de muestreo se elaboraron con el apoyo del Laboratorio

7

de Sistema de Informacin Geogrfica de la UCA y posteriormente fueron
validados con los miembros de la comunidad. El detalle de dicho plan de muestreo
se incluye en la seccin 5.1. Una vez seleccionados los puntos de muestreo se
redactaron protocolos basndose en una revisin bibliogrfica, definindose los
tipos de recipientes a utilizar, el tipo de muestra a obtener, el equipo, el
procedimiento a seguir y las formas de preservacin de las muestras antes de su
ingreso al laboratorio. Los protocolos se muestran en el Anexo 2 de este informe.

Los resultados del estudio de uso de pesticidas en la zona y el plan de muestreo
fueron presentados y discutidos en una reunin con personal del FIAES, personal
tcnico del Ministerio de Medio Ambiente y Recursos Naturales (MARN) y con
representantes de algunos actores locales como: Asociacin MANGLE y
Movimiento Salvadoreo de Mujeres (MSM). Los participantes hicieron
observaciones que fueron tomadas en cuenta para la ejecucin del muestreo.

Una vez montado el laboratorio se inici con la optimizacin de los mtodos de
anlisis. Para ello en primer lugar, se realizaron ensayos para determinar los
tiempos de retencin de los plaguicidas organoclorados y organofosforados con el
fin de evaluar si los pesticidas eran detectados por el equipo y adems evaluar si
cada uno se identifica en un tiempo diferente, para esto se prepararon soluciones
con patrones de cada pesticida y se inyectaron al cromatgrafo 5 veces, se
verific que todos los pesticidas daban seal y que cada uno se identificaba en un
tiempo diferente. Una vez verificado lo anterior se realizaron curvas de calibracin
para cada pesticida, para lo cual se prepararon mezclas de todos los pesticidas, a
5 niveles de concentracin utilizando estndares certificados, las cuales se
inyectaron al cromatgrafo para evaluar la intensidad de la respuesta. Para cada
curva se hizo la evaluacin de la linealidad, todas ellas presentaron coeficiente de
correlacin Pearson (r
2
) mayor de 0.98, el resultado de las curvas de calibracin
se muestra en Anexo 10.

8

Posteriormente se llev a cabo la validacin del mtodo de determinacin de
pesticidas organoclorados y organofosforados en aguas para evaluar si las
condiciones del anlisis eran adecuadas, se determinaron los niveles de
recuperacin y los lmites de deteccin y cuantificacin para cada pesticida. Para
lograr lo anterior se prepararon muestras y blancos fortificados con las mezclas de
pesticidas a analizar, los cuales se sometieron a todo el proceso de anlisis. La
recuperacin para los pesticidas organoclorados se mantiene en el intervalo 60-
85%. Para los pesticidas organofosforados los resultados fueron los siguientes:
para los pesticidas phoxim, metamidofos y terbufos, no se obtuvo respuesta de
rea, posiblemente porque el lmite de deteccin del equipo es muy alto. En
cuanto al etroprofos, metil paratin y paratin s se obtuvieron respuestas y los
porcentajes de recuperacin se encuentran dentro del intervalo 70%-125%.
Adicionalmente se definieron los lmites de deteccin (LD) y de cuantificacin
(LCM) para los organoclorados y organofosforados. El detalle de todos los
clculos y resultados de la validacin se muestran en el Anexo 10.

El primer muestreo inici en diciembre de 2007 y finaliz en marzo 2008 cubriendo
el muestreo en poca seca. Se tomaron muestras de agua, sedimentos y se
realizaron las extracciones y la deteccin de todas ellas. Los resultados de aguas
se cuantificaron y se presentan en la seccin 5.4. Sin embargo en los
cromatogramas correspondientes al anlisis de sedimentos se observaron
interferencias que impedan la cuantificacin. Debido a esto se modific la marcha
de sedimentos para eliminar dichas interferencias, determinando que es necesario
hacer pasar los extractos por una columna de limpieza y realizar la cuantificacin
por la tcnica de estndar externo, todas las pruebas realizadas para eliminar
dichas interferencias se presentan en la seccin 5.3.3, los resultados de los
anlisis de sedimentos se muestran en la seccin 5.4.

El segundo muestreo se realiz entre junio y agosto de 2008, recolectndose
muestras de agua, sedimento y suelo para luego extraerlas y concentrarlas. Los
resultados se presentan en la seccin 5.4.

9

Finalmente las muestras de camarn (Penaeus sp.) se recolectaron en el mes de
octubre de 2008 cuando estos haban alcanzado la talla comercial en los
estanques seleccionados, los resultados del anlisis de esta matriz se muestra en
la seccin 5.4.

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1. Definicin del problema

El estuario de la Baha de Jiquilisco es el primero en importancia en El Salvador
dada su extensin, su intensa actividad pesquera y por ser un rea de desarrollo
de estadios larvarios y juveniles de numerosas especies. Por otra parte, es el rea
con mayor extensin de bosque salado, entre 14,267 ha. y 22,912 ha. cuya
especie dominante es el mangle rojo. El complejo incluye las reas protegidas de
bosque aluvial costero: Normanda, Chaguantique y el Tercio, as como la punta
San Juan del Gozo (MARN 2003).

En la Baha de Jiquilisco drenan tres cuencas hidrogrficas: la del ro Lempa, la
comprendida entre el ro Lempa y el Grande de San Miguel y la del ro Grande de
San Miguel. Los ros de dichas cuencas contienen contaminacin por vertidos de
aguas negras domsticas y por vertidos de las diferentes actividades industriales y
agrcolas.

En la zona nor-occidental de la baha existe una actividad agrcola enfocada en el
cultivo de maz, arroz, frijoles, maicillo, ajonjol, musceas, algodn y caa de
azcar. Actualmente, esta ltima actividad agrcola es la que en mayor medida
utiliza fertilizantes y pesticidas que eventualmente se trasladan a las aguas
costeras a travs de los ros.

Por otra parte, segn Lpez, citado por Pacheco (1995), en la dcada de los 70 en
el departamento de Usulutn se sembraron cerca de 30,000 hectreas de
algodn, algunas de estas plantaciones se ubicaron en la parte nor occidental de
la Baha de Jiquilisco, aunque para el ao de 1992 las hectreas cultivadas de
algodn se haban reducido a 1400.

El cultivo del algodn se ha caracterizado por el uso intensivo de agroqumicos
para el control de plagas. Muchos de estos plaguicidas son compuestos
organoclorados altamente txicos y de lento proceso de descomposicin en el

11

medio natural, tales como Aldrn, Endrn, Dieldrn, DDT y otros similares. Estudios
realizados por Lpez (1975-1976) detectaron la presencia de residuos de
plaguicidas organoclorados y organofosforados en 5 sitios de la Baha de
Jiquilisco, as como residuos en peces, moluscos, crustceos y equinodermos.
Rubio et al. (1984) reporta adems la presencia de Metil Paratin, Etil Paratin y
Lindano en Jiquilisco. Por su parte, Pacheco (1995) realiz anlisis en 5 sitios de
muestreo de la Baha de Jiquilisco en agua, sedimento y especies pesqueras e
hizo una comparacin con los datos de Lpez (1976), encontrando una reduccin
en aguas estearinas en las concentraciones de DDT, Metil paratin y Endrn y un
aumento en las concentraciones de Dieldrn; en el caso de los sedimentos se
observ un aumento de Dieldrn y Endrin entre 1976 y 1995 en algunas de las
estaciones de monitoreo en la poca lluviosa y una reduccin en la poca seca, se
observaron disminuciones en esta matriz de DDT y Metil Paratin en todas las
estaciones de monitoreo tanto en poca seca como en poca lluviosa. Se observ
adems que las concentraciones ms altas en sedimento se encontraron en las
estaciones ms alejadas de la bocana. Se observ un incremento en la
concentracin de Dieldrn y Endrn en camarn (Penaeus sp) y curiles aunque una
reduccin de DDT en los mismos. Los valores encontrados de pesticida no
sobrepasaron los niveles reportados en dicho estudio como permisibles para la
vida acutica.

Adicionalmente, el documento Lnea Base de las Condiciones Biofsicas y
Socioeconmicas del rea de Conservacin Jiquilisco-Jaltepeque manifiesta que
el ecosistema estuarino de la Baha de Jiquilisco presenta una considerable
contaminacin antropognica debido a cultivos agrcolas en tierras aledaas al
estero y que los residuos detectados sobrepasan los lmites establecidos para
solubilidad en aguas y toxicidad, por lo tanto constituyen un peligro potencial para
la fauna y la flora marina. Adems se sugiere que esto podra ser una de las
causas de la extincin y degeneracin de especies marinas, como la disminucin
de tamao de conchas (Anadara sp.) y la falta de engrosamiento de la cutcula del
camarn (Penaeus sp.).

12

Por otra parte, el cultivo del camarn marino (Penaeus vannamei y P. stylirostris)
en El Salvador, se concentra principalmente en la zona del margen oriental del
bajo Lempa y de la Baha de Jiquilisco, estimndose que en 1995 se dedicaban
entre 580 y 780 has. permanente o temporalmente al cultivo. La mayora de esa
extensin ( 97%) corresponde a salineras reconvertidas al cultivo del camarn
(Penaeus sp), incluidas en el programa CEE-GOES ALA 92/18 dirigido a la
reintegracin de ex-combatientes de la guerra civil (Hernndez et al, 2005).

En la Figura 1 se muestran las ocho zonas o sectores dedicados al cultivo de
camarn marino en esta regin. En la jurisdiccin de Jiquilisco se ubican cuatro
zonas: La Canoa-Las Mesitas; Salinas de Sisiguayo, El Zompopero y El Potrero-
Cuche de Monte, mientras que en la jurisdiccin de Puerto El Triunfo: El Jobal en
la Isla El Espritu Santo y Salinas El Mapachn (Hacienda. La Carrera) y en la
jurisdiccin de San Dionisio: Puerto Parada y Puerto El Flor. Finalmente se
incluyen los ncleos de La Ringlera e Isla Arco del Espino, en la jurisdiccin de
Jucuarn. En esas ocho zonas existen 33 ncleos productores de camarn
(Penaeus sp), de los que 28 pertenecen a asociaciones cooperativas y cinco son
de propietarios individuales (Hernndez et al, 2005).

Figura 1. Ocho Zonas dedicadas al Culti vo de camarn en la Baha de Jiquilisco
(Adaptado de Hernndez et al, 2005)

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La Asociacin de Desarrollo Campesino, ASDEC, que agrupa a cooperativas del
rea, declara problemas en el crecimiento de especies de camarn (Penaeus sp)
en sus lagunas de crianza. Una de las reas donde se ha observado este
problema es el cantn Salinas el Potrero, donde est ubicado el ncleo
camaronero El Zompopero y donde habitan aproximadamente 500 familias que
subsisten del cultivo del camarn. Los suelos aledaos a dichos estanques, que
actualmente son utilizados para cultivos de granos bsicos, fueron utilizados
anteriormente para el cultivo intensivo de algodn, por lo que podran estar an
contaminados con residuos de plaguicidas, y probablemente continan
contribuyendo a la contaminacin de la Baha. De igual forma, la Asociacin
Movimiento Salvadoreo de Mujeres, MSM, manifiesta la misma problemtica de
crecimiento en un estanque de cultivo de camarn manejado slo por mujeres
(Estanque de las mujeres) ubicado en la Cooperativa 31 de Diciembre del cantn
Salinas de Sisiguayo, donde esta asociacin brinda apoyo.

Los niveles actuales de contaminacin en los suelos, el agua y los sedimentos de
la Baha de Jiquilisco se desconocen, los ltimos datos reportados datan de 1995,
haciendo notar que el monitoreo de los niveles de contaminacin en la Baha es
importante porque en ella desembocan muchos ros que a su paso arrastran
pesticidas que pueden afectar el medio natural de las especies y el desarrollo del
cultivo en los estanques camaroneros. Por otro lado, tambin se desconoce si
estos contaminantes siguen bioacumulndose en especies marinas, afectando el
desarrollo normal de stas e ingresando de esta forma a la cadena alimenticia del
ser humano.

El presente trabajo pretende establecer los niveles actuales de contaminacin de
10 plaguicidas en suelo, sedimento, agua y camarones de 3 estanques de crianza;
y en suelo y agua circundante a stos, en la Baha de Jiquilisco.

La motivacin a desarrollar este trabajo est dirigida a investigar sobre posibles
causas que afectan a las especies de la baha de Jiquilisco, en este caso el

14

camarn (Penaeus sp), no se pretende en ningn momento dar una respuesta
directa al problema del crecimiento de ste; sino, generar informacin actualizada
que pueda ser utilizada para investigaciones ms concretas encaminadas a
resolver este tipo de problemas. Por otro lado, tambin se pretende generar
registros que contribuyan a las decisiones respecto a las acciones a seguir para
regular el uso de pesticidas a lo largo de la cuenca de los ros, para reducir su
efecto en el ecosistema estuarino.

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2. Delimitacin del Problema

2.1 Delimitacin Geogrfica

Para la realizacin del estudio se ha seleccionado trabajar en las reas
circundantes a dos estanques donde se han detectado problemas con las
especies y uno donde no se han manifestado dificultades en el crecimiento. La
Figura 2 muestra la ubicacin de los ncleos camaroneros seleccionados y la
Figura 3 muestra los estanques seleccionados: Estanque Los Mancornados
(Cantn Salinas Sisiguayo), el estanque manejado por mujeres de la cooperativa
31 de Diciembre (Cantn Salinas Sisiguayo) y La Carranza (Cantn Salinas el
Potrero). Sin embargo en el momento de iniciar el muestreo el estanque La
Carranza no estaba en cultivo por lo que se tom la decisin de monitorear el
estanque contiguo El Torno que presenta similares caractersticas de manejo y
eficiencia al seleccionado originalmente.

Figura 2. Sitios seleccionados para realizar la investigacin

16

Figura 3. Estanques seleccionados para llevar a cabo la investigacin

2.2 Delimitacin de contaminantes a analizar

Con el fin de seleccionar los plaguicidas que se analizarn como posibles
contaminantes del suelo, agua, sedimentos y camarones de los cantones Salinas
El Potrero y Salinas de Sisiguayo se realiz una encuesta a personas de las
comunidades de San Hilario y Sisiguayo para conocer sus hbitos de uso y
manejo de plaguicidas. El cuestionario utilizado en la encuesta, incluidos en el
Anexo 1, constaba de 4 partes: una primera sobre datos generales del
encuestado, la segunda sobre informacin referente a las formas de seleccionar y,
comprar plaguicidas, as como sobre los tipos de plaguicidas utilizados en la zona,
la tercera orientada a comprender cuales son las prcticas en el uso y manejo de
los agroqumicos y la ltima parte para definir a las personas que estn

17

involucradas en el trabajo con plaguicidas. El resultado de la encuesta se muestra
en forma resumida en la Tabla 1.

Tabla 1 Resultados de las encuestas sobre pesticidas utilizados por la comunidad
Pesticidas
Utilizados
Nombre genrico Componente
Gramoxone Paraquat Derivado bipiridilo
Folidol metil-paratin Organofosforado
Marshal carbosulfan Carbamato
Ranger Glifosato Aminocidos fosforados
Paraquat Paraquat Derivado del bipiridilo
Hedonal 2,4 D Derivado fenoxiactico
Batalla Glifosato Aminocidos fosforados
Gesaprim Atrazina Triazina
Root Out Amino cidos fosforados
Semevin Thiodicarb Carbamato
Camarn Methamidophos Organofosforado
Basta
Glufosinato de
amonio
Volaton Phoxim Organofosforado
Karate Cihalotrina labmda
Lannate Methomyl Carbamato

En cuanto a la extensin de las tierras cultivadas por los miembros de las
comunidades se pudo constatar que su extensin comparada con las parcelas
agroindustriales ubicadas al norte de la baha, es relativamente pequea como se
muestra en la Figura 4. Aunque por lo anterior, la cantidad de agroqumicos
utilizados por los miembros de la comunidad en comparacin con las cantidades
utilizadas en dichas parcelas puede considerarse pequea, por su cercana a los
estanques de cultivo, se tomaron en cuenta tanto los agroqumicos utilizados por

18

la comunidad como los agroqumicos utilizados por las plantaciones
agroindustriales principalmente caa de azcar que se muestran en la Tabla 2.

Figura 4. Ubicacin de Culti vos de Algodn y Caa de Azcar en el perodo 2005-2006 en el
departamento de Usulutn (Fuente MAG)

Tabla 2 Plaguicidas utilizados en el cultivo de caa de azcar (consulta a experto)
Terbutrina Triazina
Diuron Derivado de la Urea
Ametrina Triazina
Glifosato Derivado del cido fosfnico
Glufosinato de Amonio Derivado del cido fosfnico
Terbufos Organofosforado
Etroprofos Organofosforado
Carbofurano Carbamato

Para seleccionar entre los pesticidas utilizados, el primer filtro utilizado fue la
tcnica de deteccin, nicamente los organofosforados tienen posibilidad de ser
detectados por cromatografa gaseosa por detector de captura de electrones por lo

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tanto se seleccionaron los pesticidas mostrados en la Tabla 3, por ser detectables
a la tcnica analtica disponible en le laboratorio.

Tabla 3. Pesticidas organofosforados utilizados en el culti vo de caa de azcar y en las
comunidades para sus labores agrcolas
Pesticidas
Organofosforados Nombre-genrico Tipo de Componente
Parcelas en Comunidades
Folidol Metil paratin Organofosforado
Ranger Aminocidos fosforados
Batalla Glifosato Aminocidos fosforados
Root Out Aminocidos fosforados
Tamaron Methamidophos Organofosforado
Volaron Phoxim Organofosforado
Plantaciones de caa de azcar
Terbufos 10 GR Terbufos Organofosforado
Counter 10 G Terbufos Organofosforado
Mocap 10 GR Etroprofos Organofosforado
Roundup 35.6 SL Glifosato Aminocido fosforado

Entre los mostrados en la Tabla 3, se seleccionaron para monitorear la presencia
de contaminacin por plaguicidas, los siguientes:
- Terbufos
- Metil Paratin
- Etroprofos
Sin embargo al desarrollar las marchas analticas y evaluar las recuperaciones
para cada pesticida el lmite de deteccin del Terbufos fue demasiado alto, por lo
que no se podrn reportar resultados dadas las bajas concentraciones que se
esperan encontrar en muestras ambientales. Debido a ello se reportar en su
lugar resultados de Paratin para el cual el lmite de deteccin es bajo.
Adems de las fuentes de contaminacin actual, el rea de la Baha de Jiquilisco
ha sido contaminada con pesticidas persistentes utilizados en el pasado. Entre los

20

cultivos que histricamente han marcado el uso de plaguicidas clorados est el
cultivo del algodn. Este cultivo tiene una alta incidencia de plagas por lo que el
uso de plaguicidas fue incrementndose cada ao siendo los aos 1964/1965
cuando se logra la mxima rea de siembra de algodn, (86,001 hectreas), y se
adopt el uso intensivo de maquinara y agroqumicos. Entre los plaguicidas ms
utilizados en las dcadas de los 60 y 70 se encuentran compuestos
organoclorados tales como: BHC (Lindano), DDT (Diclorodifeniltricloroetano),
Toxafeno, Dieldrn, Aldrn, Endrn, Heptacloro y Endosulfan. Todos ellos son
compuestos muy persistentes es decir que su vida media en el medio ambiente
es muy alta.

Adems del uso de compuestos clorado para el control de plagas, tambin hubo
uso de estos compuestos para el control de enfermedades como la Malaria. Antes
de 1950 esta enfermedad estaba considerada como la principal causa de
morbilidad en El Salvador, siendo en 1931 la tasa de morbilidad de 270 personas
por 10,000 habitantes, mientras que en 1981 dicha tasa ya se haba reducido a 1.8
y actualmente la malaria ya no es causa de morbilidad.

Figura 5. Mapa de reas epidemiolgicas de Malaria y cultivo de algodn en los aos 70
(mapa elaborado en el Laboratorio de SIG de la UCA con informacin de Rodrguez, M.,
2001)

21

La Gerencia de Atencin Integral de la Salud Ambiental del Ministerio de Salud
Pblica y Asistencia Social (MSPAS), en el documento Diagnstico situacional de
DDT en los programas de control de vectores en El Salvador reporta que a pesar
de que no existen registros donde se especifique que cantidad de DDT fue
utilizado, se estima que desde 1946-1959 se utilizaron 1,690,000 Kg. de DDT, y en
base a la informacin de fichas tcnicas del MSPAS, desde 1960-1973 reporta
que se rociaron 5,161,260 casas con 2,580,630 Kg. de DDT, habiendo un total de
1,316,486 personas expuestas por ao. En la Figura 5 muestra el mapa de la
zona hiperendmica, la ms afectada por la enfermedad y por lo tanto la ms
expuesta a roco de DDT, esta zona se ubica como muestra la figura, en la zona
costera e incluye el territorio de la Baha de Jiquilisco en Usulutn.

Adicionalmente, desde los aos 70 diversas instituciones han realizado estudios
en El Salvador que demuestran la presencia de pesticidas clorados en productos
lcteos, hortalizas, suelos, aguas subterrneas y superficiales. Entre estos
pesticidas utilizados histricamente se encuentran los que se muestran en la
Tabla 4.

El DDE (Diclorodifenildicloroetileno) y el DDD (Diclorodifenildicloroetano) son
compuestos de degradacin del DDT. Por ejemplo en suelo el DDT se degrada a
estos metabolitos por la accin de microorganismos. Es importante incluirlos en
sitios donde ha habido contaminacin por DDT, ya que son compuestos de
degradacin del mismo y son txicos.

22

Tabla 4. Pesticidas organoclorados utilizados histricamente
DDT Organoclorado
DDE Organoclorado
DDD Organoclorado
Endrn Organoclorado
Dieldrn Organoclorado
Lindano Organoclorado
Heptacloro Organoclorado

En base a lo anteriormente descrito, la lista de plaguicidas seleccionados para ser
identificados en este proyecto, tanto en agua, suelo, sedimento y tejido de
camarn (Penaeus sp.) son los que se muestran en la Tabla 5, pese a que se
propusieron 4 plaguicidas se identificaran 10 en las distintas matrices.

Tabla 5. Pesticidas seleccionados para el estudio
Naturaleza Qumica
del componente
Activo
Nombre del
pesticida
Paration
Metil paratin Organofosforados
Etroprofos
DDT
DDE
DDD
Endrn
Dieldrn
Lindano
Organoclorados
Heptacloro

23

3. Objetivos de la Investigacin

3.1 Objetivo General

Cuantificar, en una primera fase, el contenido de 4 plaguicidas en suelos,
sedimentos, agua y camarones, en poca lluviosa y poca seca, en estanques de
camarones y zonas circundantes, en la Baha de Jiquilisco.
3.2 Objetivos Especficos

Acondicionamiento del laboratorio, sistematizacin y consolidacin de la
investigacin, socializacin de la informacin.

Determinar niveles actuales de 4 plaguicidas, en suelos y agua circundante a
estanques de cultivo de camarn (Penaeus sp.), en la Baha de Jiquilisco

Determinar niveles actuales de 4 plaguicidas en el sedimento, suelo, agua y
camarones, en estanques de cultivo de camarn (Penaeus sp.)

24

4. Metodologa
4.1 Revisin Bibliogrfica

Antes de iniciar el trabajo de campo y de laboratorio se realiz una bsqueda
bibliogrfica de estudios previos en la zona, as como de estudios similares
realizados en otras zonas. La informacin encontrada se tom en cuenta para la
seleccin de las metodologas a utilizar en el presente estudio.

Las matrices de inters son: agua, suelo, sedimento y camarones, y se trabajar
con analitos orgnicos, particularmente pesticidas organoclorados y
organofosforados. Basndose en esta informacin se realiz una revisin
bibliogrfica para definir los mtodos estndares de muestreo para estas
diferentes matrices, tomndose la decisin de utilizar los mtodos estndares de
la Agencia de Proteccin Ambiental de Estados Unidos (EPA).

4.2 Trabajo de Campo

El primer paso para la realizacin del trabajo de campo fue la definicin de los
puntos de muestreo. Como se muestra en el captulo 2, en la seccin referente a
la delimitacin geogrfica del problema, se trabajar en las reas circundantes a
dos estanques donde se han detectado problemas de crecimiento de camarn y
uno donde no se han manifestado dificultades en el crecimiento.

Para la determinacin de los puntos de muestreo se realizaron mapas de las
zonas de inters a gran escala, apoyndose en el Laboratorio del Sistema de
Informacin Geogrfica de la UCA. Luego se definieron como criterios para la
seleccin de puntos de muestreo, los siguientes:

- Se tomarn muestras dentro de los estanques, tanto de suelo, sedimentos,
agua y camarones.

25

- Se tomaron muestras de agua en todo su recorrido hasta los estanques,
comenzando en la Baha, luego en los brazos de agua que se internan en el
manglar y finalmente en los puntos de toma de agua de los estanques.
Intentando de esta forma monitorear todo el recorrido del agua que se
utiliza en el cultivo de camarn. Adems para la definicin de los puntos se
tomaron en cuenta las zonas donde hay desembocadura de ros, ya que en
estas zonas puede darse el ingreso de contaminantes a la Baha.
- En algunos de los puntos seleccionados para toma de agua, se tomaron
tambin muestras de sedimentos y se determinaron parmetros como pH,
Temperatura y Oxgeno disuelto.

Por otra parte, en el Anexo 2 se detallan los siguientes procedimientos de
muestreo:

- Protocolo para muestreo de aguas de baha y/o estanque para la
determinacin de pesticidas organoclorados y organofosforados.
- Protocolo para muestreo de sedimentos de baha para la determinacin de
pesticidas organoclorados y organofosforados.
- Protocolo para muestreo de suelos para la determinacin de pesticidas
organoclorados y organofosforados.

Los contenedores utilizados para la recoleccin de las muestras fueron lavados
previamente al muestreo con agua y jabn libre de fosfatos y luego enjuagados
con acetona, en el Anexo 3 se presenta el procedimiento para el lavado de toda la
cristalera en el laboratorio.

El material de los contenedores para agua y sedimento es de vidrio color mbar
con capacidad de 2.5 litros ya que no puede utilizarse recipientes de plstico, por
la posibilidad de contaminar las muestras de steres ftalatos y otros hidrocarburos.
Para camarones se utilizan bolsas plsticas con cierre hermtico pero en su

26

interior se recubren con papel aluminio para evitar contaminacin de la muestra
con el plstico.
Las muestras, una vez adquiridas se enfran a 4C con hielo y luego se guardan a
esta temperatura en el laboratorio. El tiempo mximo para realizar la extraccin es
de una semana, as como indican los procedimientos de la EPA que se muestran
en la Tabla 6 .

Tabla 6 Manejo y Preservacin de muestras compuestos orgnicos semi-voltiles
[SW-846, EPA]
ORGANICOS SEMIVOLATILES PESTICIDAS ORGANOCLORADOS/PCBSY HERBICIDAS
Matriz de la
muestra
Contenedor Preservati vo Tiempo mximo de
almacenamiento
Muestras de
residuos
concentradas
Contenedor de 125 mL
de boca ancha con
tapadera de tefln
Ninguno
Muestras 14 das

Muestra acuosas
sin residuos de
cloruro
Contenedores color
mbar de 1 galn, dos
de 0.5 galones o 4 de
un litro con tapadera
de tefln
Enfriar a 4 C
Muestras 7 das

Muestra acuosas
con residuos de
cloruro
Contenedores color
mbar de 1 galn, dos
de 0.5 galones o 4 de
un litro con tapadera
de tefln
Aadir 3 mL de
tosulfato de sodio al
10% por galn. La
adicin del tosulfato
puede ser hecha en el
laboratorio antes de
salir al campo.
Muestras 7 das

Muestras Slidas
Contenedor de 125 mL
de boca ancha con
tapadera de tefln
Enfriar a 4 C
Muestras 14 das

El muestreo se realiz en dos pocas en los puntos de muestreo seleccionados,
un muestreo en la poca seca y otro en la poca lluviosa para evaluar si el cambio
de estacin afecta la movilidad y presencia de los contaminantes.

27

4.3 Trabajo Experimental

4.3.1 Montaje de Laboratorio

Entre las primeras actividades programadas en el proyecto estaba el montaje y
adecuacin de un laboratorio para el anlisis de pesticidas organoclorados. Para
esto se realiz la adquisicin de mobiliario, de una cmara de extraccin, se
realizaron las instalaciones de gas, aire acondicionado y ductos de succin.
Finalmente se adquiri el equipo y reactivos que se detallan a continuacin (en el
Anexo 8 pueden observarse fotos del laboratorio). El laboratorio recibi el nombre
de Laboratorio de Calidad Ambiental.

Equipo
- Cromatgrafo, Detector y Auto inyector
El cromatgrafo utilizado para el anlisis es un Shimadzu GC-2014 con un
Detector de Captura de Electrones Shimadzu ECD-2014 y un Autoinyector AOC-
20.

- Columna Cromatogrfica de Deteccin
Marca: Alltech
Numero de serie: 706120203
Fase: EC
TM
-5
Dimetro Interno: 0.32 mm
Grosor del Film: 0.25 m
Temperatura mxima: 350 C

- Equipo de concentracin RapidVap Vaccum, Marca: LABCONCO

- Bomba de vaco para concentrador , Marca: LABCONCO
195 litros / minuto

28

115 VAC
50/60 Hz fase nica
7.2 amperios

- Shaker Forma Scientific

Reactivos
CLORURO DE METILENO
- Fisher Scientific D143-4
Calidad HPLC
- Fisher Scientific D154-4
Calidad GC Resolv

HEXANO
- Fisher Scientific Clase 1B H302-4
Calidad HPLC grade

ACETONA
- Fisher Scientific Clase 1B H929-4
Calidad Optima
- Mallinckrodt Chemicals
Calidad AR

SULFATO DE SODIO ANHIDRO
- Fisher Scientific Calidad ACS
- Mallinckrodt Chemicals Calidad ACS

4.3.2 Anlisis

La tcnica estndar para deteccin de los pesticidas organofosforados y
organoclorados es a travs de la cromatografa gaseosa. En cromatografa

29

gaseosa la muestra debe ser sometida a una serie de preparaciones previas a la
inyeccin en el cromatgrafo, estas son: extraccin y limpieza.

La extraccin depende de la matriz en la cual se encuentran las muestras, para
muestras acuosas en particular la extraccin de compuestos orgnicos
semivoltiles se realiza por extraccin lquido-lquido (mtodo EPA 3510) por
embudos de separacin. En el Anexo 4 se muestra la marcha de extraccin
realizada en el Laboratorio de Calidad Ambiental.

Para las muestras slidas el proceso de extraccin que puede ser utilizado es la
extraccin Soxhlet (mtodo EPA 3540). Debido a ciertas limitaciones de equipo
fue necesario modificar dicho mtodo, y con el fin de comprobar que la
modificacin hecha producira resultados equivalentes al procedimiento original, se
realizaron experimentos una vez modificado el mtodo, los resultados se muestran
en el apartado 5.2.1 Pruebas preliminares. El procedimiento para la extraccin de
muestras slidas se muestra en el Anexo 5.

La deteccin de organoclorados se realiz en el laboratorio de Calidad Ambiental
de la UCA, utilizando el mtodo denominado organoclorados 4 el cual tiene las
siguientes especificaciones:

- Horno: 80C (1 min.), 20C/min. hasta 140C (2 min.), 4C/min. hasta 250 (10
min.).
- Detector: ECD, 325 C, 1 nA
- Gas portador: N
2
ultra alta pureza, flujo de columna 2 mL/min
- Inyeccin: 2 L, 10:1 split.

La deteccin de organofosforados no pudo realizarse en el laboratorio de la UCA
ya que los pesticidas no fueron detectados por el detector ECD, por lo tanto se
determinaron en el Laboratorio de Calidad Integral de FUSADES, bajo las
siguientes condiciones.

30

- Horno: 85 C/0.00 min, 30.0C/min 195 C/0.0 min, 5 C/min, 250 C/8.33 min.
Tiempo de corrida 23 min.
- Gas de Arrastre: Nitrgeno de Alta Pureza
- Inyector: 250 C. Inicialmente en modo Splitless, flujo total: 64.2 mL/min., flujo de
purga: 60.0 mL/min., 0.75 min. (Modo Split).
- Detector: FPD, 250 C, Make up 58.1 mL/min., Flujo de Hidrgeno: 75.0 mL/min.;
Flujo de Aire: 100 mL/min.

4.3.3 Control de calidad

Antes de realizar los anlisis se elabor una curva de calibracin utilizando la
tcnica de estndar interno, utilizando 5 puntos de la mezcla de pesticidas
organoclorados y organofosforados a 5 concentraciones diferentes.

Los estndares sustitutos utilizados son:
- Para compuestos organoclorados: pentacloronitrobenceno
- Para compuestos organofosforados: Mezcla de tributil fosfato y trifenil
fosfato.

Como medida de control de calidad el anlisis de las muestras se realiza en
duplicado y se inyecta cada muestra dos veces al cromatgrafo. Adems se
analizan junto a las muestras un blanco de laboratorio para verificar que no haya
contaminacin cruzada y una muestra fortificada para evaluar la recuperacin.

La tcnica de estndar interno se utiliz para cuantificar las muestras de agua y
camarones, las muestras de sedimentos no pudieron ser cuantificadas con esta
tcnica ya que al ser la matriz ms compleja algunas sustancias extradas no
permitan leer el estndar interno. Es por esto que para las muestras de
sedimentos se utiliz para su cuantificacin la tcnica de estndar externo.

31

5. Resultados
5.1 Plan de muestreo

Tomando en cuenta los criterios explicados anteriormente en la seccin 4.2
Trabajo de campo, se realiz el mapa de muestreo que se muestra en la Figura 6
y se defini el plan de muestreo que se muestra en la Tabla 7 , en el Anexo 8
pueden verse fotos de la ejecucin de dicho plan.

Figura 6. Mapa de puntos de muestreo

32

Tabla 7. Plan de muestro
Cantn
Nombre
estanque
Tipo de
muestra
Numero de muestras
Ubicacin del
punto
de muestreo
mapa
Agua baha 3 muestras en poca seca y lluviosa 5
2 muestras a lo largo de la baha en
poca seca y lluviosa
6 y 7
Agua brazos
1 muestra justo a la entrada de la
piscina en poca seca y lluviosa
8
31 de
Diciembre

Sedimento
4 muestras en poca seca y poca
lluviosa
6 y 7
Agua baha
3
muestras sobre el punto en poca
seca y lluviosa
2
2 muestras a lo largo en poca seca
y lluviosa
3
Agua de
brazos 1 muestra justo a la entrada de la
piscina en poca seca y lluviosa
4
Muestras en sitios circundantes a los
estanques de cultivo de camarn
Los
Mancornados
Sedimento
4 en poca seca y 4 en poca
lluviosa
3
Agua
3 muestras en poca seca y en
poca lluviosa
Penaeus sp.
2 muestras en poca seca y dos en
poca lluviosa
Suelo 3 muestras en vaciado de estanque
31 de
Diciembre
Sedimento 3 muestras en vaciado de estanque
9
Agua
3 en poca seca y 3 en poca
lluviosa
Penaeus sp.
2 muestras en poca seca y dos en
poca lluviosa
San
Hilario

Muestras en los estanques de cultivo de
camarn
Los
Mancornados
1

33

Cantn
Nombre
estanque
Tipo de
muestra
Numero de muestras
Ubicacin del
punto
de muestreo
mapa
Agua baha
3 muestras en poca seca y en poca
lluviosa
10
1 muestra en la desembocadura del Ro
San Lzaro en poca seca y poca
lluviosa.

11
1 muestras en la desembocadura del ro El
Espino en poca seca y lluviosa

12
Agua brazos
1 muestra justo a la entrada donde se
toma agua para la piscina en poca seca y
lluviosa
13
Muestras en sitios circundantes a
los estanques de cultivo de
camarn
La Carranza
Sedimento
4 muestras en poca seca y 4 en poca
lluviosa
11 y 12
Agua 3 en poca seca y 3 en poca lluviosa
Penaeus sp.
2 muestras en poca seca y dos en poca
lluviosa
Sisiguayo

Muestras en los estanques de
cultivo de camarn
La Carranza
14

34
5.2 Medicin de parmetros en puntos de muestreo

Durante la toma de muestra en los puntos seleccionados se midieron diferentes
parmetros en el sitio con equipo porttil, tales como: pH, Oxgeno Disuelto,
conductividad, los datos obtenidos en cada punto se muestran en la Tabla 8,
Tabla 9, Tabla 10 y Tabla 11.

A continuacin se detalla las especificaciones tcnicas del equipo de medicin
utilizado.

- Medidor de oxigeno porttil
Marca OAKTON DO 300
Con compensacin de temperatura y de salinidad

- Medidor de conductivita porttil
Marca WTW
Con compensacin de temperatura.

- Tiras de papel
Marca Hydrion pH 1-12

Tabla 8 Parmetros medidos en puntos de muestreo de agua en poca seca
Parmetros de medicin
Tipo de
Muestra
Identificacin
del punto
Lugar
Hora
pH Oxigeno
Disuelto
Conductivi
dad

TC

Observaciones
Agua
18-12-07
1 Estanque
Coop.
Los Mancor
nados
10:56
a.m.
8.0 0.45
mg/L
4.9
S/cm

27.9 47 das de
sembrado
Agua
28-03-08
2

Baha
Coop. Los
Mancorna
dos
8:30
a.m.
7:0 0.09
mg/L
Interfere-
ncias
29.5 Bajamar
Agua
28-03-08
3

Brazo
Baha
Coop. Los
Mancorna
8:15
a.m.
7.0 0.14
mg/L
53.4
mS/cm
29.4 Bajamar

35
dos
Agua
28-03-08
4 Brazo
Baha
Coop. Los
Mancorna
dos
8:00
a.m.
7.0 0.10
mg/L
53.7
mS/cm
29.0 Bajamar
Agua
26-02-08
5

Baha
31 de
Diciembre
Sisiguayo
9:15
a.m.
8.0 0.10
mg/L
9.36
S/cm
29.2 Bajamar
Agua
29-03-08
6 Brazo
Bahia
Coop. 31
Diciembre
Sisiguayo
2.00
p.m.
7.0
Inter-
ferencias
50.2
mS/cm
30.6 Pleamar
Agua
3-12-07
7 Brazo de
Baha
Coop. 31
Diciembre
Sisiguayo
9.40
a.m.
7.0 No se
llevo el
equipo
No se
llevo el
equipo
No se
llevo el
equipo
Bajamar

Viento fuerte

Agua
3-12-07
8 Entrada al
estanque
brazo de
Baha
Coop. 31
Diciembre
Sisiguayo
9:30
a.m.
7.0 No se
llevo el
equipo
No se
llevo el
equipo
No se
llevo el
equipo
Bajamar

Viento fuerte
Agua
18-12-07
9 Estanque
Coop.
Las
Mujeres
9.00
a.m.
8.0 1,86
mg/L
4.4
S/cm
24.8 A una semana de
siembra de
camarn
Agua
26-02-08
10 Baha La
Carranza
San
Hilario
9:25
a.m.
8.0 0,09
mg/L
Interfe-
rencias
29.0 Bajamar
El conductivmetro
fall

Agua
12-12-07
11 Brazo
Bahia
San
Hilario
11:07
a.m.
8.0 0,20
mg/L
4.9
S/cm
29 Bajamar
Agua
12-12-07
12 Brazo
Bahia
San
Hilario
10:35
a.m.
8.0 0,28
mg/L
4.9
S/cm
27.7 Bajamar
Agua
12-12-07
13 Justo
entrada de
estanque
Brazo
Bahia
San
Hilario
11:20
a.m.
8.0 0,11
mg/L
3.6
S/cm
26.7 Bajamar
Agua
12-12-07
14 Estanque
El Torno
San
Hilario

2:00
p.m.

8.0

0,86
mg/L
Interfe-
rencias

27.5
Los camarones
estaban en fase de
cosecha

36
Tabla 9 Parmetros medidos en puntos de muestreo de agua en poca lluviosa
Tipo de
Muestra
Identificacin
del punto
Lugar

Hora pH
Oxigeno
Disuelto
Conductivi
dad

TC

Observaciones
Agua
23-07-08
1 Estanque
Coop.
Los Mancor
nados
9:20
a.m.
7.0 5.93
mg/L
7.44
mS/cm

29.4
Agua
23-07-08
2 Baha
Coop. Los
Mancorna
dos
8:12
a.m.
7:0 6.14
mg/L
35.4
mS/cm
29.4
Agua
23-07-08
3 Brazo
Baha
Coop. Los
Mancorna
dos
8:31
a.m.
7.0 4.89
mg/L
34.7
mS/cm
29.2
Agua
23-07-08
4 Brazo
Baha
Coop. Los
Mancorna
dos
7:45
a.m.
7.0 5.52
mg/L
34.9
mS/cm
29.4
Agua
20-06-08
5 Baha
31 de
Diciembre
Sisiguayo
11:37
a.m.
7.0 5.73
mg/L
36.9
mS/cm
31.5
Agua
20-06-08
6 Brazo
Bahia
Sisiguayo
11:21
a.m.
7.0 2.99
mg/L
34
mS/cm
31.4 Pleamar
Agua
20-06-08
7 Brazo de
Baha
Coop. 31
Diciembre
Sisiguayo
10:57
a.m.
7.0 1.51
mg/L
28.3
S/cm
31.0 Pleamar
Agua
20-06-08
8 Entrada al
estanque
brazo de
Baha
Coop. 31
Diciembre
Sisiguayo
10:34
a.m.
7.0 0.95
mg/L
13.81
mS/cm
29.4 Pleamar
Agua
18-12-07
9 Estanque
Coop.
Las
Mujeres
10:55
a.m.
11.73
mg/L
21.8
mS/cm
34.5C
Agua
20-06-08
10 Baha La
Carranza
San
Hilario
11:50
a.m.
7.0 3.76
mg/L
36
mS/cm
31.3
Agua
20-06-08
11 Brazo
Bahia
San
Hilario

12:07
a.m.
8.0 3.28
mg/L
33.2
mS/cm
31.9 Justo entrada ro
San Lzaro
Agua 12 Brazo 11:30 8.0 3.64 20.1 32.1 Justo en la

37
15-08-08 Bahia
San
Hilario
a.m. mg/L mS/cm

desembocadura
del ro El Calabozo
Agua
20-06-08
13 Justo
entrada de
estanque
Brazo
Bahia
San
Hilario
12:29
a.m.
8.0 3.51
mg/L
19.5
mS/cm
26.7 Bajamar
Agua
30-06-08
14 Estanque
El Torno
San
Hilario
4:40
p.m.
8.0 14.68
mg/L
40.6
mS/cm

32.2
Los camarones
estaban en fase de
cosecha, acaban
de hacer recambio
de agua, la noche
anterior llovi
fuertemente

Tabla 10 Parmetros medidos en puntos de muestreo de sedimentos en poca seca
Tipo de
Muestra
Identificacin
del punto
Lugar

Hora pH
Oxigeno
Disuelto
Conductivi
dad

TC

Observaciones
Sed
18-12-
07
1 Estanque
Coop.
Los
Mancor
nados
10:56
a.m.
8.0 0,45
mg/L
4.9
S/cm

27.9 47 das de
sembrado
Sed
28-03-
08
3

Brazo
Baha
Coop. Los
Mancorna
dos
8:15
a.m.
7.0 0.14
mg/L
53.4
mS/cm
29.4 Bajamar
Sed
29-03-
08
6 Brazo
Bahia
Coop. 31
Diciembre
Sisiguayo
2.00
p.m.
7.0
Interfe
-rencias
50.2
mS/cm
30.6 Pleamar
Sed
3-12-07
7 Brazo de
Baha
Coop. 31
Diciembre
Sisiguayo
9.40
a.m.
7.0 No se
llevo el
equipo
No se
llevo el
equipo
No se
llevo el
equipo
Bajamar
Estaba haciendo
viento fuerte

Sed
18-12-
07
9 Estanque
Coop.
Las
Mujeres
9.00
a.m.
8.0 0,61
mg/L
4.4
S/cm
24.8 A una semana de
siembra de
camarn
Sed
12-12-
07
11 Brazo
Bahia
San
Hilario
11:07
a.m.
8.0 0,21
mg/L
4.9
S/cm
Bajamar
Sed
12-12-
07
12 Brazo
Bahia
San
Hilario
10:35
a.m.
8.0 0,28
mg/L
4.9
S/cm
27.7 Bajamar

38
Sed
12-12-
07
14 Estanque
El Torno
San
Hilario

2:00
p.m.

8.0

0,87
mg/L
Inter-
ferencias

27.5
Los camarones
estaban en fase de
cosecha

Tabla 11 Parmetros medidos en puntos de muestreo de sedimentos en poca lluviosa

Tipo de
Muestra
Identificaci
n
del punto
Lugar
Hora pH Oxigeno
Disuelto
Conducti
vidad

TC

Observaciones
Sed
23-07-
08
1 Estanque
Coop.
Los
Mancor
nados
9:20
a.m.
7.0 5.93
mg/L
7.44
mS/cm

29.4
Sed
23-07-
08
3

Brazo
Baha
Coop. Los
Mancorna
dos
8:31
a.m.
7.0 4.89
mg/L
34.7
mS/cm
29.2
Sed
22-09-
08
6 Brazo
Bahia
Sisiguayo
9:20
a.m.
6.5 3,56
mg/L
32.8
mS/cm
29.9
Sed
22-09-
08
7 Brazo de
Baha
Coop. 31
Diciembre
Sisiguayo
9:45
a.m.
6.5 7,32
mg/L
44.3
mS/cm
29.4 Pleamar
Sed
22-09-
08
11 Brazo
Bahia
San
Hilario
10:05
a.m.
6.0 5,68
mg/L
40.3
mS/cm
29 Justo entrada ro
San Lzaro
Sed
22-09-
08
12 Brazo
Bahia
San
Hilario
11:45 6.0 5,6
mg/L
20.8
mS/cm
27.5
Sed
20-06-
08
14 Estanque
El Torno
4:42
p.m.
7-8 14.6
mg/L
40.6
mS/cm
32.2 La noche anterior
hubo lluvia fuerte,
se acababa de
hacer un recambio
de agua al
estanque.

39
5.3 Trabajo Experimental

5.3.1 Tiempos de retencin

Para poder determinar la especificidad del mtodo, primero se determinaron los
tiempos de retencin de cada pesticida, inyectando los estndares individuales de
cada pesticida cinco veces. Luego se calcul el coeficiente de variacin de los
tiempos de retencin para crear una ventana o intervalo de tiempo de retencin,
los resultados se muestran en Tabla 12 y Tabla 13.

Estos tiempos de retencin se introdujeron al programa del cromatgrafo y luego
se realizaron pruebas con mezclas de pesticidas a diferentes concentraciones
para verificar que fueran identificados estando mezclados entre s.

Pesticidas organoclorados

Tabla 12. Tiempo promedio de pesticidas organoclorados

Pesticida
Tiempo de
retencin
Ventana*
Lindano 15.202 0.03356
Estndar sustituto 15.436 0.04487
Heptacloro 18.440 0.1375
Dieldrn 24.644 0.132
DDE 24.773 0.1237
Endrn 25.584 0.1325
DDD 26.627 0.1191
DDT 28.286 0.124
*ventana est definida como +/- 3 Coeficientes de Variacin (CV)

40
Pesticidas organofosforados

Tabla 13. Tiempos de retencin promedio de pesticidas fosforados
Pesticida
Tiempo de
retencin (min.)
Ventana*

Etroprofos 10,119 0,028
Estndar
sustituto 9,826 0,025
Paration 16,219 0,032
Metil Paration 14,518 0,026
Terbufos 12,396 0,075
Phoxim 4,619 0,172
*ventana est definida como +/- 3 Coeficientes de Variacin (CV)

5.3.2 Curvas de Calibracin

Cuantificacin Estndar Interno

Para construir la curva de calibracin de los compuestos organoclorados se
prepararon soluciones de mezclas de los siguientes pesticidas:
Hexaclorobenceno, Lindano, Endrin, Dieldrn, DDD, DDE, DDT, Heptacloro y
Estndar Sustituto. Las soluciones se prepararon a 25 ppb, 50 ppb, 100 ppb, 150
ppb, 250 ppb y 400 ppb.

Para elaborar la curva de calibracin de los compuestos organofosforados se
prepararon soluciones de mezclas de los siguientes pesticidas: Phoxim,
Metamidofos, Etroprofos, Terbufos, Metil Paratin, Paratin y Estndar Sustituto.
Se prepararon soluciones de las siguientes concentraciones 50 ppb, 100 ppb,
200ppb, 250 ppb y 300 ppb.

Para cada pesticida se realiz el anlisis de regresin lineal para determinar la
linealidad del mtodo, as como para generar la ecuacin de la curva de
calibracin:
y= mx + b,

41

En donde:
y: relacin de reas analito-estndar sustituto
x: relacin de masas analito-estndar sustituto
m: pendiente
b: intercepto

Los resultados obtenidos del anlisis de regresin lineal para los pesticidas
organoclorados y organofosforados se presentan en la Tabla 14, el anlisis se
realiz por medio del programa Excel y el procedimiento se detalla en Anexo 10.

Tabla 14. Resultados de curvas de calibracin estndar interno para pesticidas
organoclorados y organofosforados
Pesticida Curva de Calibracin
Coeficiente de
Correlacin
Pearson (r
2
)
Lindano Y= 1.045x + 0.092 0.938
Heptacloro Y= 0.877x + 0.132 0.931
Dieldrn Y= 0.815x + 0.102 0.987
DDE Y= 0.974x + 0.070 0.992
Endrn Y= 0.768x + 0.092 0.987
DDD Y= 0.641x + 0.063 0.991
DDT Y= 0.731x + 0.067 0.990
Etroprofos Y= 1.305x -0.087 0.995
Metil paratin Y= 0.812x-0.081 0.995
Paration Y= 0.935x -0.062 0.997

La cuantificacin con estndar interno no fue posible con todas las muestras. Las
muestras de suelo y sedimento presentaban interferencias cuyo principal problema
fue que una de ellas coincida en tiempo con el estndar interno lo que
imposibilitaba su cuantificacin. La eliminacin de las interferencias no fue posible
as que se opt por cuantificar dichas muestras por la tcnica de estndar externo.
Por lo tanto se procedi a calcular las curvas de calibracin para esta tcnica.

42
Cuantificacin con estndar externo

Para construir la curva de calibracin de los compuestos organoclorados se
prepararon soluciones de mezclas de los siguientes pesticidas:
Hexaclorobenceno, Lindano, Endrin, Dieldrn, DDD, DDE, DDT, Heptacloro. Las
soluciones se prepararon a 25 ppb, 50 ppb, 100 ppb, 150 ppb, 250 ppb y 400 ppb.

Para cada pesticida se realiz el anlisis de regresin lineal para determinar la
linealidad del mtodo, as como para generar la ecuacin de la curva de
calibracin:
y= mx + b,
En donde:
y: rea analito
x: Concentracin analito
m: pendiente
b: intercepto

Los resultados obtenidos del anlisis de regresin lineal para los pesticidas
organoclorados y organofosforados se presentan en la Tabla 15, el anlisis se
realiz por medio del programa Excel.

Tabla 15. Resultados de curvas de calibracin estndar externo para pesticidas
organoclorados y organofosforados

Pesticida Curva de Calibracin
Coeficiente de
Correlacin
Pearson (r
2
)
Lindano Y= 1983.6x - 1160.3 0.997
Heptacloro Y= 1637.8x + 19309 0.990
Dieldrn Y= 1567.8 + 9921.3 0.999
DDE Y= 1865.5x - 7424 0.997
Endrn Y= 1475.7x + 7895.9 0.998
DDD Y= 1229x + 1799.8 0.998
DDT Y= 1400x 224.6 0.997

43
5.3.3 Marchas analticas

Anlisis de Aguas

Para el anlisis de aguas se realiz la validacin del mtodo detallado en el
Anexo 9, en dicho anexo se presenta el protocolo de validacin y los resultados
de la validacin se muestran en el Anexo 10.

Los resultados ms significativos de la validacin se resumen en la Tabla 16:

Tabla 16 Resultados relevantes de la validacin
Prueba Pesticidas organoclorados Pesticidas organofosforados
Lmite de deteccin del
mtodo
0,016 ppb 0,016 ppb
Porcentaje de recuperacin 60-85% 70-125%
Linealidad de analitos >0.98 >0.98

Anlisis de suelos y sedimentos

Como se explic en el apartado 4.3.2 Anlisis fue necesario modificar el mtodo
de extraccin de sedimentos y suelos. A continuacin se presenta la modificacin
realizada al mtodo y las pruebas hechas para verificar que funcionase.

El procedimiento de la EPA para extraccin de suelos es el siguiente:
Agregar 10 g de muestra de sedimentos en un recipiente de vidrio.
Aadir Estndar sustituto a la muestra.
Aadir sulfato de sodio granulado.
Transferir muestra a dedal de extraccin y colocar en equipo de extraccin
Sohxlet.
En el recipiente de recoleccin de solvente colocar cobre granular con el fin
de eliminar sulfuros.

44
En el laboratorio de calidad ambiental no se cuentan con suficientes equipos de
extraccin Sohxlet por tanto este equipo fue sustituido por un Shaker. El mtodo
modificado es el siguiente:
En un erlenmeyer de 250 mL se agregan 10 g de muestra
Aadir sulfato de sodio anhidro
Aadir cobre granular
Mezclar bien
Aadir 100 mL de cloruro de metileno
Se coloca el erlenmeyer en el shaker
Se hace funcionar el shaker a una velocidad de 125 rpm por cuatro horas
Una vez cumplidas las cuatro horas se remueve el solvente del erlenmeyer,
a este solvente se le llama primer lavado, aadir 100 mL de cloruro de
metileno al erlenmeyer. Colocar erlenmeyer en shaker y hacerlo funcionar
por 4 horas ms
Repetir el paso anterior, hasta obtener tres lavados.

Es evidente que el grado de extraccin de los pesticidas depender de cuanto
tiempo la muestra permanezca en contacto con el solvente y de cuantos lavados
sean aplicados a la muestra. El tiempo de cada lavado se predetermin en cuatro
horas. Para evaluar el nmero de lavados ptimos se realizaron las siguientes
pruebas.

Se tomaron seis muestras del punto 3 y se prepararon segn el mtodo
modificado, agregndose 750 L de mezcla de pesticidas organoclorados de 400
ppb. Las muestras se sometieron a 1, 2 y 3 lavados, obtenindose los
cromatogramas que se muestran en el Anexo 7 y los porcentajes de recuperacin
que se muestran en la Tabla 17.

45
Tabla 17 Porcentajes de recuperacin de extraccin de sedimentos con diferentes lavados

Recuperacin de Pesticidas en Sedimentos
Muestra Lindano Heptacloro DDE Endrin Dieldrn DDD DDT
Prueba Shaker 1
Lavados
86% 38,8% 43,5% 30,9% 31,8% 37,0% 50,2%
Prueba Shaker 2 lavados 74,2% 67,9% 69,7% 69,3% 64,8% 74,2% 71,9%
Prueba Shaker 3 lavados 88,8% 78,6% 79,3% 70,4% 77,6% 81,7% 89,2%

Como se pueden observar en la Tabla 17 al aumentar la cantidad de lavados se
extrae ms de cada uno de los pesticidas. En el cromatograma de 3 lavados que
se muestra en la Figura 7, se observa adems que se obtienen tres picos de gran
intensidad en los minutos 9.9, 15.6 y 21.4.

Figura 6. Extraccin con 3 lavados.

Figura 7. Cromatograma de extraccin con 3 lavados

Minut es
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45
m
V
o
lt
s
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
3
7
7
5
1
6

1
.
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5
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1
2
3

2
.
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4
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0
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EC D
Ps h ak er 3L R 2
A re a
Na m e
Re t e n t i o n T i m e
9.7 min 15.6 min 21.4 min

46
Para determinar el origen de estos picos se realizaron tres lavados de cuatro
horas para cada etapa del anlisis, para poder identificar el origen de las
interferencias, para evaluar cada etapa se analiz lo siguiente:
Cobre con solvente
Solvente pasado por lana de vidrio
Solvente pasado por filtro de fibra de vidrio
Muestra sin fortificar

Los cromatogramas obtenidos de las pruebas se muestran en el Anexo 7.
nicamente en el cromatograma de la muestra sin fortificar que se muestra en la
Figura 8 aparecen los 3 picos, por lo tanto se concluye que estas sustancias
pertenecen a la muestra de sedimentos y no son interferencias incorporadas
durante el anlisis.

Figura 8. Cromatograma de extraccin de muestra sin fortificar
Minutes
0 5 10 15 20 25 30 35 40 45
m
V
o
l
t
s
0
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
10000
m
V
o
l
t
s
0
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
10000
6
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Area
Name
Retenti on Ti me
9.7
min
15.6
i
21.4

47
Los picos que aparecen cerca de los tiempos 9.7 y 21.4 min. no interfieren con los
pesticidas a analizar, sin embargo la interferencia que aparece a los 15.6 min. est
muy cerca del estndar sustituto e imposibilita la cuantificacin de las muestras.

Adems al hacer el anlisis de fosforados en el cromatgrafo de gases con
detector PFD, la seal de estas sustancias extradas de la matriz son mucho ms
intensas y imposibilitan la cuantificacin, ya que como puedo observarse en la
Figura 9, distorsionan la lnea base y cubren gran parte del cromatograma,
interfiriendo con las seales de los pesticidas de inters.

Figura 9 Cromatograma de anlisis de pesticidas organofosforados en sedimentos.

Interferencia

48
Debido a esta interferencia se consider necesario agregar un paso de limpieza al
protocolo de determinacin de pesticidas organoclorados y organofosforados en
sedimentos.

La tcnica seleccionada para la limpieza de los extractos de sedimento y suelo fue
la tcnica de exclusin por tamao a travs de un gel de nombre comercial
SEPHADEX, las columnas utilizadas se muestran en la Figura 8. El protocolo para
la implementacin de esta tcnica se muestra en el Anexo 11 y el protocolo de
limpieza en el Anexo 12.

Figura 8 Columnas de limpieza rellenas con gel SEPHADEX

Sin embargo al pasar las muestras por la fase de limpieza no se eliminaron las
interferencias en los cromatogramas de organoclorados, sin embargo esta etapa
permita la cuantificacin de organofosforados.

Para eliminar las interferencias se muestre una tercera vez los sedimentos
recolectando nicamente la parte superficial del sedimento, de esta forma no se
extraera la parte anxica del mismo que es la que se sospechaba poda introducir
las interferencias en el anlisis. En las Figura 9 y Figura 10 se muestran
cromatogramas de los muestreos 2 y 3.

49
Figura 9 Cromatograma muestreo II, punto 12

Figura 10 Cromatograma muestro III, punto 10

Minutes
0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 30.0 32.5 35.0 37.5 40.0 42.5 45.0
m
V
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lt
s
-20
0
20
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V
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2
.
2
8
7
ECD
Punto 1.2 S R1 MII
Name
Retenti on Ti me
Interferencias
Minutes
0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 30.0 32.5 35.0 37.5 40.0 42.5 45.0
m
V
o
lt
s
-50
0
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100
150
200
250
300
350
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m
V
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s
-50
0
50
100
150
200
250
300
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4
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6
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5
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6
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4
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3
1
7

3
8
.
2
1
0
ECD
Punto 10 S R1 MIII Sepha
Name
Retenti on Ti me
Interferencias

50
Como puede observarse las interferencias estn presentes an en los sedimentos
ms superficiales (capa superior de 3 cm.) por lo tanto muestrear nicamente la
parte superficial del sedimento no resolvi el problema, la interferencia es adems
de un tamao similar a las molculas de pesticida y por lo tanto la tcnica de
limpieza que se basa en separacin por tamaos no es efectiva. El principal
problema de las interferencias es como se ha explicado anteriormente que una de
ellas coincide en tiempo con el estndar interno lo que imposibilita la cuantificacin
de las muestras.

Se intent utilizar otra tcnica de limpieza basada en otro principio que no fuese la
separacin de tamaos, se solicit la colaboracin del laboratorio MAG-OIRSA ya
que ellos utilizan una tcnica basada en la separacin por adsorcin utilizando
columnas empacadas con el adsorbente de nombre comercial Florisil. Se llev una
muestra de sedimento al laboratorio donde se extrajo y limpi, los resultados
obtenidos se muestran en la Figura 11.

Figura 11 Muestra de sedimento sometida a limpieza con Florisil
Minutes
0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5 20.0 22.5 25.0 27.5 30.0 32.5 35.0 37.5 40.0 42.5 45.0
m
V
o
lt
s
0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100
m
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0
10
20
30
40
50
60
70
80
90
100

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d
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)

(
D
D
D
)

D
D
T

ECD
Punto14SHexAcetFl or i si l
Name

51
Como puede observarse en la Figura 11 las interferencias no son removidas por
el Florisil, de lo que podemos concluir que las interferencias encontradas en la
matriz sedimentos y suelos son de tamao y polaridad similar a los pesticidas
organoclorados y por esta razn es difcil removerlos.

Para determinar la naturaleza de dichas interferencias se seleccionaron 9
muestras de sedimento, cuyos extractos fueron enviados el Laboratorio de
Cromatografa del Instituto Qumico de Sarria en Barcelona, Espaa. Las
muestras fueron analizadas por Cromatografa de Gases con Espectrometra de
Masas (GC-MSD), los resultados de estos anlisis se muestran en el Anexo 13.

Como alternativa a la cuantificacin se utilizar la tcnica de estndar externo que
no requiere el estndar sustituto o interno para la cuantificacin.

Anlisis de camarones

El anlisis de camarones se realiz con el mtodo de extraccin que se presenta
en el Anexo 6 y el mtodo de limpieza que se muestra en el Anexo 12. En las
primeras pruebas se realiz la calibracin de la columna de limpieza el
procedimiento se presenta en el Anexo 11.

Los resultados del anlisis de camarones se muestran en la Figura 12, donde se
puede observar que al extraer los pesticidas se extraen otras sustancias, como
grasa y que al pasar el extracto por la columna de cromatografa de exclusin los
pesticidas viajan al mismo tiempo que dichas interferencias, por lo que es
imposible su cuantificacin.

52
Figura 12. Cromatograma de anlisis de camarones luego de pasar por la columna de
limpieza

Se realizaron pruebas de extraccin de camarones sin caparazn, ya que los
pesticidas se acumulan en el tejido, para evaluar si de esta forma se eliminan
dichas interferencias. Adems se cambi el solvente de Cloruro de Metileno a una
mezcla Acetona:Hexano 1:1, al extraer bajo estas condiciones se obtuvo el
cromatograma que se muestra en la Figura 13.

Figura 13. Extraccin de camarn (Penaeus sp) sin caparazn y utilizando solvente Acetona:
Hexano 1:1

Como puede observarse en la Figura 13 las interferencias se han eliminado por lo
que los anlisis se realizaron sin caparazn y utilizando el solvente Acetona:

53
Hexano 1:1. Los porcentajes de recuperacin se muestran en la Tabla 18 y se
encuentran dentro del rango aceptable para este tipo de anlisis.

Tabla 18. Porcentajes de recuperacin para anlisis de organoclorados en camarones

Porcentajes de recuperacin

Lindano Heptacloro Dieldrn DDE Endrin DDD DDT

Promedio

65.3% 84.9% 56.6% 60% 62% 72.7% 33%

A parte de las muestras de camarn (Penaeus sp) recolectadas en los estanques
se muestrearon camarones en el brazo de la Baha donde est ubicados lo puntos
de muestreo 5, 6 y 7. Se obtuvieron muestras de camarones silvestres de este
sitio, se pesaron y se analizaron 2 muestras de pesos similares. Se pudo observar
que el tamao de los camarones silvestres es mucho ms grande que el se logra
en los estanques de cultivo, los camarones recolectados tenan pesos entre 14 g
hasta los 35 gramos (Figura 14).

Figura 14. Camarones silvestres muestreados en un brazo de la Baha de Jiquilisco

54
5.4 Resultado de anlisis de pesticidas

Los resultados de los anlisis de agua para poca seca (muestreo I) y para poca
lluviosa (muestreo II) se muestran en la Tabla 19 para organoclorados y
organofosforados. Los resultados ms relevantes de la matriz agua se resumen en
la Figura 15.

En la Tabla 20 se muestran los resultados del muestreo de sedimentos en poca
seca y poca lluviosa, en la Tabla 21 los resultados del muestreo de sedimentos y
suelos dentro de los estanques y finalmente en la Tabla 22 se muestran los
resultados del muestreo de camarones. Los resultados ms relevantes para
sedimentos se resumen en la Figura 16 y Figura 17.

55
Tabla 19. Resultados de anlisis de pesticidas organoclorados y organofosforados en muestreo I y II de aguas, concentracin en
ppb
ND: No detectado
ConcentracionesdePesticidasencontradasenmuestrasdeAguaduranteMuestreoIppb(ng/ml)
Muestra Lindano Heptaclor DDE Endrin Dieldrn DDD DDT MetilParation Paration Etroprofos
Estanques
ElTorno
Punto14,1Replica1 ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND
LasMujeres
LosMancornados
AguadelosBrazosylaBahia
Punto2Replica1 ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND

56
Punto5,1Replica1 ND ND ND ND 0,085 ND ND ND ND ND
Punto5,2Replica1 ND ND ND ND <LCM 0,086 ND ND ND ND
Punto5,2Replica2 ND ND ND ND <LCM <LCM ND ND ND ND
Punto5,3Replica2 ND ND ND ND <LCM ND ND ND ND ND
Punto6Replica1 ND ND ND ND <LCM ND ND ND ND ND
Punto6Replica2 ND ND ND ND <LCM ND ND ND ND ND

ResultadoscorregidosporelsesgoND:
NODETECTADO
LCM:lmitedecuantificacin
<LCMElvalordetectadoenlamuestraenmayorqueellimitededeteccindelmtodo0,016ppbperoinferioralLimitedecuantificacin0,083ppb

57
ConcentracionesdePesticidasencontradasenmuestrasdeaguaduranteMuestreoIIppb(ng/ml)
Muestra Lindano Heptaclor DDE Endrin Dieldrin DDD DDT Metil
Paration
Paration Etroprofos
Estanques
ElTorno
LasMujeres
LosMancornados
AguadelosBrazosylaBahia

58
Punto7,2Replica1 ND ND ND ND ND ND <LCM ND ND ND
Resultadoscorregidosporelsesgo
ND:NODETECTADO

<LCMElvalordetectadoenlamuestraenmayorqueellimitededeteccindelmtodo0,016ppbperoinferioralLimitedecuantificacinparaDDT0,116ppb

59
Tabla 20 Resultados de anlisis de pesticidas organoclorados y organofosforados en muestreo I y II de sedimentos,
concentracin en ppb
ND: No detectado

ResultadosMuestreoIsedimentosppb(ng/g)
Muestra Lindano Heptaclor DDE Endrin Dieldrin DDD DDT MetilParatin Paration Etroprofos
Punto3,2Replica1 ND ND 3,93 ND ND ND ND ND ND ND
Punto6,2Replica2 <LCM ND 3,97 ND ND ND ND ND ND ND
Punto7,1Replica2 ND <LCM 4,99 ND ND ND ND ND ND ND
Punto7,2Replica1 <LCM ND ND ND ND ND ND ND ND ND
Punto12,2Replica1 ND ND 30,97 ND ND ND ND ND ND 2,59

ND:NODETECTADO

<LCMElvalordetectadoenlamuestraenmayorqueellimitededeteccindelmtodo3,75ppbperoinferioralLimitedecuantificacin
LCMLindano30ppb
LCMHeptaclor46ppb

60
ResultadosMuestreoIIsedimentosppb(ng/g)
Punto7,2Replica2 ND <LCM ND ND ND ND ND ND ND ND
Punto11,1Replica2 ND ND 10,27 ND ND 188,76 <LCM ND ND ND
Punto11,2Replica1 ND <LCM 9,34 ND ND ND <LCM ND ND ND
Punto12,1Replica1 ND <LCM 16,97 ND ND ND <LCM ND ND ND
Punto12,2Replica1 ND ND 21,32 ND ND ND <LCM ND ND ND
Punto5Replica1 ND ND 5,51 <LCM ND ND ND ND ND ND
Punto5Replica2 ND ND 3,81 ND ND ND ND ND ND ND

ND:NODETECTADO

<LCMElvalordetectadoenlamuestraenmayorqueellimitededeteccindelmtodo3,75ppbperoinferioralLimitedecuantificacin
LCMHeptaclor46.6ppb
LCMEndrin19,8ppb
LCMDDT30ppb

61
Tabla 21 Resultados de anlisis de pesticidas organoclorados y organofosforados en muestreo de sedimentos y suelo dentro de
los estanques de culti vo de camarn (Penaeus sp), concentracin en ppb
ND: No detectado

Muestreodesueloysedimentosenestanquesdecultivodecamarn

Sedimento(5cm)
ElTorno
Suelo(20cm)
Punto14,3Replica1 11,69 ND ND ND ND ND ND ND ND ND
Punto14,3Replica2 ND ND 6,10 ND ND ND <LCM ND ND 41,71

LasMujeres
Sedimento(5cm)
Suelo(20cm)

62
Punto9,2Replica1 ND ND 9,28 ND ND ND <LCM ND ND ND
Punto9,2Replica2 <LCM <LCM 7,98 <LCM <LCM <LCM <LCM ND ND ND

LosMancornados
Sedimento(5cm)
Punto1,3Replica2 ND <LCM 4,86 ND ND ND <LCM 8,25 12,68 10,98
Suelo(20cm)
Punto1,2Replica1 ND <LCM 19,61 <LCM <LCM <LCM <LCM ND ND ND
Punto1,2Replica2 ND <LCM 9,01 <LCM <LCM <LCM <LCM ND ND ND

ND:NODETECTADO

LCMlmitedecuantificacin
<LCMElvalordetectadoenlamuestraenmayorqueellimitededeteccindelmtodo(3,75ppb)peroinferioralLimitedecuantificacin
LCMHeptaclor46.6ppb
LCMEndrin19,8ppb
LCMDDT30ppb
LCMLindano30ppb
LCMDieldrin18.7ppb

63
Tabla 22 Resultados de anlisis de pesticidas organoclorados y organofosforados en de camarones, concentracin en ppb
ND: No detectado

CuantificacinCamaronesng/g(ppb)
Muestras Lindano Heptaclor DDE Endrin Dieldrin DDD DDT Etroprofos
Metil
Paration Paration
EstanqueElTorno
M2R1ElTorno ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND
EstanqueLos
Mancornados
M1R1LM ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND
Estanque31deDiciembre
M1R131Dic ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND
MuestrasbrazoSan
Hilario
M1(15gramos) ND ND ND ND ND ND ND ND ND ND
M2(15gramos) ND ND ND ND ND ND ND 21,27 ND 10,97

ND:NODETECTADO

64

Figura 15 Resultados relevantes muestreo de Agua poca lluviosa

65

Figura 16 Resultados relevantes muestreo sedimentos poca seca

66

Figura 17 Resultados relevantes muestreo sedimentos poca lluviosa

67
5.5 Anlisis de Resultados

Agua

En el muestreo de aguas no se detecta presencia de pesticidas organoclorados y
organofosforados en las aguas de los estanques de cultivo de camarn (Penaeus
sp.), tanto en la poca seca como en la lluviosa.

En el muestreo de aguas circundantes a los estanques se observaron en el agua
concentraciones de Dieldrn en todas las replicas de los puntos de muestreo 5, 6 y
10, la concentracin oscila entre 0,085 ng/ml (ppb) a 0,182 ng/ml (ppb). Este
hallazgo se dio nicamente en el muestreo de poca seca ya que en el muestreo
de poca lluviosa no se detectaron residuos de pesticidas en ninguna de las
muestras. El Dieldrn fue uno de los pesticidas utilizados en el cultivo de algodn,
el Aldrn, otro pesticida utilizado en el cultivo de algodn, se degrada rpidamente
a Dieldrn en el ambiente, se adhiere al suelo y se degrada muy lentamente.
Segn el Ambient Water Quality Criteria for Aquatic Organism de la Agencia de
proteccin ambiental EPA, la mxima concentracin de Dieldrn en agua
superficial salada para la cual una comunidad acutica puede estar expuesta
indefinidamente sin que resulte en efectos inaceptables es 0,1194 ng/ml (Se
excede nicamente en una muestra del punto 10).

Al comparar con los estudios hechos en el 76 (Lpez) y en el 95 (Pacheco), un
punto de muestreo definido por ellos coincide con los puntos 5 y 10 de muestreo
de este estudio como muestra la Figura 15.

68

Figura 18 Estaciones de muestreo, Baha de Jiquilisco (Pacheco, 1995)

En el estudio de 1995 se observ la presencia de Dieldrn en el punto 1 y adems
se observ un aumento del mismo con respecto a 1976. Esto posiblemente se
deba a que el DDT se prohibi en 1980 y el Dieldrn en 1986 por lo tanto puede
ser que una vez prohibido el DDT, este fuera sustituido por el Dieldrn. Si se
grafica las concentraciones de pesticidas encontradas en el punto 1 en los aos
76 y 95 y las de los puntos 5 y 10 encontradas en este estudio se observa en
poca seca como muestra la Figura 19 una reduccin en el tiempo de la
concentracin DDT y Metil Paratin, una aumento del Dieldrn entre 1975 y 1993 y
adems se observa que las concentraciones de Dieldrn encontradas en la zona
en el estudio de 2007 son equivalentes a las encontradas en 1993.

Figura 19 Evolucin de concentracin de pesticidas en punto de muestreo 5
0
0,05
0,1
0,15
0,2
0,25
Nov. 1975 Nov. 1993 Dic.2007
Fechas de muestreo
C
o
n
c
e
n
t
r
a
c
i
n

p
p
b
Dieldrin
DDT
Metil Paration
Punto 1 La Llanta
coincide con
puntos 5 y 10 del
estudio

69
En poca lluviosa se observa (Figura 20) al comparar los 3 muestreos una
disminucin del DDT en el tiempo, un aumento de Dieldrn y Endrn entre 1976
y 1994, sin embargo en el 2007 en esta poca no se detectaron pesticidas en
la zona.

Figura 20 Evolucin de concentracin de pesticidas en punto de muestreo 5

Por otra parte, se detect 4-4DDD en una muestra del punto 5, el 4-4DDD se
utiliz como plaguicida pero adems es uno de los metabolitos del DDT cuando
este se degrada en el ambiente.

Sedimentos

Se muestrearon los sedimentos de las reas circundantes de los estanques
camarones encontrando en poca seca que en el 60% de las muestras (puntos 3,
6, 11, 12) hay presencia de DDE, en concentraciones que oscilan entre 3,93 ppb
hasta 30,97 ppb. El DDE es el principal metabolito del DDT y es muy persistente
en el medio ambiente y se adhiere muy fuertemente en el suelo.

Durante el muestreo en poca lluviosa se agregaron 2 puntos ms al muestreo de
sedimentos, el 5 y el 10, ya que los resultados de agua mostraban contaminacin
del agua en esa zona. Los resultados de los anlisis de estas muestras de
0
0,005
0,01
0,015
0,02
0,025
0,03
0,035
Mayo. 1976 Mayo. 1994 Junio.2008
Fechas muestreo
C
o
n
c
e
n
t
r
a
c
i
n

p
p
b
Dieldrin
Endrin
DDT

70
sedimentos revelan presencia de DDE en el punto 5, en concentraciones de 3,81-
5,51 ppb.

Al igual que en la poca seca en el 60% de las muestras (puntos 3, 6, 11, 12) hay
presencia de DDE en concentraciones que oscilan entre 3,75-21,32 ppb.

Adems en poca lluviosa se observ en los puntos 6, 11 y 12 presencia de
Heptacloro en los sedimentos en concentraciones inferiores al lmite de
cuantificacin establecido por el mtodo.

El 17% de las muestras, en puntos 11 y 12, mostraron presencia de residuos de
DDT en concentraciones por debajo del lmite de cuantificacin establecido por el
mtodo.

Sedimentos y suelos de los estanques

El muestreo del fondo de los estanques de cultivo de camarn se hizo a dos
niveles, los sedimentos constituidos por los 5 cm. de la capa superior del fondo del
estanque y los suelos que son capas ms profundas, aproximadamente 20 cm.
por debajo del sedimento.

Los sedimentos de los estanques (5 cm. de profundidad) no reflejaron presencia
de los plaguicidas organoclorados y organofosforados evaluados para ninguno de
los dos periodos establecidos en el muestreo. Sin embargo, en los suelos de los
estanques (20 cm. de profundidad) se identificaron Heptacloro, Endrn, Dieldrn,
DDD y DDT, en concentraciones inferiores al lmite de cuantificacin respectivo
por lo cual no se puede asegurar la cantidad en que se encuentran pero s se
puede confirmar su presencia. Pero s se encontr DDE en los suelos en valores
cuantificables: 3,85-19,61 ng/g.

71
En cerca del 95% de las muestras de sedimento de los estanques y de la baha al
extraer y limpiar los pesticidas se arrastraron junto a estos 3 interferencias, al
enviar 9 muestras al Instituto Qumico de Sarri en Barcelona donde se analizaron
con cromatografa de gases con espectrofotometra de masas, se revel que
dichas sustancias son: cyclic octaatomic sulfur (23.1 min.); un compuesto que
tiene una masa molecular de 292 (32.3 min.) y una sustancia de masa molecular
275.1 (33.5 min.) Estas dos ltimas no pudieron ser identificadas sus molculas
ya que no se encontraban en la librera de molculas del equipo. Como los pesos
moleculares de las sustancias son prximos a los pesos moleculares de los
pesticidas la tcnica de separacin por exclusin de tamao no es efectiva.

Camarones

Se analizaron 4 muestras de camarones de cada estanque y no se detect
presencia de pesticidas organoclorados ni organofosforados en el tejido del
mismo.

72
6. Conclusiones

El agua de los estanques no reflej presencia de ninguno de los pesticidas, sin
embargo en el agua circundante a los estanques se detect presencia de Dieldrn
en concentraciones de 0,085 a 0,182 ppb. El Dieldrn fue uno de los pesticidas
utilizados en el cultivo de algodn y su uso en la agricultura fue prohibido en 1986.

En el sedimento procedente de los estanques no se encontr ninguno de los diez
plaguicidas analizados. En el sedimento tomado en las zonas circundantes a los
estanques fueron encontrados tres de los diez plaguicidas, especficamente DDE,
Heptacloro y DDT, sin embargo los dos ltimos en concentraciones abajo de los
lmites de cuantificacin respectivos. No se encontraron parmetro de
comparacin respecto a los valores aceptables de dichas sustancias en
sedimentos. Esta nueva informacin quedara como referencia para futuras
evaluaciones en la zona.

En el suelo de los estanques (capa a 20 cm. de profundidad) se detectaron seis de
los diez plaguicidas evaluados, Heptacloro, DDE, Endrn, Dieldrn, DDD y DDT,
prcticamente todos en concentraciones inferiores al lmite de cuantificacin. El
estanque Los Mancornados fue el que present ms presencia de pesticidas
organoclorados, seguido del estanque de Las Mujeres y finalmente del Torno.

En el tejido de camarn (Penaeus sp.) de las muestras obtenidas en los estanques
objetos de estudio no se detect presencia de pesticidas organoclorados y
organofosforados.

Segn la informacin que proporcionan los espectros de masas, se observ que
las sustancias interferentes ms repetidas en las muestras de sedimentos son:
cyclic octaatomic sulfur (23.1 min.) observado prcticamente en todas las
muestras; el compuesto que tiene una masa molecular de 292 (32.3 min.) y la
sustancia de masa molecular 275.1 (33.5 min.). Estas dos ltimas no pudieron ser

73
identificadas sus molculas, debido a que la base de datos del equipo no las ubico
con ninguna de las referencias que tiene en su memoria. Estas tres sustancias
fueron arrastradas junto a los pesticidas en los procesos de extraccin y limpieza,
segn los mtodos aplicados y la tcnica de limpieza por exclusin de tamaos no
es eficiente pues los pesos moleculares son muy prximos.

En conclusin, principalmente en los sedimentos de la zona se encuentran an
evidencia de los compuestos organoclorados objeto de este estudio, aunque en
cantidades relativamente pequeas

74
7. Recomendaciones

Extender esta investigacin a otras reas de produccin de camarn (Penaeus
sp.) en la Baha de Jiquilisco, es muy importante caracterizar el contenido de
plaguicidas en torno a las zonas de cultivo de camarn debido que ste es un
producto de consumo humano y adems un producto con potencial de
exportacin.

Ampliar la investigacin a otras familias de plaguicidas utilizados en la actualidad
como carbamatos y piretroides para completar el estudio sobre el impacto de los
cultivos aledaos a la Baha de Jiquilisco sobre el ecosistema de la misma. As
mismo se recomienda investigar el efecto, sobre el ecosistema estuarino, de los
maduradores de caa de azcar utilizados en grandes cantidades en la zona.

Para dar seguimiento a los resultados de este estudio, realizar una evaluacin del
contenido de plaguicidas en bivalvos, en los puntos donde se ha detectado
presencia de pesticidas organoclorados en sedimentos (puntos 5, 6, 11 y 12), ya
que estos organismos son buenos indicadores para evaluar la penetracin de
estas sustancias en el medio ambiente.

Se recomienda en este tipo de estudios siempre incluir el anlisis de los
sedimentos dado que representan una matriz estable en el tiempo a diferencia del
agua cuya constante movimiento dificulta su anlisis en el tiempo. Sin embargo
esta matriz es muy compleja y como se ha mostrado en el estudio en la zona de la
Baha de Jiquilisco existen algunas sustancias difciles de remover que interfieren
con la cuantificacin de pesticidas organoclorados y organofosforados por lo tanto
se recomienda en esta matriz realizar cuantificacin por estndar externo.

En la ejecucin de este proyecto se enfrent la dificultad de las pocas condiciones
que ofrece el pas para la investigacin, por ejemplo la adquisicin de insumos y

75
equipo puede tardar entre 3 a 6 meses por lo que se recomienda tomar en cuenta
dicha dificultad en los cronogramas de las investigaciones.

76
Bibliografa

1. Pacheco, R. Residuos de Plaguicidas en agua, sedimento y organismos
acuticos en la baha de Jiquilisco. Universidad de El Salvador.1995.
2. Rodrguez, M. Diagnstico situacional del uso de DDT en los Programas de
Control de Vectores en El Salvador. Ministerio de Salud Pblica y
Asistencia social, Programa de Accin Integral (PAI).2001
3. MARN; Plan de Manejo del rea Natural Baha de Jiquilisco; San Salvador;
El Salvador; 2004
4. MARN/AECI; Complejo Baha de Jiquilisco. Propuesta de sitio Ramsar; San
Salvador; El Salvador; 2004
5. MARN; Diagnstico Lnea Base de condiciones biofsicas y
socioeconmicas del rea de Conservacin Jiquilisco y Jaltepeque.
Proyecto ECOSERVICIOS. Documento sin publicar. Disponible MARN; 2003
6. Hernndez-Rauda R., W.A. Lpez & M.Vsquez-Jandres; El cultivo del
camarn marino en la Baha de Jiquilisco, Usulutn, El Salvador; Instituto de
Ciencias del Mar y Limnologa, Facultad de Ciencias Naturales y
Matemtica, Universidad de El Salvador, 2006.
7. Hamilton D.J. et al; Regulatory limits for pesticide residues in water (IUPAC
Technical Report); Pure Appl.Chem.; Vol 75 N8; p.1123-1155; 2003
8. EPA; Waste-Hazard Waste-Test Methods, SW-846 On Line disponible en:
http://www.epa.gov/epawaste/hazard/testmethods/sw846/online/index.htm

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