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UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE

SAN MARCOS
FACULTAD DE QUIMCA, ING. QUIMICA E ING.
AGROINDUSTRIAL
E.A.P DE ING AGROINDUSTRIAL



DETERMINACION DE UN ESPECTRO DE ABSORCION


DOCENTE: Quim. Mara Anglica Rodrguez Best

MATERIA: Laboratorio de Anlisis Instrumental

ALUMNO:
Ramrez Chacn Erick
Paz Rojas Giancarlo
Escalante Alarcn Wilder

GRUPO: sbado de 1-5 pm.

determinacin de un espectro de absorcin practica #1

Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag1

INDICE


Resumen...2
Objetivos......3
Introduccin........ 4
Fundamento terico....... 5
Procedimiento experimental................14
Resultados y Clculos.....16
Anlisis y discusin de resultados.27
Recomendaciones...28
Conclusiones....29
Bibliografa...30
Anexo..31



determinacin de un espectro de absorcin practica #1

Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag2


RESUMEN



La espectrofotometra UV-visible es una tcnica analtica que permite determinar la
concentracin de un compuesto en solucin. Se basa en que las molculas absorben las
radiaciones electromagnticas y a su vez que la cantidad de luz absorbida depende de
forma lineal de la concentracin. Para hacer este tipo de medidas se emplea un
espectrofotmetro, en el que se puede seleccionar la longitud de onda de la luz que pasa
por una solucin y medir la cantidad de luz absorbida por la misma.
En esta prctica se darn a conocer las caractersticas generales y conceptos relacionados
con la espectrofotometra. A continuacin y tras la explicacin del funcionamiento del
espectrofotmetro se harn espectros de absorcin con el fin de determinar la longitud
de onda donde la muestra presenta la mxima absorcin.
























determinacin de un espectro de absorcin practica #1

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OBJETIVOS

Obtener el espectro de absorcin del colorante E-163determinar el aspecto que presenta
este y determinar su
Max
.

Nuestra practica consistir en comparar nuestras graficas (absorbancia vs longitud de
onda, %T vs longitud de onda) experimental con el catalogo del fabricante en el caso del
CoCl
2
y para nuestra muestra de chicha se comparara con las diferentes graficas de
diferentes tipos de solventes

Familiarizarse con la utilizacin y manejo de un espectrmetro UV- visible



























determinacin de un espectro de absorcin practica #1

Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag4



INTRODUCCION



La interaccin entre las ondas electromagnticas y la materia de la regin UV-visible es el
campo de estudio de la espectroscopia UV-visibles o espectrofotometra. Esta basada en
la relacin que presenta un haz de luz incidente en la muestra y el haz de luz que pasa por
la solucin.
Su estudio se basa en que la cantidad de luz absorbida por la materia presente en la
solucin es caracterstica del compuesto. La respuesta de dicho componente es funcin de
las caractersticas del haz de luz incidente en la muestra, lo que permite determinar la
respuesta en funcin de la calidad del haz proporcionado.

Dicho conjunto de respuesta en el rango de longitud de onda de la gama UV-visible se
denomina espectro de absorcin; dicha respuesta es caracterstica de cada compuesto

El espectrofotmetro constituye una herramienta fundamental en el
laboratorio. Ms del 90% de las determinaciones que se realizan en Qumica
tienen como paso final la lectura de una absorbencia o una transmitancia.













PARTE TEORICA

La Espectrofotometra es una de las tcnicas experimentales ms utilizadas para la
deteccin especfica de molculas.
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El fundamento de la espectroscopia se debe a la capacidad de las molculas para absorber
radiaciones, entre ellas las radiaciones dentro del espectro UV-visible. Las longitudes de
onda de las radiaciones que una molcula puede absorber y la eficiencia con la que se
absorben dependen de la estructura atmica y de las condiciones del medio (pH,
temperatura, fuerza inica, constante dielctrica), por lo que dicha tcnica constituye un
valioso instrumento para la determinacin y caracterizacin de biomolculas, Se
caracteriza por su precisin, sensibilidad y su aplicabilidad a molculas de distinta
naturaleza (contaminantes, biomolculas, etc) y estado de agregacin (slido, lquido,
gas).

Las molculas pueden absorber energa luminosa y almacenarla en forma de
energainterna. Esto permite que se inicien ciclos vitales de muchos organismos, entre
ellos elde la fotosntesis en plantas y bacterias. La Mecnica Cuntica nos dice que la luz
estcompuesta de fotones cada uno de los cules tiene una energa:

Dondec es la velocidad de la luz, es su frecuencia, su longitud de onda yh= 6.6 10-34 Js es la
constante de Planck. Cuando decimos que una sustancia qumicaabsorbe luz de longitud de onda ,
esto significa que las molculas de esa sustanciaabsorben fotones de esa longitud de onda.




En espectroscopa el trmino luz no slo se aplica a la forma visible de radiacin
electromagntica, sino tambin a las formas UV e IR, que son invisibles. En espectofotometra
de absorbancia se utilizan las regiones del ultravioleta (UV cercano, de 195-400 nm) y el visible
(400-780 nm).


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Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag6

La regin UV se define como el rango de longitudes de onda de 195 a 400 nm. Es una
regin de energa muy alta. Provoca dao al ojo humano as como quemadura comn. Los
compuestos con dobles enlaces aislados, triples enlaces, enlaces peptdicos, sistemas
aromticos, grupos carbonilos y otros heterotomos tienen su mxima absorbancia en la
regin UV, por lo que sta es muy importante para la determinacin cualitativa y
cuantitativa de compuestos orgnicos. Diversos factores -como pH, concentracin de sal y
el disolvente- que alteran la carga de las molculas, provocan

La fuente de radiacin ultravioleta es una lmpara de deuterio. En la regin visible
apreciamos el color visible de una solucin y que corresponde a las longitudes de onda de
luz que transmite, no que absorbe. El color que absorbe es el complementario del color
que transmite. Por tanto, para realizar mediciones de absorcin es necesario utilizar la
longitud de onda en la que absorbe luz la solucin coloreada. La fuente de radiacin
visible suele ser una lmpara de tungsteno y no proporciona suficiente energa por debajo
de 320 nm.





En esta prctica estudiaremos la absorcin de luz en el ultravioleta cercano (325-420) y
en el visible (420-900 nm). Cuando una molcula absorbe un fotn en esteintervalo
espectral, se excita pasando un electrn de un orbital del estado fundamental aun orbital
excitado de energa superior. De est manera la molcula almacena la energadel fotn:



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A + h A*
E(A*) = E(A) + Efotn


Como la energa se conserva, la diferencia de energa entre el estado fundamental de
lamolcula (A) y su estado excitado (A*) debe ser exactamente igual a la energa delfotn.
Es decir, una molcula slo puede absorber fotones cuya energa h
energa de un estado molecular excitado. Cada molcula tiene una serie de
estadosexcitados discretos (o bandas) que dependen de su estructura electrnica y que
ladistinguen del resto de molculas. Como consecuencia, el espectro de absorcin,
esdecir, la luz absorbida en funcin de la longitud de onda, constituye una verdadera seal
de identidad de cada sustancia o molcula.
En una ampliacin a esta prctica, se puede detectar una mezcla de doscolorantes
alimentarios, el rojo E-124 y un colorante verde midiendo su espectro
deultravioleta/visible. Cuando dos o ms sustancias aparecen mezcladas en una
mismamuestra sus espectros de absorcin aparecen superpuestos tal como se representa
en la
Siguiente figura:



TRANSMITANCIA Y ABSORBANCIA


Cuando un rayo de luz de una determinada longitud de onda de intensidad I
o
incide
perpendicularmente sobre una disolucin de un compuesto qumico que absorbe
luz o cromforo, el compuesto

Absorber una parte de la radiacin incidente (I
a
) y dejar pasar el resto (I
t
), de
forma que se cumple: I
o
= I
a
+ I
t

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Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag8


La transmitancia (T) de una sustancia en solucin es la relacin entre la cantidad de luz
transmitida que llega al detector una vez que ha atravesado la muestra, I
t,
y la cantidad de
luz que incidi sobre ella, I
o
, y se representa normalmente en tanto por ciento:
% T = I
t/
I
o
x100

La transmitancia nos da una medida fsica de la relacin de intensidad incidente y
transmitida al pasar por la muestra. La relacin entre %T y la concentracin no es lineal,
pero asume una relacin logartmica inversa.

La absorbancia (A) es un concepto ms relacionado con la muestra puesto que nos indica
la cantidad de luz absorbida por la misma, y se define como el logaritmo de 1/T, en
consecuencia: A = log 1/T = -log T = -log I
t
/ I
o.

Cuando la intensidad incidente y transmitida son iguales (Io = It), la transmitancia es del
100% e indica que la muestra no absorbe a una determinada longitud de onda, y entonces
A vale log 1 = 0.

Los espectros de absorcin se miden mediante un instrumento
denominadoespectrmetro. Los instrumentos que vamos a usar en esta prctica constan
de unafuente de luz blanca caracterizada por un espectro de emisin continuo en
unintervalo amplio de longitudes de onda (en nuestro caso 325 nm-900 nm) y de
unmonocromador que acta como filtro ptico transmitiendo un haz de luz de longitud
deonda fija de intensidad I0. Este haz de luz penetra en la cubeta de anlisis donde
seencuentra la muestra. Un detector sensible a la luz mide la intensidad del haz a la salida
If.







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Instrumentacin para la medicin de absorbancias de la luz visible y
ultravioleta: espectrofotmetro UV-visible


La medicin de absorbancia de la luz por las molculas se realiza en unos aparatos
llamados espectrofotmetros. Aunque pueden variar en diseo, en especial con la
incorporacin de ordenadores para el anlisis de datos, todos los espectrofotmetros
constan, segn se indica en la figura, de:

1. Una fuente de energa radiante: lmpara de deuterio y tungsteno.
2. Un monocromador para la seleccin de radiaciones de una determinada longitud de
onda: filtros, prismas, redes de difraccin.
3. Un compartimento donde se aloja un recipiente transparente (cubetas o tubos) que
contenga la muestra Pueden ser de vidrio, cuarzo o plstico transparente. Para medir en
UV se deben usar las de cuarzo o slice fundido, porque el vidrio no transmite la radiacin
UV.
4. Un detector de luz y un amplificador convertidor de las seales luminosas en seales
elctricas.
5. Un registrador o sistema de lectura de datos.

Desde el punto de vista operativo, el primer paso es seleccionar la fuente de luz y longitud
de onda a la que se va a realizar la medida. Hay espectrofotmetros de un solo haz (con
una sola celdilla para alojar la cubeta con la muestra) y de doble haz (con dos celdillas para
dos cubetas); en nuestro caso se trabajar con los de un solo haz.

Se mide primero la absorbancia del disolvente (conocido como blanco) y al que se le
asigna el valor de cero mediante el ajuste del mando, de forma que la intensidad incidente
y transmitida sean iguales (I
o
= I
t
), y por tanto la absorbancia es cero. A continuacin se
pone en la celdilla la cubeta con la muestra y se lee la absorbancia de sta.









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Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag10
La siguiente tabla nos da una relacin entre rango de longitudes de onda en que absorbe
el compuesto,color absorbido y color observado o transmitido


OBTENCIN DE UN ESPECTRO DE ABSORCIN
El espectro de absorcin es una representacin grfica que indica cantidad de luz
absorbida () a diferentes valores de .
A partir de una solucin diluida de un compuesto, cuya absorbancia mxima entra dentro
del rango de medida del espectrofotmetro, se ver el valor de absorbancia a diferentes
longitudes de onda frente a un blanco que contenga el disolvente de la solucin de la
muestra a caracterizar. A partir del espectro de absorcin se obtendr el valor de al que
el compuesto presenta la mayor absorbancia (
max
). Dicho se utilizar a la hora de hacer
determinaciones cualitativas y cuantitativas del compuesto.
El espectro de absorcin de un cromforo depende, fundamentalmente, de la estructura
qumica de la molcula.











EQUIPO


ESPECTROFOTOMETRO GENESYS 20 THERMO SCIENIFIC
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Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag11


Es un espectrofotmetro adecuado para anlisis de rutina en laboratorios de formacin,
de control de calidad y de produccin. Es fiable, robusto y preciso, con impresora
integrada (opcional). Hay disponibles una gran variedad de soportes para cubetas
estndar, como viales DQO, cubetas de 50 mm, filtros y tubos de ensayo.

Teclado de membrana con proteccin contra salpicaduras, de fcil limpieza
Pantalla LCD multilinge
Visualizacin clara y directa
Teclado de 10 teclas fcil de


GENESYS 20

Fuente de luz: Lmpara de wolframio
Sistema ptico: Haz simple
Rango de medicin: 3251100 nm
Ancho de banda: 8 nm
Exactitud: +/-2,0 nm
Rango fotomtrico: 0, 12, 5A, 0125% T, 01999C, absorcin, transmisin,
concentracin, factores
Pantalla: LCD con 2 lneas y 20 caracteres
Soporte de cubetas estndar: Soporte para cubetas de 10 mm y tubos
Memoria de mtodos: Parmetros en memoria fija
Memoria de datos: No
Impresora, interna (opcional): 20 columnas
Dimensiones: 300x330x190 mm
Peso: 4,5 Kg






ANTOCIANINA (E 163)
El maz morado (Zea mays L.) es una variedad de maz que tiene una coronta y granos de
color morado, es originaria del Per y Bolivia.
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Su colorante principal es la antocianina, cianidina-3-b-glucosa. El extracto de maz
morado puede ser usado en productos cidos donde se desee un color rojo posee un
Extracto lquido viscoso con un pH de 3

Las antocianinas son compuestos polares que imparten color rojo, morado y azul a las
frutas y varios vegetales por el desplazamiento de longitud de onda que genera su catin
flavilio. El principio colorante del maz morado se basa en la existencia de la antocianina,
la que se encuentra en mayor cantidad en la coronta y en menores proporciones en el
pericarpio (cscara) del grano.

Origen:
Las antocianinas y las antocianidinas son un gran grupo de colorantes naturales. Su
combinacin da origen al color de la mayora de las frutas, flores y bayas. Mientras que las
antocianinas siempre contienen una molcula de carbohidrato en su estructura, las
antocianidinas carecen de ella. Los compuestos individuales son aislados a partir de
diferentes especies de plantas, siendo el E163 (i)-(iii) una mezcla de diversos componentes
respectivamente.

Funcin & caractersticas:

E163a (cianidina): colorante alimentario rojo
E163b (delfinidina) : colorante alimentario azul
E163c (malvidina) : colorante alimentario prpura
E164d (pelargonidina) : colorante alimentario anaranjado
E164e (peonidina) : colorante alimentario rojo-marrn
E165f (petunidina) : colorante alimentario rojo oscuro

Las antocianinas son pigmentos responsables por una variedad de colores atractivos y
brillantes de frutas, flores y hojas que varan desde el rojo vivo al violeta o azul. Son
obtenidas fcilmente por extraccin a fro con metanol o etanol dbilmente acidificado.
Algunas antocianinas son lbiles y se descomponen en presencia de cidos minerales y en
este caso, la extraccin debe ser realizada con solventes acidificados con cido actico.
.

Las antocianinas son anfteras, En medio cido las antocianinas se encuentran en la forma
de sales de ozono y son generalmente de color rojo brillante. Con el aumento del pH de
las soluciones, las antocianinas pasan a tener una estructura quinodial, prpura y en
medios alcalinos el color cambia al azul.
determinacin de un espectro de absorcin practica #1

Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag13
Las antocianinas tienen color rojo intenso en valores de pH bajos. A medida que el pH
aumenta la coloracin pasa a ser ms violeta.
Extrado con agua o soluciones alcohlicas, el extracto de la cscara de uva contiene 25
pigmentos diferentes, dependiendo de la variedad. El colorante es frecuentemente
denominado enocianina y su principal cromforo presente en la cscara de uva es la
mezcla compleja de antocianinas: antocianidina (aglicona), azcar y frecuentemente
cidos.
La estabilidad es un problema ya que las antocianinas son degradadas en la presencia de
metales, cido ascrbico, azcar, oxgeno, temperatura y enzimas.
La inestabilidad al pH es un factor limitante en varias situaciones, afectando el color y la
estabilidad qumica, decolorando en valores de pH por encima de 4,0. En soluciones cidas
la antocianina es roja, pero con el aumento del pH la intensidad del color disminuye.

En solucin alcalina, el color azul es obtenido, siendo sin embargo, inestable. Para
aplicaciones generales, el pH entre 1,0 y 3,5 confiere una mayor estabilidad.
Adems del pH (principal responsable por la estabilidad de las antocianinas), otros
factores contribuyen para su degradacin.









ANALISIS EXPERIMENTAL

ESPECTRO DE ABSORCIN DE UN COLORANTE (MAIZ MORADO)
determinacin de un espectro de absorcin practica #1

Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag14

La prctica que vamos a hacer consiste en la determinacin de una
concentracindesconocida de un colorante alimentario en una muestra problema. Para
ellorealizaremos los siguientes experimentos:

Mediremos el espectro de absorcin de una disolucin que contiene el colorante E-163 y
localizaremos su mximo de absorcin.

Nos situaremos en dicho mximo y mediremos la absorbancia de 4 disoluciones
deconcentracin conocida de colorante preparadas por nosotros.

A. ESPECTRO DE ABSORCION DEL CoCl
2

1. Verificacin del espectrofotmetro Genesys 20- thermoScientific con CoCl
2
en HCl
al 1%
Utilizamos el CoCl
2
debido que fue la solucin que vino junto al espectrofotmetro que
tenemos en el laboratorio.

Aprendimos a utilizar el espectrofotmetro, teniendo en cuenta los siguientes pasos:

Elegir el modo de transmitancia
Primero se calibra las longitudes de onda deseada a 500 nm.

Luego se introduce en el espectrofotmetro la celda con el blanco en este
caso fue el HCl al 1%, y se calibra a cero presionando en la parte inferior de
la pantalla

Cuando en la pantalla se observe 100% podemos sacar la celda e introducir
nuestra muestra pero antes se debe de programar la transmitancia(450 nm
a 750 nm)

Al momento de introducir nuestra solucin ( muestra) se cierra la tapa y se
observara en la pantalla el resultado que dar que es la transmitancia
.Repetir los pasos de 4 hasta 5 a 505, 510, 515 y 520 nm.

B. ESPECTRO DE ABSORCION DEL MAIZ MORADO

2. Maz con agua
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Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag15
Pesar 3 granos de maz morado, colocar en un vaso de 50ml, agregar 20ml de agua
destilada y hervir durante 20 minutos. Enfriar y tomar 5 ml de solucin y llevar a
una fiola de 25 ml enrasar con agua destilada

3. Maz en solucin de etanol
Pesar 3 granos de maz morado, colocar en un vaso de 50 ml, agregar 20 ml de
etanol, dejar en reposo hasta obtener la coloracin deseada

4. Producto elaborado con chicha morada
Pesar 0.1 g de un producto elaborado de chicha morada y disolver con 20 ml de
agua destilada. Tomar 2ml de la muestra y llevar a una fiola de 25 ml con agua
destilada
Seguimos los mismos pasos que utilizamos para la muestra de CoCl2 para medir en el
espectrofotmetro, pero para cada caso en el momento de la calibracin se usara
diferente blanco (aquella solucin en el que el analito fue disuelta)
Se repite la operacin de manera ms fina en la regin donde se haya observado una
mayor absorbancia, esta vez tomando valores cada 10 nm. Establecer, apartir de esta
medida, dnde se encuentra el mximo de absorcin del colorante. Anotarel valor de
absorbancia para esa longitud de onda de la Disolucin 2, 3,4.

Repetir la medida, a la misma longitud de onda (mximo de absorcin del colorante
para las disoluciones 3, 2, 1 y para una mezcla problema de concentracin
desconocida.
Anotar los correspondientes valores de absorbancia frente a concentracin para
haceruna recta de calibrado.

.






RESULTADOS
Tabla 1
determinacin de un espectro de absorcin practica #1

Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag16
Rango: entre 500 y 510 0% de absorbacia de cocl2
(nm) %T
ABSORBANCIA = - logT
450 65 0,18708664
460 56.5 0,24795155
470 50.1 0,30016227
480 45.7 0,3400838
490 42.7 0,36957212
500 38.8 0,41116827
510 36.2 0,44129143
520 36.9 0,43297363
530 42 0,37675071
540 50.3 0,29843201
550 61.4 0,21183163
560 72.4 0,14026143
570 82.4 0,08407279
580 88.3 0,0540393
590 91.2 0,04000516
600 92.4 0,03432803
610 93.1 0,03105032
620 93.6 0,02872415
630 93.9 0,02733441
640 94 0,02687215
650 95 0,02227639
660 94.9 0,02273379
670 95.4 0,02045163
680 96.3 0,01637371
690 97 0,01322827
700 98.3 0,00744648





Tabla 2 (Maiz(sobre) +agua)
Rango: entre 450 y 700 0% de absorbacia de cocl2
determinacin de un espectro de absorcin practica #1

Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag17
(nm) %T
ABSORBANCIA = - logT
450 70.5 0,151810883
460 64 0,193820026
470 56.4 0,248720896
480 50 0,301029996
490 44.5 0,351639989
500 41 0,387216143
510 40 0,397940009
520 41 0,387216143
530 43 0,366531544
540 48.3 0,316052869
550 57 0,244125144
560 69.7 0,156767222
570 80.6 0,093664958
580 85.9 0,066006836
590 88.4 0,053547735
600 88.4 0,053547735
610 85.3 0,069050969
620 80.6 0,093664958
630 77 0,113509275
640 81.2 0,090443971
650 88.5 0,053056729
660 93.9 0,027334408
670 96.8 0,014124643
680 98 0,008773924
690 98.6 0,006123085
700 98.5 0,00656377




Tabla 3(Maz(polvo) en etanol)

Rango: entre 450 y 700 0% de absorbacia
determinacin de un espectro de absorcin practica #1

Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag18
(nm) %T
ABSORBANCIA = - logT
450
6.1 0,18442225
460
3.2 1,21467016
470
1.2 1,49485002
480
0.5 1,92081875
490
0.2 2,30103
500
0.1 2,69897
510
0.1 3
520
0.1 3
530
0.1 3
540
0.1 3
550
0.4 3
560
3.0 2,39794001
570
14.3 1,52287875
580
29.7 0,84466396
590
38.9 0,52724355
600
38.0 0,4100504
610
28.1 0,4202164
620
17.2 0,55129368
630
13.7 0,76447155
640
20.6 0,86327943
650
40.1 0,68613278
660
64.1 0,39685563
670
81.7 0,19314197
680
92.0 0,08777794
690
96.0 0,03621217
700
97.4 0,01772877




Tabla 4(Maz en etanol)

Rango: entre 450 y 700 0% de absorbacia
(nm) %T
ABSORBANCIA = - logT
determinacin de un espectro de absorcin practica #1

Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag19
450
65.4 0,151810883
460
65.2 0,193820026
470
63.6 0,248720896
480
63.8 0,301029996
490
62.7 0,351639989
500
60.1 0,387216143
510
57.9 0,397940009
520
56.0 0,387216143
530
54.6 0,366531544
540
53.8 0,316052869
550
54.4 0,244125144
560
56.5 0,156767222
570
59.8 0,093664958
580
63.4 0,066006836
590
67.3 0,053547735
600
72.7 0,053547735
610
79.0 0,069050969
620
84.9 0,093664958
630
88.6 0,113509275
640
91.6 0,090443971
650
93.6 0,053056729
660
94.7 0,027334408
670
95.8 0,014124643
680
96.6 0,008773924
690
96.7 0,006123085
700
97.5 0,00656377




Tabla 5(maz +agua)

(nm) %T
ABSORBANCIA = - logT
450
65.4 0,23062267
460
65.2 0,22402567
470
63.6 0,22184875
determinacin de un espectro de absorcin practica #1

Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag20
480
63.8 0,22112553
490
62.7 0,22329882
500
60.1 0,23062267
510
57.9 0,23433145
520
56.0 0,23210238
530
54.6 0,22841252
540
53.8 0,22402567
550
54.4 0,21896306
560
56.5 0,20620962
570
59.8 0,1877553
580
63.4 0,16367588
590
67.3 0,14630179
600
72.7 0,12262865
610
79.0 0,09854168
620
84.9 0,07468791
630
88.6 0,05898576
640
91.6 0,04143612
650
93.6 0,03105032
660
94.7 0,02410886
670
95.8 0,01772877
680
96.6 0,01367622
690
96.7 0,00966115
700
97.5 0,00744648




Graficas en Excel absorvancia vs longitud de onda
Tabla 1
determinacin de un espectro de absorcin practica #1

Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag21


Tabla 2


Tabla 3
0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.35
0.4
0.45
0.5
0 100 200 300 400 500 600 700 800
A
b
s
o
r
v
a
n
c
i
a

longitud de onda
0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0.35
0.4
0.45
0 100 200 300 400 500 600 700 800
A
b
s
o
r
v
a
n
c
i
a

longitud de onda
determinacin de un espectro de absorcin practica #1

Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag22

Tabla4



Tabla 5
0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0.3
0 100 200 300 400 500 600 700 800
A
b
s
o
r
v
a
n
c
i
a

longitud de onda
0
0.5
1
1.5
2
2.5
3
3.5
0 100 200 300 400 500 600 700 800
A
b
s
o
r
v
a
n
c
i
a

longitud de onda
determinacin de un espectro de absorcin practica #1

Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag23

Graficas en Excel %T vs longitud de onda
Tabla 1


Tabla 2
0
0.05
0.1
0.15
0.2
0.25
0 100 200 300 400 500 600 700 800
A
b
s
o
r
v
a
n
c
i
a

longitud de onda
0
20
40
60
80
100
120
0 100 200 300 400 500 600 700 800
A
b
s
o
r
v
a
n
c
i
a

longitud de onda
determinacin de un espectro de absorcin practica #1

Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag24

Tabla 3




Tabla 4
0
20
40
60
80
100
120
0 100 200 300 400 500 600 700 800
A
b
s
o
r
v
a
n
c
i
a

longitud de onda
0
20
40
60
80
100
120
0 100 200 300 400 500 600 700 800
A
b
s
o
r
v
a
n
c
i
a

longitud de onda
determinacin de un espectro de absorcin practica #1

Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag25


Tabla 5




ANALISIS Y DISCUSIN DE RESULTADOS
0
20
40
60
80
100
120
0 100 200 300 400 500 600 700 800
A
b
s
o
r
v
a
n
c
i
a

longitud de onda
0
20
40
60
80
100
120
0 100 200 300 400 500 600 700 800
A
b
s
o
r
v
a
n
c
i
a

longitud de onda
determinacin de un espectro de absorcin practica #1

Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag26


PARA EL CLORURO DE COBALTO
Segn el fabricante:
El instrumento est apropiadamente calibrado cuando la transmitancia mnima (mxima
absorbancia) ocurre entre 510 y 530 nm. Segn el fabricante del producto es 530
Los valores de transmitancia especfica (o absorbancia) no son relevantes
Se realiz la medicin de la absorbancia en el espectrofotmetro de absorcin de luz uv-
visible
Para el caso de transmitancia vs longitud de onda se observa que la transmitancia
mnima ( mxima absorbancia) se obtiene entre 530 a 42%T, de modo que son similares a
lo establecido por los datos del fabricante
A concentraciones altas se pierde la linealidad en la lectura de datos de absorbancia, ya
que la concentracin es directamente proporcional con la absorbancia a medida que
aumenta la concentracin aumenta la absorbancia siendo ella la que indica cuanto de luz
se absorbi, si un cromoforo est menos concentrado no habr datos significativos de
absorbancia , pero debe recalcarse que si est demasiado concentrado no deja pasar el
haz de luz y no hay lecturas correctas se pierde la linealidad; es por este motivo que la
profesora recomend diluir la muestra hasta que sea translucida.







determinacin de un espectro de absorcin practica #1

Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag27







RECOMENDACIONES


Los espectrofotmetros, en condiciones normales, deben conservar la exactitud
(calibracin) de su longitud de onda, indefinidamente. Si el instrumento ha sufrido un
golpe severo o algn otro dao, entonces es recomendable controlar la exactitud de la
longitud de onda por medio de un filtro de Didimio o una solucin de Cobalto.
al momento de colocar las celdas, asegurarse que la marca que esta en esta est en direccin
hacia nosotros








determinacin de un espectro de absorcin practica #1

Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag28




CONCLUSIONES

Por medio de esta prctica se logr familiarizarse y aprender el uso correcto y manejo del
espectrofotmetro de absorcin UV-visible por medio de sustancias que presentan color y
que por mediode la espectrofotometra se puede observar su regin de absorbancia
en determinada longitud de ondaque nosotros podemos manejar de acuerdo a nuestras
necesidades, as como lograr determinar en que regin se encuentra determinado
compuesto si es que este es desconocido, ayudndonos tambin algraficarlo para facilitar
la determinacin del mismo.
En esta prctica aprendimos a utilizar el espectrofotmetro que nos sirvi para medir, en
funcin de lalongitud de onda, la transmitancia.









determinacin de un espectro de absorcin practica #1

Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag29

BIBLIOGRAFIA

Antocianinas | La Gua de Qumicahttp://quimica.laguia2000.com/elementos-
quimicos/antocianinas#ixzz2S46VoR2h
Wade, L. G., Qumica orgnica, 5 edicin, Prentice hall, Madrid, 2004, Pgs.: 490-495,544.
Skoog, Douglas A. Qumica Analtica,.Edit Mc Graw Hill 7 ed. Mxico 2001.Pg. 282













ANEXOS
Usos de las antocianinas.

determinacin de un espectro de absorcin practica #1

Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag30
Las Antocianinas imparten color a bebidas, dulces y confites, productos depanadera, vegetales,
conservas de pescado, grasas y aceites, mermeladas y jaleas, frutas confitadas y en almbar,
jarabes de frutas, sopas ysaborizantes.

Las Antocianinas del Maz Morado, se usan en la preparacin de refrescos(chicha morada), dulces
(mazamorra de maz morado), coloracin de jugosde frutas (fresa) y tambin en vermouth, vinos y
vinagres. En Japn seutilizan para colorear caramelos, helados y bebidas.

El uso farmacutico de las Antocianinas es reconocido en Oftalmologa,por sus propiedades de
incrementar la agudeza visual y mejorar la visinnocturna; para el tratamiento de diversos
trastornos de circulacin de lasangre (Colesterol) y recientemente se concluy que el principio
activo delMaz Morado, evita la presencia de cncer al intestino grueso

Este colorante natural tiene un potencial benfico para la salud; por tratarsede un rico
antioxidante con propiedades medicinales comprobadas a nivelmundial; entre ellas:-
Promueve la reduccin del colesterol y la baja de presin arterial-Estabiliza y protege la capilaridad
de las arterias






APLICACIN DE LA ANTOCIANINA EN LA INDUSTRIA ALIMENTARIA

De acuerdo con la armonizacin internacional de las normas sobre aditivosalimentarios, la
antocianina de maz morado fue aceptada como un agente colorantenatural desarrollado por el
Japn para el uso en los alimentos.
-
determinacin de un espectro de absorcin practica #1

Laboratorio de anlisis qumico instrumental pag31
En Japn y EE.UU, el maz morado ha sido ampliamente utilizado en laelaboracin de diversos
alimentos, como bebidas, dulces y postres congelados,desde su introduccin comercial como
agente colorante natural para alimentos en1974.
-
La produccin exitosa de color maz morado en una escala industrial ha contribuidoenormemente
al enriquecimiento de la tonalidad y la expansin de la demanda decolorantes naturales con
pigmentos de antocianina.
-
El principal insumo con respecto al maz morado es la coronta, que es utilizado enlas industrias de
colorantes naturales por su alto contenido de antocianina.Salinas (2005) realiz un estudio de
aplicacin y evaluacin de la antocianina delmaz morado en el yogur. Defini como unidad
experimental 100 g de yogur base, alos cuales adicion 1 mg del extracto de antocianina, el cual lo
incorpor medianteagitacin manual.
Establec
i cuatro tratamientos correspondientes a los cuatroextractos de cada una de las muestras de maz
estudiadas y dos repeticiones portratamiento. Las variables evaluadas fueron: pH, color, apariencia
fsica (formacin degrumos o grnulos de color).

El color de los yogures coloreados por Salinas (2005) con cada uno de los cuatroextractos fue
diferente desde el primer da, no obstante que la concentracin deantocianinas incorporada al
yogur fue la misma para todos (cuadro 19). Laluminosidad del yogur
colo
reado con los extractos de arrocillo y peruano fue menorque la registrada en los yogures
coloreados con los extractos del grano de lasvariedades cnico y purepecha, pero en todos los
casos el valor de esta variable fuemayor que la del yogur comercial de fresa, empleado como
referencia. Los valores detono o matiz para los yogures coloreados con los dos primeros extractos
fueronmenores de 21, que corresponden a un color rojo con tonalidades de rosa. En elcaso del
yogur coloreado con los extractos de
c
nico y purepecha, los valores deltono o matiz fueron de 35.4 y 30.4, respectivamente, y el color
se observ menosintenso.

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