LA CROMATOGRAFA

DE GASES Y SUS
APLICACIONES

to
t1
t2
A B
A B
Flujo de fase mvil
tB
A B
tA
A
Seal
tiempo
to



t1



t2



tB



tA

El objetivo de la cromatografa es doble:
Separar los distintos componentes de la muestra
Identificar los componentes previamente separados
Buena selectividad
Eficiencia baja
Baja selectividad
Buena eficiencia
Buena selectividad
Buena eficiencia
Cromatografa de Gases

El primer concepto de gas-liquido fue por Martin y
Singe
En, 1955 aparecio el primer aparato comercial.
Se estima que existen 500,000 cromatografos de
gases en el mundo.
Mas de 30 fabricantes y 130 modelos diferentes
Con un costo de entre 2000 a 40000 dolares
Hasta 1985 se estimo que en el mundo existian
cerca de 200,000 en el mundo.

Cromatografa de Gases

En cromatografa de gases (GC), la muestra (liquida o gas)
se volatiliza y se inyecta en la cabeza de una columna
cromatografa.

La elucin se produce por el flujo de una fase mvil de un
gas inerte, y a diferencia de la mayora de los tipos de
cromatografa, la fase mvil no interacciona con las
molculas del analito.

Su nica funcin es la de transportar el analito a travs de la
columna.
Cromatografa de Gases

Existen dos tipos de cromatografa de gases:

La cromatografa gas - slido (GSC) y la cromatografa gas-lquido (GLC).

La cromatografa gas - slido se basa en una fase estacionaria slida en
la cual se produce la retencin de los analitos como consecuencia de la
adsorcin fsica. De poca utilizacion actualmente.

La cromatografa gas - lquido se basa en la distribucin del analito
entre una fase mvil gaseosa y una fase lquida inmovilizada sobre la
superficie de un slido inerte. Esta es conmumente reconocida como
CG
Cromatografa de Gases

Es la tcnica a elegir para la separacin de
compuestos orgnicos e inorgnicos
trmicamente estables y voltiles

Un cromatgrafo de gases consiste en el acoplamiento de
varios mdulos bsicos ensamblados
Gas portador
Rotametro
Sistema de Inyeccion
Columna y Horno de columna
Detector
Registrador
Cromatografa de Gases
Cromatografa de Gases
Cromatografa de Gases
Cromatografa de Gases
Gas Portador

Deben ser quimicamente inertes
Principalmente son Helio, Nitrogeno e Hidrogeno
La eleccion del gas esta determinada por el detector
Con el suministro se encuentra asociados los
manometros y medidores de caudal
El caudal se controlan mediante un regulador de
presion o regulador de flujo desde el sistema
computacional
Presiones de entrada de 10 a 50 psi
Caudales de de 25 a 150 mL/ min columnas rellenas y 1
a 25 mL/min columnas capilares.



Cromatografa de Gases

Rotametro

Un rotmetro es un medidor de caudal en tuberias de rea
variable, de cada de presin constante.

Sistema de inyeccin

Los dispositivos de inyeccin de muestras tienen la misin de
vaporizar la muestra e incorporarla a la corriente de gas
portador que se dirige hacia a la columna.

La vaporizacin e introduccin de la muestras deben cumplir
con los siguientes requisitos:

1.- La vaporizacin de la muestra debe ser lo mas rpida
posible.
2.- La vaporizacin debe realizarse sin discriminar ningn
componente de la muestra.
3.- La muestra debe llegar a la columna como una banda lo mas
fina posible.
Sistema de inyeccin

A) Inyeccion directa (columnas capilares split y splitless)


Adecuado para aproximadamente 95% de las aplicaciones de
las columnas empacadas (o empaquetadas), es la inyeccin
directa (liquidos y gases)

La muestra es inyectada con una jeringa hipodrmica a travs
de un sptum de goma (o hule) de silicona autosellante, a un
alineador de vidrio (glass insert) contenido en un bloque
metlico, donde es vaporizada y barrida hacia la columna

Sistema de inyeccin
INYECCION DIRECTA
Sistema de inyeccin


La cantidad de muestra inyectada es del orden de
L para lquidos y algo superior para gases

Existen jeringas especiales para muestras
gaseosas. Tambin se puede emplear un lazo o
bucle para incoporar las muestras gaseosas al flujo
de gas portador

Para las columnas rellenas varia desde 1 -20 uL
Para columnas capilares es de 10-3 uL
Sistema de inyeccin

B) Inyeccion con valvula rotatoria

Las muestras, lquidas y gaseosas, tambin pueden
introducirse con un lazo (o bucle) calibrado,
introducindolas despus a la corriente del gas que
fluye por medio de una vlvula (Fig. 3.3).

Menos errores que el anterior.

Las muestras solidas se introducen como
disoluciones y solo inyecta la capacidad de entrada a
loop y posteriormente desecha el resto
Sistema de inyeccin
Figura 3.3. Vlvula rotatoria de seis vas
Sistema de inyeccin

C) Sistemas Adicionales
Para el anlisis de compuestos orgnicos voltiles en muestras
slidas y lquidas, se han desarrollado algunas tcnicas auxiliares:
Espacio de cabeza (Head space)
Purga y trampa (Purge and trap)

Espacio de cabeza (Head space)
T equilibrio
Gas portador A la columna
Purga y trampa (Purge and trap)
Es aplicable solo a
muestras lquidas.
T
1) Gas portador
trampa
T baja
T
2) Gas portador
trampa
T alta
A la columna
Columnas cromatogrficas. Dentro de la cual se encuentra
la fase estacionaria
Columnas Empacadas Columnas capilares
La fase estacionaria es un
liquido depositado sobre las
particulas de un solido o
soporte
La fase estacionaria se
encuentra sobre las paredes
del tubo
Cromatografa de Gases

Columnas

En cromatografa de gases se usan dos tipos generales de
Columnas empacadas o rellenas y abiertas o capilares.

Mas comunes columnas de relleno

Llegan a tener una medida de entre 2 a 50 mts de longuitud

A fin de colocarse dentro de un horno estan enrrolladas en
forma helicoidal con diametros de 10 a 30 cm





Cromatografa de Gases

Horno

La temperatura de la columna es una variable importante
que para un trabajo preciso ha de regularse a las dcimas de
grado, por ello la columna normalmente se introduce
dentro de un horno termostatizado
La temperatura ptima de la columna depende del punto
de ebullicin de la muestra y del grado de separacin
requerido.
La mayoria de analitos son volatiles, es necesario la temp
para que no volaticen y puedan ser separados.




Cromatografa de Gases
Figura 3.4. Efecto de la temperatura sobre los
cromatogramas. a) Temperatura
programada. b) Isotermo


COLUMNAS CROMATOGRAFICAS RELLENAS

Se construyen con tubo de acero inoxidable,
niquel o vidrio.

En el interior se dispone la fase estacionaria
bajo la forma de un liquido soportado sobre
un material adecuado finamente pulverizado

El relleno se encuentra confinado en el
interior del tubo.

Los dimetros interiores van de 2 a 5 mm.

La longitud suele ser inferior a los 3 m.

Se rellenan de un material adsorbente
adecuado a las sustancias que se quiere
separar.

COLUMNAS CROMATOGRAFICAS CAPILARES


Esta formada por un tubo en cuya
pared interna se se dispone la fase
estacionaria (liquido)

Muestran gran eficacia

Se construyen con silice fundida

Los dimetros interiores van de 200 a
250 um

La longitud suele ser superior a los 20
m.


COLUMNAS CROMATOGRAFICAS CAPILARES
Las columnas capilares son de dos tipos
bsicos.

Columna abierta de pared recubierta
(WCOT)
(Wall coated open tubular) uso frecuente.
La fase estacionaria se encuentra depositada
formando una pelicula directamente sobre las
paredes del tubo.

Capilares con soporte recubierto (PLOT)
La pared interna del tubo esta recubierta por
una capa de un soporte adsorbente, si a su vez
el soporte esta impregnado con una fase
estacionaria liquida las columnas son
denominadas (SCOT)
Material de relleno en las columnas
Soportes

La misin de los soportes solidos utilizados es proporcionar
una superficie sobre la que se deposita la fase estacionaria
liquida como pelcula uniforme

Deben presentar superficie especifica relativamente elevada

Deben ser porosos, con el fin de no provocar excesivas cadas
de presin

Deben ser relativamente duros y trmicamente estables

Material de relleno en las columnas




Soportes
El material de soportes mas comun son las tierras de
diatomeas ( que estan constituidos por esqueletos de miles de
especies de plantas unicelulares que habitaban en mares o
lagos)

Las particulas de soporte son de aprox 170 a 260 um

La adsorcion se debe a los grupos silanol presentes en la
superficie

Las particulas de soporte son de aprox 170 a 260 um

La adsorcion para compuestos polares se debe a los grupos
silanol presentes en la superficie




Ejemplos de fases estacionarias en cromatografa de gases
Fase estacionaria

Las separaciones se deben exclusivamente entre esta y los
componentes dela muestra.

Deben ser trmicamente estables y qumicamente inertes

Debe ser selectiva a los materiales a separar

Ejemplos de fases estacionarias en cromatografa de gases
Fase estacionaria

Tipos de fase estacionaria de uso frecuente o comun.

1.-Hidrocarburos.
2.- Polisiloxanos.(siliconas de gran estabilidad termica)
3.- Polifenileteres.
4.- Poliesteres.
5.-Polietilenglicoles

Ejemplos de fases estacionarias en cromatografa de gases
Soportes
polietilenglicol
pentaeritritol tetracianoetilado

TIPOS DE DETECTORES
Durante el desarrollo de la cromatografia de Gases se han
investigado y utilizado docenas de detectores

Los cromatografos se han aclopado tambien a
espectofotometria IR y de masas

Caracteristicas del detector ideal:

Adecuada sensibilidad.
Buena estabilidad y reproducibilidad
Respuesta lineal
Intervalo de temperatura de temp ambiente hasta 400C
Alta fiabilidad y manejo sencillo
Sistemas de deteccin
Detector de ionizacin de llama (FID)
Este detector aade hidrgeno al
eluyente de la columna.

La mezcla pasa a travs del
conducto de un mechero, donde se
mezcla con aire externo y luego
Arde.
Cuando entra en la llama material
ionizable del eluyente de la columna
Se quema y la corriente aumenta
notablemente.
Este detector es ideal para compuestos
oxidables.
No responde a los compuestos de
carbono totalmente oxidados, como
carbonilos o carboxilos y grupos ster

Sistemas de deteccin
Detector de conductividad trmica (TCD)
Utiliza un filamento caliente
colocado en el flujo de gas emergente.

La cantidad de calor por conduccin
que pierde el filamento hacia las
paredes del detector depende de la
conductividad trmica de la fase
gaseosa.

Es til para determinar la presencia
incluso de pequeas cantidades de
materiales orgnicos que producen
una reduccin relativamente grande
en la conductividad trmica del
eluyente de la columna.
Sistemas de deteccin
Detector de captura de electrones (ECD)
El eluyente pasa entre dos electrodos.
Uno de los electrodos tiene en su
superficie un radioistopo que emite
electrones de alta energa conforme
decae.
Los electrones bombardean el gas
portador (N2) formndose un plasma
que contiene iones positivos, radicales
y electrones trmicos.
Se aplica una diferencia de potencial
de modo que se recolectan los
electrones generados.
Los compuestos que absorben
electrones reaccionan con los
electrnes trmicos disminuyendo la
corriente del detector, la cual es
medida y permite la cuantificacin

Sistemas de deteccin
Detector de espectroscopa de masas (MS)
Los eluyentes son ionizados y
fragmentados.
Los iones resultantes se dirigen a
travs de un cuadrupolo y se ordenan
en funcin de su masa.
Ese detector permite obtener el
espectro de masas del compuesto que
ha eluido.
Podemos por tanto conocer, adems
del tiempo de retencin el espectro de
masas del compuesto y contrastarlo
con bibliotecas de espectros.
Se trata por tanto de un detector
universal para la mayora de los
compuestos conocidos.
APLICACIONES DE CG
1.-Herramienta de separacion eficaz.
Muestras organicas complejas
Organometalicos
Especies de origen volatil


2.- Para identificacion cualitativa como cuantitativa
Tiempo de retencion para identificacion y area del pico para
cuantificacion.
Mucho mas limitada que otros metodos espectroscopicos
Su mejor aplicacin esta dada aunada al IR, masas y RMN.

APLICACIONES DE CG
Limitantes en cuantificar
La exactitud depende de la calidad y naturaleza de la
muestra
Un analista experimentado.
Excelente para identificar compuestos siempre que se
disponga de un estndar
Existen en ocasiones demasiadas variables de control para la
cuantificacin.
Se puede alcanzar una exactitud relativa del 1 por 100 por
ciento.

APLICACIONES DE CG
La CG es probablemente de las tecnicas de mas amplia
utilizacion, sobre todo por la separacion y caracterizacion de
compuestos volatiles.