ANALISIS CLINICOS II Y

ENFERMEDADES DE LA
SANGRE

Profesor a cargo: Mira, G.A.

Autores:
- De Lema, Mariela
- Esarte, Marcela
- Mira, Graciela
- Pereira, Marcela
- Prez, Marcelo
- Vartabedian, Alberto

Colaboradoras:
- Cardillo, Natalia
- Murphy, Brbara

AREA DE PATOLOGA CLNICA
Y ENFERMEDADES MEDICAS

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ANALISIS CLINICOS II Y ENFERMEDADES DE LA SANGRE

ANALISIS DE LIQUIDOS DE PUNCION

Sin dudas el estudio de los lquidos de puncin constituye un extenso captulo dentro de la
citologa. En este apartado se describirn someramente los mtodos de toma de muestra y se
prestar especial nfasis al procesamiento de los lquidos as como al diagnstico y a la
clasificacin de las distintas efusiones.

- Toma de muestra: el mtodo utilizado para la obtencin de lquidos es la puncin.
Podemos punzar cavidades anatmicamente constituidas, tales como la pericrdica, pleural y
abdominal, o cavidades neoformadas como abscesos, hematomas, seromas y quistes. Para el
caso de estas ltimas slo se necesita una aguja 25/8 40/8 y jeringa de 5 10 cc.
En el caso de las cavidades corporales, cada una de ellas presenta consideraciones especiales,
a saber:
Cavidad pericrdica: la puncin se hace preferentemente del lado derecho a nivel del 4 o
5 espacio intercostal a la altura de la articulacin condrocostal previa tricotoma y
antisepsia y con el animal en decbito esternal o sentado. La aguja a utilizar vara segn el
tamao del animal, desde la 40/8 a la 40/12 o catteres de tefln equivalentes.
Cavidad pleural: si la colecta es bilateral realizar la puncin en el hemitrax derecho,
previa antisepsia y tricotoma de la zona a nivel del 8 a 9 espacio intercostal y a la altura
de la articulacin condrocostal. Los materiales a utilizar son los mismos que para la
puncin pericrdica y la posicin del animal tambin.
Cavidad abdominal: es la ms sencilla de todas y se realiza con el animal en estacin o en
decbito lateral tomando como punto de referencia la cicatriz umbilical, haciendo la
puncin en cualquiera de los laterales. Los materiales son comunes a las otras punciones.
Cabe recordar que las punciones adems de diagnsticas pueden ser evacuadoras o
terapeticas, por lo que puede adicionarse una llave de tres vas y tubuladuras.

- Remisin de los lquidos de puncin: se hacen en las mismas jeringas con las que se
efectu la puncin. Deben enviarse al laboratorio refrigeradas y preferentemente en el dia.

- Protocolo: toda muestra debe estar acompaada por un protocolo similar al usado en
histopatologa.

- Procesamiento de las muestras:
Cavidades neoformadas: consiste en centrifugar el lquido, tirar el sobrenadante y realizar
extendidos con el sedimento para su posterior coloracin.
Cavidades corporales: estos lquidos son sometidos a un examen fsico-qumico y
citolgico cuantitativo y cualitativo.

Para el procesamiento de la muestra, como primer paso, se fracciona la muestra en dos partes,
la primera se centrifuga y la segunda no. Esta ltima se la destina para el recuento de clulas
nucleadas utilizando la cmara de Neubauer, obtenindose la cantidad de clulas por mm3
(examen citolgico cuantitativo).
La otra fraccin se coloca en un tubo de centrfuga para separar el sobrenadante del
sedimento. Del sobrenadante se determinan la densidad y las protenas totales mediante el uso
del refractmetro.
A partir del sedimento y con pipetas de 1 o 2 cc se confeccionan los frotis, para realizar el
examen citolgico cualitativo.
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Fijacin: se utiliza el secado al aire, una vez secos los frotis se procede a su coloracin.

Coloracin: el colorante ms utilizado por razones de rapidez y practicidad es la Tincin 15,
aunque tambin son vlidas las coloraciones de Wright y Giemsa.

Observacin microscpica de los frotis: sin duda aportan los datos ms importantes. Puede
haber una sustancia de fondo, acelular, sobre la que se disponen las clulas, las cuales pueden
ser inflamatorias, mesoteliales, tumorales, etc. Pueden observarse tambin microorganismos.
Todos estos elementos deben figurar en el informe citolgico como descripcin microscpica.
Obtenemos as los siguientes datos:
- Examen fsico-qumico: color, aspecto, densidad, protenas totales.
- Examen citolgico cuantitativo.
- Examen citolgico cualitativo.
En base a ellos podr encasillarse la efusin segn la siguiente clasificacin:

1) Trasudado: Densidad: inferior a 1017
Protenas totales: menores a 2,5 g%
Recuento de clulas nucleadas: inferior a 1000/mm3
Tipos celulares predominantes: mononucleares y mesoteliales
Bacterias: ausentes

Etiologa: insuficiencia heptica, insuficiencia renal y enteropata perdedora de protenas.

2) Trasudado modificado: Densidad: entre 1017 y 1025
Protenas totales: entre 2,5 y 5 g%
Recuento de clulas nucleadas: entre 500 y 10000/mm3
Tipos celulares predominantes: linfocitos, monocitos,
mesoteliales, eritrocitos, tumorales.
Bacterias: ausentes

Etiologa: insuficiencia cardaca, neoplasias e insuficiencia heptica.

3) Exudado: Densidad: superior a 1025
Protenas totales: superior a 3 g%
Recuento de clulas nucleadas: mayor a 5000/mm3
Tipos celulares predominantes: neutrfilos, mononucleares, eritrocitos,
tumorales
Bacterias de presencia variable.

Etiologa: a) exudados spticos: causas infecciosas
b) exudados aspticos: peritonitis biliar, por ruptura de vescula biliar o vas
biliares; uroperitoneo, por traumatismos en vejiga o vas urinarias; peritonitis infecciosa
felina; neoplasias.

La efusin ocasionada por el virus de la Peritonitis Infecciosa Felina (PIF) en su forma
efusiva puede considerarse como un exudado con caractersticas propias, como ser su alto
valor de protenas (superior a 4,5 g%); ausencia de bacterias y escasa celularidad. Desde el
punto de vista fsico son en general amarillos, viscosos y coagulan en contacto con el aire.

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4) Sangre y efusiones hemorrgicas: no deben confundirse con trasudados o exudados y
se los puede diferenciar porque las efusiones hemorrgicas tienen un hematocrito y recuento
de glbulos blancos similar al de la sangre perifrica del paciente. La intensa coloracin de
estos lquidos impide la lectura de densidad y protenas con el refractmetro.

Etiologa: iatrognica al realizar la puncin; hemorragia aguda debida a traumatismos,
coagulopata o neoplasias sangrantes; hemorragia crnica asociada a neoplasias sangrantes.

5) Quilo: Color: blanco a rosado
Aspecto: turbio y tpicamente lechoso
Valores de densidad, protenas y recuento celular: variable
Tipos celulares predominantes: linfocitos, aunque tambin pueden hallarse
neutrfilos Todo esto implica que es necesario realizar otras pruebas de laboratorio para
diagnosticar una efusin quilosa y no confundirla con una pseudoquilosa que tiene grandes
similitudes.
La mejor forma de diferenciarlas es mediante el dosaje de triglicridos y colesterol en la
efusin y en suero. En el caso del quilo el nivel de triglicridos es superior al de la
trigliceridemia; con respecto al colesterol sus valores son inferiores a los de la colesterolemia.

Etiologa: traumatismos del conducto torcico, obstrucciones debido a neoplasias o
granulomas o inflamaciones del conducto torcico. Tambin pueden obedecer a
linfangiectasias intestinales o inflamaciones de la cisterna del quilo.

6) Pseudoquilo: de caractersticas similares al quilo, por lo que se recomiendan mediciones
de colesterol y triglicridos en la efusin y en suero. A diferencia del quilo, en este caso los
valores de colesterol del lquido sern superiores a la colesterolemia y los de triglicridos
menores a los de la trigliceridemia.

Etiologa: generalmente neoplsicas, de ah la importancia de diferenciarla del quilo.

Diferencias entre quilo y pseudoquilo:

Triglicridos en la efusin superior a trigliceridemia
QUILO
Colesterol en la efusin inferior a colesterolemia


Triglicridos en la efusin inferior a trigliceridemia
PSEUDOQUILO
Colesterol en la efusin superior a colesterolemia


RESUMIENDO: Todo informe de un lquido de puncin de una cavidad corporal debe
incluir los datos del examen fsico-qumico y citolgico cuali y cuantitativo para as poder
clasificar a la efusin.

Bibliografa:
1) Cowell; Tyler y Meinkoth: Citologa y hematologa diagnstica en el perro y el gato. Ed.
Multimdica.
2) Willard; Tvedten, Turnwald: Diagnstico clnico por mtodos de laboratorio en pequeos
animales. Ed. Saunders.

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BIOQUMICA SERICA

UREA y CREATININA:

La urea se forma en el hgado y representa el principal producto del catabolismo proteico en
los carnvoros y omnvoros. La urea atraviesa el glomrulo y un 2540 % es reabsorbido a
nivel tubular. El incremento del flujo de filtrado reduce la reabsorcin de urea mientras que
los flujos lentos la facilitan. Los niveles del nitrgeno ureico se pueden incrementar con el
aumento de la protena diettica, desintegracin tisular catablica y hemorragia dentro del
conducto gastrointestinal.
La creatinina se forma durante el metabolismo del msculo esqueltico. Similar al nitrgeno
ureico, la creatinina srica es un ndice grosero de la filtracin glomerular. La creatininemia
no recibe gran influencia de la dieta o hemorragias intestinales. La consuncin muscular
pronunciada reducir la cantidad de creatinina formada. La reduccin del volumen de
filtracin glomerular incrementa la concentracin de creatinina srica, como ocurre con la
urea. A diferencia de sta, no es reabsorbida por los tbulos.
La determinacin de urea sangunea constituye una de las determinaciones ms comnmente
solicitadas junto con la creatinina como estudio de la funcin renal. Si bien estas
determinaciones tambin se ven alteradas en patologas que no afectan al rin , son
marcadores groseros del funcionamiento glomerular, y son de gran utilidad para la evaluacin
secuencial tanto de la progresin de la enfermedad renal como tambin de la respuesta al
tratamiento.

Para la determinacin de UREA se utilizan comnmente mtodos enzimticos, teniendo como
producto final una solucin coloreada, donde la concentracin de urea es proporcional a la
intensidad del color luego de la reaccin.


Urea +Ureasa CO2 y Amonaco

Amonaco +Fenol y Hipoclorito Azul de Indofenol


MUESTRA: Suero o plasma

ESTABILIDAD: 1 dia a 24 hs, 7 das a 2-8 C y 1 mes en freezer.

SUSTANCIAS INTERFERENTES: Anticoagulantes con fluoruro (inhiben reacciones
enzimticas) y hemlisis intensa.

VALOR DE REFERENCIA : CANINOS: 15 a 50 mg/dl
FELINOS: 30 a 60 mg/dl

La determinacin de CREATININA se realiza por mtodos cinticos donde lo que se mide es
la variacin en la intensidad de color de la muestra a travs del tiempo.
A mayor diferencial entre ambas lecturas mayor ser la concentracin de creatinina.


Creatinina +Ac.Pcrico (en medio alcalino) complejo coloreado
(Se mide su produccin a travs del tiempo)
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MUESTRA: Suero. Para la determinacin de urea puede tambin utilizarse plasma, no as
para la creatinina.

ESTABILIDAD: 30 dias a 2-8C y 7 dias a temperatura ambiente.

SUSTANCIAS INTERFERENTES: Hemlisis, ictericia y lipemia.

VALOR DE REFERENCIA: CANINOS: hasta 1.5 mg/dl
FELINOS: hasta 1.5 mg/dl


Los incrementos observados en los valores de urea y creatinina srica, pueden deberse a
distintas causas como se describe a continuacin.

- Enfermedad prerrenal
Est causada por disminucin del flujo sanguneo a travs del rin secundaria a
deshidratacin e insuficiencia cardaca. La azotemia prerrenal debera estar acompaada por
incremento de la densidad urinaria, si no, hay enfermedad renal primaria concurrente

- Disminucin del flujo sanguneo renal
- Disminucin de la presin de filtracin glomerular
- Deshidratacin- Insuficiencia cardaca- shock

- Enfermedad renal (insuficiencia renal)
La azotemia primaria ocurre en el dao glomerular; la proteinuria tambin puede estar
presente en distinta intensidad segn el grado de insuficiencia renal.

-Enfermedad post-renal
La azotemia postrenal ocurre con la obstruccin uretral o luego de la ruptura de la vejiga
urinaria.
-Obstruccin del tracto urinario
- Ruptura del tracto urinario
- Ingesta elevada de protena (no creatinina)


La presencia de valores por debajo de los lmites inferiores, solo tienen importancia clnica
para el caso de la urea y esto puede observarse en:

- Insuficiencia heptica severa
- Ingesta baja de protenas
- Malabsorcin
- Sobrehidratacin


GLUCOSA:

La glucosa es un hidrato de carbono que constituye la principal fuente energtica del
organismo. La glucemia vara segn el momento del dia y en relacin con la alimentacin y el
ayuno, aunque siempre se mantiene dentro de un estrecho margen en condiciones de salud.
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Estas variaciones son debido al efecto combinado de la insulina, glucagn, epinefrina,
cortisol, etc.
Unas de las patologas ms comunes de observar en pequeos animales donde encontramos
una alteracin en los valores normales de glucemia (hiperglucemia) es la diabetes mellitus
donde la deficiencia relativa o absoluta de insulina conduce a la hiperglucemia.

La determinacin de GLUCEMIA se realiza a travs de mtodos enzimticos donde la
concentracin de glucosa sangunea es proporcional a la intensidad del color del producto
final de la reaccin.



Glucosa +O2+H20 GOD Ac.Glucnico +H2O2

H2O2+fenol +4AF POD Quinoneimina



MUESTRA: Suero o plasma (EDTA fluoruro)

ESTABILIDAD: Suero hasta 2 hs luego de extrada la muestra.
Con anticoagulante EDTA Fluoruro : 48hs a 2-8C


SUSTANCIAS INTERFERENTES : Hemlisis y lipemia.

VALOR DE REFERENCIA: CANINOS: 60 a 110 mg/dl
FELINOS: 70 a 110 mg/dl


La hiperglucemia suele ser consecuencia de las siguientes patologas:

- Diabetes mellitus
Pancreatitis aguda y crnica
- Excitacin, convulsiones, ejercicios (transitoria)
- Hiperadrenocorticismo
- Administracin de corticoides o ACTH
- Medicamentos: Infusiones glucosadas, morfina, estricnina, etc.
- Alimentacin reciente rica en carbohidratos


La presencia de hipoglucemia puede observarse en patologas tales como:

- Hiperinsulinismo: Inyeccin de insulina, tumor pancretico (clulas Beta)
- Hipoglucemia funcional
- Enfermedad por almacenamiento de glucgeno
- Hipoadrenocorticismo
- Hipotiroidismo
- Hipopituitarismo
- Insuficiencia heptica marcada
- Malnutricin


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PROTEINAS SERICAS:

Las protenas actan como elementos de transporte, estructurales, forman parte de enzimas,
hormonas, anticuerpos, factores de coagulacin, e intervienen en la regulacin de la presin
onctica.
La albmina y gran parte de las globulinas son producidas en el hgado, y en el sistema
retculo endotelial se produce una pequea parte de gammaglobulinas.
Las alteraciones en los niveles de protenas plasmticas no son indicadores de una patologa
especfica sino que nos indican alteracin de los tejidos responsables del balance entre la
sntesis y catabolismo, o prdida mecnica.
Para interpretar correctamente estas alteraciones deben ser evaluadas ambas fracciones
proteicas ya que una disminucin en una fraccin puede estar enmascarada con un aumento en
la otra.
Para la determinacin de PROTEINAS TOTALES y ALBMINAS se utilizan mtodos
colorimtricos de punto final donde la concentracin de stas es directamente proporcional a
la intensidad de color observado luego de la reaccin. La medicin de protenas totales puede
tambin obtenerse por refractometra.




PROTEINAS TOTALES (Reaccin de Biuret)

Protenas (sol. alcalina) con ion cprico Complejo color violeta

ALBUMINA

Albumina+BromoCresolsulfonFtaleina(BCF) Complejo color verde



MUESTRA: Suero

ESTABILIDAD: 72hs a 2-8C, 7 das en congelador .

SUSTANCIAS INTERFERENTES : Hemlisis, ictericia severa y lipemia.

VALOR DE REFERENCIA :

Protenas Totales Albmina
CANINOS: 5.7 a 7.5 mg/dl 2.4 a 3.6 mg/dl
FELINOS: 5.6 a 7.8 mg/dl 2.1 a 3.6 mg/dl


HIPERPROTEINEMIAS (En general Globulinas):
- Policitemia:
Deshidratacin
- Hiperproduccin de globulinas:
Respuesta a antgenos
Envejecimiento
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- Gammopatas:
Neoplasias: Linfoma , Mieloma mltiple
Enfermedad heptica
Infeccin- PIF

HIPOPROTEINEMIA (en general hipoalbuminemia):
-Hipoproduccin:
Edad
Malabsorcin intestinal
Mala digestin
Desnutricin
Hepatopata crnica
Neoplasia
-Prdida incrementada:
Enfermedad renal con proteinuria crnica
Lesin tegumentaria exudativa
Hemorragia externa
Enteropata perdedora de protenas


Bibliografa:

1) Benjamin, MM: Manual de Patologa clnica en Veterinaria

2) Willard; Tvedten, Turnwald: Diagnstico clnico por mtodos de laboratorio en pequeos
animales. Ed. Saunders.



ENZIMOLOGA CLNICA

Definicin:
Las enzimas son elementos de naturaleza proteica que catalizan reacciones dentro del
organismo que son esenciales para la vida. Se combinan en forma temporal con sustancias a
las cuales se las llama sustratos para formar un complejo enzima-sustrato. Cuando el complejo
se rompe quedan formados los productos de la reaccin y la enzima se libera para continuar
con su funcin cataltica.

Clasificacin de las enzimas de utilidad clnica:
Hay varias formas de clasificarlas, teniendo en cuenta el tipo de reaccin en la que intervienen
y la especificidad por un sustrato, segn el lugar donde ejercen su funcin, etc. Pero desde el
punto de vista clnico hay dos clasificaciones que cobran inters.










Segn su distribucin en los tejidos:
de alta especificidad: ALT SDH ARGINASA GLDH
de moderada especificidad: AST CPK GGT
de baja especificidad: FAS LDH

Segn su localizacin intracelular:
citoplasmticas: ALT LDH CPK SDH
mitocondriales: AST GLDH ARGINASA
ligadas a membrana: FAS GGT

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ALT (Alanin amino transferasa) o GPT (Glutamato pirvico transaminasa)
Interpretacin clnica:
De ubicacin citoplasmtica: indicadora de inflamacin, tumefaccin celular, daos que no
impliquen muerte celular.
De alta especificidad ya que la encontramos en: hgado.
Es afectada por drogas como: corticoides, andrgenos, estrgenos, antibiticos, anestsicos,
anticonvulsivantes. El uso prolongado de las mismas produce incrementos moderados tanto
por induccin enzimtica como por alteracin directa de los hepatocitos.
Es de diagnstico precoz, ya que la injuria que provoca su aumento es reversible y no implica
la muerte celular.
No tiene valor pronstico porque luego de una lesin alcanza valores mximos a los 3 4 das
y regresa a la normalidad entre los 10 y 15 das independientemente de la evolucin del
paciente.

Condiciones que debe reunir la muestra a remitir:
Recoleccin: se requiere suero obtenido de la manera usual.
Sustancias interferentes: los sueros con hemlisis o hiperlipemia visible producen falsos
incrementos en los valores de esta enzima por lo que no deben ser usados.
Estabilidad y almacenamiento de la muestra: el suero es estable hasta 3 das a temperatura de
4 C.



AST (Aspartato amino transferasa) o GPT (Glutamato oxalactico transaminasa)
Interpretacin clnica:
De ubicacin mitocondrial en un 90% y citoplasmtica en el 10% restante, por lo tanto es
marcadora de necrosis o muerte celular.
De moderada especificidad ya que la podemos encontrar en: hgado, corazn, msculo
esqueltico, rin , pncreas, cerebro, eritrocitos (muy poca cantidad).
Es afectada por drogas como: corticoides, andrgenos, estrgenos, antibiticos, anestsicos,
anticonvulsivantes. El uso prolongado de alguna de estas drogas produce incrementos de esta
enzima por induccin enzimtica y por un dao directo a la clula y est en relacin a la
fraccin citoplasmtica de la misma.
No es de diagnstico precoz porque la lesin que provoca su incremento es irreversible.
No tiene valor pronstico porque luego de una lesin alcanza valores mximos a los 3 - 4 das
y regresa a la normalidad entre los 10 y 15 das independientemente de la evolucin del
paciente.

Condiciones que debe reunir la muestra a remitir:
Recoleccin: se requiere suero obtenido de la manera usual.
Sustancias interferentes: los sueros con hemlisis o hiperlipemia visible producen falsos
incrementos en los valores de esta enzima por lo que no deben ser usados.
Estabilidad y almacenamiento de la muestra: el suero es estable hasta 3 das a temperatura de
4 C.


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FAS (Fosfatasa alcalina srica)
Interpretacin clnica:
Ligada a membrana:
En hgado se encuentra ligada a las membranas plasmticas de los hepatocitos que tapizan los
canalculos biliares. Es indicadora de colestasis intra o extra heptica ya que los aumentos en
la presin intracanalicular y la acumulacin de fosforilcolina estimulan la sntesis de esta
enzima que tiene como funcin hidrolizar los steres fosfricos de la colina. Por otro lado ante
un fenmeno colestsico se acumulan sales biliares que no pueden pasar a intestino y que
tienen un efecto detersivo barriendo las enzimas unidas a la membrana. A nivel seo la FAS
se encuentra unida a las membranas lisosomales de las clulas seas y su incremento est en
relacin a la mayor actividad de estas clulas en la produccin de tejido osteoide.
De baja especificidad: ya que la encontramos en: hgado, hueso, mucosa intestinal, placenta,
rin, bazo. Existe adems en caninos sobre todo una isoenzima que se expresa como
consecuencia de la exposicin a corticoides tanto endgena como exgena. Si bien la
separacin de las isoenzimas sera importante, los mtodos que existen para ello se aplican
para la investigacin y no son de uso comn en los laboratorios y por lo tanto lo que se mide
es la FAS total. Si embargo hay ciertos datos que nos pueden orientar. En caninos la vida
media no es la misma para todas las isoenzimas. La heptica, sea y la inducida por
esteroides tienen una vida media de aproximadamente 3 das. El resto tiene una vida media
de minutos y por lo tanto las patologas que asienten en esos rganos producirn incrementos
que no sern prolongados en el tiempo y que por lo tanto no tendrn un significado clnico
importante. Los mayores aumentos en la FAS total se deben a patologas hepticas y a
induccin por corticoides. Los incrementos en la FAS sea no son tan importantes ni en
situaciones fisiolgicas como el crecimiento ni en patologas que asienten a ese nivel. En los
felinos la situacin no es la misma ya que tienen muy poca cantidad de FAS por gramo de
hgado y la colestasis debe ser muy importante para que se vea reflejada por un incremento en
esta enzima, y tampoco es tan sensible como el canino a los corticoides ya sean endgenos o
exgenos.
Es afectada por drogas: anticonvulsivantes, estrgenos, andrgenos, antibiticos y por
corticoides como se mencion anteriormente.

Condiciones que debe reunir la muestra a remitir:
Recoleccin: se requiere suero obtenido de la manera usual.
Sustancias interferentes: la hemlisis visible o hiperlipemia produce falsos incrementos en los
valores de esta enzima.
Estabilidad y almacenamiento de la muestra: si la determinacin no puede realizarse en un
plazo de seis horas, la muestra debe congelarse ya que a temperatura ambiente o en
refrigerador a 4C hay aumentos de su actividad de 30 a 50% en 24 horas.

GGT (gamma glutamil transferasa)
Interpretacin clnica:
Ligada a membrana: indicadora de colestasis por los mismos mecanismos que la FAS.
De moderada especificidad: hgado, rin, pncreas
Afectada por drogas: corticoides, anticonvulsivantes. Si bien el uso de estas drogas puede
incrementar los valores sricos de GGT nunca en la misma magnitud que la FAS.

Condiciones que debe reunir la muestra a remitir:
Recoleccin: se requiere suero obtenido de la manera usual.
Sustancias interferentes: hemlisis visible e hiperlipemia producen falsos incrementos en los
valores de esta enzima.
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Estabilidad y almacenamiento de la muestra: el suero es estable hasta 2 semanas a temperatura
de 4 y ms a temperaturas ms bajas.

LDH (Lactato deshidrogenasa)
Interpretacin clnica:
Es de ubicacin citoplasmtica: no indica lesin celular irreversible.
De baja especificidad: todos los tejidos
Es de diagnostico precoz por tener una ubicacin citoplasmtica.
No tiene valor pronstico, luego de una lesin alcanza los mximos niveles a los 2-3 das.
permanecen elevados por 7-10 das y luego decrece.

Condiciones que debe reunir la muestra a remitir:
Recoleccin: se requiere suero obtenido de la manera usual y separado del cogulo dentro de
las 2 horas posteriores a la toma de la muestra.
Sustancias interferentes: la hemlisis o hiperlipemia visible produce falsos incrementos en los
valores de esta enzima.
Estabilidad y almacenamiento de la muestra: el suero es estable hasta 12 horas a temperatura
de 4C. No se aconseja congelar.

CPK ( Creatinin fosfoquinasa)
Interpretacin clnica:
Es de ubicacin citoplasmtica: no implica lesin celular irreversible
De moderada especificidad: msculo esqueltico, msculo cardaco, cerebro.
Es de diagnstico precoz: su aumento se asocia a procesos inflamatorios a nivel muscular
Tiene valor pronstico: luego de una lesin alcanza valores mximos a las 24-36hs y regresa a
la normalidad a los 4 das. El clnico puede solicitarla junto con la GOT para tener idea de la
gravedad del dao y para hacer un seguimiento de la evaluacin del paciente. Se sabe que un
aumento de moderado a alto de la GOT indican necrosis celular y que independientemente de
la evolucin del paciente esta enzima bajar a niveles normales en dos semanas
aproximadamente. Si en el transcurso de este tiempo la CPK retorna a niveles normales esto
indicar una buena evolucin del paciente, pero si la misma permanece elevada significar
que el proceso contina sin mejora.

Condiciones que debe reunir la muestra a remitir:
Recoleccin: se requiere suero obtenido de la manera usual.
Sustancias interferentes: la hemlisis o hiperlipmico visible produce falsos incrementos en
los valores de esta enzima.
Estabilidad y almacenamiento de la muestra: el suero es estable hasta 1 semana a temperatura
de 4C.

AMILASA
Interpretacin clnica:
Es una enzima de excrecin la cual es producida por las clulas y liberadas al espacio
extracelular.
De moderada especificidad ya que la encontramos en: pncreas, mucosa intestinal, glndula
salival, hgado.
Tiene valor pronstico: aumenta en las primeras 12 hs. , llega al mximo en 24 hs. y retorna a
la normalidad en 2-6 das.

Condiciones que debe reunir la muestra a remitir:
Recoleccin: se requiere suero obtenido de la manera usual.
Sustancias interferentes: evitar cualquier grado de hemlisis.
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Estabilidad y almacenamiento de la muestra: el suero es estable hasta 3 semanas a temperatura
de 4C.

LIPASA
Interpretacin clnica:
Es una enzima de excrecin la cual es producida por las clulas y liberada al espacio
extracelular.
De alta especificidad ya que se encuentra en pncreas y en muy poca cantidad en mucosa
intestinal
No tiene valor pronstico: aumenta mas tardamente que la amilasa y se mantiene elevada por
mas tiempo.

Condiciones que debe reunir la muestra a remitir:
Recoleccin: se requiere suero obtenido de la manera usual.
Sustancias interferentes: evitar cualquier grado de hemlisis.
Estabilidad y almacenamiento de la muestra: el suero es estable hasta 3 semanas a temperatura
de 4C.


BILIRRUBINA SRICA:
Breve recordatorio fisiolgico:
Los pigmentos biliares son un componente del flujo biliar que derivan del metabolismo de la
hemoglobina a partir de los glbulos rojos que han completado su ciclo en la circulacin.
Estos son captados por las clulas del sistema retculo endotelial del bazo, mdula sea e
hgado que transforman al grupo hem en bilirrubina. La de origen extraheptica se une a una
albmina en sangre para ser transportada al hgado en donde se conjuga con cido glucurnico
pasando de bilirrubina no conjugada o indirecta a bilirrubina conjugada o directa. Esta se
vuelca al intestino en donde por accin de la flora intestinal se transforma en urobilingeno.
Parte de este se elimina por materia fecal como estercobilingeno dando color a las heces,
mientras que un 10 a un 15% se reabsorbe y vuelve al hgado (circulacin entero-heptica).
De este porcentaje absorbido entre el 1 al 5% se elimina por rin como urobilingeno dando
color a la orina.


Interpretacin clnica:
La coloracin amarilla de los tejidos por concentracin aumentada de la bilirrubina en
cualquiera de sus formas, ya sea indirecta (no conjugada) o directa (conjugada) se denomina
ictericia y se reconocen tres formas de la misma: preheptica o hemoltica, heptica y
postheptica u obstructiva.
Ictericia preheptica o hemoltica:
En un cuadro hemoltico se produce un importante aumento de la bilirrubina indirecta (ms de
un 80% de la bilirrubina total) como consecuencia de la acelerada destruccin de glbulos
rojos. Aumenta la formacin de bilirrubina directa que pasa a intestino, aumenta tambin la
circulacin entero-heptica y la produccin de urobilingeno y estercobilingeno con
aumento en la coloracin de la orina y de la materia fecal. Si la hemlisis es muy importante o
se prolonga en el tiempo se producir una disminucin de la conjugacin heptica como
resultado de la hipoxia anmica que sufren los hepatocitos aumentando en circulacin no solo
la bilirrubina indirecta sino tambin la directa.
Ictericia heptica:
Se produce como consecuencia de un fenmeno colestasico, un estancamiento de la bilis en su
pasaje intra o extra heptico con retencin y regurgitacin a la sangre. En la estructura del
lobulillo heptico la bilirrubina indirecta es tomada y conjugada inicialmente por las clulas
14
que se ubican en la regin centrolobulillar y por lo tanto lesiones que asienten en esta zona
rara vez producen efecto sobre la circulacin biliar ya que el flujo biliar cruza el lbulo
heptico desde la regin centrolobular al rea periportal que es en donde se ubica el canalculo
biliar. En cambio las lesiones que afecten la zona periportal aunque leves producen severa
hiperbilirrubinemia. En esta forma de ictericia hay un aumento de bilirrubina total en sangre a
expensas de la bilirrubina directa que puede representar hasta un 60% de la bilirrubina total.
Hay un aumento en la eliminacin de bilirrubina directa en orina. Por otro lado disminuye el
aporte de bilis al intestino y la eliminacin de estercobilingeno con produccin de heces
hipoclicas. Disminuye la circulacin entero-heptica y la eliminacin de urobilingeno por
rion. Dependiendo de la gravedad del dao heptico y de su evolucin puede incrementarse
la bilirrubina indirecta por no poder conjugarse. Adems como consecuencia de la lesin
heptica tambin hay liberacin de enzimas hepticas a la circulacin.
Ictericia postheptica u obstructiva:
Cualquier patologa que provoque la compresin del ducto biliar llevar a una ictericia de este
tipo. Se producir un aumento de la bilirrubina total en sangre a expensas de la bilirrubina
directa, con aumento de la eliminacin de misma por orina. El flujo biliar est muy reducido o
ausente si la obstruccin es total con disminucin importante o falta de estercobilina y
produccin de heces aclicas y esteatorreicas por la falta de sales biliares, disminucin o
ausencia de circulacin entero-heptica y reducidas cantidades o falta de urobilingeno en
orina. Como consecuencia de la obstruccin hay un incremento de las enzimas de colestasis
(FAS; GGT).


Condiciones que debe reunir la muestra a remitir:
Recoleccin: se requiere suero obtenido de la manera usual, separado del cogulo dentro de
las 2 horas posteriores a la toma de la muestra y mantenerlo al abrigo de la luz.
Sustancias interferentes: la hemlisis visible produce falsos incrementos en los valores de esta
enzima.
Estabilidad y almacenamiento de la muestra: la determinacin debe efectuarse en lo posible de
inmediato, sino fuera posible conservar al abrigo de la luz y a temperatura de 4C no ms de
12 horas.




CALCIO-FOSFORO COLESTEROL-TRIGLICERIDOS


CALCIO:

INDICACIONES:
En pacientes con debilidad ,depresin , anorexia, vmito, estreimiento, polidipsia, poliuria
(Signos de Hipercalcemia)
En pacientes con intranquilidad, tremores musculares, fasciculaciones, calambres de
miembros posteriores, tetania o convulsiones.(Signos de Hipocalcemia)

ANALISIS
Medir 0.5 ml de suero, plasma heparinizado y orina mediante mtodos espectrofotomtricos.
La calcemia debe ser corregida mediante el uso de las siguientes frmulas (Feldman y Nelson)

Calcio corregido(mg/dl) =calcio medido (mg/dl) - albuminemia (gr/dl) +3.5

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Calcio corregido (mg/dl) =calcio medido (mg/dl) - {(0.4 x proteinemia (gr/dl)}+3.3


CAUSAS DE HIPOCALCEMIA EN CANINOS Y FELINOS
Endocrinas
*Hipoalbuminemia
*Hipoparatiroidismo
*Eclampsia
*Hiperparatiroidismo Secundario Renal debido a falla renal crnica
*Hipertiroidismo

Toxicidad
*Glicol de etileno
*Malabsorcin
*Hipomagnesemia
*Iatrognicas

CAUSAS DE HIPERCALCEMIA EN CANINOS Y FELINOS
*Cncer
*Hiperparatiroidismo primario
*Hipotiroidismo
*Hiperadrenocorticismo
*Hipervitaminosis D
*Falla renal
*Osteomielitis
*Hiperproteinemia


Valores Normales:
Perro: 8.0 - 12 mg/dl
Gato: 8.0 -12 mg/dl



FOSFORO:

INDICACIONES:
Las mismas indicaciones que para el calcio ,adems de hemlisis inexplicable, convulsiones o
aumento de la FA

CAUSAS DE HIPERFOSFATEMIA:
*Azotemia
*Hipoparatiroidismo primario
*Hiperparatiroidismo secundario nutricional
* Hipersomatotrofismo
* Hipertiroidismo
*Hipervitaminosis D
*Neoplasia sea
*Trauma de tejidos Blandos
* Iatrognica

CAUSAS DE HIPOFOSFATEMIA:
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* Pseudohiperparatiroidismo
*Hiperparatiroidismo primario
* Diabetes Mellitus
*Alcalosis
*Defectos Tubulares renales
*Hipovitamnosis D


Valores Normales:
Perro: 2.1 - 5.6 mg/dl
Gato: 2.6 6.0 mg/dl


COLESTEROL:

INDICACIONES:
En pacientes hiperlipidmicos o como una prueba selectiva para el hipotiroidismo e
hiperadrenocorticismo.En procesos colestsicos.

ANALISIS:
Medir en 0.5 ml de suero o plasma heparinizado mediante mtodos espectrofotomtricos,
cromatogrficos, automticos directos y enzimticos.

CAUSAS DE HIPERCOLESTEROLEMIA
*Dieta rica en grasa
*Hipotiroidismo
*Hiperadrenocorticismo
*Diabetes Mellitus
*Sindrome nefrtico
*Procesos colestsicos



CAUSAS DE HIPOCOLESTEROLEMIA
No es un problema frecuente, puede aparecer en pacientes con enteropatas perdedoras de
protenas, algunas hepatopatas, cnceres seleccionados y desnutricin grave.

Valores Normales:
Perro: 125 250 mg/dl
Gato: 70 150 mg/dl


TRIGLICERIDOS:

INDICACIONES: En pacientes con hiperlipidemia o hipercolesterolemia

ANALISIS:
Medir 0.5 ml de suero o plasma con EDTA mediante mtodos espectrofotomtricos o
enzimticos.

CAUSAS DE HIPERTRIGLICERIDEMIA
* Diabetes mellitus
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* Inanicin
* Hipotiroidismo
* Pancreatitis Aguda

Valores Normales:
Perro: 50 100 mg/dl
Gato: 50 100 mg/dl


Bibliografa:

1) Benjamin, MM: Manual de Patologa clnica en Veterinaria

2) Willard; Tvedten, Turnwald: Diagnstico clnico por mtodos de laboratorio en pequeos
animales. Ed. Saunders.



HEMOGRAMA:

El examen de sangre es una de los mtodos complementarios mas importantes, al que se
recurre rutinariamente en la clnica veterinaria. Por tal motivo es importante interiorizarse en
las tcnicas de las pruebas ms comunes y poder interpretar los valores obtenidos. Dentro de
las pruebas mas comnmente utilizadas en hematologa podemos citar:

-HEMATOCRITO (HTO, VCA)
-HEMOGLOBINA
-INDICE DE RETICULOCITOS
-RECUENTO DE LEUCOCITOS
-FROTIS SANGUINEO
-RECUENTO ABSOLUTO DE EOSINOFILOS (RAE)

HEMATOCRITO:
Los glbulos rojos pueden cuantificarse mediante el recuento celular, determinacin de
hemoglobina (Hb) y hematocrito (Hto.) o volumen celular aglomerado (VCA). Esta ltima
determinacin nos aporta en forma directa el porcentaje de eritrocitos circulantes y depende
tanto de la cantidad, tamao de los glbulos rojos como as tambin del volumen plasmtico.
La obtencin del hematocrito puede realizarse a travs de contadores celulares electrnicos
( a travs de la medicin del recuento medio de eritrocitos y del volumen celular medio). Otra
forma de obtener este dato es a travs de centrifugacin de sangre anticoagulada. Este es un
mtodo muy sencillo de realizar y posee una alta repetibilidad con errores que rondan entre el
1 y 2 %. Para esto se utilizan micro capilares de 75 mm por 1mm de dimetro que por
capilaridad se llenan con sangre previamente homogeneizada. Uno de sus extremos debe ser
sellado, el cual debe ubicarse en la parte externa del plato en la micro centrfuga. La
centrifugacin se realiza por el trmino de 5 minutos a 12000 rpm dando como resultado la
separacin en diferentes estratos: capa eritrocitaria, capa flogstica y plasma.
Aparte del volumen celular aglomerado puede obtenerse del tubo de microhematocrito datos
sobre espesor de la capa flogstica que en forma grosera mantiene una correlacin con el
recuento leucocitario total. Esta informacin puede verse falseada en casos de trombocitosis
pronunciadas o en reticulocitosis marcadas.
Tanto en caninos como felinos el plasma normalmente es transparente y de color mbar, por
tal motivo a travs de ste pueden observarse alteraciones tanto en el aspecto como el color
18
del plasma, las cuales deben observarse sistemticamente, ya que los cambios en la coloracin
del mismo pueden ser indicativos de distintas patologas.

Las variaciones en las coloracin normal del plasma se deben, principalmente al tipo de dieta
y a hemoconcentracin, lo que nos va a dar una variacin dentro de la gama del color mbar.
La presencia de plasmas ictricos, nos puede orientar hacia enfermedad heptica, obstruccin
biliar o a anemias hemolticas donde generalmente esta asociado con disminucin del
hematocrito.
En los casos de plasmas lipmicos debemos descartar en primer instancia el ayuno inadecuado
antes de la extraccin de la muestra, en caso de persistir, puede orientarnos hacia distintas
patologas como ser: diabetes mellitus, pancreatitis aguda, hipotiroidismo,
hiperadrenocorticismo o enfermedad heptica. La presencia de plasmas hemolizados suele
deberse a la incorrecta toma o conservacin de la muestras.
Otro dato que podemos obtener del microhematrocrito, es la observacin de microfilarias, las
cuales se depositan sobre la capa flogstica, observndose como formaciones refringentes con
gran movilidad.


VALORES DE REFERENCIA

CANINOS ADULTOS: 37-55 % CACHORROS: 30-50 %

FELINOS ADULTOS y CACHORROS: 28-45 %



En los cachorros, al momento del nacimiento pueden observarse valores similares al de los
adultos, pero inmediatamente sufre un descenso normal, llegando a los valores expresados
para cachorros, el que suele comenzar a aumentar con la incorporacin de dieta slida,
observndose ya entre los 8 y 10 meses de vida valores correspondientes a los adultos.
Como se mencion anteriormente el valor del hematocrito depende tanto de la cantidad y
tamao de los eritrocitos, en relacin al plasma. Por lo tanto pueden observarse valores que
superan los valores mximos normales en casos de: Policitemia vera, o en casos en casos
donde el volumen plasmtico se encuentra reducido (hemoconcentracin, deshidratacin).
La obtencin de valores inferiores a los normales se observa en todas las anemias donde el
valor del hematocrito se utiliza como uno de los elementos para determinar los ndices
hematimtricos que nos permitirn clasificar las anemias.


HEMOGLOBINA:
Como en esencia toda la hemoglobina est presente dentro de los eritrocitos, generalmente el
recuento eritrocitario, Hto y contenido de hemoglobina son paralelos entre s, excepto en
ciertas patologas donde existen alteraciones en la produccin de hemoglobina donde esta
proporcin se ve alterada. El contenido de hemoglobina se determina por mtodos
colorimtricos a partir de espectrofotometra; el mtodo mas utilizado es el de la
CIANOMETAHEMOGLOBINA, donde el reactivo de trabajo (FERROCIANURO) en
combinacin con la hemoglobina da una solucin coloreada, donde la intensidad del color
resultante es proporcional a la concentracin de Hemoglobina. Se utilizan los siguientes
volmenes:

5 ml reactivo (Ferrocianuro) +20 ul sangre

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Para la obtencin de valores confiables se utilizan estndar con concentraciones de
hemoglobina conocida.
VALORES DE REFERENCIA:

CANINOS 12 a 18 mg/dl
FELINOS 8 a 15 mg/dl

Los ndices que se obtienen a partir de la hemoglobina son los siguientes Concentracin de
hemoglobina corpuscular media ( CHCM) y Hemoglobina corpuscular media (HCM)
La CHCM representa la concentracin de Hb promedio dentro de los eritrocitos. Se calcula
dividiendo el valor de la Hb en g/dl por el Hto y multiplicando por 100.

INTERPRETACIN

Hipocrmica Normocrmica


Los valores incrementados de CHCM se deben a artificios y pueden ser originados por
procesos hemolticos en vivo o in vitro, lipemia o la presencia de cuerpos de Heinz.
En las muestras hemolizadas parte de la hemoglobina est libre en el plasma y al ser evaluada
sta en su totalidad produce un incremento en la CHCM, las muestras lipmicas producen un
aumento por la turbidez del plasma.
Los valores disminudos de CHCM suelen presentarse en los pacientes con anemia
regenerativa, en especial en aquellos con altos porcentajes de reticulocitos. Tambin en los
pacientes con deficiencia crnica de hierro suelen observarse CHCM inferiores a los valores
normales.


INDICE RETICULOCITARIO:
Los reticulocitos son eritrocitos anucleados inmaduros, que retienen material basfilo, el cual
se observa como un reticulado intracelular, producto del precipitado de los ribosomas durante
el proceso de tincin vital. Este precipitado no se observa en los frotis teidos con Giemsa.
Excepto en los equinos, grandes cantidades de reticulocitos son liberados en respuesta a la
anemia, tanto de origen hemoltico como hemorrgicos.
La presencia de reticulocitos en sangre perifrica constituye un valioso elemento de
pronstico para diferenciar anemias regenerativas de aquellas arregenerativas. La cantidad de
reticulocitos en sangre aporta datos sobre la intensidad de la respuesta medular

Para realizar la coloracin de reticulocitos (Tincin vital) se colocan partes iguales de sangre
y colorante (azul brillante de cresilo o nuevo azul de metileno), se incuba a 37 C por 15
minutos para luego realizar un extendido en un portaobjeto.
La lectura se realiza con objetivo de inmersin y se realiza la cuenta de reticulocitos en 500 a
1000 eritrocitos para luego extraer el porcentaje de los mismos. Dado a que este porcentaje no
es representativo para evaluar cuantitativamente la respuesta medular es que se utiliza a tal fin
el ndice reticulocitario que se obtiene segn la siguiente frmula.







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INDICE RETICULOCITARIO

RECUENTO ABSOLUTO= % reticulocitos x Hematocrito (Ht)

45(canino) 35(felino)

INDICE RETICULOCITARIO: Recuento absoluto

Vida media

Vida media: Ht Caninos Ht Felinos
45 1 35 1
35 1.5 25 1.5
25 2 15 2
15 2.5 10 2.5

VALOR DE REFERENCIA > = 1.8

Las anemias que cursan con ndices reticulocitarios inferiores a 1.8 se consideran
ARREGENERATIVAS. Cuando el ndice reticulocitario es superior a 1.8 se considera que la
anemia es REGENERATIVA.



RECUENTO DE LEUCOCITOS:
A diferencia de los hemates los leucocitos no exhiben un lapso vital en la sangre sino que la
abandonan al azar en respuesta a estmulos quimiotcticos. Su produccin y cintica depende
de las necesidades orgnicas como respuesta a ciertas noxas. Otras veces, su produccin
puede estar alterada como en el caso de alteraciones neoplsicas de clulas precursoras. Por
estos motivos que es fundamental realizar una evaluacin tanto del nmero total de leucocitos
como la evaluacin de los distintos tipos presentes.
El recuento total de leucocitos se basa en el recuento total de clulas nucleadas en sangre
perifrica. Existen en la actualidad mtodos electrnicos con resultados muy exactos y de alta
repetibilidad. Dentro del mtodo manual ms utilizado es el recuento en cmara (Neubauer).















21
Para realizar el recuento de leucocitos totales se realiza una dilucin 1:20 (muestra 20ul -
diluyente 380 ul) con diluyentes como: AC. ACETICO GLACIAL 2% o AC.
CLORHIDRICO 1% que tienen la particularidad de lisar los glbulos rojos.
Luego de realizar la dilucin y pasado el tiempo necesario para la lisis de los eritrocitos (1
minuto) se realiza la carga de la cmara con pipeta y se espera que las clulas sedimenten para
realizar la lectura. El recuento se realiza con objetivos de poco aumento 10x o 20 x y se
cuentan las clulas de cada uno de los cuatro cuadrados grandes de las esquinas. Debe evitarse
el recuento doble de clulas que estn en contacto con las lneas de la cmara, por lo que se
sugiere la siguiente regla. Se cuentan las clulas que estn en contacto con las lneas internas
superior e izquierda y no se cuentan las clulas que contactan con las lneas internas inferior
y derecha.













Si en el recuento se obtiene una diferencia superior al 20% (aproximadamente) de clulas en
cada cuadrado debe realizarse nuevamente el procedimiento por la incorrecta distribucin de
clulas.
Una vez hecho el recuento se aplica la siguiente frmula.



FORMULA

LEUCOCITOS/mm3=

CELULAS CONTADAS X 20 (DILUCION) X 10 (CAMARA)
4 (CUADRADOS CONTADOS)



VALORES DE REFERENCIA

CANINOS 6000 A 17000 /mm3
FELINOS 5500 A 19500 /mm3

El error del recuento en cmara es de alrededor del 20 %. En los recuentos muy altos
( mayores a 80000/mm3) debe realizarse una dilucin mayor de la muestra para poder realizar
el recuento leucocitario.

INTERPRETACIN: LEUCOCITOSIS- LEUCOPENIA

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Las leucocitosis se presentan comnmente como leucocitosis neutroflica debido a que este
tipo celular es el predominante en sangre perifrica en caninos y felinos. Se debe
generalmente a la respuesta medular en casos de tipo infecciosos, txicos, qumicos y en
respuestas a enfermedades sistmicas.
Las leucopenias pueden deberse a la reduccin total de leucocitos o como ocurre
frecuentemente a la disminucin marcada de uno de los tipos celulares, generalmente
neutrfilos, por ser las clulas que se presentan en mayor cantidad. Esta es una respuesta
comn de observar en ciertas enfermedades virales o como respuesta a aplasia medular sea
medicamentosa , txica o por neoplasias hematopoyticas.


FROTIS SANGUINEO:
Para completar la evaluacin de las clulas sanguneas es necesario recurrir al examen del
frotis sanguneo el cual nos aporta datos de gran valor como ser:


ERITROCITOS:
TAMAO
FORMA
COLOR
PUNTILLADO BASOFILO
CUERPOS DE HOWELL-JOLLY
ERITROCITOS NUCLEADOS
RETICULOCITOS
CUERPOS INCLUSION (MOQUILLO)

LEUCOCITOS:
TAMAO
CITOPLASMA: COLOR - GRANULOS - VACUOLAS
NUCLEO : FORMA COLOR - NUCLEOLOS
CUERPOS INCLUSION (MOQUILLO)

TROMBOCITOS (PLAQUETAS) : CANTIDAD TAMAO - DISTRIBUCION

PARASITOS : HAEMOBARTONELLA - BABESIAS - HEPATOZOON

Los extendidos sanguneos deben ser delgados para obtener una distribucin de clulas en
monocapa y luego de confeccionarse deben ser secados al aire para posteriormente teirlos.
Para este fin se utilizan tinciones del tipo de ROMANOWSKY que estn basadas en
colorantes como el Azul de metileno y Eosina.



-TINCION DE GIEMSA
FIJADOR: ALCOHOL METILICO
COLORANTE : GIEMSA

- T15 (tincin rpida)

Es fundamental la correcta identificacin del frotis por lo cual se hace imprescindible
rotularlo.
23
Para realizar la correcta evaluacin del frotis debe observarse en primera instancia con
objetivo de menor aumento para observar la distribucin celular, acmulos celulares,
plaquetarios etc.
El recuento diferencial de leucocitos se realiza mediante la cuenta de 100 leucocitos anotando
los distintos tipos celulares encontrados. Para evitar un recuento errneo a causa de la
distribucin despareja de los distintos tipos celulares, es que se proponen diferentes formas de
realizarlo, como se muestra en el siguiente grafico.














DATOS A OBTENER RECUENTO DIFERENCIAL (distintos tipos celulares)

RELATIVO ( % ) ABSOLUTO (mm3)


El recuento absoluto para cada tipo celular , que es el que nos aporta la mayor informacin
diagnstica, se obtiene multiplicando los distintos valores relativos por el nmero total de
leucocitos.
Cuando se observa en el frotis gran cantidad de eritrocitos nucleados, como suele observarse
en anemias severas, debe realizarse la correccin de leucocitos totales, ya que en stos fueron
incorporados eritrocitos nucleados en el recuento en cmara, lo que alterara el recuento
absoluto de los distintos tipos de leucocitos. Para la correccin se utiliza la siguiente frmula.


CUENTA LEUCOCITARIA CORREGIDA.

CUENTA OBSERVADA x 100

100 +% ERITROCITOS NUCLEADOS




RECUENTO ABSOLUTO DE EOSINOFILOS:
Si bien el recuento relativo de eosinfilos se realiza habitualmente como el del resto de tipos
celulares a partir del recuento leucocitario total y el diferencial a partir del examen del frotis
sanguneo, es comn que se solicite el recuento absoluto de estas clulas, sobre todo ante la
sospecha de hiperadrenocortisismo, as tambin como control del tratamiento de esta
enfermedad. Para tal motivo se realiza el recuento en cmara (Fuchs Rosenthal) donde los
valores obtenidos suelen ser mucho ms exactos que los obtenidos a partir del frotis
sanguneo.
4399
24

TECNICA

Se utiliza como diluyente una solucin a base de eosina y acetona que tiene como fin lisar las
clulas y teir los grnulos eosinoflicos.
La dilucin utilizada es de 1:20 (muestra 20ul y 380 ul )
Se realiza el recuento en cmara contabilizando la totalidad de su superficie, obteniendo la
cantidad de eosinfilos por mm3 a partir de la siguiente formula.


FORMULA N de Eosinfilos x 6.25 = Eo/mm3




VALORES DE REFERENCIA
CANINOS 100 a 1250/mm3
FELINOS 0 a 1500/mm3

Bibliografa:

1) Benjamin, MM: Manual de Patologa clnica en Veterinaria

2) Willard; Tvedten, Turnwald: Diagnstico clnico por mtodos de laboratorio en pequeos
animales. Ed. Saunders.


ALTERACIONES EN LOS GLOBULOS BLANCOS:

- Introduccin:
La evaluacin de un frotis sanguneo es una rpida fuente de abundante
informacin, y por lo tanto, debe ser parte de la rutina de un laboratorio clnico. A partir del
mismo podemos obtener datos sobre los eritrocitos, leucocitos y plaquetas.
Para realizar un correcto anlisis de un frotis debemos dirigirnos hacia la porcin terminal del
mismo, que es la porcin ms delgada, donde las clulas se encuentran en una monocapa y
por lo tanto se tien mejor permitiendo una buena evaluacin de los detalles citoplasmticos y
nucleares.

- Datos que obtengo sobre los leucocitos a partir de la lectura de un frotis:

A) Frmula leucocitaria relativa

B) Morfologa leucocitaria:
1) Morfologa celular normal

2) Alteraciones no neoplsicas:
a- Desvos a la izquierda
b- Neutrfilos txicos
c- Inclusiones intracitoplasmticas
d- Linfocitos reactivos

3) Alteraciones neoplsicas:
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a- Linfoma
b- Leucemias
c- Mieloma


A) Frmula leucocitaria relativa:
La misma se determina contando 100 glbulos blancos (o
ms), sacando el porcentaje de cada uno de los leucocitos observados ( neutrfilos, linfocitos,
monocitos, etc). Recordar que tanto en caninos como en felinos el neutrfilo segmentado es la
clula blanca que se presenta normalmente en mayor cantidad en un frotis sanguneo.
Cual es la utilidad de la frmula leucocitaria relativa? Multiplicando cada uno de los
porcentajes de los distintos tipos celulares por el recuento absoluto de glbulos blancos
(expresado en mm3) obtenemos la frmula leucocitaria absoluta que es la que tiene real
valor al momento de evaluar un aumento o disminucin de cada tipo celular.

B) Morfologa leucocitaria:

1) MORFOLOGA CELULAR NORMAL:
Para poder evaluar las alteraciones
morfolgicas en los leucocitos debemos reconocer las caractersticas celulares normales.
Siendo el neutrfilo la clula que sufre mayores modificaciones no slo en su morfologa sino
en los distintos estados madurativos que pueden aparecer en un frotis sanguneo nos
detendremos en esta lnea celular. Slo marcar algunas caractersticas diferenciales a tener en
cuenta para su identificacin; recurrir a la bibliografa para ms detalles.
Recordar que dentro de la serie del neutrfilo en sangre perifrica en condiciones normales
podemos encontrar : neutrfilos segmentados y neutrfilos en banda (estos ltimos hasta
300/mm3 tanto en caninos como en felinos), pero en condiciones patolgicas (tanto
neoplsicas como no neoplsicas) pueden aparecer todas las clulas de la progenie del
neutrfilo.
Por esta razn veremos cuales son esas clulas y que detalles debemos recordar para
reconocerlas.


MIELOBLASTO

PROMIELOCITO

MIELOCITO NEUTRFILO

METAMIELOCITO NEUTROFILO

NEUTROFILO EN BANDA

NEUTROFILO SEGMENTADO


MIELOBLASTO: es la ms inmadura reconocible morfolgicamente. Es una clula grande,
de forma redondeada o irregular.
Ncleo redondo, cromatina laxa finamente punteada con uno ms nucleolos o anillos
nucleolares.
Citoplasma abundante , se tie con leve basofilia. No presenta grnulos citoplasmticos.

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citoplasma

nucleolo
ncleo
PROMIELOCITO PROGRANULOCITO: es una clula de tamao similar o ms grande
que el mieloblasto.
Ncleo redondeado con cromatina finamente punteada, sin nucleolos.
El citoplasma es abundante, bien basfilo y con granulaciones azurfilas. Estas
granulaciones son inespecficas y desaparecen al dividirse para dar origen al mielocito. stas
son la principal elemento para reconocer al promielocito.


Granulaciones azurfilas
citoplasma

ncleo



MIELOCITO, METAMIELOCITO, N. EN BANDA, N. SEGMENTADO: a partir del
mielocito neutrfilo y hasta el neutrfilo segmentado inclusive, todas las clulas tienen un
tamao similar (12-15u), con un citoplasma casi indistinguible, puesto que las granulaciones
neutroflicas en caninos y felinos no son visibles. Por lo tanto el nico elemento que me
permite diferenciarlas es la forma del ncleo, puesto que la condensacin de la cromatina de
las mismas tambin es similar.

CARACTERISTICAS DE LOS NUCLEOS:

MIELOCITO: es oval, desplazado hacia un costado del citoplasma y puede presentar una
pequea indentacin.
citoplasma

ncleo




METAMIELOCITO: puede ser arrionado (la indentacin del ncleo se hace ms profunda)
en forma de masa

citoplasma




ncleo



NEUTROFILO EN BANDA: ncleo en forma de herradura o de S

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citoplasma



ncleo
NEUTROFILO SEGMENTADO: ncleo polimrfico con mltiples lobulaciones

citoplasma




ncleo


2) ALTERACIONES NO NEOPLSICAS:
a- DESVOS A LA IZQUIERDA:
Recordar que las nicas clulas de la
serie del neutrfilo que normalmente aparecen en un frotis sanguneo son los neutrfilos
segmentados y los en banda (stos ltimos hasta 300/mm3). Cuando comienzan a aparecer
clulas ms inmaduras (metamielocitos, mielocitos, etc) nos encontramos con los llamados
desvos hacia la izquierda (ya vistos en medicina V). Estos desvos estn asociados a
procesos inflamatorios o infecciosos.
Recordaremos brevemente las caractersticas de los mismos:

DESVIOS A LA IZQUIERDA

REGENERATIVO: Casi siempre cursa con neutrofilia
N. SEGMENTADOS > FORMAS JUVENILES (a la sumatoria de las mismas)


DEGENERATIVO: Puede cusar con neutrofilia, recuento normal o neutropenia.
N. SEGMENTADOS < FORMAS JUVENILES

Siempre es de peor pronstico si cursa con neutropenia porque indica agotamiento o
inhibicin medular

REACCION LEUCEMOIDE:

- Cursa con recuento leucocitarios >a 70000 /mm3
- Recuento de neutrfilos >a 50000/mm3
- Cambios txicos en la morfologa
- Diferenciar con una leucemia mieloide crnica

COMO DIFERENCIAR UNA LEUCEMIA MIELOIDE CRNICA
DE UNA REACCION LEUCEMOIDE

R. LEUCEMOIDE L. MIELOIDE CRNICA

Neutrfilos txicos + -

Respuesta a Antibiticos + -
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Tincin citoqumica
(fosfatasa alcalina) - +



b- NEUTRFILOS TXICOS:
Son una variedad de alteraciones
morfolgicas que sufren los neutrfilos y que nos dan una idea de la severidad de una
infeccin, una quemadura extensa o una toxemia (tanto bacteriana como de otro tipo) .
Estas clulas txicas tienen una menor capacidad funcional, por lo tanto si su nmero es muy
elevado se encuentra comprometida la defensa del animal.
Se reconocen dos causas bsicas de los cambios producidos en las clulas:



NEUTROFILOS TOXICOS

- Defectos madurativos :
- Basofilia citoplasmtica
- Granulaciones txicas
- Clulas gigantes
- Cuerpos de Dhle

- Efectos txicos :
- Citoplasma vacuolado o espumoso

- DEFECTOS MADURATIVOS: los cuales se manifiestan como un asincronismo en la
maduracin de ncleo y citoplasma
- Basofilia citoplasmtica: se observa como un citoplasma azul difuso. Recordar que
esta caracterstica es normal en las clulas inmaduras (mieloblasto y progranulocito), pero se
la considera un cambio txico cuando lo observamos en clulas ms maduras. Esta basofilia
es debida a la retencin de ribosomas y retculo endoplsmico rugoso y es indicativa de un
deterioro en la maduracin celular.
- Granulaciones txicas: representan las granulaciones primarias observadas en los
promielocitos, las cuales normalmente, al madurar la clula pierden su capacidad tintorial.
Son granulaciones de color rojizo y representan mucopolisacridos que son retenidos. Es un
cambio que se observa con mucha frecuencia en caninos.
- Clulas gigantes: son debidas a un asincronismo entre la maduracin del ncleo y el
citoplasma. O sea se produce maduracin del citoplasma en el mielocito pero sin divisin
nuclear. En raros casos puede producirse un doble ncleo. Son clulas semejantes en
apariencia a las clulas normales pero con un tamao aproximadamente el doble de lo normal.
Es mucho ms frecuente de observar en felinos.
Tambin puede ocurrir que el ncleo comience a madurar con la formacin de una cavidad
central: ncleo en anillo.
- Cuerpos de Dhle: son pequeas reas de basofilia citoplasmtica que resultan de la
agregacin aberrante de lminas de retculo endoplsmico rugoso. Son frecuentes de observar
en felinos sin estar asociada a procesos infecciosos o txicos, por ejemplo en una
granulopoyesis aumentada.

- EFECTOS TXICOS: son efectos degenerativos de las clulas circulantes ocasionados
por productos txicos.
29
- Citoplasma vacuolado o espumoso: refleja un cambio autoltico, debido a la ruptura
de lisosomas o al escape de enzimas hidrolticas bajo la influencia de toxinas bacterianas .Es
muy comn de observar en pacientes con toxemia o septicemia. Dan un aspecto de apolillado
al citoplasma.

En caninos el cambio txico ms frecuente son las granulaciones txicas, mientras que en
felinos la basofilia y las clulas gigantes.


c- INCLUSIONES INTRACITOPLASMTICAS:
En algunas ocasiones pueden
observarse inclusiones en los neutrfilos durante el recuento diferencial rutinario que
posibilitan una diagnstico etiolgico especfico. Estas inclusiones se pueden relacionar con
virosis, rickettsiosis, o protozoariasis.

INCLUSIONES INTRACITOPLASMATICAS

a- MOQUILLO CANINO

b- HEPATOZOON

c- EHRLICHIA

a- Moquillo canino: en general son poco frecuentes de observar. Aparecen en los estados
iniciales de la enfermedad, aunque han sido vistas en perros poco despus de la vacunacin.
Son estructura redondeadas, ovales o irregulares de distintos tamaos, de color rosado o
basfilo plido. Se las localiza en el citoplasma de los leucocitos (neutrfilos, linfocitos,
monocitos) y/o eritrocitos.
Cuando aparecen (y habiendo descartado una vacunacin reciente) son patognomnicas.

b- Hepatozoon: los gametocitos de este parsito de la familia de los coccidios pueden ser
observados en el citoplasma de los neutrfilos y/o monocitos.
Son de forma bacilar, de gran tamao (5 x 10 u), ocupando gran parte del citoplasma de las
clulas infectadas, presentan una gran cpsula y en su interior se observa el gametocito en
color azulado. Las parasitemias son bajas , slo 1 2 clulas cada 1000 leucocitos, por lo
cual se aconseja realizar la bsqueda en frotis hechos a partir de la capa flogstica .

c- Ehrlichia sp.: es una rickettsia que puede observarse en los distintos tipos de leucocitos,
sobre todo en los monocitos y neutrfilos (segn la especie de Ehrlichia).
Son estructuras moruladas intracitoplasmticas de color eosinoflico o azul grisceo. No es
fcil observarlas ya que aparecen en forma transitoria y en bajo porcentaje, por lo cual se
aconseja, buscarlas en la capa flogstica.


d- LINFOCITOS REACTIVOS:
Son linfocitos inmunoestimulados, que aparecen en
pacientes con una fuerte estimulacin antignica (p.ejemplo: enfermedades virales,
autoinmunes), pero son inespecficos etiolgicamente. Tambin es comn de observar en
animales posvacunacin.
Estos linfocitos generalmente son de un tamao mayor al normal, con un citoplasma teido de
azul intenso (debido al aumento de sntesis proteica), con un ncleo que a veces puede ser
30
irregular, e incluso en algunos casos puede observarse una transformacin blstica del
mismo: ncleo grande, con cromatina laxa y nucleolo




3) ALTERACIONES NEOPLSICAS:

Los tumores hematopoyticos se dividen en dos grupos segn la clula de origen:

* T. LINFOPROLIFERATIVOS:

LINFOMA

LEUCEMIA LINFOIDE

MIELOMA MULTIPLE


* T. MIELOPROLIFERATIVOS :

LEUCEMIAS:
- MIELOIDE
- MONOCITICA
- MIELOMONOCITICA
- ERITROLEUCEMIA
- MEGACARIOCITICA


a- LINFOMA:
Es una neoplasia hematopoytica caracterizada por la multiplicacin de
clulas neoplsicas de origen linfoide localizadas en rganos slidos (ganglio, hgado,
bazo, etc )

Caractersticas diferenciales entre el linfoma canino y felino


CANINOS

FELINOS
Etiologa Multifactorial

70% casos: Vilef (+)
Edad Antes: >7 aos
Actualmente: se ve con
frecuencia en animales jvenes
(2 3 aos)

Bimodal:
2- 3 aos: Vilef (+)
>8 aos: Vilef (-)
Formas clnicas
ms frecuentes
80% MULTICNTRICO
Digestivo
Cutneo
Mediastnico
1/3 DIGESTIVO
25-30% Vilef (+)
1/3 MEDIASTINICO
80% Vilef (+)
1/3 Restante:
Multicntrico
31
Extranodal





DIAGNOSTICO:
CANINOS:
1) Exmen clnico: tener en cuenta que el 80 90% de los casos son multicntricos, por lo
tanto presentarn todos o la mayora de los ganglios superficiales aumentados, y
generalmente el estado del paciente es excelente
Recordar: NO EXISTE OTRA PATOLOGIA QUE CURSE CON LINFADENOPATIA
SUPERFICIAL GENERALIZADA CON EXCELENTE ESTADO GENERAL.
2) Puncin ganglionar con aguja fina: 80- 90% casos es confirmativa (poblacin
monomrfica de linfoblastos)
3) En caso de dudas con respecto al resultado de la citologa indicar biopsia y estudio
histopatolgico.
Recordar que son muy pocos los casos de linfoma que leucemizan por lo tanto el
hemograma y la puncin de mdula sea dan idea de la extensin de la enfermedad pero
no son confirmativas del diagnstico.

APROXIMACION DIAGNSTICA AL LINFOMA EN FELINOS:
1) Mediastnica:
- Edad (animales jvenes)
- Alta incidencia de VILEF (+) (80%)
- Examen fsico: importante masa palpable en mediastino anterior
- Radiografa de trax
- Anlisis de lquido pleural. La presencia de linfocitos/linfoblastos en el mismo
es confirmativo de linfoma.
2) Digestiva:
- Edad (animales adultos)
- Baja incidencia de VILEF (-) (25- 30%)
- Examen fsico y signos clnicos
- Radiografa y ecografa abdominal
-Laparatoma e histopatologa: es confirmativa, aunque generalmente es
postmortem.

QU GANGLIOS PUNZAR SI SON VARIOS LOS AFECTADOS?
32
1) Siempre punzar 2 ganglios que estn alejados entre si
2) Descartar en lo posible los submaxilares (por ser la primera barrera de defensa del
organismo).
3) No elegir los ms grandes porque puede existir mucho material necrtico.
TRATAMIENTO DE LINFOMA

Al ser el linfoma una patologa potencialmente sistmica el tratamiento de eleccin es la
quimioterapia

QUIMIOTERAPIA Monodrogas

Poliquimioterapia Eleccin porque:

1) Remisiones completas y ms prolongadas
2) Tiempos de sobrevida mayores


MUY IMPORTANTE: NUNCA INICIAR UN TRATAMIENTO DE LINFOMA CON
CORTICOIDES SOLAMENTE YA QUE INDUCEN RESISTENCIA A LA
APLICACIN DE POLIQUIMIOTERAPIA, FAVORECEN LAS RECAIDAS,
ACORTAN LA SOBREVIDA

FASES DEL TRATAMIENTO:

1-INDUCCIN: Remisin completa


2- MANTENIMIENTO

Recada

3- RESCATE

FASE DE INDUCCIN:

VINCRISTINA: 0,5 mg/m2/endovenoso cada 7 das durante 8 semanas.

CICLOFOSFAMIDA: 50 mg/m2/oral/4 das por semana durante 8 semanas

PREDNISONA: 40 mg/m2/oral/dia durante 7 das y luego 20 mg/m2/oral/dia por medio
durante 7 semanas ms.

FASE DE MANTENIMIENTO: 1 ETAPA: 12 SEMANAS
Dosis: Vincristina: 0,5 mg/m2
Ciclofosfamida: 50 mg/m2
Prednisona: 20 mg/m2

Semanas 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
VINCRISTINA X X X X X X
CICLOFOSFAMIDA X X X X X X
33
PREDNISONA X X X X X X X X X X X X





FASE DE MANTENIMIENTO: 2 ETAPA: 18 SEMANAS
Dosis : igual que en la 1 etapa

Semanas 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18
VINCRISTINA X X X X X X
CICLOFOSFAMIDA X X X X X X
PREDNISONA X X X X X X X X X X X X X X X X X X


FASE DE MANTENIMIENTO: 3 ETAPA: SEGUIR HASTA RECAIDA
Dosis: igual que en la 1 etapa

Semanas 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18
VINCRISTINA X X X X X
CICLOFOSFAMIDA X X X X X
PREDNISONA X X X X X X X X X X X X X X X X X X


b- LEUCEMIAS:
Neoplasias hematopoyticas que se originan en mdula sea.
Segn tengan expresin en sangre perifrica se denominan:

- L. Aleucmicas
- L. Subleucmicas
- L. Leucmicas

Clasificacin:

- Segn su origen:
- Linfoides
- Mieloides:
_ Mieloctica
_ Monoctica
_ Mielomonoctica
- Segn su curso:
- Agudas
- Crnicas


Datos de laboratorio en las leucemias

AGUDAS CRONICAS

Anemia +++ Ausente o Leve

Trombocitopenia +++ Ausente o Leve
34

Rec. Glob. Blancos Normal, alto bajo Generalmente alto



CARACTERSTICAS CITOLGICAS EN MDULA SEA Y SANGRE EN LAS
LEUCEMIAS:

* LEUCEMIAS AGUDAS:

Clulas escasamente diferenciadas (BLASTOS)

Difcil identificacin con los colorantes habituales (Giemsa)

Se necesitan tinciones especiales (citoqumicas)

En mdula sea: infiltracin >30% blastos


* LEUCEMIAS CRONICAS:

Clulas con morfologa similar a las maduras normales pero afuncionales

Fcilmente identificables con los colorantes habituales (Giemsa, T 15)


Tincin citoqumica para diferenciar blastos en sangre periferica y/o mdula sea:


TINCION DE MIELOPEROXIDASA
(+) (-)
Mieloide Linfoide

Recordar que en las leucemias agudas es fundamental:

- Usar tinciones citoqumicas para clasificar los blastos.
- En el hemograma : hematocrito
hemoglobina
ndice de reticulocitos
frotis: plaquetas, glbulos rojos y blancos
- Puncin de mdula sea sobre todo en las formas aleucmicas o
subleucmicas


Frecuencia de presentacin de leucemias:

AGUDAS CRONICAS

CANINOS LMA > LLA LLC > LMC
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FELINOS LMA > LLA LLC y LMC: MUY RARAS



TRATAMIENTO DE LAS LEUCEMIAS:

1) AGUDAS:

- LINFOIDE: C.O.P. + L- ASPARAGINASA


- MIELOIDE: - ARABINOSIDO DE CITOSINA: 5 10 mg/m2 /12 hs subcutnea
durante 2 a 3 semanas y luego a semanas alternas.

- DOXORRUBICINA: 30 mg/m2 /endovenoso; una aplicacin cada 20
das

- PREDNISOLONA: 40 mg/m2/dia/oral durante 7 das y luego 20
mg/m2/dia por medio.

TIENEN MUY MALA RESPUESTA AL TRATAMIENTO


2) CRONICAS:
NO SE TRATAN SALVO EN LAS CRISIS BLASTICAS O CUANDO
HAY GRAN COMPROMISO ORGANICO.
Largo tiempo de sobrevida, sobretodo en las linfocticas.


c- MIELOMA:
El Mieloma mltiple (MM) es una neoplasia de linfocitos B
normalmente comprometidos con la produccin de inmunoglobulinas. Se caracteriza por
infiltracin plasmocitaria de mdula sea (MO), pudiendo o no ser acompaada por la
produccin y secrecin de una inmunoglobulina monoclonal completa o fraccin de la misma,
identificable y mensurable en suero y/u orina (protena de Bence Jones), mediante
electroforesis y por lesiones de tipo osteoltica. El cuadro clnico es muy variable e incluye
lesiones asociadas a la infiltracin de clulas plasmticas y a la secrecin de
inmunoglobulinas.


DATOS DE LABORATORIO ASOCIADOS A MIELOMA:

1) Anemia

2) Presencia de clulas plasmticas en sangre y mdula sea

3) Trombocitopenia y trombocitopata

4) Hipercalcemia

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5) Presencia de Ig A Ig G monoclonal

6) Protena de cadena liviana en orina (Protena de Bence Jones)

7) Disminucin de los niveles plasmticos de globulinas
CARACTERISTICAS DE LA MEDULA OSEA EN EL MIELOMA

- INFILTRACION DE CELULAS PLASMATICAS (+15%)

- CARACTERISTICAS CELULARES:
Clulas bien diferenciadas, generalmente agrupadas
Clulas inmaduras, multinucleadas
Clulas en llama

- LA PRESENCIA DE CELULAS PLASMATICAS EN MEDULA OSEA NO
ES PATOGNOMONICO DE MIELOMA


CRITERIOS PARA EL DIAGNOSTICO DE MIELOMA:

1) ALTERACIONES EN LA CITOLOGIA MEDULAR (+ de un 15% de clulas
plasmticas en mdula sea)

2) LESIONES OSTEOLITICAS RADIOLOGICAS (<50% casos)

3) PRESENCIA DE GAMOPATIA MONOCLONAL (>75% casos)

4) PROTEINURIA DE BENCE JONES (30-40% casos)

Para confirmar un diagnstico de mieloma debe cumplirse siempre el primer criterio
(infiltracin plasmocitaria en mdula sea) ms uno ms de los otros tres criterios.

TRATAMIENTO DEL MIELOMA:

1) MELFALAN: 0,1 mg/Kg /oral/ 1 vez al dia durante 10 das y luego 0,05 mg / kg dia por
medio continuamente.

2) PREDNISOLONA: 0,5 mg/kg/oral una vez al da durante 10 das y luego dia por medio
durante 30 a 60 das.




ALTERACIONES DE LOS GLOBULOS ROJOS:

Normalmente el Pronormoblasto tarda 72 horas en madurar a reticulocito y ste 48 horas ms
en llegar a eritrocito. La vida media del eritrocito es de 110 a 122 das en el perro y de 68 das
en el gato.
La morfologa normal de un eritrocito vara segn la especie: en el perro tiene forma
bicncava, con un borde rosado en donde se ubica la hemoglobina y un centro plido; su
tamao es de aproximadamente 7 En cambio los eritrocitos del gato son de menor tamao,
5.8 , similares a los linfocitos y no presentan una forma bicncava ya que la hemoglobina
37
se distribuye en forma pareja por toda la clula. Debido a esto, es imposible poder determinar
la presencia de esferocitosis en los felinos.
Para estudiar a los glbulos rojos se debe realizar un frotis de sangre perifrica confeccionado
de manera finita y debemos ir al extremo ms delgado, ya que en esa zona las clulas no van a
estar superpuestas. Se deben mirar con objetivo de inmersin y aceite, haciendo que el
microscopio tenga una buena cantidad de luz.
A los eritrocitos se les estudia:
1. Tamao
2. Forma
3. Color
4. Estados anormales
5. Formas anormales

1. Tamao: Las variaciones que puede sufrir el eritrocito en su tamao recibe el nombre
de anisocitosis.. Segn esta clasificacin podemos hablar de eritrocitos normocticos cuando
tienen un tamao normal, microcticos si son ms pequeos y macrocticos cuando son mas
grandes que el tamao normal para la especie.

2. Forma: Las variaciones que puede sufrir el eritrocito en su forma reciben el nombre
de poiquilocitosis. Dentro de esta patologa hay una gran variedad, las ms frecuentes son:
Clulas blanco, codocitos o target cell: son eritrocitos con una zona central redondeada de
material pigmentado la cual esta rodeada por una zona clara sin pigmento, con un anillo
denso de citoplasma cerca de la periferia del eritrocito.
Esferocitos: son clulas de menor tamao y con una distribucin anormal de la hemoglobina,
ya que no presentan una forma bicncava, se asemejan a los eritrocitos del gato. Estas clulas
aparecen en las anemias hemolticas inmunomediadas y se producen debido a que se ubican
complejos antgeno-anticuerpo sobre la membrana citoplasmtica de los eritrocitos, cuando
dicha clula pasa por el bazo, el sistema reticuloendotelial elimina esa porcin de membrana
haciendo que el glbulo rojo pierda su forma normal y transformndola en una clula mucho
ms friable lo que originar la destruccin masiva de los eritrocitos en lo que se llama crisis
hemoltica, que se caracteriza por la aparicin de una ictericia de tipo preheptica , donde lo
que va a predominar es un aumento de la bilirrubina indirecta.
Acantocitos: son eritrocitos que presentan terminaciones en forma de punta o espina.
Crenocitos: presentan la misma forma que los anteriores pero la diferencia es que estas
puntas son ms redondeadas.
Dacriocitos: son glbulos rojos alargados con forma de lgrima.
Esquistocitos: son fragmentos de glbulos rojos producto de la lisis de los mismos.
Estomatocitos: presentan una distribucin irregular de la hemoglobina encontrndose una
zona lineal central.
Ovalocito: es un eritrocito de forma oval.
Estas alteraciones se presentan en anemias producidas por hepatopatas, anemias hemolticas
entre otras causas y se deben a una alteracin en la distribucin de la hemoglobina.

3. Color: El color normal del eritrocito canino es rosado en la periferia con un halo
plido en el centro. En cambio en el gato es todo rosado ya que la hemoglobina est
distribuda en forma pareja. Reciben el nombre de eritrocitos normocrmicos aquellos que no
presentan alteraciones en su color. Los eritrocitos hipocrmicos son aquellos que presentan
una menor cantidad de hemoglobina y por consiguiente el borde de la misma es menor a lo
normal e hipercrmicos cuando la cantidad relativa de hemoglobina es superior a lo esperado
para la especie. Este ltimo caso se presenta en las anemias hemolticas inmunomediadas por
la presencia de esferocitos en los cuales la cantidad de hemoglobina que presenta la clula es
38
la misma que en la de un glbulo rojo normal, pero como disminuye su tamao parecera que
tiene una mayor cantidad de la misma.

4. Estados anormales: Recibe el nombre de eritrocito policromatfilo, policromatofilia
o policromasia a aquel eritrocito que presenta un tinte levemente azulado debido a una mezcla
en los colores caractersticos de la hemoglobina y del citoplasma celular basfilo. Es
indicativo de la presencia de gran cantidad de reticulocitos en sangre perifrica.
Puntillado basfilo: se observan grnulos basfilos en el citoplasma que se tien de color azul
, diseminados. Se presenta principalmente en la intoxicacin crnica con plomo. La accin
txica del plomo afecta la sntesis de los grupos pirrlicos esenciales para la produccin de
hemoglobina.
Cuerpos de Howell-Jolly: son cuerpos pequeos, redondeados, altamente teidos, que se
presentan en el citoplasma celular, generalmente de localizacin excntrica. Son restos
nucleares.
Cuerpos de Heinz: son masas intraeritrocitarias de globina desnaturalizada, presentan una
forma irregular y son refringentes. Se los observa bien al realizar la tincin de azul de
metileno nuevo o azul brillante de cresilo para observar reticulocitos.
Glbulos rojos nucleados: su presencia es indicativa de algn proceso patolgico a nivel de
mdula sea o como respuesta insuficiente de la misma frente a una anemia.
Reticulocitos: son eritrocitos que an conservan restos de ARN nuclear y que en la tincin de
May Grunwald Giemsa no se observan. Debido a esto, se debe realizar una tincin supravital
especial.
Cabe destacar que para que cualquiera de estas alteraciones se considere patolgicas, deben
estar en ms de un 20% de las clulas observadas.


Bibliografa:

1) Feldman: Schalms: Veterinary Hematology. Ed. Lippincott, Williams and Wilkins

3) Willard; Tvedten, Turnwald: Diagnstico clnico por mtodos de laboratorio en
pequeos animales. Ed. Saunders.
























39






VALORES HEMATOLOGICOS DE REFERENCIA

PARAMETRO PERRO GATO

REC. GL. ROJOS
( X 106 /MM3 ) 5.5-8.5 5-10

HEMOGLOBINA g/dl 12-18 8-15

HEMATOCRITO % cach.30-50 28-45
adult.37-55
V.C.M. 60-77 39-55

C.Hb.C.M.% 30-36 31-35

IND. RETICULOCITOS 1.8-2 1.8-2


REC. GL. BLANCOS 6000-17000 5500-19500
(por mm3)


FORMULA LEUCOCITARIA RELATIVA

NEUTROF. SEGM.% 60-77 37-75

NEUTROF. BANDA% 0-3 0-3

LINFOCITOS% 12-30 20-55

MONOCITOS% 3-10 1-4

EOSINOFILOS% 2-10 2-12

FORMULA LEUCOCITARIA ABSOLUTA

NEUTROF. SEGM/mm3 3000-11500 2500- 12500


NEUTROF.BANDA/mm3 0-300 0-300

LINFOCITOS/mm3 1000- 4800 1500-7000

MONOCITOS/mm3 150-1350 0-850

EOSINOFILOS/mm3 100-1250 0-1500

40
PLAQUETAS X 109/mm3 200-500 300-800




VALORES BIOQUIMICOS DE REFERENCIA OBTENIDOS EN EL
LABORATORIO DEL HOSPITAL ESCUELA DE LA FACULTAD DE CIENCIAS
VETERINARIAS U.B.A.

PARAMETROS UNIDADES PERRO GATO
UREA mg/dl 15-50 30-60

CREATININA mg/dl hasta 1,5 hasta 1,5

GLUCOSA mg/dl 60-110 70-110

PROT. TOTALES g/dl 5,7-7,5 5,6-7,8

ALBUMINA g/dl 2,4-3,6 2,1-3,6

REL ALB/GLOB 0,5-1,5 0,6-1,0

CALCIO mg/dl 8,0-12,0 8,0-12,0

FOSFORO mg/dl 2,1-5,6 2,6-6,0

COLESTEROL TOTAL mg/dl 125-250 70-150

TRIGLICERIDOS mg/dl 50-100 50-100

BILIRRUBINA TOTAL mg/dl hasta 0,8 hasta 0,6

BILIRRUBINA LIBRE mg/dl hasta 0,6

ALT/GPT UI/L hasta 80 hasta 80

AST/GOT UI/L hasta 60 hasta 70

FAS (CINETICA) UI/L hasta 250 hasta 380

GGT UI/L hasta 10

COLINESTERASA UI/L 2500-4000 2500-4000

AMILASA UI/L hasta 2200

LIPASA UI/L hasta 240

SODIO mEq/L 135-145 143-148

POTASIO mEq/L 3,7- 5,8 4,0 4,5

41
MAGNESIO mEq/L 2,1-0,3

CPK UI/L hasta 230