EFECTO DEL SUSTRATO Y DEL PRODUCTO EN LA CINTICA MICROBIANA
RESUMEN El objetivo principal del presente trabajo, es conocer el efecto del sustrato y del producto en la cintica microbiana. La cinticase refiere al estudio de la velocidad de cambio de reactivos a productos durante una reaccin qumica. Los experimentos de cintica examinan la relacin que existe entre la cantidad de producto formado en la unidad de tiempo, de acuerdo a las condiciones experimentales bajo las cuales se realiza la reaccin. La base de la mayora de las determinaciones cinticas es la observacin de como la velocidad, de una reaccin vara directamente con la concentracin de cada una de las sustancias que actan como reactivos para producir el producto. Esta observacin es expresada por medio de una ecuacin de velocidad. En la cintica microbiana tenemos un proceso conocido como fermentacin. La fermentacin natural es una situacin compleja con una abigarrada mezcla de alimentos y clulas que reaccionan incesantemente Los factores principales que afectan la velocidad de las reacciones catalizadas donde se inyectan microbiosson; concentraciones del sustrato y del producto, temperatura, pH y la presencia de inhibidores. En el curso de biotecnologa, los temas abordados con respecto a la cinticamicrobiana, es muy importante, para tratar temas cada vez mscomplejos, as, por ejemplo el diseo de reactores y biorreactores, importancia biomdica, fermentacin, industria de alimentos, entre otros.
INTRODUCCIN Cintica de las reacciones es aquella parte de la Qumica que se encarga de estudiar la velocidad de una Reaccin Qumica y los factores que permiten su control. Siendo las principales en el curso de biotecnologa, la cintica enzimtica y microbiana. Estudiar el efecto de la concentracin de sustrato sobre la actividad microbiana no es sencillo si pensamos que lgicamente la concentracin del sustrato(alimento) disminuye segn avanza la reaccin, la alta o baja concentracin determinara el crecimiento rpido o lento de las bacterias. En el caso del efecto del producto, que en algunos casos acta como inhibidor de las clulas, disminuye la velocidad de reaccin y en algunos casos detiene la reaccin.
OBJETIVOS
OBJETIVO GENERAL
Conocer el efecto del sustrato y del producto en la cintica microbiana.
OBJETIVOS ESPECFICOS
Realizar una revisin bibliogrfica.
Identificar los principales factores que afectan la velocidad de las reacciones.
describir de qu manera afecta el sustrato y el producto en la cintica microbiana.
MARCO TERICO FERMENTACIN MICROBIANA.
La fermentacin natural es una situacin compleja con una abigarrada mezcla de alimentosy clulas que reaccionan incesantemente. En esta introduccin slo se considerarnlas situaciones ms simples: Slo acta un tipo de microbio C, que en ocasiones se llamar clula o bicho. Slo es necesario un tipo de alimento A, llamado sustrato por los investigadoresde las ciencias de la salud. Si el alimento es adecuado, los bichos lo comen, se multiplican y en el proceso producen material de desecho o residual, R. En smbolos
En algunos casos, la presencia del producto R inhibe la accin de las clulas, sin importarcunto alimento est todava disponible. Se tiene as lo que se denomina envenenamientopor el producto. La fabricacin del vino es un ejemplo de esto
Conforme aumenta la concentracin de alcohol, las clulas se multiplican ms lentamente,y cuando hay cerca de 12% de alcohol los bichos paran. El alcohol es aqu elveneno o inhibidor. El tratamiento de aguas residuales con lodos activos es un ejemplo de fermentacinno inhibida por el producto
En ocasiones el inters se encuentra en la descomposicin de A. como en el tratamientode aguas residuales. En otras ocasiones estar en producir clulas C. como enlos procesos de crecimiento de levaduras o produccin de protena unicelular paraproductos alimenticios. En otros casos se desea el material de desecho de las clulas. R, como en la produccin de penicilina y otros antibiticos. Se ver a continuacin lo que ocurre de manera tpica cuando se tiene un solo tipode bicho y un solo alimento.
Figura 1. Crecimiento celular en un medio adecuado y uniforme.
Fermentador intermitente. Anlisis cualitativo En este caso las clulas se reproducen. La composicin del sustrato vara y se forma el producto que puede ser txico para las clulas. Tpicamente se observa:
un periodo de induccin; un periodo de crecimiento; un periodo estacionario; y la muerte de las clulas.
Unas cuantas palabras acerca de estos regmenes.
a) Induccin o retardo. Confom1e las clulas en un recipiente consumen todo su alimento dejan de multiplicarse. Su actividad enzimtica decrece, difunden alexterior compuestos de bajo peso molecular y las clulas cambian de carcter: envejecen. Por tanto; cuando se introducen en un nuevo entorno se observa unretardo mientras las clulas vuelven a fabricar las sustancias necesarias para sucrecimiento y reproduccin. En general cualquier cambio en el enromo se traduceen un periodo de induccin mientras las clulas se adaptan al mismo.
b) Crecimiento y fase estacionara. Las clulas crecen exponencialmente en unambiente uniforme, pero en un sistema intermitente el medio cambia, por loque tambin cambia lavelocidad de crecimiento. El cese del crecimiento de laclula que ocurrir finalmente est gobernado:
Por el agotamiento del alimento, o bien Por la acumulacin de materiales txicos (txicos para la clula).
Fermentador de tanque agitado En este caso las clulas se encuentran en un medio ambiente uniforme. No se necesitaninguna adaptacin y la multiplicacin de las clulas tiene lugar a una velocidadconstante, determinada por la composicin del fluido en el reactor. Esto se representa frecuentemente por una ecuacin tipo Monod. .
El Valor de k depende de todo tipo de parmetros: temperatura, presencia de elementos en baja concentracin, vitaminas, sustancias txicas, intensidad de la luz. Etctera
Expresiones cinticas
La velocidad de la multiplicacin de las clulas depende, en general, de la disponibilidad de alimento y de la formacin de residuos que interfieren en la multiplicacin de las clulas. Se muestran a continuacin las fom1as de velocidad razonables ms simples.
Se han propuesto y utilizado muchas otras ecuaciones cinticas en el pasado; sin embargo, todas ellas han quedado en el olvido desde que Monod present su expresin. Su simplicidad la hizo prevalecer. Por tanto, se utilizar este tipo de expresin en adelante para relacionar la velocidad de crecimiento celular con la concentracin de sustrato. Efecto de residuos nocivos. Conforme se van formando residuos R que perjudican el crecimiento, stos interfieren en la multiplicacin de las clulas. As, la constante de velocidad de Monod observada, disminuye con un aumento de CR. Una forma simple de esta relacin es
En general, pues, la reaccin y la multiplicacin de las clulas disminuirn ya sea por el agotamiento de A (hambre) o por el aumento de R (contaminacin del ambiente).
FERMENTACIN MICROBIANA LIMITADA POR EL SUSTRATO
Si se supone un rendimiento fracciona! constante y que no hay decrecimiento de la velocidad como consecuencia de inhibicin por producto o por un aumento de la sobrepoblacin de clulas en el medio de cultivo, entonces la ecuacin general de velocidad del captulo anterior, ecuacin 28.8, se reduce a la conocida ecuacin de Monod
Y donde CA O y Ceo son las composiciones de la alimentacin o al inicio. Se examina ahora la forma en que los diferentes reactores ideales procesan una alimentacin que reacciona de acuerdo con estas cinticas.
Reactor intermitente (o de flujo pistn).
Aplicando la ecuacin de diseo. se encuentra que:
Acerca de las operaciones por lote
Para valores muy altos de C0 simplemente no puede aplicarse la ecuacin de Monod sin inhibicin por producto, ya que incluso si hay suficiente alimento, las clulas se amontonaran unas sobre otras y el crecimiento disminuira y terminara por detenerse en algn momento. As, para concentraciones muy altas de clulas debe recurriese a la cintica con inhibicin por producto.
Es difcil intentar evaluar las constantes de la ecuacin de Monod a partir de los datos obtenidos en un reactor intermitente o de flujo pistn. Los datos que se obtienen en el reactor de tanque agitado son mucho ms simples de interpretar, como se ver en seguida.
FERMENTADORES DE TAN QUE AGITADO
Ceo = O, la alimentacin no contiene clulas Se supone una cintica tipo Monod (sin inhibicin por producto), rendimientos fraccionales conconstantes y la ausencia de clulas en la corriente de entrada. La ecuacin de diseo del reactor de tanque agitado se transforma entonces en;
Con cintica de Monod sin inhibicin y un alimento dado, se tiene una curva en forma de U cuando se grafica 1/r contra C. tal como se muestra en la figura 29.6. En el captulo 5 se vio que para esta forma de la curva velocidad-concentracin deber operarse como sigue:
Para alcanzar cualquier punto entre A y B se opera en A con parte de la alimentacin en tanque agitado y se mezcla con el resto de la alimentacin. Para alcanzar cualquier punto entre A y O se va directamente al punto A en tanque agitado y entonces se cambia a flujo pistn ms all de A. Estas dos reglas representan la clave para el diseo ptimo de un reactor.
FERMENTACIN MICROBIANA LIMITADA POR EL PRODUCTO
Con suficiente alimento y un ambiente propicio, las clulas se multiplican libremente. Sin embargo, independientemente de la cantidad de alimento de la que se dispone, al final se llega a un punto en donde las clulas se amontonan desplazndose entre s, o bien sus productos de desecho inhiben su crecimiento. .Esto se denomina inhibicin por producto. Por tanto, la cintica de Monod es siempre un caso especial de una expresin de velocidad ms general que incluye la inhibicin por producto. Una ecuacin sencilla de la forma general de la velocidad para esta situacin es:
FERMENTADORES INTERMITENTES O DE FLUJO PISTN PARA n = 1
FERMENTADORES DE TANQUE AGITADO PARA n = 1
Fermentacin con cintica inhibida por producto con n diferente de 1
CONCLUSIONES En la cintica de Monod sin inhibicin, en este caso, la limitacin del alimento por s sola afecta la velocidad del crecimiento celular.
La cintica con inhibicin por producto. Aqu slo algunos de los productos formados durante la fermentacin disminuyen la velocidad.
De forma ms general, un exceso de sustrato o de clulas en el medio de cultivo tambin puede disminuir la velocidad de la fermentacin. En estas situaciones la ecuacin de Monod debe modificarse adecuadamente.
La similitud en la forma de las grficas de tanque agitado para la cintica limitada por el producto y la cintica limitada por el sustrato ha conducido a muchos investigadores a ajustar sistemas con inhibicin por producto con la ecuacin simple de Monod. El ajuste ser bueno pero no deber intentarse utilizar la ecuacin ajustada para condiciones diferentes en la alimentacin. Las predicciones probablemente seran errneas, ya que la lgica de la extensin es errnea. Se debe determinar primero cul de los dos factores es el controlante de la velocidad, sustrato y producto. Esto es fcil de hacer, por lo que no hay excusa para utilizar la expresin equivocada.
El conocimiento de la cintica de crecimiento de los microorganismos es de sumo inters en el campo industrial, ya que permite conocer la manera de reproduccin de las bacterias, permitiendo desarrollar mtodos de catalizacin e inhibicin de stos y de prevencin en caso de que el crecimiento sea en una forma desproporcionada y peligrosa. Adems este conocimiento ayuda en diferentes campos, como por ejemplo, el alimenticio, en el cual el conocimiento de la cintica de crecimiento microbiano es un parmetro que indica la forma en que se deben colocar los preservantes en un producto determinado. en general las aplicaciones de ste tema son innumerables.
BIBLIOGRAFA
OCTAVELEVENSPIEL, el omnilibro de los reactores qumicos Chemicalengineeringdepartmentoregonstateuniversity, editorial revert, s. a. barcelona, 1986. http://www.google.com.mx/search?hl=es&q=cinetica+microbiana&meta http://books.google.com.mx/books?id=AXEkC3hU684C&pg=PA48&lpg=PA48&dq=d iagrama+de+flujo++de+la+penicilina&source=web&ots=rDWfxdJJpj&sig=Fkv3HfPr HM&hl=es&sa=X&oi=book_result&resnum=6&ct=result#PPA48,M1 http://paginas.tol.itesm.mx/Alumnos/A01102977/fireworks/FERMENTACION.doc