Uso potencial del girasol como fitorremediador de Cr(VI): estudios
preliminares de los efectos de la concentracin de sulfatos en el
desarrollo de la planta
Estudiante: Olga Rodrguez Vallejo (Universidad de Guanajuato) olga_nirvana@hotmail.com
Asesor: Dra. Mara Guadalupe de la Rosa lvarez (Universidad de Guanajuato) delarosa@quijote.ugto.mx
RESUMEN
La Fitorremediacin es una tecnologa relativamente nueva que propone el uso de plantas para restaurar ambientes contaminados con compuestos ya sean orgnicos o inorgnicos. Para fines de fitorremediacin se prefiere el uso de plantas llamadas hiperacumuladoras, aquellas que son capaces de absorber y acumular los contaminantes en grandes cantidades. Helianthus annus ha sido identificado como un hiperacumulador de Cr aunque es tambin poco tolerante a este metal. En realidad se sabe poco acerca de los mecanismos que sta planta utiliza para hiperacumular Cr, se conoce que en algunas plantas existe una competencia entre cromatos y sulfatos, aunque en el caso particular del girasol, esta informacin no est disponible. Dichos datos son importantes y necesarios para determinar en que medida la presencia de sulfatos afectar la absorcin de Cr(VI). As que se determin tanto los requerimientos mnimos de sulfatos como los niveles txicos de este nutriente para la germinacin y crecimiento de la planta de girasol para obtener datos de referencia importantes y posteriormente realizar estudios del efecto de la concentracin de sulfatos en la tolerancia y absorcin de cromatos por H. annuus.
INTRODUCCIN
El cromo es un metal que se utiliza ampliamente en la industria, incluyendo la curtidura, el cromado, produccin de pigmentos y pinturas y en la conservacin de la madera, entre otros. Dichas actividades han incrementado enormemente los niveles de Cr en el medio ambiente lo que representa un peligro potencial para la salud. Respecto a la regin centro de Mxico, se sabe que existe una elevada contaminacin por cromo tanto en aguas subterrneas como en suelos, lo que se debe tanto a fuentes naturales como antropognicas (Dhillon y Dhillon, 2001). Esta fuerte contaminacin representa un peligro potencial para los habitantes del rea por lo que es importante tomar medidas tanto precautorias como de remediacin.
En aos recientes, el surgimiento de la tcnica llamada fitorremediacin ha proporcionado una nueva opcin para el rescate de ambientes contaminados mediante el uso de plantas vivas o sus biomasas. En este contexto, una de las tareas principales para los investigadores interesados en esta tcnica es la identificacin de plantas hiperacumuladoras, es decir, aquellas con la habilidad de absorber y acumular grandes cantidades de contaminante. En cuanto a cromo se refiere, una planta se considera hiperacumuladora si es capaz de acumular hasta 1000 mg kg-1 de peso seco en la parte area (Brooks R.R. 1998). El girasol (Helianthus annuus) ha sido identificado como una planta potencialmente hiperacumuladora de Cr, sin embargo es tambin muy sensible a este metal mostrando signos de fitotoxicidad a ciertas concentraciones (Shahandeh, H.2000). Por otro lado, se ha demostrado que esta planta tolera y acumula otros metales incluyendo algunos radioactivos y se ha trabajado ya incluso en experimentos piloto para remediar algunos sitios con problemas de contaminacin.
Respecto a Cr (VI), se ha encontrado que dicha especie es mas fcilmente absorbida y transportada a las partes areas de algunas plantas que el Cr(III), esto en parte debido a la diferencia de solubilidades de las especies de cromo. Adicionalmente, se ha encontrado que la presencia de sulfato en el medio de crecimiento afecta la absorcin de cromato en algunas especies mientras que en otras promueve dicho proceso (Kleiman, I.D. 1997).
Lamentablemente estos estudios se han realizado en pocas plantas por lo que una generalizacin est lejos de poder ser formulada.
OBJETIVO
Como un estudio preliminar, este proyecto propone la determinacin de las concentraciones mnimas y mximas de sulfatos en las cuales no se afectan tanto la germinacin como el crecimiento de la planta. De este forma se tendrn datos de referencia importantes para posteriormente realizar estudios del efecto de la concentracin de sulfatos en la tolerancia y absorcin de cromatos por H. annuus. Para el desarrollo de estos experimentos se ha elegido la hidropona ya que este medio proporciona un buen modelo para estudiar las respuestas de los organismos en un tiempo relativamente corto
MATERIALES Y MTODOS
Preparacin de medio nutritivo y soluciones de cromo. El medio nutritivo a emplear es la solucin de Hoagland (Peralta y col 2001). La solucin contiene los siguientes nutrientes a las concentraciones dadas entre parntesis: Ca(NO 3 ) 2 4H 2 O (0.35 mM); CaCl 2 2H 2 O (2.1 mM); Mg(NO 3 ) 2 6H 2 O (0.91 mM); KH 2 PO 4 (0.97 mM); KNO 3 (0.255 mM) H 3 BO 3 (23.13 M); MnCl 2 4H 2 O (3.9 M); MoO 3 (23.13M); Fe(NO 3 ) 3 9H 2 O (10 M); y Zn(NO 3 ) 2 6H 2 O (0.37 M); el pH se ajust a 4.8 en todas las soluciones nutritivas. La concentracin de la sal de sulfato de cobre se modificar de acuerdo a los requerimientos experimentales de concentracin de sulfatos.
Determinacin del efecto de la concentracin de sulfatos en la germinacin de Helianthus annuus Las semillas de girasol se desinfectan (con hipoclorito de sodio) se colocaron en cajas Petri que contienen papel humedecido con el 25% de solucin nutritiva a diferentes concentraciones de sulfatos 0, 20, 40, 60, 80, 100mM (Kaszycki y col. 2005) y con un 50% de concentracin de la solucin nutritiva a 0, 0.001, 0.01, 0.1, 1.0, 10.0mM de sulfatos. Se realizaron observaciones diarias y se observ el tiempo de germinacin para cada uno de los tratamientos (Carrillo-Castaeda y Col. 2002). Se consider que una semilla germin si emite una radcula de al menos 2mm de longitud. La concentracin de sulfatos ptima para este proceso se estableci como aquella en la que el proceso de germinacin se lleva a cabo en un menor tiempo y a un mayor porcentaje de germinacin. Los datos se analizaron estadsticamente para determinar diferencias significativas. Una vez obtenidos los resultados de germinacin se identificaron las concentraciones mnimas y mximas que no afectan la germinacin de la semilla de girasol.
Determinacin del efecto de la concentracin de sulfatos en la produccin de biomasa y clorofila en H. annuus
Las semillas de girasol se germinaron y se hicieron crecer a diferentes concentraciones de sulfatos tomando como rango de referencia los resultados de la prueba de germinacin. El tiempo de exposicin a los tratamientos se estableci como de 10 das, periodo durante el cual se tomarn mediciones diarias de crecimiento y de produccin de clorofila. De acuerdo a estos datos, se determinarn las concentraciones mnima y mxima de sulfato a las cuales no se afecta el crecimiento y la produccin de clorofila en la planta de girasol.
RESULTADOS
De acuerdo a los resultados, se observaron diferencias significativas en el crecimiento de raz y tallo de plantas que se crecieron en solucin nutritiva completa (SNC) en comparacin con aquellas en solucin a de fuerza (F) con y sin sulfatos. El tamao de raz de plantas tratadas con SNC sin sulfatos fue mayor que el de aquellas que se crecieron en todos los tratamientos de F (140+6 y 89+4mm, respectivamente), en tanto que para tallo, se observ que la concentracin de 40mM afecta considerablemente el crecimiento con resultados 102+6mm y 38.4+6 u de absorcin para clorofila, mientras que el control midi 126+5mm con 66+1 u de absorcin. En el peso seco de la raz hay diferencias significativas entre el control y las concentraciones de 20mM y 40mM con los siguientes datos: 157+11mg del control y 82+6mg 20mM. En el segundo experimento con concentraciones mnimas de sulfatos, en general no se observan diferencias significativas en el crecimiento y produccin de clorofila. Solamente la longitud de la raz se ve un poco afectada por las concentraciones (177+8 y 137+4 mm en plantas tratadas con 0.01mM 10mM, respectivamente).
CONCLUSIONES Y DISCUSIN
A concentraciones relativamente pequeas de sulfatos, el crecimiento de la planta de girasol no se afecta, mientras que a concentraciones relativamente mayores es muy probable que la planta sea mas bien sensible a la concentracin de otros nutrientes y no tanto a la concentracin de sulfatos en el medio de crecimiento. Por lo tanto sugerimos en primera instancia realizar experimentos de absorcin de cromatos por planta de girasol a concentraciones de sulfatos menores a 10 mM, ya que a mayores concentraciones, es muy probable que se afecte el crecimiento y tal vez la capacidad de hiperacumular Cr(VI).
REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS
1. Brooks, R.R. (1998), Plants that hyperaccumulate heavy metals: their role in phytoremediation, microbiology, archeology, mineral exploration and phytomining. CAB International, Oxon, U.K.
2. Carrillo-Castaeda, G., Jurez Muoz, J., Peralta-Videa, J.R., Gmez, E., Duarte-Gardea, M., Tiemann, K.J., Gardea-Torresdey, J.L. (2002), Advances in Environmental Research. 6(3), 391-399.
3. Dhillon K.S. Dhillon S.K. (2001), Restoration of Selenium-Contaminated Soils. Iskandar I.K. (ed) CRC Press. Boca Raton, Florida. USA p. 211-212.