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MITOSIS Y MEIOSIS
OBJETIVOS
Identificar cada uno de los periodos que comprende el ciclo celular. Relacionar cada cambio presente en las clulas meristemticas, con las diferentes fases de la mitosis. Reconocer los procesos de la meiosis con base en el material suministrado.

MATERIALES
Los materiales se dividen en tres categoras Biolgicos, instrumentos y reactivos, as: A. Bulbo de cebolla Allium cepa,Pez macho B. Pinzas, Vaso de precipitado o vaso desechable, Palillos grandes, Tijeras, Pipeta pasteur, Papel de filtro, Portaobjetos, Cubreobjetos, Aguja de diseccin, pinzas largas, Bistur y bandeja de diseccin. C. Aceto orceina, Eosina, Metanol, Acido actico.

Meiosis 1 Las caractersticas tpicas de la meiosis I, solo se hacen evidentes despus de la replicacin del DNA, en lugar
de separarse las cromtidas hermanas se comportan como bivalente o una unidad, como si no hubiera ocurrido duplicacin formando una estructura bivalente que en si contiene cuatro cromtidas. Las estructuras bivalentes se alinean sobre el huso, posteriormente los dos homlogos duplicados se separan desplazndose hacia polos opuestos, a consecuencia de que las dos cromtidas hermanas se comportan como una unidad, cuando la clula meitica se divide cada clula hija recibe dos copias de uno de los dos homlogos. Por lo tanto las dos progenies de esta divisin contienen una cantidad doble de DNA, pero estas difieren de las clulas diploides normales.

Profase:
Leptoteno: En esta fase, los cromosomas se hacen visibles, como hebras largas y finas. Otro aspecto de la fase leptoteno es el desarrollo de pequeas reas de engrosamiento a lo largo del cromosoma, llamadas crommeros, que le dan la apariencia de un collar de perlas. Cigoteno: Es un perodo de apareamiento activo en el que se hace evidente que la dotacin cromosmica del meiocito corresponde de hecho a dos conjuntos completos de cromosomas. As pues, cada cromosoma tiene su pareja, cada pareja se denomina par homlogo y los dos miembros de la misma se llaman cromosomas homlogos. Paquiteno: Esta fase se caracteriza por la apariencia de los cromosomas como hebras gruesas indicativas de una sinapsis completa. As pues, el nmero de unidades en el ncleo es igual al nmero n. A menudo, los nucleolos son muy importantes en esta fase. Los engrosamientos cromosmicos en forma de perlas, estn alineados de forma precisa en las parejas homlogas, formando en cada una de ellas un patrn distintivo. Diploteno: Ocurre la duplicacin longitudinal de cada cromosoma homlogo, al ocurrir este apareamiento las cromtidas homlogas parecen repelerse y separarse ligeramente y pueden apreciarse unas estructuras llamadas quiasmas entre las cromtidas.ademas La aparicin de estos quiasmas nos hace visible el entrecruzamiento ocurrido en esta fase. Diacinesis: Esta etapa no se diferencia sensiblemente del diploteno, salvo por una mayor contraccin cromosmica. Los cromosomas de la interfase, en forma de largos filamentos, se han convertido en unidades compactas mucho ms manejables para los desplazamientos de la divisin meitica.

Metafase Al llegar a esta etapa la membrana nuclear y los nucleolos han desaparecido y cada pareja de cromosomas
homlogos ocupa un lugar en el plano ecuatorial. En esta fase los centrmeros no se dividen; esta ausencia de divisin presenta una diferencia importante con la meiosis. Los dos centrmeros de una pareja de cromosomas homlogos se unen a fibras del huso de polos opuestos

Anafase Como la mitosis la anafase comienza con los cromosomas movindose hacia los polos. Cada miembro de una
pareja homologa se dirige a un polo opuesto TELOFASE Esta telofase y la interfase que le sigue, llamada intercinesis, son aspectos variables de la meiosis I. En muchos organismos, estas etapas ni siquiera se producen; no se forma de nuevo la membrana nuclear y las clulas pasan directamente a la meiosis II.

Meiosis 2
Profase Esta fase se caracteriza por la presencia de cromosomas compactos en nmero haploide. Los centroiolos se desplazan hacia los polos opuestos de las clulas Metafase En esta fase, los cromosomas se disponen en el plano ecuatorial. En este caso, las cromtidas aparecen, con frecuencia, parcialmente separadas una de otra en lugar de permanecer perfectamente adosadas, como en la mitosis. Anafase: opuestos Los centrmeros se separan y las cromtidas son arrastradas por las fibras del huso acromtico hacia los polos

Telofase: En los polos, se forman de nuevo los ncleos alrededor de los cromosomas. En suma, podemos considerar que la meiosis supone una duplicacin del material gentico (fase de sntesis del DNA) y dos divisiones celulares. Inevitablemente, ello tiene como resultado unos productos meiticos con solo la mitad del material gentico que el meiosito original

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GIMNASIO DE LOS CERROS Guia de laboratorio BIOLOGA PROCEDIMIENTO I. MITOSIS

Para el desarrollo de esta prctica utilice bulbos de cebolla, Allium cepa y realice preparaciones con la raz de material fijado y teido, una vez obtenidos los extendidos de clulas obsrvelos al microscopio ptico. Preparacin de la cebolla: 1. Con ayuda de una pinza retire la capa externa marronacea o roscea y lave con abundante agua, esto se realiza para eliminar restos de sustancias con las que frecuentemente han sido tratadas para inhibir o retardar la germinacin de las raicillas. 2. Llene un vaso de precipitados con agua y coloque un bulbo de cebolla sujeto con dos o tres palillos de manera que la parte inferior quede inmersa en el agua. 3. Pngalo a germinar a 25C o a temperatura ambiente durante 3 das, al cabo de estos aparecern numerosas raicillas en crecimiento de unos 3 o 4 cm. de longitud. 4. Revise diariamente y procure que la corona no se deseque para lo cual es necesario rellenar con agua cada 24 horas. Elaboracin del montaje: 5. Cuando las races tengan entre 0.5 y 1 cm de longitud, realice cortes de raz de aproximadamente 2 3 mm a partir del pice. 6. colquelas en una lmina portaobjetos. Adiciona una gota del colorante aceto orceina o eosina. 7. Coloque el cubreobjetos con mucho cuidado sobre la raz. Con ayuda de la punta de una aguja de diseccin, d unos golpecitos sobre el cubre objetos sin romperlo, de modo que la raz quede extendida. 8. Use papel de filtro para retirar el exceso de colorante realice una suave presin, evitando que l cubre objetos resbale. Si la preparacin est bien asentada no hay peligro de rotura por mucha presin que se realice. 9. Coloque la preparacin al microscopio e inicie la observacin con el objetivo de 10x e identifique las clulas. Observacin al microscopio: 10. Cambie al objetivo de 40X para detallar las clulas. Observe los ncleos y cromosomas en color rosceo morado. 11. Ubique el objetivo de 100 x y anote sus observaciones describiendo las diferencias en cada uno de los aumentos mencionados. 12. Trate de observar detenidamente las preparaciones y distinga clulas en interfase, profase, anafase, etc.., y haga un conteo de las clulas en divisin en cada una de estas fases. Realice dibujos de lo observado.

II.

MEIOSIS

Para la observacin de las diferentes fases de la meiosis trabaje con un pez macho: Preparacin del pez: 1. Introduzca el pez en una bandeja de diseccin y realice un corte rectangular desde el ano hasta el oprculo y observe la musculatura. 2. Retire la musculatura y de esta manera quedan a la vista las vsceras del pez. 3. Con la pinza tome los testculos los cuales aparecen como cintas alargadas de color blanco situadas en la parte superior de la cavidad abdominal desde la regin occipital hasta el poro genital. Preparacin del montaje: 4. Coloque los testculos sobre una lmina portaobjetos. 5. Agregue una gota del colorante aceto orceina o eosina. 5. Coloque encima una laminilla, realice una suave presin y observe al microscopio con objetivo de menor y mayor aumento. Anote sus observaciones. Observacin al microscopio: 6. Coloque la preparacin al microscopio e inicie la observacin con el objetivo de 10x e identifique las clulas, cambie progresivamente de objetivo y mencione las diferenias entre las observaciones hechas en cada aumento. 7. Realice dibujos o tome fotos y Escriba una descripcin detallada de lo observado, disee una tabla en la que incluya los dibjos o fotos y sus descripciones. 8. Trate de observar detenidamente las preparaciones y distinga clulas en interfase, profase, anafase, etc.., y haga un conteo de las clulas en divisin en cada una de estas fases. Realice dibujos de lo observado tenga en cuenta la posicin de los cromosomas para identificar las fases.

GIMNASIO DE LOS CERROS Guia de laboratorio BIOLOGA TAXONOMA, DIVERSIDAD DEL REINO PROTISTA INTRODUCCIN
Con el reino protista comienza el estudio de los organismos eucariontes. Las clulas de los organismos eucariticos contienen un ncleo rodeado por una membrana, as como los dems organelos celulares. Los dems organismos eucariticos (Incluyendo hongos, plantas y animales) se originaron probablemente de protistos pimitivos. Para nuestros propsitos los protistos sern clasificados en tres grupos basndonos en modelos de nutricin. PROTOZOA: Unicelulares hetertrofos, tpicamente como animales. MOHOS: Algunos los llaman hongos inferiores por que pueden ser multinucleados como los hongos, durante alguna parte de su ciclo de vida. Son clasificados con llos protistas por que presentan similitudes con los protozoos. ALGAE: Organismos unicelulares y multicelulares parecidos a las plantas pues son fotosintetizadores.

OBJETIVOS Identificar y clasificar protozoos representativos. Identificar tipos de algas basndose en caractersticas morfolgicas. PROCEDIMIENTO En esta prctica de laboratorio se identificaran organismos representativos de protozoos y algas, por tanto el procedimiento se divide en dos: I. Identificando Protozoos: Los protozoos son organismos unicelulares, la mayora son mviles, pueden ser encontrados como organismos de vida libre y en formas parasticas, adems pueden estar en ecosistemas de agua dulce y marinos. Existen muchos Fillum de protozoos. En esta prctica identificaremos algunas de las formas ms representativas. Estas pueden distinguirse por la forma del cuerpo y el tipo de locomocin. Realice montajes con el agua que le provee el profesor, esta ha sido una muestra reciente de agua estancada y/o de cultivo de protozoos. Coloque la laminilla y con un papel absorbente elimine el exceso de agua, agregue unas gotas de solucin de nicotina para adormecer a los protozoos y as facilitar su observacin. Observe las muestras en diferentes aumentos, dibuje y/o tome fotografas, describa detalladamente cada observacin y compare con las claves taxonmicas anexas para asignar los nombres correspondientes. II. Identificando algas: Las algas son organismos eucariticos fotosintticos. Las algas evolucionaron hace ms de 450 millones de aos, todas las algas modernas contienen clorofila a, como su principal pigmento fotosinttico pero tambin tienen algunos pigmentos accesorios. Las distinciones hechas a travs de los grupos de algas se basan en el tipo de pigmentos accesorios, la naturaleza del tipo de almacn de alimentos, la composicin de la pared celular, si presenta, y si el cuerpo es unicelular o extracelular. Realice montajes con el agua que le provee el profesor, esta ha sido una muestra reciente de agua estancada y/o de cultivo de algas. Coloque la laminilla y con un papel absorbente elimine el exceso de agua. Observe las muestras en diferentes aumentos, dibuje y/o tome fotografas, describa detalladamente cada observacin y compare con las claves taxonmicas anexas para asignar los nombres correspondientes.

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ENZIMAS OBJETIVOS 1. Explicar qu es una enzima y cmo stas actan en reacciones intracelulares. 2. Identificar factores que afectan la actividad enzimtica. 3. Distinguir entre inhibicin competitiva e inhibicin no-competitiva. INTRODUCCIN Las clulas llevan a cabo simultneamente una gran cantidad de reacciones qumicas necesarias para la vida. Muchos de los productos de esas reacciones se necesitan inmediatamente, y si no fuera por la participacin de las enzimas, algunas reacciones no se produciran tan rpido. Las enzimas, en su mayora protenas o RNA (riboenzimas), son catalizadores qumicos que agilizan una reaccin que envuelve la formacin o rompimiento de enlaces qumicos. Las enzimas no se consumen en las reacciones, ni tampoco se alteran, razn por lo cual no se necesitan en grandes cantidades. Las enzimas actan sobre los sustratos formando un complejo enzima sustrato; esto ocurre en un lugar en especfico conocido como el sitio activo de la enzima. Las enzimas son muy selectivas porque pocas molculas pueden interactuar bien con este sitio. Las enzimas reducen la energa de activacin necesaria para llevar a cabo una reaccin; es decir, reducen la barrera de energa que hay que sobrepasar para que la reaccin se lleve a cabo. Las enzimas trabajan ptimamente bajo condiciones especficas y ciertos cambios pueden alterar el funcionamiento de la enzima, desactivarla o hasta destruirla. Algunas enzimas necesitan activadores para cambiar su conformacin de modo que pueda formarse el complejo enzimasustrato. Estos activadores se conocen como cofactores y pueden ser tan simples como iones metlicos. Los cofactores orgnicos se conocen como coenzimas. Las enzimas pueden afectarse negativamente por inhibidores que impidan la actividad enzimtica. Estos inhibidores pueden afectar el sitio activo de dos maneras: competitivamente, al bloquear el sitio activo, o no competitivamente, al pegarse en otro lugar de la enzima y alterar indirectamente la forma del sitio activo. Factores que afectan el funcionamiento de la catalasa En los ejercicios siguientes se estudiar el funcionamiento de la catalasa. Esta enzima est presente en casi todas las clulas aerbicas y acta descomponiendo perxido de hidrgeno (agua oxigenada) en agua y oxgeno, segn la siguiente reaccin:

MATERIALES Perxido de hidrgeno, papa, hgado, setas, espinaca, gasa, placas de porcelana, goteros, morteros o licuadora

Prueba 1. En este ejercicio se prepararn varios homogenizados para obtener partculas pequeas y uniformes al
mezclarlas con el agua. 1. Para preparar los homogenizados, corte en pedazos por separado las muestras de papa, hgado, setas y espinaca. 2. Usando una licuadora o mortero, muela el material con un poco de agua hasta diluir parte de la muestra; no muela excesivamente para que no queden pedazos muy pequeos del material. 3. De ser necesario, filtre el macerado con una gasa 4. Coloque cada homogenizados en un tubo de ensayo. 5. Usando un gotero, coloque cinco gotas de cada homogenizados en las fosas de la placa de porcelana y aada tres gotas de perxido de hidrgeno Observe y anote los resultados en la Tabla

Prueba 2. Se comporta la catalasa de igual manera en todos los organismos?

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MATERIALES: Homogenizado de hgado, papa, setas y espinaca, Tubos de ensayo grandes, Perxido de hidrgeno, Goteros. PROCEDIMIENTO 1. Rotule cinco tubos de ensayo con las letras A a la E. 2. Ponga 3 mL de cada homogenado en los tubos como sigue: A Hgado B Papa C Setas D Espinaca E - Agua 3. Marque el nivel hasta donde llega cada homogenizado. 4. Ponga 3 mL de perxido de hidrgeno en cada tubo de ensayo. 5. Observe la reaccin que sucede en cada tubo y marque el cambio en el nivel del lquido. 6. Tabule los resultados en la Tabla

Prueba 3. Efecto de la temperatura sobre el funcionamiento de las enzimas

MATERIALES: Homogenado de hgado, bao de agua, termmetro, agarradera de tubo, hielo, congelador PROCEDIMIENTO: 1. Rotule cinco tubos de ensayo del 1 al 5 y caliente un bao de agua hasta 37 C y otro hasta 80C. 2. Aada 5 mL de hgado homogenado a cada tubo. 3. Mantenga los tubos a las siguientes temperaturas: Tubo 1 = 80 C por 15 minutos Tubo 2 = 37 C por 15 minutos Tubo 3 = Temperatura ambiental Tubo 4 = Hielo por 30 minutos Tubo 5 = Congelador a 4 C por 30 minutos 4. Aada 2 mL de perxido de hidrgeno al tubo 1. 5. Mida el tiempo transcurrido desde que se aadi el perxido hasta que se comienzan a producir burbujas, y antelo en la Tabla. 6. Repita con los dems tubos. 7. Compare sus resultados en trmino de tiempo de reaccin vs. temperatura.

Prueba 4. El efecto del pH sobre el funcionamiento de las enzimas

PROCEDIMIENTO 1. Rotule tres tubos de ensayo A, B y C 2. Aada 3 mL de homogenado de hgado a cada tubo. 3. Aada soluciones 3M de HCl y 3M de NaOH a los tubos como sigue, y agite suavemente hasta mezclar: Tubo A 3 ml de 3M HCl Tubo B 3 ml de 3M NaOH Tubo C control (sin cido ni base) 4. Aada 3 mL de perxido de hidrgeno a cada tubo. 5. Observe y anote las reacciones en la Tabla

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CUESTIONARIO Qu ocurri al aadir el perxido? Ocurri lo mismo en todas las muestras? Por qu se forman burbujas? Qu otros organismos podran usarse para esta prueba? Por qu se prepararon los homogenados? Por qu no se aadi el perxido directamente a los tejidos sin macerarlos? Explique por qu la gran mayora de las especies de plantas y de animales producen la enzima catalasa.