REPORTE DE PRCTICA DE BIOQUIMICA II

NOMBRE DEL ALUMNO (A) _______________________________GRADO Y GPO_____CALIF______ INSTRUCCIONES: LLENAR CON TINTA NEGRA Y LETRA CLARA CADA UNO DE LOS ESPACIOS DE ACUERDO A LO QUE SE PIDE. NMERO Y NOMBRE DE LA PRCTICA: Prctica N 4: La membrana y transporte celular OBJETIVO: Tener conocimientos acerca de los componentes de una membrana. Conocer los factores que puedan afectar y/o alterar la integridad de una membrana Explicar cmo se da la osmolaridad en los tejidos. Identificar cundo la clula se encuentra hipotnica, isotnica e hipotnica INTRODUCCIN: La membrana celular est formada por una capa doble de fosfolpidos, protenas y carbohidratos. Cada fosfolpido est compuesto por glicerol, cidos grasos y fosfato, que en conjunto crean una barrera hidrofbica entre los compartimientos acuosos de la clula. Las protenas permiten el paso de molculas hidroflicas a travs de la membrana, determinan las funciones especficas de sta e incluyen bombas, canales, receptores, molculas de adhesin, transductores de energa y enzimas. Las protenas perifricas estn asociadas con las superficies, mientras que las integrales estn incrustadas en la membrana y pueden atravesar completamente la capa doble. La funcin de los carbohidratos adheridos a las protenas (glucoprotenas) o a los fosfolpidos (glucolpidos) es la de adhesin y comunicacin intercelular. El colesterol , que es un esteroide (lpido), determina la fluidez de la membrana. Para que la clula funcione eficientemente, debe mantenerse en la misma un ambiente estable conocido como homeostasis . Para mantener este equilibrio existen mecanismos para el transporte selectivo de materiales hacia el interior o exterior de la clula. Las membranas de la clula son selectivamente permeables , permitiendo el paso de algunas sustancias o partculas (molculas, tomos, o iones), e impidiendo el paso de otras. Esta selectividad se debe a la capa doble de fosfolpidos de la membrana. La manera en que las molculas pasan por la membrana depende en parte de la polaridad de las mismas. Las molculas hidrofbicas, o no polares, pasan con relativa libertad a travs de la capa de lpidos, mientras que molculas hidroflicas, o polares, incluyendo el agua, y las molculas de mayor tamao, pasan a travs de canales formados por protenas transportadoras . La regulacin del transporte de las molculas, o la direccin en que se mueven depende de su gradiente de concentracin (diferencia en concentracin entre dos lugares).

Las molculas se mueven constantemente debido a su energa cintica y se esparcen uniformemente en el espacio disponible. Este movimiento, llamado movimiento browniano , es la fuerza motriz de la difusin. Difusin se define como el movimiento natural de las partculas de un rea de mayor concentracin a un rea de menor concentracin hasta alcanzar un equilibrio dinmico , en el cual el movimiento neto de partculas es cero. La difusin no requiere gasto de energa por parte de la clula y por lo tanto es un movimiento pasivo . Cuando la clula transporta sustancias en contra de un gradiente de concentracin (de un rea de menor concentracin a un rea de mayor concentracin) se requiere energa (ATP) y sucede movimiento activo . FUNDAMENTO: La membrana celular est formada por una capa doble de fosfolpidos, protenas y carbohidratos. Cada fosfolpido est compuesto por glicerol, cidos grasos y fosfato, que en conjunto crean una barrera hidrofbica entre los compartimientos acuosos de la clula. Las membranas de la clula son selectivamente permeables , permitiendo el paso de algunas sustancias o partculas (molculas, tomos, o iones), e impidiendo el paso de otras. Esta selectividad se debe a la capa doble de fosfolpidos de la membrana. La manera en que las molculas pasan por la membrana depende en parte de la polaridad de las mismas. Las molculas hidrofbicas, o no polares, pasan con relativa libertad a travs de la capa de lpidos, mientras que molculas hidroflicas, o polares, incluyendo el agua, y las molculas de mayor tamao, pasan a travs de canales formados por protenas transportadoras . Cuando la clula contiene una concentracin de solutos mayor que su ambiente externo, se dice que la clula est en una solucin hipotnica , y como consecuencia, el agua entra a la clula causando que se expanda Si la concentracin de solutos es mayor fuera de la clula, se dice que la clula est en una solucin hipertnica ; la clula pierde agua y se encoge. Si las concentraciones de soluto son iguales en ambos lados de la membrana, se dice que la clula est en una solucin isotnica , donde el movimiento neto es cero. EQUIPO, MATERIAL Y SUSTANCIAS: EXPERIMENTO 1.- EFECTO DE LA TEMPERATURA MATERIAL Y SUSTANCIAS Gradilla 1 vaso de 100 ml 1 vaso de 250 ml 6 tubos de 14 x 125 1 vaso de 500 ml 1 horadador 1 termmetro 1 regla 1 nevera 1 navaja o exacto 1 pinza para tubo de ensayo 1 aguja de diseccin 1 probeta de 25 ml 1 pipeta de 5 ml 1 Perilla 1 marcador de cera

Agua destilada 1 remolacha hielo

1 envase 1 tripi 1 tela de asbesto 1 mechero Bunsen

EXPERIMENTO 2. EFECTO DE SOLVENTES MATERIAL Y SUSTANCIAS 2 a 4 huevos de gallina 1 gradilla 6 tubos de 14 x 125

Etanol al 1%, 25%, 50% Acetona al 1%, 25%, 50% 10 ml de aceite 1 remolacha

EXPERIMENTO3. DIFUSIN A. DIFUSIN DE MOLCULAS DE AGUA MATERIAL Y SUSTANCIAS 2 vasos de precipitados de 100 o 250 ml 1 probeta de 50 ml Agua fra Agua a temperatura ambiente Colorante vegetal

B. DIFUSIN A TRAVS DE UNA MEMBRANA SELECTIVAMENTE PERMEABLE (DILISIS) MATERIAL Y SUSTANCIAS 1 vaso de precipitados de 500 ml 1 bolsa de dilisis y cordn o banda de goma 1 gradilla Tubos de 13 x 100 1 bao mara 1 matraz Erlenmeyer de 125 o 250 ml 1 probeta de 50 ml 1 pinzas para tubo de ensayo Reactivo de Benedict Solucin de Yodo 25 ml Solucin de glucosa al 30% 25 ml Solucin de almidn al 1%

PROCEDIMIENTO (HACER DIAGRAMA DE FLUJO):

OBSERVACIONES (HACER DIBUJOS Y EXPLICARLOS EN FORMA ORDENADA):

Experimento 2: Efectos de solventes

6 tubos de ensaye de 14 x 125 rotulados de acuerdo a las especificaciones y con los cortes de la remolacha de 15 mm

Experimento 3: Difusin. A. -"Difusin de molculas de agua"

Experimento 3: B. "Difusin a travs de una membrana selectivamente permeable (dilisis)"

bolsa de dilisis con la mitad de solucin de glucosa y la mitad de solucin de almidn.

Experimento 4: SMOSIS: A) En clulas animales

Laminillas en donde se pudieron observar los cambios de los eritrocitos de la sangre de vaca.

Como se observan los eritrocitos en las laminillas 1-4 en el microscopio. RESULTADOS (HACER TABLA Y/O GRFICA CON SU INTERPRETACIN): (HOJA ANEXA) CONCLUSIN:

Se concluye con esta prctica la importancia que tiene saber acerca de los componentes de una membrana as como todos aquellos factores que pueden alterar sus componentes, esto nos conlleva a conocer que la membrana es permeable y que no permite el paso de cualquier sustancia o partcula a la clula y la manera en que las molculas pasan por la membrana depende en parte de la polaridad de las mismas. Es vital por supuesto mencionar que hay otros puntos que se aprendieron y se lograron observar en esta prctica, como lo fue: el gradiente de concentracin en donde cuando la clula contiene una concentracin de solutos mayor que su ambiente externo, se dice que la clula est en una solucin hipotnica , y como consecuencia, el agua entra a la clula causando que se expanda. Si la concentracin de solutos es mayor fuera de la clula, se dice que la clula est en una solucin hipertnica ; la clula pierde agua y se encoge. Si las concentraciones de soluto son iguales en ambos lados de la membrana, se dice que la clula est en una solucin isotnica , donde el movimiento neto es cero.

CUESTIONARIO (HOJA ANEXA)

BIBLIOGRAFA: http://www.ehowenespanol.com/efectos-temperatura-membranas-celulares-sobre_168388/ http://www.buenastareas.com/ensayos/Factores-Que-Afectan-a-La-Membrana/6897212.html http://www.buenastareas.com/ensayos/Difusi%C3%B3n-a-Trav%C3%A9s-De-Una/27168908.html http://facultad.bayamon.inter.edu/amlugo/biol2013/MEMBRANAS%20BIOL%C3%93GICAS.htm http://dianapatcruzhdz.blogspot.mx/2010/11/practica-2-accion-de-la-amilasa-sobre.html http://www.medvet.una.ac.cr/carrera/mva505_Practica2.pdf

CUESTIONARIOS DE LA PRCTICA N 4.

EXPERIMENTO 1.- EFECTO DE LA TEMPERATURA

CUESTIONARIO 1. Qu tubo mostr ms intensidad de color? El tubo N1 2. Qu indica la intensidad del color? Nos indica que a mayor dao que sufre la membrana, mayor es la cantidad de pigmento que escapa de la clula. 3. Cmo afectan las temperaturas altas a las membranas celulares? Las colas de cidos grasos de la bicapa fosfolpida pueden "disolverse" a altas temperaturas, lo que significa que se vuelven ms fluidas, posibilitando un mayor movimiento. Esto modifica la permeabilidad de la clula, lo que puede permitir el ingreso de molculas que no deberan ingresar y, por ello, daar a la clula. 4. Qu le pasa a las clulas en temperaturas bajas? Las colas de cidos grasos presentes en los fosfolpidos se tornan ms rgidas cuando se exponen a temperaturas fras. Esto afecta la fluidez, la permeabilidad y la capacidad de supervivencia de las clulas. Cuando las clulas pierden fluidez, quedan imposibilitadas de moverse y de crecer. El descenso de la permeabilidad implica que molculas vitales no puedan ingresar a las clulas. Adems, las temperaturas ms fras pueden provocar una disminucin o el freno de las reacciones celulares. 5. Por qu se usa remolacha? Dado que las clulas de la remolacha poseen almacenada en la vacuola central una gran cantidad de pigmento rojo llamado betacianina. Cuando ocurre un dao a la membrana este pigmento puede escapar de la clula. Por lo tanto ante la presencia de un tensor fsico o qumico el pigmento escapa de la clula. A mayor dao a la membrana, mayor cantidad de pigmento escapar de la clula.

EXPERIMENTO 2. EFECTO DE SOLVENTES 1. En qu tubos se observaron reacciones? En todos los tubos se pudieron observar reacciones. 2. Basado en lo que se observ en los tubos de ensayos (refirindose a los tubos 1 - 6 y A - F), cmo afecta la acetona a la membrana? La acetona es un disolvente orgnico que acta rompiendo la estructura de la membrana ya que es ms apolar debido al doble enlace, por lo que disolvera ms los lpidos.

3. Cmo afecta el etanol a la membrana? El etanol al igual que otros alcoholes puede actuar en las membranas biolgicas fundamentalmente de 3 formas: l) alterando la fluidez de las membranas, lo que indirectamente afectara el funcionamiento de las protenas como enzimas y canales; 2) produciendo una deshidratacin a nivel de las membranas; 3) interactuando directamente con las protenas de la membrana. 4. Qu indican los resultados sobre los componentes de la membrana? Indican que al haber una alteracin en la membrana, sus componentes no podrn cumplir sus funciones EXPERIMENTO3. DIFUSIN A. DIFUSIN DE MOLCULAS DE AGUA Afect la temperatura la difusin del tinte? Si afecto ya que la temperatura es directamente proporcional a la velocidad de difusin de un liquido. A mayor temperatura mayor velocidad en la difusin. B. DIFUSIN A TRAVS DE UNA MEMBRANA SELECTIVAMENTE PERMEABLE (DILISIS) 1. Cules son los resultados de este experimento para las pruebas de yodo y de Benedict? Explique. La prueba del yodo o el lugol permite identificar la presencia de almidn, con este reactivo se obtiene un color azul-violeta caracterstico. Si no existe la hidrlisis del almidn la prueba ser positiva. La prueba de Benedict permite identificar a los azucares reductores. Si existe hidrlisis del almidn se formar un precipitado rojo ladrillo que indica la presencia de azcares como la glucosa y la maltosa 2. Qu indican estos resultados? La prueba de Benedict identifica azcares reductores (aquellos que tienen su OH anomrico libre), como el lactosa, la glucosa, la maltosa, y celobiosa. En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que precipita de la solucin alcalina como Cu2O de color rojo-naranja. 3. Qu caracterstica tiene la membrana de dilisis que afecta los resultados? Su composicin qumica y la capacidad de depuracin. Alta permeabilidad y gran capacidad de absorcin.

4. Escribe la reaccin qumica de la prueba de Benedict

Cu+ + OH - Cu(OH) (precipitado amarillo) El hidrxido pierde agua 2Cu(OH) Cu2O (precipitado rojo ladrillo) + H2O La aparicin de un precipitado amarillo, anaranjado, o rojo ladrillo evidencia la presencia de un azcar reductor.

EXPERIMENTO 4. SMOSIS: A) EN CLULAS ANIMALES CUESTIONARIO 1. Qu le pas a las clulas al entrar en contacto con cada una de las soluciones? Por qu? Fueron cambiando de aspecto hasta el grado de que ocurriera una eritrocateresis, ya que cuando la clula contiene una concentracin de solutos mayor que su ambiente externo, se dice que la clula est en una solucin hipotnica , y como consecuencia, el agua entra a la clula causando que se expanda. Si la concentracin de solutos es mayor fuera de la clula, se dice que la clula est en una solucin hipertnica ; la clula pierde agua y se encoge. Si las concentraciones de soluto son iguales en ambos lados de la membrana, se dice que la clula est en una solucin isotnica , donde el movimiento neto es cero. 2. Cules de las soluciones usadas fueron hipotnicas, hipertnicas e isotnicas para los eritrocitos? ERITROCITOS Sacarosa 0.1 y 0.6 M Sol. hipotnica Sacarosa 0.3 M Sol. hipertnica Solo la sangre de vaca Sol. Isotnica

3. En qu solucin sucedi hemlisis de los eritrocitos y por qu? En la solucin hipotnica ya que ste pasa por un estado de turgencia (se hincha por el exceso de lquido) y luego esta clula estalla debido a la presin. 4. Qu indican los resultados acerca de la concentracin de solutos en el plasma sanguneo? Indican que cuando la clula contiene una concentracin de solutos mayor que su ambiente externo, se dice que la clula est en una solucin hipotnica. Si la concentracin de solutos es mayor fuera de la clula, se dice que la clula est en una solucin hipertnica Si las concentraciones de soluto son iguales en ambos lados de la membrana, se dice que la clula est en una solucin isotnica

TABLAS DE LOS EXPERIMENTOS

Experimento 1. Efecto de la temperatura Tubo 1 2 3 4 5 6 Solucin 70 C 55 C 37 C 20 C En bao del hielo En congelador Intensidad de color. 1=menos intenso. 6= ms intenso 6 4 3 5 2 1

Experimento 2. Efectos de solventes Tubo 1 2 3 4 5 6 Solucin Etanol 1% Etanol 25 % Etanol 50 % Acetona 1% Acetona 25 % Acetona 50 % Intensidad de color. 1=menos intenso. 6= ms intenso 3 5 6 4 2 1

Experimento 4. smosis. A) En clulas animales ERITROCITOS Sacarosa 0.1 y 0.6 M Sacarosa 0.3 M Solo la sangre de vaca

Sol. hipotnica Sol. hipertnica Sol. Isotnica

LAMINILLA 1 2 3 4

ERITROCITOS OBSERVACIN Los eritrocitos se ven normales Los eritrocitos se ven ensanchados Se nota la separacin de los eritrocitos Ocurri una eritrocateresis.