CICLO CELULAR Y DUPLICACIN DEL ADN Ciclo celular

Las clulas de los distintos organismos pasan durante su vida por distintos per odos! cada uno de ellos caracter stico " claramente di#erenciado$ Cada tipo celular cumple con sus #unciones espec #icas durante la ma"or parte de su vida! creciendo gracias a la asimilaci%n de materiales provenientes de su am&iente " con ellos sinteti'a nuevas molculas por medio de comple(os procesos regulados por su material gentico$ Cuando una clula aumenta )asta llegar a un determinado tama*o! su e#iciencia meta&%lica se torna cr tica! entonces se divide$ En los organismos pluricelulares! se produce un crecimiento a partir de una clula +)uevo o cigoto, como as tam&in se aumenta la masa tisular " se reparan los te(idos lesionados o desgastados! por aumento del n-mero de clulas$ Las nuevas clulas originadas en esta divisi%n poseen una estructura " #unci%n similares a las clulas progenitoras! o &ien derivadas de ellas$

.ig$ /0$/ 1 Ciclo de Divisi%n Celular En parte son similares por2ue cada clula nueva! reci&e apro3imadamente la mitad de organoides " citoplasma de la clula madre! pero en trminos de capacidades estructurales " #uncionales lo importante es 2ue cada clula )i(a! reci&a una rplica e3acta del material gentico de la clula madre$ Durante la vida celular! las clulas pasan por un ciclo regular de crecimiento " divisi%n$ A esta secuencia de #ases se la denomina ciclo celular " en general consta de un per odo donde ocurre un importante crecimiento " aumento de la cantidad de organoides +inter#ase, " un per odo de divisi%n celular +mitosis o meiosis,$ La inter#ase involucra per odos donde la clula reali'a los procesos vitales propios de su #unci%n$ Durante ella! se producen tam&in #en%menos a nivel nuclear imprescindi&les para la divisi%n posterior$ Cronol%gicamente podemos dividir la inter#ase en tres etapas 4 /! 5 " 40$

6aciendo un es2uema del ciclo celular! el tiempo en 2ue transcurre cada una de las etapas se representa en la .ig$ /0$0$ Es necesario se*alar 2ue e3isten e3cepciones a este ciclo! "a 2ue no en todas las clulas los per odos tienen la misma duraci%n$ Incluso si consideramos una po&laci%n celular )omognea +clulas del mismo tipo,! e3isten variaciones particulares$ 5iempre 2ue se )a&la de tiempos determinados! se )ace considerando los promedios de cada tipo celular$ 7am&in e3isten clulas 2ue de(an de dividirse por largos per odos o &ien permanentemente$ Por e(emplo! las neuronas permanecen luego de la maduraci%n del te(ido nervioso en una etapa especial denominada 4 8! donde las clulas entrar an como alternativa a 4/$ En la actualidad es #recuente re#erirse a este tipo de clulas como 9no c clicas9 o detenidas en 4/! "a 2ue no es seguro 2ue las clulas 2ue no se dividen pasen por un solo estad o$

.ig$ /0$0 1 .ases del Ciclo Celular

E7APA5 Y CARAC7ER:57ICA5 Como "a se mencion%! una clula tipo pasa a lo largo de su vida por etapas +4 /! 5 " 40, antes de dividirse$ Las caracter sticas m;s relevantes de cada una de las mismas son< Etapa G1: Esta etapa 2ue sucede a la divisi%n celular es la m;s varia&le en duraci%n$ Las clulas )i(as recientemente originadas presentan una gran actividad meta&%lica producindose un aumento acelerado del tama*o celular$ Los organoides de la clula precursora )an sido repartidos de manera m;s o menos e2uitativa entre las clulas )i(as! de&en entonces aumentar de tama*o " tam&in en n-mero para mantener las

caracter sticas de su tipo celular$ 5e sinteti'an as ri&osomas " microt-&ulos a partir de las prote nas " otras molculas 2ue la con#orman$ Los organoides del sistema de endomem&ranas! aumentan considera&lemente de tama*o! "a 2ue am&as clulas )i(as )an reci&ido parte de estos organoides$ 5in em&argo! pueden ser sinteti'ados de nuevo en caso de no e3istir precursores$ Esto no ocurre con mitocondrias " cloroplastos 2ue se originan por divisi%n de estas estructuras pree3istentes$ Como se recordar; am&os organoides contienen ADN " ri&osomas 2ue les permite dividirse de #orma relativamente independiente del n-cleo celular$ 7odos los procesos de s ntesis de nuevos organoides o aumento de tama*o de los e3istentes! son regulados mediante activaci%n de comple(os en'im;ticos en un momento determinado$ En este per odo se o&serva! a su ve'! una gran s ntesis de ARNm como as tam&in ARNt " ARNr$ Estos ;cidos ser;n utili'ados para la s ntesis de prote nas estructurales! para la construcci%n " o aumento de los organoides! como as tam&in la producci%n de en'imas necesarias para dic)a s ntesis$ Ca&e destacar 2ue durante este per odo tam&in se sinteti'an las en'imas 2ue ser;n utili'adas en la etapa siguiente! es decir en la duplicaci%n del ADN! como as tam&in molculas precursoras de los ;cidos nucleicos$ Cuando las clulas de(an de crecer +si se agotan los nutrientes o por in)i&ici%n por contacto, lo )acen en 4/$ Esto implica 2ue tam&in se sinteti'an las sustancias 2ue estimulan o in)i&en distintas #ases del ciclo celular$ Etapa S: el per odo 5 o de s ntesis de ADN tiene como caracter stica #undamental la s ntesis de nuevo material gentico! para 2ue las clulas )i(as tengan la misma dotaci%n$ 5in em&argo persisten los altos ndices de s ntesis de ARN para o&tener en'imas re2ueridas en la s ntesis de )istonas 2ue #ormar;n parte de la macroestructura del ADN " tu&ulinas relacionadas con el proceso de divisi%n celular$ Etapa G2: En esta #ase! "a con el ADN duplicado! la clula ensam&la las estructuras necesarias para la separaci%n de las clulas )i(as durante la divisi%n celular " la citocinesis +separaci%n del citoplasma,$ Etapa M: Durante =! la envoltura nuclear se desintegra! la cromatina se condensa en #orma creciente )asta ser visi&le los cromosomas al microscopio %ptico$ Estos cromosomas #ormados cada uno por dos crom;tidas +cromosomas duplicados, pasaran por cada una de las #ases de la divisi%n celular +mitosis o meiosis, para concluir con la #ormaci%n de las clulas )i(as! cada una con una -nica copia de su ADN +cromosomas sin replicar, ! 2ue marcan el inicio de un nuevo ciclo$ 5I57E=A DE CON7ROL DEL CICLO CELULAR El sistema de control del ciclo celular es un dispositivo &io2u mico compuesto por un con(unto de protenas reguladoras interactivas< las ciclinas " las quinasas dependientes de ciclinas 2ue inducen " coordinan los procesos &;sicos del ciclo! como la duplicaci%n de ADN " la divisi%n celular! a los 2ue denominamos procesos subordinados$ Durante un ciclo t pico! el sistema de control est; regulado por factores de retraso 2ue pueden #renar el ciclo en puntos determinados denominados puntos de control$ En estos

puntos! las se*ales de retroalimentaci%n 2ue contienen in#ormaci%n so&re los procesos su&ordinados pueden detener moment;neamente el avance del ciclo! evitando el inicio del proceso siguiente antes 2ue el precedente )a"a terminado$ 5o&re dic)os #actores tam&in act-an se*ales del entorno como puede ser una )ormona o un #actor de crecimiento$ Una analog a 2ue puede a"udarnos a comprender este mecanismo es comparar al sistema de control del ciclo celular con el #uncionamiento de una lavadora autom;tica +/$ Al&erts " col 1p;g>0>1>?8,! el programador de la lavadora s%lo avan'a a travs de los di#erentes pasos del ciclo de lavado +etapas del ciclo celular,! si reci&e determinadas se*ales$ Adentro de la lavadora )a" sensores 2ue miden el nivel de agua o (a&%n 2ue ingresan$ Estos sensores env an se*ales 2ue pueden provocar el retraso o la interrupci%n del ciclo de lavado$ De igual manera en la clula! las se*ales generadas en los procesos su&ordinados +por e($ la s ntesis de ADN, o por el entorno! detienen el ciclo$ A continuaci%n pasaremos a descri&ir las prote nas reguladoras! el mecanismo de regulaci%n " los puntos de control del ciclo celular$ PRO7E:NA5 RE4ULADORA5 DEL CICLO CELULAR El pasa(e de una clula a travs del ciclo es controlado por prote nas citoplasm;ticas$ Los principales reguladores del ciclo en clulas animales son< /$ Las ciclinas! prote nas 2ue controlan la actividad de sus protein2uinasas dependientes$ La concentraci%n de ciclinas var a en #orma c clica! aumentando o disminu"endo durante el transcurso del ciclo celular$ Esto se de&e a variaciones en la velocidad de degradaci%n de la ciclina! dado 2ue la velocidad de s ntesis es casi constante durante todo el ciclo$ En los mam #eros e3isten @ ciclinas como m nimo! denominadas A! A! C! D! E " . +.ig$ /0$B&,! pero nosotros las clasi#icaremos como ciclinas de 4/ " ciclinas mit%ticas$ Las ciclinas 4/ se unen a sus 2uinasas dependientes de ciclinas +CdC0, durante 4/ siendo necesarias para superar el punto de control 4/ " pasar a la #ase 5$ Las ciclinas mit%ticas se #i(an a la 2uinasa CdC/ durante 40! siendo necesaria su presencia para 2ue el ciclo supere el punto de control 40 " se inicie la mitosis$ +.ig$ /0$? , 0$ Las quinasas dependientes de ciclinas +CDD,! en'imas 2ue mediante la #os#orilaci%n de determinadas prote nas desencadenan los procesos su&ordinados del ciclo celular$ En los mam #eros se conocen E CDD las cuales #orman tres grupos principales<

.ig$ /0$? 1 Comple(o ciclina12uinasa dependiente de ciclina activo +ciclina1CDD,

CDD de 4/ +CdC0, CDD de #ase 5 +CdC0,

CDD de #ase = +CdC/,

A di#erencia de la concentraci%n de ciclinas! la concentraci%n de CDD se mantiene durante todo el ciclo celular! por permanecer constantes tanto la velocidad de s ntesis como la de degradaci%n +.ig$ /0$B " /0$E, Las CDD se activan s%lo cuando se unen a las ciclinas para #ormar comple(os! por lo 2ue re2uieren un nivel um&ral para desencadenar la transici%n a la #ase siguiente del ciclo celular$ ?$ El Complejo Promotor de la Anafase +APC, " otras en'imas proteol ticas$ El APC desencadena los eventos 2ue conducen a la destrucci%n de las co)esinas F/G permitiendo a las crom;tidas )ermanas separarse e iniciando la degradaci%n de las ciclinas mit%ticas$

.ig$ /0$B 14enerali'aci%n del sistema de control del ciclo celular en eucariotas

.ig$ /0$ E 1 Ciclinas " CDD en un ciclo celular de verte&rados =ECANI5=O DE RE4ULACIN DEL CICLO CELULAR Al #inali'ar la mitosis aumenta la e3presi%n de la ciclina 4/ +E,! esta ciclina se unir; a la su 2uinasa +CdC0, #ormando un comple(o activo conocido como factor promotor de ase S ! PS "$ Este .P5 s%lo puede actuar so&re cromosomas en estado Pre#$eplicati%o$ As se denominan por poseer so&re cada origen de replicaci&n un comple(o multiproteico llamado Pre1Replicativo$ Los or genes de replicaci%n +ORI, se presentan en n-mero de 08 a H8 so&re cada la'o de cromatina " se caracteri'an por poseer una secuencia com-n denominada secuencia de replicaci&n aut&noma !A$S" #ormada por dos secuencias 94A44C9 so&re las 2ue se )alla unido a lo largo de todo el ciclo celular! el complejo de reconocimiento del origen de replicaci&n !'$C"( uno de los comple(os prote cos 2ue #orma parte del comple(o Pre1 Replicativo +PreR,$ El segundo componente del comple(o PreR es la prote na Cdc)p !cell di%ision c*cle protein"( 2ue se sinteti'a en 4/ e inserta so&re los or genes de replicaci%n al -ltimo componente! las protenas de mantenimiento de los minimicrosomas !MCM"+ +.ig$ /0$@, El nivel creciente de .P5 al inicio de la #ase 5 induce la apertura de los or genes de replicaci%n! activando a las molculas responsa&les de la s ntesis de ADN e induciendo la separaci%n del comple(o Pre1R del componente Cdc@p " =C=$ 5eparados estos componentes! se inicia la s ntesis! " por lo tanto el .P5 no se re2uiere m;s! siendo su componente l;&il! la ciclina de 4/! degradada en los proteosomas$ Los cromosomas a partir de este momento se denominar;n cromosomas Post#$eplicati%os +s%lo presentan asociado a los or genes de replicaci%n el ORC,$ Los cromosomas se mantendr;n en estado Post1R )asta el inicio de la ana#ase$

Degradadas las ciclinas 4/! el nivel de ciclinas mit&ticas aumenta$ Un nuevo participante entra al ciclo! el complejo promotor de la mitosis( PM ! #ormado por las ciclinas mit%ticas m;s las 2uinasas dependientes de ciclinas de = +CdC/,$ Iste inicia el ensam&lado del )uso mit%tico! la desintegraci%n de la envoltura nuclear " la condensaci%n de los cromosomas! al inducir la #os#orilaci%n de di#erentes sustratos como las l;minas nucleares! conduciendo a la clula a la meta#ase$ A esta altura del ciclo! el .P= activa el complejo promotor de la Anafase( APC! 2ue permite la separaci%n de las crom;tides )ermanas " su migraci%n a los polos +ana#ase,$ As se completa la mitosis! se destru"en las ciclinas de #ase = " se activan las ciclinas de 4/ para el pr%3imo ciclo celular$

.ig$ /0$@ 1 =odelo simpli#icado propuesto para la replicaci%n de cromosomas eucariotas

CON7ROL DE CALIDAD DEL CICLO CELULAR +.ig$ /0$J,

Durante el ciclo celular! la clula pasa al menos tres puntos de control +c)ecCpoints,< Punto de control G1! en este punto el sistema de control de la clula pondr; en marc)a el proceso 2ue inicia la #ase 5$ El sistema evaluar; la integridad del ADN +2ue no

este da*ado,! la presencia de nutrientes en el entorno " el tama*o celular$ A2u es donde generalmente act-an las se*ales 2ue detienen el ciclo +arresto celular, $ Punto de control G2! en l se pone en marc)a el proceso 2ue inicia la #ase =$ En este punto! el sistema de control veri#icar; 2ue la duplicaci%n del ADN se )alla completado +2ue no este da*ado,! si es #avora&le el entorno " si la clula es lo su#icientemente grande para dividirse$ Punto de control de la Metafase o del ,uso ! veri#ica si los cromosomas est;n alineados apropiadamente en el plano meta#;sico antes de entrar en ana#ase$ Este punto protege contra prdidas o ganancias de cromosomas! siendo controlado por la activaci%n del APC$

.ig$ /0$J 1 Puntos de Control e Ingreso de la in#ormaci%n Reguladora al 5istema de Control del Ciclo Celular

Prote na pE?! el guardi;n del genoma

Como )emos mencionado en los p;rra#os precedentes! tanto en el punto de control 4/ como 40 se veri#ica la integridad del ADN$ Ante la presencia de A-. da/ado se genera una se*al 2ue retrasa la entrada en #ase =$ El mecanismo depende de una prote na llamada p01! 2ue se acumula en la clula en respuesta a las alteraciones de ADN! deteniendo el sistema de control en 4/ " por lo tanto impidiendo la posterior entrada en mitosis$ El gen pE? es uno de los genes supresores de tumores m;s conocidos! 2ue no s%lo detiene el ciclo +arresto celular,! sino tam&in participa en la apoptosis +muerte celular programada, #or'ando a las clulas al suicidio cuando el da*o en el ADN es irrepara&le$ Las clulas 2ue presentan los dos alelos del gen p01 mutados! tendr;n protena p01 no acti%a " por lo tanto continuar;n dividindose a pesar del da*o en su genoma! por lo tanto desarrollar;n c2ncer$ Las mutaciones del gen pE? presenta una alta incidencia en la ma"or a de los c;nceres )umanos$

3C&mo act4a la p015

Cuando el ADN presenta un da*o 9limitado9! aumentan los niveles de prote na pE?$ Dic)a prote na activa la transcripci%n del gen p0/! 2ue codi#ica a la prote na p0/$ Esta -ltima prote na e(erce su e#ecto in)i&idor unindose al comple(o ciclina1CdC0 " deteniendo el ciclo$ Cuando el ADN es reparado! la prote na pE? se li&era del promotor del gen p0/! provocando el descenso en los niveles de p0/$ Esto permite restaurar la actividad del comple(o ciclina1CdC0$

.ig$ /0$H 1 Acci%n de la Prote na pE? en el Control del Ciclo Celular

ONCO4ENE5 Y CKNCER Los genes supresores de tumores! codi#ican para productos celulares 2ue in)i&en la proli#eraci%n celular$ Para impedir el e#ecto protector 2ue e(ercen so&re el genoma! se re2uiere la mutaci%n de sus dos alelos$ Los genes conocidos como protooncogenes codi#ican prote nas 2ue estimulan la divisi%n celular! por e(emplo! #actores del crecimiento o receptores de #actores del crecimiento$ La mutaci%n de uno de los dos alelos 2ue codi#ican para un protooncogen! lo trans#orma en un oncogen capa' de originar productos celulares 2ue estimulan la divisi%n celular de #orma incontrolada conduciendo al c;ncer! con alteraci%n de los mecanismos de control del ciclo celular$ En la siguiente ta&la se mencionan a titulo in#ormativo los oncogenes " genes supresores de tumores me(or conocidos por su e3presi%n durante el ciclo celular$

7a&la /0$/ 1 AL4UNO5 4ENE5 RELACIONADO5 CON CKNCERE5 EN 6U=ANO5

Genes para factores de crecimiento o sus receptores P-G

Codi#ica el .actor de crecimiento derivado de las pla2uetas$ Responsa&le de glioma +un c;ncer del cere&ro,
Codi#ica al .actor de crecimiento epidrmico$ Relacionado con glio&astoma +c;ncer del cere&ro, " c;ncer de mama$ Codi#ica receptor de #actor de crecimiento$ Relacionado con c;ncer de mama! gl;ndulas salivales " ovario$ Codi#ica receptor de .actor del crecimiento$ Relacionado con c;ncer de tiroides$

'.C'GE.ES

erb#6

erb#62

$E7

Genes para transductores citoplasm2ticos en %as estimuladoras 8i#ras .#ras Responsa&le de c;ncer de pulm%n! ovario! colon " p;ncreas$ Relacionado con leucemias$

Genes para factores de transcripci&n que acti%an genes promotores del crecimiento c#m*c .#m*c '.C'GE.ES 9#m*c Relacionado con leucemias " c;nceres de est%mago! pulm%n " mamas Relacionado con neuro&lastoma +c;ncer de clulas nerviosas, " glio&lastoma Relacionado con c;ncer de pulm%n$ Genes para otros tipos de mol:culas 6cl#2 Codi#ica para una prote na 2ue normalmente &lo2uea la apoptosis$ Relacionado con lin#oma de clulas #oliculares A$ 7am&in llamado PRADI$ Codi#ica la ciclina D/! un ciclina reguladora del ciclo celular$ Relacionada con c;ncer de mama! ca&e'a " cuello$ Codi#ica un antagonista de la prote na pE?$ Participa en sarcomas " otros c;nceres$ Genes de protenas citoplasm2ticas

6cl#1

M-M2

GE.ES S;P$ES'$ES

APC -PC<

Relacionada con c;ncer de col%n " est%mago$ Codi#ica para una molcula transductora en una v a 2ue in)i&e la divisi%n celular$ Relacionada con c;ncer pancre;tico$ Codi#ica para una prote na 2ue in)i&e a la prote na Ras$ Relacionada con neuro#i&roma " #eocromocitoma +c;ncer del sistema nervioso peri#rico, " leucemia mieloide$

. #1

. #2

Relacionado con meningioma " ependinoma +enc#alo, " sc)Lanoma +nervios peri#ricos,
Genes de protenas nucleares

M7S1 -E 7;M'$ES $6

Codi#ica para la prote na p/@! uno de los #renos del sistema de control del ciclo celular$ Relacionada con muc)os c;nceres$ Codi#ica para la prote na RA +retino&lastoma,$ Esta prote na es uno de los principales #renos en el ciclo celular$ Codi#ica para la prote na pE?! la cual detiene la divisi%n celular e induce a las clulas anormales al suicidio +apoptosis,$ Relacionado con la ma"or a de los c;nceres $ Relacionado con el 7umor de Milms del ri*%n$

p01

=71

Genes que codifican protenas de ubicaci&n a4n no determinada 6$CA1 6$CA2 >,9 Relacionado en c;nceres de mama " ovario$ Relacionado con c;ncer de mama$ Relacionado con c;ncer de clulas renales$

DUPLICACIN DEL ADN

CARAC7ER:57ICA5 DE LA DUPLICACIN DEL ADN
Aun2ue los principios generales de la duplicaci%n o replicaci%n del ADN son sencillos " pueden considerarse como consecuencia directa de su estructura! el proceso re2uiere una ma2uinaria comple(a 2ue contiene una gran cantidad de en'imas " prote nas 2ue act-an en con(unto$

.ig$ /0$> 1 La duplicaci%n del ADN se produce previo desenrollamiento de las dos cadenas de la do&le )lice! usando cada una como molde para sinteti'ar las nuevas cadenas$ /$ =NL7IPLE5 PUN7O5 DE ORI4EN

Los cromosomas eucariontes tienen una gran cantidad de ADN! el cual se )alla contenido en dos molculas lineales! una para cada crom;tide$ 5i estas molculas se replicasen a partir de un sitio -nico de origen! la etapa O5P de la Inter#ase ser a e3tremadamente larga$ Las clulas eucariontes resuelven este pro&lema disponiendo de m-ltiples sitios de origen de la replicaci%n en cada cromosoma$ En ellos! el ADN presenta secuencias especiales de nucle%tidos$ Adem;s todos los or genes tienen en com-n secuencias conservadas de apro3imadamente doce pares de nucle%tidos! llamados AR5 +autonomus replication secuence,$

.ig$ /0$/8 1 La replicaci%n siempre comien'a en los sitios de origen en cada cromosoma$ En ellos el ADN presenta secuencias especiales de nucle%tidos 0$ DE5ENROLLA=IEN7O DE LA5 CADENA5 DE ADN

En cada cromosoma! las dos cadenas del ADN se encuentran arrolladas una a la otra como los )ilos de una soga$ 5i tratamos de separarlas! la soga de&e apretarse m;s en las vueltas restantes o girar$ Algo similar ocurre en el ADN! cuando las cadenas complementarias se separan para iniciar la duplicaci%n$ En ese momento aumenta la tensi%n torsional en el sector no duplicado de la do&le )lice$

.ig$ /0$ // 1 5eparaci%n progresiva de las dos cadenas de ADN a nivel de la )or2uilla de replicaci%n " su posi&le consecuencia &iol%gica$ El desenrollamiento es reali'ado por las en'imas A-.#?elicasas! las cuales recorren la )lice desenrollando las )e&ras del ADN a medida 2ue avan'an$ Una ve' separadas! las cadenas se com&inan con las protenas SS6! llamadas tam&in prote nas desesta&ili'adoras! 2ue evitan el autoapareamiento entre las &ases complementarias li&remente e3puestas$

.ig$ /0$/0 1 Cadenas adelantada " retrasada del ADN durante la replicaci%n$ La )elicasa separa a las dos cadenas del ADN " las prote nas 55A evitan autoapareamientos entre las &ases complementarias li&remente e3puestas en la cadena atrasada$

A medida 2ue la en'ima )elicasa a&re la do&le )lice! dos en'imas complementarias< la topoisomerasa @ " la topoisomerasa @@ o girasa( van disminu"endo la tensi%n torsional acumulada por el superenrollamiento en el sector no replicado de la do&le )lice$ 9a topoisomerasa @ primero corta una de las cadenas del ADN! luego la cadena cortada gira una vuelta en torno a su propio e(e " #inalmente vuelve a unir los e3tremos cortados$ 9a topoisomerasa @@ corta las dos cadenas! las cuales luego de girar una vuelta alrededor del e(e de la do&le )lice! resta&lecen sus uniones$ Am&as en'imas utili'an energ a del A7P " se comportan como nucleasas +cortando las cadenas de ADN, " luego como ligasas +resta&leciendo las uniones #os#odister,$ Las topoisomerasas I " II se di#erencian no s%lo por2ue la primera corta una de las cadenas " la segunda corta las dos! sino tam&in por2ue la topoisomerasa I reali'a desenrollamientos de corto alcance " la girasa a&arca una e3tensi%n de ADN &astante ma"or$

.ig$ /0$/0 1 E#ecto )ipottico de la topoisomerasa II para evitar el superenrollamiento 2ue se produce en el ADN como consecuencia de la separaci%n progresiva de sus cadenas$

?$

LA DUPLICACIN DEL ADN E5 AIDIRECCIONAL

Al a&rirse la do&le )lice se #orma una O&ur&u(aP de replicaci%n! cu"o tama*o aumenta a medida 2ue avan'a la separaci%n de las dos cadenas del ADN! #en%meno 2ue se produce en am&os e3tremos de la &ur&u(a en #orma simult;nea$ 5e esta&lece de este modo! en cada uno de los e3tremos! una estructura en #orma de A! a la 2ue llamamos )or2uilla de replicaci%n! cu"os &ra'os representan a las cadenas "a separadas de ADN " el tronco la do&le )lice en v as de separaci%n$ As cada &ur&u(a tiene dos )or2uillas de replicaci%n 2ue a partir de un punto de origen com-n avan'an en direcciones opuestas$ Las )or2uillas desaparecen cuando se van integrando a las &ur&u(as contiguas$ Las )or2uillas 2ue recorren los tel%meros desaparecen cuando se separa el -ltimo par de nucle%tidos$

El segmento de ADN 2ue se sinteti'a a partir de un origen de replicaci%n +con sus dos )or2uillas,! lo llamamos replic&n+ De este modo la replicaci%n del ADN termina cuando se ensam&lan los sucesivos replicones$ Esto permite 2ue el ADN se sintetice en un tiempo &astante &reve para el ciclo de vida de una clula$

.ig$ /0$ /B 1 Es2uema 2ue muestra dos replicones contiguos " los puntos donde se origina la replicaci%n +#lec)as,$ Puede o&servarse el car;cter &idireccional de la replicaci%n " los sectores donde el ADN se sinteti'a en #orma continua " discontinua$ B$ LA 5:N7E5I5 DE ADN E5 DI5CON7INUA

Una de las caracter sticas de las ADN1polimerasas es 2ue s%lo pueden actuar en direcci%n EQ ?Q! por agregado de nucle%tidos en el e3tremo ?Q de las cadenas nuevas$ Como vimos! a medida 2ue se separan las cadenas progenitoras en la )or2uilla de replicaci%n! una presenta sus nucle%tidos en direcci%n EQ ?Q " la otra en direcci%n ?Q EQ$ De manera 2ue la primera al ser copiada de&er a #ormar una cadena )i(a en sentido ?Q EQ! algo 2ue las polimerasas no pueden )acer$ Las clulas solucionan esta situaci%n utili'ando estrategias distintas en la construcci%n de cada una de las nuevas cadenas$ La cadena )i(a 2ue se #orm% en direcci%n ER ?Q se constru"e en #orma continua mediante el agregado de nucle%tidos en el e3tremo ?Q a medida 2ue avan'a la )or2uilla de replicaci%n$ En cam&io la otra cadena )i(a es sinteti'ada de manera discontinua! en pe2ue*os tramos! llamados #ragmentos de OCa'aCi! los cuales se unen entre s a medida 2ue se sinteti'an! por acci%n de la en'ima A-.#ligasa+ Por lo e3puesto! podemos decir 2ue la s ntesis del ADN es un proceso &idireccional! no s%lo por2ue se produce en dos direcciones divergentes a partir de una misma &ur&u(a de replicaci%n! sino tam&in por2ue las cadenas de la do&le )lice son sinteti'adas en direcciones opuestas$

.ig$ /0$ /E 1 Replicaci%n semiconservativa del ADN$

E$

=ODELO 5E=ICON5ERSA7ISO

Como las nuevas )lices de ADN est;n #ormadas por una cadena original +pree3istente, 2ue sirvi% de molde " una cadena nueva +recin sinteti'ada, decimos 2ue el mecanismo de replicaci%n es semiconservativo$ INICIO DE LA 5:N7E5I5 DE ADN Para iniciar la s ntesis de las cadenas complementarias se re2uiere adem;s del ADN molde un cebador o primer ( 2ue consiste en una pe2ue*a cadena de ARN de unos die' nucle%tidos de largo$ La s ntesis del ce&ador es catali'ada por una en'ima llamada A$.#primasa "$ el ce&ador 2ueda unido al ADN temporariamente$ Una ve' sinteti'ado el ce&ador la s ntesis contin-a si la ADN1polimerasa tiene disponi&les su#icientes deso3irri&onucle%tidos tri#os#atados +dA7P! d47P! dCCP " d77P,$ Istos se agregan en la cadena nueva de acuerdo a la secuencia de nucle%tidos de la cadena 2ue sirve de molde$ 4ran parte de la energ a re2uerida durante la replicaci%n la aportan los deso3irri&onucle%tidos tri#os#atados! 2ue )idroli'an los -ltimos dos grupos #os#ato +li&erando energ a, cuando se unen entre s $ Al iniciarse la s ntesis continua del ADN! en cada origen se #orman dos cebadores orientados divergentemente uno en cada cadena de la do&le )lice " a continuaci%n la A-.#polimerasa catali'a la s ntesis de la cadena continua agregando nucle%tidos en el e3tremo ?Q de la )e&ra en #ormaci%n$ =ientras tanto los ce&adores son removidos por una nucleasa reparadora " su lugar es reempla'ado por un #ragmento de ADN e2uivalente sinteti'ado por la A-.#polimerasa $

Como vimos la cadena continua re2uiere un solo ce&ador 2ue se #orma a comien'o de la replicaci%n! en cam&io la cadena discontinua necesita muc)os ce&adores! uno para cada #ragmento de OCa'aCi$ La en'ima responsa&le de la s ntesis discontinua es la A-.# polimerasa + Ca&e se*alar 2ue las ADN1polimerasas son sosten das por un anillo proteico llamado PC.A +Proli#erating Cell Nuclear Antigen, mientras reali'a el desli'amiento por la cadena de ADN

.ig$ /0$/@ 1 Do&le )lice de ADN desenrroll;ndose$ Cada cadena servir; de molde para la s ntesis de cadenas nuevas

.ig$ /0$/J 1 La energ a para el proceso de replicaci%n la proveen los mismos deso3irri&onucle%tidos tri#os#atados! con la )idr%lisis de los -ltimos dos grupos #os#ato1

.ig$ /0$ /H 1 Uni%n del aro de PCNA a la ADN polimerasa

Los #ragmentos de OCa'aCi alcan'an una longitud de 088 nucle%tidos$ Una ve' completa la s ntesis de un #ragmento am&as en'imas se li&eran " vuelven (untas )acia el ;ngulo de la )or2uilla de replicaci%n! de(ando atr;s los 088 nucle%tidos del segmento 2ue aca&an de sinteti'ar " otros tantos del ADN molde 2ue se usar; para copiar el pr%3imo #ragmento de OCa'aCi$ Como ocurre con la polimerasa d en movimiento! la ADN1polimerasa a no se desprende del ADN de&ido a 2ue se le asocia un aro de PCNA$ Luego el ce&ador es )idroli'ado por una nucleasa( la 2ue se encarga tam&in de reparar errores +segundo sistema de reparaci%n, " los )uecos son rellenados con deso3irri&onucle%tidos por la A-.#polimerasa + .inalmente los #ragmentos de OCa'aCi son unidos por la ADN1ligasa$ La discontinuidad de la s ntesis )ace 2ue la )e&ra mal orientada cre'ca m;s lentamente 2ue la otra! 2ue lo )ace en #orma continua! por esta ra'%n se les asign% el nom&re de cadena reBagada " cadena adelantada respectivamente$ Replicaci%n de la )eterocromatina La )eterocromatina por estar mu" compactada se replica tard amente durante la #ase O5P del ciclo celular$ 5 ntesis de )istonas 6emos se*alado 2ue el ADN se replica en #orma semiconservativa! es decir 2ue las cadenas de la do&le )lice progenitora! al separarse para su replicaci%n! se comparten por igual en am&os cromosomas )i(os$ En cam&io no se sa&e como se segregan las )istonas$ Es posi&le 2ue al ca&o de la replicaci%n sean )eredadas totalmente por uno de los cromosomas )i(os! en este caso el otro cromosoma )i(o de&e procurarse de la totalidad de )istonas nuevas$ En su ma"or parte las )istonas se sinteti'an durante la #ase O5P de la inter#ase " se incorporan al cromosoma apenas es duplicado el ADN Replicaci%n en Procariontes =uc)as de las caracter sticas esenciales de la duplicaci%n del ADN son universales! aun2ue e3isten algunas di#erencias entre procariontes " eucariontes de&ido a 2ue su material gentico est; organi'ado de manera distinta$

En las &acterias casi todo el ADN se encuentra #ormando una cadena circular! en cam&io en los eucariontes cada cromosoma no duplicado contiene una cadena lineal asociada a una gran cantidad de prote nas " algo de ARN$ En procariontes al e3istir un 4nico punto de origen se #orma s%lo un o(al de replicaci%n$ A2u act-an tres ADN1polimerasas< A-.#polimerasa @! es la 2ue elimina el ce&ador " reempla'a los ri&onucle%tidos de ste por deso3irri&onucle%tidos! rellenando los )uecos de(ados por la ADN1polimerasa II$ Adiciona /8 nucle%tidosTseg$ A-.#polimerasa @@! tiene actividad de nucleasa! es decir 2ue retira nucle%tidos de la cadena de ADN en los sitios donde se produ(eron errores o desempare(amientos$ A-.#polimerasa @@@( es la en'ima responsa&le de alargar las cadenas en el proceso de replicaci%n$ Adiciona E88 nucle%tidosTseg$

.ig$ /0$/> 1 =ecanismo de replicaci%n del ADN en clulas procariontes

.ig$ /0$08 1 =ecanismo de replicaci%n en procariotas

Cuadro /0$/ 1 =NL7IPLE5 .UNCIONE5 DE LA5 ADN1POLI=ERA5A EN E$ COLI

Poli$ I " Poli$ III 5 ntesis de ADN en sentido EQ E3onucleasa en sentido ?Q EQ ?Q

Correcci%n de errores! removiendo nucle%tidos en sentido EQ ?Q

E3onucleasa en sentido EQ

Poli$ I

?Q

Cuadro /0$0 1 PRINCIPALE5 ENUI=A5 VUE AC7UAN EN LA REPLICACIN En'imas

Reacciones 2ue catali'an Elimina el ce&ador! reempla'ando los ri&onucle%tidos por deso3irri&onucle%tidos$ Rellena los )uecos del ADN$

ADN1polimerasa I +procariontes,

ADN1polimerasa II +procariontes,

Nucleasa! corrige errores$ Principal en'ima de la replicaci%n$ 5inteti'a la cadena nueva a partir del ce&ador$ Reali'a correcci%n de prue&as$ 5inteti'a los #ragmentos de ADN discontinuos a partir del ce&ador$ Rellena los )uecos de(ados por el ce&ador " repara errores como un segundo sistema de reparaci%n$ 5inteti'a la )e&ra continua a partir del ce&ador " reali'a lecturas de prue&a$ Rompen los puentes de )idr%geno! separando las cadenas del ADN$ 5inteti'an el primer o ce&ador$ 5e e3tienden so&re las )e&ras del ADN evitando autoapareamientos entre las &ases li&remente e3puestas Corrigen el superenrollamiento

ADN1polimerasa III +procariontes,

ADN1polimerasa

+eucariontes

ADN1polimerasa +eucariontes,

ADN1polimerasa +eucariontes,

6elicasas Primasas

Prote nas 55A

7opoisomerasas I " II

F/G Co)esinas< prote nas 2ue mantienen unidas transitoriamente a las crom;tidas )ermanas$