UNIVERSIDAD DE NARIO FACULTAD DE CIENCIAS PECUARIAS PROGRAMA DE ZOOTECNIA MICROBIOLOGA ZOOTCNICA PRCTICA No.

1: EQUIPOS Y MATERIALES DE UN LABORATORIO DE MICROBIOLOGA

1. INTRODUCCIN RECOMENDACIONES GENERALES PARA EL TRABAJO EN EL LABORATORIO Todos los laboratorios deben seguir normas de seguridad que garanticen el buen uso y conservacin de los mismos para lograr los objetivos de los estudios que all se desarrollen. Algunas de estas normas son: 1. No comer, beber o fumar dentro del laboratorio. 2. Usar siempre bata de laboratorio. 3. Cada vez que se derrame material contaminado, cubra la mesa con toallas de papel, y humedzcalas con sustancias bactericidas. (Alcohol o hipoclorito de sodio). 4. No pipetear con la boca el material contaminado, utilice pipeteadores. 5. El material contaminado debe ser colocado en recipientes adecuados para su posterior esterilizacin y/o desecho. 6. Antes y despus de cada sesin de trabajo limpie los mesones con solucin desinfectante (Alcohol o hipoclorito de sodio). 7. Antes y despus de cada sesin lave las manos y aplique alguna solucin desinfectante 8. Informe inmediatamente al instructor de cualquier accidente, tales como cortaduras, quemaduras o derrames de cultivos. Tome las precauciones posibles para evitar accidentes 9. Las asas bacteriolgicas deben ser esterilizadas en la llama del mechero, poniendo al rojo vivo todo el alambre, antes y despus de su uso. 10. Despus de realizar las respectivas lecturas de los cultivos deschelos en la mesa dispuesta para tal fin, o devulvalo al personal de laboratorio. 11. Todos los reactivos y equipos deben dejarse organizados y en sus sitios respectivos al final de cada prctica. 12. Antes de entrar a trabajar al laboratorio, lea el texto de la prctica que va realizar y haga el plan de trabajo. 13. Cada grupo de estudiantes tendr a su cargo un microscopio que debe aprender a manejar y a cuidar adecuadamente ya que ste ser usado durante

todo el curso. 14. No olvide traer a las prcticas los siguientes implementos de uso personal: Bata de laboratorio. Encendedor. Libreta de notas. Porta- objetos Cubre-objetos Marcador de vidrio o lpiz vidriograf. LIMPIEZA Todo laboratorio de microbiologa debe seguir unas normas estrictas de limpieza por parte del personal que maneja el laboratorio (y eso incluye a los estudiantes). Estas normas incluyen: Limpieza general del espacio fsico (pisos, paredes. mesas, lavadero, etc.) con agua, jabn e hipoclorito de sodio para minimizar los contaminantes del ambiente. Limpieza peridica de incubadoras, estantes, estufas, rejilla de aire acondicionado y dems equipos Esterilizacin total de toda la vidriera, morteros, asas, etc. Eliminar inmediatamente despus de concluida una prctica de laboratorio todos los materiales de desecho que puedan ser foco de contaminacin. Nota: Los estudiantes del curso tienen la responsabilidad de mantener limpio su sitio de trabajo, limpiar con alcohol antes y despus de realizada una prctica, entregar al personal encargado del laboratorio los materiales utilizados, dejar estereoscopios, microscopios y lmparas apagadas. En general darles un uso ptimo a los equipos, pues estos sern utilizados durante todo el desarrollo del curso. BIOSEGURIDAD EN EL LABORATORIO

En el laboratorio, al igual que en la vida diaria, nos enfrentarnos a algunos peligros que debemos considerar para disminuir los riesgos de accidentes. Podramos clasificar a estos riesgos en Riesgos Biolgicos (virus, bacterias, clamidias, rickettsias, parsitos y hongos) y en No Biolgicos. Estos ltimos incluyen los riesgos qumicos (Por ejemplo (p.e.). uso de sustancias y solventes inflamables o custicos), fsicos (p.e. cortaduras), elctricos (p.e. descargas elctricas por enchufes o cables en mal estado) y el fuego (p.e. quemaduras), que son comunes a otros laboratorios. El estudio de los microorganismos que pueden ser patgenos para el hombre, los animales u otras formas de vida, trae consigo ciertos riesgos que varan segn el

agente infeccioso y los procedimientos utilizados. Para que se produzca un accidente por agente biolgico deben concurrir bsicamente cuatro elementos: Un husped susceptible, defensas bajas Un agente infeccioso, una concentracin suficiente de ste y Una ruta de transmisin apropiada.

De todos ellos, el que mejor se puede controlar en el laboratorio es la ruta de transmisin. Las rutas de transmisin ms comunes en el laboratorio son la area y la inoculacin directa, muy por encima de todas las dems, aunque la oral, la percutnea y el contacto directo con la piel o las mucosas tambin son posibles. SEGURIDAD BIOLGICA Las Normas de Seguridad Biolgica pretenden reducir a un nivel aceptable el riesgo relacionado con la manipulacin de material peligroso, y su rigurosidad vara con la peligrosidad de los agentes. La seguridad biolgica se fundamenta entonces en tres elementos: Tcnicas de Laboratorio. Se refieren a todas aquellas prcticas y tcnicas microbiolgicas que se realizan dentro y fuera del laboratorio. Un buen seguimiento de las mismas ayuda a minimizar los riesgos biolgicos. Equipo de seguridad. Se incluyen los dispositivos o aparatos que garantizan la seguridad (p.e. las cabinas de seguridad biolgica), como las prendas de proteccin personal (guantes, mascarillas, batas, calzado, etc.). Diseo y Construccin de la Instalacin. Depender del tipo de agente infeccioso que se manipule en el laboratorio. Dentro de ellas se incluyen la separacin por zonas, segn las actividades que se realizan (Preparacin de medios de cultivo, siembra, disponibilidad de sistemas de descontaminacin (autoclaves), filtrado del aire de salida al exterior, etc. El equipamiento y el diseo del laboratorio de microbiologa contribuyen a la seguridad slo si las personas que trabajan en l estn motivadas , conocen las normas de seguridad y las aplican. La actitud y el modo de proceder de sus trabajadores determinan su propia seguridad, as como la de sus compaeros y la de la colectividad. De nada sirve la mejor ingeniera sanitaria, un ptimo diseo arquitectnico o la tecnologa ms avanzada s el personal desconoce o incumple las medidas establecidas para su seguridad.

La formacin es la clave de la eficacia de los programas de seguridad y sta debe ser facilitada a todas las personas que estn expuestas a los riesgos del laboratorio: personal del laboratorio, de mantenimiento, de limpieza, etc. EL FACTOR HUMANO EN LA PREVENCIN DE ACCIDENTES Para disminuir los riesgos es importante mantener buenos hbitos de trabajo, respetar las normas de seguridad y conocer los peligros potenciales dentro del laboratorio. El riesgo puede ser alto o muy limitado y depende de la motivacin del personal, de la infraestructura y de la metodologa. Un accidente puede ocurrir por diferentes causas, pero "casi siempre, se debe a errores humanos que pueden ser evitados". Por ello, es que debe tenerse especial atencin en aquellos factores humanos que intervienen en la prevencin de accidentes: Prestar atencin a los estados de ansiedad, irritabilidad y apresuramiento. Reflexionar sobre las actitudes de negacin ante situaciones de riesgo. Considerar que las crisis de cambio (p.e. fallecimiento de un familiar, cambio de trabajo) pueden ser un factor especfico en la produccin de accidentes. Detenerse a investigar las causas de un accidente menor ocurrido como predecesor de otro de mayor importancia. Estar alerta frente a situaciones de crisis familiares y/o laborales. Atender los estados de tensin que genera la rutina. El riesgo de que se produzca un accidente puede disminuirse a niveles muy bajos siempre y cuando se tenga en cuenta que se debe:

Conocer los elementos de riesgo. Conocer la forma de manejarlos.

Utilizar los elementos necesarios de seguridad y aplicar tcnicas que disminuyan los riesgos.

Aceptar recomendaciones tcnicas, de personas con experiencia en el trabajo de laboratorio.

Transmitir dichas recomendaciones a quienes recin ingresan al laboratorio. Exigir de los superiores la implementacin de medidas de proteccin. Restringir el acceso de visitantes.

Si a pesar de todo lo antes expresado, el accidente igual ocurre, es muy importante saber que se debe hacer y a quin hay que acudir para tomar los

correctivos en forma inmediata. ELEMENTOS DE RIESGO Manos: Son una alta fuente de contaminacin, estn en contacto con la suciedad, las fuentes de infeccin y sin que tengamos una nocin clara de sus movimientos, las llevamos a la boca o a los ojos que son, a su vez, la puerta de entrada de muchas infecciones. Cuando estamos trabajando en un laboratorio, tenemos que cambiar ciertas costumbres, como la de llevarnos lpices a la boca, ya que normalmente se dejan en cualquier lugar pudindonos infectar con cualquier microorganismo all presente. Un paso importante en la proteccin de nuestra salud es aceptar e incorporar en nuestras prcticas la "Regla de los cuatro NO" (o primera regla de oro de la boseguridad), en ella se destaca que en el laboratorio se debe: No fumar No comer No beber No maquillarse

Para realizar estas acciones deben existir espacios destinados para tal fin, como as tambin para elementos de oficina y lectura. Como una prctica diaria y en forma repetida, deben lavarse las manos con jabn (de preferencia lquido), cuantas veces sea necesario. Dado que las manos son susceptibles de recibir pinchazos, heridas y abrasiones, para realizar algunas tareas, se recomienda utilizar guantes, dado que la posibilidad de que lo anterior ocurra se encuentra muy disminuida. Dos prcticas son necesarias cuando utilizamos guantes, el lavado con jabn y el retirarlos cuando se vayan a realizar otras tareas diferentes a las que estamos realizando, como por ejemplo, levantar el telfono, luego de trabajar. Cabello: Debe usarse corto o recogido durante el trabajo, en ciertos laboratorios, donde se manejan, medicamentos o sustancias altamente susceptibles a contaminacin se recomienda el uso de cofias. Uso de ropa protectora: El uso de bata de laboratorio impide daos mayores, por ejemplo salpicaduras con colorantes, material infeccioso o contaminado. Esta ropa debe ser higienizada peridicamente y debe usarse siempre y exclusivamente dentro del laboratorio. Proteccin de ojos: Cuando se trabaja con sustancias corrosivas, es conveniente usar anteojos protectores o mscaras para disminuir el riesgo de lesionar la crnea con salpicaduras o por exposicin a vapores qumicos. Es importante trabajar bajo campana, al manipular solventes, como as tambin tener a mano soluciones y dispositivos especiales para el enjuague de los ojos.

Otras protecciones: En las operaciones comunes del laboratorio se generan aerosoles y dado que la mayora de las bacterias y virus tienen como puerta de entrada al organismo la va area, hay que evitar su entrada, por ello se hace necesario usar mascarillas. Adicionalmente para evitar contaminar los cultivos, pues no siempre se tiene disponible una cmara de flujo laminar que evite el ingreso de los microorganismos presentes en boca y/o nariz. Debe evitarse el ppeteo directo con la boca, por ello es necesario usar pipetas automticas, propipetas (peras de goma), dispensadores, etc. Otra regla importante, considerada la segunda regla de oro de la bioseguridad es "Considerar que toda muestra es potencialmente peligrosa y tratarla como tal". OTRAS RECOMENDACIONES Proteger de sobrecargas los circuitos elctricos, usando estabilizadores y polos a tierra. Usar tomacorrientes simples en lugar de tornas mltiples. Colocar los interruptores en lugares accesibles. Usar calentadores con vlvula de seguridad. Revisar peridicamente los cortapicos. Mantener los corredores y pasillos libres de obstculos que puedan obstaculizar las salidas. Controlar las plagas y artrpodos. En general la labor del microbilogo en el laboratorio, consiste en aislar e identificar microorganismos que, en algunos casos, pueden resultar patgenos. Para aislar el microorganismo de inters, se debe trabajar con elementos estriles (asas, medios de cultivo, material de vidrio, recipientes, etc.) y manipular las muestras con sumo cuidado, como potenciales vehculos de microorganismos patgenos. En el laboratorio de docencia, se deben tomar las medidas mnimas de bioseguridad y stas debern extremarse cuando se trabaje con microorganismos potencialmente letales. PRECAUCIONES EN EL MANEJ0 DE MATERIAL BIOLGICO En lo posible, las operaciones deben realizarse dentro de una cabina de seguridad biolgica.

 Reducir al mnimo la produccin de aerosoles. (Preferiblemente utilizar mascarilla, o hablar lo estrictamente necesario). Utilizar dispositivos mecnicos para el pipeteo. Tener en el laboratorio, desinfectantes para manos y mesones. Colocar el material contaminado en recipientes con desinfectantes. Desechar el material contaminado en el lugar indicado. Las incubaciones deben realizarse durante el perodo de tiempo recomendado, no dejar material contaminado dentro de las incubadoras innecesariamente. Esterilizar o incinerar el material contaminado antes de su eliminacin. CLASIFICACIN DE LOS AGENTES BIOLGICOS POR GRUPOS DE RIESGO Segn la peligrosidad de los microorganismos infecciosos, existe una clasificacin por grupos de riesgo: Agente Biolgico del Grupo I. Es aqul que resulta poco probable que cause una enfermedad en el hombre y en la comunidad. Agente Biolgico del Grupo II. Es aqul que puede causar una enfermedad en el hombre y puede suponer un peligro para los manipuladores, siendo poco probable que se propague a la comunidad y existiendo generalmente profilaxis o tratamiento eficaz. Agente Biolgico del Grupo III. Aqul que puede causar una enfermedad grave en el hombre y presenta un serio peligro para los manipuladores, pudiendo causar la muerte, con riesgo de que se propague a la comunidad y existiendo frente a l generalmente profilaxis o tratamiento eficaz.' Agente Biolgico del Grupo IV. Aqul que causando una enfermedad grave en el hombre supone un serio peligro para los trabajadores, con muchas posibilidades de que se propague a la comunidad y sin que exista generalmente frente a l profilaxis o tratamiento eficaz. CLASIFICACIN DE LOS LABORATORIOS SEGN SU NIVEL DE SEGURIDAD BIOLGICA Nivel 1. Microorganismos no patgenos para el hombre.

Es el nivel de seguridad requerido para los agentes biolgicos del grupo I, es decir, los que no producen enfermedad en el ser humano sano y de susceptibilidad conocida y estable a los antimicrobianos. Es el habitualmente utilizado en los laboratorios de prcticas de universidades o centros docentes donde se emplean cepas no patgenas. Se debe trabajar en condiciones mnimas de asepsia y esterilidad. Ejemplos tpicos son Escherichia coli, como as tambin todos aquellos microorganismos que se utilizan en la industria alimenticia, para la elaboracin de quesos, cerveza, embutidos, etc. Nivel 2. Microorganismos y procedimientos de riesgo moderado. En l se trabaja con agentes del grupo II, como as tambin con algunos que, perteneciendo a la propia flora habitual del hombre, son capaces de originar patologa infecciosa humana de gravedad moderada o limitada. Deben ser manipulados por personal especializado y son los que con ms frecuencia se estudian en laboratorio de microbiologa clnica: Salmonella typhi, Mycobacterium tuberculosis, Virus de la Hepatitis B, etc. Otros aspectos que se deben considerar en este nivel son: El rea de riesgo debe restringirse al personal, no permitindose el acceso a personas, que tengan aumentado, por alguna causa, el riesgo de infeccin (p.e. inmunosuprimidos). En el acceso al laboratorio figurarn seales de riesgo biolgico, condiciones de ingreso y responsables del mismo (nombre, telfono y domicilio). El personal debe estar vacunado (si correspondiera) y entrenado para prevenir accidentes y actuar correctamente en caso de que ocurriere. Control permanente de roedores e insectos. Uso de bata de laboratorio en el rea de trabajo exclusivamente (considerar que sta es un elemento potencialmente contaminante). Evitar el uso de jeringas o cualquier otra prctica que genere aerosoles. "Las muestras deben tratarse siempre como potencialmente infectadas y tenerse en cuenta las precauciones citadas."

Nivel: 3 Microorganismos que pueden causar la muerte o aquellos de riesgo moderado

En este nivel se trabaja con agentes biolgicos del grupo III, microorganismos que causan patologas graves, de difcil y largo tratamiento, que pueden dejar secuelas y ocasionalmente producir la muerte, en cuya manipulacin se aplican procedimientos de trabajo para prevenir el alto riesgo de infeccin. Los laboratorios clnicos pertenecen a este nivel. Nivel 4: Microorganismos exticos y/o altamente peligrosos y procedimientos de alto riesgo Este nivel se requiere cuando se procesa con certeza y se sospecha un agente especialmente patgeno e infectocontagioso, extico o no, que produce alta mortalidad y para el que no existe tratamiento o es poco fiable. Normalmente son microorganismos de dosis infectiva baja y alta contagiosidad. Este nivel tambin puede utilizarse para trabajar con animales de experimentacin infectados con microorganismos del grupo IV. Debe trabajarse en laboratorios especiales de mxima seguridad, en los que es necesario ducharse y cambiarse de ropa tanto a la entrada como a la salida del mismo y en donde existen barreras de aire con el exterior. El manejo del material limpio y contaminado se realiza por canales altamente controlados. Ejemplos de este nivel son el virus bola, el virus de la fiebre aftosa, el virus del HIV, y el Marburg. Adems, deben incluirse en este nivel de contencin los microorganismos propios del grupo 3 que adquieren propiedades patgenas que los elevan al grupo 4. Un ejemplo sera Mycobacterum bovis multrresistente que puede causar fallecimiento por fracaso teraputico. NORMAS GENERALES PARA LA ELABORACIN DE INFORMES DE LABORATORIO Las ideas e investigaciones cientficas deben someterse a verificaciones por parte de otros Investigadores a fin de determinar su validez, para ello es necesario que las personas que investigan comuniquen los resultados de sus trabajos directamente o en algn medio de publicacin. El informe de laboratorio es el ejercicio que permite al estudiante usar estas tcnicas y normas de comunicacin, que se usan para transmitir los hallazgos en forma clara y precisa. Un informe se elabora bsicamente con las anotaciones de laboratorio, por ello es necesario tomar los datos y dibujos en la forma ms clara posible.

Un informe debe contener bsicamente la siguiente informacin: a) Ttulo del trabajo: breve y exacto, de tal forma que el lector pueda tener una

idea rpida de su contenido. b) Nombre de los autores: se escribirn indicando el apellido y luego el nombre completo, separado por comas. c) Resumen: muy brevemente se especifica que se hizo, la metodologa utilizada y los resultados obtenidos. d) Introduccin: en ella se especifica el problema investigado, su importancia y justificacin. Los objetos y/o propsitos de la investigacin. e) Materiales y mtodos: se describen las tcnicas utilizadas, teniendo en cuenta los equipos, reactivos y materiales. La descripcin debe ser muy clara, de tal forma que permita a otras personas replicar las tcnicas utilizadas, la redaccin se hace en pasado y en tercera persona, ej.: se tom el cultivo con el asa y se sembr sobre una caja de Petri f) Resultados: la presentacin de los resultados es fundamental, ya que en esta parte se describen los resultados obtenidos, los cuales se ilustran con tablas, figuras, fotografas y cualquier otro tipo de representacin que abrevie y de claridad a la presentacin de los datos obtenidos. g) Discusin: este es el eje central del informe, en donde se hace una interpretacin de los resultados obtenidos, se hace uso de la capacidad de anlisis del investigador, aqu se debe analizar la informacin obtenida y se confronta con otros investigadores, se describen tambin las causa de error. h) Conclusiones: en forma breve se resalta la importancia del trabajo realizado, as como los resultados obtenidos despus de haber sido analizados. i) Referencias bibliogrficas: se elabora una lista de la literatura consultada, segn las normas establecidas para la elaboracin de informes, igualmente a loa largo del texto se deben citar en forma abreviada. Los informes elaborados en un procesador de textos, deben omitirse las imgenes bajadas de internet, salvo en casos estrictamente necesarios, evite incluir informacin que no sea realmente importante, debe evitarse el corta y pega tan usual hoy en da. No se aceptaran informes demasiado extensos, el nmero mximo de pginas es de 10, escritas por ambos lados. MATERIALES Y EQUIPOS EN EL LABORATORIO

Entre los principales equipos empleados en el laboratorio de microbiologa se mencionan:

Material de vidrio: La mayora de los instrumentos ms utilizados en los laboratorios, son elaborados de vidrio resistente a altas temperaturas, por su alto contenido de dixido de silicio, bajo lcali, xido brico y vestigios de otros xidos, lo que condiciona su escaso coeficiente d e d i l a t a c i n , uno de los ms conocidos es .el vidrio PYREX, el cual posee la caracterstica de ser muy buen conductor del calor y porque al medio ambiente no se altera su composicin.

Los requisitos para que un material de vidrio sea de buena calidad son:

1. Que no sean fcil de quebrarse. 2. Ser de color neutro. 3. Poseer resistencia a l a s a c c i o n e s m e c n i c a s y a l a s v a r i a c i o n e s de temperatura as como tambin a los lcali-libre (no se raje). 4. Poseer bajo coeficiente de dilatacin (que no pierda su forma)

Tubos de ensayo: Se emplean como recipientes de medios de cultivo. Deben ser de vidrio neutro, paredes gruesas y equilibradas, de preferencia sin rebordes para facilitar el taponamiento. Se encuentran de diferentes tamaos dependiendo de la prctica que se desee realizar.

Capsulas o placas petri: Son de forma cilndrica y se emplean para el cultivo y aislamiento de microorganismos. Las ms usadas son las de 10, 15, 20 y 100 mm.

Placas Brewer: Para el cultivo y aislamiento de microorganismos anaerbicos. Son idnticas a las anteriores, con excepcin de las tapas que adems de ser ms pesadas estn adaptadas para crear anaerobiosis.

Figura 1. Material de vidrio

Pipetas: Tubos cilndricos delgados terminados en punta, graduados al dcimo o al c e n t s i m o d e m I . S e e m p l e a n e n l a m e d i c i n d e p e q u e a s c a n t i d a d e s d e lquidos. Pueden ser: Serolgicas: son terminales y con capacidad de 0.1 a 25 ml.

Volumtricas: se reconocen por presentar una dilatacin bulbosa central con unas marcas de aforamiento conocida, en el extremo proximal angosto de la pipeta, se les llama tambin pipetas de bola, las medidas ms conocidas sonde 10, 25, 50 y 100 ml.

Pasteur: Confeccionados de varillas de vidrio de dimetro de 4 x 20mm de 30 40cm de longitud. La calidad de vidrio debe facilitar reblandamientos a la accin directa d e l a l l a m a d e l m e c h e r o , p a r a c o n s e g u i r p o r e s t i r a m i e n t o l a c a p i l a r i d a d deseada. Se emplea para la toma de pequeos inculos de siembra.

Matraces y Erlenmeyers: R e c i p i e n t e s d e f o r m a c n i c a y c u e l l o c o r t o , v o l u m t r i c o s t i l e s p a r a l a preparacin y almacenamiento de soluciones, colorantes, reactivos, medios decultivos, etc. Matraces aforados: Recipientes de forma esfrica y base plana. Estn calibr4ados a medidas exactas mediante un foro en la parte media del cuello del recipiente en el que s e i n d i c a l a m e d i d a . S e emplean para la preparacin de reactivos de preferencia solucin buffer.

Kitasato: Son frascos muy parecidos a los Erlenmeyers, se caracterizan por sus paredes g r u e s a s y p o r u n a t u b u l a d u r a l a t e r a l e n e l

c u e l l o , l a m i s m a q u e s i r v e d e tabulacin lateral para hacer el vaco.

Probetas: Recipientes graduados de forma cilndrica y capacidad variable, con base parala esterilidad. Pueden estar graduada.

Vasos de Precipitacin o Beacker: R e c i p i e n t e s c i l n d r i c o s y cortos, con una depresin en el margen de la bocadura. Su utilidad es amplia. El vidrio debe ser resistente al calor.

Frascos viales para Hemocultivos, vacunas, Cultivos de Tejido: Son de vidrio neutro, resistentes al calor, transparentes y con tapas de rosca, Con capacidad para 50 ml. y 100 ml., blancos o de color mbar pueden utilizarse p a r a l a r e s e r v a d e s o l u c i o n e s y m e d i o s d e c u l t i v o e n s t o c k , p r e v i a m e n t e taponados con algodn esterilizados.

Perlas de Vidrio Neutro: Se emplean para desfibrilar sangre y para recoger cosechas microbianas en la preparacin de antgenos, De 4 a 6 mm. Vienen acompaados de una Varilla de vidrio macizo.

Equipos

Potencimetro: Miden el pH de los medios de cultivo y de las solucione buffer. Constituido de un par de electrodos sensible a concentraciones de hidrogeniones, conectados a un potencimetro que indique las mediciones, Los potencimetros emplean un electrodo de vidrio, unido a un electrodo de calomel como estndar.

Figura 2. Potencimetro

Centrfugas: Se utiliza en la separacin de slidos suspendidos en lquidos. Hay centrfugas de tamao y velocidades variables, la velocidad, se mide l a s p a r en revoluciones por m i n u t o , L a v e l o c i d a d a l a c u a l s e d i m e n t a r a n t c u l a s e n u n l q u i d o dependen de varios factores: Tamao de la partcula, el peso de la partcula. la viscosidad del lquido. La a fuerza gravitacional. Ultra centrifugacin; para obtener alteraciones elevadas (mayor o igual a 100000 g), pueden ser:

Ultracentrifugacin analtica: para determinacin de caractersticas fsicas de protenas o de cido nucleicos.

Ultracentrifugacin preparativa: p e r m i t e l a s e p a r a c i n d e o r g a n e l o s (mitocondrias, etc.), la separacin se debe efectuar en gradiente de densidad.

Incubadoras y Hornos: L o s h o r n o s s o n c a p a c e s d e m a n t e n e r t m a s d e 1 0 0 C y l a s i n c u b a d o r a s menos de 100 C .Los hornos no tienen salida de aire, las incubadoras s.

Figura 3. Centrifuga y horno

Baos de agua: Tambin llamados Bao Mara, Estn dotados de un piso par colocar los materiales. Cuentan con salida de aire y un termostato que regula la temperatura del agua

Refrigeradoras y congeladores: Son incubadoras de de temperatura fra menor de cero grados.

Elementos de Filtracin: Sirve para separar materiales lquidos de slidos, un ejemplo de ellos son los filtros de membrana.

Espectrofotmetro: Se puede observar los colores de los alimentos con una intensidad que el aparto brinda.

Autoclave: Funciona por las presiones que se dar a una mayor temperatura logrando su esterilizacin como por ejemplo las conservas.

Figura 4. Autoclave

Horno Pasteur: Es como una mufla que tiene tres paredes y la cubierta es de asbesto sirve para la esterilizacin por el calor seco.

Estufas de aire caliente: Al igual que el anterior es utilizado en la esterilizacin a traves de calor seco. Tienen solo dos paredes y son de forma cbica.

Aparato de Arnold koch: Es un tipo de esterilizador con calor hmedo de forma cilndrica1.

Microscopio: Segn los criterios clsicos de clasificacin pueden ser microscopios pticos y microscopios electrnicos. Los microscopios pticos se clasifican en simples (monoculares, binoculares) y compuestos (estereomicroscopios, de luz ultravioleta, de fluorescencia, de contraste de fases, de campo oscuro, de polarizacin y de luz reflejada), y los electrnicos en microscopios de barrido MEB, de transmisin TEM y microscopio confocal de barrido laser.

En el microscopio ptico el rea observada esta ampliamente iluminada y los objetos que se estudian aparecen ms oscuros que el fondo. Normalmente alcanzan hasta 1000 aumentos. El poder de resolucin esta dado por la onda de luz utilizada y de la apertura numrica que posea el sistema de lente empleado. Los microscopios pticos se clasifican segn el nmero de lentes y la posicin de los mismos.

Estereomicroscopios: Son microscopios dobles, con dos objetivos y dos oculares que poseen un doble prisma, el cual permite enderezar las imgenes y conservar la textura. La iluminacin del objeto se hace por transparencia o por incidencia, siendo esta ltima la ms frecuente. Pueden estar dotados de accesorios microfotogrficos, doble dispositivo de observacin para observaciones simultneas, cmaras claras y microdisectores.

Microscopio de luz ultravioleta: Se basa en la longitud de onda ultravioleta corta (180-400 nanmetros), tiene la ventaja de que algunas sustancias estudiadas no requieren tincin par su observacin porque tienen bandas de absorcin ultravioleta. Los lentes del microscopio se contruyen en cuarzo y la imagen ultravioleta se obtiene con fotografa, fluorescencia o fotoemisin.

Microscopio de fluorescencia: Se basa en la propiedad que poseen determinadas sustancias (llamadas fluorescentes), de emitir, bajo la accin de radiaciones de onda corta, otras radiaciones de longitud de onda larga denominadas fluorescencia. Esta constituido por una fuente de luz que emite una banda de longitud de onda del ultravioleta al infrarrojo, un filtro que determina la banda de excitacin que normalmente es ultravioleta, una muestra fluorescente despus del cual se encuentra un filtro (filtro de barrera) que corta los restos de la luz de excitacin y deja pasar solo la fluorescencia.

Microscopio de contraste de fases: Se utiliza para estudiar aquellas preparaciones de densidad homognica y transparente, como son las bacterias y las clulas, en la que la baja capacidad de absorcin hace que la imagen obtenida no presente diferencia de luminosidad entre sus elementos, permaneciendo prcticamente invisibles los detalles. Se requiere la prctica de tincin de muestras.

Microscopio de campo oscuro. Este tipo de microscopios producen un efecto consistente en un fondo oscuro sobre el que se ven los objetos intensamente iluminados. El poder de resolucin depende del contraste que existe entre el objeto y el medio que lo rodea. Se utiliza para observar microorganismos sin teir y que estn suspendidos en lquidos.

Microscopio de polarizacin: Son microscopios de luz polarizada, que se construyen a partir de un microscopio ordinario colocando un polarizador

entre la fuente de luz y el condensador y un analizador entre el objetivo y el ocular.

Microscopios de luz reflejada: Se utiliza en microscopia de minerales metlicos u opacos. Se necesita un foco de luz polarizada que incide de manera perpendicular sobre la superficie finamente pulida, con intenso brillo y sin interposicin de cubreobjetos. Se requiriere adems un iluminador de opacos acoplado adecuadamente al microscopio. Respecto a los microscopios electrnicos, se tiene la ventaja de alcanzar una extraordinaria ampliacin puede dar un poder de resolucin 1000 veces mayor que con el ptico debido a que emplea un haz de electrones en un lugar de un haz de fotones.

Microscopio electrnico de barrido MEB: Tambin conocido como microscopia de exploracin electrnica. Los electrones inciden sobre la preparacin, esta ltima puede ser secada por congelacin o por punto crtico y se cubre con una capa de metal como el oro o el platino. Con este microscopio no se alcanza la misma resolucin que con un microscopio electrnico de transmisin, pero su ventaja es una excelente impresin tridimensional.

Microscopio electrnico de transmisin: En este tipo de microscopia el haz de electrones atraviesa el material que se desea observar. Opera igual que un microscopio ptico a diferencia de que la imagen se forma sobre una pantalla de material fluorescente, que brilla al recibir el impacto de los electrones; debajo de la pantalla se sita la cmara para la toma de fotografas. Es til con muestras de un grosor muy delgado. Esta microscopia debe estar acompaada de tcnicas de tincin negativa, microtoma y congelacin.

Microscopio confocal de barrido laser: Es el mejor de los avances en cuanto a microscopia, ya que permite utilizar la tecnologa laser. Permite la observacin de secciones finsimas dentro de una espesa muestra fluorescente y la digitalizacin y reconstruccin a gran velocidad de imgenes de alta resolucin en tres dimensiones2.