Espectroscopia de absorcin atmica (AA)

Equipo de Absorcin Atmica (AA) asociado a unGenerador de Hidruros.

La espectroscopia de absorcin atmica (a menudo llamada AA) es un mtodo instrumental de la qumica analtica que determina una gran variedad de elementos al estado fundamental como analitos.
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1 Descripcin 2 Atomizacin con llama

o o o o o

2.1 Tipos de llama 2.2 Estructura de llama 2.3 Perfiles de temperatura 2.4 Atomizadores de llama 2.5 Reguladores de combustibles y oxidantes

3 Caractersticas del funcionamiento de los atomizadores de llama

o o o o o o o o

3.1 Seal de salida 3.2 Atomizacin en vapor fro 3.3 Fuentes de radiacin 3.4 Lmpara de ctodo hueco 3.5 Instrumentos de haz sencillo 3.6 Instrumentos de doble haz 3.7 Monocromadores 3.8 Detectores

4 Interferencias

4.1 Formacin de compuestos poco voltiles

5 Tecnologas derivadas, ICP (Inductively Coupled Plasma)

o o

5.1 Neumtica requerida 5.2 Sistema de enfriamiento

6 Caractersticas de la antorcha plasmtica

6.1 Nebulizadores

7 Fundamentos

7.1 ptica

8 Versatilidad analtica 9 Enlaces externos

Descripcin [editar]
Es un mtodo quimico analitica que esta basado en la atomizacin del analito en matriz lquida y que utiliza comnmente un nebulizador pre-quemador (o cmara de nebulizacin) para crear una niebla de la muestra y un quemador con forma de ranura que da una llama con una longitud de trayecto ms larga, en caso de que la transmisin de energa inicial al analito sea por el mtodo "de llama". La niebla atmica es desolvatada y expuesta a una energa a una determinada longitud de onda emitida ya sea por la dicha llama, o una lmpara de ctodo hueco construida con el mismo analito a determinar o una Lmpara de Descarga de Electrones (EDL). Normalmente las curvas de calibracin no cumplen la Ley de Beer-Lambert en su estricto rigor. La temperatura de la llama es lo bastante alta para que la llama de por s no mueran los tomos de la muestra de su estado fundamental. El nebulizador y la llama se usan para desolvatar y atomizar la muestra, pero la excitacin de los tomos del analito es hecha por el uso de lmparas que brillan a travs de la llama a diversas longitudes de onda para cada tipo de analito. En AA la cantidad de luz absorbida despus de pasar a travs de la llama determina la cantidad de analito existente en la muestra. Hoy da se utiliza frecuentemente una mufla de grafito (u horno de grafito) para calentar la muestra a fin de desolvatarla y atomizarla, aumentando la sensibilidad. El mtodo del horno de grafito puede tambin analizar algunas muestras slidas o semislidas. Debido a su buena sensibilidad y selectividad, sigue siendo un mtodo de anlisis comnmente usado para ciertos elementos traza en muestras acuosas (y otros lquidos). Otro mtodo alternativo de atomizacin es el Generador de Hidruros.

Atomizacin con llama [editar]

En un atomizador con llama la disolucin de la muestra es nebulizada mediante un flujo de gas oxidante mezclado con el gas combustible y se transforma en una llama donde se produce la atomizacin. El primer paso es la desolvatacin en el que se evapora el disolvente hasta producir un aerosol molecular slido finamente dividido. Luego, la disociacin de la mayora de estas molculas produce un gas atmico.

Como primer paso, naturalmente, es necesario obtener una disolucin de la muestra, por ejemplo mediante fusin con perxidos o por digestin cida.

Tipos de llama [editar]

Combustible Gas LP Gas LP Hidrgeno Hidrgeno Acetileno Acetileno Acetileno Oxidante Aire Oxgeno Aire Oxgeno Aire Oxgeno xido nitroso Temperatura 1700-1900 2700-2800 2000-2100 2550-2700 2100-2400 3050-3150 2600-2800 Vel. de Combustin 39-43 370-390 300-440 900-1400 158-266 1100-2480 285

Estructura de llama [editar]

Las regiones ms importantes de la llama son la zona de combustin primaria secundaria y zona interconal, esta ltima es la zona ms rica en tomos libres y es la ms ampliamente utilizada.

Perfiles de temperatura [editar]

La temperatura mxima se localiza aproximadamente 1 cm por encima de la zona de combustin primaria

Atomizadores de llama [editar]

Un fotmetro de llama de laboratorio que se utiliza propano o butano como gas de combustin

El aerosol formado por el flujo del gas oxidante, se mezcla con el combustible y se pasa a travs de una serie de deflectores que eliminan las gotitas que no sean muy finas. Como consecuencia de la accin de estas, la mayor parte de la muestra se recoge en el fondo de una cmara y se drena hacia un contenedor de desechos. El aerosol, el oxidante y el combustible se queman en un mechero

provisto de una ranura de 1 mm o 2 de ancho por 5 10 mm de longitud. Estos mecheros proporcionan una llama relativamente estable y larga, estas propiedades aumentan la sensibilidad y la reproducibilidad.

Reguladores de combustibles y oxidantes [editar]

Los caudales de oxidante y combustible constituyen variables importantes que requieren un control preciso es deseable poder variar cada uno de ellos en un intervalo amplio para poder encontrar experimentalmente las condiciones ptimas para la atomizacin

Caractersticas del funcionamiento de los atomizadores de llama [editar]

Seal de salida [editar]
La seal del detector aumenta al mximo algunos segundos despus de la ignicion y cae rpidamente a cero cuando los productos de atomizacin salen fuera.

Atomizacin en vapor fro [editar]

La tcnica de vapor fro solamente aplicable a la determinacin de mercurio ya que es el nico elemento metlico que tiene una presin vapor apreciable a temperatura ambiente.

Fuentes de radiacin [editar]

Los mtodos analticos basados en la absorcin atmica son potencialmente muy especficos, ya que las lneas de absorcin atmica son considerablemente estrechas (de 0,002 a 0,0005 nm)y las energas de transicin electrnica son especficas de cada elemento.

Lmpara de ctodo hueco [editar]

Una lmpara de ctodo hueco consiste en un nodo de wolframio y un ctodo cilndrico cerradas hermticamente en un tubo de vidrio lleno con nen / argn a una presin de 1 a 5 torr. El ctodo esta constituido con el metal cuyo espectro se desea obtener, o bien, sirve de soporte para una capa de dicho metal. Una parte de estos tomos se excitan con la corriente que pasa a travs de ellos y, de este modo, al volver al estado fundamental emiten su radiacin caracterstica, los tomos metlicos se vuelven a depositar difundiendo de nuevo hacia la superficie del ctodo o hacia las paredes del vidrio. La configuracin cilndrica del ctodo tiende a concentrar la radiacin en una regin limitada del tubo metlico, este diseo aumenta la probabilidad de que la redepositacin sea en el ctodo y no sobre la pared del vidrio.

Instrumentos de haz sencillo [editar]

Consiste en una fuente de ctodo hueco, un contador o una fuente de alimentacin de impulsos, un atomizador, un espectrofotmetro sencillo de red de difraccin y un detector. El haz de luz proveniente de la fuente pasa directamente a travs de todos los componentes del instrumento hasta llegar al detector.

Instrumentos de doble haz [editar]

Bsicamente consta de las mismas partes que el sistema de haz sencillo, slo que el haz que proviene de la fuente de ctodo hueco se divide mediante un contador reflejante y un divisor de haz, una mitad pasa a travs de la llama y la otra es enviada por un paso ptico interno. Los dos haces se encuentran nuevamente en el mismo camino ptico mediante un espejo semiplateado o recombinador antes de entrar al monocromador.

Monocromadores [editar]
Existen diversas combinaciones y distribuciones de los componentes pticos dentro de un monocromador que buscan optimizar la calidad del espectro generado. Las ms comunes son las denominadas, prisma de Nicoll o el de Litrow y Zcerny-Turner para sistemas convencionales con redes de difraccin hologrficas. Tambin se estn comenzando a utilizar monocromadores con redes Echelle.

Detectores [editar]
El detector es el dispositivo encargado de captar la seal ptica proveniente del monocromador y transformarlo en una seal electrnica capaz de ser convertida en un valor legible. El ms comn es el fotomultiplicador, tubo de vaco provisto de placas fotosensibles que recibe los fotones, los convierte en impulsos electrnicos y multiplica hasta obtener la suficiente intensidad elctrica. En aos reciente se estn utilizando tambin los detectores de estado slido CCD, de alta sensibilidad asociados a los monocromadores Echelle.

Interferencias [editar]
Se producen cuando la absorcin o emisin de una especie interferente se solapa o aparece muy prxima a la absorcin o emisin del analito, de modo que su resolucin por el monocromador resulte imposible. Las interferencias qumicas se producen como consecuencia de diversos procesos qumicos que ocurren durante la atomizacin y que alteran las caractersticas de absorcin del analito. Dado que las lneas de emisin de las fuentes de ctodo hueco son muy estrechas es rara la interferencia debida a la superposicin de las lneas, para que exista esta interferencia la separacin entre las dos lneas tiene que ser menor a 0,1 . Algunos instrumentos poseen Slit (rendija) y monocromadores muy finos que pueden discernir en 0,1 nm de diferencia. Algunas matrices presentan seal de ruido que se elimina con el background del instrumento permitiendo resultados

Formacin de compuestos poco voltiles [editar]

El tipo ms comn de interferencia es el producido por aniones que forman compuestos de baja volatilidad con el analito y reducen as su velocidad de atomizacin lo que origina resultados menores a los esperados.

Tecnologas derivadas, ICP (Inductively Coupled Plasma) [editar]

Actualmente, las tecnologas de espectroscopia atmica estn tendiendo a migrar de la "absorcin" AA a la "emisin". Esta tecnologa es llamada Espectroscopa de Emisin Atmica por Plasma Acoplado Inductivamente ICP por sus siglas en ingls. que da uso a otros tipos de descargas elctricas, llamadas plasmas, estas fuentes han sido usadas como fuentes de atomizacin / excitacin para AA. Estas tcnicas incluyen el plasma inductivamente acoplado y el plasma acoplado directamente.

Neumtica requerida [editar]

El plasma es generado por el gas argn en estado de ionizacin. Adicionalmente puede requerir gas nitrgeno que es un carrier o gs de purga para la ptica, y un gas de corte axial que es aire. El Gs Argn debe ser 99.996% mnimo de pureza y el gas de purga no menos de un 99.999% de pureza. El gs Argn fluye dentr del equipo a razn de unos 20-25 L/min y el de purga a 5 L/min. El gs de corte debe fluir a 25 L/min.

Sistema de enfriamiento [editar]

El acoplamiento se produce generando un campo magntico pasando una elevada corriente elctrica de alta frecuencia a travs de una espiral (RF Coil) de induccin enfriada con un sistemaChiller. El ncleo del oscilador se calienta enormemente generando unas 6.600 Btu/hora, esto requiere un sistema que mantenga el detector, el inductor y el oscilador en temperaturas de 8 C. Adicionalmente la temperatura ambiente debe ser de 222 C para evitar las incomodas reiniciaciones cuando el oscdilador vara en 1 C su temperatura de trabajo.

Caractersticas de la antorcha plasmtica [editar]

El ICP permite analizar por efectos de ionizacin en elevadas temperaturas de plasma (8.000 K) inducido en campo magntico de argn casi la totalidad del sistema peridico exceptuando sodio, potasio y gases nobles. El generador de hidruros usado en espectroscopia de AA no es necesario en esta tcnica, aunque algunos espesctroscopista que desean trabajan a concentraciones muy reducidas del orden de los microgramos lo usan.

Nebulizadores [editar]
La forma geomtrica de los nebulizadores usados en ICP son diversos y dependen del fabricante, en general son cmaras asociadas al sistema del inyector, y este esta solidario a la antorcha plasmtica y operan por efecto Venturi cuando el gas argn es introducido a gran velocidad por un tubo capilar. Las cmaras spray pueden ser de vidrios (ciclnicas-Gemcone)) o de PVC (cmaras tipo Scott o MEINHARD de flujo cruzado) dependiendo de la cantidad de slidos disueltos que presente la matriz del analito.

Un equipo ICP Plasma.

Fundamentos [editar]
El fundamento del mtodo es analgicamente parecido a la tcnica AA, el plasma recalentado es inducido en un campo magntico y se forma una antorcha plasmtica que es espectroscpica ya sea axial o radialmente. Se puede generar un plasma acoplado por induccin al dirigir la energa de un generador de frecuencia de ondas de radio hacia un gas apropiado, comnmente argn ICP. Este inductor genera rpidamente un campo magntico oscilante orientado al plano vertical (axial o perpendicular) de la espiral. La ionizacin del gas argn entrante se inicia con una chispa de la llamada espiral de Tesla. Los iones resultantes y sus electrones asociados luego interactan con el campo magntico fluctuante. Esto genera energa suficiente para ionizar tomos de argn por excitacin de choque. Los electrones generados en el campo magntico son acelerados perpendicularmente hacia la antorcha. A altas velocidades, los cationes, aniones y electrones conocidos como corriente turbulenta (Corriente de Eddy), colisionarn con los tomos de argn para producir mayor ionizacin, lo que produce un gran aumento de temperatura. En 2 microsegundos, se crea un estado estable con alta densidad electrnica. Se produce plasma en la parte superior de la antorcha. La temperatura en el plasma vara entre 6000-10000 K, usualmente 8.000 K. Una larga y bien definida cola emerge desde la parte superior de la antorcha. Esta antorcha de alta intensidad luminosa es la fuente espectroscpica que permite la tcnica analtica. La misma contiene todos los tomos del analito y los iones que fueron excitados por el calor del plasma. Las ventajas analticas del ICP -Plasma Acoplado por Induccin yace en su capacidad de analizar una gran cantidad de analitos en un perodo corto con muy buenos lmites de deteccin para la mayora de los elementos. Los elementos pueden ser analizados en forma axial para bajos lmites de concentracin, o radial para elevadas concentraciones. La variante de anlisis axial est definida en el rea del ptico perpendicular a la antorcha.

ptica [editar]
El monocromador o sistema de esllos es parte de la propiedad del constructor del equipo y su perfomance hace la diferencia entre una y otra marca; pero en general, estos sistemas que vienen sellados dentro de un habitculo cuentan con una serie de espejos de transferencia ptica, que son los primeros elementos que reciben los haces pticos de la antorcha. Estos son reflejados en lentes colimadores que los desvan a un prisma que difracta en sus respectivas longitudes de onda y luego pasan por rendijas y de ah son recibidos por otro lente colimador que los enva al detector.

Versatilidad analtica [editar]

El ICP permite realizar un barrido simultneo o secuencial segn el tipo de construccin entregando un reporte analtico en solo minutos, a diferencia del proceso analtico del AA que es muy laborioso. Asimismo permite construir curvas de calibracin a mayores o menores concentraciones del analito obteniendo excelentes correlaciones concentracin versus intensidad (medidos en cuentas por segundo). No requiere de cambio de lmparas, solo ajustes del monocromador cada cierto tiempo. Las longitudes de onda que se manejan dentro del sistema permite una resolucin de hasta 0.5nm. Otra derivacin es el ICP-Masa que es una variante de uso investigativo que adiciona un detector de masa a la salida de la antorcha. Su uso est limitado a la investigacin.

Espectrometra de absorcin
La espectrometra de absorcin se refiere a una variedad de tcnicas que emplean la interaccin de la radiacin electromagntica con la materia. En la espectrometra de absorcin, se compara la intensidad de un haz de luz medida antes y despus de la interaccin con una muestra. Las palabras transmisin y remisin se refieren a la direccin de viaje de los haces de luz medidos antes y despus de la absorcin. Las descripciones experimentales por lo general asumen que hay una nica direccin de incidencia de la luz sobre la muestra, y que un plano perpendicular a esta direccin pasa por la muestra. En la transmisin, la luz es dispersada desde la muestra hacia un detector en el lado opuesto de la muestra. En la remisin, la luz es dispersada desde la muestra hacia un detector en el mismo lado de la muestra. La radiacin remitida puede estar formada por dos clases de radiacin: reflexin especular (cuando el ngulo de reflexin es igual al ngulo del frecuencia) y reflexin difusa (en todos los dems ngulos). Otro descriptor asociado con la espectrometra de absorcin es la variedad de longitudes de onda de radiacin que se usa en el haz de luz incidente. Por ejemplo, se habla deespectrometra infrarroja o de microondas, que son a su vez ejemplos de espectrometra de absorcin. Por otra parte, tambin se encuentran referencias a otros rangos de longitud de onda, como la espectrometra de rayos X, que por lo general denotan una espectrometra de emisin. Este artculo trata principalmente de la espectrometra ultravioleta-visible.

La espectrometra UV-visible se refiere a tcnicas donde se mide cunta luz de una longitud de onda particular (color) es absorbida por una muestra. Ya que el color a menudo puede correlacionarse con la presencia y/o la estructura de una sustancia qumica particular, y ya que la absorbancia es una medida fcil y barata de hacer, la espectrometra de absorbancia se usa ampliamente en clculos cualitativos, cuantitativos y estructurales. Por ejemplo, el ADN absorbe luz en el rango ultravioleta (por eso la luz del sol es peligrosa), y por tanto la cantidad de ADN en una muestra puede ser determinarse midiendo la absorbancia de la luz ultravioleta. La relacin entre el color visible y el color de absorbancia es complicada; una muestra que parece roja no absorbe en el rojo, sino que absorbe en otras longitudes de onda (colores) de modo que la luz que pasa por la muestra se enriquece en rojo. La palabra "color" se usa para indicar que la espectrometra de absorbancia no slo trata con la luz en rango visible (fotones con una longitud de onda de aproximadamente 400 a 700 nanmetros), sino tambin con longitudes de onda que estn fuera del rango de la visin humana (infrarrojo, ultravioleta, rayos X). Sin embargo, los principios son bastante similares tanto para la luz visible como para la no visible. Tcnicamente, la espectrometra de absorcin se basa en la absorcin de fotones por una o ms sustancias presentes en una muestra (que puede ser un slido, lquido, o gas), y la promocin subsiguiente del electrn (o electrones) desde un nivel de energa a otro en esa sustancia. La muestra puede ser una sustancia pura, homognea o una mezcla compleja. La longitud de onda en la cual el fotn incidente se absorbe es determinada por la diferencia en los niveles de energa disponibles de las diferentes sustancias presentes en la muestra. Esta es la selectividad de la espectrometra de absorbancia, la capacidad de generar fuentes de fotones (luz) que son absorbidas slo por algunos componentes en una muestra. Tpicamente, los rayos X se usan para revelar la composicin qumica, mientras que las longitudes de onda cercanas al ultravioleta y el infrarrojo se usa para distinguir las configuraciones de diversos ismeros detalladamente. En la espectroscopia de absorcin, los fotones absorbidos no son emitidos de nuevo (como en la fluorescencia) sino que la energa que se transfiere al compuesto qumico en la absorbancia de un fotn se pierde por medios no radiantes, como la transferencia de energa por calor a otras molculas. Aunque la intensidad relativa de las lneas de absorcin no vara con la concentracin, a cualquier longitud de onda dada la absorbancia medida ( log (I / I0)) es proporcional a la concentracin molar de las especies que absorben y el grosor de la muestra por la que la luz pasa. Esto se conoce como ley de BeerLambert. El grfico de la cantidad de radiacin absorbida respecto a la longitud de onda para un compuesto particular se conoce como espectro de absorcin. El

espectro de absorcin normalizado es caracterstico para cada compuesto particular, no cambia con la concentracin y es como la "huella digital" qumica del compuesto. En las longitudes de onda correspondientes a los niveles de energa resonantes de la muestra, se absorben algunos de los fotones incidentes, lo que provoca una cada en la intensidad de transmisin medida y una pendiente en el espectro. El espectro de absorcin puede medirse usando un espectrmetro. Conociendo la forma del espectro, la longitud de ruta ptica y la cantidad de radiacin absorbida, se puede determinar la estructura y la concentracin del compuesto. Los espectros de absorcin de luz visible pueden tomarse en cualquier material que sea visiblemente claro. El poliestireno, el cuarzo, y las clulas de borosilicato (Pyrex), son los materiales ms usados. La luz ultravioleta es absorbida por la mayor parte de cristales y plsticos, por lo que se usan clulas de cuarzo. El Si-O presente en el cristal y el cuarzo, y el C-C en el plstico absorben la luz infrarroja. Los espectros de absorcin infrarrojos se realizan generalmente con una delgada pelcula de la muestra sostenida entre platos de cloruro de sodio. Otros mtodos implican suspender el compuesto en una sustancia que no absorba en la regin de estudio. Las emulsiones de aceite mineral (Nujol) y los cristales de bromuro de potasio suelen ser los ms comunes. El NaCl y KBr, al ser inicos, no absorben el infrarrojo de forma significativa, y el Nujol tiene un espectro infrarrojo relativamente sencillo. Espectrometra ultravioleta-visible

Espectroscopia ultravioleta-visible
La espectroscopia ultravioleta-visible o espectrofotometra ultravioleta-visible (UV/VIS) es una espectroscopia de emisin de fotones y una espectrofotometra. Utiliza radiacin electromagntica (luz) de las regiones visible, ultravioleta cercana (UV) e infrarroja cercana (NIR) del espectro electromagntico, es decir, una longitud de onda entre 380nm y 780nm. La radiacin absorbida por las molculas desde esta regin del espectro provoca transiciones electrnicas que pueden ser cuantificadas. La espectroscopia UV-visible se utiliza para identificar algunos grupos funcionales de molculas, y adems, para determinar el contenido y fuerza de una sustancia. Se utiliza de manera general en la determinacin cuantitativa de los componentes de soluciones de iones de metales de transicin y compuestos orgnicos altamente conjugados. Se utiliza extensivamente en laboratorios de qumica y bioqumica para determinar pequeas cantidades de cierta sustancia, como las trazas de metales en aleaciones o la concentracin de cierto medicamento que puede llegar a ciertas partes del cuerpo.
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1 Introduccin

2 Principio fsico 3 Modos de excitacin electrnica

o o o

3.1 Transiciones 3.2 Transiciones n 3.3 Transiciones n y

4 El espectrofotmetro ultravioleta-visible

4.1 Ley de Beer-Lambert

5 Caractersticas del sistema

5.1 Tipos de Espectrofotmetros

6 Consideraciones generales 7 Espectroscopia de Reflectancia Difusa (DRIFTS)

7.1 Ventajas y desventajas del DRIFTS

8 Enlaces externos 9 Referencias

Introduccin [editar]
Una diferencia obvia entre ciertos compuestos es su color. As, la quinona es amarilla; la clorofila es verde; los 2,4-derivados del dinitrofenilhidrazona de aldehdos y de cetonas se extienden en color de amarillo brillante a de color rojo oscuro, dependiendo de la conjugacin del enlace doble; y el aspirin es descolorido.

Longitud de onda: se define como la distancia entre los picos adyacentes y puede ser medida en metros, centmetros, o nanometros ( meters).

Frecuencia: es el nmero de ondas por ciclos usualmente sus unidades estn dadas en Hertz que son ciclos por segundos (Hz).

La luminiscencia ocurre debido a la emisin de luz por una sustancia determinada y esto ocurre cuando un electrn regresa a su estado inicial despus de haber sido excitado y libera una energa como un fotn. Podemos encontrar tres tipos de nombres para la espectroscopia de luminiscencia, para diferentes tcnicas:

Espectroscopia de fluorescencia molecular Espectroscopia de fosforescencia molecular Espectroscopia de quimiluminiscencia

Principio fsico [editar]

El principio de la espectroscopia ultravioleta-visible involucra la absorcin de radiacin ultravioleta visible por una molcula, causando la promocin de un electrn de un estado basal a

un estado excitado, liberndose el exceso de energa en forma de calor. La longitud de onda ( ) comprende entre 190 y 800 nm. La luz visible o UV es absorbida por los electrones de valencia, stos son promovidos a estados excitados (de energa mayor). Al absorber radiacin electromagntica de una frecuencia correcta, ocurre una transicin desde uno de estos orbitales a un orbital vaco. Las diferencias entre energas varan entre los diversos orbitales. Algunos enlaces, como los dobles, provocan coloracin en las molculas ya que absorben energa en el visible as como en el UV, como es el caso del -caroteno. Cuando un haz de radiacin UV-Vis atraviesa una disolucin conteniendo un analito absorbente, la intensidad incidente del haz (Io) es atenuada hasta I. Esta fraccin de radiacin que no ha logrado traspasar la muestra es denominada transmitancia (T) (T = I/Io). Por aspectos prcticos, se utizar la absorbancia (A) en lugar de la transmitancia (A = -logT), por estar relacionadalinealmente con la concentracin de la especie absorbente segn la Ley de Beer-Lambert: A = lc ( : coeficiente de absortividad molar, l: camino ptico, c: concentracin de la especie absorbente).

Modos de excitacin electrnica [editar]

Cuando un fotn UV-Visible de energa adecuada incide en una especie absorbente, un electrn es promovido desde su estado fundamental a un estado electrnico excitado. En absorcin UV-Visible, pueden observarse las distintas transiciones electrnicas:

Transiciones

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<150 nm . Este tipo de transiciones se dan sobre todo en hidrocarburos que nicamente poseen enlaces C-H o C-C. La energa requerida para que tenga lugar esta transicin es relativamente

grande, perteneciente a la regin espectral denominada ultravioleta de vaco.

Transiciones n

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entre 150-200 nm . Correspondientes a hidrocarburos que poseen tomos con pares de electrones no compartidos (electrones de no enlace). La energa necesaria para que se produzca esta transicin sigue siendo alta (aunque menor que en las regin espectral UV Lejano. ) perteneciendo stas a la

Transiciones n

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entre 200-700 nm. La mayora de las aplicaciones de espectroscopia UV-Visible estn basadas en transiciones que ocurren en esta zona. Se requiere que las especies participantes aporten un sistema de electrones (grupos cromforos: compuestos con insaturaciones, sistemas aromticos son medianamente altas, son considerablemente

multicclicos, etc.). Las energas de excitacin en las transiciones correspondiendo a la regin UV Lejano y Prximo, mientras que las n menores, correspondiendo a la regin visible del espectro.

En espectroscopia UV-Vis se irradia con luz de energa conocida suficiente como para provocar

transiciones electrnicas, es decir promover un electrn desde un orbital de baja energa a uno vacante de alta energa. Transiciones electrnicas posibles entre orbitales n: orbital que contiene par de electrones no compartidos (ejemplo en : O, N, Cl) Las transiciones ms favorecidas son entre el orbital ocupado de energia ms alta (HOMO) y el orbital desocupado de energia ms baja (LUMO) el espectrometro UV-Vis registra las longitudes de onda donde se registra absorcin y cuantifica la absorcin. El espectro se registra como absorbancia (A) Vs. longitud de onda (), las bandas del espectro UV son anchas por que incluyen la estructura fina de transiciones vibracionales y rotacionales de menor energa.

El espectrofotmetro ultravioleta-visible [editar]

El espectrofotmetro es un instrumento que permite comparar la radiacin absorbida o transmitida por una solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia. Todas las sustancias pueden absorber energa radiante. El vidrio, que parece ser completamente transparente, absorbe longitudes de onda que pertenecen al espectro visible; el agua absorbe fuertemente en la regin del IR. La absorcin de las radiaciones UV, visibles e IR depende de la estructura de las molculas, y es caracterstica para cada sustancia qumica. El color de las sustancias se debe a que absorben ciertas longitudes de onda de la luz blanca que incide sobre ellas y slo dejan pasar a nuestros ojos aquellas longitudes de onda no absorbida. Esta espectrofotometra utiliza radiaciones del campo UV de 80 a 400 nm, principalmente de 200 a 400 nm (UV cercano) y de luz visible de 400 a 800 nm, por lo que es de gran utilidad para caracterizar las soluciones en la regin ultravioleta-visible del espectro. Se rige por una ley muy importante: la ecuacin de Beer-Lambert.

Ley de Beer-Lambert [editar]

Una expresin para la ecuacin de Beer-Lambert es la siguiente:

Donde: es el rango de luz captado por el tubo de fotocolorimetra, es el rango de luz que sale del tubo de fotocolorimetra y que va a llegar a la celda fotoelctrica donde es captada y medida

es la capacidad de captacin del haz del campo electromagntico, es la longitud del tubo de fotocolorimetra, en cm. es la concentracin de la muestra ya ubicada en el tubo de fotocolorimetra. La ley de Beer permite cuantificar la concentracin de una muestra por UV, tambin puede ser expresada de la siguiente manera:

donde: es la Absorbancia es el Coeficiente de extincin (Caracterstico de cada sustancia). es el Largo del paso de la cuba (cm). es la Concentracin (moles/l). La zona de longitudes de onda que se registra en un espectro UV-Vis es de entre 200 y 800 nm. En esta zona no absorben dobles ni triples enlaces aislados . Slo van absorber enlaces pi conjugados y heterotomos con pares de electrones no compartidos (O, N), como los grupos cromforos.

Caractersticas del sistema [editar]

Las muestras en solucin se ponen en una pequea celda de Si.

Se utilizan dos lmparas: una de H o deuterio para la regin UV, y una de W / halgeno para la regin visible

Se utiliza tambin una celda de referencia que contiene slo solvente.

La luz pasa simultneamente por la celda de muestra y la celda de referencia.

El espectrmetro compara la luz que pasa por la muestra con la que pasa por la celda de referencia.

La radiacin transmitida es detectada y el espectrmetro obtiene el espectro de absorcin al barrer la longitud de onda de la luz.

Tipos de Espectrofotmetros [editar]

Espectrofotmetro de doble haz: es aquel que cuenta con dos compartimientos para celdas de muestra que le permite medir simultneamente la cantidad de energa radiante absorbida por una matriz (blanco) y la energa absorbida por la muestra compuesta por la matriz y la especie de inters. Espectrofotmetro de haz simple: cuenta con un nico compartimiento de celda con lo cual se debe realizar la medida de absorcin del blanco para poder registrar un cero (o referencia) y luego medir la absorcin de la muestra.

Consideraciones generales [editar]

La espectroscopia ultravioleta-visible es la ms limitada para la informacin de compuestos. Los compuestos que tengan un cromforo o instauraciones son visibles en esta regin. Un cromforo es cualquier grupo de tomos que absorben luz independientemente de que presente color o no, aunque tambin puede presentar un grupo auxcromo que es el que amplia la conjugacin de un cromforo mediante la comparticin de electrones de no enlace. La mxima absorcin se debe a la presencia de cromforos en una molcula. Este tipo de espectroscopia sirve principalmente para el anlisis de compuestos aromticos y cidos carboxlicos ( y ) insaturados.

Para el anlisis de catalizadores suele utilizarse una variante de esta espectroscopia llamada espectroscopia de reflectancia difusa (fsica)#Reflexi.C3.B3n difusa.

Espectroscopia de Reflectancia Difusa (DRIFTS) [editar]

La reflectancia difusa tiene lugar en todas las direcciones como consecuencia de los procesos de absorcin y dispersin como se muestra en la figura, y predomina

cuando los materiales de la superficie reflectante son dbiles absorbentes a la longitud de onda incidente y cuando la penetracin de la radiacin es grande en relacin a la longitud de onda.

Ventajas y desventajas del DRIFTS [editar]

Ventajas

Preparacin mnima muestra. Posibilidad anlisis mayora materiales no reflectores, incluyendo materiales muy opacos o poco absorbentes.

Anlisis de superficies irregulares y materiales duros. Alta sensibilidad (pocos ppm).

Desventajas Adems de los problemas de la reflexin en la superficie nos encontramos con otros problemas:

Est limitada principalmente a muestra en polvo. Si la muestra contiene agua y debido al calentamiento producido por el rayo de luz infrarrojo, sta se puede evaporar dando lugar a vapor de agua que causa fuertes interferencias en el espectro.

El llenado de la celda es poco reproducible sobre todo cuando se quiere trabajar en anlisis cuantitativo.

Espectrometra ultravioleta-visible
La espectrometra ultravioleta-visible o espectrofotometra UV-Vis implica la espectroscopia de fotones en la regin de radiacin ultravioleta-visible. Utiliza la luz en los rangos visible y adyacentes (el ultravioleta (UV) cercano y el infrarrojo (IR) cercano. En esta regin del espectro electromagntico, las molculas se someten a transiciones electrnicas. Esta tcnica es complementaria de la espectrometra de fluorescencia, que trata con transiciones desde el estado excitado al estado basal, mientras que la

espectrometra de absorcin mide transiciones desde el estado basal al estado excitado.

APLICACIONES La espectrometra UV/Vis se utiliza habitualmente en la determinacin cuantitativa de soluciones de iones metlicos de transicin y compuestos orgnicos muy conjugados. Soluciones de iones metlicos de transicin Las soluciones de iones metlicos de transicin pueden ser coloreadas (es decir, absorben la luz visible) debido a que los electrones en los tomos de metal se pueden excitar desde un estado electrnico a otro. El color de las soluciones de iones metlicos se ve muy afectado por la presencia de otras especies, como algunos aniones o ligandos. Por ejemplo, el color de una solucin diluida de sulfato de cobre es muy azul; agregando amonaco se intensifica el color y cambia la longitud de onda de absorcin mxima. Compuestos orgnicos Los compuestos orgnicos, especialmente aquellos con un alto grado de conjugacin, tambin absorben luz en las regiones del espectro electromagntico visible o ultravioleta. Los disolventes para estas determinaciones son a menudo el agua para los compuestos solubles en agua, o el etanol para compuestos orgnicos solubles. Los disolventes orgnicos pueden tener una significativa absorcin de UV, por lo que no todos los disolventes son adecuados para su uso en espectrometra UV. El etanol absorbe muy dbilmente en la mayora de longitudes de onda. La polaridad y el pH del disolvente pueden afectar la absorcin del espectro de un compuesto orgnico. La tirosina, por ejemplo, aumenta su mximo de absorcin y su coeficiente de extincin molar cuando aumenta el pH de 6 a 13, o cuando disminuye la polaridad de los disolventes. Aunque los complejos de transferencia de carga tambin dan lugar a colores, stos son a menudo demasiado intensos para ser usados en mediciones cuantitativas. La ley de Beer-Lambert establece que la absorbancia de una solucin es directamente proporcional a la concentracin de la solucin. Por tanto, la espectrometra UV/VIS puede usarse para determinar la concentracin de una solucin. Es necesario saber con qu rapidez cambia la absorbancia con la concentracin. Esto puede ser obtenido a partir de referencias (las tablas de

coeficientes de extincin molar) o, con ms exactitud, determinndolo a partir de una curva de calibracin. El espectrofotmetro UV/Vis puede utilizarse como detector para la Cromatografa Lquida de Alta Resolucin (CLAR). La presencia de un analito da una respuesta que puede ser proporcional a la concentracin. Para resultados precisos, la respuesta del instrumento al analito debe compararse con la respuesta a un estndar, lo que es muy similar al uso de curvas de calibracin. La respuesta (por ejemplo, el pico de altura) para un concentracin particular se conoce como factor de respuesta.

LEY DE BEER-LAMBERT La espectrometra UV-Vis se utiliza con mayor frecuencia en forma cuantitativa para determinar las concentraciones de especies absorbentes en solucin, usando la Ley de Beer-Lambert: donde A es la absorbancia medida, I0 es la intensidad de la luz incidente a una determinada longitud de onda, I es la intensidad de transmisin, L la longitud de ruta a travs de la muestra, y c la concentracin de las especies absorbentes. Para cada especie y longitud de onda, es una constante conocida como absortividad molar o coeficiente de extincin. Esta constante es una propiedad fundamental molecular en un solvente dado, a una temperatura y presin particular, y tiene como unidades 1/M * cm o, a menudo, U/M * cm. La absorbancia y extincin a veces son definidas en trminos de logaritmo natural en lugar de logaritmo de base 10. La ley de Beer-Lambert es til para la caracterizacin de muchos compuestos, pero no sirve como relacin universal para la concentracin y absorcin de todas las sustancias. En molculas complejas de gran tamao, como los tintes orgnicos (Xylenol Naranja o Rojo Neutro, por ejemplo), a veces se encuentra una relacin polinmica de segundo orden entre la absorcin y la concentracin.

ESPECTROFOTMETRO ULTRAVIOLETA-VISIBLE El instrumento utilizado en la espectrometra ultravioleta-visible se llama espectrofotmetro UV-Vis. Mide la intensidad de luz que pasa a travs de una

muestra (I), y la compara con la intensidad de luz antes de pasar a travs de la muestra (Io). La relacin I / Io se llama transmitancia, y se expresa habitualmente como un porcentaje (%T). La absorbancia (A) se basa en la transmisin: A = - log (%T) Las partes bsicas de un espectrofotmetro son una fuente de luz (a menudo una bombilla incandescente para las longitudes de onda visibles, o una lmpara de arco de deuterio en el ultravioleta), un soporte para la muestra, una rejilla de difraccin o monocromador para separar las diferentes longitudes de onda de la luz, y un detector. El detector suele ser un fotodiodo o un CCD. Los fotodiodos se usan con monochomadores, que filtran la luz de modo que una sola longitud de onda alcanza el detector. Las rejillas de difraccin se utilizan con CCDs, que recogen la luz de diferentes longitudes de onda en pxeles. Un espectrofotmetro puede ser nico o de doble haz. En un instrumento de un solo haz (como el Spectronic 20), toda la luz pasa a travs de la clula muestra. La Io debe medirse retirando la muestra. Este fue el primer diseo, y todava est en uso en la enseanza y laboratorios industriales. En un instrumento de doble haz, la luz se divide en dos haces antes de llegar a la muestra. Un haz se utiliza como referencia, y el otro haz de luz pasa a travs de la muestra. Algunos instrumentos de doble haz tienen dos detectores (fotodiodos), y el haz de referencia y el de la muestra se miden al mismo tiempo. En otros instrumentos, los dos haces pasan a travs de un bloqueador que impide el paso de un haz. El detector alterna entre la medida del haz de muestra y la del haz de referencia. Las muestras para espectrofotometra UV-Vis suelen ser lquidas, aunque la absorbancia de los gases e incluso de los slidos tambin puede medirse. Las muestras suelen ser colocadas en una clula transparente, conocida como cubeta. Las cubetas suelen ser rectangulares, con una anchura interior de 1 cm. Esta anchura se convierte en la longitud de ruta, L, en la Ley de Beer-Lambert. Tambin se pueden usar tubos de ensayo como cubetas en algunos instrumentos. Las mejores cubetas estn hechas con cuarzo de alta calidad, aunque son comunes las de vidrio o plstico. El cristal y la mayora de los plsticos absorben en el UV, lo que limita su utilidad para longitudes de onda visibles.

ESPECTRO ULTRAVIOLETA-VISIBLE Un espectro ultravioleta-visible es esencialmente un grfico de absorbancia de luz frente a una longitud de onda en el rango del ultravioleta o la luz visible. Este

espectro puede ser producido directamente con los espectrofotmetros ms sofisticados, o bien pueden registrarse los datos de una sola longitud de onda con los instrumentos ms simples. La longitud de onda se representa con el smbolo . Del mismo modo, para una determinada sustancia, puede hacerse un grfico estndar del coeficiente de extincin () frente a la longitud de onda (). Este grfico estndar sera efectivamente "la concentracin corregida" y, por tanto, independiente de la concentracin. Para una sustancia determinada, la longitud de onda en la cual se produce el mximo de absorbancia en el espectro se llama max, y se pronuncia "lambda-max". Las reglas de Woodward-Fieser son un conjunto de observaciones empricas que pueden utilizarse para predecir max, la longitud de onda de la absorcin UVVis, para compuestos orgnicos conjugados como dienos y cetonas. Las longitudes de onda de los picos de absorcin pueden correlacionarse con los tipos de enlace en una determinada molcula, y son valiosos para determinar los grupos funcionales dentro de la molcula. La absorcin UV-Vis no es, sin embargo, una prueba especfica para ningn compuesto determinado. La naturaleza del disolvente, el pH de la solucin, la temperatura, la concentracin de electrolitos, y la presencia de sustancias interferentes pueden influir en los espectros de absorcin de los compuestos, as como las variaciones en la anchura de la hendidura (ancho de banda efectivo) en el espectrofotmetro.