ACUMULACIN DE FOSFATOS EN LOS LODOS DE PURGA EN UN REACTOR DISCONTINUO Arod Bernal Martnez y Simn Gonzlez Martnez Instituto de Ingeniera-UNAM,

Coyoacn 04510 Mxico, D.F. abm@pumas.iingen.unam.mx

RESUMEN

El objetivo de este trabajo fue determinar la acumulacin de los fosfatos en los lodos de purga con diferentes tiempos de retencin celular y, por consiguiente, la habilidad para remover los fosfatos del 3 agua residual. Un reactor discontinuo con biomasa suspendida con capacidad de 1.94 m oper con cuatro diferentes cargas orgnicas para obtener los TRC de 23, 16, 6 y 3 das. El trabajo experimental tuvo una duracin de 436 das, tiempo en el cual se obtuvo la ms alta concentracin de fosfatos en los lodos de purga del 4.8%, la mayor capacidad de acumulacin con los TRC de 16 y 23 das y la ms alta remocin de fosfato del medio con el TRC de 16 das (98%), y no se present con el TRC de 3 das. La eliminacin de fosfato no depende del caudal de purga, sino de la capacidad de la biomasa para acumular los fosfatos dentro de ella. Palabras clave: Eliminacin Biolgica de Fosfatos; Tiempo de Retencin Celular; Acumulacin de Fosfatos.

INTRODUCCIN El sistema discontinuo se presenta como una alternativa para la Eliminacin biolgica de fsforo debido a la flexibilidad de operacin que permite la introduccin de perodos anaerobios/aerobios en el tanque de reaccin para activar un mecanismo enzimtico de remocin en bacterias aerobias estrictas. Bajo condiciones anaerobias, estos procesos liberan los fosfatos y durante condiciones aerobias se lleva a cabo la captura de fosfato quedando incorporado en el material celular (Muyima and Cloete, 1995), el cual es eliminado como lodos de purga. Resulta importante manejar menores caudales de purga con el mayor contenido de fosfato, de esta manera, se aumenta la eficiencia de la remocin de las aguas residuales. La concentracin de la biomasa en el reactor es controlada con la manipulacin del caudal de purga, el cual tiene una influencia directa con el Tiempo de Retencin Celular (TRC) que esta relacionado con la velocidad especfica de crecimiento de los microorganismos, y sta a su vez con la Carga Orgnica (C.O). El objetivo de este trabajo fue determinar el caudal de los lodos de purga, a la cual se ejecuta la mayor acumulacin del fosfato bajo diferentes TRC en un reactor discontinuo con biomasa suspendida.

MATERIALES Y MTODOS

Para este estudio se utiliz un reactor discontinuo con biomasa suspendida con un volumen total de 1.94 3 m , alimentado con aguas resiudales de la Universidad Nacional Autnoma de Mxico (Fig. 1). Para incrementar la concentracin de contaminantes, al agua residual le fue agregado melaza y fosfato de potasio para alcanzar un promedio de DQO de 500 mg/l y concentraciones de fosfato de 15 mg/l la tabla 1 muestra las caractersticas del agua residual. Fueron controladas cuatro diferentes cargas orgnicas para obtener cuatro TRC. La operacin del reactor fue con ciclos de 8 h (480 min), cada uno dividido en cinco fases: llenado, anaerobia, aerobia, sedimentacin y vaciado (tabla 2). El lodo fue purgado del licor totalmente mezclado en cada ciclo minutos antes de la fase de sedimentacin. Fue evaluada la eficiencia en la EBF tomando muestras tres veces por semana al influente, final de fase anaerobia y efluente a los cuales se les determin: DQOt y s, fsforo total, ortofosfatos, oxgeno disuelto, pH y temperatura (Deutsche Einheitsverfahren, 1983; APHA, 1992). Cuando el sistema fue considerado estable bajo las diferentes cargas orgnicas, el muestreo fue realizado cada 30 minutos para describir el perfil de concentraciones de los parmetros ya indicados anteriormente. En la biomasa se cuantific el contenido

de fsforo total e ndice volumtrico de lodos (IVL), determinando los SST al final de la fase de reaccin. Los valores de SST y DQO para cada TRC fueron sometidos a un ajuste polinomial de segundo grado para de esta manera, obtener; la velocidad especfica de crecimiento ( ) y el tiempo de duplicacin (td). Con el conocimiento de estas variables se realiz una comparacin del td con los TRC. Se evaluaron los coeficientes de rendimiento (gSST o SSV/gDQO consumida) para cada TRC. Por ltimo se realiz un balance de fsforo total en la biomasa, con el cual se determin la capacidad de acumulacin en los lodos de purga.

Reloj programable

Puerto de muestreo

Efluente

Melaza + K2HPO4

Puerto de muestreo Agua residual cruda Recirculacin para mezclado Difusores

Purga de lodos
Figura 1. Diagrama esquemtico de la planta piloto. Tabla 1. Caractersticas del agua residual con la adicin de melaza (valores promedio). Parmetro DQOt DQOs DBOt DBOs + N-NH4 -3 P-PO4 N-NO3 N-NO2 pH OD T C Agua residual cruda 15155 5930 11019 4815 1610 53 21 0.10.2 80.5 41 163 Agua residual + melaza + K2HPO4 55087 40570 42050 38025 2915 153 32 0 70.3 31.5 182

Tabla 2. Ajuste de la duracin de las fases de acuerdo a la carga orgnica Carga Orgnica (kgDQO/kgSSTd) 0.08 0.18 0.32 0.42 Influente por ciclo (litros) 175 436 762 943 Llenado (min) 8 20 30 38 Fase Anaerobia (min) 222 210 200 192 Fase Aerobia (min) 222 210 200 192 Sedimentacin (min) 20 20 20 20 Vaciado (min) 8 20 30 38

RESULTADOS Y DISCUSIN

Establecimiento del Tiempo de Retencin Celular

En la tabla 3 se muestran las Cargas Orgnicas (C.O) con las cuales se trabaj, la duracin de la experimentacin, los SST y la purga diaria de lodos. Con las cuatro C.O establecidas y la purga diaria de lodos (manteniendo los SST en un valor constante) se logr el establecimiento del TRC para cada caso. Se observ que al disminuir el TRC la C.O aument, as como la purga de lodos. De acuerdo con Vaccari and Longtin (1985), estos resultados aprueban la hiptesis de que a C.O altas el TRC disminuye, ocurriendo lo contrario cuando las C.O son bajas. Tabla 3. Cargas orgnicas con la purga diaria de lodos y establecimiento del TRC. C.O . kgDQO/kgSST d Arranque 0.08 0.18 0.32 0.42 Delal (da) 0-75 75-190 190-340 340-400 400-445 Tiempo de experimentacin (das) 75 115 150 60 45 SST (mg/l) Purga diaria (l) 78 4 112 6 295 7 600 10 TRC (das) 23 16 6 3

2300 2000 2300 2300

Rendimiento para cada Tiempo de Retencin Celular

La Fig. 2 muestra el rendimiento, expresado en g de SST o SSV producidos/g de DQO consumida. Los mayores rendimientos (gSST/gDQO consumida) se obtuvieron con los TRC de 23 y 3 das (0.65 y 0.71 respectivamente).

0.8

Rendimiento (g SS/g DQO consumida)

0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 5 10

gSST/gDQO removida

gSSV/gDQO removida

15

20

25

Tiempo de Retencin Celular (das)

Figura 2. Rendimientos con los diferentes TRC en el reactor discontinuo.

En tanto, para los TRC de 16 y 6 das los rendimientos fueron de 0.44 y 0.57 respectivamente. Los rendimientos expresados en g de SSV producidos/g de DQO removida son mostrados en la misma figura, en donde los ms altos fueron para los TRC de 23 y 3 das (0.51 y 0.53 respectivamente) y los menores para los TRC de 16 y 6 das (0.34 y 0.46 respectivamente). El rendimiento disminuye conforme aumenta el TRC, con la excepcin de la que se presenta en el TRC de 23 das (0.65 y 0.51 para cada caso). De acuerdo con Metcalf & Eddy (1979) en plantas convencionales de lodos activados se manejan rendimientos en un intervalo de 0.2 a 0.4 mg SSV/mg DQO removida, lo cual significa que los manejados durante este estudio se encuentran en ese intervalo. Por otra parte Wentzel et al. (1990) reportan un rendimiento para organismos poliP de 0.45 mg SSV/mg DQO, este dato fue similar al que se obtuvo con el TRC de 6 das. Sin embargo, Smolders et al. (1995) concluye que no existen grandes cambios en el rendimiento en funcin del TRC.

Velocidad especfica de crecimiento para los diferentes tiempos de retencin celular

Se determinaron las velocidades mximas de crecimiento para cada caso como se observa en la tabla 4. Al aumentar el TRC disminuye la mx y aumenta el td. La ms alta velocidad de crecimiento -1 corresponde a un TRC de 3 das ( =0.065 h ), lo cual significa que estn presentes microorganismos con una ms alta velocidad de crecimiento, como las bacterias facultativas (BF). El tiempo de duplicacin determinado fue de 4 das en la experimentacin se manejo un TRC de 3 das. La ms baja velocidad de -1 crecimiento corresponde al TRC de 23 das ( =0.015 h ) ya que al bajar la velocidad de crecimiento los microorganismos permanecen por ms tiempo en el reactor. De acuerdo con el tiempo de duplicacin calculado con respecto a la fue de 19.5 das. Con este tiempo se puede asegurar la presencia de bacterias acumuladoras de fosfato (BAF). Una manera indirecta de determinarlo es con el perfil de eliminacin de fosfatos. Tabla 4. Velocidad de crecimiento y tiempo de duplicacin para cada TRC. TRC td mx -1 (das) (das) (h ) 3 0.065 4.50 6 0.045 6.51 16 0.026 11.27 23 0.015 19.53

En la Fig. 3, se observa que al aumentar la C.O (0.08, 0.18, 0.32 y 0.42 kgDQO/kgSST.d), las -1 velocidades especficas de crecimiento disminuyen (0.065, 0.045, 0.026 y 0.015 h respectivamente), en tanto el TRC aumenta (3, 6, 16 y 23 das respectivamente). Lo que significa que al operar con TRC altos las velocidades de crecimiento son pequeas lo cual favorece el establecimiento de BAF y al operar con TRC bajos las velocidades de crecimiento que se presentan son altas, las cuales son favorables para las BF.

El TRC en la Eliminacin Biolgica de Fsforo

En la Fig. 4 se presenta la eliminacin biolgica de fsforo en toda la experimentacin con los diferentes TRC al inicio del ciclo, al final de fase anaerobia y en el efluente. En el TRC de 16 das, al final de la fase anaerobia la liberacin de fosfatos alcanz valores del 300% con respecto al influente. La concentracin en el efluente fue de 1.0 mg/l. Posteriormente con el TRC de 23 das producen efluentes de 0.8 mg/l. Con los TRC de 3 y 6 das la eliminacin de fosfatos disminuye 53 y 44% respectivamente. Las mejores remociones fueron en los TRC de 16 y 23 das (98 y 95% respectivamente). Christensson et al. (1996), muestran resultados similares a los de esta investigacin en el TRC de 16 das.

0.07 0.06 0.05

25

20 TRC 15

0.04 0.03 0.02

10

5 0.01 0 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0

C.O (kgDQO/kgSST.d)

Figura 3. Velocidades especficas de crecimiento (h ) y TRC con las diferentes Cargas Orgnicas.
-1

70 60

Al inicio del ciclo Arranque 16

Final anaerobia 23

Efluente 6 3

(mg/l)

50 40 30 20 10 0 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450

P-PO4

Tiempo (das)
Figura 4. Comportamiento del P-PO4
3

despus del llenado, final de fase anaerobia y efluente.

TRC (das)

(das-1)

300 250
DQOs (mg/l)

Anaerobia

Aerobia
TRC= 23 das

50 40 30
P-PO4 (mg/l)

DQO y los fosfatos en un ciclo de tratamiento con los diferentes TRC DQO. En la fig. 5 se observa la eliminacin del material orgnico en un ciclo de 8 h. La captura de la materia orgnica disminuy en la fase anaerobia en forma directa con el TRC. La mayor captura se obtuvo con los TRC de 23 y 16 das (79 y 82% de remocin de la DQO respectivamente). Cuando se present la mayor concentracin del material orgnico, los TRC fueron menores (6 y 3 das), predominando las BF, lo que ocasion que la captura del material orgnico disminuyera, ya que la proporcin de las BAF disminuy. Al incrementar el TRC, el consumo del sustrato es mayor para el almacenamiento, por lo que se reduce la concentracin del sustrato en el medio y las BAF entran en competencia con las BF; en este caso las BAF predominan en el sistema. Esto se explica mejor con la incorporacin de la fase aerobia. El consumo de la DQO en fase aerobia fue mayor para los TRC de 3 y 6 das (52 y 58 % respectivamente). En tanto que para los TRC de 23 y 16 das se obtuvo una eliminacin de la DQO del 46 y 12 % respectivamente, lo cual indica que con los TRC de 3 y 6 das predominan las BF. Estas oxidan el material orgnico y, es por eso, que se observa una disminucin en el por ciento de eliminacin de la DQO. Para los TRC de 23 y en especial para los 16 das, quiz el mayor nmero de microorganismos eran las BAF, las cuales en fase aerobia consumen el PHB que se encuentra almacenado en las clulas. El consumo de sustrato exgeno es mnimo. Al ser muy poca la cantidad del material orgnico en esta fase, las bacterias aerobias estrictas, debido a la falta del material orgnico, no tienen oportunidad de proliferar en el sistema, lo que hace que la proporcin de las BAF sea mayor.

200 150 20 100 50 0

300 250

10 0

Anaerobia

Aerobia
TRC= 16 das

70 60 50 40
P-PO4(mg/l)
P-PO4 (mg/l)

DQOs (mg/l)

200 150

30 100 50 0 20 10 0

300 250
DQOs (mg/l)

Anaerobia

Aerobia
TRC= 6 das

50 40 30
P-PO4 (mg/l)

200 150 20 100 50 0 300 10 0 50

Anaerobia

250
DQOs(mg/l)

Aerobia TRC= 3 das

40 30 20 10 0 500

200 150 100 50 0 0 100 200 300 400

Tiempo (min)
Figura 5. Comportamiento de la DQO () y los P-PO4 () con los diferentes TRC en un ciclo de 8 horas.
-3

Como menciona Smolders et al. (1995), las BAF emplean el PHB almacenado como sustrato en condiciones anaerobias y durante condiciones aerobias es utilizado para la formacin de la biomasa, mientras que otros organismos aerobios sufren de falta de sustrato y, en consecuencia no producen biomasa. Fosfatos. En la fig. 5 se muestran los fosfatos en un ciclo de tratamiento, en la fase anaerobia el mayor porcentaje -3 de excrecin de los PO4 (460%) se obtuvo con el TRC de 23 das, y al disminuir el TRC la excrecin de -3 -3 los PO4 se vio afectada. Los TRC ms largos son aquellos que logran una mayor liberacin de los PO 4 en el medio, y esto sta correlacionado con la cantidad del material orgnico que es almacenando por las bacterias. Para almacenar mayor cantidad del material orgnico se requiere ms energa en forma de ATP. Al introducir el material orgnico en las clulas ocurre el rompimiento de las cadenas de polifosfato y, como consecuencia, la liberacin de los fosfatos al medio, lo cual se justifica en los TRC de 23 y 16 das, donde es factible que las BAF se encuentren en el sistema. La captura de los fosfatos ocurrida durante la fase aerobia se muestra en la misma figura. La mayor captura de los fosfatos se logr para el TRC de 16 das (98%), seguido de 23 das (95%) 6 y 3 das (44 y 53%). Se observa que la eficiencia de eliminacin de fsforo disminuye con el TRC. Si se encuentra mayor cantidad del material orgnico capturado, entonces se requieren mayor cantidad de fosfato en fase aerobia. A partir de los valores de la DQO y sacando una diferencia del t=0 y final de la fase anaerobia, se observa que con el TRC de 16 das existe una mayor captura del material orgnico. Esto se corrobora con los datos de fosfato, en donde la mayor eliminacin, o bien, utilizacin de las clulas por el fosfato, se present con el TRC de 16 das (98%). Los TRC de 6 y 3 das no fueron favorables para la eliminacin de los fosfatos, quiz bajo estos TRC se present el fenmeno observado por Christensson et al. (1996), quienes trabajaron con los TRC de 25 y 7 das en donde en el sistema se present captura del material orgnico y liberacin de los fosfatos, aunque no se obtuvo captura de los fosfatos durante la fase aerobia con el TRC de 7 das

Contenido de fosfatos en los lodos de purga

En la tabla 5 se muestra un balance del fosfato en la biomasa de purga. El caudal de la purga increment (26,37,98 y 200) cuando el TRC disminuye (23, 16, 6 y 3 das respectivamente), al igual que los fosfatos en la purga. El contenido de fosfato fue expresado en por ciento.

Tabla 5. Contenido de fosfatos en los lodos de purga durante un ciclo de tratamiento. TRC Fosfato en la Caudal de Fosfatos en Masa de SST Por ciento del (das) Biomasa purga por ciclo la purga purgados fosfato en la (g/l) (l) (g) (g) biomasa eliminada en la purga 23 0.07 26 2 52 3.6 16 0.93 37 3.5 89 3.9 6 0.10 98 10 209 4.8 3 0.04 200 9 444 2

Se observa que al aumentar el caudal de la purga, incrementa el contenido de los fosfatos con la excepcin del caudal de purga de 200 l que corresponde al TRC de 3 das, fue el menor (2% de PO4). La mayor acumulacin se da con el TRC de 6 das (4.8%) seguido por los TRC de 16 y 23 das (3.9 y 3.6% respectivamente). La mayor cantidad de SST purgados fue de 444 g (TRC de 3 das). Sin embargo, fue en la que menos fosfato se encuentra, ya que los lodos que se establecen en este tiempo no tienen la capacidad de acumular fosfatos. La velocidad especfica de crecimiento para este TRC, ver tabla 4 -1 corresponde a la ms alta = 0.065 h , un td de 4.5 das, siendo el de ms alto rendimiento (0.71) ver fig. 2. Estos datos indican de manera indirecta que predominan las BF, ya que no existe acumulacin de

fosfato. Con el caudal de purga de 98 l, se obtuvo una acumulacin del 4.8%, en tanto la eliminacin del agua residual fue del 44% (fig. 4). Para el caudal de purga de 37 l (TRC de 16 das), el fosfato en purga fue del 3.9% y la eliminacin en el medio fue del 98% (fig. 4). Y por ltimo, con el caudal de purga de 26 l (TRC de 23 das), la acumulacin fue del 3.6% y una eliminacin del agua residual del 95%. La acumulacin de fosfatos y la eliminacin del agua residual fueron similares en los TRC de 23 y 16 das. La fig. 6 muestra que los lodos contienen ms baja cantidad de fosfatos despus de la fase anaerobia que al final del ciclo. Con la excepcin del TRC de 3 das, la concentracin de fosfatos sigue un patrn. La concentracin es inversamente proporcional al TRC, al final de la fase anaerobia y del ciclo; la diferencia entre ellos es proporcional al TRC. Esto significa que la cantidad de los fosfatos liberados durante la fase anaerobia se incrementa con el TRC. En un proceso PhoStrip, Hashimoto and Furukawa (1984) observaron un contenido de fsforo intracelular del 2.5%, con un TRC de 5 das. Shao et al. (1992), reportan un contenido entre 1.3 y 2% en un sistema de lodos activados y con un TRC de 1.5 das se pierde la capacidad de acumular fosfatos.

Final de fase anaerobia 5

Final del ciclo

Fosfato en la biomasa (Por ciento de los SST)

4 3 2 1 0 3 6 TRC (das) 16 23

Figura 6. Concentracin de los fosfatos en el lodo despus de la fase anaerobia y al final del ciclo.

ndice volumtrico de lodos

En la fig. 7 se muestra el ndice volumtrico de lodos (IVL) en la experimentacin. En el primer TRC (16 das) se obtuvo un IVL promedio de 120 ml/g, para el TRC de 23 das fue de 108 ml/g para los TRC de 6 y 3 das el promedio fue 210 y 252 ml/g respectivamente; al respecto, Rodrigo et al. (1996) mencionan que con TRC de 10 hasta 67 das se presentaron entre 150 y 90 ml/g, sin embargo, Ramalho (1983) hace mencin de que el IVL decrece con el TRC de acuerdo con los lmites impuestos por la disponibilidad de sustrato. Al respecto, Echeverra et al. (1992), manejando las C.O en un intervalo entre 0.25-0.60 . gDBO/gSSVLM d y un TRC entre 4-10 das, observaron que los slidos presentaron buena sedimentacin, y cuando este sobrepasa el TRC de 10 das las caractersticas de sedimentacin cambian de manera negativa. Adems, se ha observado en la operacin de un reactor discontinuo, tanto en ste trabajo como en el de Wanner (1992), que se producen flculos grandes y compactos, que suelen ser as debido al rgimen operacional establecido; en ste caso, los microorganismos almacenan los fosfatos en las clulas, lo que las hace probablemente ms pesadas y facilitar con esto su sedimentacin, por lo que la disponibilidad de sustrato y fsforo tienen gran influencia en la sedimentacin de los lodos.

300 Arranque 250

16

23

IVL (ml/g)

200

150

100

50

0 0 50 100 150 200 250 300 350 400 450 Tiempo (das)

Figura 7. ndice volumtrico de lodos con los diferentes tiempos de retencin celular.

CONCLUSIONES

1.-

2.-

3.4.5.6.-

El Tiempo de Retencin Celular es inversamente proporcional a la carga orgnica y la purga de los lodos es directamente proporcional a la carga orgnica. El mayor rendimiento (gSST producidos/gDQO removida) se observ con un Tiempo de Retencin Celular de 3 das (0.71), y el menor para el de 16 das (0.57). Se confirma la hiptesis en la que; los TRC altos corresponden tasas de crecimiento menores. -1 Para los TRC de 23, 16, 6 y 3 das, las mx, para cada uno fue: 0.065, 0.045, 0.026 y 0.015 h respectivamente. La remocin biolgica de fsforo se realiz con TRC de 6 a 23. La ms alta remocin fue observada con un TRC de 16 das (98%), y no se present con los TRC de 3 das. -3 La ms alta concentracin de fosfatos en los lodos de purga fue de 4.8% (P-PO4 /SST) y la ms alta capacidad de acumulacin fue con los TRC de 16 y 23 das. La eliminacin de fosfato no depende del caudal de purga, sino de la capacidad de la biomasa para acumular los fosfatos dentro de ella. Al aumentar el Tiempo de Retencin Celular disminuye el ndice Volumtrico de Lodos, lo cual es deseable para lograr una mejor separacin de los lodos durante el proceso de sedimentacin. Se obtuvo un ndice Volumtrico de Lodos de 108 ml/gSST con el TRC de 23 das y de 252 ml/gSST con el de 3 das.

BIBLIOGRAFA

APHA, AWWA & WPCF. (1992). Standard methods for the examination of water and wastewater. 16th edition. Washington, D.C. Christennson, M; Blackall, L; Keller, J; Welander, T. (1996). The influence of sludge retention time on the biological nutrient removal and changes in sludge community in activated sludge sequencing batch reactors. First IAWQ Specialized Conference on Sequencing Batch Reactor Technology , Munich. Deutsche Einheitsverfahren zur Wasser-, Abwasser- und Schlammuntersuchung. (1983). Verlag Chemie, Weinheim, Germany.

Echeverra, E; Seco, A and Ferrer, J. (1993). Control of activated sludge settleability using preaeration and preprecipitation. Wat. Res. 27(2):293-296. Hashimoto S. and Furukawa K. (1984). Biological phosphorus release from activated sludge of sludge recycling nitrification-denitrification process. J. Ferment. Technol. 62 (5): 437-444. Metcalf and Eddy. (1979). Wastewater engineering treatment disposal reuse. 2 Edition. McGraw-Hill Brook Company. Muyima, N. and Cloete T. (1995). Phosphate uptake by inmobilized Acinetobacter calcoaceticus cells in a full scale activated sludge plant. J. of Ind. Microbiol. 15: 19-24. nd Ramalho R. (1983). Introduction to Wastewater Treatment Processes .2 edition. Academic Press. New York, pp 246-247. Rodrigo, M; Seco, A; Penya-Roja, J; Ferrer, J. (1996). Influence of sludge age on enhanced phosphorus th removal in biological systems. 18 IAWQ Biennial international conference & Exhibition. 23-28 June. Singapore. Shao, Y; Wada, F; Abkian, V; Crosse, J; Horenstein and Jenkins, D. (1992). Effects of MCRT on enhanced biological phosphorus removal. Wat. Sci. Technol. 26(5-6):967-976. Smolders, G; Bulstra, J: Klop, J; Jacobs, R; Van Loosdrecht, and Heijnen, J. (1995). A Metabolic Model of the Biological Phosphorus Removal Process: II. Validation During Start-Up Conditions. Biotechnol. and Bioeng. 48:234-245. Vaccari, D; Fagedes T. and Longtin J. (1985). Calculation of mean cell residence time for unsteady - state activated sludge systems. Biotech. and Bioeng. 27, 695-703. Wanner, J. (1992). Comparison of biocenoses from continuous and sequencing batch reactors. Wat. Sci. Tech. 25(6): 239-249. Wentzel M; Ltter; Ekama, G; Loewenthal, R and Marais, G. (1991). Evaluation of biochemical models for biological excess phosphorus removal. Wat. Sci. Tech. 23: 567-576.