PRACTICA NO.

6 METABOLISMO CATABLICO MICROBIANO DETERMINACION DEL USO DE AZUCARES EN LOS MEDIOS DE CULTIVO POR PARTE DE LOS MICROORGANISMOS La mayora de los microorganismos son capaces de utilizar los azucares como recursos energticos y transformarlos en formas de energa utilizables y accesibles. Esa capacidad de los microorganismos para utilizar macromolculas como recursos energticos se debe a que poseen los sistemas necesarios enzimticos que les permiten ingresar los monneros, molculas e iones para ser catabolizados en las rutas metablicas respectivas. Procedimiento: Inocular a partir cultivos microbianos a los siguientes medios: Verde Brillante 2% lactosa (48 horas a 37C) con tubo Durham invertido.- La finalidad la observacin de la formacin de CO2. Es importante indicar que despus de este perodo de incubacin y si hay gas (CO2), se inocula del verde BRILA a agua de tristona para la comprobacin de la formacin de indol en un metabolismo proteico. Caldos lactosado, glucosado, y maltosado. (48 horas a 37C).- La finalidad es observacin de formacin de catabolitos que permitirn el cambio del indicador, rojo de metilo. El rojo de metilo es agregado para ver estos cambios despus del perodo de incubacin. Triple sugar Iron Agar (TSI).- inoculacin a partir del crecimiento de verde brila en plano inclinado con picadura para observacin de uso de los tres azucares presentes en el medio. BPLS (Bilis, Phenol red, lactosa sacarosa).- inoculacin por superficie estriada a partir de verde Brila para observacin del catabolismo de lactosa y sacarosa METABOLISMO CATABLICO MICROBIANO DETERMINACION DEL USO DE LIPIDOS EN LOS MEDIOS DE CULTIVO POR PARTE DE LOS MICROORGANISMOS Los lpidos son considerados biomolculas altamente energticas por la mayora de las formas de vida. Para que los lpidos sean utilizados como recurso de energa primeramente debe pasa por un proceso de separacin del monmero lipdico, triacylglicerido, en glicerol y cidos grasos, este proceso se lleva acabo extracelularmente gracias a la accin de la lipasa microbiana. El metabolismo intracelular del glicerol y de los cidos grasos cidos grasos son ocurre en sitios diferentes de la clula. En el caso del glicerol se lleva cabo en el citoplasma, y en el caso de los cidos grasos en la membrana citoplasmtica a travs de la B-oxidacin, metabolismo estrictamente aerbico.

Para esta prctica se usar el Agar Baird Parker, el mismo que es enriquecido con yema de huevo que contiene un fosfolpido llamado lecitina. METABOLISMO CATABLICO MICROBIANO DETERMINACION DEL USO DE PEPTONAS EN LOS MEDIOS DE CULTIVO POR PARTE DE LOS MICROORGANISMOS El metabolismo proteico generalmente se da cuando el sistema enzimtico microbiano no se encuentra presente las enzimas que degradan las biomolculas que son consideradas combustibles para el mantenimiento celular; debido a que en los microorganismos existe la carencia de informacin gentica para transcribir las enzimas necesarias para llevar a cabo el catabolismo de azcares y/o lpidos. Esto obliga a que los microorganismos recurran a otras molculas para mantener su status quo. Estas molculas son las peptonas que deben de decomponerse a sus monmeros extracelularmente por los sistemas enzimticos exocelulares microbianos par luego llevar acabo el metabolismo intracelular. Procedimiento:- Observar los cambios en el medio de BPLS, y TSI por los indicadores presentes en los medios respectivos. Para el caso de la formacin de indol, a partir del crecimiento de verde BRILA inocular a agua de tristona por 24 horas a 44C, incubar los tubos en bao de Mara. Despus del perodo de incubacin agregar el reactivo de Kovacs y observar la formacin del halo rojo carmes como positivo a la formacin de indol.