Mycotoxinas

Patricia Glorio Paulet, Ph.D

UNIVERSIDAD NACIONAL AGRARIA LA MOLINA. Av La Molina s/n Lima 12 Peru Email: pgp@lamolina.edu.pe

Major mycotoxins and producing fungi are:

MYCOTOXINS PRODUCERS Mycotoxinas son productos naturales producidos por hongos filamentosos.
fusarium

Alternaria
Aspergillus flavus Aspergillus parasiticus

MYCOTOXINS PRODUCERS

Manzana con patulina Penicillium expansum

Trichothecium roseum
Produces tricotecin

Definition of Mycotoxins

Mycotoxins son metabolitos secundarios que son toxicos para ambos: hombres y animales. El tipo de toxicidad depender de la dosis y del individuo afectado. Las micotoxinas se pueden desarrollar en cualquier etapa de la cadena alimentaria, desde la granja hasta el tenedor del consumidor. Su presencia en los alimentos y piensos aumentar el riesgo para los seres humanos y los animales

Primary and secondary metabolism

Metabolitos primarios Es toda la reaccin catalizada por enzimas que proporciona el organismo con energa y metabolitos primarios.

Metabolitos secundarios

Proceso sinttico cuyos productos finales son los metabolitos secundarios que no desempean ningn papel evidente para el organismo. Se les llama "idiolites" porque son formados en la fase de produccin (idiophase) de cultivos discontinuos.

Mycotoxinas y Respuestas txicas La enfermedad causada por la ingestin de alimentos contaminados con micotoxinas se denominan "micotoxicosis". Las Micotoxinas causan una respuesta txica (crnica o aguda) cuando se introduce por una ruta de ingesta natural a vertebrados superiores y otros animales. A bajas concentraciones puede causar enfermedades crnicas, incluyendo la formacin de tumores y genotoxicidad. La exposicin directa a un alto nivel de micotoxina (s) puede causar toxicidad aguda y muerte.

There are 300 different mycotoxin identified.

The mayor mycotoxins are :

Aflatoxin B1, B2, G1 and G2. Ochratoxin A Aflatoxin M1 Patulin Sterigmatocystin. Penicillic acid Ergot Alkaloids Phomopsin A Zearalenone Cyclopiazonic acid Alternariol

Fumonisin B1 y B2

Xanthomegnin and related naphthoquinone

Trichothecenes Tenuazonic acid

Bhat R, Rai RV, Karim A. Mycotoxins in food and feed: present status and future concerns. Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety. 2010;9(1):57-81

Human Exposure to micotoxins!

Semilla de algodn

Cultivos: cereales and oleaginosas

Los efectos txicos y el nivel de micotoxinas en los alimentos.

Bajas concentraciones
A bajas concentraciones las micotoxinas pueden causar enfermedades crnicas, incluyendo la formacin de tumores y genotoxicidad.

Altas concentraciones

La exposicin directa al alto nivel de micotoxina (s) puede causar toxicidad aguda y muerte.

Clasificacin de riesgo en carcingenos

IARC group Group 1 Group 2A Group 2 B Group 3

Risk classification The substances are definitely a carcinogen. (AF) The substances are probably a carcinogen. The substances are possibly a carcinogen. (OT, F) The substances are not classifiable as to its carcinogenicity to humans. (ZEN)

Group 4

The substances are probably not carcinogenic to humans.

The International Agency for Research on Cancer (IARC) is an intergovernmental agency established in 1965, which forms part of the World Health Organization of the United Nations. It is based in Lyon, France

SOME CHEMICAL STRUCTURE

Las aflatoxinas son altamente txicas, mutagnicas, teratognicas y carcinognicas. Producidas por aspergillus flavus, aspergillus parasiticus. Sterigmatocystina: producida por Aspergillus versicolor y Aspergillus nidulans

Coumarin ring.

Las micotoxinas de riesgo para la salud pblica y su importancia econmica.

Aflatoxins (AF) hepatotoxins Ochratoxins (OT) nephrotoxins Tricothecenes (DON, DAS T-2) Immunotoxins Zearalenone (ZEN) hyperestrogenic sindromes Fuminosins (F) human oesophageal carcinoma. Equine leukoencephalomacia.

CHEMICAL STRUCTURE: Lactonic ring Ochratoxin: Producidas por both A. ochraceus y P. viridicatum Zearalenone Producida por fusarium.

Citrinin
Murphy PA, Hendrich S, Landgren C y Bryant CM. 2006. Food mycotoxins: an update. Journal of food science 71(5):R51-R65.

ALGUNAS ESTUCTURAS QUIMICAS

Del Fusarium: Las fuminosinas son aminas primarias sin anillos aromaticos. Las Fuminosians son solubles en agua. Causan leukoencephalomalacia en caballos.

CHEMICAL STRUCTURE: Sesquiterpene

Journal of APPLIED BIOMEDICINE ISSN 1214-0287 (on-line) ISSN 1214-021X (printed) Volume 5 (2007) Elosta et al.

Son potentes inhibidores de la sintesis proteica.

CHEMICAL STRUCTURE: Sesquiterpene

Zain ME. 2011. Impact of mycotoxins on humans and animals. Journal of Saudi Chemical Society 15(2):129-144.

MECANISMO DE AFLATOXINA PRODUCTOR DE EFECTOS NOCIVOS EN EL ORGANISMO

Aflatoxinas (AF)
Metabolito txico, altamente mutagnico, inmuno supresor, teratognico y cancergeno, asociado a aflatoxicosis, en el ganado, los animales domsticos y los seres humanos. Fue descubierta en 1960 cuando se identific en la alimentacin de aves de corral enfermas (Pavos X enfermos). Hay cuatro aflatoxinas principales como contaminantes de los alimentos y piensos: B1, B2, G1, G2 y dos productos metablicos M1 y M2.

Murphy PA, Hendrich S, Landgren C y Bryant CM. 2006. Food mycotoxins: an update. Journal of food science 71(5):R51-R65.

MECHANISM OF TOXICITY

Guengerich FP. 2006. Cytochrome P450s and other enzymes in drug metabolism and toxicity. The AAPS journal 8(1):101-111.

Organos afectados por aflatoxinas

El cncer de hgado es frecuente en los pases en desarrollo. Los estudios epidemiolgicos asocian el consumo de alimentos contaminados con AF y el carcinoma hepatocelular.

DEPENDS ON THE COUNTRY

Potency: Estima la capacidad para el cncer de hgado humano que resulta de la exposicin a La aflatoxina B1 derivada de estudios epidemiolgicos y toxicolgicos (Cnceres por ao por cada 100 000 personas por ng por kilogramo de peso corporal por da)

Risk: Estima la probabilidad de conseguir dicha enfermedad.

Potency = 0.001 x (1-P) + 0.03 x P

Potency: Estima la capacidad para el cncer de hgado humano que resulta de la exposicin a La aflatoxina B1 derivada de estudios epidemiolgicos y toxicolgicos (Cnceres por ao por cada 100 000 personas por ng por kilogramo de peso corporal por da)

Potency = 0.001 x (1-P) + 0.03 x P P= Probability of Human HbsAg expression. Risk: Estimate the probability for getting the disease.

CONTROL OF MYCOTOXINS

Las ms importantes son las medidas preventivas en toda la cadena alimentaria desde la granja hasta el tenedor del consumidor. GPA (Good Agricultural Practices), BPM (Good Manufacturing Practices), HACCP (Important in post harvest control)

Effective control of mycotoxins require a combination of:

Buenas Prcticas Agrcolas. Control en las condiciones de almacenamiento : Muy importante en regiones de climas de alta temperatura. Vigilancia en todas las etapas desde la granja al tenedor del consumidor.

Factores que favorecen la produccin de micotoxinas La combinacin apropiada del hongo, su huesped y el medio ambiente conduce a la colonizacin del sustrato y la produccin de micotoxinas. Se requiere el sustrato adecuado para el crecimiento de los hongos y la posterior produccin de toxinas, aunque el (los) factor(es) exacto que inicia la formacin de toxinas no es bien entendido El estrs hdrico, de alta temperatura, insectos y daos de la planta husped son los principales factores determinan la infestacin de moho y la produccin de toxinas.
2008 Cornell University Updated 03/26/2009 09:37:59 Department of Animal Science.

http://www.dpi.vic.gov.au/agriculture/beef-and-sheep/sheep/feeding-and-nutrition/buyingand-feeding-weather-damaged-grain

Mycotoxins durante el almacenamiento.

Lneas alternas: de maz, A. flavus infestado, man, A. flavus infestadas.

Mazorca de maiz infestada

Observe la comparacin entre la misma mazorca de maz antes y despus de la eliminacin de la cscara de la misma: No hay grandes signos de infestacin por fuera sin embargo, est daado extensivamente desde el interior.

2008 Cornell University, Department of Animal Science.

Aflatoxinas en castaas

(Sumirre, 2012)

Calidad higinica de frutos almacenados

Tipo de Tiempo Almacenami Hongos Levadura Aflatoxinas (das) Concesiones (ufc/g) (ufc/g) (ppb) ento 0 Bajo Alegra Cubierto 6400 3500 0.007
0 0 0 30 Bajo Alegra Descubierto Mavila Cubierto Mavila Descubierto Bajo Alegra Cubierto 45000 28000 25000 5500 4500 90 90 900 0 0 0 0.99

(Sumirre, 2012)

30 30 30
60 60 60 60
32%

Bajo Alegra Descubierto Mavila Cubierto Mavila Descubierto

Bajo Alegra Cubierto Bajo Alegra Descubierto Mavila Cubierto Mavila Descubierto

2400 1000 900

1100 1500 300 2100

200 90 500
20400 200 1100 200

2.88 0 0
0 0 0.012 0
20.0 17.5 15.0

30%

Almacenamiento Cubierto Almacenamiento Descubierto

Podrido Hongueado Ojos Deteriorado

Humedad almendra

Porcentaje (%)

28%

12.5 10.0 7.5 5.0 2.5

26%

24%

22%

0.0
20% 0 30 60 das 0 30 60 das

30

60

Concesin Bajo Alegra

Concesin Mavila

Tiempo (das)

MTODOS UTILIZADOS EN EL MBITO DE Post COSECHA Para la descontaminacin de micotoxinas: El uso de agentes qumicos como el amonaco, sosa custica, perxido, bisulfitos, agentes clorados. ozono Tostado Adsorbentes de micotoxinas Fermentacin El tratamiento alcalino Pulido y fresado. Seleccion.
Bhat R, Rai RV y Karim A. 2010. Mycotoxins in food and feed: present status and future concerns. Comprehensive Reviews in Food Science and Food Safety 9(1):57-81.

MECANISMO DE INACTIVACION QUIMICA Los Grupos lactona en las micotoxinas pueden desglosarse por grupos cidos o alcalinos. Un carboxlico o un grupo hidroxilo se introduce en el punto o la ruptura.

MECANISMO DE INACTIVACION QUIMICA

MECANISMO DE INACTIVACION QUIMICA Dihidrofurano dobles enlaces no aromticos en los grupos terminales pueden ser atacados por el ozono, perxido, cido sulfrico o clorhdrico.

Remocion Fsica de las Micotoxinas Los grupos hidroxilo de silicatos y otros adsorbentes pueden reaccionar con los grupos carbonilo de algunas micotoxinas.

Kabak, Bulent, Dobson, Alan D. W. and Var, Il(2006)'Strategies to Prevent Mycotoxin Contamination of Food and Animal Feed: A Review',Critical Reviews in Food Science and Nutrition,46:8,593 619

PROCESAMIENTO Y DESTRUCCIN
Algunas micotoxinas, como las aflatoxinas no se ven afectados por el calor moderado (80 a 121 C) las aflatoxinas requieren de altas temperaturas (237 C a 306 C) para la descomposicin. (Kabak et al 2006) Tostado y freido durante 30 minutos (150-200 C) redujo 20-60% Bhat et al (2010) revisa que una combinacin de 121 C y el tratamiento alcalino antes de frer dio lugar a muy bajos niveles de aflatoxina en el maz contaminado. Nixtamalizacin reduce el contenido de aflatoxinas

Kabak, Bulent, Dobson, Alan D. W. and Var, Il(2006)'Strategies to Prevent Mycotoxin Contamination of Food and Animal Feed: A Review',Critical Reviews in Food Science and Nutrition,46:8,593 619

CONTROL OF MYCOTOXINS

Las ms importantes son las medidas preventivas en toda la cadena alimentaria desde la granja hasta el tenedor del consumidor. GPA (Good Agricultural Practices), BPM (Good Manufacturing Practices), HACCP (Important in post harvest control)

Desde la granja hasta el tenedor del consumidor

UE, destiny for more than 50% of coffee exportation from Per. Roasted coffe: 5 ug/kg (ppb)

Soluble coffe: 10 ug/Kg (ppb)

Para el caf, Diaz, A, 2012, demostr que a mayor cumplimiento de las BPM, ms bajos son los niveles de OTA

Cdigo de prcticas para prevenir y reducir la Contaminacin de Ocratoxina A en el caf (CAC/RCP 69-2009)

Mtodos para la deteccin de micotoxinas

Extraccin de la toxina con MeOH: H2O 70:30. Muestra extrada se detect por ELISA O Muestra extrada, se concentr con columna de inmunoafinidad y luego detectado con el mtodo de aflatoxina HPLC: Columna C18. Detector de fluorescencia excitacin 360 nm, emisin 420.

ELISA DETECTION

IMMUNOAFFINITY COLUMN

HPLC

HPLC

GRACIAS POR SU ATENCION